Search

Microorganisms have commonly been studied as producers of antibacterial substances; yet they are also considered producers of antifungic, antiviral, antiparasitic, citotoxics and inhibitory of other forms of cellular growth substances. This paper describes the isolation, inhibitory potential and phenotipic characterization of native bacterial strains associated to bivalve mollusks such as Argopecten purpuratus “concha de abanico” and Crassostrea gigas “ostra” in cultivation systems. From 345 marine strains collected, 20 strains were recovered that had the ability of inhibiting a wide spectrum of fish, mollusks and shellfish pathogenic bacteria; being the most sensitive pathogens Aeromonas sobria P-281, Aeromonas hydrophila ATCC 7966, Vibrio vulnificus ATCC 27562 and Vibrio parahaemolyticus ATCC 17803. The phenotipic characterization of this strains with inhibitory capacity allowed the identification of the following genera: Vibrio (40%), Aeromonas (15%), Flavobacterium (10%), Pseudomonas (5%), Moraxella (5%), Flexibacter (5%). A 20% could not be identified. The results suggest that the isolated bacteria could be used as probiotics agents for the biological control of pathogens from marine organisms of interest in mariculture., Los microorganismos han sido siempre objeto de estudios como productores de sustancias antibacterianas; sin embargo, también son consideradas productores de sustancias antifúngicas, antivirales, antiparasitarias, citotóxicas e inhibitorias de otras formas de crecimiento celular. Este trabajo describe el aislamiento, el potencial inhibitorio y la caracterización fenotípica de cepas bacterianas nativas asociadas a los moluscos bivalvos Argopecten purpuratus “concha de abanico” y Crassostrea gigas “ostra” en sistemas de cultivo. De un total de 345 cepas de bacterias colectadas se recuperaron 20 cepas marinas con capacidad inhibitoria de amplio espectro de bacterias patógenas de peces, moluscos y crustáceos; y los más sensibles fueron los patógenos Aeromonas sobria P-281, Aeromonas hydrophila ATCC 7966, Vibrio vulnificus ATCC 27562 y Vibrio parahaemolyticus ATCC 17803. La caracterización fenotípica de las cepas con capacidad inhibitoria permitió identificar los siguientes géneros: Vibrio (40%), Aeromonas (15%), Flavobacterium (10%), Pseudomonas (5%), Moraxella (5%), Flexibacter (5%). No fueron identificadas 20%. Los resultados sugieren que las bacterias aisladas podrían ser aprovechadas como agentes probióticos en el control biológico de patógenos de organismos marinos de interés en maricultura.

A member of the genus Alteromonas sp. (strain N22.C) isolated from marine neuston and substance-producer which inhibit growth of ichthyopathogenics was characterized phenotipically by means of morphological, physiological and biochemical conventional tests. To determine the chemical nature of the inhibitory substance, raw extracts of supernatans from cultured strains were precipitated with increasing concentrations of Ammonium Sulphate up to 70% and filtered through columns of Sephadex G-25. Assays by Sodium Dodecyl Sulfate–Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS–PAGE) revealed that the antimicrobial substance is a proteinaceous compound with a molecular mass of approximately 34000 Da, which lacks sugar associated residues of it. Other assays made with raw semipurified fractions extracts of Alteromonas sp N22.C show the wide spectrum of antibiotic activity against pathogenic bacterial strains of fish, mollusks and crustaceans., Un miembro del género Alteromonas sp. (cepa N22.C), aislado del neuston marino y productor de sustancias que inhiben el crecimiento de ictiopatógenos fue caracterizado fenotípicamente mediante pruebas morfológicas, fisiológicas y bioquímicas convencionales. Para determinar la naturaleza quí- mica de la sustancia inhibitoria, extractos crudos de sobrenadantes de cultivos fueron precipitados con concentraciones crecientes de Sulfato de Amonio hasta el 70% y filtrados a través de columnas de Sephadex G-25. Ensayos con Dodecil Sulfato de Sodio-electroforesis en Geles de Poliacrilamida (SDS– PAGE) revelaron que la sustancia antimicrobiana es un compuesto proteináceo con una masa molecular de aproximadamente 34000 Da, que carece de residuos de azúcares asociados. Otros ensayos realizados con extractos crudos y fracciones semipurificadas de la cepa de Alteromonas sp. N22.C mostraron un amplio espectro de actividad antibiótica contra cepas de bacterias patógenas de peces, moluscos y crustáceos.

A total of 26 strains of marine bacteria with proteolytic activity was isolated from sea water contaminated with fishing effluents; they were evaluated in basis of their growth and formation of activity halos in Marine Agar supplemented with casein to 1%, pH 8,0 and incubated to 25 ºC per 72 hours. Selected five strains were evaluated on the basis of displaying the best halos of activity as well by their growth and production of proteases at different concentrations of NaCl, temperature ranges and pH; being finally considered as moderate halotolerants bacteria, psicrotrophics and alkalophile. These strains also were evaluated by their specific proteolytic activity on the casein, being strain CM48 (Pseudomonas sp.) the one that presented the best specific activity (17,38 U/mg) at 72 hours, and followed by strain CM45 (Alcaligenes sp.) (12,09 U/mg) and three strains of Aeromonas sp. (CM43, CM44 and CM46) with values of 12,02; 10,07 and 10,10 U/mg respectively., Un total de 26 cepas de bacterias marinas con actividad proteolítica fueron aisladas de agua de mar contaminadas con efluentes pesqueros; las mismas que se evaluaron en base al crecimiento y formación de halos de actividad en Agar Marino suplementados con caseína al 1%, pH 8,0 e incubados a 25 ºC por 72 h. Cinco cepas, seleccionadas por presentar los mejores halos de actividad fueron evaluadas a su vez por su crecimiento y producción de proteasas a diferentes concentraciones de NaCl, rangos de temperatura y pH; siendo consideradas finalmente como bacterias halotolerantes, psicrotróficas y alcalófilas moderadas. Estas cepas también fueron evaluadas por su actividad proteolítica específica sobre la caseína, siendo la cepa CM48 (Pseudomonas sp.) la que presentó la mejor actividad específica (17,38 U/mg) a las 72 horas, y seguidas por las cepas CM45 (Alcaligenes sp.) (12,09 U/mg) y tres cepas de Aeromonas sp. (CM43, CM44 y CM46) con valores de 12,02; 10,07 y 10,10 U/mg respectivamente.

In order to select marine bacteria with the ability to produce extracellular enzymes (EEC), samples from Argopecten purpuratus and Crassostrea gigas in cultivation as well as from other interticlal and benthic invertebrates were analyzed. The selection of producer EEC strains was carried out in Marine Agar (MA) with addition of the relevant substratum (starch, casein, tween-80, lecithine, DNA and gelatine). The EEC producer strains evaluation was carried out on 102 isolates. The results show that bacteria associated toA. purpuratusand C. gigashave the best multienzymatic activities; however, Semimytilus algosus, Tetrapigus niger and Thais chocolata are also important sources of bacteria producers of EEC. The qualitative multienzymatic activity in MA (clear or opaque zones around the colonies in mm of diameter) varied from 6 to > 16 mm. The frequency of multienzymatic production was caseinase 62,74%, tween-esterase 57,84%, amylase 52,94%, gelatinase 38,23%, DNAse 33,3%, agarase 5,43% and lecithinase 90,0%. The results suggest the possibility of using native strains for biotechnological purposes., Con el fin de seleccionar las bacterias marinas con la capacidad de producir enzimas extracelulares ( CEE ) , se analizaron muestras de Argopecten purpuratus y Crassostrea gigas en el cultivo , así como de otros invertebrados interticlal y bentónicos. La selección de cepas de la CEE de productores se llevó a cabo en Agar Marino ( MA ) con la adición del sustrato relevante ( almidón , caseína , Tween - 80 , lecitina , ADN y gelatina ) . La CEE evaluación cepas productoras se llevó a cabo en 102 aislamientos . Los resultados muestran que las bacterias asociadas TOA . purpuratusand C. gigashave las mejores actividades multienzimáticos ; Sin embargo , Semimytilus algosus, Tetrapigus niger y Thais chocolata también son fuentes importantes de productores de bacterias de la CEE. La actividad multienzimático cualitativa en MA ( zonas claras u opacas alrededor de las colonias en mm de diámetro ) varió de 6 a > 16 mm . La frecuencia de la producción multienzimático fue caseinase 62,74 % , entre esterasa 57,84 % , 52,94 % de la amilasa , la gelatinasa 38,23 % , 33,3 % DNAsa , agarasa 5,43 % y 90,0 % lecitinasa . Los resultados sugieren la posibilidad de usar cepas nativas para fines biotecnológicos

Inhibitory substances produced by marine strains belonging to the genus Alteromonas spp. are partially characterized. Precipitation of raw extracts supernatans from strains N22.C and N11.6 with concentration saturants of ammonium sulfate and filtrates in columns Sephadex G-25 show the production of inhibitory substances (SI) of proteinacea nature. Other assays revealed that these substances have a wide spectrum of antibiotic activity against collection strains pathogens of fish, mollusks and crustaceans. Also, it shows those SI to be thermosensitive at 90 9C for 45 min and stable within the pH range of 3,0 at 9,0 for 15 min. Antibiotic activity of the substances against Vibrio angufflarum NCMB 2133, V anguillarum ATCC 19264 and Aeromonas salmonicida 76,79 was comparatively equivalent to 30 ppm of the antibiotic oxitetraciclina (OTC)., Se caracterizan parcialmente substancias inhibitorias producidas por cepas marinas del género Alteromonas spp. Pruebas de precipitación de extractos crudos de sobrenadantes de las cepas N22.C y N11.6 con concentraciones saturantes de sulfato de amonio y filtrados en columnas de Sephadex G-25 muestran la producción de substancias inhibitorias (SI) de naturaleza proteinácea. Otros ensayos de caracterización revelan que dichas substancias tienen un amplio espectro de actividad antibiótica frente a cepas de colección patógenas de peces, moluscos y crustáceos. Asimismo, muestran a las SI como termosensibles a 90oC en 45 min y con capacidad de mantener estabilidad inhibitoria dentro, del rango de pH de 3,0 a 9,0 hasta por 15 min. La actividad antibiótica de las substancias frente a Vibrio anguillarum NCMB 2133, V. anguillarum ATCC 19264 y Aeromonas salmonicida 67,79 fueron comparativamente equivalentes a 30 ppm del antibiótico oxitetraciclina (OTC).

Marine bacteria have been frequently included in the scientific literature as producers substance antibacterial properties. In this study, we investigate the potential activity antibiotic in vitro of strains the marine bacterioneuston isolated from rocky litoral pools in Montemar Beach, Bay of Valparaiso, Chile. Were isolated 71 strains antagonic to Staphylococcus aureus ATCC 11632. Twentyfive strains producing strongly inhibitory substance were tested against 15 know ichthiopathogenic bacteria. Applying a classic method for marine bacteria, they were carried out phenotypic characterization of bacterioneuston strains accordingly to identified. Results showed that all fifteen ichthiopathogens strains were inhibeted by the neustonic isolates, being V anguillarum NCMB 2133, V ordalii 84/2559 and V tubiashii EX1 the most sensitive. Strains of bacterioneuston were identified as Vibrio spp. (28%), Flavobacterium spp. (12%), AlteromonasMarinomonas group (12%), Pseudomonas spp. (8%) and Micrococcus spp. (4%). Nine neustonic isolates did not match our identifications schemes. Experimental results suggest that this strains or their products coullo be useful in activities of intensive cultivation of aquaculture fish, mollusks and crustaceans., En la literatura científica, las bacterias marinas han sido consideradas con frecuencia como productores de sustancias antibacterianas. En este estudio, se investigó el potencial de actividad antibiótica in vitro de cepas nativas de bacterioneuston marino aisladas de las pozas intermareales de Montemar, Bahía de Valparaiso, Chile. Se aislaron 71 cepas neustónicas antagonistas a Staphylococcus aureus ATCC 11632. Veinticinco de ellas, productoras de sustancias fuertemente inhibitorias, fueron evaluadas por su antagonismo frente a una colección de 15 bacterias ictiopatógenas. Aplicando métodos clásicos para bacterias marinas, se caracterizaron fenotípicamente orientados a la identificación. Los resultados de antibiosis indican que la totalidad cle las ictiopatógenas en prueba son susceptibles a la actividad inhibitoria de las cepas neustónicas, siendo V anguillarum NCMB 2133, V ordalii 84/2559 y V tubiashii EX1 las más sensibles. Entre las cepas aisladas del neuston se identificaron miembros de los géneros Vibrio spp. (28%), Flavobacterium spp. (12%), Alteromonas-Marinomonas (12%), Pseudomonas spp (8%) y Micrococcus spp, (4%). Nueve cepas (36%) no fueron identificadas. Los resultados de actividades inhibitorias frente a ictiopatógenos sugieren que dichas cepas o sus productos pudieran ser útiles en actividades de cultivos intensivos de maricultura de peces, moluscos y crustáceos.