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La rápida y específica degradación de proteínas por el sistema proteosomaubiquitinaha emergido como un importante mecanismo de regulación en eucariotas.Algunos de los procesos básicos celulares regulados por proteólisis dependiente deubiquitina incluyen la progresión del ciclo celular, iniciación de la transcripción otransducción de señales. Las enzimas clave en el proceso de ubiquitinación son lasligasas de ubiquitina E3, puesto que son las que actúan como moduladores para elreconocimiento del sustrato y además son las que transfieren la ubiquitina activada adicho sustrato. Las proteínas Skp1, Cul1 y la proteína F-box (SCF) son el grupo deligasas E3 mejor conocido. Dada la importancia de dicho proceso, resultó de graninterés investigar el papel de las proteínas pertenecientes a la maquinaria derenovación proteica, en la patogénesis de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici sobreplantas de tomate.En este trabajo nos hemos centrado en el estudio de una proteína F-box, Fbp1,ortóloga de GRR1 en S. cerevisiae. Para estudiar el papel del gen fbp1 en la virulenciade F. oxysporum se ha llevado a cabo la interrupción dirigida del gen en la estirpesilvestre del hongo. La infección de plantas de tomate inoculadas con los mutantesdeficientes en el gen mostró un retraso en el proceso de infección, lo que indica queFbp1, aunque no es esencial para la patogenicidad, es necesaria para la completavirulencia de F.oxysporum. El mutante Δfbp1 presentó un retraso significativo en todaslas fuentes de carbono y nitrógeno analizadas, además de un patrón de crecimientoondulado de las hifas líder y una tinción del Spk muy abundante y deslocalizada.Mutantes de F. oxysporum en el gen fbp1 mostraron niveles reducidos de fosforilaciónde Fmk1 y compartían características fenotípicas con los mutantes Δ fmk1, tales comodefectos en el crecimiento invasivo, en la colonización del tejido vivo de la planta y enla capacidad de fusión vegetativa. Por otro lado, los bajos niveles de fosforilación de laMAPK Mpk1 que exhibió el mutante nulo fbp1 junto con la sensibilidad a compuestoscomo SDS y CFW, sugieren que Fbp1 contribuye al mantenimiento de la integridadcelular.Realizamos un análisis proteómico, en condiciones de crecimiento invasivo, paraconocer las proteínas diferencialmente expresadas en la cepa mutante Δ fbp1 y poderasí identificar posibles dianas del complejo SCFFbp1. De las 41 proteínas identificadas,17 de ellas estaban sobre-expresadas en el mutantΔe fbp1 y relacionadas confunciones susceptibles de sufrir ubiquitinación: transporte, proteolisis, respuesta aestrés y organización de los componentes celulares..., Fast and specific degradation proteins by the ubiquitin-proteasome system haverecently emerged as a major regulatory mechanism of cellular function in eukaryotes.Some basic cellular processes regulated by ubiquitin proteasome system are cell cycle,signal transduction and transcription. The key enzymes in the ubiquitination processare the E3 ubiquitin ligases, because the function as the susbtrate recognition moduleof the system and are capable of transferring the activated ubiquitin to the substrate.Spk1, Cul1 and F-box protein (SCF) E3 ligases are amoung the best-understood ligases.Given the importance of this process, it was of great interest investigating the role ofproteins belonging to the protein turnover machinery and their contribution toFusarium oxysporum pathogenicity.In this study, we have focused in the study of an F-box protein called Fbp1 whichencodes the orthologe of S. cerevisiae GRR1 gene. In order to investigate the role Fbp1in pathogenicity of F. oxysporum we performed a targeted disruption of fbp1 gene.Disease progression on tomato plant inoculated with Δfbp1 mutant showed reducedvirulence suggesting that Fbp1 is essential for full virulence in F.oxysporum. The Δfbp1mutant showed reduced hyphal growth on all carbon and nitrogen sources analysed.In the mutant strain, leader hyphae displayed a zig-zag growth phenotype and anabundant and delocalized staining Spk. F. oxysporum strains lacking Δ fbp1 had areduced phosphorylation levels of Fmk1 and shared characteristic phenotypes withΔfmk1mutants, including defects in hyphal growth under nutrient-limited conditions,invasion of the underlying substrate and colonization of living plant tissue.Interestingly, low phosphorylation levels of Mpk1 and hypersensitivity to cell walltargeting compounds like CFW and SDS showed Δ fbp1 mutant, suggesting that Fbp1contributes to cell wall integrity via a MAPK Mpk1 pathway.In order to know differentially expressed proteins in Δfbp1 mutant invasiongrowthconditions, we carried out a proteomic approach to identify the target proteinsof SCFFbp1 complex. 17 of the 41 proteins differentially expressed in the present workwere up-regulated in the Δfbp1 mutant and they were related with processsusceptible to be ubiquininated: transport, proteolysis, response to stress and cellularcomponent organization.One of the most abundant protein in the Δfbp1 mutant was the FOXG_0146gene, a 14-3-3 protein annotated in the Fusarium database like Bmh2. 14-3-3 proteinsare dimeric and highly conserved proteins which are involved in a many cellular...