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Objetivo: Las células madre mesenquimales (MSCs) son atractivas en la terapia regenerativa de patologías humanas. En los modelos murinos, en los que se trasplantan MSCs humanas, es muy importante poder distinguir el origen de las MSCs identificadas en los órganos de ratones. El objetivo de este estudio fue determinar el rendimiento del análisis basado en PCR de secuencias Alu humanas para detectar ADN humano después de la infusión de células madre de médula ósea humana (hBMSCs) en ratones inmunodeficientes. Material y método: Las hBMSCs se obtuvieron de la cabeza femoral de pacientes sometidos a cirugía de reemplazo de cadera. Se infundieron 106 hBMSCs por vía intravenosa mediante inyección en el seno retro-orbitario de ratones NOD/SCID. Después se evaluó la presencia de ADN humano en pulmón, hígado y hueso. Resultados: En mezclas de ADN in vitro, el ADN humano se detectó fácilmente con una buena relación logarítmica-lineal. De manera similar, cuando se mezclaron osteoblastos humanos y de ratón, se detectaron fácilmente 1-10 células humanas entre 105 células de ratón. Asimismo, se detectó el ADN humano en los pulmones 1 y 7 días después de las infusiones celulares en ratones NOD/SCID. Sin embargo, el ADN humano se detectó de manera inconsistente en el hígado y los huesos. Conclusión: La detección de secuencias Alu es un procedimiento eficaz para detectar ADN humano. Los resultados confirman que la mayoría de las hBMSCs inyectadas por vía intravenosa quedan atrapadas en los pulmones. Por lo tanto, de cara al tratamiento de trastornos esqueléticos, se necesitan procedimientos para aumentar la migración de dichas células al hueso.

Objetivos: Los mecanismos epigenéticos, y en particular la metilación de las citosinas en las regiones promotoras, modulan la expresión de muchos genes. Sin embargo, su papel en la homeostasis esquelética apenas ha sido estudiado. En particular, se desconoce si los patrones de metilación de las células óseas en cultivo son un buen reflejo de lo que ocurre en el tejido óseo. El objetivo de este trabajo fue explorar las posibles diferencias en la metilación de citosinas en muestras de hueso humano y en osteoblastos. Material y métodos: Para ello efectuamos un estudio de todo el genoma analizando el grado de metilación de 23.667 loci y comparamos los resultados en muestras de tejido óseo y en cultivos de osteoblastos primarios. Resultados: Globalmente observamos una buena correlación entre ambos tipos de muestras, tanto en el conjunto de loci (r2=0,87; p

Objetivo: Los osteoblastos son células especializadas encargadas principalmente de la formación ósea. Además son capaces de modular la osteoclastogénesis a través de la producción de RANKL y OPG. El objetivo de este trabajo fue estudiar la expresión de estas citocinas en osteoblastos primarios. Material y métodos: Se obtuvieron osteoblastos primarios usando tejido óseo trabecular de pacientes sometidos a colocación de una prótesis de cadera por fractura (n=28) o artrosis (n=26). Se excluyeron del estudio aquellos pacientes con osteoporosis secundaria, con fracturas debidas a traumatismos de alta energía o artrosis secundaria. La expresión de RANKL y OPG se estudió mediante PCR cuantitativa. Resultados: La expresión de RANKL y OPG no varió significativamente durante un proceso de mineralización in vitro. Además, la expresión de OPG fue marcadamente superior a la de RANKL. Dado que en un trabajo previo encontramos una mayor abundancia de RANKL y un mayor cociente RANKL/OPG en el tejido óseo de pacientes osteoporóticos que en el de artrósicos, decidimos estudiar si esta expresión anormal en tejido se daba también en los osteoblastos. Sin embargo, en cultivos de osteoblastos primarios no encontramos diferencias en los niveles de expresión de RANKL, ni de OPG, entre los dos grupos de pacientes. Conclusiones: En conjunto, nuestros datos confirman que los osteoblastos son capaces de producir RANKL y OPG. Sin embargo, las diferencias de expresión encontradas a nivel de tejido óseo entre pacientes osteoporóticos y artrósicos no parecen relacionarse con diferentes características intrínsecas de sus osteoblastos, pues no se reproducen en los cultivos primarios.