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A genetic vaccine consisting of the bovine herpesvirus-1.2a (BHV-1.2a) glycoprotein D (gD) gene under the control of the cytomegalovirus immediate-early promoter/enhancer was generated and administered to sheep intramuscularly in the neck. All animals developed serum antibodies which recognized the homologous antigen (BHV-1.2a strain BH-83) and also exhibited cross-reactivity against the heterologous antigen (BHV-5 strain EVI-190). Three intramuscularly injections were given but serological responses were not improved after the second inoculation. Specific antibodies were detected against BHV-1.2a until at least 12 months after the first inoculation. However, the capacity to induce antibodies against BHV-5 was lower and of shorter duration than to BHV-1.2a. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: Uma vacina geneticamente preparada com o gene da glicoproteína D do herpesvirus bovino-1.2a (BHV-1.2a) controlado com o promotor/potenciador imediatamente precoce de citomegalovírus foi administrada no pescoço de ovinos. Todos os animais produziram anticorpos séricos que reconheceram, em ELISA, o antígeno homólogo (BHV-1.2a, amostra BH-83) e também mostraram reatividade cruzada contra um antígeno heterólogo (BHV-5 amostra EVI-190). Foram aplicadas três inoculações, mas não houve melhora de resposta com a terceira inoculação. Resposta específica contra BHV-1.2a foi detectada pelo menos até 12 meses após a primeira inoculação, entretanto, a resposta sorológica contra o BHV-5 foi de menor intensidade e duração do que aquela contra o BHV-1.2a.

Desenvolveu-se a técnica de transcrição reversa - reação em cadeia pela polimerase para detectar o vírus da hepatite do camundongo em tecido hepático. Para se eliminar possíveis falhas na reação de amplificação RT-PCR usou-se um segundo ciclo de amplificação com primers internos para confirmar a especificidade e aumentar a sensibilidade do teste. Após a optimização do protocolo, descreve-se a detecção da amplificação específica da seqüência-alvo em camundongos de 18 das 20 colônias examinadas. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: A reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) to detect mouse hepatitis virus (MHV) in hepatic tissue was developed. To circumvent possible failures in RT-PCR amplifications, a second round of PCR with internal primers was used to confirm the specificity and increase the sensitivity of the test. Using this method specific amplification of MHV sequences was observed in 18 out of 20 mouse colonies examined.

Uma amostra brasileira do vírus da doença de Aujeszky, isolada de um leitão, foi estudada quanto à virulência para suínos e seu genoma analisado no que se refere ao padrão de fragmentação pela enzima de restrição Bam HI. Leitões com 50 dias de idade, sorologicamente negativos, expostos a essa amostra, não mostraram sinais de doença e o vírus foi detectado na região orofaríngeana durante pelo menos três dias após exposição. Com base no padrão de migração dos fragmentos de restrição, o isolamento foi classificado como pertencente ao grupo I da classificação proposta por Herrmann. Infecção latente foi detectada por PCR em todos os suínos. Algumas variações foram identificadas no mapa físico de Bam HI da amostra ASB Piau quando se comparou com o mapa obtido da amostra virulenta brasileira LA031. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: One Brazilian strain of Aujeszky’s disease virus isolated from a piglet in which the disease had not been observed was studied as for its virulence in pigs. The genome of the virus was molecularly analysed as for their restriction endonuclease cleavage pattern. Fifty-day-old non-immune weanlings exposed to this strain showed no disease although the virus was present in their oropharyngeal area for at least three days. All animals developed moderate titers of neutralizing antibody. Based on number of bands and migration rate of restriction fragments the isolate was classified into Herrmann’s type I group. Latent infection was detected in all pigs by PCR. Some variations were detected in the cleavage pattern of the strain ASB Piau when compared to LA031 virulent Brazilian strain, that could be related to differences in the virulence.

A DNA hybridization dot-blot assay using a radioactive and a non-radioactive probe has been developed for the detection of Aujeszky's disease virus (ADV). The Bam H I 7 fragment of ADV genomic DNA was labeled by nick translation using 32P-dCTP and the 196bp polymerase chain reaction (PCR) gG glycoprotein gene amplified fragment was also labeled by nick translation but using biotin d-7-dATP. This technique provides a fast and effective means of detecting acute cases of ADV infection but it was unable to detect ADV nucleic acid sequences in trigeminal nerve ganglia of latent infected pigs and mice.