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Submitted by Natalia Cristine Dias Dos Santos null (santos.nataliacris@gmail.com) on 2018-01-04T14:17:17Z No. of bitstreams: 1 Dissertação.pdf: 3720898 bytes, checksum: 25acdc7e7879412ae2dcd73e6d9407ea (MD5) Approved for entry into archive by Laura Akie Saito Inafuko (linafuko@assis.unesp.br) on 2018-01-08T15:30:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 santos_ncd_me_assis.pdf: 3720898 bytes, checksum: 25acdc7e7879412ae2dcd73e6d9407ea (MD5) Made available in DSpace on 2018-01-08T15:30:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 santos_ncd_me_assis.pdf: 3720898 bytes, checksum: 25acdc7e7879412ae2dcd73e6d9407ea (MD5) Previous issue date: 2017-11-09 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Vários estudos têm apontado que a interação de plasma rico em plaquetas (PRP) com células-tronco mesenquimais de tecido adiposo humano (CT-TAs) é capaz de otimizar o processo regenerativo, estimulando a angiogênese e o recrutamento de células para o local da lesão. O avanço no conhecimento sobre os aspectos físico-químicos do gel de PRP, bem como na interação e no comportamento das CT-TAs quando associadas ao gel poderão resultar em aplicações práticas em processos de regeneração tecidual. Em função disso, objetivou-se analisar diferentes parâmetros relativos a aspectos morfológicos, físico-químicos e estrutural do gel de PRP isolado ou em associação com CT-TAs (PRP/CT-TAs). As análises dos géis foram realizadas por meio da microscopia eletrônica de varredura (MEV) e da técnica de espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier (FTIR). Também foi avaliada a viabilidade e migração das CT-TAS após associação ao gel de PRP. Os resultados mostraram que as CT-TAs continuam viáveis, mantendo suas propriedades, assim como o gel de PRP, após a associação. Não foram observadas alterações estruturais nos géis de PRP isolado e PRP/CT-TAs, preservando os perfis físico-químicos das amostras. Concomitantemente com estes resultados, observou-se que o gel de PRP pode proporcionar um ambiente favorável às células, permitindo proliferação e migração celular. Os resultados obtidos permitem concluir que o gel de PRP pode ser usado como um potencial scaffold, mantendo as células viáveis quando encapsuladas, preservando os aspectos físico-químicos das CT-TAs e do PRP quando em associação. Além disso, pode-se propor que gel de PRP exerce efeitos positivos sob as CT-TAs, estimulando a proliferação e a viabilidade celular. Several studies have shown that the platelet-rich plasma (PRP) in association with human adipose-derived mesenchymal stem cells (h-AdMSCs) is able to optimize the regenerative process, stimulating angiogenesis and the recruitment of cells to the lesion site. Advancing in the knowledge of the physico-chemical aspects of PRP-gels, as well as in the interaction and behavior of h-AdMSCs when associated to the gel will result in practical applications in tissue regeneration processes. Therefore, the aim of this study was to evaluate different morphological, physic-chemical and structural parameters of the isolated PRP-gel or in association with h-AdMSCs (PRP/h-AdMSCs). The PRP-gels were submitted to scanning electron microscopy (SEM) and Fourier transform infrared spectroscopy technique (FTIR). The h-AdMSCs viability and migration after association with the PRP-gel were also evaluated. The results showed that as h-AdMSCs remain viable, retaining their properties, as the PRP gel, after association. There were no structural changes in the PRP gels isolated and PRP/h-AdMSCs, so maintaining the physical-chemical profiles of the samples. Additionally to these results, it was observed that the PRP-gel can provide a favorable environment for cells, allowing its proliferation and migration. In summary, it is possible to conclude that PRP-gel can be used as a potential scaffold, maintaining cell viability when encapsulated and preserving the physical-chemical aspects of h-AdMSCs and PRP when in association. In addition, it may be proposed that PRP gel exert chemotatic effects for h-AdMSCs, stimulating cell proliferation and viability.

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina Veterinária A aplicação de plasma rico em plaquetas (PRP) constitui um tratamento promissor na reparação de lesões devido aos efeitos benéficos das plaquetas, dos fatores de crescimento e de outras moléculas biológicas nos mecanismos fisiológicos de cicatrização e regeneração tecidular. Porém, atualmente não existe consenso quanto ao valor biológico do PRP, bem como das características ideais para a sua aplicação, o que não é surpreendente dado o número de variáveis que influenciam a obtenção deste produto biológico e do potencial destas poderem interagir entre si, incluindo as variáveis do protocolo de preparação. Não obstante, o interesse no PRP tem vindo a aumentar na Medicina Veterinária, existindo, ainda, poucas referências à sua preparação em algumas espécies, como é o caso do gato. Assim, este trabalho teve como objetivo rever os princípios da terapia por PRP e otimizar um protocolo de produção de PRP em gatos, através do estudo das variáveis inerentes à sua preparação laboratorial (número de centrifugações, força e tempo de centrifugação) na eficácia de concentração de plaquetas. Adicionalmente, foram realizadas contagens de células sanguíneas de forma a caracterizar o PRP obtido. Concluiu-se que, através da metodologia usada, não foi possível concentrar plaquetas e que, dentro dos limites deste trabalho, uma única “rotação branda” (