Search

Une nouvelle technique de transformation génétique mise au point très récemment sur Hevea brasiliensis, haut producteur de caoutchouc naturel, permet l'insertion de transgène via Agrobacterium tumefaciens. L'étude présentée vise la caractérisation du promoteur H4 du gène hev2.1 à l'aide du gène rapporteur gusA. Cette caractérisation précoce au niveau du cal et de plantules in vitro a nécessité une mise au point des tests histo-cytochimique et fluorimétrique de l'activité GUS. Au final, 10 des 16 lignées H4::GUS correspondant à un événement de transformation indépendant ont permis d'obtenir une cinquantaine de plantules dont une trentaine ont été acclimatées en serre. La caractérisation du promoteur a permis de mettre en évidence une influence des stress éthyléniques, lumineux et osmotiques sur le fonctionnement du promoteur. Toutefois, ces résultats restent à confirmer sur des tissus ex vitro ainsi que sur un nombre d'échantillons plus important pour gagner en significativité. Par ailleurs, une hybridation in situ sur messagers a été réalisée avec une sonde ARN antisens gusA sur des échantillons de plantules transgéniques H4::GUS. Cela a permis de mettre en évidence une expression du gène gusA localisée strictement au niveau des lactifères dans la tige et la racine d'une part, et sans spécificité au niveau des feuilles d'autre part.

Chantier qualité spécifique "Auteurs Externes" département de Génétique animale : uniquement liaison auteur au référentiel HR-Access; National audience; Les cartes géniques des espèces domestiques sont restées très rudimentaires, voire inexistantes, jusqu’au début des années 1990. La situation a évolué à cette période avec la mise en place de vastes programmes de cartographie du génome, aussi bien au plan national (programmes de cartographie de l’INRA, programmes Génome Français) qu’européen (programmes Bridge) pour quelques espèces majeures dont les espèces bovine et porcine. Il est en effet apparu clairement que la connaissance du génome, indispensable pour l’isolement et le clonage des gènes d’intérêt agronomique, passait par la construction des cartes génétique (mise en place d’un réseau de marqueurs polymorphes par analyse de liaison sur des familles de référence) et cytogénétique (localisation de marqueurs et de gènes sur les chromosomes). Les principales méthodes mises au point pour établir, dans un premier temps, la carte cytogénétique puis, dans un deuxième temps, la carte physique à haute résolution sont présentées.

Les différents outils sérologiques et moléculaires que nous avions développés nous avaient principalement servi à démontrer l'extrême hétérogénéité du genre créé arbitrairement pour décrire les trypanosomes de plantes : "Phytomonas". Ces outils nous avaient permis d'aborder l'épidémiologie moléculaire et nous avions pu ainsi démontrer que les trypanosomes des diverses Euphorbes et Asclepiades poussant dans les palmeraies et cocoteraies étaient différents de ceux associés aux dépérissements du cocotier et du palmier à huile en Amérique du Sud ("Hartrot" et "Marchitez sorpresiva"). Les études qui ont suivi ont été principalement orientées sur les trypanosomes intraphloémiques associés à ces dépérissements, ainsi que sur les trypanosomes intraphloémiques associés à un dépérissement de l'Alpinia purpurata dans les Caraibes

Une méthode d'hybridation moléculaire de l'ADN en dot-blots a été réalisée pour la caractérisation des espèces animales dans les produits carnés. La présence de porc est détectable grâce à cette technique dans des pâtes fines crues, pasteurisées ou stérilisées. Les résultats obtenus montrent qu'il est possible d'identifier sans ambiguïté des espèces animales même dans des produits stérilisés

Not available, Trois types de gènes codent pour les chaines lourdes(IGH) et les chaines légères kappa(IGK) et lambda(IGL) des immunoglobulines. Le réarrangement de ces gènes est obligatoire pour qu'ils puissent s'exprimer. La chronologie de ce réarrangement au cours de la différenciation des lymphocytes b implique d'abord les gènes IGH, et ensuite, selon la littérature, une séquence d'essais successifs dans l'ordre IGK-IGK-IGL-IGL. A la suite de l'observation d'une inversion de la ration des chaines kappa: lambda dans les lymphocytes associes aux tissus muqueux et dans les liquides sécrétoires chez l'homme, nous avons entrepris d'analyser le réarrangement des gènes des chaines légères humaines dans les leucémies, les lymphocytes b amygdaliens et les lymphocytes b du sang périphérique. Les résultats obtenus, présentés dans ce mémoire, nous conduisent à proposer un modèle alternatif pour la chronologie de réarrangement des gènes codant pour les chaines légères, selon lequel le réarrangement de ces gènes peut commencer soit par IGK soit par IGL. Le deuxième gène qui réarrangerait serait également au choix IGK ou IGL. Cette hypothèse diffère des modèles traditionnels en ce qu'une cellule b peut réarranger ce gène IGL sans avoir nécessairement réarrangé les deux allèles IGK. Nos résultats indiquent enfin que la prédominance de cellules produisant des chaines légères lambda dans le malt peut résulter de l'utilisation préférentielle de ce réarrangement alternatif

Not available, Trois types de gènes codent pour les chaines lourdes(IGH) et les chaines légères kappa(IGK) et lambda(IGL) des immunoglobulines. Le réarrangement de ces gènes est obligatoire pour qu'ils puissent s'exprimer. La chronologie de ce réarrangement au cours de la différenciation des lymphocytes b implique d'abord les gènes IGH, et ensuite, selon la littérature, une séquence d'essais successifs dans l'ordre IGK-IGK-IGL-IGL. A la suite de l'observation d'une inversion de la ration des chaines kappa: lambda dans les lymphocytes associes aux tissus muqueux et dans les liquides sécrétoires chez l'homme, nous avons entrepris d'analyser le réarrangement des gènes des chaines légères humaines dans les leucémies, les lymphocytes b amygdaliens et les lymphocytes b du sang périphérique. Les résultats obtenus, présentés dans ce mémoire, nous conduisent à proposer un modèle alternatif pour la chronologie de réarrangement des gènes codant pour les chaines légères, selon lequel le réarrangement de ces gènes peut commencer soit par IGK soit par IGL. Le deuxième gène qui réarrangerait serait également au choix IGK ou IGL. Cette hypothèse diffère des modèles traditionnels en ce qu'une cellule b peut réarranger ce gène IGL sans avoir nécessairement réarrangé les deux allèles IGK. Nos résultats indiquent enfin que la prédominance de cellules produisant des chaines légères lambda dans le malt peut résulter de l'utilisation préférentielle de ce réarrangement alternatif

La maladie des raies noires causée par M. fijiensis est considérée comme l'une des principale menaces des bananiers. Cette maladie s'étend inexorablement aux principales régions bananières et supplante la Cercosporiose jaune causée par M. musicola. Une étude de population de ces Mycosphaerella spp, pathogènes des bananiers et plantains, par RFLP (polymorphisme de longueur de fragments de restriction), a été initiée. Une méthode d'extraction d'ADN total adaptée à ces espèces a été mise au point. Des hybridations avec une sonde hétérologue correspondant à l'ADNr de Sordaria macrospora nous ont permis de détecter un polymorphisme interspécifique et entre isolats de M. fijiensis d'origine géographique différente. L'espèce M. musicola semble plus homogène. Ces observations seraient en accord avec l'activité pathogène supérieure de l'espèce M. fijiensis.