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Snakes of the Philodryadini tribe are included in the Dipsadidae family, which is a diverse group of rear-fanged snakes widespread in different ecological conditions, including habitats and diet. However, little is known about the composition and effects of their venoms despite their relevance for understanding the evolution of these snakes or even their impact on the occasional cases of human envenoming. In this study, we integrated venom gland transcriptomics, venom proteomics and functional assays to characterize the venoms from eight species of the Philodryadini tribe, which includes the genus Philodryas, Chlorosoma and Xenoxybelis. The most abundant components identified in the venoms were snake venom metalloproteinases (SVMPs), cysteine-rich secretory proteins (CRISPs), C-type lectins (CTLs), snake endogenous matrix metalloproteinases type 9 (seMMP-9) and snake venom serinoproteinases (SVSPs). These protein families showed a variable expression profile in each genus. SVMPs were the most abundant components in Philodryas, while seMMP-9 and CRISPs were the most expressed in Chlorosoma and Xenoxybelis, respectively. Lineage-specific differences in venom composition were also observed among Philodryas species, whereas P. olfersii presented the highest amount of SVSPs and P. agassizii was the only species to express significant amounts of 3FTx. The variability observed in venom composition was confirmed by the venom functional assays. Philodryas species presented the highest SVMP activity, whereas Chlorosoma species showed higher levels of gelatin activity, which may correlate to the seMMP-9 enzymes. The variability observed in the composition of these venoms may be related to the tribe phylogeny and influenced by their diets. In the presented study, we expanded the set of venomics studies of the Philodryadini tribe, which paves new roads for further studies on the evolution and ecology of Dipsadidae snakes.

Fifteen well-defined strains of Aeromonas of thirteen species were analyzed by SDS protein electrophoretic analysis (SDS-PAGE) and random amplified polymorphic DNA analysis (RAPD). The comparison between the patterns obtained by both methods allowed differentiating all the strains. Clusters formed by the unweighted pair group method with arithmetic averages applied to protein data correlates with the genetic and biochemical information about the species. The results show that protein fingerprinting has the potential to differentiate Aeromonas species, but the low qualitative variation indicates that this technique is not efficient for the characterization of strains within a species. Conversely, RAPD fingerprinting allows the identification of strains but the high variability limits its potential as an aiding method for species identification.Quinze linhagens de Aeromonas pertencentes a treze espécies foram avaliadas através de eletroforese de proteínas totais (SDS-PAGE) e segmentos de DNA amplificados ao acaso (RAPD). A comparação entre os padrões obtidos por ambos métodos permitiu diferenciar todas as linhagens. Agrupamentos formados com base nos dados protéicos mostraram relação com informações bioquímicas e genéticas a respeito das espécies. Os resultados mostraram que análises protéicas têm potencial para diferenciar espécies de Aeromonas, mas a baixa variação qualitativa indica que esta técnica não é eficiente para a caracterização entre linhagens dentro de espécies. Ao contrário, marcadores de RAPD permitem identificar linhagens, mas a alta variabilidade limita seu potencial como método auxiliar na identificação de espécies.

The tribe Philodryadini is constituted by a rich group of neotropical snakes that are highly diverse ecologically and morphologically. Currently, 24 species compose the tribe, and are recognized as common components of the ophidian diversity in several regions of South America. The species of Philodryadini exhibit two great geographical distribution patterns, with most species occurring in the lowlands of the cis-Andean region of the American continent, while another not so diverse group is distributed in the trans-Andean region of the central and southern Andes, in Ecuador, Peru and Chile. The richness of the tribe and its evolutionary relationships has varied greatly in recent years, mainly due to the recent formulation of diverse phylogenetic hypotheses based on molecular evidence. In the same way, in recent years many taxonomic complexes have been studied and the taxonomic status of several species has been clarified. However, many questions about the status of some complexes and phylogenetic relationships within the tribe are still unknown. To understand the evolutionary relationships between Philodryadini and the other Xenodontinae tribes we performed a phylogenetic analysis including molecular evidence of a representative sample of all tribes of the subfamily. Simultaneously, we evaluated the relationships within Philodryadini using DNA sequences from the vast majority of the species of the tribe described so far. Likewise, we performed a taxonomic revision of the tribe species, using a combination of morphological and molecular evidence. Our phylogenetic analyzes revealed that the tribe Philodryadini is a non-monophyletic group, and is currently composed of two different lineages of unrelated xenodontine snakes. To provide a phylogenetic structure that reflected the relations of the tribes in the interior of the subfamily, we erected a new tribe and a new genus to accommodate the group of species that constituted a completely different radiation of xenodontine snakes from the Andes. Within Philodryadini (sensu stricto), we recognize a particular pattern of diversification, with a first clade, composed of two groups , closely related to the clade that contains the type species of Philodryadini. To best represent the pattern of evolutionary diversification within the tribe, we restructured its generic composition by resurrecting the genera Chlorosoma and Xenoxybelis. Additionally, with our taxonomic revision we resolve the taxonomic status of three species complexes and recognize four taxa previously located in the synonymy of Philodryas. With our study, the relationships within Philodryadini are now better understood and their diversity is currently consisted of three genera and 24 species. A tribo Philodryadini é composta por um rico grupo de serpentes neotropicais altamente diversas ecológica e morfologicamente. Na atualidade, 24 espécies fazem parte da tribo, sendo amplamente reconhecidas como um dos componentes comuns da diversidade de ofídio-fauna de América do Sul. As espécies que fazem parte de Philodryadini apresentam dois grandes padrões de distribuição geográfica, sendo que a grande maioria das espécies ocorrem nas terras baixas da região cis-Andina do continente americano, enquanto que um outro grupo não tão diverso distribui-se na região trans-Andina dos Andes centrais e do Sul, no Equador, Peru e Chile. O conhecimento da diversidade da tribo e das suas relações evolutivas tem variado muito nos últimos anos, principalmente pela recente formulação de diversas hipóteses filogenéticas baseadas em evidência de biologia molecular. Do mesmo jeito, muitos complexos taxonômicos têm sido abordados recentemente e o status taxonômico de várias espécies esclarecido. No entanto, ainda se desconhecem muitas questões sobre o status de alguns complexos e as relações filogenéticas do interior da tribo. Para entender as relações evolutivas entre Philodryadini e as demais tribos de Xenodontinae realizamos uma análise filogenética incluindo evidência molecular de uma amostra representativa de todas as tribos da subfamília. Simultaneamente, avaliamos as relações ao interior de Philodryadini empregando sequências de ADN da grande maioria das espécies da tribo descritas até o momento. De igual forma, realizamos uma revisão taxonômica das espécies da tribo, empregando uma combinação de variáveis morfológicas e moleculares. As nossas análises filogenéticas mostraram que a tribo Philodryadini é um grupo não monofilético, estando na atualidade composto por duas linhagens diferentes de serpentes xenodontineas não relacionadas. Para fornecer uma estrutura filogenética que refletisse as relações das tribos no interior da subfamília, erigimos uma nova tribo e um gênero novo para acomodar o grupo de espécies que constituem uma radiação completamente diferente de serpentes xenodontineas dos Andes. Já no interior de Philodryadini (sensu stricto), reconhecemos um padrão de diversificação particular, com um primeiro clado, composto por dois grupos (as cobras cipó e as cobras de focinho afiado da Amazônia), estreitamente relacionado com o clado que contem a espécie tipo de Philodryadini. Pra melhor representar o padrão de diversificação evolutivo no interior da tribo, reestruturamos a sua composição genérica ao ressuscitar os gêneros Chlorosoma e Xenoxybelis. Adicionalmente, com a nossa revisão taxonômica reconhecemos o status taxonômico de três complexos de espécies e reconhecemos a validade de quatro táxons previamente localizadas na sinonímia de Philodryas. Com o nosso estudo, as relações no interior da tribo Philodryadini ficaram melhor resolvidas e a sua diversidade ficou constituída por três gêneros e 24 espécies.

The genus Pristimantis has 500 species of anurans with distribution in northwest South America, specially in the Andes. Due to the large number of species morphologically diverse, the genus was divided in 11 species groups, with 312 species not allocated in any of them. The great number of species not allocated in species groups is due to the lack of morphological characters to better define and diagnose these groups, and because most of the anteriorly recognized groups in the literature of 70, 80 and 90s decades of the last century were not recovered monophyletic in the most recent phylogenetic analyses. The present study aims to perform a phylogenetic analysis of Pristimantis, with phenotypic and genotypic characters, through total evidence with dynamic homology and parsimony. As a result, Pristimantis is not monophyletic and some of its species were reallocated in the genus Tachiramantis. The species groups within Pristimantis were reformulated with proposed diagnosis. In total, 25 species groups are here defined O gênero Pristimantis possui 500 espécies de anfíbios anuros com distribuição no noroeste da América do Sul, concentrado principalmente nos Andes. Devido ao grande número de espécies, morfologicamente diversas, o gênero encontra-se atualmente dividido em 11 grupos de espécies, com 312 espécies não alocadas em grupos. O grande número de espécies não alocadas em grupos se deve especialmente pela falta de dados morfológicos para definir e diagnosticar esses grupos, e pelo fato dos grupos anteriormente reconhecidos nas décadas de 70, 80 e 90, serem em sua grande maioria não monofiléticos. O presente trabalho tem como objetivo uma análise filogenética do gênero Pristimantis, utilizando caracteres fenotípicos e genotípicos através de uma análise de evidência total utilizando homologia dinâmina e parcimônia. Pristimantis não resultou monofilético e algumas de suas espécies foram realocadas no gênero Tachiramantis. Os grupos de espécies em Pristimantis foram reformulados com diagnoses propostas. No total 25 grupos de espécies são reconhecidos