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Abroca-da-cana, Diatraea saccharalis, é considerada a principal praga da cana-de-açúcar, causando prejuízos de maneira direta e indireta. Entre os danos diretos, devido à abertura de galerias no interior do colmo da planta pela lagarta, podemos citar a redução da translocação de seiva e a quebra e perda de peso de colmos.

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Predatory ants, play an important role for the functioning of ecosystems as they provide several essential ecosystem services. In their role as natural enemy of many pest insects, they positively impact agroecosystems. In Brazilian sugarcane plantations these ant species are the main predators of eggs and initial instar larvae of the sugarcane borer, Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae), one of the key pests of this crop. Thus, the conservation of the predaceous ant fauna turns out to be a desirable, but at the same time challenging task. In this highly anthropized environment, ant populations are continuously impacted by the widespread application of insecticides used to control D. saccharalis and other sugarcane pests. Further, entomopathogenic fungi are used within integrated pest management and Beauveria bassiana has proven to be efficient in controlling D. saccharalis. However, a variety of previous studies showed, that the control of pest ants, using fungal entomopathogens, did not lead to satisfactory results. Thus, the use of B. bassiana could be an interesting and sustainable alternative to control D. saccharalis as this control strategy seems to preserve the ants. In this context, the purpose of the following study was to evaluate the impact on D. saccharalis and predatory ant populations after exposure to thiamethoxan + lambda-cialotrina, a systemic insecticide, or to B. bassiana, an entomopathogenic fungus. The experiment was conducted under field conditions in two different commercial sugarcane plantations located in the state of São Paulo, Brazil. The total experimental area of 2.500 m2 was divided into three equal plots, two treatment and one control area. The exposure of the insect populations to the treatments occurred by terrestrial pulverization, applying the product with the jet directed to the base of the plant (70% base / 30% soil), using thiamethoxan + lambda-cialotrina (141 / 106 g L-1) or B. bassiana (1 x 1011 conidia mL-1) as a suspension with 150 or 200 L of water, respectively. The population dynamics had been observed and assessed during a period of 40 to 69 days after application by weekly sampling of ants in pitfall- and sardine bait traps, and evaluation of the pest infestation based on the infestation intensity index. Further, anthill activity was monitored and assessed in each plot. The results showed that both products reduced the pest populations but did not cause a direct impact on the populations of predatory ants. Despite this, in all plots, including the control, we observed a heavy decline of the ant populations, verified by a continuous drop in the number of insects captured in the traps and the reduction of the anthill activity. We discussed the biotic and abiotic factors that could have been responsible for the population decline of the pest and its natural enemy. To support the results of the main experiment, complementary essays had been installed in a third experimental area, where the ants had been exposed to the same treatments. After application of the products, the area was artificially infested with the pest. The low damage incidence observed in all plots suggests predation, particularly as the presence of foraging ants had been verified, while looking for incidences of the pest on the plants. Hence, we suspect, that the decline of the ant populations in the main experiment seems somehow to be related to habitat conditions such as distribution and availability of food sources. As formigas predadoras desempenham um papel importante para o funcionamento dos ecossistemas, pois fornecem diversos serviços ecossistêmicos essenciais. Na sua função como inimigo natural de muitos insetos-praga, elas impactam positivamente os agroecossistemas. Em cana-de-açúcar, no Brasil, essas espécies são as principais predadoras de ovos e larvas da broca-da-cana, Diatraea saccharalis (Lepitoptera: Crambidae), uma das principais pragas dessa cultura. Diante disso, a conservação da fauna mirmecológica torna-se uma tarefa desejável, mas ao mesmo tempo desafiadora, uma vez que nesse ambiente altamente antropizado, as populações de formigas são continuamente impactadas pela aplicação de inseticidas para o controle de D. saccharalis e outras pragas da cana-de-açúcar. Além disso, fungos entomopatogênicos, são aplicados em programas de manejo integrado de pragas e Beauveria bassiana tem mostrado boa eficácia no controle de D. saccharalis. No entanto, diversas pesquisas conduzidas no passado mostraram que o uso desse fungo para o controle de diversas formigas-praga não levou a resultados satisfatórios. Diante disso, o uso de B. bassiana poderia ser uma alternativa interessante e sustentável para o controle de D. saccharalis, visto que, esta estratégia de controle parece preservar as formigas predadoras. Nesse contexto, o objetivo dessa pesquisa foi avaliar o impacto sobre as populações de D. saccharalis e formigas predadoras após exposição ao inseticida sistêmico tiametoxam + lambda-cialotrina e ao fungo entomopatogênico B. bassiana. O experimento foi conduzido em campo em duas diferentes áreas comerciais de cana-de-açúcar do estado de São Paulo, Brasil. A área total do delineamento experimental de 2.500 m2 foi dividida em três parcelas iguais, duas de tratamento e uma de controle. A exposição das populações dos insetos aos tratamentos ocorreu por meio de pulverização terrestre, aplicando-se o produto com jato direcionado à base da planta (70% base / 30% solo), utilizando tiametoxam + lambda-cialotrina (141 / 106 g L-1) ou conídios de B. bassiana (1 x 1011 conídios mL-1) em 150 e 200 mL de água respectivamente. A dinâmica populacional foi observada e avaliada durante um período de 40 a 69 dias após a aplicação, por amostragem semanal de formigas em armadilhas do tipo “pitfall” e com isca de sardinha. A infestação pela praga foi avaliada com base no índice de intensidade de infestação. Além disso, a atividade dos formigueiros foi monitorada e avaliada em cada parcela. Os resultados mostraram que os dois produtos diminuíram as populações da praga, porém não causaram um impacto direto nas populações das formigas predadoras. Não obstante disso, observou-se em todos os tratamentos, incluindo a testemunha, um forte declínio populacional de formigas, pela queda contínua no número de insetos capturados em armadilhas e pela redução na atividade dos formigueiros. Os fatores bióticos e abióticos que poderiam ter sido responsáveis pelo declínio populacional da praga e seu inimigo natural foram discutidos. Para apoiar os resultados do experimento principal, ensaios complementares foram instalados em uma terceira área experimental, onde as formigas foram expostas aos mesmos tratamentos e a praga infestada artificialmente. A baixa incidência de danos observada em todas as parcelas sugere que houve predação, porque foi verificada presença expressiva de formigas forrageando na parte aérea das plantas, enquanto procurava-se pela praga nas plantas. Portanto, suspeita-se que o declínio das populações de formigas no experimento principal está relacionado às condições do habitat, particularmente à distribuição e disponibilidade de fonte de alimentos. Palavras-chaves: Formigas predadoras; Diatraea saccharalis; inseticidas neurotóxicos e sistêmicos; Beauveria bassiana; relações tróficas. Predatory ants, play an important role for the functioning of ecosystems as they provide several essential ecosystem services. In their role as natural enemy of many pest insects, they positively impact agroecosystems. In Brazilian sugarcane plantations these ant species are the main predators of eggs and initial instar larvae of the sugarcane borer, Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae), one of the key pests of this crop. Thus, the conservation of the predaceous ant fauna turns out to be a desirable, but at the same time challenging task. In this highly anthropized environment, ant populations are continuously impacted by the widespread application of insecticides used to control D. saccharalis and other sugarcane pests. Further, entomopathogenic fungi are used within integrated pest management and Beauveria bassiana has proven to be efficient in controlling D. saccharalis. However, a variety of previous studies showed, that the control of pest ants, using fungal entomopathogens, did not lead to satisfactory results. Thus, the use of B. bassiana could be an interesting and sustainable alternative to control D. saccharalis as this control strategy seems to preserve the ants. In this context, the purpose of the following study was to evaluate the impact on D. saccharalis and predatory ant populations after exposure to thiamethoxan + lambda-cialotrina, a systemic insecticide, or to B. bassiana, an entomopathogenic fungus. The experiment was conducted under field conditions in two different commercial sugarcane plantations located in the state of São Paulo, Brazil. The total experimental area of 2.500 m2 was divided into three equal plots, two treatment and one control area. The exposure of the insect populations to the treatments occurred by terrestrial pulverization, applying the product with the jet directed to the base of the plant (70% base / 30% soil), using thiamethoxan + lambda-cialotrina (141 / 106 g L-1) or B. bassiana (1 x 1011 conidia mL-1) as a suspension with 150 or 200 L of water, respectively. The population dynamics had been observed and assessed during a period of 40 to 69 days after application by weekly sampling of ants in pitfall- and sardine bait traps, and evaluation of the pest infestation based on the infestation intensity index. Further, anthill activity was monitored and assessed in each plot. The results showed that both products reduced the pest populations but did not cause a direct impact on the populations of predatory ants. Despite this, in all plots, including the control, we observed a heavy decline of the ant populations, verified by a continuous drop in the number of insects captured in the traps and the reduction of the anthill activity. We discussed the biotic and abiotic factors that could have been responsible for the population decline of the pest and its natural enemy. To support the results of the main experiment, complementary essays had been installed in a third experimental area, where the ants had been exposed to the same treatments. After application of the products, the area was artificially infested with the pest. The low damage incidence observed in all plots suggests predation, particularly as the presence of foraging ants had been verified, while looking for incidences of the pest on the plants. Hence, we suspect, that the decline of the ant populations in the main experiment seems somehow to be related to habitat conditions such as distribution and availability of food sources. Keywords: Predatory ants; Diatraea saccharalis; neurotoxic and systemic insecticides; Beauveria bassiana; trophic relationships.

RESUMO A cultura do milho é atacada por diversos lepidópteros-praga. Recentemente, foi liberada no Brasil a comercialização de híbridos de milho Bt, integrando em seu genoma o gene Cry1Ab, proveniente de Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki, que codifica a proteína com efeito tóxico sobre insetos da ordem Lepidooptera. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar, em condições de campo, a eficácia de híbridos de milho convencionais e transgênicos para o controle de pragas, submetidos ou não à pulverização com inseticidas. O ensaio foi realizado em área experimental do Polo Apta Centro Norte, em Pindorama, Estado de São Paulo. Foram avaliados cinco híbridos de milho convencionais em comparação com os respectivos híbridos isogênicos Bt. A avaliação dos danos visuais de Spodoptera frugiperda (Smith) foi realizada a cada 10 dias, em 20 plantas das duas linhas centrais da parcela, e para Helicoverpa zea (Bod.) e Diatraea saccharalis (Fab.) na pré-colheita. As interações entre os híbridos e a transgenia ocorreram em todas as avaliações a partir dos 40 dia após emergência (DAE). Os híbridos transgênicos (Bt) avaliados apresentaram as menores notas de danos visuais de S. frugiperda em todas as avaliações. A transgenia também proporcionou menor percentagem de espigas danificadas por H. zea e S. frugiperda e de colmos atacados por D. saccharalis. Conclui-se que a transgenia proporciona redução nos danos visuais ocasionados pelas pragas, embora apresente desempenho diferente entre os híbridos. ABSTRACT Diverse lepidopteran pests attack the maize crop. The commercialization of hybrids of transgenic Bt maize, integrating in its genome the gene Cry1Ab, from Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki, which codifies the protein with toxic effect on insects of the Lepidoptera order, has been recently introduced in Brazil. The objective of this work was to evaluate, under field conditions, the effectiveness of conventional and transgenic maize hybrids for the control of pests, sprayed or not with insecticides. The assay was carried out in an experimental area of the Polo Apta Centro Norte, in Pindorama, São Paulo State, Brazil. Five conventional maize hybrids were evaluated in comparison with the respective isogenic Bt hybrids. The evaluation was carried out every 10 days, in 20 plants of the 2 central lines of the parcel for Spodoptera frugiperda (Smith) damage. For damages of Helicoverpa zea (Bod.) and Diatraea saccharalis (Fab.) the evaluations were carried out in the pre-harvest. The interactions between the hybrids and the transgeny occurred in all evaluations starting at the 40th day after emergence (DAE). The Bt hybrids evaluated presented the lowest scores for visual S. frugiperda damages in all the evaluations. The transgenic maize also provided the lowest percentage of cobs damaged by H. zea and S. frugiperda, and of stalks attacked by D. saccharalis. In conclusion, the transgenic maize provided reduction in visual damages caused by the pests, however, it presented different performance among the hybrids.

A espécie Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae), conhecida popularmente por broca-da-cana, destaca-se como praga-chave da cultura da cana-de-açúcar no Brasil devido aos prejuízos que acarreta na produtividade agrícola e industrial. O objetivo da pesquisa foi avaliar a não preferência para oviposição e alimentação de D. saccharalis por cultivares de cana-de-açúcar. Para tanto, foram realizados testes com e sem chance de escolha conduzidos em casa de vegetação e em laboratório, respectivamente, com as seguintes cultivares: RB867515, RB855453, RB855536, CTC 15, CTC 9, SP80-1842, SP79-1011, SP89-1115, SP81-3250 e SP87-365. No teste de não preferência para oviposição, foi avaliado o número de ovos, de posturas e de ovos por postura. Para o teste de alimentação, foi observada a atratividade das lagartas de D. saccharalis em cada tolete das cultivares, anotando-se a quantidade delas e o tempo de atração por meio de observações a 1, 3, 5, 10, 15, 30, 60 e 120 minutos após as liberações. Após 48 horas do início do teste, foi medido o consumo por intermédio da diferença entre a massa seca da alíquota (mg) pela massa seca da sobra do tolete. Conclui-se que a cultivar CTC 15 foi a menos preferida para oviposição e a mais consumida por D. saccharalis, sendo possivelmente portadora de resistência do tipo não preferência para oviposição e suscetível para alimentação à D. saccharalis.

Paraíba is prominent in the sugarcane production, being the third state with highest productive impact in the Northeast. In the 2018/2019 harvest, the state processed 5,675,107.870 million tons destined to the production of 118 thousand tons of sugar and 382 thousand m³ of ethanol. Among the multiple aspects that permeate the sugarcane culture, this study focus on the biological control, more precisely the biological cycle and behavioral aspects of Cotesia flavipes and Diatraea saccharalis produced in laboratory, on the Paraíba north coast. The research experiments were carried out at the Mass Production of Biological Control Laboratory (LPMCB) of the Paraíba Sugarcane Growers Association (ASPLAN), in Mamanguape, the north coast of Paraíba. Regarding the C. flavipes insects there were measured the egg-larva duration; the pupa duration; the quantitative of adults; the number of cocoons per caterpillar; the pupae viability; the sex ratio at the three temperatures (21, 25 and 29oC) and the efficiency among male and female handlers. Regarding the D. saccharalis pest host behavioral variables, it was observed the D. saccharalis egg-adult biological cycle, the larvae and pupae viability, adult sex ratio and the number of larvae per couple. In the first stage, corresponding to the egg-adult life biological cycle evaluation, the experiment used 34 couples randomly selected from the laboratory commercial creation, individually accommodated. In the second stage, to diagnose the larva-pupa, larva-adult and pupa-adult viability, as well as the D. saccharalis adult sex ratio, 600 larvae were collected during five weeks, 120 units per week. In the third stage, regarding the experiment evaluations to measure the number of larvae per couple, it was necessary to perform four treatments with 10 repetitions each, using one adult couple of insects per mating chamber. As analysis of variance was performed and the average was compared through the statistical program of the Student Newlman Keuls Test – Cloud Radio Access Networks (CRAN) version 2019. In the results obtained by the study, the laboratory-produced parasitoids behavioral aspects present differences among the controlled temperatures. Concluding that the parasitoid sample presents satisfactory quality to the analyzed parameters and that temperature is an important factor to extend or reduce the C. flavipes and D. saccharali life cycle. Nenhuma A Paraíba é proeminente na produção de cana-de-açúcar, sendo o terceiro estado com maior impacto produtivo no Nordeste. Na safra 2018/2019, o estado processou 5.675.107,870 milhões de toneladas destinadas à produção de 118 mil toneladas de açúcar e de 382 mil m3 de etanol. Dentre os múltiplos aspectos que perpassam pela cultura da cana-de-açúcar, esse estudo privilegia o controle biológico, mais precisamente o ciclo biológico e os aspectos comportamentais de Cotesia flavipes e Diatraea saccharalis produzidas em laboratório, no litoral norte paraibano. Os experimentos da pesquisa foram desenvolvidos no Laboratório de Produção Massal de Controle Biológico (LPMCB) da Associação de Plantadores de Cana da Paraíba (ASPLAN), em Mamanguape, no litoral norte da Paraíba. Em relação aos insetos C. flavipes foram mensuradas a duração de ovo-larva; a duração de pupa; o quantitativo de adultos; a quantidade de casulos por lagarta; a viabilidade de pupas; a razão sexual nas três temperaturas (21, 25 e 29⁰C) e a eficiência entre manipuladores masculino e feminino. No tocante às variáveis comportamentais do hospedeiro da praga D. saccharalis, foram observados o ciclo biológico da D. saccharalis do ovo-adulto, a viabilidade de larvas e pupas, e razão sexual dos adultos e a quantidade de larvas por casais. Na primeira etapa, correspondente à avaliação do ciclo biológico de vida ovo-adulto, o experimento utilizou 34 casais selecionados aleatoriamente da criação comercial do laboratório, acomodados de modo individualizado. Na segunda etapa, para diagnosticar a viabilidade de larva-pupa, larva-adulto e pupa-adulto, bem como a razão sexual dos adultos de D. saccharalis, foram coletadas 600 larvas durante cinco semanas, sendo 120 unidades semanais. Na terceira etapa, em relação às avaliações do experimento para mensurar a quantidade de larvas por casais, fez-se necessário executar quatro tratamentos com 10 repetições cada um, sendo utilizado um casal adulto de inseto por câmara de acasalamento. Realizou-se uma análise de variância e a média comparada pelo programa estatístico do teste de Student-Newlman-Keuls conhecido por Cloud Radio Access Networks (CRAN), versão 2019. Nos resultados obtidos no presente estudo, os aspectos comportamentais de parasitoides produzidos em laboratório apresentam diferenças entre as temperaturas controladas. Concluindo que a amostra de parasitoide apresenta qualidade satisfatória para os parâmetros analisados e que a temperatura é um fator importante para prolongar ou diminuir o ciclo de vida de C. flavipes e D. saccharalis.

The development of processes for the production of cellulases with high specific activity is a challenge for industrial biotechnology. Although the performance of commercial cellulases has improved significantly in the last decade, the same has not happened with cellulases produced in research laboratories, being the production of this type of enzyme still a high cost factor in the processes that require its use. Thus, the present study aimed to investigate the presence of cellulolytic bacteria isolated from the intestinal tract of Diatraea saccharalis larvae in order to determine their potential use in the hydrolysis of sugarcane bagasse. For this, cellulolytic bacteria were screened from the intestinal tract of Diatraea saccharalis larvae through specific culture media using sugarcane bagasse and carboxymethylcellulose (CMC) as sole carbon sources. In this scenario, sugarcane bagasse was used as the inducible biomass of cellulase by means of liquid fermentation. Through an experimental planning were determined the best conditions of cellulase production (inoculum concentration and pH). The physico-chemical-morphological characterization of the biomass was performed by means of chromatographic (HPLC) and spectroscopic analyzes (FTIR, XRD). Then electrophoretic techniques were used to measure the endoglucanase protein profile of cellulolytic bacterial isolates, electrophoretic purification techniques to determine molecular weight of proteins and molecular techniques (PCR and DNA sequencing) for bacterial genome identification. The results of chemical characterization showed that cellulose and hemicellulose decreased after pretreatment, suggesting carbohydrate loss and formation of other products such as furfural, HMF, acetic acid and formic acid. FTIR spectra revealed similarity between untreated and pretreated material spectra, qualitatively evidencing that pretreatment was efficient in extracting hemicellulose and lignin. Peaks in the XRD diffractograms confirmed the removal of lignin and hemicellulose from the pretreated biomass. However, for the crystallinity index there was no significant change (73.25 and 73.70% for untreated and pretreated biomass, respectively). Gram staining of cellulolytic bacterial isolates revealed the presence of one Gram-positive encapsulated bacillus and three Gram-negative bacteria. The degradation activity of CMC revealed higher extracellular cellulase activity for the isolates INTB2, INTB3 and INTB4. For extracellular endoglucanase activity, the 4 isolates reported similar patterns of endoglucanase excretion, however, the INTB4 isolate reported the lowest extracellular activity (3.0 cm). The results of cellulase production through the INTB3 isolate showed to be more stable compared to the other isolates INTB1, INTB2, INTB4. As for purification, the specific activity for the INTB3 extract was 30.13 U/mg for INTB4 19, 97, INTB2 11,15 and INTB1 5,53 U/mg, after precipitation with ammonium sulfate. Native PAGE presented to the four isolates 3 protein bands corresponding to ~ 89, 58 and 48 kDa. In SDS-PAGE the enzyme extracts investigated (crude and precipitated) reflect multiple proteins detected in the gel and show that the enzymes presented several bands (between 150 and 17 kDa). The zymogram-CMC analysis exhibited cellulolytic activity, suggesting that the enzymes were able to hydrolyze sodium carboxymethylcellulose and have at least two sizes, ~ 89 and 58 kDa. The method applied for the cellulase isolation of the INTB3 isolate presented a single peak of cellulolytic activity and through 12% SDS-PAGE, 3 protein bands were observed around 113, 76, 52 kDa. In the present study, of the microorganisms isolated for enzymatic production, INTB3 was identified as the main producer of cellulase, having the highest specific activity after partial purification (30.13 U/mg). A purificação da endoglucanase de INTB3 através da cromatografia 11 por exclusão de tamanho triplicou (96,25 UI/mL) a atividade específica celulolítica. Mais distante outros estudos tornam-se importantes para dar continuidade a estes experimentos para obter alto rendimento de produção, purificação e aplicação de celulase. CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O desenvolvimento de processos para produção de celulases com alta atividade específica é um desafio para a biotecnologia industrial. Embora o desempenho das celulases comerciais tenha melhorado significativamente na última década, o mesmo não aconteceu com as celulases produzidas em laboratórios de pesquisa, sendo, a produção desse tipo de enzima ainda um fator de custo elevado nos processos que exigem seu uso. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo investigar a presença de bactérias celulolíticas isoladas do trato intestinal de larvas de Diatraea saccharalis a fim de determinar seu potencial uso na hidrólise do bagaço da cana-de-açúcar. Para isto, realizou-se uma triagem de bactérias celulolíticas do trato intestinal de larvas de Diatraea saccharalis através de meios de cultura específicos utilizando o bagaço da cana-de-açúcar e carboximetilcelulose – CMC como únicas fontes de carbono. Nesse cenário, utilizou-se como biomassa indutível de celulase o bagaço da cana-de-açúcar por meio de fermentação em estado líquido. Através de um planejamento experimental foram ,determinado as melhores condições de produção de celulase (concentração do inóculo e pH). Realizou-se a caracterização físico-química-morfológica da biomassa por meio de análises cromatográficas (CLAE) e espectroscópicas (FTIR, DRX). Em seguida, aplicou-se técnicas eletroforéticas para mensurar o perfil proteico da endoglucanase dos isolados bacterianos celulolíticos, técnicas de purificação associadas às eletroforéticas para determinar o peso molecular das proteínas e técnicas moleculares (PCR e sequenciamento de DNA) para identificação de genoma bacteriano. Os resultados de caracterização química mostraram que a celulose e hemicelulose diminuíram após o pré-tratamento, sugerindo perda de carboidratos e formação de outros produtos como furfural, HMF, ácido acético e ácido fórmico. Os espectros de FTIR revelaram semelhança entre os espectros dos materiais não tratados e pré-tratado, evidenciando, qualitativamente, que o pré-tratamento foi eficiente na extração da hemicelulose e lignina. Os picos nos difratogramas do DRX confirmaram a remoção de lignina e hemicelulose da biomassa pré-tratada. No entanto, para o índice de cristalinidade não houve mudança significativa (73,25 e 73,70% para biomassa não tratada e pré-tratada, respectivamente). A coloração de Gram dos isolados bacterianos celulolíticos revelou a presença de um bacilo Gram-positivo encapsulado, e três bactérias Gram-negativas. A atividade de degradação de CMC revelou maior atividade de celulase extracelular para os isolados INTB2, INTB3 e INTB4. Para atividade de endoglucanase extracelular, Os 4 isolados reportaram padrões semelhantes de excreção de endoglucanase, no entanto, o isolado INTB4 foi o que reportou menor atividade extracelular (3,0 cm). Os resultados de produção de celulase através do isolado INTB3 mostraram-se mais estáveis em comparação aos demais isolados INTB1, INTB2, INTB4. Quanto a purificação, após precipitação com sulfato de amônio a atividade específica para o extrato INTB3 foi de 30,13 U/mg, para INTB4 19,97, INTB2 11,15 e INTB1 5,53 U/mg. A PAGE nativa apresentou para os quatros isolados 3 bandas de proteínas correspondentes a ∼89, 58 e 48 kDa. No SDS-PAGE os extratos enzimáticos investigados (bruto e precipitado) refletem múltiplas proteínas detectadas no gel e revelam que as enzimas apresentaram várias bandas (entre 150 a 17 kDa). A análise do zimograma-CMC exibiu atividade celulolítica, sugerindo que as enzimas conseguiram hidrolisar a carboximetilcelulose sódica e possuem pelo menos dois tamanhos, ∼ 89 e 58 kDa. O método aplicado para o isolamento da celulase do isolado INTB3 apresentou um único pico de atividade celulolítica e através de SDS-9 PAGE a 12%, observou-se 3 bandas proteicas em torno de 113, 76, 52 kDa. No presente estudo, Dos microrganismos isolados para produção enzimática, o INTB3 foi identificado como o principal produtor de celulase, tendo a maior atividade específica após purificação parcial (30,13 U/mg). A purificação da endoglucanase de INTB3 através da cromatografia por exclusão de tamanho triplicou (96,25 UI/mL) a atividade específica celulolítica. Mais distante outros estudos tornam-se importantes para dar continuidade a estes experimentos para obter alto rendimento de produção, purificação e aplicação de celulase.

Submitted by Rosangela Silva (rosangela.silva3@unioeste.br) on 2018-05-24T20:32:41Z No. of bitstreams: 2 Charles Seuchuco.pdf: 1461597 bytes, checksum: d1fe07c8c4b16541956c362cc1acb19c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2018-05-24T20:32:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Charles Seuchuco.pdf: 1461597 bytes, checksum: d1fe07c8c4b16541956c362cc1acb19c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-03-05 Diatraea saccharalis, known as a sugarcane borer, is a moth of the Lepidoptera order, being one of the main pests on sugarcane, responsible for damage to the sugar and alcohol industries. The fat body is the organ responsible for several functions during the larval phase of insects, mainly in charge of synthesizing molecules with metabolic actions. The success in insects’ adaptation is due to its efficient defense system, in which the fat body is able to synthesize antimicrobial peptides (AMP’s) and secrete them in the hemolymph, where they act as a defense mechanism against pathogens. AMP’s has a cationic character and present the capacity to interact with negative charge molecules of the bacteria, leading to the disintegration of their membranes. Considering the concerns regarding bacterial resistance to antibiotics and antimicrobial properties of AMP’s, such as fast-acting, varied mechanisms of action and wide range against Gram-positive and Gram-negative bacteria; it has become appropriate to carry out studies to use AMP’s as alternative or complementary antibiotic. In D. saccharalis, AMP’s with antimicrobial action have been reported in recently published papers using proteomic methodology. Thereby, this study aimed to perform the differential analysis of the proteins and peptides of the fat body in the 5th instar of larvae challenged with Escherichia coli, Bacillus subtilis and Beauveria bassiana; using the two-dimensional electrophoresis technique (2-DE), with 12.5% SDS-PAGE tricine gels, MALDI-TOF type mass spectrometry and the research in protein databases (Mascot and TagIdent). After analysis, six defense proteins of the innate immune system were found using the TagIdent identification tool: apolipophorin-3, attacin, attacin-F, Peptidoglycan recognition protein (PGRPs), putative defense protein 1 and putative defense protein 3. The AMP attacin presented a positive regulation in relation to the control gel indicating that the B. bassiana septic challenge stimulated the immune system of D. saccharalis. This study provides the first reports of proteins of the immune system produced by the adipose tissue of D. saccharalis. A Diatraea saccharalis, conhecida como broca-da-cana, é uma mariposa da ordem Lepidoptera, tratando-se de uma das principais pragas da cana-de-açúcar, responsável por prejuízos à indústria de açúcar e de álcool. O corpo gorduroso é o órgão responsável por várias funções durante a fase larval dos insetos, principalmente encarregado de sintetizar moléculas com ações metabólicas. O sucesso na adaptação dos insetos se deve ao seu eficiente sistema de defesa, no qual o tecido gorduroso é capaz de sintetizar peptídeos antimicrobianos (PAM’s) e secretá-los na hemolinfa, onde atuam como mecanismo de defesa contra patógenos. Os PAM’s têm caráter catiônico e apresentam capacidade de interagir com as moléculas de carga negativas das bactérias, levando a desintegração de suas membranas. Considerando as preocupações em relação à resistência bacteriana a antibióticos e às propriedades antimicrobianas dos PAM’s como ação rápida, mecanismos de ação variados e amplo espectro contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, têm se tornado atrativo para a realização de estudos para utilização de PAM’s como antibiótico alternativo ou complementar. Em D. saccharalis já foram relatados PAM’s com ação antimicrobiana em artigos recentemente publicados empregando metodologia proteômica. Desta forma, este trabalho teve como objetivo realizar a análise diferencial das proteínas e peptídeos do corpo gorduroso no 5° instar de larvas controles e desafiadas com Escherichia coli, Bacillus subtilis e Beauveria bassiana, utilizando eletroforese bidimensional (2-DE) com géis tricina SDS-PAGE 12,5%, espectrometria de massas do tipo MALDI-ToF e a pesquisa em bancos de dados de proteínas (Mascot e TagIdent). Após análise, foram encontradas seis proteínas de defesa do sistema imune inato utilizando a ferramenta de identificação TagIdent, sendo elas Apolipophorin-3, Atacina, Atacina-F, Proteína de reconhecimento de peptidoglicano (PGRPs), Provável proteína de defesa 1 e Provável proteína de defesa 3. O PAM Atacina apresentou regulação positiva em relação ao gel controle, indicando que o desafio séptico por B. bassiana estimulou o sistema imune da D. saccharalis. Este trabalho fornece os primeiros relatos de proteínas do sistema imune produzidas pelo corpo gorduroso de D. saccharalis.

Submitted by Aline Namie Suzuki (aline.n.suzuki@gmail.com) on 2018-05-18T00:02:26Z No. of bitstreams: 1 Dissertação-Aline-Suzuki.pdf: 1718334 bytes, checksum: 19706019f79a154b086c5de971b6b3dc (MD5) Approved for entry into archive by Cristina Alexandra de Godoy null (cristina@adm.feis.unesp.br) on 2018-05-21T13:33:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 susuki_an_me_ilha_par.pdf: 1053891 bytes, checksum: 6d1c78ca74d7da00d1c477234e7ffdc1 (MD5) Made available in DSpace on 2018-05-21T13:33:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 susuki_an_me_ilha_par.pdf: 1053891 bytes, checksum: 6d1c78ca74d7da00d1c477234e7ffdc1 (MD5) Previous issue date: 2018-02-16 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Considerando que a intensidade de infestação (I.I.%) é um importante dado sobre o dano causado pela Diatraea saccharalis em cana-de-açúcar e que existem poucos trabalhos na literatura relacionados ao tamanho de ótimo de parcela para este tipo de amostragem, o objetivo deste trabalho foi estimar o tamanho ótimo de parcela em hectares e número de colmos que deverá ser utilizado no processo de amostragem de modo que represente a intensidade de infestação causada pelo ataque da D. saccharalis em cana-de-açúcar. Para os cálculos relativos ao tamanho da área a ser amostrada foram utilizados quatro métodos para o cálculo do tamanho de parcela: método de inspeção visual da curvatura máxima, método da máxima curvatura modificado, modelo linear segmentado com platô e modelo quadrático segmentado com platô. Para os cálculos referentes ao número de entrenós foi utilizado o método da estimativa da suficiência amostral. O método da máxima curvatura modificado foi o que proporcionou melhores resultados. De acordo com os resultados encontrados neste trabalho, podemos concluir que o número mínimo a ser amostrado é o de 36 entrenós por hectare e a área máxima a ser amostrada é a de 27,5 hectares. Infestation intensity (II%) is an important data on the damage caused by Diatraea saccharalis in sugarcane. There are few studies in the literature related to the optimal plot size for this type of sampling. The objective of this work is to estimate the optimal plot size in hectares and number of stems to be used in the sampling process to represent the intensity of infestation caused by D. saccharalis attack on sugarcane. For the calculation of the size of the minimum sampled area, four methods were used: 1. visual inspection method of maximum curvature; 2. modified maximum curvature method; 3. segmented linear model with plateau and; 4. quadratic segmented model with plateau. For the calculations referring to the number of internodes, the method of estimating the sample adequacy was used. The modified maximum curvature method presented the best results. According this study, the minimum number to be sampled is 36 trains per hectare and the maximum area to be sampled is 27.5 hectares.

Submitted by Hurian Gallinari Holzhausen null (huriangh@gmail.com) on 2018-01-15T11:49:02Z No. of bitstreams: 1 HGH MS Thesis (versão final com certificado de aprovação e ficha catalográfica).pdf: 1510898 bytes, checksum: a45b72beb1fe2ac3364dcbb483cdfc89 (MD5) Approved for entry into archive by Alexandra Maria Donadon Lusser Segali null (alexmar@fcav.unesp.br) on 2018-01-17T12:47:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 holzhausen_hg_me_jabo.pdf: 1510898 bytes, checksum: a45b72beb1fe2ac3364dcbb483cdfc89 (MD5) Made available in DSpace on 2018-01-17T12:47:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 holzhausen_hg_me_jabo.pdf: 1510898 bytes, checksum: a45b72beb1fe2ac3364dcbb483cdfc89 (MD5) Previous issue date: 2017-10-31 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Chrysodeixis includens (Walker) e Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) são consideradas pragas de grande importância na cultura da soja, enquanto Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Crambidae) é considerada importante na cultura do milho no Brasil Central. Para o controle bem-sucedido dessas pragas usando plantas Bt, bem como o desenvolvimento de estratégias do manejo de resistência, é essencial conhecer a movimentação do estágio larval desses insetos. O estudo foi conduzido dentro de gaiolas teladas (3,00 x 3,00 x 1,80 m), a fim de evitar infestações naturais. As lagartas foram liberadas em uma planta localizada no centro das gaiolas. As lagartas e as injurias foram observadas a fim de registrar a posição na planta e a localização na gaiola. Lagartas de C. includens e H. armigera apresentaram movimentação entre as plantas de soja, enquanto lagartas de D. saccharalis praticamente se mantiveram nas plantas onde houve a liberação. Com isso, a adoção de mistura de sementes não Bt e Bt para o estabelecimento de refúgio em cultivos Bt pode ser adequado apenas para D. saccharalis. Chrysodeixis includens (Walker) and Helicoverpa armigera (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) are considered pests of great importance in soybean crop, while Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Crambidae) is considered important in maize crop in the Brazilian Central region. For the successful control of these pests using Bt plants as well as development of resistance management strategies, it is essential to know the larval stage movement of these insects. The study was carried out inside saran cages (3.00 x 3.00 x 1.80 m), in order to avoid natural infestation. Larvae were released in a plant located in the center of the cages. Larvae and injuries were observed in order to register the position in the plant and the location in the cage. Larvae of C. includens e H. armigera moved between soybean plants, whereas D. saccharalis practically remained in the plants where they were released. Thus, the adoption of non-Bt and genetically modified seed mixture for refuge establishment in Bt crops may be suitable only for D. saccharalis. 134533/2015-1

Resumo. A producao de inimigos naturais com qualidade comparavel aqueles encontrados na natureza e primordial para os sistemas de criacao de insetos em condicoes de laboratorio, que vise atender a programas de controle biologico. Dentre os indicadores de qualidade de parasitoides, a capacidade de voo e uma caracteristica importante a ser avaliada em laboratorio, pois esta relacionada a dispersao e alcance de abrigo, alimentos e hospedeiros em condicoes de campo. Palmistichus elaeisis Delvare & LaSalle e um endoparasitoide gregario, polifago, idiobionte que parasita pupas, principalmente da ordem Lepidoptera. O objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade da populacao do parasitoide P. elaeisis , criada em pupas Diatraea saccharalis (Fabricius) em laboratorio pelo teste de voo. Pupas de D. saccharalis com 24 horas de idade foram expostas ao parasitismo por femeas de P. elaeisis . Os adultos emergidos foram classificados de acordo com suas posicoes no interior da Unidade de teste em: voadores, caminhadores e nao voadores. A porcentagem dos parasitoides encontrados na tampa (voadores) foi de 51,23%, no anel (caminhadores) de 23,49% e no fundo (nao voadores) de 25,26%. Em razao aos percentuais de nao voadores observado para outras especies de parasitoides, o valor constatado para P. elaeisis pode significar uma queda na qualidade desse parasitoide, o que levaria a necessidade de introducao de novos individuos coletados em campo para recompor essa qualidade de voo. Flight Test as Evaluation Criteria of the Palmistichus elaeisis Delvare & LaSalle (Hymenoptera: Eulophidae) Quality Abstract. The production of natural enemies of comparable quality to those found in nature is essential to the creation of systems of insect in laboratory conditions, which object to meet biological control programs. Among the indicators of quality of parasitoids, flight capacity is an important factor to be evaluated in the laboratory feature, because it is related to the dispersion and range of shelter, food and hosts under field conditions. Palmistichus elaeisis Delvare & LaSalle is a gregarious endoparasitoid, polyphagous, idiobionte and parasite pupae, especially the Lepidoptera order. The objective of this study was to evaluate the quality of the parasitoid P. elaeisis population, created in pupae of Diatraea saccharalis (Fabricius) laboratory for the flight test. Pupae D. saccharalis with 24 hours of age were exposed to parasitism by females of P. elaeisis . The emerged adults were classified according to their positions within the unit test, flyers, running and not flying. The percentage of parasitoids found on the cover (flying) was 51.23%, the ring (running) of 23.49% and the bottom (non-flying) of 25.26%. Because the percentage of non-flying observed for other species of parasitoids, the value found for P. elaeisis could mean a drop in quality of the parasitoid, which would lead to the need to introduce new individuals collected in the field to restore this quality of flight.

Resumo. Durante o manejo da cultura da cana-de-acucar sao utilizados diversos produtos fitossanitarios que podem afetar o desempenho de parasitoides, inimigos naturais da broca-da-cana, Diatraea saccharalis (Fabricius) e consequentemente, o controle biologico da mesma. Assim, objetivou-se avaliar em laboratorio o efeito de herbicidas e reguladores de crescimento de plantas utilizados na cultura da cana-de-acucar, sobre a sobrevivencia, e parasitismo de adultos do parasitoide de ovos Trichogramma galloi Zucchi , assim como sobre a emergencia do parasitoide (F1). Os produtos testados foram: Clomazone, Diuron + Hexazinone (herbicidas); Sulfometuron-methyl e Trinexapac-ethyl (reguladores de crescimento de plantas) nas maiores doses recomendadas a cultura. Ovos de D. saccharalis foram imersos durante 5 segundos em uma das caldas quimicas e, apos secos por 1 hora, oferecidos as femeas de T. galloi, totalizando 20 repeticoes . Avaliou-se a mortalidade e o numero de ovos parasitados pela geracao F0, assim como, a emergencia da geracao F1 de T. galloi , sendo os produtos classificados quanto a toxicidade, conforme percentual de reducao da sobrevivencia, parasitismo e emergencia do parasitoide. Em relacao a sobrevivencia de T. galloi , numero de ovos parasitados pela F0 e a emergencia da F1, Clomazone e Trinexapac-ethyl foram classificados como levemente prejudicais. Diuron + Hexazinone e Sulfometuron-methyl foram inocuos em todos os parâmetros avaliados, com excecao do parasitismo, onde Diuron + Hexazinone foi classificado como levemente prejudicial. Conclui-se que, Clomazone, Diuron + Hexazinone, Trinexapac-ethyl e Sulfometuron-methyl sao inocuos ou levemente prejudiciais a sobrevivencia e parasitismo (F0) de adultos de T. galloi , e a emergencia (F1) desse parasitoide, em laboratorio. Herbicides and Plant Growth Regulators Used in SUGARCANE and their Action on Adult Trichogramma galloi Zucchi (Hymenoptera: Trichogrammatidae) Abstract. During crop sugarcane management, several used pesticides can affect the performance of parasitoids, natural enemies of sugarcane borer, Diatraea saccharallis (Fabricius) and consequently the biological control ofit . Thus, the objective was to evaluate in laboratory the effect of herbicides and plant growth regulators used in the sugarcane crops on survival and parasitism in adults of the eggs parasitoids, Trichogramma galloi Zucchi. The products tested were the herbicides Clomazone and Diuron + Hexazinone, and the plant regulators Sulfometuron-methyl and Trinexapac-ethyl, all in the higher recommended dosages for sugarcane. The eggs of D. saccharalis were immersed during 5 seconds in chemical solutions and, after dry for 1 hour, offered to T . galloi females with 20 repetitions. We evaluated the mortality and number of eggs parasitized by the F0 generation of T. galloi , as well as the emergence of the F1. The products were classified by their toxicity, according to the percentage of reduction in the survival, parasitism and emergence of the parasitoid. In relation to the survival of adult T. galloi , the number of eggs parasitized by F0 as well as the percentage of F1 emergence, clomazone and trinexapac-ethyl were classified as slightly harmful. Diuron+hexazinone and sulfometuron-methyl were harmless in all parameters, except for parasitism, where diuron+hexazinone was classified as slightly harmful. We conclude that clomazone, diuron+hexazinone, trinexapac-ethyl and sulfometuron-methyl, are harmless or slightly harmful the survival and parasitism (F0) of T. galloi adults and emergence (F1) of this parasitoid in the laboratory.

Dissertação (Mestrado em Entomologia) - Programa de Pós-Graduação em Entomologia, Instituto de Biologia, Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, 2016. Orientador: Dori Edson Nava, Co-orientadores: Ana Paula Schneid Afonso da Rosa, Gabriela Inés Diez-Rodríguez.

In the current agriculture is essential to adopt management strategies, low environmental impact. In this context, the environment comprising plant roots is of utmost importance, since they are in constant contact with microorganisms such as growth promoting rhizobacteria (RPCPs), known to affect the metabolism and resistance of plants, may help them dealing with biotic and abiotic stresses via promotion of growth, induced resistance, production of phytohormones compounds, volatile organic compounds (VOCs) and ability to fix nitrogen. Studies of associative rhizobacteria led to discovery of Azospirillum genus isolated in grasses and cereals grown in several countries of tropical and temperate. Regarding endophytic microorganisms G. diazotrophicus is a Gram-negative bacteria, obligatory aerobic and non-spore forming isolated initially from sugar cane in Brazil. This study was based on the assumption that the RPCPs can change the resistance of plants to insect herbivores, and to evaluate the influence of the joint action of two strains of RPCPs (Gluconacetobacter diazotrophicus and Azospirillum sp) in metabolome of plant cane -Sugar variety SP 79-1011 but also in plant defense mechanism herbivory by Diatraea saccharalis. The metabolites present in higher concentration both in inoculated plants as on control plants were identified by analysis metaolomica by the NMR technique. Compounds identified in higher concentration in inoculated plants were carbohydrates, aromatic compounds, amino acids and organic acids. In control plants and amino compounds were inetrmediarios Krebs cycle. Changes in the volatile organic compounds VOCs profile were identified by gas chromatography coupled to mass spectrometry. Qualitative and quantitative changes have occurred in the overall volatile profile emitted by plants inoculated as compared to the profile of volatile issued by the control plants, which could be contributing to preference Diatraea saccharalis the control plants from the plants inoculated in bioassay chance choice. VOCs present changes in the profile of infested plants with Diatraea saccharalis. Bioassay no choice there was no significant difference in saccharalis Diatraea weight gain fed control or inoculated plants. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Na agricultura atual é essencial a adoção de estratégias de manejo, de baixo impacto ambiental. Nesse contexto o ambiente que engloba as raízes das plantas é de extrema importância, uma vez que ela está em constante contato com microrganismos tais como rizobactérias promotoras do crescimento (RPCPs), conhecidos por afetar o metabolismo e a resistência das plantas, podendo ajuda-las a lidar com estresses bióticos e abióticos via promoção de crescimento, resistência induzida, produção de compostos fitohormonios, compostos orgânicos voláteis (COVs) e capacidade de fixar nitrogênio. Estudos com as rizobactérias associativas levaram a descoberta do gênero Azospirillum, isolado em gramíneas forrageiras e cereais cultivados em diversos países de clima tropical e temperado. Em relação aos microrganismos endofíticos G. diazotrophicus é uma bactéria Gram-negativa, aeróbica obrigatória e não-formadora de esporos isolada inicialmente a partir de cana-de-açúcar no Brasil. O presente estudo foi embasado na hipótese de que as RPCPs podem alterar a resistência de plantas a insetos herbívoros, tendo como objetivo avaliar a influencia da ação conjunta de duas estirpes de RPCPs (Gluconacetobacter diazotrophicus e Azospirillum sp) no metaboloma de plantas de cana-de-açúcar da variedade SP 79-1011 como também nos mecanismo de defesa da planta a herbivoria por Diatraea saccharalis. Os metabólitos presentes em maior concentração tanto em plantas inoculadas quanto em plantas do controle foram identificados por análise metaolômica pela técnica de RMN. Os compostos identificados em maior concentração nas plantas inoculadas foram carboidratos, compostos aromáticos, aminoácidos e ácidos orgânicos. Nas plantas do controle os compostos foram aminoácido e inetrmediários do ciclo de Krebs. Alterações no perfil de compostos orgânicos voláteis COVs foram identificados por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas. Alterações qualitativas e quantitativas ocorreram no perfil geral de voláteis emitidos pelas plantas inoculadas quando comparado ao perfil de voláteis emitido pelas plantas do controle, fato que poderia estar contribuindo para preferência de Diatraea saccharalis pelas plantas do controle em relação as plantas inoculadas no bioensaio com chance de escolha. Ocorreu alteração no perfil de COVs de plantas infestadas com Diatraea saccharalis. No bioensaio sem chance de escolha não se observou diferença significativa no ganho de peso de Diatraea saccharalis alimentadas com plantas do controle ou inoculadas.

Made available in DSpace on 2015-10-21T13:12:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-01. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-22T09:52:07Z : No. of bitstreams: 1 WOS000353711000030.pdf: 507123 bytes, checksum: 32e16b2d59180173e5166b658aa45fdd (MD5) Visando melhorias qualitativas na criação de Cotesia flavipes (Cameron, 1891) (Hymenoptera: Braconidae) em laboratório foram realizados testes com alimentação de adultos antes do parasitismo em Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae), utilizando 14 dietas a base de sacarose, lêvedo e mel. Foram avaliados: adultos emergidos; razão sexual; porcentagem de emergência; peso das massas de pupas; e longevidade dos adultos nas gerações F1 e F2. O delineamento foi inteiramente casualizado, com 15 tratamentos e 5 repetições. As maiores médias de adultos emergidos foram 85 (5% sacarose) em F1 e 91 (5% sacarose + 2,5% lêvedo) em F2 e as menores 63,60 (5% mel + 2,5% lêvedo) em F1 e 66,80 (5% mel) em F2. As dietas que proporcionaram mais fêmeas foram 5% mel + 2,5% lêvedo (0,82) em F1 e 10% sacarose + 2,5% lêvedo (0,75) em F2, sendo menos para 10% sacarose + 2,5% lêvedo (0,60) em F1 e 2,5% mel (0,59) em F2. As maiores porcentagens de emergência foram 93,90% (2,5% sacarose + 2,5% lêvedo) em F1 e 93,89% (5% mel + 2,5% lêvedo) em F2 e as menores 81,71% (5% mel + 2,5% lêvedo) para F1 e 78,96% (5% mel) em F2. O mel (2,5%) levou a um maior peso de massas. A longevidade não diferiu significativamente para as dietas nas gerações F1 e F2. E as dietas contendo 5% ou 10% de sacarose ou mel proporcionaram, no geral, melhoria qualitativa no desenvolvimento de C. flavipes em criações massais. Aiming qualitative improvements in the mass rearing of Cotesia flavipes (Cameron, 1891) (Hymenoptera: Braconidae) in laboratory, tests were conducted with adults feed before parasitism on Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) larvae, using 14 artificial diets based on sucrose, brewer yeast and honey. The design was completely randomized with 15 treatments and five replications. The biological parameters evaluated in F1 and F2 generations were: number of adults emerged; sex ratio; adult emergence percentage; weight of pupae mass; and male and female longevity. The highest average of emerged adults were 85 in diet with sucrose 5% for F1 generation, and 91 in diet with sucrose 5% + yeast brewer 2,5% for F2; the smaller average of adult emergency were 63.60 in diet with honey 5% + yeast brewer 2.5 % for F1 generation and 66.80 in diet with honey 5% for F2. Diets that produced more females were honey 5% + yeast brewer 2.5%, showing the sex ratio of 0.82 for F1 generation, and sucrose 10% + 2.5% yeast brewer 2.5% (0.75) for F2, while sucrose 10% + yeast brewer 2.5% (0.60 for F1) and honey 2.5% (0.59) provided fewer females for F2 generation. The highest percentage of adult emergence were 93.90% with the diet containing sucrose 2.5% + yeast brewer 2.5%) and 93.89 % with honey 5% + yeast brewer 2.5%, and the lowest 81.71% (honey 5% + yeast brewer 2.5%) for F1 and 78.96 % (honey 5%) to F1 and F2, respectively. The diet with Mel 2.5% produced greater weight of pupae mass. The adult longevity did not differ significantly for all diets in F1 and F2 generations. Diets containing 5% or 10% of sucrose or honey provide, in general, improve the qualitative development of C. flavipes in mass rearing. FCAV UNESP, Lab Biol &Criacao Insetos, Dept Fitossanidade, BR-14884900 Jaboticabal, SP, Brazil FCAV UNESP, Lab Biol &Criacao Insetos, Dept Fitossanidade, BR-14884900 Jaboticabal, SP, Brazil

Diante da busca por abordagens mais sustentáveis para o controle de insetos, os inibidores de peptidases de plantas surgem como uma ferramenta promissora para a proteção de culturas via obtenção de plantas transgênicas. Efeitos nocivos da ingestão de inibidores de peptidases de soja (IPS) sobre o desenvolvimento de Diatraea saccharalis já foram reportados em trabalhos anteriores, entretanto, esses efeitos não foram estudados em nível molecular para essa espécie. Esse trabalho teve como objetivos identificar e analisar a expressão gênica e a atividade de serino peptidases intestinais de D. saccharalis em resposta à ingestão de um concentrado ativo de inibidores de peptidases de soja, relacionando essas informações com a presença ou não de algum mecanismo adaptativo desse inseto em resposta à ingestão desses inibidores. Para isso, foi obtido o transcriptoma intestinal de lagartas de D. saccharalis no quinto ínstar do desenvolvimento, submetidas à ingestão crônica de IPS. Em seguida foram identificadas as sequências correspondentes a serino peptidases do tipo tripsinas e quimotripsinas nesse transcriptoma, as quais foram utilizadas para o estudo da expressão gênica relativa por RT-PCR quantitativo, em resposta à ingestão aguda (por 24 e 48 horas) e crônica e de 0,5% (m/v) de um concentrado ativo de IPS por lagartas de D. saccharalis no terceiro e no quinto ínstares do desenvolvimento larval. As mesmas sequências foram utilizadas para a proposição de filogenias, sendo comparadas inclusive com sequências de serino peptidases de Spodoptera frugiperda identificadas em outro estudo paralelo. Ensaios de atividade tríptica e quimotríptica foram realizados utilizando substratos específicos (BApNA e SApNA) para determinar o efeito da ingestão de IPS sobre a atividade enzimática e finalmente, a integridade e a atividade inibitória do IPS foram analisadas após sua passagem pelo trato digestório das lagartas. Os resultados obtidos permitiram concluir que, nas condições experimentais empregadas nesse estudo, as lagartas de D. saccharalis não foram capazes de modular a expressão gênica das serino peptidases em resposta à ingestão crônica ou aguda de IPS. Os resultados de atividade tríptica e quimotríptica em função da ingestão de IPS podem sugerir um sinergismo na ação dessas enzimas em lagartas do quinto instar. Não foram detectadas diferenças na atividade de tripsinas e quimotripsinas em lagartas do terceiro ínstar em função da ingestão de IPS. A separação eletroforética das proteínas das fezes de lagartas permitiu a visualização de uma banda com massa molecular em torno de 20 kDa possivelmente correspondente ao inibidor do tipo Kunitz presente em soja que, juntamente com os dados de atividade antitríptica das fezes, indicam que D. saccharalis não é capaz de hidrolisar esse inibidor como um mecanismo de adaptação à sua presença na dieta. Given the importance of search for more sustainable approaches for pest control, plant peptidases inhibitors emerge as a promising tool for the protection of crops by obtaining transgenic plants. Harmful effects of soybean peptidases inhibitors (SPI) intake by Diatraea saccharalis on its development were already reported in previous studies, however, these effects have not been studied at the molecular level for this specie. This study aimed to identify and analyze the gene expression and the gut serine peptidases activity of D. saccharalis in response to the intake of an active extract of soybean peptidases inhibitors. These informations were related to the presence or absence of some adaptive mechanism of this insect in response to these inhibitors. The gut transcriptome of larvae of D. saccharalis in the fifth developmental instar was obtained, undergoing chronic intake of IPS. Then, sequences of serino peptidases like trypsin and chymotrypsin were identified and used for gene expression studies on a real-time PCR in response to acute (for 24 and 48 hours) and chronic intake of 0.5 % (w/v) of SPI active extract by larvae of D. saccharalis in the third and fifth instars of larval development. The same sequences were used to propose phylogenies, including comparisons with sequences of Spodoptera frugiperda serine peptidases identified in another parallel study. Tryptic and chymotryptic activity assays were performed using specific substrates (BApNA and SApNA) to determine the effect of the SPI intake on enzyme activity and finally, the integrity and the inhibitory activity of the SPI were analyzed after passing through the digestive tract of caterpillars. The results showed that under the experimental conditions employed in this study, the larvae of D. saccharalis were not able to modulate the gene expression of serine peptidases in response to acute or chronic SPI intake. The results of tryptic and chymotryptic activity due to the SPI intake can suggest a synergism in the action of these enzymes in larvae of the fifth developmental instar. SPI intake did not cause differences in enzymatic activity of third instar larvae. Electrophoretic separation of proteins from the feces of caterpillars enabled visualization of a band with a molecular mass around 20 kDa possibly corresponding to the Kunitz inhibitor present in soybean. The antitryptic activity of the feces indicates that D. saccharalis is not able to hydrolyze soybean peptidases inhibitor as a mechanism of adaptation to their presence in the diet.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-05-16T15:26:01Z No. of bitstreams: 1 RogerioHidalgoBarbosa.pdf: 1490738 bytes, checksum: ca173977f55d408f6ea2734191fa3e0c (MD5) Made available in DSpace on 2019-05-16T15:26:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RogerioHidalgoBarbosa.pdf: 1490738 bytes, checksum: ca173977f55d408f6ea2734191fa3e0c (MD5) Previous issue date: 2014-02-20 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O conhecimento do número de fêmeas parasitoides a serem liberadas no campo e a sua capacidade de dispersão pode aumentar o sucesso em programas de controle biológico aplicado. A broca da cana-de-açúcar é uma das pragas mais importantes da cana-deaçúcar no Brasil e seus inimigos naturais são responsáveis pela regulação populacional no campo. O objetivo desse trabalho foi estimar o número de fêmeas do parasitoide Tetrastischus howardi (Hymenoptera: Eulophidae) por pupa de Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae) e sua capacidade de dispersão na cultura da cana-de-açúcar. Pupas de D. saccharalis foram introduzidas em internódios de colmos de cana-deaçúcar e distribuídas na cultura da cana-de-açúcar. Fêmeas de T. howardi foram liberadas no ponto central das parcelas, exceto na testemunha, e as pupas de D. saccharalis recolhidas após 96 horas. A maior porcentagem de parasitismo (46,39%) foi constatada ao se utilizar 102 fêmeas de T. howardi por pupa de D. saccharalis. Fêmeas de T. howardi encontraram e parasitaram pupas de D. saccharalis até 20 metros do ponto de liberação. A distância média de dispersão na cultura da cana-de-açúcar foi de 7,64 m, sendo a área de dispersão de 80,07 m2. Inicialmente, liberações de T. howardi devem ser realizadas em 125 pontos por hectare para que haja uma distribuição mais próxima da homogênea na cultura da cana-de-açúcar com até sete meses de brotação visando o controle biológico de D. saccharalis. The knowledge of the number of parasitoids to be released in the field and their dispersal capacity can increase the chances of success in the biological control programs. The borer sugarcane is one of the most important pests of sugarcane in Brazil and their natural enemies are responsible for population regulation in the field. The aim of this study was to estimate the number of female parasitoid Tetrastischus howardi (Hymenoptera: Eulophidae) per pupa of Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae) and its ability to spread the sugarcane culture. Pupae of D. saccharalis were introduced in internodes of stalks and spread the sugarcane culture. Females of T. howardi were released at the midpoint of the plot, except to the witness, and pupae of D. saccharalis collected after 96 hours. The highest percentage of parasitism (46.39%) was observed when using 102 females of T. howardi per pupa of D. saccharalis. Females of T. howardi found and parasitized pupae of D. saccharalis up to 20 meters from the release point. The average dispersal distance in the canesugar culture was 7.64 m, with an area of 80.07 m2 dispersion. Initially, releases of T. howardi should be performed at 125 points per hectare so that a homogeneous distribution closer to the culture of sugarcane with up to seven months of sprouting from biological control of D. saccharalis.

The increasing global demand for renewable energy to replace fossil fuels has given great emphasis on sugar cane (Saccharum spp) As this has been considered as the most efficient crop for energy production. Brazil is the largest producer of sugar cane with a production of 652.02 million tonnes in the 2013/2014 season, in an area of 8.1 million hectares. One major barrier to the production of sugar cane is still the attack of pests and diseases. It is estimated that about 10 % of the crop losses to be caused by insects, and the bit of sugar cane (Diatraea saccharalis) the most important. Plants, during evolution, to reduce the damage caused by the attack of insects, have developed a number of defense mechanisms, among them physical, toxic metabolites and volatile metabolites. Many studies have been developed to decipher the mechanisms of defense sugar cane to attack by herbivorous insects in an attempt to support breeding and biotechnology information programs for the development of more resistant plants, but many of these mechanisms still remain to be clarified. This project aimed to evaluate the response of sugar cane in herbivory by Diatraea saccharalis identifying volatile organic compounds, secondary metabolites and proteins produced during the response to the attack. We investigated the possible sequence of a terpene synthase, and Benzoxazinoides (Bx) sugar cane genes and the expression of these genes in the infected plants. Our results show that sugar cane has a systemic response when attacked by the larva Diatraea saccharalis producing β - caryophyllene volatile compound with increased expression of TPs cane putative gene, hydroxamic acid DIMBOA in roots increased with the expression of genes involved in the biosynthesis and defense-related proteins in attempts to inhibit the attack of the larvae and preserve the plant. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A crescente demanda mundial para a produção de energias renováveis em substituição aos combustíveis fósseis tem dado grande destaque à cana-de-açúcar (Saccharum sp.), pois esta tem sido considerada como a cultura mais eficiente para a produção de energia. O Brasil é o maior produtor mundial de cana-de-açúcar com uma produção de 652,02 milhões de toneladas na safra 2013/2014, em uma área de 8,1 milhões de hectares. Um dos grandes entraves à produção de cana-de-açúcar ainda é o ataque de pragas e doenças. Estima-se que cerca de 10% das perdas para esta cultura sejam ocasionadas por insetos, sendo a broca da cana-de-açúcar (Diatraea saccharalis) a mais importante. As plantas, durante a evolução, para reduzir os danos causados pelo ataque dos insetos, têm desenvolvido uma série de mecanismos de defesa, dentre eles, barreiras físicas, metabólitos tóxicos e metabólitos voláteis sinalizadores. Muitos trabalhos têm sido desenvolvidos para decifrar os mecanismos de defesa da cana-de-açúcar ao ataque de insetos herbívoros, na tentativa de subsidiar programas de melhoramento genético e a biotecnologia de informação para o desenvolvimento de plantas mais resistentes, mas, muito destes mecanismos ainda permanecem a ser esclarecidos. Este projeto se propôs a avaliar a resposta da cana-de-açúcar na herbivoria por Diatraea sccharalis através da identificação de importantes compostos orgânicos voláteis, metabólitos secundários e proteínas produzidas durante o processo de resposta ao ataque. Investigamos a sequência de uma possível terpeno sintase, bem como genes Benzoxazinoides (Bx) de cana de açúcar e a expressão destes genes nas plantas infestadas. Nossos resultados mostram que a cana-de-açúcar apresenta uma resposta sistêmica quando atacada pela larva de Diatraea saccharalis produzindo o composto volátil β-cariofileno, com aumento da expressão do gene putativo TPs de cana, o aumento ácido hidroxâmico DIMBOA nas raízes junto com o aumento da expressão dos genes envolvidos na sua biossíntese e proteínas relacionadas a defesa na tentativas de inibir o ataque da larva e preservar a planta.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-04-02T13:08:23Z No. of bitstreams: 1 DanielePerassaCosta.pdf: 1817640 bytes, checksum: 8fe8589f7295535acb008133829d7dc4 (MD5) Made available in DSpace on 2019-04-02T13:08:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DanielePerassaCosta.pdf: 1817640 bytes, checksum: 8fe8589f7295535acb008133829d7dc4 (MD5) Previous issue date: 2013-08-20 Fundação de Apoio ao Desenvolvimento do Ensino, Ciência e Tecnologia do Estado de Mato Grosso do Sul (FUNDECT) Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera: Braconidae) é um endoparasitoide larval eficiente no controle da broca-da-cana Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Crambidae) e Tetrastichus howardi (Olliff) (Hymenoptera: Eulophidae) é um endoparasitoide larval e pupal com potencial para ser utilizado no controle de lepidópteros-praga. O objetivo geral foi comparar aspectos biológicos reprodutivos de T. howardi e C. flavipes multiplicados em lagartas e pupas de D.saccharalis e as habilidades para localizar e parasitar lagartas desse lepidóptero em colmos de cana-de-açúcar em laboratório e campo. Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Entomologia/Controle Biológico (LECOBIOL) da Faculdade de Ciências Agrárias, Universidade Federal da Grande Dourados, e na área experimental da Usina Monteverde Agro-Energética S/A em Dourados, Mato Grosso do Sul, Brasil. No capítulo I, foi avaliado o desenvolvimento de T. howardi e C. flavipes em lagartas de D. saccharalis expostas a diferentes densidades e períodos de parasitismo. No capítulo II, verificou-se o desenvolvimento de T. howardi em pupas de D. saccharalis expostas a diferentes densidades e períodos de parasitismo. E no capítulo III, analisou-se a eficiência de T. howardi e C. flavipes para localizar e parasitar lagartas de D. saccharalis em cana-de-açúcar. Concluiu-se de maneira geral, que os parasitoides T. howardi e C. flavipes parasitaram lagartas de terceiro ínstar D. saccharalis em todas as combinações de densidades de fêmeas (uma e três) e períodos de parasitismo (0,016; 0,5; 1; 12; 24; 48; 72 e 96 horas). A maior taxa de emergência da progênie de T. howardi foi proveniente do aumento do período de parasitismo. O número de descendentes de C. flavipes por lagarta de terceiro ínstar de D. saccharalis decresceu com o aumento do período de parasitismo e o inverso foi observado para o parasitoide T. howardi. Três fêmeas de T. howardi com 96 horas de parasitismo e três de C. flavipes com trinta minutos de parasitismo em lagartas de terceiro ínstar de D. saccharalis foram as combinações mais apropriadas para multiplicação desses parasitoides por proporcionar o maior número de descendentes por fêmea parasitoide. O parasitoide T. howardi parasitou e se desenvolveu em pupas de D. saccharalis em todas as combinações de densidades de fêmeas (uma, três e sete) e períodos de parasitismo (24, 48 e 72 horas). A produção de descendentes de T. howardi foi proporcional ao aumento da densidade (uma, três e sete) de fêmeas parasitoides. O número de fêmea produzida por fêmea de T. howardi por pupa de D. saccharalis foi inversamente proporcional ao aumento da densidade de fêmeas. Sete fêmeas de T. howardi com 24 horas de parasitismo em pupas de D. saccharalis foi a combinação mais apropriada para multiplicação desse parasitoide por proporcionar o maior número de descendentes por fêmea parasitoide. Os parasitoides C. flavipes e T. howardi localizaram e parasitaram lagartas de terceiro ínstar de D. saccharalis em internódios de cana-de-açúcar em condições de laboratório e campo. Atributos como a longevidade, razão sexual aliada à capacidade de parasitar duas fases do hospedeiro (lagartas e pupas) e a facilidade de multiplicação em grandes quantidades são peculiaridades do parasitoide T. howardi, que o capacita e justificam a possibilidade de ser associado com C. flavipes em programas de controle biológico de D. saccharalis. Cotesia flavipes (Cameron) (Hymenoptera: Braconidae) is a larval endoparasitoid effective in control of sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabricius) (Lepidoptera: Crambidae) and Tetrastichus howardi (Olliff) (Hymenoptera: Eulophidae) is a larval and pupal endoparasitoid with the potential to be used to control lepidopteran pests. The general objective was to compare the biological reproductive T. howardi and C. flavipes multiplied in larvae and pupae D. saccharalis and ability to locate and parasitize caterpillars of this insect in the internode of sugarcane in the laboratory and field. The experiments were conducted at the Laboratory of Entomology/Biological Control (LECOBIOL ), Faculty of Agricultural Sciences, Federal University of Grande Dourados, and in the experimental area of Monteverde Factory Agro-Energética S/A in Dourados, Mato Grosso do Sul , Brazil. In Chapter I, we evaluated the development of T. howardi and C. flavipes in larvae of D. saccharalis exposed to different densities and periods of parasitism. In Chapter II, there was the development of T. howardi in pupae of D. saccharalis exposed to different densities and periods of parasitism. And in Chapter III, we analyzed the efficiency of T. howardi and C. flavipes to locate and parasitize larvae of D. saccharalis in sugarcane. Concluded generally that the parasitoids T. howardi and C. flavipes parasitized third instar D. saccharalis all combinations of densities of females (one and three) and periods of parasitism ( 0.016, 0.5, 1 , 12, 24 , 48, 72 and 96 hours). The highest rate of emergence of progeny of T. howardi was from the increase of the period of parasitism. The number of descendants of C. flavipes by third instar caterpillar of D. saccharalis decreased with the increase of the period of parasitism and the reverse was observed for the parasitoid T. howardi. Three females of T. howardi within 96 hours of parasitism and three C. flavipes with thirty minutes of parasitism in third instar larvae of D. saccharalis combinations are most appropriate for multiplication by these parasitoids provide the more number of descendent per female parasitoid. The parasitoid T. howardi parasitized and developed into pupae of D. saccharalis all combinations of densities of females (one, three and seven) and periods of parasitism (24, 48, and 72 hours). The production of descendent T. howardi was proportional to the density increase (one, three and seven) parasitoid females. The number of female produced by female T. howardi per pupa of D. saccharalis was inversely proportional to the density increase females. Seven females of T. howardi with 24 hours of parasitism in pupae of D. saccharalis was the combination most appropriate for multiplication of this parasitoid for providing the more number of descendent per female parasitoid. The parasitoid C. flavipes and T. howardi located and parasitized third instar D. saccharalis in internodes of sugarcane in the laboratory and fiel. Attributes such as longevity, sex ratio coupled with the ability to parasitize host two stages (larvae and pupae) and ease of multiplication in large quantities are peculiarities of parasitoid T. howardi that enable and justify the possibility of being associated with C. flavipes in biological control programs of D. saccharalis.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-04-02T13:10:13Z No. of bitstreams: 1 ElizangelaLeiteVargas.pdf: 3354431 bytes, checksum: 007b82ac2fd8099ac69f037e06957296 (MD5) Made available in DSpace on 2019-04-02T13:10:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ElizangelaLeiteVargas.pdf: 3354431 bytes, checksum: 007b82ac2fd8099ac69f037e06957296 (MD5) Previous issue date: 2013-08-19 Fundação de Apoio ao Desenvolvimento do Ensino, Ciência e Tecnologia do Estado de Mato Grosso do Sul (FUNDECT) Tetrastichus howardi (Olliff, 1893) (Hymenoptera: Eulophidae) é um endoparasitoide gregário e polífago, que foi coletado em plantio de cana-de-açúcar em Dourados-MS, parasitando pupas de Diatraea sp. (Lepidoptera: Crambidae) e criado no Laboratório de Entomologia/Controle Biológico da Faculdade de Ciências Agrárias, da Universidade Federal da Grande Dourados, em Dourados - Mato Grosso do Sul, Brasil, visando a realização de estudos sobre o seu potencial para controlar a broca-da-cana, Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae). Como o sucesso dos programas de controle biológico com parasitoides depende do conhecimento da interação desses inimigos naturais com seus hospedeiros e do desenvolvimento de técnicas de criações massais desses insetos, o objetivo geral deste trabalho foi avaliar o parasitismo e o desenvolvimento de T. howardi criado em lagarta e pupa de D. saccharalis. Para isso, foram desenvolvidos os seguintes trabalhos: Registro de T. howardi parasitando Diatraea sp. em cultura de cana-de-açúcar no Brasil. Multiplicação de T. howardi por sucessivas gerações em pupas de D. saccharalis. Reprodução de T. howardi em pupa de D. saccharalis: relação de diferentes densidades do parasitoide e do hospedeiro. Parasitismo e desenvolvimento de T. howardi em lagartas de D. saccharalis. De maneira geral, além de parasitar pupas, T. howardi parasitou lagartas de D. saccharalis em laboratório. A multiplicação de T. howardi em pupas de D. saccharalis por 25 gerações sucessivas não compromete a qualidade biológica do parasitoide. A densidade de até 14 fêmeas de T. howardi por pupa de D. saccharalis é a mais efetiva para proporcionar aumento da progênie sem perder características biológicas essenciais numa criação de laboratorio. Uma fêmea de T. howardi parasita até sete pupas de D. saccharalis. T. howardi é capaz de completar seu ciclo e emergir de adultos de D. saccharalis. Além disso, T. howardi parasitou lagartas de segundo, terceiro, quarto e quinto ínstares de D. saccharalis. O terceiro ínstar de D. saccharalis é o mais indicado para utilização em criações de T. howardi. Essas informações são importantes por contribuirem para a otimização da multiplicação de T. howardi em laboratório, visando o controle biológico de D. saccharalis com este inimigo natural em campo. Tetrastichus howardi (Olliff, 1893) (Hymenoptera: Eulophidae) is a gregarious endoparasitoid and polyphagous, was collected in sugarcane crop in Dourados-MS parasitizing pupae of Diatraea sp. (Lepidoptera: Crambidae) and is being created in the Laboratório de Entomologia/Controle Biológico at Faculdade de Ciências Agrárias, of Universidade Federal da Grande Dourados in Dourados - Mato Grosso do Sul, Brasil, aimed at studies on its potential to control the sugarcane borer, Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae). As the success of biological control programs with parasitoids depends on knowledge of the interaction of these natural enemies with their hosts, and the development of techniques for mass rearing of these insects, the aim of this study was to evaluate the parasitism and development of T. howardi in caterpillar and pupae of D. saccharalis. For this, we developed the following work: Record of T. howardi parasitizing Diatraea sp. in sugarcane crop in Brazil. Multiplication of T. howardi by successive generations in pupae of D. saccharalis. Reproduction of T. howardi in pupae of D. saccharalis: relationship of densities different of parasitoid and host. Parasitism and development of T. howardi in D. saccharalis caterpillar. In general, in addition to parasitize pupae, T. howardi parasite to caterpillar of D. saccharalis in the laboratory. The multiplication of T. howardi in pupae of D. saccharalis for 25 successive generations did not compromised the biological quality of the parasitoid. The density of up to 14 females of T. howardi per pupa of D. saccharalis is more effective to provide increased progeny without losing biological features essential in creating laboratory. A female T. howardi parasite up to seven pupae of D. saccharalis. T. howardi is able to complete its life cycle and emergence of adult D. saccharalis Also, T. howardi parasited caterpillar of second, third, fourth and fifth instars of D. saccharalis. The third instar of D. saccharalis is the most suitable for use in creations T. howardi. This information is important for contributing to the optimization of the multiplication of T. howardi in laboratory, aimed at biological control of D. saccharalis with this natural enemy in the field.

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:30:04Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:32:48Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-84880694997.pdf: 421926 bytes, checksum: 9040807b52d15383e781ab165808a3b6 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:30:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-31 O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da fertirrigação nitrogenada sobre os danos causados pelo complexo broca-podridão à produtividade e à qualidade da cana-de-açúcar. O experimento foi realizado em campo, em delineamento de blocos ao acaso, com quatro repetições e cinco doses de N (0, 50, 100, 150 e 200 kg ha-1), aplicadas por irrigação por gotejamento. Quantificaram-se as seguintes variáveis: número de orifícios causados por Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae); número de internódios infectados com a podridão-vermelha; percentagem de incidência de podridão-vermelha; produtividade de colmos; e teor de açúcar. Em laboratório, foram avaliados a atratividade e o consumo de fragmentos de colmos por lagartas de quarto instar, em testes com ou sem chance de escolha. A irrigação nitrogenada aumentou a incidência de D. saccharalis e de podridão-vermelha. O número de orifícios causados pelas lagartas correlacionou-se à ocorrência de podridão-vermelha. A percentagem de açúcar diminuiu com o aumento do número de internódios danificados pela podridão-vermelha. As doses de N não afetaram a atratividade dos fragmentos de colmos de cana-de-açúcar; no entanto, maiores doses de N fertilizante aumentaram o consumo destes fragmentos por lagartas de D. saccharalis. Apesar dos danos à qualidade, a adubação nitrogenada aumentou expressivamente a produtividade de colmos e de açúcar. The objective of this work was to evaluate the effect of nitrogen-fertigation on the damage caused by the borer-rot complex to the productivity and quality of fertigated sugarcane. The experiment was carried out in field, using a randomized complete block design, with four replicates and five N doses (0, 50 100, 150, and 200 kg ha-1) applied through drip irrigation. The following variables were determined: number of holes caused by Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae); number of internodes infected with red rot; incidence percentage of red rot; stalk productivity; and sugar content. In laboratory, the attractiveness and the consumption of culm fragments by fourth instar caterpillars, in trials with or without choice, were evaluated. Nitrogen fertigation increased the incidence of D. saccharalis and red rot. The number of holes produced by the larvae was correlated with the occurrence of red rot. Sugar percentage reduced with the increase in the number of red rot affected internodes. Nitrogen doses did not affect the attractiveness of sugarcane culm fragments; however, higher N doses increased the consumption of these fragments by D. saccharalis caterpillars. Despite the damages to quality, nitrogen fertilization expressively enhanced the productivity of stalks and sugar. Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agronômicas, Caixa Postal 237, CEP 18603-970 Botucatu, SP Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios Polo Centro-Oeste, Rodovia Deputado Leônidas Pacheco Ferreira (Jaú-Bariri), Km 304, Caixa Postal 66, CEP 17201-970 Jaú, SP Centro de Ciência e Tecnologia do Bioetanol Laboratório Nacional de Ciência e Tecnologia do Bioetanol Rua Giuseppe Maximo Scolfaro, no 10.000, Polo de Alta Tecnologia II, Caixa Postal 6.170, CEP 13083-970 Campinas, SP Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agronômicas, Caixa Postal 237, CEP 18603-970 Botucatu, SP

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-05-16T14:22:37Z No. of bitstreams: 1 FabianaGarciadeOliveira.pdf: 667875 bytes, checksum: 573efa7be9166b9a1e62cf240f0176b9 (MD5) Made available in DSpace on 2019-05-16T14:22:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FabianaGarciadeOliveira.pdf: 667875 bytes, checksum: 573efa7be9166b9a1e62cf240f0176b9 (MD5) Previous issue date: 2013-03-08 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Tetrastichus howardi Olliff, 1893 (Hymenoptera: Eulophidae) é um endoparasitoide pupal e larval, gregário e cosmopolita, principalmente de espécies de Lepidoptera que vem sendo estudado como agente potencial de controle biológico. O objetivo geral foi obter informações sobre a biologia e criação de T. howardi em pupa do hospedeiro alternativo Tenebrio molitor (Linnaeus, 1758) (Coleptera: Tenebrionidae) visando sua multiplicação em grande escala para ser utilizado em programas de controle biológico, especialmente para o controle de Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae). Para isso, os seguintes trabalhos foram desenvolvidos no Laboratório de Entomologia/Controle Biológico (LECOBIOL) da Faculdade de Ciências Agrárias, da Universidade Federal da Grande Dourados, em Dourados, Mato Grosso do Sul, Brasil. Reprodução de T. howardi em pupas de T. molitor em função da densidade do parasitoide. Neste trabalho, fêmeas de T. howardi foram expostas ao parasitismo de pupas de T. molitor, nas densidades 1:1, 7:1, 14:1, 21:1, 28:1 e 32:1, parasitoidehospedeiro, respectivamente. As densidades de 7, 14 e 21 fêmeas de T. howardi por pupa de T. molitor foram as mais adequadas para a criação desse parasitoide. Influência da idade de pupas de T.molitor na progênie de T. howardi. Para tanto, fêmeas de T. howardi, nas densidades de 7:1, parasitóide, hospedeiro, respectivamente, foram expostas ao parasitismo de pupas de T. molitor, nas idades de 12, 24, 48, 72, 96 e 120 horas. A idade de 24 horas foi a mais adequada para a criação de T. howardi. Desempenho reprodutivo de T. howardi no hospedeiro natural D. saccharalis após três gerações em hospedeiro alternativo T. molitor. Para a realização desse trabalho, dois grupos de T. howardi foram multiplicados, separadamente, por três gerações, um grupo no hospedeiro alternativo T. molitor e o outro no hospedeiro natural D. saccharalis. Na seqüência, 50 pupas de D. saccharalis foram expostas por 72 horas ao parasitismo de fêmeas de T. howardi, criado anteriormente em pupas de T. molitor e de D. saccharalis. A criação sucessiva por três gerações de T. howardi no hospedeiro alternativo não afetou o número de pupas parasitadas e de pupas com emergência de parasitoides no hospedeiro natural D. saccharalis e contribuiu para o aumento de progênie por pupa, com indivíduos maiores e maior longevidade de fêmeas e de machos. A razão sexual encontrada foi a mesma nas duas condições testadas. Concluiu-se, de maneira geral que T. howardi pode ser criado no hospedeiro alternativo T. molitor por três gerações, sem comprometer seu desempenho reprodutivo no hospedeiro natural D. saccharalis. Tetrastichus howardi (Olliff, 1893) (Hymenoptera: Eulophidae) is a pupal and larval endoparasitoid, gregarious and cosmopolitan, mainly of Lepidoptera species that has been studied as a potential biological control agent. The objective was to obtain information abought the biology and rearing of T. howardi pupa in the alternative host Tenebrio molitor (Linnaeus, 1758) (Coleptera: Tenebrionidae) aimed at multiplying its mass scale to be used in biological control programs, especially for control of Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) . For this, the following works have been developed in the Laboratory of Entomology / Biological Control (LECOBIOL), Faculty of Agricultural Sciences, Federal University of Grande Dourados in Dourados, Mato Grosso do Sul, Brazil. In the first study “Reproduction of T. howardi in pupae of T. molitor depending on the density of the parasitoid”. Female T. howardi were exposed to parasitism of pupae of T. molitor at densities 1:1, 7:1, 14:1, 21:1, 28:1 and 32:1, parasitoid-host, respectively. The densities of 7, 14 and 21 females of T. howardi by pupae of T. molitor were the most suitable for the creation of this parasitoid. Influence of age of pupae T.molitor progeny of T. howardi. Therefore, females of T. howardi at densities of 7:1, parasitoid host, respectively, were exposed to parasitism of pupae of T. molitor, at ages 12, 24, 48, 72, 96 and 120 hours. The age of 24 hours was more appropriate for rearing of T. howardi. Reproductive performance of T. howardi in the natural host D. saccharalis after three generations in alternative host T. molitor. To conduct this study, two groups of T. howardi were multiplied separately by three generations, a group on alternative host T. molitor and the other in the natural host D. saccharalis. Subsequently, 50 pupae of D. saccharalis were exposed for 72 hours to parasitism of females of T. howardi, rearing earlier in pupae of T. molitor and D. saccharalis. The rearing of three successive generations of T. howardi in alternative host did not affect the number of parasitized pupae and pupal parasitoids emergence of the natural host D. saccharalis and contributed to the increase of progeny per pupa, with larger longevity of females and males. The sex ratio found was the same in both conditions tested. It was concluded that in general T. howardi can be rearing in alternative host T. molitor for three generations, without compromising their reproductive performance in natural host D. saccharalis.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-28T12:13:06Z No. of bitstreams: 1 Liliane Marques da Silva.pdf: 566459 bytes, checksum: 54839b1e8470b48f9d90167ceb6a2716 (MD5) Made available in DSpace on 2016-11-28T12:13:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Liliane Marques da Silva.pdf: 566459 bytes, checksum: 54839b1e8470b48f9d90167ceb6a2716 (MD5) Previous issue date: 2013-02-04 Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq The bacterium Bacillus thuringiensis (Berliner) presents remarkable aspects for the control of insect pests, such as its mode of action, specificity and selectivity. Thus, this study aimed to evaluate the toxic activity of B. thuringiensis isolates in larvae of Diatraea saccharalis (Fabr.) and Diatraea flavipennella (Box) and determine the toxin gene contents for the very active isolates. The insects were maintained on artificial diet. Twenty four isolates were used, which were preserved in LB medium, 15% glycerol and 0.02% SDS and kept at -80 ° C. General and specific primers were used to survey for toxin genes. In pathogenicity tests with D. saccharalis and D. flavipennella, 16 and 18 isolates showed activity toward borers, respectively. The LC50 values among isolates for the population of D. saccharalis ranged from 0.08 x 105 (LIIT-0105) and 4104 x 105 (LIIT-2707) crystals + spores/mL. The isolated LIIT-0105 was 4,382 and 18.59 times more toxic than Btk and Btt, respectively. For D. flavipennella, the LC50 values between isolates ranged from 0.40 x 105 (LIIT-2707) and 542.75 x 105 (LIIT-2109) crystals + spores/mL. The isolate LIIT-2707 was 1,137 and 11.52 times more toxic than Btk and Btt, respectively. The isolate LIIT-0105 presented the lowest LC50 for D. saccharalis that harbored the genes cry1, cry2, cry8 cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1C, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1, cry2Ab2, cry9C. For the borer D. flavipennella, the isolated LIIT-2707 presented the lowest LC50 and the following genes cry1, cry2, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1 and cry2Ab2 were amplified. The results suggest that B. thuringiensis isolates present a great variability of genes for bioprospection, and thus potential for developing new products and insertion on plants to express Bt genes for the control of D. saccharalis and D. flavipennella. A bactéria Bacillus thuringiensis (Berliner) apresenta características essenciais no controle de insetos-praga, tais como seu modo de ação, especificidade e seletividade. Dessa forma, esta pesquisa objetivou avaliar a atividade tóxica de isolados de B. thuringiensis em larvas de Diatraea saccharalis (Fabr.) e Diatraea flavipennella (Box) e caracterizar quanto à presença de gene de toxinas os isolados tóxicos. Estas pragas foram mantidas em dieta artificial. Foram utilizados 24 isolados, preservados em meio LB, glicerol a 15% e SDS a 0,02% e mantidos a -80ºC. Para caracterização molecular foram utilizados iniciadores gerais e específicos. Nos testes de patogenicidade com D. saccharalis e D. flavipennella, 16 e 18 isolados mostraram-se ativos, respectivamente. Os valores de CL50 entre os isolados para a população de D. saccharalis variaram entre 0,08 x 105 (LIIT-0105) e 4104 x 105 (LIIT-2707) esporos + cristais/mL. O isolado LIIT-0105 foi 18,59 e 4382 vezes mais tóxico que o Btk e Btt, respectivamente. Para D. flavipennella, os valores de CL50 entre os isolados variaram entre 0,40 x 105 (LIIT-2707) e 542,75 x 105 (LIIT-2109) esporos + cristais/mL. O isolado LIIT-2707 foi 11,52 e 1137 vezes mais tóxico que o Btk e Btt, respectivamente. O isolado LIIT-0105 que teve a menor CL50 para D. saccharalis apresentou os genes cry1, cry2, cry8, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1C, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1, cry2Ab2 e cry9C e para D. flavipennella o isolado LIIT-2707 apresentou a menor CL50 amplificando para os genes cry1, cry2, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1 e cry2Ab2. Os resultados sugerem que isolados de B. thuringiensis apresentam grande potencial e variabilidade para bioprospecção desta bactéria, para o desenvolvimento de produtos ou transformação de plantas que expressem genes de Bt para o controle de D. saccharalis e D. flavipennella.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-05-13T16:32:12Z No. of bitstreams: 1 MarinadeResendeAntigo.pdf: 1109431 bytes, checksum: 071c09cdf5354f34ebb79b42ac536157 (MD5) Made available in DSpace on 2019-05-13T16:32:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarinadeResendeAntigo.pdf: 1109431 bytes, checksum: 071c09cdf5354f34ebb79b42ac536157 (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) No presente trabalho estudou-se a repelência e a toxicidade dos inseticidas clorantraniliprole (350g/kg), etiprole (200 g/l), tiametoxam (250 g/kg), triflumuron (480 g/l), lambda-cialotrina+tiametoxam (106 g/l + 141 g/l), fipronil (800 g/kg) e Metharizium anisopliae (50 g/kg); dos herbicidas clomazone (800 g/l) e diurom+hexazinona (488 g/kg + 142 g/kg) e dos reguladores de crescimento de plantas sulfometurom-metílico (750 g/kg) e trinexapaque-etílico (250 g/l) sobre adultos e imaturos de Trichogramma galloi, em ovos de Diatraea saccharalis. Os produtos avaliados estavam nas concentrações máximas indicadas para a cultura da cana-de-açúcar, seguindo metodologia recomendada pela “IOBC”. Para a avaliação da repelência dos produtos realizou-se teste com livre chance de escolha, onde 30 ovos de D. saccharalis foram imersos em água destilada e outros 30 no produto a ser testado. Essas massas de ovos foram transferidas para tubos de vidro distintos e os mesmos foram interligados por um conector de papel com um orifício central por onde um tubo menor com três fêmeas de T. galloi foi acoplado. Foram avaliados o parasitismo e a emergência do parasitoide, sendo considerada repelência quando na testemunha era encontrado um número médio de ovos parasitados maior que no produto. Para testar os efeitos dos produtos fitossanitários sobre os adultos de T. galloi, 60 ovos de D. saccharalis foram tratados por imersão nas caldas químicas e, após secos, oferecidos às fêmeas de T. galloi. Avaliou-se a mortalidade e o número de ovos parasitados da F0, e a emergência da F1. Os efeitos sobre a fase imatura de T. galloi foram avaliados através da imersão de ovos de D. saccharalis contendo o parasitoide nas fases de ovo-larva, pré-pupa e pupa, analisando-se os efeitos dos produtos sobre a emergência da F1 de T. galloi, assim como no número de ovos parasitados e na emergência da geração F2. Clorantraniliprole, triflumurom, fipronil e sulfometurom-metílico não repeliram T. galloi. Na avaliação da seletividade sobre adultos do parasitoide, clorantraniliprole, M. anisopliae, clomazone, diurom+hexazinona, trinexapaque-etílico e sulfometurom-metílico não afetaram a sobrevivência, número de ovos parasitados e a emergência de T. galloi. Já para as fases imaturas do parasitoide, observou-se que clomazone, diurom+hexazinona e sulfometurom-metílico não afetaram a f1 e a f2 de t. galloi, já clorantraniliprole, M. anisopliae, trinexapaque-etílico e etiprole não apresentaram efeito sobre a F1, mas reduziram o número de ovos parasitados pela F2. In this work, it was studied the repellency and toxicity of insecticides chlorantraniliprole (350g/kg), ethiprole (200 g/l), thiamethoxam (250 g/kg), triflumuron (480 g/l), lambda-cyhalothrin+thiamethoxam (106 g/l + 141 g/l), fipronil (800 g/kg) and Metarhizium anisopliae (50 g/kg); the herbicides chlomazone (800 g/l) and diuron+hexazinone (488 g/kg + 142 g/kg) and the plant growth regulators sulfometuron-methyl (750 g/kg) and trinexapac-ethyl (250 g/l), in adult and immature of Trichogramma galloi, in eggs of Diatraea saccharalis. The products evaluated were in the highest concentrations recommended for the cultivation of cane sugar, following the method recommended by the "IOBC". To evaluate the repellency of each product, testing was conducted with free-choice, where 30 eggs of D. saccharalis were immersed in distilled water and another 30 in the product to be tested. These egg masses were transferred to distinct glasses tube, which were connected by a roll of paper with a central hole through which a small tube with three females of T. galloi was engaged. Were evaluated the parasitism and the emergence of the parasitoid, it was considered repellency when in the witness was found a number of parasitized eggs greater than the products. To evaluate the effects of pesticides on the adult of T. galloi 60 eggs of D. saccharalis were treated by immersion in chemicals grout and after drying, offered to females of T. galloi. It was evaluated the mortality and the number of parasitized eggs of the F0 and F1 emergence. The effects on immature stage of T. galloi were evaluated by immersion of eggs of D. saccharalis containing the parasitoid on stages of egg-larva, pre-pupa and pupa, analyzing the effects on emergence of the F1 T. galloi, as well as the number of parasitized eggs and the emergence of the F2 generation. Chlorantraniliprole, triflumuron, fipronil and sulfometuron-methyl not repelled T. galloi. About the parasitoid adults, chlorantraniliprole, M. anisopliae, clomazone, diuron+hexazinone, trinexapac-ethyl and sulfometuron-methyl did not affect survival, number of parasitized eggs and the emergence of T. galloi. However, for the parasitoid immature stages, it was observed that clomazone, diuron+hexazinone and sulfometuron-methyl did not affect the F1 and F2 of T. galloi, for chlorantraniliprole, M. anisopliae, and etiprole trinexapac-ethyl it was not observed effect on the F1, however, reduced the number of eggs parasitized by F2.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-03-29T21:39:51Z No. of bitstreams: 1 DanieleFabianaGlaeser.pdf: 874052 bytes, checksum: 3bdf5e3f130c252fcba782817b4dd610 (MD5) Made available in DSpace on 2019-03-29T21:39:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DanieleFabianaGlaeser.pdf: 874052 bytes, checksum: 3bdf5e3f130c252fcba782817b4dd610 (MD5) Previous issue date: 2011-12-09 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Trichospilus diatraeae Cherian & Margabandhu, 1942 (Hymenoptera: Eulophidae) é um parasitoide pupal que apresenta potencial para o controle biológico de Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae).O objetivo geral foi avaliar características biológicas e comportamentais de T. diatraeae criado em pupa de D. saccharalis. Para isso, os seguintes trabalhos foram desenvolvidos no Laboratório de Entomologia/Controle Biológico da Faculdade de Ciências Agrárias, da Universidade Federal da Grande Dourados, em Dourados, Mato Grosso do Sul, Brasil. Desempenho reprodutivo de T. diatraeae no hospedeiro natural D. saccharalis após criado por sucessivas gerações no hospedeiro alternativo T. molitor (Linnaeus, 1758) (Coleoptera: Tenebrionidae). Desenvolvimento e progênie de T. diatraeae em função do peso de pupas de D. saccharalis. Comportamento e características biológicas de T. diatraeae em pupa de D. saccharalis de diferentes idades. Parasitismo de T. diatraeae com diferentes idades em pupa de D. saccharalis. Concluiu-se de maneira geral que T. diatraeae pode ser criado no hospedeiro alternativo T. molitor por três gerações, sem comprometer seu desempenho reprodutivo ao ser criado posteriormente no hospedeiro natural D. saccharalis. A progênie de T. diatraeae foi diretamente proporcional ao aumento do peso de pupas do hospedeiro D. saccharalis. O intervalo de peso de pupas de D. saccharalis entre 0,160g e 0,220g proporcionou a maior produção de descendentes de T. diatraeae. A longevidade de adultos de T. diatraeae reduziu para indivíduos emergidos de pupas com peso superior a 0,180 g. A idade do hospedeiro D. saccharalis não afeta o parasitismo de T. diatraeae, mas pupas com mais de 96 horas de idade podem prejudicar o desenvolvimento do parasitoide. Pupas de D. saccharalis com idades entre 24 e 72 horas de idade são mais adequadas para a criação do parasitoide T. diatraeae em laboratório. Fêmeas de T. diatraeae não discriminam para a oviposição, pupas de D. saccharalis com idades entre 24 e 120 horas com chance de escolha. Fêmeas de T. diatraeae com idades entre 24 horas e 120 horas parasitam pupas de D. sacharalis. O desenvolvimento de imaturos em pupas de D. saccharalis parasitadas por T. diatraeae com idades entre 96 e 120 horas pode ser prejudicado. Fêmeas de T. diatraeae com idades entre 48 e 72 horas apresentaram maior sucesso reprodutivo em pupas de D. saccharalis. As informações obtidas com estes trabalhos podem contribuir para o aprimoramento da técnica de criação de T. diatraeae, visando a obtenção desse parasitoide para a realização de estudos científicos ou para o estabelecimento de criações massais, caso o mesmo venha a ser utilizado em programas de controle biológico. Trichospilus diatraeae Cherian & Margabandhu, 1942 (Hymenoptera: Eulophidae) is a pupal parasitoid that has potential for biological control of Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae). The overall objective was to evaluate behavioral and biological characteristics of T. diatraeae reared in pupae of D. saccharalis. For this, the following works were developed out in Laboratório de Entomologia/Controle Biológico, at Faculdade de Ciências Agrárias, at Universidade Federal da Grande Dourados, in Dourados, Mato Grosso do Sul, Brazil. Reproductive performance of T. diatraeae the natural host D. saccharalis after reared by successive generations in the alternative host T. molitor. (Linnaeus, 1758) (Coleoptera: Tenebrionidae). Development and progeny of T. diatraeae a function of pupal weight of D. saccharalis. Behavior and biological characteristics of T. diatraeae in pupae of D. saccharalis of different ages. Parasitism of T. diatraeae with different ages at pupa of D. saccharalis. It was concluded that in general T. diatraeae can be reared in alternative host T. molitor for three generations, without compromising reproductive performance to be reared later in the natural host D. saccharalis. The progeny of T. diatraeae was directly proportional to the increase of the weight of pupae of the host D. saccharalis. The range of pupal weight of D. saccharalis between 0.160 g and 0.220 g with the highest increase of offspring of T. diatraeae. The adult longevity of T. diatraeae reduced for individuals emerged from pupae weighing more than 0.180 g. The age of the host D. saccharalis does not affect the parasitism of T. diatraeae but pupae with more than 96 hours old may hinder the development of the parasitoid. Pupae of D. saccharalis aged between 24 and 72 hours of age are most appropriate for setting up the parasitoid T. diatraeae laboratory. Females of T. diatraeae not discriminate for oviposition, pupae of D. saccharalis aged between 24 and 120 hours with possibility choice. Females aged between 24 and 120 hours parasitize pupae of D. sacharalis. The development of immature pupae D. saccharalis parasitized by T. diatraeae with 96 and 120 hours age may be impaired. Females of T. diatraeae aged between 48 and 72 hours had higher reproductive success in pupae of D. saccharalis. The information obtained from this work can contribute to the improvement of breeding technique of T. diatraeae order to obtain this parasitoid to conduct scientific studies or for the establishment of mass rearing, if it will be used in biological control programs.

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:26:12Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:47:26Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-84863915122.pdf: 230515 bytes, checksum: d535c32a43d45329e574886d3855eca3 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:26:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-01 Ceraeochrysa paraguaria do not has its life history well known, despite its description do not be recent. The present work aimed to evaluate morphometric aspects of C. paraguaria larvae were feeding on Diatraea saccharalis, Sitotroga cerealella e Anagasta kuehniella eggs with the objective to determine the mandibule length, head capsule length, torax + head length, and larvae weight. By the results it was possible to conclude: to the morphometrical parameters, only larvae weight was influenced by the food consumed by the predator, being the nymphal development shorter. Departamento de Fitossanidade Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, SP Departamento de Fitossanidade Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, SP

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:54:24Z No. of bitstreams: 1 S0006-87052011000300013.pdf: 616886 bytes, checksum: 08e0a2058a63e364fd4f83148aa8fb26 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:54:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0006-87052011000300013.pdf: 616886 bytes, checksum: 08e0a2058a63e364fd4f83148aa8fb26 (MD5) Previous issue date: 2011-01-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T17:51:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0006-87052011000300013.pdf: 616886 bytes, checksum: 08e0a2058a63e364fd4f83148aa8fb26 (MD5) S0006-87052011000300013.pdf.txt: 34701 bytes, checksum: a4a3c3558115ceb5f541171d0fceb060 (MD5) Previous issue date: 2011-01-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:13:47Z No. of bitstreams: 2 S0006-87052011000300013.pdf: 616886 bytes, checksum: 08e0a2058a63e364fd4f83148aa8fb26 (MD5) S0006-87052011000300013.pdf.txt: 34701 bytes, checksum: a4a3c3558115ceb5f541171d0fceb060 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:13:47Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0006-87052011000300013.pdf: 616886 bytes, checksum: 08e0a2058a63e364fd4f83148aa8fb26 (MD5) S0006-87052011000300013.pdf.txt: 34701 bytes, checksum: a4a3c3558115ceb5f541171d0fceb060 (MD5) Previous issue date: 2011-01-01 A broca Diatraea saccharalis é uma das mais importantes pragas da cana-de-açúcar no Brasil. O manejo de áreas infestadas está embasado no controle biológico com Cotesia flavipes, cujas liberações são feitas em função da população de lagartas da praga em campo. Por esta razão, a estimativa desta população é de fundamental importância para o sucesso do programa de manejo. Assim, o objetivo do presente trabalho foi estudar a variabilidade espacial de D. saccharalis em canaviais e sugerir um método de amostragem que permitisse uma estimativa adequada das populações em campo. Seis campos de aproximadamente 1 ha cada um foram amostrados, em grid retangular de aproximadamente 10 x 10 m, com ilhas. Cada ponto de amostragem foi representado pela coleta das formas biológicas da praga no interior dos colmos em 2 m de sulco. Na maioria das áreas, as populações de formas imaturas de D. saccharalis distribuíram-se de forma contagiosa, com alcance do semivariograma variando de 18 a 80 m. Com base no alcance médio, estimou-se em seis o número médio de pontos de amostragem por hectare que deveriam ser feitos para representar adequadamente a área. Este número foi menor do que o estimado utilizando parâmetros da estatística clássica. Sugere-se que, para estimativa das formas imaturas de D. saccharalis em canaviais, a amostragem seja feita em grid de 40 x 40 m, o que resulta em aproximadamente seis pontos de amostragem por hectare e permitirá, na maioria das áreas, efetuar levantamentos com independência e coeficientes de variação menores que 50%. The sugarcane borer Diatraea saccharalis Fabr. (Lepidoptera: Crambidae) is one of the most important pests of sugarcane in Brazil. The management of infested area is based on biological control with Cotesia flavipes, whose releases are made according to the pest population in field. Therefore, the evaluation of D. saccharalis population is important for the success of management program. The objective of this work was to study the spatial variability of D. saccharalis in sugarcane and suggesting a sampling method that allows an adequate evaluation of the population in the field. Six fields with areas of 1 ha were sampled, within a grid measuring about 10 × 10 m, with islands. Each sample point was represented by collecting biological forms of the pest in the stalks, considering 2 m of furrow. In most areas, D. saccaralis has aggregated spatial distribution and the values of range in semivariogram varied from 18 to 80 m. Based on average range, it was estimated in six the number of samples per hectare to evaluate the population in a given area. This number was smaller than that estimated using classical statistical parameters. According to the results, to obtain a reliable evaluation of the population of D. saccharalis immature forms in sugarcane fields, samples should be collected 40 m apart, meaning about 6 sampling points per hectare. This method allows independent samplings, with coefficients of variation less than 50% in most areas. UNESP Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Departamento de Ciências Exatas UNESP Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias Departamento de Ciências Exatas

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-05-13T14:08:12Z No. of bitstreams: 1 RobertoAugustoChichera.pdf: 331793 bytes, checksum: 59f033095f9f9a49abd4b27beceb6610 (MD5) Made available in DSpace on 2019-05-13T14:08:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RobertoAugustoChichera.pdf: 331793 bytes, checksum: 59f033095f9f9a49abd4b27beceb6610 (MD5) Previous issue date: 2011-03-08 Conselho Nacional de Pesquisas (CNPq) O conhecimento de aspectos biológicos e comportamentais constitui informação básica para realizar estudos como a seleção de espécies parasitoides com potencial para o controle de pragas. O objetivo do trabalho foi comparar os aspectos biológicos reprodutivos de T. diatraeae e P. elaeisis criados em pupa de D. saccharalis e as habilidades para localizar e parasitar pupas dessa praga no interior de colmos de cana-de-açúcar. Trinta e seis pupas de D. saccharalis foram individualizadas em tubos de vidro (2,5 x 8,5 cm) e distribuídas em três tratamentos representados pela exposição aos parasitoides por uma fêmea de P. elaeisis ou uma fêmea de T. diatraeae ou ainda a uma fêmea de P. elaeisis + uma fêmea de T. diatraeae. Após 24 horas os parasitoides foram retirados dos tubos e as pupas hospedeiras mantidas a 25°C, 70% de umidade relativa e 14 horas de fotoperíodo até a emergência dos parasitoides. A maior taxa de parasitismo e de emergência foi para P. elaeisis. Quando essas duas espécies foram colocadas juntas para parasitar a pupa, verificou-se a emergência apenas de P. elaeisis, sendo considerada a espécie dominante em parasitar pupas de D. saccharalis no interior de tubos de vidro. Para analisar a habilidade de busca e parasitismo foram utilizados setenta e cinco colmos de cana-de-açúcar de 10 a 15 cm e feito um orifício em cada colmo, na qual foi introduzida uma pupa de D. saccharalis com 24 horas de idade. Após a fixação das pupas, cada colmo foi inserido dentro de garrafas plásticas transparentes. Nessas garrafas foram liberadas 21 fêmeas de P. elaeisis ou 21 fêmeas de T. diatraeae ou ainda, 21 fêmeas de P. elaeisis + 21 fêmeas de T. diatraeae representando os tratamentos. Após 72 horas as pupas foram retiradas do interior dos colmos, individualizadas em tubos de vidro a 25°C, 70% de umidade relativa e 14 horas de fotoperíodo até a emergência dos parasitoides. A maior taxa de parasitismo e de emergência foi para T. diatraeae e não houve emergência de P. elaeisis. Não foi constatado parasitismo quando os parasitoides foram liberados juntos. Trichospilus diatraeae apresentou maior eficiência em parasitar e se desenvolver em pupas de D. saccharalis inseridas no interior de colmos de cana-de-açúcar. Knowledge of biological and behavioral aspects constitute basic information for studies such as the selection of parasitoid species with potential for pest control. The objective was to compare the biological aspects of reproductive T. diatraeae and P. elaeisis reared on pupae of D. saccharalis and skills to locate and parasitize pest pupae inside stems of cane sugar. Thirty-six pupae of D. saccharalis were individualized in glass tubes (2.5 x 8.5 cm) and distributed in three treatments represented by exposure to parasitoids by a female of P. elaeisis or a female of T. diatraeae or a female of P. elaeisis + one female of T. diatraeae. After 24 h the parasitoids were removed from the tubes and pupae kept at 25 ° C, 70% relative humidity and 14 h photoperiod until emergence of parasitoids. The highest rate of parasitism and emergence was for P. elaeisis. When these two species were put together to parasitize the pupae, there was only the emergence of P. elaeisis, considered the dominant species parasitize pupae of D. saccharalis inside glass tubes. To analyze the ability to search and parasitism were used seventy-five stalks of cane-sugar 10 to 15 cm and made a hole in each stem, which was introduced a pupa of D. saccharalis 24 hours old. After fixation of the pupae, each stem was inserted into transparent plastic bottles. These cylinders were released 21 females of P. elaeisis or 21 females of T. diatraeae or even 21 females of P. elaeisis + 21 females of T. diatraeae as treatments. 72 hours after the pupae were removed from the interior of the stalks in separate glass tubes at 25 ° C, 70% relative humidity and 14 h photoperiod until emergence of parasitoids. The highest rate of parasitism and emergence was T. diatraeae and no emergence of P. elaeisis. Parasitism was not observed when the parasitoids were released together. Trichospilus diatraeae showed greater efficiency in parasitizing and developing in pupae of D. saccharalis inserted inside culms of cane sugar.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-15Bitstream added on 2014-06-13T19:14:44Z : No. of bitstreams: 1 simi_ld_me_jabo.pdf: 975668 bytes, checksum: a1a658ff0ef48ae2b0a2439f7cbf0bb3 (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A broca da cana Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) é responsável por grandes prejuízos na cultura da cana-deaçúcar. O controle tem como alvo principal somente a fase de lagarta. No entanto, a eficiência pode ser maior atingindo fases do ciclo da praga mais expostas aos agentes de controle. O objetivo deste estudo foi avaliar a patogenicidade de Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. e Isaria farinosa (Holmsk.) Fr. para ovos, lagartas, pupas e adultos de D. saccharalis e avaliar, através da análise de parâmetros biológicos, os efeitos no ciclo de vida da praga. Ovos postos no período de 24 horas, lagartas com 15 dias de desenvolvimento, pupas recém formadas e adultos com 24 horas de vida foram inoculados com os fungos nas concentrações de 108, 107 e 106 conídios mL-1. A viabilidade dos ovos foi afetada significativamente no tratamento com 108 con. mL-1 de M. anisopliae, mas as lagartas sobreviventes não foram afetadas em nenhum outro parâmetro avaliado. M. anisopliae e B. bassiana causaram mortalidade de lagartas principalmente nas concentrações de 108 e 107 con. mL-1, enquanto a viabilidade pupal e o peso de pupas fêmeas formadas a partir de lagartas tratadas foram reduzidos apenas pelos tratamentos com 108 e 107 con. mL-1 de M. anisopliae, respectivamente. I. farinosa não se mostrou patogênico para as fases de ovo e lagarta de D. saccharalis. O tratamento com 108 con. mL-1 de M. anisopliae e B. bassiana produziu 52,0 e 42,0% de mortalidade de pupas, respectivamente, afetando também a viabilidade de pupas e a longevidade de adultos emergidos. A fecundidade destes adultos foi severamente afetada por I. farinosa na concentração 108 con. mL-1 e pelos outros fungos em todas as concentrações avaliadas. Verificou-se grande mortalidade de adultos tratados com todas as concentrações de M. anisopliae... The sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) is responsible for high losses in sugarcane. The larval stage is the main target of control. However, the efficiency can be higher by reaching different and more exposed stages with more exposure to the control agents. The aim of this study was to evaluate the pathogenicity of Metarhizium anisopliae (Metsch.) Sorok. Beauveria bassiana (Bals.) Vuill. and Isaria farinosa (Holmsk.) Fr. to eggs, larvae, pupae and adults of D. saccharalis and to evaluate the effects on pest lifecycle. Eggs with 24 hours, larvae with 15 days of development, newly formed pupae and adults with 24 hours of life were inoculated with fungi at concentrations of 108, 107 and 106 conidia mL-1. The eggs viability was significantly affected in the treatment with 108 con. mL-1 of M. anisopliae, but the survival larvae were not affected in any of the analyzed parameters. M. anisopliae and B. bassiana caused larval mortality mainly at concentrations of 108 and 107 con. mL-1, while pupae viability and female pupal weight formed from treated larvae were reduced only by treatments with 108 and 107 con. mL-1 of M. anisopliae, respectively. I. farinosa wasn´t pathogenic to eggs and larvae of D. saccharalis. The treatment with 108 con. mL-1 of M. anisopliae and B. bassiana produced 52.0 and 42.0% pupae mortality respectively, also affecting the pupal viability and the longevity of adults. The fecundity of these adults was severely affected by I. farinosa in the concentration of 108 con. mL-1 and by other fungi in all evaluated concentrations. High mortality of treated adults with all concentrations of M. anisopliae and with 107 con. mL-1 was observed. The longevity and fecundity were not affected by the fungi, and the eggs viability laid by treated females was significantly reduced by treatment with 106 and 108 con. mL-1 of B. bassiana... (Complete abstract click electronic access below)

This research evaluates the effect of the adult diet on the reproduction of Anticarsia gemmatalis Hubner, Heliothis virescens (Fabr.), Spodoptera frugiperda (J. E. Smith) (Noctuidae), Diatraea saccharalis (Fabr.) (Crambidae), Gymnandrosoma aurantianum Lima (Tortricidae) and Stenoma catenifer Walsingham (Elachistidae). Adults of all species were fed either water or a 10% honey solution. The egg viability for the 1st and 2nd egg masses, adult fecundity, longevity, number of mating and the ovigeny index (OI) (degree of ovarian maturation) were evaluated. Fecundity of A. gemmatalis and H. virescens was drastically reduced when females were fed only on water. Egg viability from both 1st and 2nd egg masses was variable between treatments. Females of A. gemmatalis, H. virescens and S. frugiperda, and males of some species had a reduced longevity when fed only on water. The number of matings was higher for A. gemmatalis and D. saccharalis when fed on water only. The OI was < 1.0 for all species evaluated indicating that all females may develop new oocytes as they age. Based on the OI and the reduced fecundity of A. gemmatalis and H. virescens, one observes that adult feeding is important for the reproduction of both species, and the IO is not a good parameter to indicate such condition. Spodoptera frugiperda, G. aurantianum, D. saccharalis and S. catenifer do not require any source of carbohydrates as adults to sustain their reproduction.

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-05-10T20:46:49Z No. of bitstreams: 1 MariaAdrianaTorquetiRodrigues.pdf: 645870 bytes, checksum: 1e0d86aa75fe623d010e5feb3e011e50 (MD5) Made available in DSpace on 2019-05-10T20:46:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MariaAdrianaTorquetiRodrigues.pdf: 645870 bytes, checksum: 1e0d86aa75fe623d010e5feb3e011e50 (MD5) Previous issue date: 2010-03-01 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O potencial de Trichospilus diatraeae Cherian e Margabandhu, 1942 (Hymenoptera: Eulophidae) para controle de Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) em cana-de-açúcar no Brasil é pouco conhecido. Por isto, este estudo objetivou avaliar o efeito da temperatura e da umidade relativa do ar na biologia de T. diatraeae criados em pupas de D. saccharalis, visando sua produção em laboratório. Inicialmente foi investigado se as características biológicas de T. diatraeae criados em pupas D. saccharalis seriam afetadas por diferentes índices de temperatura. Pupas de D. saccharalis com idade de 24 horas de idade foram expostas ao parasitismo por sete fêmeas de T. diatraeae com idade de 48 horas, permitiu-se o parasitismo por 24 horas. Após esse período as fêmeas de T. diatraeae foram retiradas e as pupas transferidas para câmaras climatizadas nas temperaturas de 16, 19, 22, 25, 28 e 31oC, 70 ± 10% de umidade relativa e fotofase de 14 horas, mantidas em temperaturas costantes. O aumento da temperatura reduziu a duração do ciclo de T. diatraeae, sendo que a 31º C, o parasitóide não concluiu seu ciclo de vida em pupas de D. saccharalis. A progênie desse parasitóide por pupa variou de 43 a 632 indivíduos e foi maior a 25oC. A temperatura base (TB) e constante térmica (K) desse parasitóide foram de 9,37°C e 257,60 graus-dia, respectivamente. O número médio de gerações por ano de T. diatraeae criados em pupas de D. saccharalis, baseando-se na temperatura média de 10 anos do Município de Dourados, Mato Grosso do Sul, foi estimado em 18,49 gerações anuais, enquanto, este número para D. saccharalis foi 5,38. O número estimado de gerações anuais de T. diatraeae em pupas de D. saccharalis para os municípios de Dourados, Ivinhema, Ponta Porã, e Três Lagoas, Mato Grosso do Sul foi de 18,49; 18,00; 15,83; e 20,36 respectivamente. No segundo experimento, foi investigado se as características biológicas de T. diatraeae criados em pupas D. saccharalis seriam afetadas por diferentes índices de umidade relativa do ar. Pupas de D. saccharalis, com 24 horas de idade foram individualizadas em tubos de vidro (14 cm de altura x 2,2 cm de diâmetro) com sete fêmeas de T. diatraeae com 48 horas de idade, sendo permitido o parasitismo por 24 horas. Ao final desse período, as fêmeas foram retiradas, e as pupas transferidas para câmaras climatizadas a 25oC, nas umidades relativas do ar de 40, 50, 60, 70, 80, e 85% e fotofase de 14 horas. Os melhores resultados das características biológicas (porcentagem de parasitismo e de emergência, duração do ciclo de vida, progênie e razão sexual) de T. diatraeae criados em pupas de D. saccharalis foram obtidos ao se utilizar a temperatura de 25ºC e umidade relativa de 80%, portanto sugerese esta combinação para criação de T. diatraeae em laboratório. The potencial of Trichospilus diatraeae Margabandhu and Cherian, 1942 (Hymenoptera: Eulophidae) for control of Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae) in sugar cane in Brazil is little known.Therefore, this study aimed to evaluate the effect of temperature and relative humidity of air the biology of T. diatraeae reared on pupae of D. saccharalis, for its production in the laboratory. Initially it was investigated if the biological characteristics of T. diatraeae pupae reared on D. saccharalis would be affected by different levels of temperature. Pupae of D. saccharalis aged 24 hours old were exposed to parasitism by seven females of T. diatraeae aged 48 hours, allowed to parasitism for 24 hours. After this period the females of T. diatraeae were removed and pupae transferred to acclimatized chambers at 16, 19, 22, 25, 28 and 31oC, 70 ± 10% relative humidity and photoperiod of 14 hours, maintained at temperature constant. Increasing the temperature reduced the cycle time T. diatraeae, being 31º C, the parasitoid has not completed its life cycle in pupae D. saccharalis. The progeny of parasitoids per pupa ranged 43 to 632 individuals and was highest at 25oC. The base temperature (TB) and thermal constant (K) of this parasitoid were 9.37 ° C and 257.60 day-degrees respectively. The average number of generations per year of T. diatraeae reared on pupae of D. saccharalis, based on the average temperature of 10 years in the city of Dourados, Mato Grosso do Sul was estimated 18.49 generations per year, while this number for D. saccharalis was 5.38. The estimated number of generations of T. diatraeae pupae of D. saccharalis for the cities of Dourados, Ivinhema, Ponta Pora and Tres Lagoas, Mato Grosso do Sul was 18.49, 18.00, 15.83, and 20.36 respectively. In the second experiment, it was investigated if the biological characteristics of T. diatraeae pupae reared on D. saccharalis would be affected by different levels of relative humidity. Pupae of D. saccharalis, with 24 hours of age were isolated in glass tubes (14 cm high x 2.2 cm in diameter) with seven females of T. diatraeae 48 hours old, being allowed to parasitism by 24 hours. After this period, females were removed and the pupae transferred to acclimatized chambers at 25oC, the relative humidity of 40, 50, 60, 70, 80, and 85% and photophase of 14 hours. The best results of biological characteristics (percentage of parasitism and Emergency cycle of life, progeny and sex ratio) of T. diatraeae reared on pupae of D. saccharalis were obtained when using the 25°C and relative humidity of 80%, so we suggest this combination to create T. diatraeae in the laboratory.

The sugarcane borer, Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae), is the most important insect pest of sugarcane grown in Brazil and others localities in the Americas, causing stalk damage to sugarcane plants which results in loss of efficiency in both sugar and alcohol production. The extensive damage caused by this pest in the sugarcane cultivation and its difficult control by conventional insecticides justify the search for new strategies that can help to reduce the use of harmful chemicals to humans and the environment. In order to generate new molecules with insecticidal activity against the sugarcane borer, the present work aimed to build a scFv antibody fragment library through Phage Display technology for selection and characterization of molecules with binding properties against D. saccharalis larval midgut proteins. The methodology used was efficient, allowing the selection of a scFv with immunoreactivity for the insect intestinal epithelium and with potential insecticidal activity. A broca-da-cana, Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae), destaca-se como a praga que mais causa danos ao cultivo da cana-de-açúcar no Brasil e outras localidades do continente americano, sendo responsável pela diminuição dos rendimentos agroindustriais associados à cultura. Devido aos extensos danos causados pela praga na cultura da canade- açúcar e ao seu difícil controle pelos inseticidas convencionais, faz-se necessário o desenvolvimento de novas estratégias de controle desse inseto visando-se a diminuição do uso de agentes químicos prejudiciais ao ser humano e ao meio ambiente. Com o intuito de gerar novas moléculas com atividade bioinseticida contra a broca-da-cana, o presente trabalho teve por objetivo a construção de uma biblioteca imune de fragmentos de anticorpos scFv por meio da tecnologia de Phage Display para seleção e caracterização de moléculas ligantes às proteínas intestinais da larva de D. saccharalis. A tecnologia utilizada na construção da biblioteca imune de fragmentos de anticorpos scFv contra as proteínas intestinais de Diatraea saccharalis mostrou-se eficiente, permitindo a seleção de um fragmento de anticorpo scFv imunorreativo ao epitélio intestinal do inseto e com potencial atividade bioinseticida. Mestre em Genética e Bioquímica

Submitted by Repositorio Institucional (repositorio@ufgd.edu.br) on 2018-10-23T18:18:36Z No. of bitstreams: 1 DanielePerassaCosta.pdf: 1033095 bytes, checksum: aeb0aba58f1aa19e1f7bce2ca27ba81a (MD5) Made available in DSpace on 2018-10-23T18:18:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DanielePerassaCosta.pdf: 1033095 bytes, checksum: aeb0aba58f1aa19e1f7bce2ca27ba81a (MD5) Previous issue date: 2009-03-05 Conselho Nacional de Pesquisas (CNPq) A lagarta Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) é a principal praga da cultura da cana-de-açúcar, ocasionando danos durante todo o ciclo vegetativo. O conhecimento da distribuição espacial do inseto é primordial ao desenvolvimento de planos de amostragens e técnicas de controle em sistemas de culturas agrícolas. Este trabalho objetivou determinar a distribuição espacial de D. saccharalis, em cultivo comercial de cana-de-açúcar. O experimento foi conduzido em talhão de cana-de-açúcar variedade SP-803280, pertencente à Usina Dourados Álcool e Açúcar S/A, situada em Dourados/Mato Grosso do Sul, no período de janeiro a outubro de 2008. Foram realizadas 21 amostragens observando-se as variáveis colmos com orifício, lagartas e pupas de D. saccharalis, em cana numa área de aproximadamente 22.500 m2 dividido em 100 parcelas de 225 m2 (15 m x 15 m). Os índices de dispersão utilizados para a definição do modelo de distribuição espacial foram: razão variância/média (I), índice de Morisita (Iσ) e o expoente K da distribuição binomial negativa. Também se testou os ajustes às distribuições de probabilidade de Poisson, binomial negativa e binomial positiva. As variáveis de distribuição espacial; colmos com orifícios e números de lagartas se ajustaram a distribuição binomial negativa (agregada) e Poisson (aleatória), respectivamente, na área de estudo. Com base na distribuição espacial das lagartas de D. saccharalis recomenda-se que a amostragem seja realizada aleatoriamente com maior número possível de amostras no talhão, para que a quantidade estimada de lagartas seja a mais próxima da real. The sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) is one the most important pest of the sugarcane crop caused damage all through vegetative cycle. Knowledge of the spatial distribution of insects is important to the development of sampling plans and techniques in control crops systems. This main of this study were to determine the spatial distribution of D. saccharalis in commercial sugarcane crop. The experiment was conducted on sugarcane field variety SP-803280, the Usina Dourados Álcool e Açúcar S/A, during January to October of 2008 in the municipality of Dourados, Mato Grosso do Sul. We perform 21 samples it was observed variables culms hole, larvae and pupae of D. saccharalis, in an area of approximately 22,500 m2 divided into 100 plots of 225 m2 (15 m x 15 m). The indices of dispersion used to define the model of spatial distribution were: variance/mean (I), Morisita index (Iσ) and the exponent K of the negative binomial distribution. We also tested the settings of the probability distributions of the Poisson, negative binomial and binomial positive. The variables of spatial distribution; culms with holes and numbers of caterpillars fit the negative binomial distribution (aggregated) and Poisson (random), respectively in the studied area. Based on the spatial distribution of larvae of D. saccharalis is recommend that random sampling is performed with larger number possible of samples available in the field, so that the estimated quantity of caterpillars is the closest to the real.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-23T15:10:01Z No. of bitstreams: 1 Cinthia Conceicao Matias da Silva.pdf: 321146 bytes, checksum: e36e95044fe468bf9019c0b4774eac46 (MD5) Made available in DSpace on 2016-11-23T15:10:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cinthia Conceicao Matias da Silva.pdf: 321146 bytes, checksum: e36e95044fe468bf9019c0b4774eac46 (MD5) Previous issue date: 2009-02-02 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES This complex of sugarcane borers, in Brazil, comprises Diatraea saccharalis (Fabr.) and Diatraea flavipennella (Box) (Lepidoptera.: Crambidae). The control of borers, in Brazil, is the applied biological control using the larval endoparasitoid Cotesia flavipes (Cam.) (Hymenoptera: Braconidae). Recently, however, the biological control of D. flavipennella by the C. flavipes has been in discussion due to increasing occurrence of this borer species in the sugarcane fields across the northeast of Brazil. Thus, this study investigated the parasitism behavior of the parasitoid C. flavipes towards D. flavipennella side by side to D. saccharalis as well as determined its fertility life table parasitizing both hosts to clearify about this question. The parasitism behavior included free choice and host finding tests with and without visual cues, using arena in the laboratory. Larvae of D. saccharalis and D. flavipennella were exposed to 24h-old C. flavipes females, mated and fed. The free choice test consisted of an arena containing larvae of both sugarcane borers andcontrasted parasitoid wasp emerged from each one. The host finding test was conducted in an arena designed to not allow visual cues to the wasps. The parasitoid wasp in both tests showed no parasitism preference toward a sugarcane borer species being able to find and parasitize both borers similarly. The fertility life table parameters for C. flavipes parasitizing D. saccharalis andD. flavipennella were estimated based on the development and the specific daily parasitism obtained in the laboratory. The results show that C. flavipes exhibited similar parasitism and fertility on both borers, but with longer mean generation time and lower cocoon viability parasitizing D. flavipennella. Based on the results of the parasitism behavior and fertility life tablewe conclude that the parasitism of C. flavipes on D. flavipennella was not compromised. As espécies Diatraea saccharalis (Fabr.) e Diatraea flavipennella (Box) (Lepidoptera: Crambidae) encontram-se distribuídas em todo o Brasil e no Nordeste, respectivamente. O controle dessas brocas, no Brasil, é a liberação do parasitóide Cotesia flavipes (Cam.) (Hymenoptera: Braconidae). No entanto, mais recentemente o controle de D. flavipennella com C. flavipes tem sido questionado em virtude da crescente ocorrência desta espécie nos canaviais do nordeste do Brasil. Assim, este trabalho investigou o desempenho de C. flavipes em D. saccharalis e D. flavipennella, com estudos de comportamento de escolha e parasitismo, bem como de biologia. Foram conduzidos estudos envolvendo testes de livre escolha para preferência e localização do hospedeiro em arenas. Lagartas das duas espécies de Diatraea foram ofertadas a fêmeas de C. flavipes com 24h de idade, acasaladas e alimentadas. Vespas criadas em lagartas de uma das brocas foram testadas individualmente, tendo como hospedeiro D. flavipennella e D.saccharalis, ou ambas as espécies. Os testes de localização do hospedeiro foram conduzindos usando arenas que permitiam as vespas utilizarem apenas pistas olfativas, pistas olfativas e visuais. Os resultados mostraram que as vespas não tiveram preferência de escolha, sendo C.flavipes capaz de localizar ambas as brocas. Em outro experimento, com dados de C. flavipes parasitando as duas brocas, foi confeccionada a tabela de vida de fertilidade do parasitóide nas duas espécies de Diatraea. A partir dos resultados encontrados observou-se que C. flavipes apresentou parasitismo similar nas duas brocas, mas com maior tempo de desenvolvimento e menor viabilidade de casulos em D. flavipennella. Com base nos resultados de comportamento, desenvolvimento e parasitismo de C. flavipes, pode-se concluir que o desempenho de C. flavipesnão foi comprometido em ambas às brocas.

Aspectos biológicos de Diaphania nitidalis foram estudados sob dietas natural e artificial em condições de laboratório, à temperatura de 25±1ºC, umidade relativa de 70±10% e fotofase de 14 horas. Como dieta natural foi utilizada abóbora 'Jacaré', pepino 'Japonês' e abobrinha 'Caserta' e, como artificial, a dieta utilizada em criações de Diatraea saccharalis, broca da cana-de-açúcar. As lagartas de D. nitidalis foram inoculadas nos diferentes tipos de substratos e criadas por todo o ciclo. Ocorreu diferença significativa entre a maioria dos parâmetros testados dentro dos tratamentos, sendo as dietas à base de abóbora e artificial as que proporcionaram maior potencial biótico para criação de D. nitidalis. Pela facilidade de aquisição dos ingredientes e manipulação dos insetos, a dieta artificial se torna mais eficaz para criação massal dessa espécie em laboratório. The aim of this research was to evaluate the biological behaviour of melonworm at different natural and artificial diet under laboratory conditions (25ºC, 70% RH, 14 h photofase). Squash 'Jacaré', cucumber 'Japonês' and zucchini 'Caserta' were used as natural substrates compared to na artificial diet developed for the sugarcane borer (Diatraea saccharalis). The caterpillars were inoculated in each substrate and reared for a full cycle. The biological parameters were different among treatments. An artificial diet and squash cv. Jacaré substrate showed higher performance for the multiplication of D. nitidalis. The artificial diet is recommended because it is easy to obtain the ingredients and nultiply this insect under laboratory conditions.

Uma nova técnica de criação para o predador Doru luteipes (Scudder), envolvendo dietas artificiais e substrato artificial de oviposição é sugerida. Tanto adultos, quanto ninfas foram mantidos em placas contendo um canudinho transparente de refrigerante com algodão umedecido e o respectivo alimento. Foram testados os seguintes tratamentos: ovos de Spodoptera frugiperda (J.E. Smith); ovos de Diatraea saccharalis Fabricius (Lepidoptera: Pyralidae); ovos de Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae); farinha de pupa de insetos (FPI); pólen comercial de abelhas Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) (PC); FPI + PC, FPI + pólen de taboa [Typha angustifolia L. (Thyphaceae)]. Para as dietas artificiais, observou-se que os tratamentos com farinha de pupas de insetos (FPI), FPI + pólen comercial (PC) e FPI + pólen de taboa resultaram em 32; 29 e 29 dias de período ninfal, com 83; 90 e 100% de sobrevivência, respectivamente, sendo superiores ao tratamento com PC , com 37 dias e 67% de sobrevivência. Os tratamentos com farinha de pupas de insetos, isolada ou em mistura com pólens, foram semelhantes ao padrão com ovos de S. frugiperda. Conclui-se que a criação de D. luteipes com as dietas artificiais testadas, bem como o método de criação, são adequados para sua produção em laboratório. A new technique involving an artificial diet and an artificial substrate for oviposition for the rearing of the predator Doru luteipes (Scudder) is suggested. Both adults and nymphs were maintained in petri dishes containing a transparent piece of soda straw filled with moistened cotton and the corresponding food for the biossays. The following treatments were tested: eggs of Spodoptera frugiperda (J.E. Smith), Diatraea saccharalis Fabricius (Lepidoptera: Pyralidae) and Anagasta kuehniella Zeller (Lepidoptera: Pyralidae); insect pupae meal (FPI); Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae) commercial pollen (PC); FPI + PC, and FPI + cattail pollen [Typha angustifolia L. (Thyphaceae)]. Each treatment had 50 replicates, and food was offered in excess. Treatments consisting of insect pupae meal (FPI), FPI + commercial pollen (PC), and FPI + cattail pollen resulted in nymphal development of 32, 29, and 29 days, with 83, 90 and 100% survival, respectively, and were superior to the PC treatment, with values of 37 days and 67% survival observed for insects reared on commercial pollen. Treatments that included insect pupae flour, either alone or mixed with pollens, were similar to control (S. frugiperda eggs). We conclude that the artificial diets tested and rearing technique are suitable for the artificial rearing of D. luteipes in laboratory conditions.