Search

Submitted by Alison Souza (alisonsouza@ufgd.edu.br) on 2019-03-28T21:50:40Z No. of bitstreams: 1 GustavoRobertoVillasBoas.pdf: 5341160 bytes, checksum: 1725a48146e56aaafb6821331f1b2f50 (MD5) Made available in DSpace on 2019-03-28T21:50:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 GustavoRobertoVillasBoas.pdf: 5341160 bytes, checksum: 1725a48146e56aaafb6821331f1b2f50 (MD5) Previous issue date: 2018-06-06 A Campomanesia pubescens (D.C.) O. BERG (guavira) é uma planta frutífera amplamente distribuída na América do Sul e utilizada pela população para fins medicinais e nutricionais, tendo importante valor econômico e cultural. Seus frutos contêm altos teores de flavonoides. No Sistema nervoso central (SNC), alguns flavonoides atuam como ansiolíticos e antidepressivos. Além de medicamentos, as plantas têm sido muito utilizadas como alimentos em todo o mundo. Sendo assim, o público consumidor das plantas deve conhecer as principais informações de segurança para evitar danos à saúde devido ao seu consumo irracional. A presente tese avaliou o potencial tóxico, através de testes de toxicidade aguda e a curto prazo, genotóxico e mutagênico, bem como os efeitos ansiolítico e antidepressivo do extrato etanólico dos frutos da C. pubescens (EEFCP). Para o teste de toxicidade aguda, ratos Wistar fêmeas receberam uma dose única de 2000 mg/kg de peso corporal do EEFCP por via oral e foram observados durante 14 dias. No teste de toxicidade a curto prazo, ratos Wistar machos e fêmeas receberam doses repetidas de 125, 250, 500 ou 1000 mg/kg de peso corporal do EEFCP por via oral, sendo tratados e observados durante 28 dias e, após esse período de tratamento, um grupo satélite e controle satélite permaneceram em observação por mais 14 dias. Para comprovar o efeito antidepressivo do EEFCP, ratos Wistar machos foram submetidos ao modelo de estresse brando crônico, ao teste de preferência por sacarose (TPS) e ao teste do nado forçado (FST). Para testar o efeito ansiolítico foram utilizados os modelos do Labirinto em Cruz Elevado (LCE), Campo Aberto (CA) e Marble-Burying (MB). No teste de toxicidade aguda, não foram observadas mortalidade nem alterações clínicas e nos pesos dos órgãos, indicando que a DL50 é superior a 2000 mg/kg de peso corporal. No teste de toxicidade a curto prazo, as doses testadas não produziram alterações significativas nos parâmetros comportamentais, fisiológicos, hematológicos ou histopatológicos nos animais. Estes resultados demonstram a baixa toxicidade aguda e a curto prazo do EEFCP em ratos. Quanto aos estudos de genotoxicidade, nas condições experimentais utilizadas no presente trabalho, nossos resultados fornecem as primeiras evidências de que o EEFCP, administrado por via oral (gavagem), não é genotóxico para as células de sangue periférico e não possui ação clastogênica/aneugênica em células de medula óssea dos ratos. Além disso, os metabólitos de biotransformação do EEFCP não apresentam atividade genotóxica, como demonstrado pelo teste SMART nos descendentes do cruzamento de alta bioativação. Com relação aos efeitos no SNC, após 2 semanas de tratamento, imipramina 25 mg/kg, EEFCP 250 mg/kg e EEFCP 500 mg/kg reverteram o comportamento anedônico mensurado pelo TPS e reduziram significativamente o tempo de imobilidade dos animais submetidos ao estresse. Ademais, os tratamentos com diazepam 2 mg/kg, EEFCP 250 mg/kg e EEFCP 500 mg/kg aumentaram o percentual de entradas e tempo gasto nos braços abertos do LCE, além de aumentarem a locomoção, o número de rearing e reduzirem o tempo de grooming no CA. A análise química do EEFCP indicou alto teor de flavonoides e a análise comportamental revelou efeito antidepressivo e ansiolítico, sugerindo que estes fitoconstituintes podem estar envolvidos com estas ações no SNC. Campomanesia pubescens (D.C.) O. BERG (guavira) is a fruit plant widely distributed in South America and used by the population for medicinal and nutritional purposes, having important economic and cultural value. Its fruits contain high levels of flavonoids. In the central nervous system (CNS), some flavonoids act as anxiolytics and antidepressants. In addition to medicines, plants have been widely used as food all over the world. Therefore, the consumers of the plants must know the main safety information to avoid damages to health due to their irrational consumption. The present thesis evaluated the toxic potential, through acute and sort-term toxicity, and genotoxic and mutagenic potential, as well as the anxiolytic and antidepressant effects of C. pubescens (EEFCP) ethanolic extract. For the acute toxicity test, female Wistar rats received a single dose of 2000 mg / kg body weight of oral EEFCP and were observed for 14 days. In the sort-term toxicity test, male and female Wistar rats received repeated doses of 125, 250, 500 or 1000 mg/kg body weight of oral EEFCP, being treated and observed for 28 days, and after that treatment period a satellite group and satellite control remained under observation for another 14 days. To confirm the antidepressant effect of the EEFCP, male Wistar rats are submitted to the chronic mild stress model, the sucrose preference test (SPT) and the forced swimming test (FST). In order to test the anxiolytic effects, the Elevated PlusMaze (EPM), Open Field (OF) and Marble-Burying (MB) models were used. In the acute toxicity test, no mortality, clinical abnormalities and organ weights were observed, indicating that LD50 is greater than 2000 mg kg body weight. In the sort-term toxicity test, the doses tested did not produce significant changes in the behavioral, physiological, hematological or histopathological parameters in the animals. These results demonstrate the low acute and sortterm toxicity of EEFCP in rats. As to genotoxicity studies, in the experimental conditions used in the present study, our results provide the first evidence that orally administered (gavage) EEFCP is not genotoxic for peripheral blood cells and does not have clastogenic/aneugenic action in cells of bone marrow of rats. In addition, EEFCP biotransformation metabolites do not exhibit genotoxic activity, as demonstrated by the SMART test in the offspring of the high bioactivation cross. Regarding the CNS effects, after 2 weeks of treatment, imipramine 25 mg/kg, EEFCP 250 mg/kg and EEFCP 500 mg/kg reversed the anhedonic behavior measured by the SPT and significantly reduced the immobility time of animals under stress. In addition, treatment with diazepam 2 mg/kg, EEFCP 250 mg/kg and EEFCP 500 mg/kg increased the percentage of inputs and time spent on the open arms of the EPM, in addition to increasing locomotion, rearing numbers and reducing time grooming in OF. The chemical analysis of the EEFCP indicated a high flavonoid content and the behavioral analysis revealed antidepressant and anxiolytic effects, suggesting that these phytochemicals may be involved with these actions in the CNS.

Resumo: Na busca de medicamentos para tratar a dependência de drogas, muitos modelos animais foram desenvolvidos. Nós adaptamos e validamos um modelo de dependência para camundongos, que permite a caracterização dos diferentes padrões de consumo de etanol. Este modelo é baseado em um paradigma de três garrafas por livre-escolha, que permite estudar o consumo de álcool, quando as soluções possuem sabor menos palatável por meio da adição de quinino, um estímulo gustativo amargo provavelmente aversivo. O modelo possui validade de face (consumo de álcool a longo prazo, ansiedade aumentada durante a abstinência de álcool e ingestão persistente apesar de adulteração das soluções de etanol com quinino); validade preditiva, quando testado com naltrexona e, também, confiabilidade (o modelo foi replicado em vários estudos). Em um desses estudos observou-se que os camundongos caracterizados como "adictos" exibiam diferentes níveis de transcrição dos genes Gabbr1 e Gabbr2 em diversas áreas do cérebro relacionadas ao comportamento aditivo. Como estes genes estão relacionados ao GABAB receptor, decidimos estudar o efeito de um agonista desse receptor sobre o consumo de etanol neste modelo de adição. Sessenta camundongos Swiss machos foram alojados individualmente e foram oferecidas soluções de etanol (5% e 10%) e água em um paradigma de livre escolha que consiste em quatro fases: aquisição (AC: 10 semanas), abstinência (W: 2 semanas), reapresentação (RE: 2 semanas) e adulteração (com quinino) (AD: 2 semanas). Os camundongos controle (n = 10) tiveram acesso somente à água. Os camundongos foram caracterizadas como: Adictos (A, n = 15: preferência por etanol durante todas as fases e sem haver redução no consumo de etanol quando adulterado), bebedor pesado (H, n = 16: preferência por etanol durante a fase de AC com uma redução no consumo de etanol quando adulterado) e bebedor de leve (L, n = 20: preferência por a água e baixo consumo de etanol durante todas as fases). Após a classificação, o etanol foi retirado durante quatro dias e, em seguida, metade dos animais dos grupos A, H e L receberam baclofeno intra-peritonealmente (i.p) (0, 1,25, 2,5 e 5,0 mg / kg, administrado aleatoriamente com 4 dias de abstinência entre cada dose) e os demais receberam solução salina. Trinta minutos depois, etanol e água foram oferecidos. O grupo controle recebeu as 3 doses de baclofen e 30 minutos depois obteve acesso à água (para verificar o efeito do baclofeno sobre o comportamento consumatório). O baclofeno reduziu o consumo de etanol apenas no grupo H. O grupo "adicto”, mesmo após o tratamento com baclofeno, apresentou uma "perda de controle" sobre o consumo de etanol. A ativação do receptor GABAB é necessária para o equilíbrio entre as subunidades GABAB1 e GABAB2 e, portanto, os níveis de transcrição genética desproporcionais observados em camundongos "adictos" poderiam explicar essa falta de resposta ao tratamento com baclofeno.