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Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) The occurrence of sedimentary atmospheric particulate matter (MPAS) containing metals and metallic nanoparticles has increased in the world, causing the contamination of aquatic environments, as is the case for Espírito Santo, southeast region of Brazil. MPAS was collected in Vitória’s bay surroundigs, ES, to evaluate the bioaccumulation pattern of metals in Oreochromis niloticus and its possible effects on the gills. The metal profile of MPAS was analyzed and, subsequently, specimens of Nile tilapia, Oreochromis niloticus were exposed to MPAS (1g/L) in a semi-static system, for 30 days, with daily sampling of water for physicochemical parameters analysis and chemical profiling of the dissolved metals. Every 3 days, specimens of tilapia were picked for analysis of bioaccumulation (Total: 11 sample collection) of metals in the viscera and fillet, and every 6 days specimens were picked for histological analysis and determination of the metallothionein concentration in gills (Total: 6 sample collection). For the multi-element analysis, the samples were prepared by acid digestion method and the concentration of metals determined by ICP-MS (Inductively coupled plasma mass spectrometry). The following metals were identified and quantified: B, Al, V, Cr, Mn, Fe, Ni, Cu, Zn, As, Se, Rb, Sr, Ag, Cd, Pb, Hg, Ba, Bi, W, Ti, Zr, Y, La, Nb, Ce in the MPAS. Ta has been identified but not quantified. Six metals (Cu, Fe, Al, Zn, Mn, Pb) were chosen/picked for analysis in the fish’s viscera and fillet based on the following criteria: higher concentration in MPAS and limits determined by Brazilian and USA legislation. The concentration of Cu in water was higher than the limits established for freshwater from day 3 to day 15 and on day 24. The concentration of Fe was higher from day 3 to day 12. Al concentration was higher on all days, except on the 18th day. Pb’s concentration only exceeded the limit on the 6th day. The determined bioconcentration factor (BCF) was >1 for all metals analyzed, confirming their bioaccumulation in tilapia. Some metals such as Al, Fe, Mn and Pb showed similar accumulation patterns with significant increase in concentration in the first days until reaching a peak, followed by the subsequent decrease. Cu and Zn showed different bioaccumulation pattern with several peaks and persistence of a high concentration throughout the exposure. There was preferential bioaccumulation of those metals in the viscera compared to the fillet. The analysis of histopathology and the concentration of metallothionein in the gills showed no significant alteration after exposure to MPAS. Exposure to higher concentrations of MPAS may trigger more severe responses. A produção de material particulado atmosférico sedimentável (MPAS) contendo metais e nanopartículas metálicas vem aumentando no mundo, ocasionando a contaminação de ambientes aquáticos, como é o caso do Estado do Espírito Santo, localizado na região Sudeste do Brasil. MPAS foi coletado na região de Vitória, ES, para avaliar o padrão de bioacumulação dos metais em Oreochromis niloticus e seus possíveis efeitos nas brânquias. O perfil químico do MPAS foi analisado e, posteriormente, exemplares de tilápia do Nilo, Oreochromis niloticus, foram expostos ao MPAS (1 g.L-1) em sistema semi-estático, por 30 dias, com coleta diária de amostra de água para análise dos parâmetros físicoquímicos e perfil químico dos metais dissolvidos. A cada 3 dias, espécimes de tilápia foram coletados para análise de bioacumulação (total: 11 coletas) de metais nas vísceras e filé, e a cada 6 dias foram coletados espécimes para análises histológicas e determinação da concentração de metalotioneína das brânquias (Total: 6 coletas). Para a análise multielementar, as amostras foram digeridas e a concentração dos metais determinada por ICP-MS (espectrômetro de massa com plasma indutivamente acoplada). Foram identificados e quantificados os seguintes metais: B, Al, V, Cr, Mn, Fe, Ni, Cu, Zn, As, Se, Rb, Sr, Ag, Cd, Pb, Hg, Ba, Bi, W, Ti, Zr, Y, La, Nb, Ce no MPAS. Ta foi identificado, mas não quantificado. Nas visceras e filé dos animais foram avaliados a bioacumulação seis metais (Cu, Fe, Al, Zn, Mn, Pb) com maior concentração no MPAS e limites determinados na legislação brasileira. A concentração de Cu na água foi superior aos limites estabelecidos legislação para águas dulcícolas do dia 3 ao dia 15 e no dia 24. A concentração de Fe foi superior do dia 3 ao dia 12. No caso do Al, a concentração foi superior todos os dias, exceto no 18º. dia e a concentração de Pb só ultrapassou o limite no 6º. dia. O fator de bioconcentração (BCF) foi acima de 1 para todos os metais analisados confirmando a bioacumulação na espécie estudada. Alguns metais como por exemplo Al, Fe, Mn e Pb apresentaram padrões de acumulação semelhantes com aumento significativo na concentração nos primeiros dias até atingir um pico, seguido pela diminuição subsequente. O Cu e Zn apresentaram um padrão de bioacumulação com diversos picos e persistência de uma alta concentração ao longo da exposição. Houve bioacumulação preferencial de metais nos tecidos viscerais quando comparados ao filé. A análise das histopatologias e da concentração de metalotioneína nas brânquias não apresentaram alterações após exposição ao MPAS. Prevê-se que concentrações superiores de MPAS desencadeie respostas mais graves. CNPq

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES The interest in native fish species has increased exponentially in recent years. The silver catfish (Rhamdia quelen) is a species that has stood out and received attention from several researchers and fish farmers, due to its easy cultivation, rusticity and good productive performances, however, there is still a lack of morphological and structural information for the maximum use of the potential of the species. Therefore, this study aimed to evaluate the morphological profile of the epithelial and branchial structure of juvenile silver catfish, and how each stage of development can manifest the expression of mucous cells, making it possible to recognize the most representative area for future analyzes. The fish used in the study were purchased from a local fish farm and acclimated in boxes with a capacity of 30L in a recirculation system with water parameters monitored according to the optimum range for the species. During the experimental period, two groups of fish were fed with fish food (37% protein) daily - three times a day until their satiety. The groups, composed of juvenile fish, were evaluated according to their stage of sequential cutaneous and gill development. The group of juveniles I was composed of 9 fish with an average weight of 7.65g and a length of 9.18cm. The group of juvenile animals II, also composed of 9 fish, had an average weight of 28.09g, and a length of 16.69cm. At the end of the experimental period, all the animals were anesthetized and euthanized by spinal cord sectioning. Afterwards, 6 sections of skin were collected from the left side of the fish, three sections in the dorsal region and three in the ventral region, in addition to the second branchial arch, also on the left side. The samples were fixed in 10% formaldehyde and subjected to routine histological procedures with PAS + Alcian Blue pH 2.5 staining and Masson-Goldner Trichomium. The results indicated that due to the species' benthic habit, the ventral region is the most representative point for skin collection due to the higher concentration of mucous cells found. In the gills, the distribution of mucous cells allows for health assessment based on the excessive or scarce production of mucus that covers the lamellae. Silver catfish (R. quelen) have greater sensitivity in terms of immunological protection arising from the viscoelastic properties of the mucous layer and the epithelial barrier. O interesse em espécies de peixes nativos tem aumentado exponencialmente nos últimos anos. O jundiá (Rhamdia quelen) é uma espécie que tem se destacado e recebido atenção de diversos pesquisadores e piscicultores devido ao fácil cultivo, rusticidade e bons desempenhos produtivos, porém ainda há escassez de informações morfológicas e estruturais para o máximo aproveitamento do potencial da espécie. Portanto, este estudo objetivou avaliar o perfil morfológico da estrutura epitelial e branquial de juvenis de jundiá, e como cada fase do desenvolvimento pode manifestar a expressão de células mucosas, oportunizando reconhecer a área mais representativa para futuras análises. Os peixes utilizados foram adquiridos em uma piscicultura local e aclimatados em caixas com capacidade de 30L em sistema de recirculação com parâmetros de água monitorados de acordo com a faixa ótima para a espécie. Durante o período experimental, dois grupos de peixes foram alimentados com ração comercial (37% proteína) diariamente três vezes ao dia até sua saciedade. Os grupos, composto por peixes juvenis foram avaliados de acordo com seu estágio de desenvolvimento sequencial cutâneo e branquial. O grupo de juvenis I era composto por 9 peixes com peso médio de 7,65g e comprimento de 9,18cm. O grupo de animais juvenis II também composto por 9 peixes, possuía peso médio de 28,09g, e comprimento de 16,69 cm. Ao final do período experimental, todos os animais foram anestesiados e eutanasiados por secção medular. Após, foram colhidas 6 secções de pele do lado esquerdo do peixe, sendo três secções na região dorsal e três na região ventral, além do segundo arco branquial, também do lado esquerdo. As amostras foram fixadas em formaldeído 10% e submetidas a procedimentos histológicos de rotina com coloração PAS + Alcian Blue pH 2,5 e Tricômico de Masson-Goldner. Os resultados indicaram que devido ao hábito bentônico da espécie, a região ventral é o ponto mais representativo para coleta de pele em razão da maior concentração de células mucosas encontradas. Nas brânquias, a distribuição de células mucosas permite a avaliação sanitária a partir da produção excessiva ou escassa de muco que recobre as lamelas. Os jundiás (R. quelen) possuem maior sensibilidade quanto a proteção imunológica proveniente das propriedades viscoelásticas da camada mucosa e da barreira epitelial.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES The world demand for fish has experienced a significant increase in the last decades, mainly due to population growth and the search for consumers for healthier foods. The contribution of aquaculture to world food production has increased significantly in the last few years old. Thus, the need for creation in intensive systems is a constant. However, this system provides stress conditions for fish, and may cause immunosuppression and the development of disease. So the aim of this study was to evaluate the adaptive cutaneous and gill morpho responses of silver catfish submitted to different stocking densities and food deprivation, evaluating its possible effects on the activity of lysozyme in cutaneous mucus, in the population of mucous cells of the skin and gills and determining a collection point more representative on the skin. Silver catfish juveniles (Rhamdia quelen) were distributed in 250L tanks and share into four experimental groups with one control group, that was collected pre-experiment and post-adaptation, the experimental groups were: GDA (high density fed); GDNA (high density not fed); PDA (low density powered); and, PDNA (small density not fed). The values established for small densities were 2.5 kg / m³, while for high densities it was 32 kg / m³. The fishes had 185-195 g, 24-26 cm. The animals in the fed groups received food 2 times a day, with commercial feed being supplied 5% of the biomass of the the tank and the animals in the non-fed group remained fasting during the experiment. After the experimental period, the fish were anesthetized and euthanized to collect biological material. Skin fragments were collected of seven different points on the animal's body, the second left branchial arch and skin mucus samples. In the results, it was observed that the VFNV point is the most representative collection point. The population of mucous cells in the skin was lower in GDNA treatment and higher in PDA. In the gills the cell population mucous membranes was significantly lower in the PDA and PDNA treatments, CONTROL and GDNA were higher. Lysozyme activity of epidermal mucus it was higher in the GDNA treatment than in the other treatments. It was possible to conclude that stocking density and food deprivation offer a stressful situation for specimens of silver catfish, which vary their response to each situation. A demanda mundial por pescado tem sofrido um significativo incremento nas últimas décadas, principalmente em função do crescimento populacional e da busca dos consumidores por alimentos mais saudáveis. A contribuição da aquicultura para a produção mundial de alimentos vem aumentando significativamente nos últimos anos. Assim, a necessidade da criação em sistemas intensivos é uma constante. Porém, esse sistema propicia condições de estresse para os peixes, podendo causar imunossupressão e o desenvolvimento de doenças. Assim o objetivo deste estudo foi avaliar as respostas morfo adaptativas cutâneas e branquiais de jundiás submetidos a diferentes densidades de estocagem e a privação alimentar, avaliando seus possíveis efeitos na atividade da lisozima no muco cutâneo, na população de células mucosas da pele e das brânquias e determinação de um ponto de coleta mais representativo na pele. Juvenis de jundiá (Rhamdia quelen) foram distribuídos em tanques de 250L e divididos em 4 grupos experimentais com 1 grupo controle, que foi coletado pré experimento e pós adaptação, os grupos experimentais foram GDA (grande densidade alimentado), GDNA (grande densidade não alimentado), PDA (pequena densidade alimentado) e PDNA (pequena densidade não alimentado). Os valores estabelecidos para as pequenas densidades foi de 2,5kg/m³, enquanto para as grandes densidades foi de 32 kg/m³. Os peixes apresentavam 185-195 g, 24-26 cm. Os animais dos grupos alimentados recebiam alimento 2 vezes ao dia, com ração comercial sendo fornecido 5% da biomassa do tanque e os animais do grupo não alimentado permaneceram em jejum durante o experimento. Após o período experimental, os peixes foram anestesiados e eutanasiados para coleta de material biológico. Foram coletados fragmentos de pele de 7 pontos diferentes no corpo do animal, o segundo arco branquial esquerdo e amostras de muco cutâneo. Nos resultados observou-se que o ponto VFNV é o ponto de coleta mais representativo. A população de células mucosas na pele foi menor no tratamento GDNA e maior no PDA. Nas brânquias a população de células mucosas foi significativamente menor nos tratamentos PDA e PDNA, já no CONTROLE e no GDNA foram maiores. A atividade de lisozima do muco epidérmico foi maior no tratamento GDNA que nos outros tratamentos. Foi possível concluir que a densidade de estocagem e a privação alimentar oferecem situação de estresse para exemplares de jundiá, que variam sua resposta a cada situação.

Submitted by Jeffesson de Oliveira Lima (jeffessonbiologia@mail.uft.edu.br) on 2019-01-19T20:35:58Z No. of bitstreams: 1 dissertação -Jeffesson.pdf: 3368340 bytes, checksum: b4f1d7a80cc24d6b067e940525723206 (MD5) Approved for entry into archive by Adriana Aparecida Puerta null (dripuerta@rc.unesp.br) on 2019-01-21T18:37:33Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lima_jo_me_rcla.pdf: 3277059 bytes, checksum: a48545fe171e3cad21116585f0a39eca (MD5) Made available in DSpace on 2019-01-21T18:37:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lima_jo_me_rcla.pdf: 3277059 bytes, checksum: a48545fe171e3cad21116585f0a39eca (MD5) Previous issue date: 2018-12-03 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A Baccharis dracunculifolia, popularmente conhecida como alecrim do campo, merece destaque por apresentar promissor potencial terapêutico. Os extratos de folhas desta planta são utilizados para tratar distúrbios do fígado e digestivo, dentre outros. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos tóxicos do extrato alcoólico de B. dracunculifolia em órgãos de peixes. Dos 60 indivíduos (Prochilodus lineatus), 32 foram utilizados em dois grupos experimentais em duplicatas Controle (ração sem aditivo-alecrim) e Grupo alecrim (ração com aditivo-alecrim). Após o tratamento (21 dias) realizou-se 2 coletas com 14 e 21 dias. As alterações histológicas e histoquímicas foram avaliadas pelo Valor Médio de Alteração (VMA), Índice de Alteração Histológica (IAH) e software ImageJ®. IAH e o VMA mostraram que o extrato causa danos leves no fígado e brânquias, entretanto significativos somente no fígado. A análise histoquímica nas brânquias e rastros branquiais demonstraram o aumento de diferentes tipos de muco substâncias produzidas pelas células mucosas. As análises de muco e histomorfométrica do estômago e da porção mediana do intestino posterior demonstraram um aumento na altura, altura total e largura das vilosidades da porção mediana do intestino posterior e altura total e espessura da camada muscular do estômago. Os resultados evidenciam que a ingestão do extrato da B. dracunculifolia pode promover alterações significativas nas brânquias, fígado, intestino e estômago da espécie estudada. Baccharis dracunculifolia, popularly known as field rosemary, deserves to be highlighted because it presents promising therapeutic potential. The leaf extracts of this plant are used to treat liver and digestive disorders, among others. This study aimed to evaluate the toxic effects of alcoholic extract of B. dracunculifolia on fish organs. Of the 60 individuals (Prochilodus lineatus), 32 were used in two experimental groups in duplicates Control (ration without additive-rosemary) and Group rosemary (ration with additive-rosemary). After the treatment (21 days) 2 collections were performed with 14 and 21 days. Histological and histochemical changes were evaluated by the Mean Value of Alteration (MVA), Histological Alteration Index (HAI) and ImageJ® software. HAI and MVA have shown that the extract causes mild damage to the liver and gills, however significant only in the liver. Histochemical analysis in the gills and gill tracts demonstrated the increase of different types of mucus substances by mucosal cells. The analysis of mucus and histomorphometric of the stomach and the medial portion of the posterior intestine demonstrated an increase in height, total height and width of the villi of the mid portion of the posterior intestine and total height and thickness of the muscular layer of the stomach. The results evidenced that the ingestion of the extract of B. dracunculifolia can promote significant alterations in the gills, liver, intestine and stomach of the studied species.

Female individuals of Hyphessobrycon eques were exposed to Diflubenzuron (Dimilin ® ) in order to determine whether exposure to sublethal levels of this insecticide causes changes in gill morphology. Fish were exposed to 0.01, 0.1 and 1.0 mg L −1 for 96 h and 17 days and then submitted to pathological and histometric evaluation. Pathological lesions, such as hyperplasia, lamellar fusion, vascular congestion, secondary lamellar disarray, vasodilatation, hemorrhage and increased lamellar epithelium, were significantly more common in the gills of fish exposed to Dimilin ® than the control. Histometric analysis documented significant changes in blood vessel diameter, primary lamellae width and secondary lamellae length, and the appearance of hemorrhage foci in all concentrations tested. Even at low Dimilin ® concentrations, the histopathological alteration index was mild to moderate, thereby indicating that the function of this tissue was compromised. These findings indicate that indiscriminate use of Dimilin ® can adversely affect the structural integrity of the gills of H. eques , which can cause numerous problems for fish farming systems.

Outra Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) The titanium dioxide nanoparticles (NP-TiO2) has achieved into aquatic ecosystems through different sources, such as sewer and leaching. Abiotic factors such as pH, ionic strength, water hardness may change the chemical aggregation of NPs as well as the bioavailability of metals in waters result of speciation and /or complexation with other compounds. Considering the pH variations can occur in the environment naturally or as a result of ecological accidents and the increasing use of NP-TiO2 in many different industries, this study aimed to determine the CL-50; 48 hours of NPTiO2 in different pH (acidic, neutral and basic) in juvenile Prochilodus lineatus (curimbatá) and evaluating the effects of exposure to sublethal NP-TiO2 these pH using biochemical, physiological and morphological biomarkers. After sensitivity test with KCl, the animals were tested with different concentrations of NP-TiO2 at pH 5.0, 7.0 and 8.0 for 48 hours to determine the CL-50; 48h. Subsequently, the animals were exposed to 1 mg L-1 NP-TiO2 for 48 hours at different pH. After the exposure period, blood samples were obtained via caudal puncture for ion plasma analysis and hematologic variables, and samples of gills were collected and fixed. The analytical characterization of NP-TiO2 suggest the aggregation ability are modified of the NP at different pH and at pH 5.0, the hydrodynamic diameter of the NP is much larger then the others pH, which may have create difficults for the entry of NP in organisms and caused less damage. The NP-TiO2 were considered non-toxic in pH 5,0, 7,0 and 8,0. Exposure to NP-TiO2 pH 5.0 and ionic imbalance caused in the exposed animals, possibly due to changes in the concentration of Cl- ions. Exposure to pH 5.0 and 8.0 and NP-TiO2 at pH 7.0 inhibited AC enzyme. In animals exposed to NP at pH 5.0 were not identified cloride cells with crypt surface, possibly due the blocking of these surfaces by the large NP aggregates. Changes in concentrations of ROS and SOD, CAT and GCL activity may indicate an imbalance in antioxidant system due to different pH and NPTiO2 exposure. NP exposure caused major damage at pH 7.0, where have lower hydrodynamic diameter , supporting the hypothesis that the smaller the size of the cluster,it’s easier the NP enter the body of the exposed animals. As nanopartículas de dióxido de titânio (NP-TiO2) têm alcançado os ecossistemas aquáticos através de diferentes fontes, como esgotos e lixiviação das culturas agrícolas. Fatores abióticos como pH, força iônica, dureza da água podem alterar a agregação química das NPs e a biodisponibilidade de metais nas águas. Considerando as variações de pH que podem ocorrer no ambiente, naturalmente ou não, e a crescente utilização de NP-TiO2 nos mais diferentes segmentos industriais, o presente estudo teve por objetivo determinar a CL-50;48h das NP-TiO2 em diferentes pH (ácido, neutro e básico) em juvenis de Prochilodus lineatus (curimbatá) e avaliar os efeitos da exposição subletal a NP-TiO2 nesses pH, utilizando biomarcadores bioquímicos, fisiológicos e morfológicos. Após a realização do teste de sensibilidade com KCl, os animais foram submetidos a testes com diferentes concentrações de NP-TiO2 nos pH 5,0, 7,0 e 8,0 durante 48h para determinar a CL-50;48h. Posteriormente, os animais foram expostos à concentração de 1 mg L-1 de NP-TiO2 durante 48h nos diferentes pH. Após a exposição, amostras de sangue e de brânquias foram coletadas. Análises de caracterização das NP-TiO2 sugerem que em diferentes pH a capacidade de agregação das NP se modificam e que em pH 5,0, o diâmetro hidrodinâmico das NP é maior em relação aos outros pH, o que pode ter dificultado a entrada das NP nos organismos e causado danos menores. As NP-TiO2 foram consideradas não-tóxicas nos diferentes pH. A exposição a NP-TiO2 e a pH 5,0 causou desequilíbrio iônico nos animais expostos, possivelmente em função das alterações na concentração de Cl-. A exposição a pH 5,0 e 8,0 e a NP-TiO2 em pH 7,0 inibiu a enzima anidrase carbônica. Nos animais expostos a NP em pH 5,0 não foram identificadas CC em cripta, possivelmente devido ao bloqueio das superfícies dessas CC pelos grandes agregados de NP. As alterações nas concentrações de espécies reativas de oxigênio e da atividade das enzimas superóxido dismutase, catalase e glutamato cisteína ligase podem indicar um desequilíbrio no sistema antioxidante. A exposição as NP causou danos maiores em pH 7,0, onde os agregados apresentam diâmetro hidrodinâmico menor, corroborando com a hipótese de que quanto menor o tamanho dos aglomerado, maior a facilidade das NP entrarem no organismo dos animais expostos.

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-22T18:15:15Z No. of bitstreams: 1 MayaraCruzRibeiro.pdf: 1477635 bytes, checksum: 3daf1f5d95a16f48c327f3fb3a6b3b89 (MD5) Made available in DSpace on 2017-06-22T18:15:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MayaraCruzRibeiro.pdf: 1477635 bytes, checksum: 3daf1f5d95a16f48c327f3fb3a6b3b89 (MD5) Previous issue date: 2014-04-29 Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão (FAPEMA) The diversity of the oscillations in the aquatic environment can be enhanced by the lack of preventive methods in management. The lack of knowledge about the parameters of water quality, such as transparency, alkalinity, hardness, dissolved oxygen, pH, ammonia, nitrite and pollutants cause various problems. The increase in the concentration of ammonia causes toxicity to aquatic organisms as it interacts with the biological parameters and can be intensified by the lack of appropriate management in water. Animals exposed to these contaminants may change in metabolic, immunologic, physiologic, and tissue damage in target organs such as gills and liver processes. The tetra (Bryconops caudomaculatus) is a native species with potential for aquaculture, with great potential for expansion, have high proliferation, short production cycle, accepts artificial food and serves as food for other species. The lack of information and the demand for knowledge about the disturbances caused by these animals increased concentrations of ammonia in the water require more specific studies in these target organs. The objective of this experiment was to evaluate the effects of exposure of un-ionized ammonia (NH3) in juvenile Bryconops caudomaculatus, and morphological and histopathological changes in the gills and liver. 150 juvenile minnows subjected to five treatments in tripicata with concentrations of NH3 (mg L-1) were control 0.003 ± 0.4; 0.15 ± 0.5; 0.30 ± 0.3; 0.50 ± 0.5; 1.00 ± 0.4. After the experimental period, 12 animals from each treatment were collected to obtain the gills and liver. After, target organs passed by fixation, dehydration, and paraffin embedding diafranização processes. The staining technique used was toluidine blue for gills and hematoxylin-eosin for the liver. Analysis of variance was used for parametric data and Kruskal-Wallis test for the descriptive analyzes. Morphological changes were observed in the secondary lamellae in the gills from 0.15 mg L-1 as hyperplasia, hypertrophy, epithelial displacement, lamellar melt, edema, aneurysm rupture lamellar epithelium and increase in width of the lamellae. There was also the presence of liver histopathologies from 0.30 mg L-1 as the capillary congestion, inflammation, pigmentation and endogenous treatment with the highest concentration in hepatocytes showed necrosis. These changes caused by the processes of intoxication impaired vital functions, metabolism, processes of respiration and detoxification of the body, probably in hematopoiesis and osmoregulation. A diversidade das oscilações no ambiente aquático pode ser intensificada pela falta de metodologias preventivas no manejo. A falta de conhecimento a respeito dos parâmetros de qualidade de água, como transparência, alcalinidade, dureza, oxigênio dissolvido, pH, amônia, nitrito e poluentes, causa vários problemas. A elevação na concentração da amônia causa toxicidade para os organismos aquáticos, pois interage com os parâmetros biológicos e pode ser intensificada pela falta de um manejo adequado na água. Animais expostos a esses contaminantes podem sofrer alterações nos processos metabólicos, imunológicas, fisiológicos, lesões teciduais e nos órgãos-alvo como brânquias e fígado. O lambari (Bryconops caudomaculatus) é uma espécie nativa com potencial para piscicultura, com grandes possibilidades de expansão, tem alta proliferação, ciclo curto de produção, aceita alimento artificial e serve de alimento para outras espécies. A falta de informação e a demanda por conhecimento sobre os distúrbios causados nesses animais pelo aumento das concentrações de amônia na água exigem estudos mais específicos nesses órgãos-alvo. O objetivo deste experimento foi avaliar os efeitos da exposição de amônia não ionizada (NH3) em juvenis de Bryconops caudomaculatus, e as alterações histopatológicas e morfológicas nas brânquias e no fígado. Foram utilizados 150 juvenis de lambaris submetidos a cinco tratamentos, em tripicata, com concentrações de NH3 (mg L-1): controle 0,003 ± 0,4; 0,15 ± 0,5; 0,30 ± 0,3; 0,50 ± 0,5; 1,00 ± 0,4. Após o período experimental foram coletados 12 animais de cada tratamento, para a obtenção das brânquias e do fígado. Após, os órgãos-alvo passaram pelos processos fixação, desidratação, diafranização e inclusão em parafina. A técnica de coloração utilizada foi a Azul de Toluidina para brânquias e a Hematoxilina-Eosina para o fígado. Foi utilizada análise de variância para os dados paramétricos e teste de Kruskall-Wallis para as análises descritivas. Observou-se alterações morfológicas nas lamelas secundárias nas brânquias a partir de 0,15mg L-1, como hiperplasia, hipertrofia, deslocamento epitelial, fusão lamelar, edemas, aneurisma lamelar com ruptura do epitélio e aumento na largura das lamelas. Houve presença também de histopatológias no fígado a partir de 0,30 mg L-1 como congestão nos capilares, processos inflamatórios, pigmentação endógena e no tratamento com maior concentração os hepatócitos apresentaram necrose. Essas alterações causadas pelos processos de intoxicação prejudicaram as funções vitais, metabolização, os processos de respiração e desintoxicação do organismo, hematopoiese e provavelmente na osmorregulação.

A morfologia, os parâmetros citomorfométricos e os glicoconjugados presentes na pseudobrânquia de guaru, Poecilia reticulata Peter, 1859 (Cyprinodontiformes: Poeciliidae), foram investigados por microscopia de luz acoplada ao sistema de captura e análise de imagens, juntamente por histoquímica com lectinas. A anatomia microscópica indicou que P. reticulata possui pseudobrânquia glandular formada por dois lóbulos, a qual se localiza abaixo do epitélio faringiano. O órgão é constituído por parênquima vascularizado e rico em células pseudobranquiais. Esse tipo celular exibe estado citofisiológico ativo, com abundante sistema de biomembranas e ausência de óstio na superfície apical,que por sua vez é encontrado nas células ricas em mitocôndrias das holobrânquias. Assim, indica-se que as células da pseudobrânquia se distinguem das células das holobrânquias em relação à morfologia, histoquímica e fisiologia. Em decorrência dessas características intrínsecas, a pseudobrânquia de alevinos do guaru pode desempenhar funções não respiratórias nas fases iniciais do desenvolvimento. Além disso, a caracterização da pseudobrânquia do guaru possibilitará estudos futuros sobre o efeito de poluentes aquáticos em espécies biomonitoras, como P. reticulata. The morphology, cytomorphometric parameters, and glycoconjugates present in the pseudo-gill of guppy, Poecilia reticulata Peter, 1859 (Cyprinodontiformes: Poeciliidae), were investigated by light microscopy coupled to image capture and analysis system, and also by lectin histochemistry. The microscopic anatomy indicates that P. reticulata has a glandular pseudo-gill formed by two lobes, located underneath the pharynx epithelium. The organ is formed by vascularized parenchyma rich in pseudo-gill cells. This cell type exhibits active cytophysiological state with an abundant system of biomembranes and lacking of ostium in apical surface, which in turn is found in the mitochondria-rich cells of the holobranch. This indicates that the pseudo-gill cells distinguishe from the holobranch cells in their morphology, histochemistry and physiology. Due to these intrinsic characteristics, the pseudo-gill of guppy fingerlings may have non-respiratory function in the initial phase of their development. The characterization of guppy's pseudo-gill could facilitate further studies about the effect of water pollutants on biomonitor species, such as P. reticulata.

Este estudo relata a primeira ocorrência de protozoários nas brânquias de tamoatá Hoplosternum littorale (Hancock 1828) (Siluriformes: Callichthyidae) no Brasil. Dos espécimes examinados, no período de julho a agosto de 2011, 95,3% estavam com as brânquias parasitadas por protozoários Ichthyophthirius multifiliis (Ciliophora) e/ou Piscinoodinium pillulare (Dinoflagellida), sendo que os maiores índices de infecção foram causados por I. multifiliis. A abundância desses parasitos não foi influenciada pelo tamanho dos peixes e não afetou o fator relativo de condição (Kn) dos hospedeiros. Este é o primeiro relato de índices epidemiológicos para H. littorale na Amazônia brasileira.

No presente estudo, células branquiais do mexilhão de água doce Lasmigona costata e do marisco de água salgada Mesodesma mactroides foram isoladas, fracionadas, caracterizadas e utilizadas em ensaios toxicológicos com cobre (Cu). As células brânquiais do mexilhão e do marisco foram isoladas utilizando-se dissociação enzimática e mecânica do tecido, respectivamente. Para ambas as espécies, gradiente de densidade (Percoll) foi utilizado para separar as células isoladas em duas Frações (I e II). A presença de células ricas em mitocôndrias foi caracterizada na Fração II através de marcadores mitocondriais e da medida da atividade da Na+,K+-ATPase. A possibilidade de aplicação deste modelo biológico em estudos toxicológicos in vitro foi avaliada através da exposição das células da Fração II a concentrações ambientalmente relevantes de Cu (5, 9 e 20 µg/L) em condição isosmótica (840 mOsmol/Kg H2O). Para ambas as espécies, o Cu não induziu toxicidade letal, mas causou acumulação celular do metal e diminuição do conteúdo de Na+. De fato, uma correlação negativa entre estes parâmetros foi observada, sugerindo a competição do Cu com o Na+ por sítios de ligação na membrana plasmática. Posteriormente, foi realizada a exposição de células ricas em mitocôndrias de M. mactroides seguida da análise da viabilidade celular, do conteúdo iônico (Na+, K+, Ca2+, Mg2+ e Cl-) e da atividade de enzimas envolvidas na regulação iônica (Na+,K+-ATPase e anidrase carbônica), nas condições descritas acima. Foi observada redução no conteúdo de Na+, K+ e Mg2+ e inibição da atividade da anidrase carbônica após exposição a 20 µg Cu/L, sem efeito na viabilidade celular, nos conteúdos Ca2+ e Cl- e na atividade da Na+,K+-ATPase. Visto que a salinidade da água influencia a toxicidade do Cu, células ricas em mitocôndria de M. mactroides foram mantidas em condição isosmótica ou transferidas para meios hiposmóticos (730 e 670 mOsmol/Kg H2O) na ausência e na presença de Cu. Neste caso, foram avaliadas a viabilidade celular, o conteúdo de Cu e de Na+, bem como as atividades da Na+,K+-ATPase e anidrase carbônica. Na ausência de Cu, o choque hiposmótico reduziu a viabilidade celular e o conteúdo de Cu, sem alterar o conteúdo de Na+ e a atividade das enzimas. Na presença de Cu, houve acúmulo de Cu, redução do conteúdo de Na+ e inibição da atividade da anidrase carbônica em células expostas a 20 µg Cu/L em meio isosmótico. Na exposição em meio hiposmótico, houve acúmulo de Cu e inibição da atividade da anidrase carbônica nas células expostas a 9 µg Cu/L e redução do conteúdo de Na+ e inibição das atividades da Na+,K+-ATPase e anidrase carbônica nas células expostas a 20 µg Cu/L. Estes resultados indicam a viabilidade das técnicas empregadas para isolamento e fracionamento de células ricas em mitocôndria de brânquias de L. costata e M. mactroides, bem como o uso destas células em testes toxicológicos visando a compreensão do mecanismo de toxicidade do Cu em ambientes dulcícolas e marinhos. Além disso, indicam que o Cu é um tóxico ionorregulatório em bivalves de água doce e marinha e que não somente a química da água, mas também a fisiologia do animal é importante para previsão da toxicidade do Cu. Neste contexto, os resultados do presente estudo apontam a atividade da anidrase carbônica de células branquiais ricas em mitocôndrias de bivalves como um potencial biomarcador da exposição ao Cu em ambientes aquáticos. In the present study, gills cells from the freshwater mussel Lasmigona costata and the seawater clam Mesodesma mactroides were isolated, fractionated, characterized and employed in toxicological assays with copper (Cu). Mussel and clam gill cells were isolated employing enzymatic and mechanical dissociation, respectively. For both species, density gradient (Percoll) was employed to separate isolated cells into two Fractions (I e II). The presence of cells rich in mitochondria was characterized in the Fraction II through mitochondrial dyes and Na+,K+-ATPase activity measurement. The possible application of this biological model in in vitro toxicological studies was evaluated exposing cells of Fraction II to environmental relevant Cu concentrations (5, 9 and 20 µg/L) in isosmotic medium (840 mOsmol/Kg H2O). For both species, Cu exposure did not induce lethal toxicity, but caused cellular accumulation of Cu and reduction in Na+ content. A negative correlation between these parameters was observed, suggesting a competition between Cu a Na+ for binding sites on the plasma membrane. Following this experiment, cells rich in mitochondria isolated from gills of M. mactroides were exposed to Cu under the experimental conditions described above and cellular viability, ionic content (Na+, K+, Ca2+, Mg2+ and Cl-), and the activity of enzymes involved in ionic regulation (Na+,K+-ATPase and carbonic anhydrase) were analyzed. Reduced Na+, K+ and Mg2+ content and inhibition of carbonic anhydrase activity was observed in cells exposed to 20 µg Cu/L, without changes in cell viability, Ca2+ and Cl- contents, and Na+,K+-ATPase activity. Because water salinity can influence Cu toxicity, cells rich in mitochondria of M. mactroides were maintained in isosmotic medium or transferred to hypoosmotic media (730 e 670 mOsmol/Kg H2O) for 3 h, in the absence or the presence of Cu. In this case, cell viability, Cu and Na+ contents, and enzyme activity (Na+,K+-ATPase and carbonic anhydrase) were analyzed. In the absence of Cu, the hypoosmotic shock reduced cell viability and Cu content, without effects on Na+ content and enzymes activities. In the presence of Cu, there was Cu accumulation, reduction in Na+ content and inhibition of the carbonic anhydrase activity in cells exposed to 20 µg Cu/L in isosmotic medium. In the hypoosmotic media, there were Cu accumulation and inhibition of the carbonic anhydrase activity in cells exposed to 9 µg Cu/L and decrease in Na+ content and inhibition of the activity of both Na+,K+-ATPase and carbonic anhydrase in cells exposed to 20 µg Cu/L. These findings indicate the viability of techniques employed to isolate and fractionate cells rich in mitochondria from gills of L. costata and M. mactroides, as well as their use in toxicological assays aiming to understand the mechanism of Cu toxicity in freshwater and seawater environments. Also, they indicate that Cu is an ionoregulatory toxicant in freshwater and seawater bivalves and suggest that not only the water chemistry, but animals physiology is important in predicting Cu toxicity. In this context, results from the present study point out the carbonic anhydrase activity of gill cells rich in mitochondria from bivalves as a potential biomarker of Cu exposure in aquatic environments.

O mecanismo de toxicidade aguda da formulação comercial de glifosato, Roundup Transorb® (RDT), foi investigado para as brânquias do guaru (Poecilia reticulata) por meio de tecnologias proteômicas associadas às análises dos índices histopatológicos (HI´s), seguido da quantificação das lesões histopatológicas branquiais. Além disso, o presente trabalho também descreve um protocolo para análise do comportamento de peixes utilizando mensurações dos Índices de Comportamento Morfofuncional (Icmf) e Total (Ict). Os resultados indicam que a toxicidade aguda do RDT pode alterar o comportamento de P. reticulata como reflexo das mudanças de expressão das proteínas associadas às lesões cito-histopatológicas branquiais. A CL50,96h do RDT para as fêmeas do guaru foi de 7,54 ± 0,93 μL.L-1, a qual indica que esta espécie é moderadamente sensível a esse herbicida. A exposição aguda à concentração subletal de 3,8 μL.L-1 de RDT induziu lesões histopatológicas branquiais de modo tempo dependente em diferentes tipos celulares epiteliais e muscular. Os HI´s foram relacionados com o aumento da severidade e da frequência das lesões histopatológicas e apontam que o RDT pode causar distúrbios regressivos, circulatórios e progressivos nas brânquias do guaru. A eletroforese bidimensional associada à espectrometria de massa e bioinformática permitiu verificar 48 spots de proteínas/isoformas reguladas pelo RDT, as quais estão envolvidas em distintos processos celulares, tais como metabolismo energético, regulação e manutenção do citoesqueleto, metabolismo de ácidos nucléicos e proteínas de resposta ao estresse. O estudo dos biomarcadores (BM´s) comportamentais indica que o Icmf e o Ict foram viáveis na análise das alterações comportamentais de P. reticulata induzidas pelo RDT. Ademais, as modificações proteômicas e histológicas nas brânquias de P. reticulata induzidas pelo RDT podem ser BM´s histopatológicos e proteômicos no biomonitoramento da poluição aquática por herbicidas baseados em glifosato. The mechanism of acute toxicity of the commercial formulation glyphosate, Roundup Transorb® (RDT), was investigated in the guppy (Poecilia reticulata) gills using proteomic technologies associated with analyses of histopathological indexes (HI´s), followed by quantification of histopathological lesions of the gills. Additionally, the present study describes a protocol for the analysis of fish behavior using measurements of the Index of morphofunctional behavior (Imb) and Total (Itb). The results indicate that the acute toxicity of RDT may change P. reticulata behavior as a consequence of changes in the expression of proteins associated with cyto-histopathological lesions of the gills. RDT LC50,96h for guppy females was 7.54 ± 0.93 μL.L-1, indicating that the species is moderately sensitive to this herbicide. Acute exposure to RDT sublethal concentration of 3.8 μL.L-1 induced time-dependent histopathological lesions of the gills in different epithelial and muscle cell types. HI´s were related to increase in severity and frequency of histopathological lesions and suggest that RDT may cause regressive, circulatory, and progressive disorders in the guppy gills. Two-dimensional electrophoresis associated with mass spectrometry and biocomputing permitted to verify 48 spots of proteins/isoforms regulated by RDT, which are involved in different cell processes, such as energy metabolism, regulation and maintenance of cytoskeleton, metabolism of nucleic acids and proteins in response to stress. The study of behavior biomarkers (BM´s) indicates that Imb and Itb were viable in the analysis of P. reticulata behavioral changes induced by RDT. Furthermore, proteomic and histological changes in the gills of P. reticulata induced by RDT may be histopathological and proteomic BM´s to biomonitor water pollution caused by glyphosate-based herbicides.

Animais que habitam ambientes aquáticos costeiros devem apresentar mecanismos para a manutenção de sua homeostase para tolerar as alterações recorrentes que ocorrem nestes ambientes. Entre essas alterações estão variações na salinidade e, algumas vezes, a presença de contaminantes, como o metal cobre. A manutenção da homeostase requer energia, fazendo com que os animais aumentem a produção de ATP através da estimulação das vias metabólicas responsáveis pela sua geração, como a via glicolítica e o ciclo de Krebs. Dessa maneira, é de extrema importância conhecer como a salinidade e o cobre interferem no metabolismo energético de animais aquáticos costeiros, em especial em espécies representantes de diferentes grupos abundantes nestes ambientes e que possuem características fisiológicas especificas, como os crustáceos, os peixes e os equinodermos. Em vista disso, o objetivo desta tese foi avaliar os efeitos do cobre no metabolismo energético no caranguejo Neohelice granulata, no peixe Fundulus heteroclitus e no pepino-domar Trachythyone crassipeda. Foram selecionadas enzimas consideradas marcapasso da via glicolítica (hexoquinase, fosfofrutoquinase e piruvato quinase) e do ciclo de Krebs (citrato sintase ou isocitrato desidrogenase). Além disso, a enzima lactato desidrogenase também foi avaliada já que em situações de hipóxia, ela passa a ser uma importante via de reciclagem de NAD+. O órgão escolhido para analise foram as brânquias (caranguejo e peixe) e árvores respiratórias (pepino-do-mar) por serem o órgão que está em maior contato com a água, sendo mais susceptíveis à acumulação de cobre e estarem associadas com a iono e osmorregulação em peixes e crustáceos e com a excreção de amônia em crustáceos e holotúrias. O caranguejo N. granulata foi exposto (96 h) ao cobre nas salinidades 2 (1 mg Cu/L) e 30 (5 mg Cu/L) e, além das enzimas citadas anteriormente, também foram avaliados o potencial de membrana mitocondrial e atividade da citocromo c oxidase de mitocôndrias branquiais isoladas. Em geral, os resultados mostraram que o cobre afeta os parâmetros analisados, sendo mais tóxico em brânquias anteriores de caranguejos aclimatados à salinidade. No peixe F. heteroclitus, foi avaliado o efeito da exposição aguda ao cobre (30µg/L) por 96 h em peixes aclimatados a diferentes salinidades (0; 3,5; 11; e 35). Nesta espécie, um efeito mais toxico do cobre foi observado nos animais aclimatados à água doce. Isto sugere que, além de um efeito direto do cobre sobre a enzima Na+,K+- ATPase como observado em outros estudos, o metal causa um efeito indireto, já que uma menor quantidade de ATP está disponível para o funcionamento da bom de sódio-potássio. Os peixes de água salobra (salinidades 3,5 e 11) também podem estar com suas reservas energéticas depletidas, pois o cobre diminui a atividade da isocitrato desidrogenase. Em relação aos peixes de água salgada o mecanismo de toxicidade do cobre é outro que não um efeito sobre a iono/osmorregulação ou o metabolismo energético. O pepino-do-mar T. crassipeda foi exposto (96 h) a diferentes concentrações de cobre (0, 5, 9, e 20 µg Cu/L) na salinidade 33. A exposição a todas as concentrações de cobre testadas acarretou em um aumento da atividade da piruvato desidrogenase sugerindo uma situação similar à estivação, onde ocorre uma mudança do substrato energético preferencial em pepinos-do-mar. Além disso, a diminuição da atividade da lactato desidrogenase provocada pela exposição a todas as concentrações de cobre testadas é extremamente danosa a animais de baixo metabolismo, que tendem a obter energia preferencialmente por via anaeróbica. Com base nos resultados apresentados nesta tese, pode-se concluir que a exposição aguda a concentrações subletais do metal afeta o metabolismo energético, em especial a via glicolítica, nos animais estuarinos (caranguejo N. granulata e peixe F. heteroclitus) e marinhos (pepino-do-mar T. crassipeda) estudados, porém a extensão e o tipo de alteração variam conforme a espécie estudada e não é possível identificar um padrão único de resposta dos diferentes grupos animais (equinodermos, crustáceos e peixes) ao metal como é observado em animais de água doce. The estuarine crab Neohelice granulata was exposed (96 h) to a sublethal copper concentration under two different physiological conditions (hyperosmoregulation: water salinity 2 ppt, 1 mg Cu/L; isosmotic: salinity 30 ppt, 5 mg Cu/L). After exposure, gills (anterior and posterior) were dissected and activities of enzymes involved in glycolysis (hexokinase, phosphofructokinase, pyruvate kinase, lactate dehydrogenase), Krebs cycle (citrate synthase), and mitochondrial electron transport chain (cytochrome c oxidase) were analyzed. Membrane potential of mitochondria isolated from anterior and posterior gill cells was also evaluated. In anterior gills of crabs acclimated to 2 ppt, copper exposure inhibited hexokinase, phosphofructokinase, pyruvate kinase, and citrate synthase activity, increased lactate dehydrogenase activity, and reduced the mitochondria membrane potential. In posterior gills, copper inhibited hexokinase and pyruvate kinase activity, and increased citrate synthase activity. In anterior gills of crabs acclimated to 30 ppt, copper exposure inhibited phosphofructokinase and citrate synthase activity, and increased hexokinase activity. In posterior gills, copper inhibited phosphofructokinase and pyruvate kinase activity, and increased hexokinase and lactate dehydrogenase activity. Copper did not affect cytochrome c oxidase activity in either anterior or posterior gills of crabs acclimated to salinities 2 and 30 ppt. These findings indicate that exposure to a sublethal copper concentration affects the activity of enzymes involved in glycolysis and Krebs cycle, especially in anterior (respiratory) gills of hyperosmoregulating crabs. Changes observed indicate a switch from aerobic to anaerobic metabolism, characterizing a situation of functional hypoxia. In this case, reduced mitochondrial membrane potential would suggest a decrease in ATP production. Although gills of isosmotic crabs were also affected by copper exposure, changes observed suggest no impact in the overall tissue ATP production. Also, findings suggest that copper exposure would stimulate the pentose phosphate pathway to support the antioxidant system requirements. Therefore, despite N. granulata is very tolerant to copper, acute exposure to this metal can disrupt the energy balance by affecting biochemical systems involved in carbohydrate metabolism.

Made available in DSpace on 2022-04-28T22:37:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-01 A histological analysis was conducted on the gills of 15 Piaractus mesopotamicus and 19 Prochilodus lineatus specimens collected between April and November 2004 from the Aquidauana River, State of Mato Grosso do Sul, Central-West Brazil, to describe the anatomopathological characteristics of the gills of these freshwater fish. Gill samples were fixated in 10% buffered formalin and processed following histological routine procedures. The histological examination of the gills of P. mesopotamicus revealed intralamellar monogenean and mixosporean cysts of Henneguya piaractus at several developmental stages over the entire (basal, median and distal) lamella. Intraepithelial cysts caused lamella dilation and deformity of adjacent lamellae. In P. lineatus gills, monogenean cysts were detected. In both host species, hyperplasia of the gill epithelium and structural disorganization of secondary lamellae was seen diffusely in the gills, leading to fused lamellae in the gills. In few cases, there was found mononuclear inflammatory cells and hemorrhagic focal points distally in the lamellae. Unidade Universitária de Aquidauana Universidade Estadual de Mato Grosso do Sul - UEMS Departamento de Patologia Veterinária Centro de Aqüicultura Universidade Estadual Paulista - UNESPCristiane Meldau de Campos Departamento de Patologia Veterinária Centro de Aqüicultura Universidade Estadual Paulista - UNESPCristiane Meldau de Campos

Specialized literature has demonstrated, in Decapods, that anterior gills are morphologically and physiologically adapted for gas exchange and breathing, while the posterior gills are specialized for osmorregulation. The goal of this work was to analyze the seasonal variations of the intermediate metabolism of the gills of Parastacus varicosus, relating variation of these metabolites with ecological and behavioral factors of the animal and abiotics factors. Crayfishes were collected from June/2004 until May/2005 in Gravataí, Rio Grande do Sul State, Brazil. Gills were removed and separated in anterior and posterior parts for determination of the levels of glycogen, proteins and lipids. The results were analyzed with ANOVA followed by Bonferroni test. For the comparision between males and females and anterior and posterior gills was used the two-way ANOVA test. Both tests were made with a significant level of 0.05 in the Statistical Package for the Social Sciences (SPSS-11.5) software. The results showed a bigger consumption of the glycogen and lipids in the males in relation to the females for anterior gills. This pattern can be related to the agonist behaviors of the males and the increase of the activity of exploration of the environment mainly in search of reproductive partners. The gills of P. varicosus act in different way in relation to its position (anterior and posterior) and sex, showing a clear seasonal variation. The storage and the consumption of the metabolites in each season differ between the sexes and the localization of the gills. These differences can be occurring due to environmental factor, behavioral or the addition of both of these factors., A literatura especializada tem demonstrado, em Decapoda, que as brânquias anteriores estão morfologicamente e fisiologicamente adaptadas a trocas de gases e respiração; já as posteriores são especializadas para osmorregulação. Este trabalho tem como objetivo analisar as variações sazonais do metabolismo intermediário das brânquias de P. varicosus, relacionando a variação destes metabólicos com fatores ecológicos e comportamentais do animal e fatores abióticos. Os lagostins foram coletados de Junho/2004 a Maio/2005 em Gravataí, Rio Grande do Sul, Brasil. As brânquias foram removidas e separadas as anteriores das posteriores para a determinação dos níveis de glicogênio, proteínas e lipídios. Ao compararmos os sexos, observa-se que as brânquias anteriores apresentam um comportamento diferencial ao longo do ano; padrão semelhante foi encontrado para as posteriores quando considerados os níveis de glicogênio, proteínas e lipídios. Foi observada também, uma variação na composição bioquímica das brânquias anteriores e posteriores entre as estações. Os resultados mostram um maior consumo de glicogênio e lipídios nos machos em relação às fêmeas somente para brânquias anteriores. Esta resposta pode estar relacionada a comportamentos agonistas dos machos e ao aumento da atividade de exploração do meio ambiente principalmente em busca de parceiras reprodutivas. As brânquias de P. varicosus atuam de maneira diferente quanto a sua posição (anterior e posterior) e quanto ao sexo; apresentando clara variação sazonal. O armazenamento e o consumo dos metabólitos em cada estação diferem tanto entre os sexos e quanto à localização das brânquias, tais diferenças podem estar ocorrendo por fatores ambientais, comportamentais ou pela soma destes fatores.

Heavy metals occur naturally in the environment, however anthropogenic activities can cause an increase of metals in the ecosystems, threatening the health of aquatic and terrestrial organisms, including men. Thus, the aim of this study was to determine the contamination by heavy metal of teleost fish from Piracicaba River (MG) and its effects on biomonitoring, aiming to provide a tool for measuring environmental quality. Specimens were collected in two locations of Piracicaba River, placed in Timóteo city, Minas Gerais state, Brazil. Sixty-three specimens were collected in three different collection days, 40 specimens were collected in location 1 and the remainder in location 2. Specimens were euthanized, and muscle, gills, liver, gonads were collected. Concentration of heavy metals was assessed in all tissues collected from all species. However, histopathological analyses were performed only in gills, liver and testes from two species: Astyanax bimaculatus and Geophagus brasiliensis. The concentration of aluminum (Al) (259,15 μg g-1 DW) in muscle fragments was the highest, followed by lead (Pb) (141,49 μg g-1 DW), zinc (Zn) (50,41 μg g-1 DW) and manganese (Mn) (14,91 μg g-1 DW). Of note, the concentrations of Pb and Zn detected in the muscle of the fish collected exceeded the safe limits established by the Health Ministry of Brazil. Regarding the season of the year, the concentration of metals in muscle was the highest during winter (174, 87 μg g-1 DW), followed by autumn (145, 07 μg g-1 DW) and then summer (29, 53 μg g-1 DW). The species G. brasiliensis presented more histopathological alterations, compared to A. bimaculatus, even though the latter presented larger concentration of metals. The metal Pb was the highest concentrated in both species. The higher histopathological response of G. brasiliensis permits us to suggest this species as a suitable indicator of environmental quality of the Piracicaba River. The values for hepatosomatic index of these two species were higher for the specimens from the river compared to the controls, and this may have occurred in response to the contamination of the river. The testes of these two species collected in the river presented higher concentration of metals, compared to controls. Of note, Pb was the highest concentrated metal in the testes of both species. The gonadosomatic index (IGS) of the two species from the control group was higher than the IGS of the specimens collected in the river, and these smaller values can be correlated to the higher concentration of metals in this group, what may be impairing the spermatogenic process. In conclusion, the fish specimens from the Piracicaba River presented the concentration of all metals in their muscle; some values were above the safe limits established by the Health Ministry, what represents a risk to people who ingest this fish. The histopathological alterations detected in the analyzed tissues permits us to infer that the environment is contaminated and that the alterations were produced in response to direct exposure to this environment, leading to the impairment of health and reproductive processes of fish that inhabit it. Metais pesados ocorrem naturalmente no ambiente, entretanto atividades antropogênicas provocam aumento destes nos ecossistemas aquáticos, o que ameaça a saúde dos organismos aquáticos e terrestres, inclusive o homem. Assim, objetivou-se determinar a contaminação por metais pesados e seus efeitos através do biomonitoramento de peixes teleósteos do rio Piracicaba (MG), visando à obtenção de um instrumento medidor da qualidade ambiental. As coletas dos espécimes foram realizadas em dois pontos ao longo do rio Piracicaba, situados na cidade de Timóteo. Foram coletados 63 espécimes ao longo de 3 coletas, sendo que 40 espécimes foram coletados no ponto 1 e o restante no ponto 2. Fragmentos de músculo, brânquias, fígado e gônadas foram coletados de todos os espécimes, mas as análises histopatológicas foram realizadas nas brânquias, fígado e testículos somente de duas espécies coletadas: Astyanax bimaculatus e Geophagus brasiliensis. Em relação à concentração dos metais nos fragmentos musculares, houve maior concentração de alumínio (Al) (259,15 μg g-1 MS), seguido pela concentração de chumbo (Pb) (141,49 μg g-1 MS), zinco (Zn) (50,41 μg g-1 MS) e manganês (Mn) (14,91 μg g-1 MS), sendo que as concentrações de Pb e Zn detectadas nos músculos dos peixes excederam o limite máximo de tolerância estabelecido pelo Ministério da Saúde. A concentração total dos metais analisados no músculo foi maior no inverno (174, 87 μg g-1 MS), seguido pelo outono (145,07 μg g-1 MS) e então o verão (29,53 μg g-1 MS). O G. brasiliensis apresentou resposta histopatológica mais expressiva que A. bimaculatus, mesmo sendo detectada maior concentração de metais no A. bimaculatus em relação a G. brasiliensis. O Pb foi o metal que apresentou maior concentração em ambas as espécies. A maior resposta histopatológica em G. brasiliensis coloca esta espécie como potencial bioindicadora da qualidade ambiental do rio Piracicaba. O índice hepatossomático destas duas espécies foi maior nos espécimes do rio comparado aos espécimes controle, fato este que pode ter ocorrido em resposta à contaminação do rio. Houve alta concentração de metais nos testículos destas duas espécies coletadas no rio Piracicaba, comparando-se com as do grupo controle, sendo o Pb o metal que apresentou maior concentração em ambas as espécies. O índice gonadossomático (IGS) médio dos controles foi maior do que o IGS dos espécimes coletados, o que pode estar correlacionado com a grande concentração de metais nas gônadas, o que provavelmente prejudicou o processo espermatogênico, bem como no peso testicular. Pode-se concluir que os espécimes de peixes do rio Piracicaba apresentaram altas concentrações teciduais de todos os metais analisados, sendo que algumas destas se encontram acima do limite de tolerância estabelecida pelo Ministério da Saúde, representando risco à saúde dos consumidores deste pescado. É possível afirmar que as alterações histológicas detectadas nos órgãos analisados revelam que o ambiente está contaminado e que estas foram produzidas em resposta a exposição direta a este ambiente, refletindo num comprometimento da saúde e do processo reprodutivodos peixes que o habitam.

Os efeitos histopatológicos do cádmio nas brânquias de tilápia Oreochromis niloticus foram estudados por microscopia óptica, usando 25mgl-1 de CdCl2 durante quatro dias, com o objetivo de identificar seus efeitos agudos na estrutura das brânquias. A morfologia geral das brânquias de O. niloticus é idêntica à de outros teleósteos, apresentando quatro pares de arcos branquiais com filamentos bem desenvolvidos. Situadas lateralmente, encontram-se as lamelas provenientes do eixo central dos filamentos. No epitélio filamentar foi possível identificar células de cloro, pavimentosas e mucosas. Os peixes expostos ao cádmio mostraram sinais de lesões epiteliais; edema intersticial, vasodilatação das lamelas, destacamento do epitélio lamelar e proliferação do epitélio filamentar. As alterações observadas também incluíram fusão nas lamelas como resultado de hiperplasia e hipertrofia epitelial, ruptura do sistema de células pilar, aneurismas e necroses. The histopathogical effects of cadmium on the gills of tilapia Oreochromis niloticus were studied by light microscopy, using 25mgl-1 of CdCl2 during four days to identified the effects of short-term exposure on gills structure. The general morphology of O. niloticus gills is similar to the other teleostean fishes, showing four pairs of gills arches with well developed filaments. Bilaterally situated, secondary lamellae branches are found from the central axis of the filaments. The filamentar epithelium showed the chloride cells, the pavement cells and mucous cells. Fish exposed to cadmium showed signs of epithelial lesion, namely the interstitial edema, swollen of the lamellae, lifting and cellular proliferation of the filamentar epithelium. The changes of the gills also included lamellar fusion as a result of epithelial hyperplasia and hypertrophy, the breakdown of pillar cell system, and aneurisms with some ruptures and necrosis, especially in the filamentar epithelium.

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:21:55Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:34:46Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-68349164888.pdf: 698004 bytes, checksum: de4cb1bd3203e4d8e2312055554d5366 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:21:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-07-01 This work described the lesions caused in different species of fish by gill parasites from fee-fishing at Guariba, State of São Paulo. The research was developed from april, 1997 to march to 1999, seeking to verified the kind tissues lesions from fish. Of these, forty and seven were Leporinus macrocephalus and fifty and five Piaractus mesopotamicus. About 87.2% of the L. macrocephalus, and 58.1% of the P. mesopotamicus were sponged by several species of parasites. The parasite most abundant in L. macrocephalus was Piscinoodinium pillulare, while monogenean, Trichodina sp and myxosporidian infected P. mesopotamicus. Severe gill lesions have been observed in L. macrocephalus and P. mesopotamicus caused by monogenean, P. pillulare e Trichodina sp. parasitism, such as intersticial hemorrhage, sub-epithelium edema, inflammation, epitelial hiperplasy in filaments and lamina, proliferation of mucosal cells and laminar fusion.

Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-27T11:21:38Z No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-05-27T14:29:31Z : No. of bitstreams: 1 2-s2.0-33745556562.pdf: 452065 bytes, checksum: bbd40ee55096c24d690b4443f54463ce (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-27T11:21:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-10-01 This study was accomplished with the objective of knowing the seasonal distribution of the main species of parasites causes of branchial damages to the fish from fee-fishing at Guariba, State of São Paulo. This city is situated at 21 degrees 15'22'' S, 48 degrees 18'58'' W, in altitude 595 meters. This research was conducted between April, 1997 to March, 1999. From 408 fishes examined, 29.1% of them were infested by the protozoans e metazoans. Leporinus macrocephalus showed the highest parasitism by Trichodina sp., although Piaractus mesopotamicus and Cyprinus carpio were also parasited. Piscinoodinium pillulare infestation were found in L. macrocephalus, P. mesopotamicus, C. carpio e Colossoma macropomum. Monogenetics metazoan have largely been observed in L. macrocephalus, P. mesopotamicus, C. carpio, C. macropomum e cross-bred tambacu. The incidence of this parasite was elevated in the summer for L. macrocephalus, spring for P. mesopotamicus and C. macropomum, and both seasons for cross-bred tambacu. Lernaea cyprinacea copepodes were observed in L. macrocephalus, P. mesopotamicus, C. carpio and cross- breeding tambacu, in spite of the fact that C. carpio has demonstrated high parasitism of adult form. The fish L. macrocephalus, P. mesopotamicus and C. carpio were sponged intensely by Dolops carvalhoi, in situation of high population density. Piaractus mesopotamicus was considered the species more parasited by myxosporídeos, that were also observed in L. macrocephalus and cross-breeding tambacu.

Várias plantas nativas do bioma Cerrado são utilizadas como plantas medicinais. Dentre elas, o pequi possuí ação moluscicida utilizada no combate a esquistossomose. Objetivamos neste trabalho a verificação da toxicidade de frações de pequi sobre outros organismos aquáticos, antes da utilização destas em mananciais. Para isso, analisamos alterações no índice mitótico das células epiteliais das brânquias de Guaru (Poecilia vivipara) expostas às frações da folha e da casca do caule de pequi extraídas com acetato de etila. Constatamos que nenhuma das frações se mostrou letal aos peixes. Os animais expostos à fração acetato de etila da folha não apresentaram modificações significativas no índice mitótico em relação ao grupo controle, mas os animais expostos à fração acetato de etila da casca do caule apresentaram aumento do índice mitótico das células epiteliais em duas regiões dos filamentos branquiais. Desta forma, a fração acetato de etila da folha poderia ser utilizada como moluscicida em mananciais, enquanto que a fração acetato de etila da casca do caule necessitaria passar por outros testes mais específicos. Many wild plants of the Cerrado bioma are used as medicinal plants. The pequi (Caryocar brasiliensis) is representative of those equipped with molluscicidal action against schistosomiasis. This paper sets out to verify the toxic action of pequi fractions in other aquatic animals before they are used in rivers or lakes. Analysis were made of the alterations to the mitotic index of epithelia cells in the gills of guppy (Poecilia vivipara) exposed to ethyl-acetate fraction of leaf pequi and bark. Animals exposed to ethyl-acetate fraction (leaf), no significant change was observed in the mitotic index when compared with the control group, whereas in fish exposed to ethyl-acetate fraction (bark) we detected an increase in mitotic index of the epithelia cells in two regions of the branchial filaments. Thus, ethyl-acetate fractions (leaf) could be used against schistosomiasis, given their high efficacy and low action as piscicide.