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Submitted by Gabriel Marra Schade (gabrielmarras@gmail.com) on 2020-09-13T23:21:18Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_de_Mestrado_Gabriel_Marra.pdf: 1091990 bytes, checksum: edbb7361832bdc2015659846f946dfbc (MD5) Rejected by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: problema 1: folha de rosto (natureza do trabalho) Na folha de rosto, natureza do trabalho você coloca: “Defesa de Mestrado”. O correto é: Dissertação (Dissertação apresentada ao curso... ). Na capa não é necessário colocar essa informação: “Defesa de Mestrado” Problema 2: financiamento Capes No formulário de submissão consta a Capes como agência financiadora do seu projeto. No arquivo submetido não localizei uma agradecimento a esta. Isso é uma exigência das agências de fomento. E a Capes sugere que o agradecimento seja feito da seguinte maneira: "O presente trabalho foi realizado com apoio da Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Código de Financiamento 001 Assim que tiver efetuado as correções submeta o arquivo, em formato PDF, novamente. Agradecemos a compreensão. on 2020-09-14T13:13:49Z (GMT) Submitted by Gabriel Marra Schade (gabrielmarras@gmail.com) on 2020-09-30T10:33:12Z No. of bitstreams: 1 FINAL_Dissertação_Gabriel_Marra.pdf: 1672112 bytes, checksum: 31b22cd342193a774b5374d28d29f188 (MD5) Approved for entry into archive by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br) on 2020-09-30T14:29:11Z (GMT) No. of bitstreams: 1 schade_gm_me_bot_par.pdf: 487366 bytes, checksum: 9abe49ca71e4ef62c6f1d41e06b383c3 (MD5) Made available in DSpace on 2020-09-30T14:29:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 schade_gm_me_bot_par.pdf: 487366 bytes, checksum: 9abe49ca71e4ef62c6f1d41e06b383c3 (MD5) Previous issue date: 2020-08-13 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Poliploidia é um fenômeno onde um organismo apresenta um conjunto extra de cromossomos, com histórico evolutivo de ocorrência natural em muitos grupos de peixes. Dentre as teorias relacionadas à sua ocorrência, a hibridização interespecífica é plausível por suas possibilidades de recombinações únicas de cromossomos. A hibridização pode causar anormalidades na gametogênese principalmente no tocante à etapa reducional da meiose, levando a ocorrência de gametas não reduzidos como espermatozoides e oócitos 2n ou 4n. Desta maneira, a fertilização com tais gametas poderia produzir progênie naturalmente poliploide. Objetivou-se nesse estudo verificar se a hibridização interespecífica entre Astyanax altiparanae e A. schubarti, e interpopulacional entre A. altiparanae favorece a ocorrência de gametas não reduzidos. Os espécimes apresentaram número diploide de 2n = 50 (A. altiparanae), 2n = 36 (A. schubarti) e 2n = 43 (hibrido interespecífico), com desenvolvimento embrionário similar ao controle (A. altiparanae). Os híbridos interpopulacionais não evidenciaram espermatozoides não reduzidos, com parâmetros espermáticos similares ao controle. Os híbridos interespecíficos indicaram maior quantidade de DNA (P = 0,0024) e espermatozoides não reduzidos (1n, 2n e 4n) viáveis, porém não sem nenhuma motilidade. Embora os híbridos interespecíficos sejam inférteis, a evidência de espermatozoides não reduzidos entre híbridos do gênero Astyanax suporta a hipótese da ocorrência de peixes naturalmente poliploides na região Neotropical. Polyploidy is a phenomenon in which an organism has an extra set of chromosomes, with the evolutionary history of occurring naturally in many fish groups. Among many theories related to its occurrence, interspecific hybridization is plausible due to its unique chromosome recombination possibilities. Hybridization can cause abnormalities in gametogenesis, especially concerning the reductive stage of meiosis, leading to the occurrence of unreduced gametes like 2n or 4n spermatozoa. Thus, fertilization with such gametes could produce naturally polyploid progeny. The objective of this study was to verify if the interspecific hybridization between Astyanax altiparanae and A. schubarti, and interpopulation hybridization between A. altiparanae favors the occurrence of unreduced gametes. The specimens had a diploid number of 2n = 50 (A. altiparanae), 2n = 36 (A. schubarti) and 2n = 43 (interspecific hybrid), and showed embryonic development similar to the control group (A. altiparanae). The interpopulation hybrids did not present unreduced sperm and showed sperm parameters similar to the control group. The interspecific hybrids showed a higher amount of DNA (P = 0.0024) and unreduced sperm (1n, 2n and 4n), but it did not show any motility. Although interspecific hybrids are infertile, the evidence of unreduced sperm among hybrids of the Astyanax genus supports the hypothesis that hybridization events are associated with the occurrence of naturally polyploid fish in the Neotropical region. 88887.341931/2019-00

Submitted by Rafaela Manchin Bertolini (rafaelambertolini@hotmail.com) on 2019-01-22T12:48:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertaçao de mestrado anexar repositorio.pdf: 3078434 bytes, checksum: 2da481903f76ada25e5f710ff2bc3d35 (MD5) Approved for entry into archive by Luciana Pizzani null (luciana@btu.unesp.br) on 2019-01-22T14:01:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 bertolini_rm_me_bot_par.pdf: 1360655 bytes, checksum: 07260ea94f9bb82b35dae2abffe595b6 (MD5) Made available in DSpace on 2019-01-22T14:01:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 bertolini_rm_me_bot_par.pdf: 1360655 bytes, checksum: 07260ea94f9bb82b35dae2abffe595b6 (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 Outra A triploidização é uma ferramenta interessante para produzir peixes estéreis. No Mandi amarelo, Pimelodus maculatus isso pode ser aplicada como uma ferramenta de reconstituição de espécies ameaçadas através de transplante de células germinativastronco. No capítulo I, objetivou-se estabelecer um protocolo eficiente para a triploidização da espécie P. maculatus empregando choques de térmicos. As temperaturas testadas foram de 37°C, 38°C e 39°C, 2 minutos pós-fertilização durante 2 minutos. Os embriões intactos serviram como grupo controle diplóide. A ploidia foi confirmada por citometria de fluxo, diâmetro nuclear dos eritrócitos e citogenética. Taxas de fertilização e sobrevivência foram verificadas nos principais estágios de desenvolvimento embrionário (clivagem, blástula, gástrula, segmentação e eclosão), assim como a porcentagem de larvas normais e anormais, e eficiência da triploidização. O choque térmico reduziu significativamente a sobrevivência no estágio de gástrula (P = 0,0178), somito (P = 0,0469) e incrementou o porcentual de larvas anormais (P = 0,0261). A menor sobrevivência foi observada para o tratamento a 39°C. Todos os tratamentos apresentaram altas porcentagens de indivíduos triploides, sendo o maior valor observado para o choque a 38°C (96,7%). Com base nos resultados acima, foi obtido um eficiente protocolo de triploidização em P. maculatus utilizado choque quente (38°C, 2 mpf e duração de 2 minutos). No capitulo II, foram avaliados aspectos relacionados ao desempenho reprodutivo e crescimento de indivíduos diploides (2n) e triploides (3n) da espécie P. maculatus. O objetivo foi avaliar crescimento entre as duas diferentes ploidias através do peso, comprimento, rendimento de carcaça, índice gonodassomatico e a possível esterilidade em peixes triploides por meio de análise histológica. Fêmeas 2n apresentaram valores de IGS significativamente maiores (P= 0,0157). A análise histológica mostrou fêmeas 2n em fase de maturação. Por outro lado, gônadas de fêmeas 3n apresentaram somente oogônias, células apoptóticas e poucos oócitos primários isolados. Machos 2n apresentaram gametogênese normal, ao passo que em machos 3n não foram observados esprmatozoides formados. Portanto, não foram observados gametas em fêmeas e machos 3n de P. maculatus, sendo considerados estéreis. Essas características são aplicáveis tanto nas ciências básicas, como modelo experimental, bem como nas ciências aplicadas, para a produção em larga escala. Triploidization is an interesting tool to produce sterile fish. In the spotted catfish Pimelodus maculatus, this may be used as a tool for reconstitution of endangered species based on stem germ cell transplantation. In Chapter I, the study aimed to establish an efficient protocol for triploidization in the spotted catfish P. maculatus using temperature shock. The temperatures tested were 37°C, 38°C e 39°C, 2 min postfertilization during 2 minutes. Intact embryos served as diploid control. Ploidy status was confirmed by flow cytometry, nuclear diameter of erythrocytes and karyotyping. Fertilization and hatching rates were verified at the main embryo stages (cleavage, blastula, gastrula, somite stage and hatching), the percentage of normal and abnormal larvae and also the efficacy of triploidization. Heat shock decrease the survival at blastula stage (P= 0,0178), somite (P = 0,0469) and increased the percentage of abnormal larvae (P = 0,0261). The lowest survival was observed at 39 °C. All treatments presented high percentages of triploid individuals, and the highest values were observed for heat shock at 38°C (96,7%). Based on results above, it was obtained an efficient protocol for triploidization in P. maculatus using heat shock (38°C, 2 min postfertilization during 2 minutes). In Chapter II, aspects related to the growth and reproductive performance of diploid (2n) and triploid (3n) of P. maculatus were evaluated. The objective was to evaluate growth according with the ploidy status, through length, weight, carcass yield, gonadassometic index and possible sterility in triploid fish by means of histological analysis. Diploid females presented significantly higher IGS values (P = 0.0157). Histological analysis showed 2n females in maturation stage. On the other hand, gonads of 3n-females presented only oogonia, apoptotic cells and few isolated primary oocytes. Diploid males presented normal gametogenesis, although in 3n-males spermatozoa were not observed. However, gametes were not observed in females and males 3n of P. maculatus, considered then as sterile sterile. AES Tietê Projeto #4690000174