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Introduction et but de l’etude L’inflammation chronique et l’activation du systeme immunitaire sont impliquees dans le developpement du diabete de type 2 chez les patients obeses. La production d’IL-1β conduite par l’inflammasome NLRP3 au sein des macrophages du tissus adipeux et des monocytes circulants joue un role crucial dans le developpement de la resistance a l’insuline. Nous avons montre que contrairement a l’oleate (C18:1), le stearate (C18:0), second acide gras sature le plus abondant, conduit a l’activation de l’inflammasome NLRP3 dans des macrophages/monocytes humains avec une augmentation concomitante du pourcentage de phospholipides membranaires satures. L’addition de C18:1 au C18:0 empeche ces evenements en redirigeant les acides gras satures vers la synthese des triglycerides. Cependant, le lien entre la saturation des phospholipides et l’activation de l’inflammasome NLRP3 n’a pas encore ete elucidee. Materiel et methodes Des cellules THP-1 differenciees au PMA ont ete traitees 8 h avec la BSA (controle), avec le C18:0 seul ou associe avec le C18:1. La [K+] cellulaire et la secretion d’IL-1β ont ete quantifiees par spectroscopie d’emission atomique et par Elisa. Du 86Rb+ a ete utilise pour monitorer l’activite de la Na, K-ATPase cellulaire. Resultats et analyse statistique L’efflux de K+ est une etape commune dans de nombreux modeles etudiant l’activation de l’inflammasome NLRP3. Nous avons teste son implication dans l’activation de l’inflammasome NLRP3 par le C18:0 et avons demontre que l’augmentation de la [K+] extracellulaire est suffisante pour inhiber l’inflammasome NLRP3 dans ces conditions, suggerant l’implication de l’efflux de K+. En effet, des diminutions significatives de la [K+] cellulaire et de l’activite Na, K-ATPase sont mesurees en reponse au C18:0 vs BSA (85,72 % vs 102,80 % de la [K+] cellulaire ; p Conclusion En induisant une augmentation des niveaux de phospholipides satures, le stearate conduit a un efflux de K+ et une activation de l’inflammasome NLRP3 via l’inhibition de la Na, K-ATPase. L’oleate, en maintenant des niveaux bas de phospholipides satures, previens la diminution d’activite de la Na, K-ATPase, l’efflux de K+ et l’activation de l’inflammasome NLRP3.

Introduction et but de l’etude L’inflammation chronique et l’activation du systeme immunitaire sont impliquees dans le developpement du diabete de type 2 chez les patients obeses. Des macrophages sont recrutes dans le tissu adipeux de ces patients et secretent des cytokines pro-inflammatoires dont l’IL-1β impliquee dans la resistance a l’insuline. Il a ete montre que l’inflammasome NLRP3, requis pour la maturation de l’IL-1β, conduit au developpement de l’inflammation induite par l’obesite et de la resistance a l’insuline. Contrairement a l’oleate (C18 :1), le stearate (C18 :0), second acide gras sature le plus abondant, conduit a l’activation de l’inflammasome NLRP3 dans des macrophages humains. L’addition de C18 :1 au C18 :0 empeche cette activation. Cependant, les mecanismes moleculaires sont inconnus. Materiel et methodes Des analyses lipidomiques ont ete realisees sur des cellules THP-1 differenciees au PMA apres 8 h de traitement avec la BSA (temoin), le C18 :0 seul ou associe avec le C18 :1 pour etudier la composition en phospholipides cellulaires. La fluidite membranaire et la formation de gouttelettes lipidiques ont ete observees par microscopie confocale avec les sondes fluorescentes Laurdan et HCS LipidTOX. Du C18 :0 radiomarque a ete utilise pour suivre son incorporation dans les differentes classes lipidiques separees par chromatographie sur couche mince. Resultats Le C18 :0 conduit a une rigidification de la membrane plasmique sans formation de gouttelettes lipidiques et induit un changement spectaculaire dans le profil des phospholipides, avec une augmentation des especes saturees de phosphatidylcholine (PC) (10,54 % contre 46,35 % des PCs totales ; p p p p p = 0,0002) et PE (33,24 % contre 39,97 % des PEs totales ; p = 0,0127). Conclusion L’augmentation de la saturation des phospholipides en presence de C18 :0 induit la rigidification de la membrane plasmique et pourrait mener a l’activation de l’inflammasome NLRP3. L’effet protecteur du C18 :1 est conduit par une reorientation de l’incorporation du C18 :0 des phospholipides vers les gouttelettes lipidiques, combine a une fluidification membranaire due a l’augmentation des phospholipides insatures.