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Diffuse large B cell lymphoma (DLBCL) and follicular lymphoma (FL) are the 2 most common aggressive and indolent lymphomas. The tumor microenvironment (TME), both immune and non-immune, plays a key supportive role in these diseases. Although their impact on the prognosis and pathogenesis of B cell lymphoma has been acknowledged for years, to date tumor-associated macrophages (TAM) have not been extensively explored at the single cell level in reactive and tumor lymphoid organ from DLBCL and FL. Herein, we explore mononuclear phagocytes (MNP) heterogeneity and their potential co-regulation with the stromal and endothelial compartment in B cell lymphoma lymph nodes compared to reactive secondary lymphoid organs, by mass cytometry, scRNASeq, and in silico approaches. We show a co-regulation between TAM and blood endothelial cells (BEC) in lymphoma. We identify a specific interaction between ANXA1-expressing BEC and FPR1/2-expressing monocytes/macrophages in DLBCL, which we confirm in situ by multiplex immunofluorescence (mIF) and imaging mass cytometry (IMC). This crosstalk is associated to an adverse prognosis and an immunosuppressive TME in DLBCL.; Le lymphome diffus à grandes cellules B (DLBCL), agressif, et le lymphome folliculaire (FL), indolent, sont les deux lymphomes les plus fréquents. Le microenvironnement tumoral (TME) immun et non immun joue un rôle de soutien essentiel dans ces maladies. Bien que leur implication dans le pronostic et la pathogénie des lymphomes B soit reconnu depuis plusieurs années, les macrophages associés aux tumeurs (TAM) n'ont pas encore été caractérisés à l’échelle de la cellule unique dans le DLBCL et le FL. Nous explorons ici l'hétérogénéité des phagocytes mononucléés (MNP) et leur corégulation potentielle avec le compartiment stromal et endothélial dans les ganglions lymphatiques des lymphomes B, en comparaison à des organes lymphoïdes secondaires réactionnels, par cytométrie de masse, scRNASeq et des approches in silico. Nous mettons en évidence une co-régulation entre les TAM et les cellules endothéliales sanguines (BEC) dans les lymphomes. Nous identifions une interaction spécifique entre les BEC exprimant ANXA1 et les monocytes/macrophages exprimant FPR1/2 dans le DLBCL, confirmée in situ par immunofluorescence multiplex et imagerie par cytométrie de masse. Ce dialogue est associé à un pronostic défavorable et à un TME immunosuppressif dans le DLBCL, et pourrait constituer une cible thérapeutique.

Despite heavy treatments, local recurrence of glioblastoma (GBM) remains frequent, leading to a poor prognosis with a median survival of 15 months. One of the main challenges is to eradicate the infiltrating part of the tumor tissue that causes recurrence while preserving the healthy brain parenchyma from irreversible damage. To this end, neuropilin-1 (NRP-1), a receptor overexpressed by endothelial cells of angiogenic phenotype of the tumor vasculature and associated with proliferation and migration of GBM has been demonstrated to be a relevant molecular target to promote the anti-vascular effect of photodynamic therapy (PDT). The KDKPPR peptide moiety targeting NRP-1 and a porphyrin acting as a photosensitizer (PS) have thus been grafted onto AGuIX design nanoparticles to meet these challenges. The photophysical properties of the PS and the molecular affinity of the KDKPPR peptide for the NRP-1 recombinant protein were preserved after the functionalization of the AGuIX nanoparticle. In vivo selectivity studies revealed prolonged retention of peptide-conjugated nanoparticles in the vascular system of xenografted human GBMs. Post-PDT follow-ups have shown promising responses associating delayed tumor growth and a reduction in tumor metabolism in the days following treatment. We also demonstrated an acute inflammation and the formation of edema within and around the tumor in the days following the treatment as well as an influx of macrophages in the tumor which in these conditions could largely participate in the inflammatory and post-PDT immunogen response. Finally, by using a monocytic cell line (THP-1) brought into contact with the conditioned medium from tumor cells treated with PDT, we were able to demonstrate the immunostimulatory effects of PDT and in particular its potential to induce the polarization of macrophages towards the inflammatory and anti-tumor phenotype M1., Malgré des traitements lourds, les récidives locales du glioblastome (GBM) restent fréquentes, conduisant à un pronostic sombre avec une médiane de survie de 15 mois. L’un des principaux défis à relever est d’éradiquer la partie infiltrante du tissu tumoral à l’origine des récidives tout en préservant le parenchyme cérébral sain de lésions irréversibles. Dans ce but, la neuropiline-1 (NRP-1), un récepteur surexprimé par les cellules endothéliales de phénotype angiogénique du système vasculaire tumoral et associé à la prolifération et à la migration du GBM a été mise en évidence comme étant une cible moléculaire pertinente pour promouvoir l'effet anti-vasculaire de la thérapie photodynamique (PDT). Le peptide KDKPPR ciblant NRP-1 et une porphyrine jouant le rôle de photosensibilisateur (PS) ont ainsi été greffés sur des nanoparticules de design AGuIX pour répondre à ces enjeux. Les propriétés photophysiques du PS et l'affinité moléculaire du peptide KDKPPR pour la protéine recombinante NRP-1 ont été préservées après la fonctionnalisation de la nanoparticule AGuIX. Les études de sélectivité in vivo ont révélé une rétention prolongée des nanoparticules conjuguées aux peptides dans le système vasculaire des GBM humains xénogreffés. Les suivis post-PDT ont démontré des réponses prometteuses associant un retard de croissance tumorale et une chute du métabolisme tumoral dans les jours suivant le traitement. Nous avons également mis en évidence une inflammation aiguë et la formation d’œdèmes au sein et au pourtour de la tumeur dans les jours suivant le traitement ainsi qu’une affluence de macrophages dans la tumeur qui dans ces conditions pourrait largement participer à la réponse inflammatoire et immunogène post-PDT. Finalement, en utilisant une lignée cellulaire monocytaire (THP-1) mis au contact avec le milieu conditionné provenant de cellules tumorales traitées par PDT, nous avons pu démontrer les effets immunostimulants de la PDT et notamment son potentiel à induire la polarisation des macrophages vers le phénotype inflammatoire et antitumoral M1.