1. VÍRUS DA ZIKA IMPACTA O DESENVOLVIMENTO DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL DE MODO INDIRETO, VIA CÉLULAS DA CRISTA NEURAL CEFÁLICA.
- Author
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TAUFER, Nathali P., SOUZA, Camila S., TRENTIN, Andréa G., GARCEZ, Ricardo C., BENEVENUTTI, Felipe Z., BORDIGNON, Juliano, ZANLUCA, Camila, and SANTOS, Claudia N. D.
- Abstract
Introdução: Nos anos 2015 e 2016, o vírus da Zika (ZIKV) ganhou notoriedade devido à sua capacidade de infectar o embrião intraútero e de provocar anomalias congênitas. A microcefalia foi a principal característica observada em recém-nascidos de gestantes infectadas pelo ZIKV. Ao longo do desenvolvimento embrionário dos vertebrados, as células da crista neural cefálica desempenham papel crucial como centro de sinalização na regulação da formação do sistema nervoso central. A expansão do telencéfalo é estimulada pela molécula sinalizadora Fgf8, cuja expressão é modulada negativamente por outra molécula, a Bmp4. Esse equilíbrio molecular é controlado pela ação de antagonistas da Bmp4, como Noggin e Gremlin, que são moléculas sinalizadoras reguladas pelos fatores de transcrição Six1 e Six2. Portanto, para que ocorra um desenvolvimento craniofacial adequado, é essencial que os eventos celulares e moleculares que orquestram a morfogênese cerebral estejam sincronizados. Objetivo: avaliar a influência da infecção pelo ZIKV sobre o desenvolvimento das vesículas encefálicas telencéfalo e mesencéfalo, e na expressão gênica de Fgf8, Bmp4, Noggin, Gremlin, Six1 e Six2, em modelo de Gallus gallus. Métodos: embriões de G. gallus foram incubados a 38 °C por 48 horas e posteriormente inoculados com 500 ou 1000 unidades formadoras de placas de ZIKV por embrião. Após 24 horas, os embriões foram retirados dos ovos e fotografados para as análises morfológicas do telencéfalo e do mesencéfalo. A técnica de RT-qPCR foi empregada para a verificação da infecção, bem como para avaliar a quantificação viral relativa individual e a expressão gênica associada. Resultados: Após 24 horas da inoculação do ZIKV, um total de 54,54 % dos embriões apresentou quantidades detectáveis de ZIKV. Em apenas 24 horas de infecção pelo ZIKV, observou-se uma redução de 19,66 % na área da parede do telencéfalo e uma diminuição de 20,06 % na área do próprio telencéfalo. Em relação ao mesencéfalo, a área de sua parede reduziu em 13,20 %, enquanto a área da vesícula apresentou uma diminuição de 7,36 %. Houve correlação significativa e negativa entre a carga viral dos embriões e a redução na área do mesencéfalo. Analisando os níveis de expressão gênica, foi verificada diminuição de 2,13x na expressão de Fgf8 e de 2,96x na expressão de Bmp4. Após a infecção pelo ZIKV, as expressões de Noggin e de Gremlin sofreram reduções de 1,74x e 1,53x, respectivamente. Os embriões infectados apresentaram aumento de 1,46x na expressão de Six1 nos embriões infectados pelo ZIKV, ao passo que a expressão de Six2 não apresentou diferença. Conclusão: Os resultados indicam que a infecção pelo ZIKV aumenta a expressão do gene Six1, e reduz as dos genes Noggin, Gremlin, Bmp4 e Fgf8, o que está associado à diminuição nas áreas das paredes e das vesículas encefálicas telencéfalo e mesencéfalo. Esses dados sugerem que o ZIKV influencia o desenvolvimento do sistema nervoso central de forma indireta, por meio de vias de sinalização orquestradas pelas células da crista neural cefálica. Essas informações contribuem para o entendimento dos mecanismos moleculares subjacentes à microcefalia. [ABSTRACT FROM AUTHOR]
- Published
- 2023