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Submitted by MARIA ISABEL AMAYA ARBELAEZ (maria.isabel-amaya-arbelaez@unesp.br) on 2021-01-20T02:32:05Z No. of bitstreams: 1 Análise da expressão de proto-oncogenes e genes supressores tumorais em células epiteliais orais normais e neoplásicas promovida por metabólitos de biofilmes simples e misto de Candida al.pdf: 1912565 bytes, checksum: 3dbadfaa96e018a859b8bfc4f04540bf (MD5) Approved for entry into archive by Ceres Maria Carvalho Galvão de Freitas null (ceres@foar.unesp.br) on 2021-01-20T12:48:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 amaya arbeláez_mi_dr_arafo_int.pdf: 1912565 bytes, checksum: 3dbadfaa96e018a859b8bfc4f04540bf (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-20T12:48:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 amaya arbeláez_mi_dr_arafo_int.pdf: 1912565 bytes, checksum: 3dbadfaa96e018a859b8bfc4f04540bf (MD5) Previous issue date: 2020-12-09 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) A microbiota oral desempenha um papel importante, tanto no microbioma humano como na saúde. Os micro-organismos presentes na cavidade bucal têm a capacidade de produzir metabólitos e toxinas, gerando relação disbiótica com o hospedeiro e levando ao desenvolvimento de diversas patologias. A inflamação crônica produzida pelo estímulo bacteriano, a inibição da apoptose e produção de espécies reativas de oxigênio, tem sido descritos como mecanismos de ação da microbiota oral na tumorigênese de cabeça e pescoço. Dados do nosso grupo de pesquisa evidenciam que metabólitos derivados de biofilmes simples e misto de Candida albicans e Staphylococcus aureus, são capazes de promover resposta inflamatória e morte celular de queratinócitos orais normais. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi analisar a expressão de proto-oncogenes e genes supressores tumorais em células epiteliais orais normais (NOK-si) e neoplásicas (SCC 25 e Detroit 562) estimuladas com metabólitos (fatores solúveis) provenientes de biofilmes simples e mistos de C. albicans e S. aureus. Para a obtenção dos fatores solúveis (FS) produzidos pelos micro-organismos, foram formados biofilmes jovens e maduros simples e mistos de C. albicans e S. aureus, com 16 e 36 horas de cultivo, respectivamente. Os FS foram coletados e incubados com as células epiteliais orais. Primeiramente, foi realizado o ensaio de viabilidade celular por AlamarBlueTM e a morfologia celular foi observada por microscopia confocal para determinar o tempo de exposição das linhagens celulares aos FS dos biofilmes. Realizou-se a análise de perfil do ciclo celular por citometria de fluxo. A análise da expressão de proto-oncogenes e genes supressores tumorais foi realizada por qRT-PCR. Em geral, a exposição aos FS de biofilmes de C. albicans e misto causou redução na viabilidade das células NOK-si e aumento na fase sub G0 do ciclo celular, com diminuição da expressão gênica em HRAS, BRAF, MEK1, AKT, mTOR,TP53, CDKN1A, CDKN1B. No entanto, nesta linhagem, os FS de biofilmes simples de S. aureus produziram uma superexpressão do gene CDKN1A e Bcl-2, seguido pela manutenção da viabilidade celular, e um aumento significativo da população G2/M. Nas células tumorais, SCC 25 e Detroit 562, os estímulos dos FS provenientes dos biofilmes, regularam positivamente proto-oncogenes como HRAS e mTOR, bem como a superexpressão de Bcl-2 e CDKN1A. As células tumorais apresentaram capacidade de sobrevivência mesmo após 24 h de estímulo com FS de 16 h e 36 h, sem mudanças significativas na progressão do ciclo celular para a linhagem SCC 25 e com uma tendência significativa de aumento de fase G2/M, para a linhagem Detroit 562. Os resultados mostraram que metabólitos provenientes de biofilmes fúngicos e bacterianos de C. albicans e S. aureus, tanto jovens como maduros, são capazes de geram alterações ligadas ao processo de tumorigênese, devido à capacidade de promover alterações na viabilidade, dinâmica do ciclo celular e na expressão de genes pro-tumorais e supressores tumorais em linhagens epiteliais orais normais e neoplásicas. The oral microbiota plays an important role both in the human microbiome and in health. The microorganisms present in the oral cavity are able to produce metabolites and toxins, generating a dysbiotic relationship with the host and leading to the development of different pathologies. Thus, the aim of this study, was to analyze the expression of proto-oncogenes and tumor suppressor genes in oral epithelial cells, normal (NOK-si), and neoplastic (SCC 25 and Detroit 562) stimulated with metabolites (soluble factors) from single and dual biofilms of Candida albicans and Staphylococcus aureus. To obtain the soluble factors (SF), biofilms from C. albicans and S. aureus of 16 h and 36 h were formed. The SF were collected and incubated with the oral epithelial cells. Cell viability assay was performed by AlamarBlueTM. The cell morphology was observed by confocal microscopy to determine the exposure time of the cell lines to the biofilms SF. Cell cycle profile analysis was performed by flow cytometry. Proto-oncogenes and tumor suppressor genes expression were analyzed by qRT-PCR. In general, exposure to C. albicans and dual SF, caused a reduction in NOK-si cell viability and an increased sub G0 phase of the cell cycle, with a downregulation of HRAS, BRAF, MEK1, AKT, mTOR, TP53, CDKN1A and CDKN1B genes. However, in this cell line, S. aureus SF induced an overexpression of CDKN1A and Bcl2 genes, followed by the cell viability maintenance and a significant increase in the G2/M population. For tumoral cells, SCC 25 and Detroit 562, the stimuli of biofilms SF upregulated oncogenes such as HRAS and MTOR, as well as Bcl2 and CDKN1A overexpression. These cells could survive even after 24 h of stimuli from both SF (young and older) without significant changes in cell cycle progression for SCC 25 and a significant tendency to increase G2/M phase for Detroit 562. These results point that metabolites from fungal and bacterial biofilms of C. albicans and S. aureus, can disrupt the homeostasis of normal and neoplastic oral epithelial cells altering proto-oncogenes and tumor suppressor genes expression, remarkably CDKN1A, Bcl2, HRAS, and mTOR genes, causing disturbance on cell viability in cells with normal phenotype (NOK-si), and a pro-survival stimuli mainly in neoplastic cell lines (SCC 25 and Detroit 562). In addition, disturbances in cell cycle profile were showed. CNPq: 304247/2017-0 FAPESP: 15/50311-8

Submitted by Lucas Portela Oliveira (lucasportela2@gmail.com) on 2018-09-20T13:38:04Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Lucas Portela.pdf: 4674713 bytes, checksum: 96eac4dbfd92488de3781cc70d2981e3 (MD5) Approved for entry into archive by Marley Cristina Chiusoli Montagnoli (marley@foar.unesp.br) on 2018-09-20T17:50:25Z (GMT) No. of bitstreams: 1 oliveira_lp_me_arafor.par.pdf: 311897 bytes, checksum: 62be83b6f5f0d6c0dc7e0b6c3e87d0a9 (MD5) Made available in DSpace on 2018-09-20T17:50:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 oliveira_lp_me_arafor.par.pdf: 311897 bytes, checksum: 62be83b6f5f0d6c0dc7e0b6c3e87d0a9 (MD5) Previous issue date: 2018-05-04 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Há diversas possibilidades para o controle microbiano, dentre elas, o uso de microcristais associados à prata (Ag), e a inativação fotodinâmica antimicrobiana (do inglês, aPDI). Devido à capacidade de fotoexcitação no comprimento de onda de luz azul, fosfato de prata (Ag3PO4) foi submetido à exposição a luz em 455nm. Este trabalho teve como objetivo sintetizar, caracterizar e verificar a capacidade fotocatalítica e antimicrobiana dos microcristais de Ag3PO4, utilizando culturas de C. albicans em suspensão e biofilme, na presença e ausência de luz. Os microcristais foram sintetizados pelo método da co-precipitação, e foram determinados o “gap” de energia e o espectro de absorção do material através de análise de espectro de UVVIS. Para caracterizar Ag3PO4, realizou-se a difração de raios-X (DRX), microscopia eletrônica de varredura por emissão de campo (MEV-EC) e atividade fotocatalítica (degradação de rodamina) após 4 exposições à luz. Para os ensaios microbiológicos (UFC/mL), determinou-se a concentração fungicida mínima (CFM) em suspensão e biofilme, na ausência e presença de luz (55,8 J/cm²). Para análise dos resultados, aplicou-se o teste de análise de variância de dois fatores, com teste posterior de Tukey. Os resultados demonstraram que o espectro de absorção abrange a faixa azul do comprimento de onda, apesar do maior sinal estar localizado na região de luz UV. Nos espectros de DRX observou-se a produção de prata cúbica e hexagonal no decorrer das exposições, juntamente com o aumento de material amorfo. Nas imagens de MEV-EC foi observado o tamanho dos microcristais (0,12 µm), os quais apresentaram morfologia arredondada, irregular e com natureza aglomerada, degradando-se após cada exposição à luz. Observou-se um aumento na atividade fotocatalítica de Ag3PO4, com aumento de velocidade na degradação do corante rodamina a cada novo ciclo. Nos testes microbiológicos em suspensão, as CFMs foram observadas (2000 e 250μg/mL) assim como em biofilme (4000 e 2000 μg/mL), na ausência e presença de luz, respectivamente. As imagens de MEV corroboraram com os dados de UFC/mL, no qual o microrganismo apresenta uma redução em seu crescimento ou deformação em sua morfologia quando comparada à sua forma arredondada padrão. Além disso, nas imagens de microscopia confocal à laser a quantidade de células mortas torna-se mais intensa à medida que as concentrações se aproximam da inibitória. Desta forma, através da síntese pelo método da coprecipitação, o microcristal de Ag3PO4 apresentou excelente atividade fotocatalítica em comprimento de onda de 455 nm, com potencialização da atividade antifúngica na presença de luz na faixa azul. There are several possibilities for microbial control, among them the use of microcrystals associated with silver (Ag), and antimicrobial photodynamic inactivation (aPDI). Due to the ability of photoexcitation in the blue light wavelength, silver phosphate (Ag3PO4) was subjected to light exposure at 455nm. Thus, the aim was to synthesize, characterize and verify the photocatalytic and antimicrobial capacity of Ag3PO4 microcrystals using cultures of C. albicans in planktonic and biofilm form, in the presence and absence of light. Microcrystals were synthesized by the coprecipitation method, the energy band gap and the absorption spectrum of the material were determined by UV-VIS spectrum analysis. To characterize Ag3PO4, Xray diffraction (XRD), field emission scanning electron microscopy (FE-SEM) and photocatalytic activity (rhodamine degradation) were performed after 4 exposures to light. For the microbiological tests (CFU/mL), the minimum fungicidal concentration (MFC) in planktonic and biofilm was determined, in the absence and presence of light (55.8 J/cm²). To analyze the results, a two-way analysis of variance (ANOVA) was applied, followed by Tukey post-test. The results showed the absorption spectrum covers the blue wavelength range, although the largest peak is located in the UV light region. The XRD spectra produced cubic and hexagonal silver during the exposures, with an increase of amorphous material. The microcrystal size was observed (0.12 μm) by FE-SEM images, with rounded and irregular morphology and agglomerated nature, degrading after each exposure to light. Besides, it was observed a gain in the photocatalytic activity of Ag3PO4, with an increasing rate of degradation on rhodamine dye at each new cycle. The MFCs were observed in the planktonic microbiological tests (2000 and 250 μg/mL) as well as in biofilm (4000 and 2000 μg/mL), in the absence and presence of light, respectively. FE-SEM images corroborated with CFU/mL data, showing a reduction on microorganism growth or deformation in its morphology when compared to its standard rounded form. Moreover, the number of dead cells in the confocal laser microscopy images becomes more intense with the approach of inhibitory concentration. Thus, through the co-precipitation method, the microcrystal of Ag3PO4 showed excellent photocatalytic activity at a 455nm wavelength, with potentiation of antifungal activity in the presence of light over blue band. 001

Submitted by BRUNA NATÁLIA ALVES DA SILVA PIMENTEL null (bruna.pimentel@yahoo.com.br) on 2017-11-01T15:43:02Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Correção FINAL.pdf: 2231604 bytes, checksum: 93f5d8065fd8add3fc7fdd61d2995f2d (MD5) Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-11-13T15:13:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pimentel_bnas_me_arafo_par.pdf: 585329 bytes, checksum: afec2a77b16549c99edd07f718c7660c (MD5) Made available in DSpace on 2017-11-13T15:13:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pimentel_bnas_me_arafo_par.pdf: 585329 bytes, checksum: afec2a77b16549c99edd07f718c7660c (MD5) Previous issue date: 2017-06-30 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Nos últimos anos, os microcristais de prata têm se tornado foco de estudos. Uma das propriedades evidenciadas destes materiais é a sua atividade antimicrobiana contra diferentes microrganismos, devido a presença da prata na sua composição. Neste estudo, investigou-se a atividade antifúngica de microcristais de alfa vanadato de prata (α-AgVO3) contra Candida albicans (ATCC 90028) e sua citotoxicidade sobre células do tipo queratinócitos orais normais espontaneamente imortalizados (NOK-si). Os microcristias de α-AgVO3 foram sintetizados pelo método da co-precipitação sob três diferentes temperaturas (10, 20 e 30ºC) e caracterizados através de difração de raios-x, microscopia eletrônica de varredura por emissão de campo e espectroscopia Raman. A atividade antifúngica foi avaliada a partir da microdiluição seriada dos microcristais (de acordo com o Clinical & Laboratorial Standards Institute - CLSI), onde foram determinadas as concentrações inibitória (CIM) e fungicida mínimas (CFM). Imagens de microscopia de fluorescência com os microcristais nas concentrações inibitória e fungicida mínimas foram obtidas a fim de confirmar os achados microbiológicos. A viabilidade celular de células NOK-si foi avaliada através do ensaio Alamar Blue, e imagens de microscopia eletrônica de varredura (MEV) de todos os grupos avaliados foram realizadas. Nos ensaios celulares foram utilizadas apenas quatro concentrações dos microcristais (CIM, CFM, CIM diluída 10 vezes e concentrada 10 vezes). Os resultados obtidos foram submetidos ao teste de normalidade Shapiro-Wilk, e então avaliados com o teste Kruskal-Wallis, seguidos do pós teste de Dunn (α = .05), no software GraphPad Prism 7. Os três microcristais apresentaram os mesmos valores de CIM e CFM (3,90 μg/mL e 15,62 μg/mL, respectivamente). Ao avaliar a microscopia de fluorescência foi possível confirmar os resultados obtidos com o ensaio microbiológico, onde na CIM notou-se uma redução do número de células em comparação ao controle, e na CFM notou-se inviabilidade de todas as células. Quando avaliados com relação a citotoxicidade, os três microcristais apresentaram-se biocompatíveis nos valores de CIM, CFM e CIM diluída 10 vezes (p

Submitted by NATALI LISETTE HARO CHÁVEZ null (natali_haro@hotmail.com) on 2017-06-07T20:08:37Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Natali pdf.pdf: 2241750 bytes, checksum: 26f078b75690d40298f30f2e1bf33708 (MD5) Rejected by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: No campo “Versão a ser disponibilizada online imediatamente” foi informado que seria disponibilizado o texto completo porém no campo “Data para a disponibilização do texto completo” foi informado que o texto completo deverá ser disponibilizado apenas 24 meses após a defesa. Caso opte pela disponibilização do texto completo apenas 24 meses após a defesa selecione no campo “Versão a ser disponibilizada online imediatamente” a opção “Texto parcial”. Esta opção é utilizada caso você tenha planos de publicar seu trabalho em periódicos científicos ou em formato de livro, por exemplo e fará com que apenas as páginas pré-textuais, introdução, considerações e referências sejam disponibilizadas. Se optar por disponibilizar o texto completo de seu trabalho imediatamente selecione no campo “Data para a disponibilização do texto completo” a opção “Não se aplica (texto completo)”. Isso fará com que seu trabalho seja disponibilizado na íntegra no Repositório Institucional UNESP. Por favor, corrija esta informação realizando uma nova submissão. Agradecemos a compreensão. on 2017-06-07T20:22:05Z (GMT) Submitted by NATALI LISETTE HARO CHÁVEZ null (natali_haro@hotmail.com) on 2017-06-14T00:42:29Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Natali pdf.pdf: 2241750 bytes, checksum: 26f078b75690d40298f30f2e1bf33708 (MD5) Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-06-19T12:33:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 harochavez_nl_me_arafo_par.pdf: 422571 bytes, checksum: c6ca26b7f89ecb013ffa0c73c68eafd1 (MD5) Made available in DSpace on 2017-06-19T12:33:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 harochavez_nl_me_arafo_par.pdf: 422571 bytes, checksum: c6ca26b7f89ecb013ffa0c73c68eafd1 (MD5) Previous issue date: 2017-05-12 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) A associação da prata a outros compostos vem sendo estudada em uma tentativa de acentuar as propriedades antimicrobianas e reduzir a citotoxicidade deste metal quando em altas concentrações. O presente estudo investigou o efeito dos microcristais: tungstato de prata (α-Ag2WO4) e molibdato de prata (β-Ag2MoO4), no comportamento das células gengivais em monocamada e em modelo de matriz de colágeno, simulando a reparação tecidual. Para isto, fibroblastos gengivais (FGH) foram cultivados e utilizados somente entre as passagens 3 e 8 para formação de monocamada e para a confecção do equivalente dermal em matriz de colágeno em três dimensões (3D). Ambos microcristais foram utilizados na concentração fungicida mínima (CFM) capaz de matar o fungo Candida albicans (C. albicans) e foram definidas como C2: 7,81 µg/mL para tungstato de prata e 15,62 µg/mL para molibdato de prata. A partir destes valores, concentrações 10 vezes concentradas (C3) e 10 vezes diluídas (C1) foram preparadas para melhor compreender a margem de efeito dos componentes sobre as células estudadas. Células incubadas com meio de cultura na ausência de microcristais foram utilizadas como controle negativo (C-) e células incubadas com tampão de lise (TL) como controle positivo, representando 100% de morte celular. O efeito dos microcristais na morfologia, viabilidade e proliferação das células foram inicialmente avaliados e direcionaram os experimentos sequenciais. A geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) e a análise da integridade do DNA foram experimentos mandatórios para se conhecer o real impacto dos microcristais quando em células humanas. Os resultados quantitativos e qualitativos mostraram que α-Ag2WO4 não afetou a atividade enzimática mitocondrial das células FGH cultivadas em monocamada e em matriz de colágeno, em contraste com β-Ag2MoO4. Embora, o β-Ag2MoO4 não tenha interferido na proliferação celular, este composto afetou diretamente a viabilidade dos fibroblastos durante a confecção do gel em 3D. Experimentos posteriores realizados com α-Ag2WO4 provaram que estes microcristais na concentração de C2 não danificaram o DNA. O desenvolvimento de novos materiais tem sido sempre atraente para os pesquisadores, principalmente pela possibilidade de ser utilizado para tratamento de doenças, bem como evitar a prescrição indiscriminada de antibióticos. Nossos resultados fornecem informações relevantes no que diz respeito as propriedades não citotóxicas do α-Ag2WO4 para células gengivais humanas, durante um período de tempo adequado para estimar-se o potencial de perigo. Growing interest has been reported in combining silver with other metals to improve the antimicrobial properties, reduce silver concentration and consequently its toxicity. Herein, this study investigated the effect of microcrystals silver tungstate (α- Ag2WO4) and silver molybdate (β-Ag2MoO4) on the gingival cells and threedimensional (3D) collagen matrices behavior. For all experiments, human gingival fibroblasts cells (HGF) were used between the 3rd and 8th passage. To carry out the experiments, lowest concentrations of α-Ag2WO4 and β-Ag2MoO4 that prevents visible growth of Candida albicans (C. albicans) planktonic cells were defined as our test concentration (C2): 7,81 µg/mL for silver tungstate and 15,62 µg/mL for silver molybdate. Solutions prepared from initial MFC concentration, ten-folds diluted (C1) and ten-folds concentrated (C3), improved the knowledge about the concentration ranging effect against human cells. Complete medium (C-) was used as a negative control and lysis buffer (LB) served as positive control (C+), equating to 100% cell death. The effect of the microcrystals concentration on cell morphology, viability and proliferation of HGF cells led following experiments. Reactive oxygen species (ROS) generation and DNA integrity analyzes were mandatories to know the real impact of the microcrystals on human cells. The quantitative and qualitative results showed that α-Ag2WO4 did not affect mitochondrial enzymatic activity of HGF cells cultured in monolayer and within collagen matrices, in contrast to β-Ag2MoO4. Although, β- Ag2MoO4 did not affect cells proliferation, this compound interfered directly in cell viability during 3D gel confection. Hence, subsequent analyzes performed with α- Ag2WO4 proved that this microcrystals in C2 concentration did not injury the genomic DNA. The new materials development has always been attractive to researchers, mainly by the possibility of treating diseases as well as avoiding the indiscriminate antibiotic prescription. Our findings afford strong information about the effect of α- Ag2WO4 on cells behavior, disclosing non-cytotoxic properties against human gingival cells, during a time period adequate to measure the hazard potential. CNPq: 163196/2015-0

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:25:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:46:30Z : No. of bitstreams: 1 000846264.pdf: 4110745 bytes, checksum: 9413f0f4aa0915b943ec1e5d62692439 (MD5) O objetivo do presente estudo in vitro foi avaliar a interação entre os microorganismos C. albicans, S. aureus sensível (MSSA) e resistente (MRSA) à meticilina com relação a alguns dos seus principais fatores de virulência. Estes fatores foram analisados considerando os micro-organismos isoladamente e em culturas mistas. Foi verificada a interação entre esses micro-organismos através da contagem do número de colônias viáveis (UFC/mL), análise da atividade metabólica por meio do ensaio XTT e quantificação da biomassa total por meio do corante cristal violeta nos tempos de 90 minutos, 12, 24 e 48 horas. Para análise da produção de proteinase (SAP) e fosfolipase (PL-C), kits fluorimétricos foram utilizados. A estrutura dos biofilmes foi avaliada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Culturas simples e mistas dos micro-organismos também foram utilizadas para infectar um epitélio oral humano reconstituído (EOHR). A capacidade de colonização e invasão foi avaliada após 24 horas utilizando a técnica de hibridização in situ (PNA-FISH). A avaliação do dano causado pelos micro-organismos ao tecido foi realizada por quantificação da liberação da enzima lactato desidrogenase (LDH). Técnicas moleculares (RT-qPCR) foram empregadas para quantificação do número de micro-organismos colonizando o epitélio e também para avaliação da expressão de genes de virulência. A expressão gênica foi avaliada em superfície biótica (EOHR) e abiótica (placa de poliestireno de 24 poços) para culturas simples e mistas dos micro-organismos. Os resultados dos ensaios de quantificação foram analisados utilizando ANOVA a dois critérios com teste post-hoc de Tukey (α = 0,05), enquanto os dados de atividade enzimática foram analisados por ANOVA a um critério com correção de Welch seguido pelo teste de Games-Howell. Os resultados da expressão gênica foram... (Resumo completo clicar acesso eletrônico) The aim of this study was to evaluate, in vitro, the interaction between C. albicans and methicillinsusceptible (MSSA) and resistant (MRSA) S. aureus in relation to some of their major virulence factors. These factors were analyzed considering the three microorganisms in single and dual cultures. The interaction between these microorganisms was evaluated by counting colony-forming units (CFU/mL), analysis of metabolic activity by the XTT assay and quantification of the total biomass by crystal violet dye at 90 minutes, 12, 24, and 48 hours. To analyze the production of proteinase (SAP) and phospholipase (PL-C), fluorometric kits were used. The structure of the biofilms was acessed by scanning electron microscopy (SEM). Further, single and dual cultures of microorganisms were used to infect a reconstituted human oral epithelium (RHOE). The pattern of colonization and invasion of the RHOE was evaluated after 24 hours using the in situ hybridization technique (PNA-FISH). The damage caused by microorganisms in the tissue was evaluated by quantification of the lactate dehydrogenase enzyme (LDH) released. Molecular techniques (RT-qPCR) were also used to quantify the number of microorganisms colonizing the epithelium and to evaluate the expression of virulence genes. Gene expression was evaluated in biotic (RHOE) and abiotic (24-well polystyrene microplate) surfaces for single and dual cultures. The results from quantification assays were compared using two-way ANOVA with Tukey post-hoc test, while data from enzymatic activities were analyzed by one-way Welch-ANOVA followed by Games-Howell post hoc test. The results of gene expression were analyzed by one-way ANOVA with Tukey for data satisfying the assumptions of normality and homoscedasticity or one-way Welch-ANOVA followed by Games-Howell for heteroscedastic data. LDH results were also...(Complete abstract electronic access below)

Made available in DSpace on 2019-10-29T15:23:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-24. Added 1 bitstream(s) on 2019-10-29T15:25:30Z : No. of bitstreams: 1 000883112.pdf: 3471027 bytes, checksum: 2bf4be3021d72bdbceb97676f510120b (MD5) Made available in DSpace on 2019-10-29T15:23:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-24. Added 1 bitstream(s) on 2019-10-29T15:25:30Z : No. of bitstreams: 1 000883112.pdf: 3471027 bytes, checksum: 2bf4be3021d72bdbceb97676f510120b (MD5) Made available in DSpace on 2019-10-29T15:23:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-24. Added 1 bitstream(s) on 2019-10-29T15:25:30Z : No. of bitstreams: 1 000883112.pdf: 3471027 bytes, checksum: 2bf4be3021d72bdbceb97676f510120b (MD5) O sucesso clínico da terapia com implantes depende da osseointegração primária e da ausência de inflamação no tecido peri-implantar. Um importante fator contribuinte para o desenvolvimento da inflamação é a colonização de microrganismos e subsequente formação de biofilme tanto nos materiais para implante quanto para componentes protéticos. Neste estudo, nós focamos no efeito de um tratamento de superfície para implante de titânio (Ti) e em materiais para abutments na adesão de bactérias e formação de biofilme. O tratamento em questão, consiste na conversão das propriedades hidrofóbicas do Ti para hidrofílicas por meio da foto funcionalização da luz UV. Biofilme foi desenvolvido pela incubação dos discos com e sem tratamento, em rico meio de cultura contendo uma complexa comunidade oral representativa da saliva humana. A biomassa e o perfil das bactérias aderidas em ambas as superfícies foram analisadas após 3 e 16 horas. Para os demais experimentos, foram utilizados discos de Ti e zircônia (ZrO2) simulando as superfícies dos abutments de implantes e esmalte bovino (EB) como controle positivo. Biofilmes simples, com Streptococcus mutans (S. mutans), Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) e Fusobacterium nucleatum (F. nucleatum), e em multiespécie (P. gingivalis e F. nucleatum) foram desenvolvidos sobre as amostras e os resultados foram analisados quantitativamente e qualitativamente. O perfil das bactérias, também, foi analisado por meio do método de eletroforese em gel com gradiente desnaturante (DGGE). Em relação ao primeiro trabalho, embora o perfil das bactérias aderidas apresentou similaridade após 16 horas de incubação, a biomassa do biofilme formado sobre as superfícies de Ti tratado com a luz UV, foi significativamente menor. Ti e ZrO2 apresentaram fortes características hidrofóbicas enquanto o EB... ((Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) Dental implant rehabilitation has become a routine procedure to replace missing teeth. Its success depends on proper osseointegration, as well as the lack of inflammation. An important factor contributing to the development of inflammation is the attachment of microorganisms and subsequent development of biofilms on the prosthetic components. This study focused on effect of materials and treatment surfaces on the bacterial adhesion and biofilm formation. We, first, assessed the biofilm formation on machined titanium (Ti) discs treated and untreated with UV photofunctionalization. UV-treatment was performed using a photo-device for 12 minutes. Hydrophobic-to-hydrophilic conversion was confirmed on UV-treated titanium surfaces. Biofilm was formed by incubating the discs in rich medium containing a complex representative saliva-derived oral microbial community. After 3 and 16 hours, the biomass of biofilm and the bacteria profile was analyzed. For other experiments, it was used titanium and zirconia (ZrO2) discs as abutment implants and bovine enamel (BE) as a positive control. Roughness means that topography and energy-free surface analysis were performed prior to applying microbiology biofilms onto materials. Biofilms in single species with Streptococcus mutans (S. mutans), Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) and Fusobacterium nucleatum (F. nucleatum) and multi species with P. gingivalis and F. nucleatum were developed on each samples and quantitatively evaluated by counting forming units (CFU) and qualitatively by confocal microscopy. Also, we analyzed the development of a complex oral biofilm on two different abutments implants surfaces. Quantitatively and qualitatively analysis were performed after 16 and 48 hours of incubation under anaerobic conditions. In relation to first study, the biomass of biofilm formed on UV treated surfaces was significantly... (Complete abstract electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-18. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:48:24Z : No. of bitstreams: 1 000839097.pdf: 4137488 bytes, checksum: e361e28e2b4d90c452faabd674b87f64 (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) O processo de esterilização deve preservar as propriedades do esmalte utilizado nas pesquisas in vitro e in situ. O objetivo deste estudo foi avaliar a influência dos métodos de esterilização Irradiação por micro-ondas - IM, Irradiação gamma - IG, Óxido de etileno - OE e Autoclave - AU sobre as propriedades do esmalte. O estudo foi realizado em duas fases. Na fase 1, 50 espécimes de esmalte bovino foram divididos em cinco grupos (n=10): IM, IG, OE, AU e controle (não esterilizado). Foram realizadas avaliações quanto à morfologia (Microscopia Eletrônica de Varredura - MEV superficial e em secção transversal), composição química (Energia Dispersiva de raios-X - EDS e Espectroscopia Fotoeletrônica por raios-X - XPS) e estrutura (Raman e Ressonância Magnética Nuclear - RMN). Na fase 2, 360 espécimes de esmalte bovino foram divididos em quatro grupos (n=90): IM, IG, OE e AU. Biofilmes monoespécie (Actinomyces naeslundii e Streptococcus sanguis) e biofilmes mistos foram formados e avaliados, para cada grupo experimental, quanto ao número de unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/mL; n=10), atividade metabólica (redução do 2 metoxi 4 nitro 5 sulfofenil 5 fenilalanina carbonil 2H tetrazolium hidróxido - XTT; n=10) e biomassa total (cristal violeta; n=10). A análise estatística dos dados foi realizada para as avaliações Raman, XPS, UFC/mL, XTT e cristal violeta com ɑ=0,05. Os resultados indicaram que o método IG não promoveu alterações sobre a morfologia, composição química e estrutura do esmalte. Os grupos IM e EO promoveram pequenas alterações na morfologia superficial, composição química e estrutura. O grupo AU resultou em severas alterações na morfologia superficial e em secção transversal, com pequena 9 influência sobre a composição química e estrutura do esmalte. Os biofilmes de S. sanguis não apresentaram diferenças...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) The sterilization process should preserve the enamel properties of specimens used for in vitro and in situ studies. The aim of this study was to evaluate the influence of sterilization methods Microwaving - MI, Gamma irradiation - GI, Ethylene oxide - EO and Steam autoclave SA on the enamel properties. This study was conducted into 2 phases. For phase 1, 50 specimens of bovine enamel were assigned into 5 groups (n=10): MI, GI, EO, SA and control (no sterilization), evaluated regarding morphology (Scanning Electron Microscopy - SEM superficial and cross-section), chemical composition (X-ray energy dispersive spectroscopy - EDS and X-ray photoelectron spectroscopy - XPS) and structure (Raman and Nuclear Magnetic Resonance - RMN). For phase 2, 360 bovine enamel specimens were assigned into 4 groups (n=90): MI, GI, EO and SA. For each group, biofilms were grown as monospécies (Actinomyces naeslundii and Streptococcus sanguis) and multispecies, evaluated regarding counting forming units (CFU/mL), metabolic activity (reduction of 2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino)carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide - XTT) and biomass (violet crystal assay). Statistical evaluation was performed for data from XPS, Raman, CFU/mL, XTT assay and violet crystal assay. The results indicated that GI group produced no alterations on the morphology, chemical composition and structure of the enamel. MI and EO groups promoted slightly alterations on morphology, chemical composition and structure. The SA group caused severe morphological changes on surface and in depth and small alterations on chemical composition and structure. There were no differences among groups for S. sanguis biofilms. A. naeslundii biofilms showed higher values of CFU/mL and biomass for SA group and higher metabolic activity in GI group. It can be concluded that enamel properties could be influenced ...(Complete abstract electronic access below) FAPESP: 2011/09416-0

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-18Bitstream added on 2014-06-13T18:45:59Z : No. of bitstreams: 1 000734874.pdf: 3245721 bytes, checksum: 5e29c8eb8d0c16d8749e92a8b44a94d0 (MD5) Este estudo avaliou propriedades físico-químicas e mecânicas de resinas para base de prótese, uma fotoativada (Eclipse - E) à base de UDMA e outra termicamente ativada por micro-ondas (Nature Cryl MC - NC) à base de PMMA, e um reembasador quimicamente ativado (Tokuyama Rebase Fast II - TR II) à base de PEMA. Propriedades viscoelásticas (E’, tan δ e Tg), contração linear de polimerização (CLP), sorção (Sor) e solubilidade (Sol) em água e em saliva artificial, grau de conversão (GC) e coeficiente de inchamento (CI) foram avaliados para a caracterização dos polímeros. A resistência à flexão dos materiais intactos (E, NC, TR II) e reembasados (E-E, E-TRII, NC-NC- NC-TR II) também foi avaliada. As propriedades viscoelásticas foram avaliadas em corpos-de-prova retangulares (64 x 10 x 3,3 mm), submetidos (n=2) à análise térmica dinâmico-mecânica (DMTA) em dois ciclos de varredura após confecção (controle) e armazenagem em saliva. O módulo de armazenamento (E’) e o amortecimento mecânico (tan δ) a 37 ºC e a temperatura de transição vítrea (Tg) foram registrados durante o 1º ciclo da DMTA. A CLP (%) foi avaliada (n=10), em projetor de perfil (Nikon 6C), em corpos-de-prova circulares (50 x 0,5 mm). A Sor e a Sol (μg/mm3) foram mensuradas (n=5) seguindo as recomendações da ISO 1567. O GC (%) foi avaliado (n=5) por espectroscopia de infravermelho por transformadas de Fourier (32 leituras; resolução 4,0 cm-1). O coeficiente de inchamento foi realizado (n=5) de acordo com a teoria de Flory-Rhener. Os ensaios mecânicos de flexão (0,5 mm/min) foram realizados (n=10) em corpos-de-prova (64 x 10 x 3,3 mm) intactos ou reembasados e a resistência (MPa) calculada na tensão máxima (RFM) e no limite de proporcionalidade (RFLP). Os dados foram avaliados por ANOVA, seguida por Tukey HSD (α=0,05) ou Dunnett (α=0,05). As resinas E e NC apresentaram similar E’, superior a TR II... This study evaluated the physical-chemical and mechanical properties of denture base resins, one UDMA light-activated (Eclipse-E) and one PMMA heat-polymerized (Nature Cryl MC - NC). The PEMA autopolymerizing reliner (Tokuyama Rebase Fast II - TR II) was also evaluated. Viscoelastic properties (E’, tan δ e Tg), linear shrinkage polymerization (LPS), sorption (Sor) and solubility (Sol) in water and in artificial saliva, degree of conversion (DC) and coefficient of swelling (CS) were employed for polymer characterization. The flexural strength of intact (E, NC, TR II) and relined samples (E-E, E-TRII, NC-NC- NC-TR II) was also made. The viscoelastic properties were evaluated by two cycles of dynamic mechanical thermal analysis (DMTA) on each rectangular (64 x 10 x 3.3 mm) samples (n=2). The storage modulus (E’) and loss tangent (tan δ) at 37 ºC and the glass transition temperature (Tg) were recorded from the 1st DMTA cycle. LPS (%) was evaluated (n=10) by a Nikon 6C optical comparator, on circular samples (50 x 0.5 mm). Sor and Sol (μg/mm3) were measured (n=6) according to ISO 1567. DC (%) was evaluated (n=5) by FTIR spectroscopy (32 scans; resolution 4.0 cm-1). CS was evaluated (n=5) by Flory-Rhener theory. A three-point flexural tests (0.5 mm/min) was applied (n=10) on rectangular intact and relined samples. The ultimate flexural strength (FSU) and the flexural strength at the proportional limit (FSPl) were recorded in MPa. Data were analyzed with ANOVA, followed by Tukey HSD (α=0.05) ou Dunnett (α=0.05). E and NC had similar E’, higher than TR II. Tan δ was arranged as TR II > NC > E. The Tg was not affected after saliva storage. The higher Tg values were obtained for E and NC. Tan δ peaks were shifted after 2 DMTA cycles. Regardless the medium immersion, Sor (μg/mm3) was arranged as NC > E > TR II. Saliva storage reduced Sol (μg/mm3) of the materials. E showed the lowest values of LPS, CS and...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-05-26Bitstream added on 2014-06-13T19:44:49Z : No. of bitstreams: 1 sanita_pv_dr_arafo.pdf: 1953204 bytes, checksum: a2f3ce08a1a45c4435513d02ab367cba (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Este estudo in vivo teve como objetivos avaliar: 1. a prevalência das diferentes espécies de Candida em pacientes diabéticos portadores de estomatite protética e compará-la àquela de pacientes não diabéticos com/sem estomatite protética; 2. a eficiência de dois tratamentos para estomatite protética em pacientes diabéticos: terapia antifúngica com nistatina e desinfecção de próteses totais por micro-ondas. Para isso, 210 pacientes usuários de prótese totais foram selecionados e distribuídos em três grupos de estudo. O grupo controle - GC foi formado por 90 pacientes não diabéticos e com mucosa oral saudável; os grupos experimentais foram formados por portadores de estomatite protética, sendo 80 pacientes não diabéticos - EPND e 40 diabéticos do tipo 2 controlados - EPD. Uma avaliação intra-oral dos pacientes dos grupos experimentais foi realizada e a aparência clínica da mucosa inflamada foi classificada de acordo com os critérios de Newton em graus I, II ou III. Coletas microbiológicas das próteses totais foram realizadas com swab estéril e plaqueadas em meio CHROMagar Candida. Em seguida, os procedimentos de identificação foram realizados: análise de microcultivo, teste de triagem fenotípica em caldo hipertônico e testes bioquímicos (ID-32C). Os resultados obtidos foram analisados por Intervalo de Confiança de Bonferroni e testes Exato de Fisher e Qui Quadrado (α=0,05). Os 40 pacientes diabéticos foram, então, submetidos ao tratamento da estomatite protética. Para isso, foram aleatoriamente distribuídos em 2 grupos (n=20): grupo NIS – tratamento com antifúngico tópico nistatina (suspensão oral - 100.000UI/mL), 4 vezes ao dia, por 14 dias; grupo MIC – tratamento por meio da irradiação das totais por micro-ondas (650W / 3 minutos), 3 vezes por semana, por 14 dias. Dois parâmetros... The aim of this in vivo study was to evaluate: 1. the prevalence of Candida spp. in well-controlled type 2 diabetic patients and compare it to that found in non-diabetics with/without denture stomatitis; 2. the efficacy of two treatments of denture stomatitis in diabetic patients: topical nystatin and denture microwave disinfection. Two hundred and ten denture wearer patients were divided into three groups of study. The control group - CG was formed by 90 individuals without diabetes or denture stomatitis and the experimental groups were formed by patients with denture stomatitis, being 80 non-diabetics - DSND and 40 well-controlled type 2 diabetics - DSD. Mucosal characteristics of denture stomatitis patients were classified in types I, II, and III, according to Newton’s criteria. Mycological samples were taken from the dentures and cultured in CHROMagar′s plates. Candida spp. were identified by micro-cultivation, hypertonic Sabouraud broth, and bioMérieux ID32C assays. Results were analyzed by means of Bonferroni corrected confidence interval, Fisher’s exact test, and Chi-square analysis of several proportions (α=0.05). The 40 diabetic patients were divided into two groups (n=20) and submitted to two treatments for denture stomatitis: NYS group – patients were treated with topical nystatin, 4 times a day, for 14 days; MW group – patients had their dentures microwaved (650W / 3 minutes), 3 times per week, for 14 days. Mycological samples were taken from the palates and the tissue surface of the dentures for quantification and identification of Candida spp. and standardized photographs of the palates were taken for the clinical analysis. Microbiological and clinical evaluations were repeated at baseline... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-28Bitstream added on 2014-06-13T20:25:49Z : No. of bitstreams: 1 ribeiro_rc_dr_arafo.pdf: 3026200 bytes, checksum: e7d101d0ede455ed6dd85a16d9ab477c (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Este estudo avaliou o efeito da desinfecção por micro-ondas sobre o desempenho clínico e a quantificação de micro-organismos de um reembasador rígido em diferentes intervalos de tempo. Foram selecionados 40 pacientes de ambos os sexos com idade entre 30 e 75 anos, utilizando prótese total superior com necessidade de reembasamento. Essas próteses foram reembasadas com o material Tokuyama Rebase II. Logo após o reembasamento, foi avaliado o escoamento e a lisura do material, classificando-os em satisfatório ou insatisfatório. Em seguida, a amostra foi separada em dois grupos: grupo GC (controle) – os pacientes higienizaram sua prótese três vezes ao dia por meio de escovação com sabão de coco. Além disso, a prótese foi retirada durante a noite, ficando imersa em água e grupo GD (desinfecção por micro-ondas) – nesse grupo, além da escovação com escova dental macia e sabão de coco, foi realizada a desinfecção da prótese por micro-ondas uma vez por semana utilizando a potência de 650W e o tempo de 3 minutos. No período noturno, a prótese também foi imersa em água. O material reembasador foi avaliado por dois profissionais treinados trabalhando separadamente após 7 dias, 15 dias, 1 mês, 3 meses, 6 meses, 9 meses e 1 ano. Foram analisadas as seguintes características: estabilidade de cor, brilho, descoloração ou manchamento, irritação dos tecidos orais, separação ou fratura do material e rugosidade superficial. Além disso, foi realizada a quantificação de micro-organismos presentes na superfície interna da prótese em todos os períodos experimentais. Os dados obtidos foram analisados por análise de variância e pelos testes de Tukey e Friedman, ao nível de significância de 5%. O material apresentou lisura e escoamento satisfatórios em todas as análises após o reembasamento. As próteses reembasadas submetidas à desinfecção... This study evaluated the effect of disinfection method on the clinical performance and quantification of microbial of a hard chairside reline resin after 1-year service period. Forty adult patients aged between 30 and 75 years, who required denture reline treatment, participated in this study. Tokuyama Rebase II was used to reline complete maxillary dentures. Immediately after the reline, assessment of the flow and smoothness was rated by the clinician as satisfactory and unsatisfactory. The edentulous subjects were randomly divided into 2 groups (n=20) and dentures were cleansed according to two methods: CG (control group)- brushing with coconut soap and soft toothbrush; DG (disinfection group)-brushing according to previous methods and microwave disinfection once a week for 3 min at 650W. Furthermore, all dentures were immersed in water at night. Evaluations were conducted by two examiners working separately. Color stability, gloss, staining or material discoloration, irritation to oral tissue, detachment or frature of material and surface roughness were assessed at 7 and 15 days, 1, 3, 6 and 9 months and 1 year post-placement. Quantitative microbial cultures were taken from the tissue side of each maxillary denture at all experimental periods. The data were analyzed by ANOVA and Friedman and Tukey tests. A 95% confindence level was used. Flow and smoothness of the material during relining were considered to be good or satisfactory in all the cases. Values color alterations of DG were significantly lower than those of CG (P

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-07-03Bitstream added on 2014-06-13T19:44:47Z : No. of bitstreams: 1 reis_jmsn_dr_arafo.pdf: 1310753 bytes, checksum: 17bd719b0c46c00b10cbd2db022db42a (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Este estudo avaliou o comportamento exotérmico de 5 resinas rígidas para reembasamento imediato, duas experimentais (E1 e E2) à base de agentes de ligação cruzada (etileno glicol dimetacrilato e 1,4-butanediol dimetacrilato) e três comerciais (Kooliner-K, New Truliner-NT, Tokuyama Rebase II-TR II), bem como o grau de conversão (GC), a sorção (Sor) e a solubilidade (Sol) em água, a contração linear de polimerização (CLP), as propriedades viscoelásticas e a resistência à flexão desses materiais e de uma resina para base de prótese (Lucitone 550-L). Foi avaliada, ainda, a resistência de união (RU) entre os reembasadores e a resina de base. O comportamento exotérmico foi avaliado (n=4) com termopar tipo K inserido no interior das resinas, em matriz circular (60 x 2,0 mm), e mantido até a polimerização. O GC (%) foi avaliado (n=5) por espectroscopia de infravermelho por transformadas de Fourier (32 leituras; resolução 4,0 cm-1). A Sor e a Sol (μg/mm3) foram mensuradas (n=5) seguindo as recomendações da ISO 1567. A CLP (%) foi avaliada (n=10), em projetor de perfil (Nikon 6C), em corpos-de-prova circulares (50 x 0,5 mm). Para avaliar as propriedades viscoelásticas, corpos-de-prova (40 x 10 x 3,3 mm) foram submetidos (n=2) à análise térmica dinâmico-mecânica (DMTA) em diferentes intervalos de temperatura (ciclos). O módulo de armazenamento (E’) e o amortecimento mecânico (tan δ) a 37ºC foram registrados durante o primeiro e último ciclo da DMTA. A temperatura de transição vítrea (Tg) foi mensurada somente no último ciclo da DMTA. Os ensaios mecânicos de flexão (0,5 mm/min) foram realizados (n=10) em corpos-de-prova (64 x 10 x 3,3 mm) intactos ou reembasados e a resistência (MPa) calculada na tensão máxima (RFM) e no limite de proporcionalidade (RFLP). Para avaliar a RU (MPa) entre os materiais, 60 cilindros (20 x 20 mm) da resina L foram processados... This study evaluated the exothermic behavior, degree of conversion (DC), water sorption (WSor), water solubility (WSol), linear polymerization shrinkage (LPS), viscoelastic properties and flexural strength of 5 hard chairside reline resins, two experimental (E1 and E2) based on crosslinking agents (ethylene glycol dimethacrylate and 1,4-butanediol dimethacrylate) and three commercially available (Kooliner-K, New Truliner-NT and Tokuyama Rebase II-TR II), and one heat-polymerized denture base resin (Lucitone 550-L). The shear bond strength (SBS) between the denture base resin and the reline materials was also evaluated. The exothermic behavior of circular specimens (60 x 2.0 mm) during polymerization was assessed (n=4) using a type K thermocouple. The DC (%) was measured (n=5) by Fourier Transformed infrared-attenuated total reflectance (FTIR-ATR) spectroscopy (32 scans; resolution of 4.0 cm-1). WSor and Wsol (μg/mm3) were determined (n=5) according to the recommendation stated in ISO 1567. The LPS (%) was measured (n=10) in circular specimens (50 x 0.5 mm) using a perfilometer (Nikon 6C). The viscoelastic properties of the specimens (40 x 10 x 3.3 mm) were evaluated (n=2) by dynamical-mechanical thermal analysis (DMTA) under different temperature ranges (runs). Values of storage modulus (E’) and loss tangent (tan δ) at 37ºC were obtained from the first and last runs. The glass transition temperature (Tg) was only measured from the last run. Ultimate flexural strength (UFS - MPa) and flexural strength at the proportional limit (FSPL - MPa) were determined (n=10) by three-point test (0.5 mm/min) using intact and relined specimens (64 x 10 x 3.3 mm). To evaluate the SBS between the materials, 60 cylinders (20 x 20 mm) of the denture base resin L were processed, relined (3.5 x 5.0 mm) and submitted to shear testing (0.5 mm/min). Data were analyzed by ANOVA and Tukey... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-03-25Bitstream added on 2014-06-13T19:38:22Z : No. of bitstreams: 1 lombardo_cel_me_arafo.pdf: 3996119 bytes, checksum: c7eb8e08977bab50ee60b2bacfeaab4e (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Este estudo avaliou o efeito da irradiação por microondas e da armazenagem em água sobre as propriedades viscoelásticas de duas resinas para base de prótese (Lucitone 550- L e Vipi Wave- VW) e duas resinas para reembasamento imediato (Kooliner- K e Tokuyama Rebase Fast II- TR II). Oito corpos-de-prova (40 x 10 x 3,3 mm) de cada material foram avaliados por meio de análise térmica dinâmico-mecânica (DMTA) após: acabamento (controle 1), armazenagem em água por 7 dias (controle 2), um (MW1) e 7 ciclos de irradiação por microondas (MW7). Para cada corpo-de-prova, ciclos de DMTA foram realizados dentro de intervalos de temperatura diferentes. Os valores do módulo de armazenamento (E’) e de amortecimento mecânico (tan δ) a 37ºC foram obtidos no primeiro e último ciclos de DMTA. A partir do último ciclo, os valores de E’ na temperatura de transição vítrea (Tg) e o máximo de tan δ também foram obtidos. Os dados foram submetidos à análise de variância a dois critérios e ao teste de Student-Newman-Keuls (α=0,05). Além disso, mensurações de temperatura no interior de corpos-de-prova de cada material, durante a irradiação por microondas (650 W/ 3 min), foram realizadas por meio da utilização de sensor de fibra óptica. Seis corpos-de-prova de cada material foram avaliados. Durante a irradiação por microondas, todos os corpos-de-prova atingiram a temperatura de ebulição da água em aproximadamente 130 s. A partir do primeiro ciclo de DMTA, MW 1 e controle 2 aumentaram significantemente os valores de E’ e reduziram os valores de tan δ de K a 37ºC (PVW>TR II>K (P

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-03-26Bitstream added on 2014-06-13T19:16:49Z : No. of bitstreams: 1 sanita_pv_me_arafo.pdf: 1236296 bytes, checksum: 793fd4710489b2253297ebbc15835736 (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) A estomatite protética associada à Candida é a forma mais comum de candidíase oral e também uma das infecções oportunistas mais encontradas em pacientes infectados por HIV. Atualmente, a desinfecção de próteses totais através da irradiação por microondas tem sido recomendada para tratamento e prevenção da estomatite protética, tanto em indivíduos saudáveis, quanto em pacientes imunocomprometidos. O presente estudo avaliou a efetividade da irradiação por microondas na desinfecção de próteses totais simuladas contaminadas com 5 diferentes espécies do microorganismo Candida (C. albicans, C. glabrata, C. dubliniensis, C. tropicalis e C. krusei) isoladas de culturas padrão e de pacientes HIV positivo. Para isso, próteses totais simuladas foram confeccionadas, esterilizadas por meio de óxido de etileno e individualmente inoculadas com os microorganismos avaliados. Após o período de incubação (48 horas a 37°C), as próteses foram submetidas à irradiação por microondas a 650W durante 3 minutos. Próteses totais não irradiadas foram utilizadas como controle positivo. A seguir, uma alíquota de 25 æL da solução resultante das diluições seriadas de 10-1 a 10-4 foi semeada em placas de Petri em duplicata e todas as placas foram incubadas por 48 horas a 37°C. As colônias foram quantificadas em ufc/mL. Para verificar a efetividade da desinfecção por microondas a longo prazo, as próteses totais irradiadas foram incubadas a 37°C por 7 dias. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelos testes de ANOVA e de Tukey (a=0.05). As próteses totais contaminadas com todas as espécies de Candida avaliadas demonstraram esterilização após irradiação por microondas durante 3 minutos a 650W. Todas as próteses do grupo controle positivo demonstraram crescimento microbiológico após incubação nas placas de Petri. The most common form of oral candidiasis is Candida-associated denture stomatitis. Oral candidiasis is also a frequent manifestation of HIV infection. Microwave disinfection of complete dentures has been recommended to treat and prevent denture stomatitis in non-immune compromised patients. The present study evaluated the effectiveness of microwave irradiation on the disinfection of simulated complete dentures inoculated with ATCC and HIV isolates of 5 species of Candida (C. albicans, C. glabrata, C. dubliniensis, C. tropicalis and C. krusei). Simulated complete dentures were made, sterilized and individually inoculated with the tested microorganisms. After incubation for 48 hours at 37°C, dentures were submitted to microwave irradiation (650W for 3 minutes). Non-irradiated dentures were used as positive controls. Replicate aliquots of suspensions were plated at dilutions 10-1-10-4 and incubated for 48 hours at 37°C. Colonies counts (cfu/mL) of each plate were quantified. To verify the long-term effectiveness of microwave disinfection, dentures were incubated at 37°C for 7 days. Data were analyzed with two-way ANOVA and Tukey HSD tests (a=0.05). The results indicated that complete dentures contaminated with all Candida yeasts showed sterilization after microwave irradiation for 3 minutes at 650W. All control dentures showed microbial growth on the plates. The cfu/mL for C. glabrata was significantly higher than those of C. albicans, C. dubliniensis and C. tropicalis whereas the cfu/mL for C. krusei was significantly lower. The cfu/mL for clinical isolates was significantly higher than those of ATCC yeasts. Microwave irradiation for 3 minutes at 650W resulted in sterilization of complete dentures contaminated with the 5 species of Candida isolated from HIV-infected patients.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-02-25Bitstream added on 2014-06-13T20:37:51Z : No. of bitstreams: 1 reis_jmsn_me_arafo.pdf: 621976 bytes, checksum: 5c962e9b21ada9ec7a0509865b3ded9c (MD5) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Este estudo avaliou o efeito do reembasamento da ciclagem mecânica e da armazenagem em água sobre a resistência à flexão de uma resina acrílica para base de prótese (Lucitone 550- L). Os corpos-de-prova foram confeccionados a partir da confecção de lâminas da resina L (64x10x2 mm3), reembasadas (1,3 mm) com quatro reembasadores quimicamente ativados (Kooliner-K, Ufi Gel Hard-UGH, Tokuso Rebase Fast-TR e New Truliner-NT). Além disso, foram confeccionados corpos-de-prova a partir do reembasamento com a própria resina L e corpos-de-prova intactos da resina L. Quarenta corpos-de-prova (64x10x3,3 mm3) foram confeccionados para cada combinação entre os materiais e divididos em quatro grupos (n=10). Os corpos-de-prova foram submetidos aos testes de flexão nas seguintes condições: após polimerização (G1); após armazenagem em água destilada a 37+-1ºC por 30 dias (G2); após ciclagem mecânica flexural de 10.000 ciclos com frequência de 5Hz (G3) e após armazenagem em água a 37ºC por 30 dias, seguida de ciclagem mecânica (G4). Os testes de flexão em três pontos foram realizados em máquina de ensaios mecânicos (5mm/min; span=50mm). A resistência à flexão (MPa) foi calculada na força máxima de ruptura (RM) e no limite de proporcionalidade (RP). A análise de variância em três níveis e o teste de Tukey HSD para comparações múltiplas foram utilizados para determinar a significância estatística dos resultados obtidos (P=0,05). Houve efeito significativo para os fatores Material e Ciclagem mecânica e para interação Armazenagem x Material. A análise dessa interação permitiu observar um aumento significante da RM das amostras L-UGH (50,64 MPa) e L-TR(57,36 MP-a), após armazenamento em água (P=0,001 e 0,016 respectivamente). Foi observado, ainda,... This study investigated the effect of relining, cyclic loading and water storage on the flexural strength of a denture base acrylic resin (Lucitone 550-L). Specimens L were made (64x10x2 mm3) and relined (1.3 mm) with four different relining resins (Kooliner-K, Ufi Gel Hard-UGH, Tokuso Rebase Fast-TR and New Truliner-NT). In addition, specimens relined with L and intact L specimens were made. Forty specimens (64x10x3.3 mm3) were made for each material combination and divided into four groups (n=10). Specimens were submitted to the flexural strength test after: polymerization (G1); water storage in distilled water for 30 days at 37+-1ºC (G2); cyclic loading for 10000 cycles at 5 Hz (G3) and water storage in distilled water for 30 days at 37+-1ºC followed by cyclic loading (G4). For the flexural tests, force measurements were made with a testing machine at a crosshead speed of 5mm/min using a three point bending fixture with a span of 50 mm. The ultimate flexure strength (RM) and the flexural strength at the proportional limit (RP) were calculated. The results were analyzed with 3-way ANOVA and Tukey's HSD tests. After water storage, the specimens L-UGH (50.64 MPa) and L-TR (57.36 MPa) demonstrated in increased RM (P=.001 and .016, respectively). Only L-TR (24.21 MPa) demonstrated an increased RP (P=.012) after water storage. The L-L specimens produced the highest RM and RP (P=.0000), followed by intact L specimens. After water storage, L-TR demonstrated higher RM and RP than L-K, L-UGH and L-NT. The cyclic loading decreased the RM and RP of all materials (P=.031 and .0000, respectively). It has been concluded that the water storage improved the RM of L-UGH and L-TR and the RP of L-TR. The L-L specimens produced the highest values of RM and RP. The RM and RP of all materials were detrimentally influenced by cyclic loading.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-02-17Bitstream added on 2014-06-13T18:58:05Z : No. of bitstreams: 1 silva_mm_me_arafo.pdf: 485003 bytes, checksum: a3299f64dc8ce209e1a2c0ea6740be6d (MD5) Este estudo teve por objetivo avaliar a efetividade da irradiação por microondas na esterilização de próteses totais. Para isso, oitenta próteses totais padronizadas foram confeccionadas e submetidas à esterilização com óxido de etileno. As próteses foram então individualmente inoculadas (107 ufc/mL) com meio de cultura de Tryptic Soy Broth (TSB) contendo um dos seguintes microrganismos: C.albicans, S. aureus, B. subtilis e P. aeruginosa. Após 48 horas de incubação a 37oC, 40 amostras foram imersas em 200 mL de água e irradiadas a 650 W por 6 minutos. Quarenta amostras não irradiadas foram utilizadas como controle. A seguir, 25 uL da suspensão resultante das diluições seriadas de 10-1 a 10-6, foram semeados em placas de Petri contendo os meios de cultura seletivos para cada microrganismo. Todas as placas foram incubadas a 37oC por 48 horas. Após a incubação, as colônias foram quantificadas em ufc/mL. Para verificação da efetividade exposição às microondas em longo prazo as amostras irradiadas foram imersas em meio de cultura e incubadas a 37oC por 7 dias. A esterilização foi obtida, após 48 horas, para as próteses contaminadas com C.albicans, S. aureus e B. subtilis. Um pequeno número de colônias foi observado em 2 placas de Petri para o microrganismo P. aeruginosa. Após 7 dias de incubação a 37oC houve crescimento microbiológico em 3 culturas de TSB, sendo 2 para P. aeruginosa e um para B. subtilis. Todas as próteses totais do grupo controle apresentaram crescimento microbiano nas placas de Petri, após 48 horas de incubação a 37oC. A irradiação por microondas por 6 minutos a 650 W provou ser um método rápido e efetivo para desinfecção das próteses totais contaminadas com P. aeruginosa e B. subtilis além, de promover a esterilização das inoculadas com C. albicans e S. aureus. The aim of this study was to evaluate the effectiveness of microwave irradiation on the sterilization of complete dentures contaminated with individual suspension of 3 bacterias (P. aeruginosa, S. aureus and B. subtilis) and one fungus (C. albicans). Eighty simulated maxillary complete dentures were fabricated in a standardized procedure and subjected to ethylene oxide sterilization. The dentures were individually inoculated (107 cfu/mL) with Tryptic Soy Broth (TSB) media containing one of the tested microorganisms. After incubation at 37°C for 48 hours, forty dentures were immersed in 200 mL of distilled water and submitted to microwave irradiation at 650 W for 6 minutes. Forty non – irradiated dentures were used as positive controls. Using 0.9% sodium chlorine solution as diluent, tenfold serial dilutions 10-1 – 10-6 were plated onto 4 selective media appropriate for each organism: Manitol Salt Agar for S. aureus, Miller Hinton for P. aeruginosa, Sabourand Agar containing 5 μg/mL gentamicin for C.albicans, and Tryptic Soy Agar for B. subtilis. All plates were incubated at 37°C for 48 hours and colonies counts of each plate were quantified (cfu/mL). To verify the long - term effectiveness ofmicrowave sterilization, the TSB beakers with the microwave specimens were incubated at 37°C for 7 days. Data were statistically analyzed by Kruskal – Wallis’s test (α=0.05). Irradiated dentures showed consistent sterilization of S. aureus, B. subtilis and C. albicans after 48 hours. Compared to P. aeruginosa control, a very low number of colonies were detected only in two plates. Turbidity was observed in three broth beakers, two from P. aeruginosa and one from B. subtilis, after 7 days incubation at 37°C. All control dentures showed microbial...(Complete abstract, click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003-02-17Bitstream added on 2014-06-13T18:58:07Z : No. of bitstreams: 1 lopes_jfs_me_arafo.pdf: 1497511 bytes, checksum: 5cff0da20eacc454b65a7066c2aba9f6 (MD5) O objetivo desta investigação foi determinar a resistência de união e limite de fadiga de nichos confeccionados em resina composta e ionômeros de vidro. Setenta e cinco corpos-de-prova (incisivos mandibulares humanos hígidos) com etiquetas adesivas com perfurações de 3,5mm de diâmetro foram adaptadas sobre a superfície lingual de cada dente. Esta delimitação tinha como objetivo padronizar a área da superfície de esmalte a ser condicionada e, posteriormente, mantida em contato com os materiais restauradores. Para realização dos nichos, matrizes foram realizadas para cada corpo-de-prova onde o material restaurador foi inserido. Os corpos-de-prova foram imersos em água destilada a 37ºC por um período de 30 dias. Para os ensaios de resistência à união, a máquina de testes mecânicos MTS modelo 810 foi calibrada utilizando uma velocidade de deslocamento de 0,5mm/min. Para os testes de limite de fadiga a máquina de testes foi calibrada para submeter cada corpo-de-prova a 10.000 ciclos constantes, com uma freqüência de 5 Hz, amplitude inicial de 0,5 mm e velocidade de rampa inicial de 100N/s. Os valores originais do experimento foram convertidos de N para MPa em função da área da base do nicho (circular) previamente calculada. Os corpos-de-prova após a fratura foram avaliados através de microscopia eletrônica de varredura com aumento de 500 vezes. A médias de resistência à união e limite de fadiga foram comparadas estatisticamente usando o teste de Análise de Variância a um Critério. Nos teste de cisalhamento, a resina composta Z-100 produziu maior valor de resistência de união (12,25 MPa) ao esmalte dentário que o ionômero de vidro convencional Fuji IX (7,21MPa). Não foram observadas diferenças entre os valores do material Fuji II LC (10,29MPa) e os demais materiais. Para todos os materiais, os corpos-de-prova testados por meio de ensaio dinâmico de... The aim of this study was to determine the bond strength and fatigue limit of rest seats prepared with composite resin and glass ionomer cements. The lingual aspect of seventy-five specimens (intact human mandibular incisors) was delimited by adhesive tags with 3.5-mm diameter perforations. This delimitation aimed at standardizing the area of enamel surface to be etched and later kept in contact with the restorative materials. For preparation of the rest seats, matrixes were obtained for each specimen on which the restorative material was placed. The specimens were immersed in distilled water at 37ºC for a period of 30 days. For the bond strength assays, the mechanical assay machine MTS model 810 was calibrated at a displacement speed of 0.5mm/min. For the fatigue limit tests, the assay machine was calibrated so as to submit each specimen to 10,000 constant cycles, at a 5-Hz frequency with an initial range of 0.5mm and initial sloping speed of 100N/s. The original values of the experiment were converted from N to MPa according to the previously calculated circular area of the base of the rest seat. After fracture, the specimens were evaluated by means of scanning electron microscopy with magnification of 500x. The means of bond strength and fatigue limits were statistically compared through the one-way variance analysis. For the shear resistance test, the composite resin Z-100 yielded a higher value of bond strength (12.25 MPa) to the dental enamel than the conventional glass ionomer cement Fuji IX (7.21MPa). No differences could be found between Fuji II LC (10.29MPa) and the further materials. For all materials, the specimens submitted to dynamic fatigue assay tests yielded lower mean values than those achieved through static shear assays. Regarding the fatigue limit values, all materials presented different behaviors, being that Fuji II LC obtained the higher mean value (6.4MPa), ...(Complete abstract, click electronic access below)