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Neoplastic transformation results from a series of genetic alterations involving activation of protooncogenes and inactivation of tumor suppressor genes. Activation of ras protooncogenes by point mutation is the most frequent genetic alteration in spontaneous thyroid tumors. Since these lesions are prevalent in benign and malignant thyroid neoplasm, it has been suggested that they may be an early event in the process of cell transformation. Multinodular goiter and, in particular, goiter nodules, have been considered a true thyroid neoplasm and an interesting model to evaluate the ras proto-oncogene alterations in the pathogeneses of thyroid neoplasia. In accordance, we have demonstrated higher expression of H-ras and K-ras proto-oncogene in nodular tissue, suggesting that control of their expression might play a important role on neoplastic transformation in thyroid cells., A transformação neoplásica resulta de uma série de alterações genéticas, envolvendo ativação de proto-oncogenes e inativação de genes supressores tumorais. Ativação do protooncogene ras por mutações em ponto é a alteração genética mais freqüente em tumores espontâneos da tireóide. Mutações no ras são prevalentes em neoplasias benignas e malignas da tireóide, sugerindo que possam ser um evento inicial no processo de transformação da célula tireoidiana. O bócio multinodular é considerado uma neoplasia benigna e um interessante modelo para o estudo das alterações nesse proto-oncogene na tumorogênese da tireóide. De acordo, observamos aumento da expressão dos proto-oncogenes H-ras e K-ras no tecido nodular de bócio em comparação com o tecido normal. A revisão da literatura e os nossos resultados sugerem que o controle da expressão do ras tenha um importante papel nas etapas iniciais da transformação neoplásica da glândula tireóide.

Acute porphyria is a disorder characterized by neurological dysfunctions such as autonomic neuropathy, peripheral neuropathy and encephalopathy. Such dysfunctions arise from an enzymatic defect in the heme biosynthetic pathway leading to decreased heme biosynthesis and accumulation of the heme precursors 5-aminolevulinic acid (ALA) and porphobilinogen. ALA accumulation seems to be responsible for the reduced plasma melatonin levels observed in porphyria patients. This could be related to the intermittent and cyclical nature of porphyria attacks, as well as to psychological alterations observed in the prodromal phase (insomnia, depression, emotional variations). Moreover, it has been proposed that ALA-induced DNA oxidation may explain the higher incidence of primary liver carcinoma in porphyria patients who have experienced a series of acute crises when compared to asymptomatic carriers. On the other hand, it has been suggested that peripheral neuropathy may be related to heme depletion, leading to a dysfunction of nervous system heme proteins. In addition, there is evidence supporting the notion that a depletion of hepatic heme may increase tryptophan plasma levels leading to enhanced serotonin levels in the central nervous system. Such alteration could be the cause of the nausea, abdominal pain and psychomotor disturbances presented by patients., As porfirias agudas são causadas por uma deficiência na via de biossíntese do heme, que provoca ataques caracterizados por disfunções neuroviscerais (neuropatiaautonômica, neuropatia periférica e encefalopatia) e produção excessiva dos precursores porfirínicos, ácido 5-aminolevulínico e porfobilinogênio. O acúmulo de ácido 5- aminolevulínico parece estar envolvido na redução dos níveis de melatonina no plasma dos pacientes, o que poderia estar relacionado com o caráter intermitente e cíclico das crises de porfiria, bem como com algumas alterações psicológicas observadas na fase prodrômica (insônia, depressão, alterações emocionais). Também tem sido sugerido que efeitos oxidantes do ácido 5-aminolevulínico no DNA poderiam explicar a maior suscetibilidade de pacientes que sofreram vários ataques de porfiria ao desenvolvimento de carcinomas hepáticos. No entanto, a neuropatia periférica apresentada pelos pacientes parece não estar relacionada com os aumentos na produção de ácido 5-aminolevulínico. Sugere-se que ela possa estar relacionada a uma depleção de heme que poderia prejudicar o funcionamento de hemoproteínas no sistema nervoso. Além disso, existem evidências convincentes de que a depleção do heme hepático nos pacientes pode provocar um aumento nos níveis de triptofano circulantes, com possíveis conseqüências no sistema nervoso central, tais como aumento nos níveis de serotonina, provocando náuseas, dores abdominais e distúrbios psicomotores e psiquiátricos.

Relatório de Estágio do Mestrado Integrado em Ciências Farmacêuticas apresentado à Faculdade de Farmácia During the Pharmaceutical Sciences's degree, we acquire a wide range of scientific knowledge related to medicine, the patient, and public health, which prepares us to exercise the role of the pharmacist in the most diverse professional areas, from community and hospital pharmacy to industry and pharmaceutical distribution, regulatory affairs, or others such as clinical, bromatological, hydrological and toxicological analyses, among others. These reports, referring to my internships at Farmácia São Sebastião and at Hospital Dr. Nélio Mendonça, are based on two SWOT analyzes - Strengths, Weaknesses, Opportunities, Threats - with a critical and individual assessment of my professional path both in a community environment, with a brief exposition of 3 practical clinical cases, as in a hospital environment, with a description of the Pharmaceutical Services with which I had contact during this period. Multiple sclerosis (MS) is a neurological and demyelinating disease mediated by inflammatory and neurodegenerative mechanisms, that impair the activity of neurons located in the central nervous system (CNS). Recent data reveals that about 2,8 million people are currently diagnosed with this pathology, and it represents a great social and economic impact both for patients and their relatives. In most patients, the early stage of the disease is described by reversible episodes of neuronal dysfunction (Clinically isolated syndrome and relapse remitting MS), duo to the infiltration of immune cells in SNC, with consequent promotion of inflammation and formation of lesions. Over time, these underlying physiopathology mechanisms are gradually replaced for others, self-sufficient, responsible for progressive atrophy and neurodegeneration (secondary progressive MS). Some people may present an exclusive progressive clinical course from the onset (primary progressive MS). Despite there is no cure for MS, an actual therapeutic intervention allows, in addition to reducing the time and intensity of relapses and ameliorating the symptoms of MS, to control the disease activity by utilizing disease-modifying therapies (DMT) and making use of one of two therapeutic strategies, escalation or induction therapies, prioritizing safety or efficacy, respectively. DMT can modify the course of the disease by mechanisms of suppression, modulation, or reconstitution of the immunological system. Currently, more than 15 DMT, with different mechanisms of action, are approved. Thus, the implementation of a pharmacological therapy properly adapted to the patient, based on the drug’s characteristics and the patient’s particularities, is a contemporary reality. Ao longo do curso de Ciências Farmacêuticas adquirimos uma vasta gama de conhecimentos científicos relacionados com o medicamento, o doente e a saúde pública, que nos apronta para exercer o papel de farmacêutico nas mais diversas áreas profissionais, desde farmácia comunitária e hospitalar, à indústria e distribuição farmacêutica, assuntos regulamentares do medicamento, ou outras como análises clínicas, análises bromatológicas, hidrológicas, toxicológicas, entre outras. Os presentes relatórios, referentes aos meus estágios na Farmácia São Sebastião e no Hospital Dr. Nélio Mendonça, assentam em duas análises SWOT - Strengths, Weaknesses, Opportunities, Threats - acompanhadas de uma apreciação crítica e individual do meu percurso profissional tanto em ambiente comunitário, com uma breve exposição de 3 casos clínicos práticos, como em ambiente hospitalar, com uma exposição dos Serviços Farmacêuticos com os quais tive contato.A esclerose múltipla (EM) é uma doença neurológica desmielinizante, mediada por mecanismos inflamatórios e neurodegenerativos que comprometem a atividade dos neurónios do sistema nervoso central (SNC). Dados recentes indicam que cerca de 2,8 milhões de pessoas estão diagnosticadas com esta patologia, que representa um grande impacto social e económico para os doentes e os seus familiares/cuidadores. Na maioria dos pacientes, a fase inicial da doença é caraterizada por episódios reversíveis de disfunção neuronal (síndrome clínica isolada e EM surto remissão), decorrente da infiltração de células do sistema imune no SNC, com consequente promoção de inflamação e formação de lesões. Ao longo do tempo, estes mecanismos fisiopatológicos subjacentes são substituídos, gradualmente, por outros, autossuficientes, que são responsáveis pela progressiva atrofia e neurodegeneração (EM progressiva secundária). Algumas pessoas podem apresentar um curso clínico exclusivamente progressivo desde o início (EM progressiva primária). Apesar de ainda não ter cura, a atual intervenção terapêutica permite, para além de diminuir o tempo e intensidade dos surtos e aliviar os sintomas adjacentes à EM, também controlar a atividade da doença, servindo-se de fármacos modificadores da doença (FMD) e utilizando uma de duas estratégias terapêuticas, a escalada terapêutica ou a terapia de indução, que priorizam a segurança ou eficácia, respetivamente. Os FMD são capazes de alterar o curso da doença através de mecanismos de supressão, modelação ou reconstituição do sistema imunológico. Atualmente, estão aprovados mais de 15 FMD para a EM, com diferentes mecanismos de ação. Deste modo, a implementação de uma terapêutica farmacológica devidamente adaptada ao doente, com base nas características do fármaco e particularidades do doente, é uma realidade contemporânea.

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Universitário Egas Moniz O Líquen Plano é uma doença crónica inflamatória, autoimune, de maior incidência nos adultos, sendo menos frequente em idosos e sobretudo raro em crianças. Acomete a pele, mucosa, couro cabeludo, unhas e globo ocular. De acordo com a morfologia e localização das lesões é possível distinguir diversas variantes clínicas. Histologicamente é caracterizado por um denso infiltrado inflamatório na junção dermoepidérmica, acompanhado por degeneração hidrópica da camada basal. Existe evidência que a destruição dos queratinócitos basais por células T citotóxicas está na base da sua patogénese. Muitos fatores contribuem para o desenvolvimento da doença, tais como agentes infeciosos, stress, fatores genéticos, imunodeficiência, doenças hepáticas, entre outros. O diagnóstico é feito através do exame clínico e confirmado com análise histopatológica. O tratamento de primeira linha constitui-se em corticoterapia tópica, no entanto outros fármacos têm-se demonstrado eficazes. Muitas controvérsias existem acerca desta entidade, sendo necessários mais estudos sobre o tema tal como novas propostas terapêuticas. Este trabalho pretende realizar uma revisão bibliográfica cujo tema central é a abordagem do Líquen Plano como uma doença dermatológica sistémica, evidenciando a generalidade das manifestações clínicas, caracterização, possibilidades de tratamento e prognóstico. A metodologia utilizada implicou uma pesquisa na base de dados B-on tendo sido selecionados os artigos publicados num espaço temporal compreendido entre 2017 e 2020, e preferencialmente em língua inglesa. Lichen planus is an chronic autoimmune inflamatory disease presenting a higher incidence in adults while being less frequent in the elderly and especially rare in children. This disease compromises skin, mucosa, scalp, nails and the eyeball. According to morphology and location of these lesions, it is possible to differentiate many clinical variants. It is histologically characterized by a dense inflamatory infiltrate in the dermoepidermal junction and by the hydropic degeneration of the basal cell layer. Evidence has shown that the destruction of basal keratonocytes by cytotoxic T cells underlies their pathogenesis. Many factors contribute to the development of the disease, such as infectious agents, stress, genetic factors, immunodeficiency, liver diseases, among others. The diagnosis is based on the clinical exam and confirmed by biopsy. The first-line treatment is topical corticosteroids. However, other treatments have proven to be effective. Several controversies exist regarding this subject, which requires further studies on the subject as well as new therapeutic proposals. The aim of this study is to conduct a literary review to approach Lichen Planus as a systemic dermatological disease, highlighting the broad range of clinical manifestations, characterization, treatment possibilities and prognosis. The research was conducted on the B-on database. Articles in English published between 2017 and 2020 were considered.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Pythiosis is an infectious disease caused by the oomycete Pythium insidiosum. This disease affects humans and several animal species. In humans, the vascular form is the most common clinical presentation of pythiosis, where hyphae are observed on the artery wall, with the development of aneurysms and thrombosis, which can lead to limb amputation, among other consequences. In animals, the occurrence of vascular lesions has already been cited by several authors, however, the details of these lesions and their possible role in the pathogenesis of pythiosis have not been studied further. Thus, the objectives of this study were (1) to characterize the vascular lesions in dogs and horses, determining the presence and location of hyphae in the wall of the affected blood vessels; (2) to investigate how canine pythiosis lesions evolve and spread to adjacent tissues, (3) as well as to seek to understand the role of blood vessels in the development of kunkers in equine pythiosis; (4) and describe an unusual case of intestinal pythiosis in a horse. In the first study, the histological reassessment of the lesions made it possible to determine the location of the hyphae, mainly in the artery wall, rather than in the lumen of the vessels or inside thrombi, suggesting that in canine pythiosis, the occurrence of embolism is uncommon in comparison to pythiosis in humans or fungal infections in dogs. The observation of intense inflammation and hyphae adjacent to blood vessels (perivasculitis) strongly suggests that hyphae use the blood vessel wall as a pathway and that lesions and hyphae spread to adjacent tissues by extension (contiguity). In the second study, hyphae were observed on the wall of the arterioles and on the periphery of the kunkers, often slightly protruding out of the kunkers, in addition to remaining in the longitudinal direction of the collagen fibers, present inside some kunkers. These findings, added to the observation of kunkers with blood vessel-like ramifications, indicate that hyphae use arteries as a pathway and that the formation of kunkers occurs through the extension of the inflammatory process, similar to what occurs in dogs, forming the concretions of threedimensional shape. In the third article, the first case of intestinal segmental pythiosis was described in an equine, at the Veterinary Pathology Laboratory of UFSM, in 56 years of diagnostic routine. Pitiose é uma doença infecciosa causada pelo oomiceto Pythium insidiosum. Esta enfermidade acomete humanos e diversas espécies animais. Em humanos, a forma vascular é a apresentação clínica mais comum, na qual são observadas hifas na parede de artérias, com desenvolvimento de aneurismas e trombose, podendo levar à amputação de membros, entre outras consequências. Em animais, a ocorrência de lesões vasculares já foi citada por diversos autores, no entanto, o detalhamento destas lesões e o seu possível papel na patogênese da pitiose ainda não foram estudados mais profundamente. Assim, os objetivos desta tese foram (1) caracterizar as lesões vasculares da pitiose em cães e equinos, determinando a presença e a localização das hifas na parede dos vasos sanguíneos afetados; (2) explorar o modo como as lesões da pitiose canina evoluem e se disseminam para os tecidos adjacentes; (3) assim como também buscar compreender o papel dos vasos sanguíneos no desenvolvimento dos kunkers na pitiose equina; (4) e descrever um caso incomum de pitiose intestinal em um equino. No primeiro estudo, a reavaliação histológica das lesões permitiu determinar a localização das hifas principalmente na parede de artérias, e em menor quantidade no lúmen dos vasos ou em meio a trombos, sugerindo que na pitiose canina, a ocorrência de embolismo seja infrequente em comparação à pitiose em humanos ou a infecções fúngicas em cães. A observação de intensa inflamação e de hifas adjacentes aos vasos sanguíneos (perivasculite) sugere fortemente que as hifas utilizam a parede dos vasos sanguíneos como um caminho, e que as lesões e hifas se disseminam para os tecidos adjacentes por extensão (contiguidade). No segundo estudo, foram observadas hifas na parede de arteríolas e na periferia dos kunkers, muitas vezes se projetando levemente para fora dos kunkers, além de permanecerem no sentido longitudinal das fibras colágenas, presentes no interior de alguns kunkers. Estes achados, somados à observação de kunkers com ramificações semelhantes a vasos sanguíneos, sugerem que as hifas utilizem as artérias como um caminho, e que a formação dos kunkers ocorra pela extensão direta do processo inflamatório, semelhante ao que parece ocorrer nos cães, porém formando as concreções (kunkers) de forma tridimensional. No terceiro artigo, foi descrito o primeiro caso de pitiose segmentar intestinal em um equino, no Laboratório de Patologia Veterinária da UFSM, em 56 anos de rotina diagnóstica.

A Doença de Parkinson (DP) é uma doença crónica e neurodegenerativa. Nos dias de hoje as doenças neurológicas são a primeira causa de incapacidade a nível mundial e o seu estudo é de extrema importância pois a prevalência destas condições continua a aumentar. A etiologia da DP encontra-se em grande parte por desvendar mas existem atualmente algumas teorias em relação à perda neuronal observada. Essas teorias envolvem inflamação, stress oxidativo, disfunção mitocondrial e processamento anormal de proteínas. Foi demostrado que fatores ambientais, comportamentais e genéticos podem encontrar-se relacionados com o aparecimento e desenvolvimento desta condição neurodegenerativa. A idade avançada e o sexo masculino são os maiores fatores de risco de DP. A genética é um fator de risco substancial para o desenvolvimento de DP. A investigação da contribuição genética da patogénese de DP foi impulsionada pela identificação de mutações no gene codificante da α-sinucleína (SNCA) responsáveis pelo aparecimento da doença. Após essa descoberta surgiram outras investigações que identificaram vários genes adicionais, também eles implicados no aparecimento de DP. Foram também identificadas várias formas monogénicas da doença e numerosos fatores de risco genéticos. Mutações altamente penetrantes que resultam em formas monogénicas raras da doença são conhecidas em genes como SNCA, Parkina, DJ-1, PINK1, LRRK2 e VPS35. Verificou-se também que mutações de penetrância incompleta nos genes LRRK2 e GBA são fortes fatores de risco para a DP Em termos da farmacogenómica de DP a informação disponível ainda é escassa, por isso, não permitindo, ainda, prever a variabilidade inter-individual da eficácia e toxicidade dos fármacos. No entanto, bastantes esforços estão a ser feitos para que num futuro próximo se consiga aplicar o conceito de terapêutica individualizada baseada na genética de cada individuo. Genes que codificam enzimas envolvidas no metabolismo da dopamina como o DRD2, COMT e DAT são alguns exemplos de genes que se encontram sob o olhar atento dos cientistas. Parkinson’s disease (PD) is a chronic and neurodegenerative disease. Nowadays, neurological diseases are the first cause of disability worldwide and their study is extremely important because the prevalence of these conditions is increasing. The etiology of PD remains mostly unknown but there are some theories regarding the observed neuronal loss. These theories include inflammation, oxidative stress, mitochondrial dysfunction and abnormal protein processing. Studies have shown that environmental, behavioral and genetic factors may be related to the onset and development of this neurodegenerative condition. Advanced age and male gender are the major risk factors for PD development. An investigation identified the α-sinuclein (SNCA) gene as responsible for the appearance of the disease, leading to the promotion of additional research about the genetic contribution for PD pathogenesis. Other investigations emerged which identified several genes involved in the onset of PD. Several monogenic forms of the disease and genetic risk factors were also identified. Highly penetrating mutations in genes such as SNCA, Parkina, DJ-1, PINK1, LRRK2 and VPS35 result in rare monogenic forms of the disease. Incomplete penetrance mutations in LRKK2 and GBA genes have also been found to be strong risk factors for PD. In terms of PD pharmacogenomics the information available is still scarce and does not allow, presently, the prediction the inter-individual variability of efficacy and toxicity of drugs. However, a lot of efforts are being made to implement the concept of individualized therapy based on the genetics of each individual. Genes coding for enzymes involved in dopamine metabolism such as DRD2, COMT and DAT are some examples of genes that are under the watchful eye of scientists.

Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Bovine alphaherpesvirus 2 (BoHV-2) - the agent of bovine herpetic mamillitis (BHM) – is related to Human alphaherpesviruses 1 and 2 (HHV-1, HHV-2) and has been proposed as a model for vaccine and drug testing. In addition, very little is known about the pathogenesis of BoHV-2 infection. Herein we studied the pathogenesis of BoHV-2 in calves after inoculation through different routes and investigated the activity of candidate anti-viral drugs in vitro and in vivo against BoHV-2. In the first study, 3 to 4-months-old calves were inoculated with BoHV-2 (107TCID50.mL-1) intramuscularly (IM, n=4), intravenously (IV, n=4) or transdermally (TD) after mild scarification (n=4) and monitored thereafter. Calves inoculated by the IV route presented as light increase in body temperature between days 6 to 9 post-inoculation (pi). Virus inoculation by the TD route resulted in mild inflammatory lesions at the sites of inoculation, characterized by hyperemia, small vesicles, mild exudation and scab formation, between days 2 and 8pi.Virus or viral DNA was detected by PCR in the crusts/swabs collected from lesions of 3 out of 4 animals inoculated TD from day 2 to 8pi. Viremia was detected in 3/4 animals of the IM group (from day 4 to 8pi); in 2/4 animals of the IV group (days 6 and 8pi) but not in the TD group. Administration of dexamethasone (Dex) to the inoculated calves at day 48pi, did not result in virus reactivation. In the second study, we investigated the anti-viral activity in vitro against BoHV-2 of three anti-herpetic drugs: Cidofovir (CDV), Fanciclovir (FAM), Foscarnet (PFA), and diphenyl disselenide (PhSe)2 by plaque reduction assays (PRA). A significant reduction in the number of viral plaques was observed by treating the monolayers with (PhSe)2 (79.7% reduction, p

Objective: to present the form of action and interaction of SARS-CoV-2 with human cells and describe the main studies on the treatment for Covid-19. Methodology: a review was carried out in the Science Direct-Elsevier and PubMed databases with analysis of experimental works in vitro and in vivo, review, technical notes and clinical research records. The terms used were: Coronavirus, COVID-19, SARS-CoV-2 associated with pathogenesis, clinical studies and treatment. Results: Many studies are under development to understand the pathogenesis of the virus and to seek efficient therapies to contain COVID-19, such as chloroquine, hydroxychloroquine, Arbidol, favipiravir, remdesivir, among others. Conclusion: This article reviewed the mechanisms of action of SARS-CoV-2 in order to provide information for a better understanding of the actions taken by several researchers in therapy against COVID-19. Many drugs are undergoing clinical trials to see if they can minimize the serious effects of the virus on the population. Objetivo: presentar la forma de acción e interacción del SARS-CoV-2 con células humanas y describir los principales estudios sobre el tratamiento de Covid-19. Metodología: se realizó una revisión en las bases de datos Science Direct-Elsevier y PubMed con análisis de trabajos experimentales in vitro e in vivo, revisión, notas técnicas y registros de investigación clínica. Los términos utilizados fueron: coronavirus, COVID-19, SARS-CoV-2 asociado a patogénesis, estudios clínicos y tratamiento. Resultados: Se están desarrollando muchos estudios para comprender la patogénesis del virus y buscar terapias eficientes para contener COVID-19, como cloroquina, hidroxicloroquina, Arbidol, favipiravir, remdesivir, entre otros. Conclusión: Este artículo revisó los mecanismos de acción del SARS-CoV-2 con el fin de proporcionar información para una mejor comprensión de las acciones tomadas por varios investigadores en la terapia contra COVID-19. Muchos medicamentos están siendo sometidos a ensayos clínicos para ver si pueden minimizar los efectos graves del virus en la población. Objetivo: apresentar a forma de ação e interação do SARS-CoV-2 com as células humanas e descrever os principais estudos sobre o tratamento para a Covid-19. Metodologia: foi realizada uma revisão nas bases de dados Science Direct-Elsevier e PubMed com análise de trabalhos experimentais in vitro e in vivo, de revisão, de notas técnicas e registros de pesquisas clínicas. Os termos utilizados foram: Coronavírus, COVID-19, SARS-CoV-2 associadas com pathogenesis, clinical studies e treatment. Resultados: Muitos estudos estão em desenvolvimento para entender a patogênese do vírus e buscar terapias eficientes para conter a COVID-19, como a cloroquina, hidroxicloroquina, Arbidol, favipiravir, remdesivir, entre outros. Conclusão: Este artigo revisou mecanismos de ação do SARS-CoV-2 a fim de fornecer informações para o melhor entendimento das ações adotadas por diversos pesquisadores na terapia contra a COVID-19. Muitos medicamentos estão em fases clínicas de experimentação para saber se podem minimizar os graves efeitos do vírus na população.

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A doença de Chagas (DC) é uma doença tropical causada pelo Trypanosoma cruzi. Uma das apresentações da DC crônica é a forma gastrointestinal. O megacólon foi descrito como manifestação tardia da DC por Koberle na década de 50, e desde então a participação do sistema nervoso entérico intrínseco no controle da função muscular da parede intestinal tem sido aventada como o mecanismo patogênico. No modelo murino de megacólon chagásico estabelecido por nosso grupo observamos perda de corpos neuronais nos gânglios do plexo mioentérico apenas na fase aguda, acompanhado de desnervação (axonal) intramuscular em todos os períodos a partir de 7 meses pós infecção (m.p.i.) com impacto no aumento da espessura da parede muscular a partir de 12 m.p.i. Padronizou-se uma cultura primaria de neurônios mioentéricos que se desenvolve na presença de células musculares lisas. As culturas infectadas com as cepas Y e Dm28c de T. cruzi apresentaram grande número de neurônios nitrérgicos, os quais se encontravam parasitados, e exibiram maior oxidação pela sonda DAF-FM, que detecta espécies reativas de nitrogênio (ERN). Os mecanismos de morte neuronal in vitro na fase aguda envolveram danos à estrutura mitocondrial do neurônio (estresse oxidativo) e processo inflamatório agudo enquanto o mecanismo de desnervação axonal ocorre de forma progressiva na fase crônica em associação com a persistência do DNA do parasito e presença de infiltrado inflamatório mononuclear com predomínio de linfócitos CD8+ e alterações fenotípicas das células musculares lisas. Em estudos de motilidade in vivo e ensaios eletrofisiológicos e farmacológicos ex vivo paralelos à cinética experimental observou-se alteração da amplitude de contração da musculatura lisa, bem como sua ritmicidade na infecção crônica (15 m.p.i.). Os ensaios farmacológicos sugerem alterações na resposta funcional do receptor muscarínico. Na fase aguda o bloqueio por atropina diminuiu a resposta contrátil, ocorrendo o contrário na fase crônica. Tais respostas em conjunto com a observação de diminuição da expressão do receptor muscarínico (WB) indica dano estrutural na fase crônica. Já o bloqueio dos receptores nicotínicos na fase aguda levou a aumento de amplitude de contração nos animais infectados, em correlação com aumento da expressão destes receptores. Esse estudo integra a história natural da doença de Chagas na fase aguda e crônica e abre perspectivas para o desenho de intervenções terapêuticas direcionadas aos mecanismos patogenéticos da doença intestinal.

A tireoide é uma glândula endócrina que pode ser afetada por diversas lesões, que incluem doenças reativas, autoimunes e neoplásicas. Evidências mostram que a resposta imunológica, a partir da liberação de citocinas inflamatórias por células imunes e não imunes, desempenha um importante papel no desenvolvimento de diversas doenças. Dentre essas citocinas, destacam-se a IL-17 e a IL-23, as quais têm sido associadas à resposta Th17 e patogênese de diversas doenças tireoidianas. Dessa forma, esta pesquisa teve como objetivo avaliar a imunoexpressão das proteínas IL-17 e IL-23 em carcinomas papilíferos de tireoide (CPTs), adenomas foliculares (AFs), bócios coloides (BCs) e tireoidites de Hashimoto (THs) (isoladas e associadas a CPTs ou BCs), com o intuito de compreender melhor a atuação destas citocinas nestas entidades. A amostra foi composta por 30 casos de CPTs, 10 AFs, 15 BCs e 15 THs. A análise da imunoexpressão das proteínas nas células foliculares/tumorais foi realizada semiquantitativamente em toda extensão das lesões, as quais foram classificadas em três escores: 1 (≤ 33%), 2 (> 33% – 66%) e 3 (> 66%). Para a avaliação dos linfócitos imunopositivos, foram selecionados cinco campos com maior quantidade de linfócitos positivos, onde foi realizada a contagem. Os dados foram submetidos à análise estatística por meio dos testes de Kruskal-Wallis (KW), Mann-Whitney (U) e Spearman (r), com o nível de significância estabelecido em 5% (p < 0,05). Na análise da IL-17 entre as lesões, foi verificada maior imunoexpressão pelos linfócitos nas THs comparado aos AFs e BCs (p=0,041 e p=0,013). Na avaliação da IL-23 foi constatada uma maior imunomarcação das células foliculares/tumorais nas THs em relação aos CPTs (p=0,002), assim como, observou-se uma maior expressão desta citocina nos linfócitos das THs em comparação aos CPTs, AFs e BCs (p=0,001; p=0,023 e p=0,003). Além disso, foram observadas nas THs correlações estatisticamente significativas entre a imunoexpressão da IL-17 e IL-23 tanto nas células foliculares/tumorais, como nos linfócitos (r=0,539; p=0,038 e r=0,522; p=0,046). Sugere-se que a IL-17 e IL-23 influenciam a patogênese destas lesões tireoidianas e que em algumas delas, represente atuação da resposta Th17. The thyroid is an endocrine gland that can be affected by several lesions, including reactive, autoimmune and neoplastic diseases. Evidence shows that the immune response, from the release of inflammatory cytokines by immune and non-immune cells, plays an important role in the development of several diseases. Among these cytokines, IL-17 and IL-23 stand out, which have been associated with the Th17 response and pathogenesis of several thyroid diseases. Hence, this research aimed to evaluate the immunoexpression of IL-17 and IL-23 proteins in papillary thyroid carcinomas (PTCs), follicular adenomas (FAs), colloid goiters (CGs) and Hashimoto's thyroiditis (HTs) (isolated and associated with PTCs or GCs), in order to better understand the role of these cytokines in these entities. The sample consisted of 30 cases of PTCs, 10 FAs, 15 CGs and 15 HTs. The analysis of protein immunoexpression in follicular/tumor cells was semiquantitatively performed in all lesions, which were classified into three scores: 1 (≤ 33%), 2 (> 33% - 66%) and 3 (> 66%). For the evaluation of immunopositive lymphocytes, five fields with the greater number of positive lymphocytes were selected, where the count was performed. The data were submitted to statistical analysis using the Kruskal-Wallis (KW), Mann-Whitney (U) and Spearman (r) tests, with the significance level set at 5% (p < 0,05). In the analysis of IL-17 between lesions, a higher immunoexpression was verified in the HT lymphocytes compared to FAs and CGs (p=0.041 and p=0.013). In the evaluation of IL-23, a higher immunostaining of follicular/tumor cells in HTs was detected in relation to PTCs (p=0.002), as well as, a greater expression of this cytokine was observed in the lymphocytes of HTs compared to PTCs, FAs and CGs (p=0.001; p=0.023 and p=0.003). In addition, statistically significant correlations between the immunoexpression of IL17 and IL-23 were observed in both follicular/tumor cells and lymphocytes (r=0.539; p=0.038 and r=0.522; p=0.046). It is therefore suggested that IL-17 and IL-23 influence the pathogenesis of these thyroid lesions and that in some of them, they represent the Th17 response.

Caprine alphaherpesvirus 1 (CpHV-1), family Herpesviridae, genus Varicellovirus is genetically and antigenically related to Bovine alphaherpesvirus 1 (BoHV-1). In kids, CpHV-1 infection has been associated with gastroenteric and respiratory diseases, whereas in adult the infection is usually subclinical or associated with abortions. Here, we investigated further the antigenic relationships of CpHV-1 with BoHV-1 and the pathogenesis of CpHV-1 in goats and calves. The antigenic relationship between CpHV-1 and BoHV-1 was analyzed by reactivity with monoclonal antibodies (MAbs) and by virus-neutralizing assays (VN). Reactivity of MAbs revealed that CpHV-1 and BoHV-1 share epitopes on the major envelope glycoproteins, e.g. gB, gC and gD. Additionally, the antigenic relationship was demonstrated by VN assays, when cross neutralization was observed between the viruses. On these tests, BoHV-1 antisera neutralized CpHV-1 more efficiently than CpHV-1 antisera neutralized BoHV-1. The antigenic relationship between CpHV-1 and BoHV-1 may have impact in serological diagnosis and control. The pathogenesis of CpHV-1 (Isolate WI 13- 46) was studied in experimentally infected kids and calves. For this, seven four to six-months-old kids, and twelve calves (six to eight-months-old), were inoculated intranasally (IN) with WI 13-46 isolate (5x107,6 infective doses, TCID50). After inoculation, clinical, serological and virological monitoring were performed. The seven kids inoculated with CpHV-1 presented nasal secretion between day 3 and 14 post-infection (pi) and respiratory distress between days 5 and 8 pi. The virus was isolated from the nasal swabs of all kids between day 1 and 9 pi. In order to verify the reactivation of the latent infection, on day 36 pi, the animals were treated with dexamethasone (Dex, 0.4mg/Kg/day) for 5 days and monitored for 15 subsequent days. Administration of Dex did not result in virus excretion in nasal secretions nor in increase in neutralizing antibodies titers. However, latent infection had been established, as evidenced by detection of CpHV-1 DNA in the trigeminal ganglia (TG) and olfactory bulbs (OB) of kids euthanized on day 67 pi. On the other hand, inoculation of CpHV-1 in calves did not result in viral replication/excretion, clinical signs or seroconversion. Overall, these results demonstrate that: i) CpHV-1 and BoHV-1 are antigenically related; ii) CpHV-1 (WI 13-46) replicates efficiently in kids and may produce mild to moderate respiratory disease after IN inoculation; iii) CpHV-1 establishes latent infection in TG and OB of kids but was not reactivated following standard herpesviruses reactivation protocols; and iv) Calves were not susceptible to CpHV-1 infection after IN inoculation. Finally, these results helped in understanding the antigenic relationships among animal herpesviruses and pathogenesis of CpHV- 1 infection in kids and calves. O alfaherpesvírus caprino 1 (Caprine alphaherpesvirus 1, CpHV-1) pertence à família Herpesviridae, gênero Varicellovirus e está relacionado genética e antigenicamente com o alfaherpesvírus bovino 1 (Bovine alphaherpesvirus 1, BoHV-1). Em caprinos jovens, o CpHV-1 tem sido associado com doença gastroentérica e respiratória, enquanto em animais adultos a infecção é geralmente subclínica ou associada com abortos. Neste estudo, investigou-se as relações antigênicas entre o CpHV-1 e BoHV-1 e a patogênese do CpHV-1 em cabritos e bezerros. A relação antigênica foi analisada pela reatividade com anticorpos monoclonais (AcMs) contra o alfaherpesvírus bovino e por soro-neutralização (SN). A reatividade dos AcMs revelou que o CpHV-1 e BoHV-1 compartilham epítopos nas principais glicoproteínas do envelope: gB, gC e gD. Adicionalmente, a relação antigênica foi demonstrada por ensaios de SN, quando se observou neutralização cruzada entre os vírus. Nesses testes, verificou-se que anti-soro contra o BoHV-1 neutralizou o CpHV-1 com maior eficiência do que o anti-soro do CpHV-1 neutralizou o BoHV-1. A relação antigênica entre a CpHV-1 e BoHV-1 pode ser associada à possível transmissão desses vírus em hospedeiros heterólogos, com um potencial impacto em sua epidemiologia, diagnóstico sorológico e controle. A patogênese do CpHV-1 (isolado WI 13-46) foi estudada em caprinos jovens e bezerros. Para tal, sete caprinos, com idade entre quatro e seis meses, e doze bovinos, com idade de seis a oito meses, foram inoculados pela via intranasal (IN) com dose de 5x107 doses infectantes para 50% dos cultivos celulares (DICC50) do isolado WI 13-46. Após a inoculação, os animais foram monitorados nos aspectos clínicos, virológicos e sorológicos. Os sete caprinos inoculados apresentaram secreção nasal entre os dias 3 e 14 pós-infecção (pi) e dificuldade respiratória entre os dias 5 e 8 pi. O vírus foi isolado de secreções nasais dos caprinos inoculados, entre os dias 1 e 9 pi. Com objetivo de investigar a capacidade do CpHV-1 reativar a infecção latente, a partir do dia 36 (pi) os cabritos foram tratados com dexametasona (Dex, 0,4mg/kg/dia) por 5 dias e monitorados nos 15 dias subsequentes. A administração de Dex não resultou em excreção de vírus nas secreções nasais ou em aumento nos títulos dos anticorpos neutralizantes. No entanto, a infecção latente foi estabelecida, como evidenciado pela detecção do DNA do CpHV-1 no gânglio trigêmeo (GT) e bulbos olfatórios (BO) dos caprinos eutanasiados no dia 67 pi. A inoculação de CpHV-1 em bezerros não resultou em infecção produtiva, não havendo replicação ou excreção viral. Em conjunto, esses resultados demonstram que: i) CpHV-1 e BoHV-1 são antigenicamente relacionados; ii) O CpHV-1 (WI 13-46) replica com eficiência em caprinos jovens e pode produzir doença respiratória de leve à moderada após inoculação IN; iii) O CpHV-1 estabelece infecção latente no GT e BO de caprinos, mas não é reativado por protocolos-padrão de reativação de alfaherpesvírus; e iv) Bezerros não foram susceptíveis à infecção por CpHV-1 após inoculação IN. Por fim, esses resultados auxiliam no conhecimento das relações antigênicas entre herpesvírus animais e da patogenia da infecção pelo CpHV-1 em caprinos jovens e bezerros.

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Universitário Egas Moniz A Doença Periodontal (DP) é uma patologia de cariz inflamatório, com elevada prevalência em adultos e é considerada a segunda maior causa de patologia dentária em todo o Mundo. É uma doença infeciosa que afeta os tecidos periodontais e que pode resultar na perda de dentes. A DP e várias patologias sistémicas têm vindo a ser relacionadas. Estudos indicam que a periodontite pode ser uma manifestação ou pode ser agravada pela presença de algumas patologias sistémicas. No entanto a evidência científica tem demonstrado que esta associação vai além dessa relação e os estudos indicam que a periodontite pode influenciar na patogénese de algumas patologias. Há vários anos que a literatura associa algumas patologias sistémicas e patologias da cavidade oral, tornando esta relação antiga. Já os egípcios, hebraicos, gregos e romanos referiam a importância da saúde oral e o bem-estar geral. Em 1900 surge o conceito de infeção local que veio estimular a procura de conhecimento através de investigação, sobre afeções da cavidade oral, em especial a doença periodontal e a influência que pode exercer na saúde em geral dos indivíduos. Neste contexto, esta revisão da literatura irá discutir os possíveis mecanismos que associam as bactérias periodontopatogénicas e diferentes patologias sistémicas, como Doenças Cardiovasculares, Cancro, Alzheimer e Diabetes Mellitus. Periodontal disease (PD) is an inflammatory disorder with high prevalence in adults and it’s considered the second leading cause of dental pathology worldwide. It is an infectious disease that affects periodontal tissues and that can result in teeth loss. PD have been related with several systemic pathologies. Studies indicate that periodontitis may be a manifestation or may be aggravated by the presence of some systemic pathologies. However scientific evidence has shown that this association goes beyond this relationship and studies have indicated that periodontitis may influence the pathogenesis of some pathologies. For several years, the literature has associated some systemic pathologies with pathologies of the oral cavity. Already the ancient Egyptians, the Hebrew, the Greeks and the Romans referred the importance of oral health and general well-being. In the 1900 the concept of local infection has stimulated the search for knowledge through research, on oral cavity diseases, especially PD and the influence it can exert on the general health of individuals. In this context, this review will discuss the possible mechanisms that associate the periodontal pathogenic bacteria and different pathologies such as cardiovascular diseases, cancer, Alzheimer's and diabetes Mellitus.

A incidência de carcinomas diferenciados da tireoide no Rio Grande do Norte, Brasil, é relativamente elevada. Casualmente, observamos uma destacada ocorrência de casos de carcinomas papilíferos em membros de mesmas famílias identificados em nossa casuística, a partir de observações clínicas de rotina. Em algumas famílias detectamos três ou mais casos de carcinomas papilíferos diagnosticados entre pacientes de primeiro e segundo grau de parentesco. Assim, decidimos aprofundar o estudo no que se refere à etiopatogenia desses tumores com o objetivo de estabelecer se há alguma expressão coincidente entre essas pessoas, que possa justificar tal prevalência e traçar um perfil clínico e genético a partir da análise do sequenciamento do exoma por meio do estudo do DNA extraído de coletas de amostras sanguíneas desses pacientes e de seus familiares. Constatamos que o sequenciamento do exoma realizado na família IV, portadora de Câncer Familiar de Tireoide Não Medular, em quatro pacientes afetados com carcinoma papilífero da tireoide em três gerações consecutivas, identificou uma mutação no gene X, quando ocorreu a substituição de adenina por citosina (A>C) no exon X. E esta alteração de nucleotídeos causou o deslocamento de isoleucina para metionina na posição X (p.xM). Esta variante foi classificada como deletéria e provavelmente prejudicial. Este gene X é um componente importante da membrana basal e evidências científicas mostraram que ele tem função relacionada à migração, invasão e progressão tumoral. Com a informação fornecida pelo sequenciamento genético de nova geração, apontando genes associados ao carcinoma diferenciado da tireoide, será possível o aperfeiçoamento do diagnóstico, condução do tratamento e rastreamento de membros familiares afetados por doença nodular tireoideana, impactando nos diversos índices de aferição de resultados de promoção da saúde. Este projeto é original uma vez que aborda um tema de investigação ainda não esclarecido na literatura e inédito no nosso país. The incidence of thyroid differentiated carcinomas in Rio Grande do Norte, Brazil, is relatively high. Incidentally, we observed a prominent occurrence of cases of papillary carcinomas in members of the same families identified in our series, based on routine clinical observations. In some families we have detected three or more cases of papillary carcinoma diagnosed among first and second degree, kinship patients. Thus, we decided to deepen the study regarding the etiopathogenesis of these tumors in order to establish if there is any coincident expression among these people, which may justify such prevalence and draw a clinical and genetic profile from the analysis of exome sequencing through from the study of DNA extracted from blood samples collected from these patients and their families. We found that exome sequencing performed in family IV, with non-medullary thyroid cancer, in four patients with papillary thyroid carcinoma in three consecutive generations, identified a mutation in the gene X, when adenine was replaced by cytosine (A> C) in exon X. And this nucleotide change caused the shift from isoleucine to methionine at position X (p.xM). This variant was classified as deleterious and probably harmful. This gene X is an important component of the basement membrane and scientific evidence has shown that it has a function related to migration, invasion and tumor progression. With the information provided by the new generation genetic sequencing, pointing out genes associated with differentiated thyroid carcinoma, it will be possible to improve the diagnosis, treatment management and screening of family members affected by thyroid nodular disease, impacting the various indexes of measurement of the results health promotion. This project is original as it addresses a research topic not yet clarified in the literature and unpublished in our country.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2019. Introdução: A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, é considerada a principal doença endêmica de origem parasitária nas Américas do Sul e Central, afetando aproximadamente oito milhões de pessoas em todo o mundo. Sua sintomatologia é variada, abrangendo desde casos assintomáticos até indivíduos que desenvolvem cardiomegalia, megacólon e megaesôfago. A relação parasito-hospedeiro é muito dinâmica e, por isso, a determinação da patogênese da doença de Chagas ainda é uma questão desafiadora. As teorias de persistência do parasito e autoimunidade buscam elucidar esse desafio. Objetivo: Verificar a contribuição de múltiplos fatores no processo de patogênese da doença de Chagas em modelo experimental. Métodos: Infectou-se camundongos machos e fêmeas com 1,0x104 formas tripomastigotas de T. cruzi das linhagens Colombiana, Y e CL Brener, sendo eutanasiados a 30 e 100 dias pós-infecção (dpi). Para determinar a carga parasitária e o acúmulo de integrações de minicírculos de kDNA no genoma dos camundongos, realizou-se a PCR quantitativa. A produção de anticorpos anti-T. cruzi e anti-proteínas cardíacas e intestinais foi mensurada pelo teste de ELISA e a produção de citocinas do perfil Th1/Th2 por citometria de fluxo. Análises histológicas avaliaram a presença de ninhos de amastigotas e alteração tecidual. As análises estatísticas estabeleceram as correlações entre os diversos parâmetros avaliados. Resultados: Observou-se uma importante correlação entre a carga parasitária do coração e intestino e a ativação das respostas imunes adaptativas celular e humoral. Apesar de não se associar à produção de anticorpos e de citocinas, a presença do parasito na medula óssea está diretamente relacionada ao processo inflamatório do tecido cardíaco e intestinal. Ao se avaliar de maneira quantitativa a integração de minicírculos de kDNA, notou-se uma associação entre a taxa de integração no coração e na medula (p

FAPEMIG - Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais Introdução: As infecções de corrente sanguínea (ICS) hospitalares são responsáveis por frequências significativas de morbidade e mortalidade em Unidades de Terapia Intensiva Neonatal (UTIN), resultando em hospitalização prolongada e aumento nos custos hospitalares, principalmente em neonatos de baixo peso. Objetivos: O presente estudo propôs determinar a patogênese de infecções de corrente sanguínea relacionada ao cateter (ICS-RC) causadas por Staphylococcus epidermidis utilizando a técnica de PFGE (“Pulsed Field Gel Electrophoresis”) bem como avaliar os fatores de risco para mortalidade entre os neonatos com pesos ≤ 1500 gramas e >1500 gramas. Adicionalmente, foram determinados os fatores de risco para desenvolvimento de ICS causadas por S. epidermidis utilizando estudo caso x controles pareados. Material e métodos: O estudo incluiu neonatos da UTI do Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia durante o período de Outubro de 2010 a agosto de 2012. Para o estudo da patogênese foram utilizadas amostras de S. epidermidis recuperadas do sangue, pele no sítio de inserção, canhão do cateter, assim como das mucosas da narina e intestino, a partir de 48 horas até 14 dias da utilização do Cateter ou até obtenção de cultura positiva para S. epidermidis e da ponta do cateter obtidas após sua remoção. Foi verificado a presença dos genes mecA e o ACME (Arginine Catabolic Mobile Element) por reação em cadeia da polimerase (PCR), em S. epidermidis. Resultados: No total, 125 neonatos desenvolveram ICS (27,0%), com 98 (78,4%) definidos como de natureza hospitalar, totalizando 124 episódios. A sepse precoce acometeu 20% dos neonatos com ICS com 48% de mortalidade, principalmente entre os neonatos com peso ≤ 1500 gramas. A presença de ventilação mecânica e sepse clínica foram os fatores associados com mortalidade entre os neonatos de maior peso. No estudo caso x controle pareados, todas as variáveis analisadas [Tempo de hospitalização (P 1500 grams. Methods: The study included neonates from the ICU of Hospital de Federal University of Uberlândia during the period from October 2010 to August 2012. For the study of the pathogenesis, were used samples of S. epidermidis recovered from blood, skin at the insertion site, hub, as well as the mucosa of the nostril and gut, from 48 hours to 14 days after the use of the Catheter or until obtaining a positive culture for S. epidermidis and catheter tip obtained after removal. In addition, were determined the risk factors for the development of BSI caused by S. epidermidis using case study x paired control. In addition to verifying the presence of mecA genes and ACME (Arginine Catabolic Mobile Element) by polymerase chain reaction (PCR), in S.epidermidis. Results: In total, 125 neonates developed BSI (27.0%), with 98 (78.4%) defined as hospital-type, totaling 124 episodes. Sepsis preterm affected 20% of newborns with BSI with 48% mortality, mainly in neonates weighing ≤ 1500 grams. The presence of mechanical ventilation and clinical sepsis were the factors associated with mortality among the heaviest neonates. In the case study x paired control, all variables analyzed [Hospitalization time (P

CNPq O Herpesvírus humano tipo 8 (Human gammaherpesvirus 8, HHV-8) é o agente etiológico do sarcoma de Kaposi (SK), um dos cânceres mais comuns em pessoas vivendo com HIV/aids. Sugere-se que o desenvolvimento do SK esteja associado com o desequilíbrio do sistema imune, como o aumento dos níveis séricos de citocinas envolvidas no processo inflamatório. O presente estudo teve como objetivo avaliar os níveis séricos das citocinas IL-6, IL-10, CCL2 e CXCL10 em pessoas coinfectadas HIV/HHV-8 com SK e correlacioná-los com a contagem de linfócitos TCD4. O estudo foi composto por três grupos: indivíduos monoinfectados pelo HIV (n=31), coinfectados HIV/HHV-8 sem SK (n=77) e coinfectados HIV/HHV-8 com SK (n=38). Os participantes do estudo eram acompanhados no Ambulatório de Doenças Infecciosas e Parasitárias do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Pernambuco, no Instituto de Infectologia Emílio Ribas e no Departamento de Moléstias Infecciosas e Parasitárias do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo. As citocinas foram dosadas por citometria de fluxo. Os níveis séricos da IL-6 foram maiores no grupo com SK em comparação aos indivíduos monoinfectados pelo HIV (p=0,0380), assim como nos coinfectados HIV/HHV-8 sem SK (p=0,0210). De forma semelhante, os níveis da IL-10 foram maiores no grupo com SK em comparação com o grupo monoinfectados pelo HIV (p=0,0403), assim como nos coinfectados HIV/HHV-8 (p

Objetivo: Esta revisão de literatura tem o propósito de oferecer aos cirurgiões-dentistas entendimento sobre os principais achados clínico-epidemiológicos da síndrome de Sjögren primária (SSp), bem como ressaltar os principais aspectos etiopatogênicos e histopatológicos da doença. Métodos: Buscou-se na base de dados Pubmed/Medline e ScienceDirect os descritores “síndrome de Sjögren”, “glândulas salivares”, “xerostomia”, “diagnóstico”, “glândula salivar menor”, “etiologia”, “biopsia” entre os anos de 1991 a 2017. Discussão: A SSp é uma exocrinopatia autoimune que tem como substrato, em especial, as glândulas lacrimais e salivares, culminando com os sintomas de xeroftalmia e xerostomia. Seu principal achado morfológico é a presença de agregados de leucócitos mononucleares ao redor dos ductos e ácinos. Outras manifestações sistêmicas podem estar presentes, acarretando considerável morbidade nos pacientes acometidos. Atualmente, foi publicado o mais novo conjunto de critérios diagnósticos da doença, sendo um marco histórico no diagnóstico precoce da enfermidade, fundamental para diminuir os altos números de subdiagnósticos e otimizar a conduta clínica. Conclusão: Esta revisão abordou os aspectos clínicos-epidemiológicos, histopatológicos e etiopatogênicos da SSp, objetivando melhor compreensão dessa doença multifatorial e, portanto, a necessidade de uma conduta multidisciplinar e do papel fundamental do cirurgião-dentista no manejo dos pacientes acometidos por essa síndrome. Objective: The aim of this present review is to provide dentists a better understanding of Primary Sjögren’s syndrome (SSp), clinical and epidemiological findings, also the etiopathogenic and histopathological features of the disease. Methods: The search was based on Pubmed/Medline and ScienceDirect database from 1991 to 2017. It was used keywords: “Sjögren’s syndrome”, “salivary gland”, “xerostomia”, “pathogenesis”, “diagnosis”, “minor salivary gland”, “ethiology”, “biopsy”. Discussion: Primary Sjögren’s syndrome (SSp) is an autoimmune exocrinopathy involving mainly the lacrimal and salivary glands, resulting in reduced secretory functions and classical sicca symptoms, such as dry eyes and dry mouth. The hallmark of the histopathological features is the presence of aggregates of mononuclear leukocytes surrounding ducts and acini. Others systemic manifestations can also be present, leading to considerable morbidity in the affected patients. The lastest diagnosis criteria of SSp was published in 2017, becoming a historical landmark in the early diagnosis of the disease, reducing the high number of underdiagnosis and improving therapeutic intervention. Conclusion: This review approached the clinical-epidemiological and histopathological features, and etiopathogenic factors of SSp, supporting a better comprehension of this multifactorial disease and needing a multidisciplinary approach and the role of the dentist in the clinical conduct of the patients affected by this syndrome.

Submitted by THAISY MILANELLI CANHIZARES null (thaisymilanelli@yahoo.com.br) on 2017-08-24T01:15:33Z No. of bitstreams: 1 DEFESA final.pdf: 700718 bytes, checksum: 9c3cbfade3105f6f93da40a95c86b3c6 (MD5) Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-08-25T14:14:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 canhizares_tm_me_bot.pdf: 700718 bytes, checksum: 9c3cbfade3105f6f93da40a95c86b3c6 (MD5) Made available in DSpace on 2017-08-25T14:14:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 canhizares_tm_me_bot.pdf: 700718 bytes, checksum: 9c3cbfade3105f6f93da40a95c86b3c6 (MD5) Previous issue date: 2017-08-04 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Retocolite Ulcerativa (RU) é um tipo de patologia que acomete o cólon intestinal, se apresentando na forma de lesões superficiais de gravidade variável. Não possui causa definida, mas sabe-se que é influenciada por fatores genéticos e ambientais, na qual, esse último, inclui um desequilíbrio na composição de espécies da microbiota intestinal. Escherichia coli (E. coli), uma das bactérias que se encontra aumentada nesses pacientes, tem sido foco de estudos de caracterização, com o objetivo de esclarecer sua participação na etiologia ou complicação dos sintomas da doença. Esse trabalho adotou essa abordagem para a caracterização de uma coleção de E. coli isoladas de portadores de RU atendidos no Hospital das Clínicas da Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho (HC/UNESP) de Botucatu, com base em sua capacidade de produção de biofilme, sorotipagem e filotipagem. Juntamente a esses testes, foi realizada uma revisão bibliográfica sobre a possível relação da E. coli com a RU. O objeto de estudo dos testes foi uma coleção de E. coli composta por 68 isolados bacterianos de 34 portadores de RU e 44 de 22 indivíduos controle (CO). A tipagem bacteriana teve como foco genes que identificam os sorogrupos O25 e O83 e determinação de filogrupos da coleção de referência de E. coli (EcoR – A, B1, B2 e D). Os resultados obtidos foram: 1) predomínio de E. coli dos filogrupos B2 e A nos grupos CO (54,5% x 26,5%, p=0,01) e de portadores de RU (32,4% x 9,1%, p=0,04) respectivamente, 2) no grupo portador de RU, 8,8% e 11,8% dos indivíduos apresentaram os sorogrupos O25 e O83, respectivamente e, entre os CO, a prevalência de ambos os sorogrupos foi de 4,5% e, 3) isolados produtores de biofilme forte (Fo), moderado (Mo) e fraco (Fra) foram encontrados em 45,5%, 22,7% e 27,3% dos CO, respectivamente. Em portadores de RU, a prevalência foi de 32,4%, 8,8% e 14,7%, respectivamente. A divergência nos dados de filotipagem em relação à literatura denota o caráter de extensa variabilidade observada nas populações naturais de E. coli e que dificulta sua vinculação com a causa da RU. A ausência de diferença na prevalência de isolados produtores de biofilme entre os grupos sugere que tal propriedade não pode ser vinculada a um eventual potencial de E. coli em provocar ou complicar os sintomas da RU. A análise bibliográfica mostrou resultados divergentes sobre a relação da E. coli na RU, possivelmente devido às variações no método de colheita, características teciduais e método de quantificação das culturas, sendo necessário mais pesquisas sobre o tema para sua maior clareza. Ulcerative colitis (UC) is a type of pathology that affects the intestinal colon, presenting as superficial lesions of different severity. It has no defined cause, but it is known to be influenced by genetic and environmental factors, which includes an imbalance in the composition of species of the intestinal microbiota. Escherichia coli (E. coli), one of the bacteria that is increased in these patients, has been the focus of characterization studies, to clarify its participation in the etiology or complication of the disease’s symptoms. Following a line of research already consolidated in our laboratory, this work adopted this approach for the characterization of a collection of E. coli isolated from UC patients treated at the HC / UNESP of Botucatu, based on its biofilm production capacity, serotyping and filotyping. Also, a literature review was performed on the possible relationship between E. coli and UC. The study’s object of these tests was a collection of E. coli composed of 68 bacterial isolates from 34 UC carriers and 44 from 22 control individuals (CO). Bacterial typing focused on genes that identify the O25 and O83 serogroups and determination of phylogroups from the E. coli reference collection (EcoR - A, B1, B2 and D). The results obtained were: 1) Predominance of E. coli of the phylogenetic groups B2 and A in the CO groups (54.5% x 26.5%, p = 0.01) and in the UC group (32.4% x 9, 1, p = 0.04), respectively. 2) In the UC group, 8.8% and 11.8% of the individuals had serogroups O25 and O83, respectively, and among CO, the prevalence of both serogroups was 4,5% and, 3) Isolated producers of strong (St), moderate (Mo) and weak (We) biofilms were found in 45,5%, 22,7% e 27,3% of the CO, respectively. In UC patients, the prevalence was 32.4%, 8.8% and 14.7%, respectively. The divergence in the data of phylotyping in relation to the literature denotes the character of extensive variability observed in the natural populations of E. coli and that makes it difficult to be linked to the cause of the UC. The absence of a difference in the prevalence of biofilm isolates among the groups suggests that such property can’t be linked to an eventual potential of E. coli to cause or complicate UC symptoms. The literature analysis showed divergent results on the relationship of E. coli and UC, possibly due to variations in the collection method, tissue characteristics and quantification method of the cultures, being necessary more researches on the subject for its greater clarity.

Esta tese foi dividida em dois estudos. Primeiro objetivou-se a tipificação e avaliação molecular de cepas de Brachyspira hyodysenteriae isoladas de suínos no Brasil. Foi aplicada a técnica de tipagem de sequências multilocus (MLST) de sete genes housekeeping em 46 isolados obtidos dos surtos de disenteria suína que ocorreram entre 2011 a 2015 nos estados de Minas Gerais, São Paulo, Mato Grosso, Rio Grande do Sul e Santa Catarina e isolados históricos da década de 90 de granjas do Rio Grande do Sul. Foi detectado um perfil nacional independente das sequencias globais depositadas no banco de dados de Brachyspira spp. Na análise entre as amostras brasileiras, foi constatada relação epidemiológica molecular intra-granja, entre granjas e entre os estados. O segundo projeto teve como objetivo, em experimento in vivo em suínos, avaliar a patogenicidade, características clínicas e moleculares de uma cepa de B. hyodysenteriae isolada de uma granja sem sinais clínicos de disenteria suína comparada com outra cepa isolada de animal com sinal clínico da doença. Nesta avaliação foram observadas diferenças significativas entre os grupos, considerando o início dos sinais clínicos, número de animais afetados e severidade das lesões macroscópicas e microscópicas. This thesis comprised the results of two studies. First, molecular typing and epidemiological evaluation of strains of Brachyspira hyodysenteriae isolated from swine in Brazil were performed. Multilocus Sequence Typing (MLST) analysis of seven housekeeping genes was performed in 46 Brazilian B. hyodysenteriae isolates obtained from pigs in farms during outbreaks of swine dysentery. Bacterial isolation was obtained between 2011 to 2015 in cases originated from the states of Minas Gerais, São Paulo, Mato Grosso, Rio Grande do Sul and Santa Catarina, and historical 1990s isolates from farms in the state Rio Grande do Sul. An independent MLST Brazilian MLST profile was observed compared with sequences deposited in the global Brachyspira spp database. Among the Brazilian strains, molecular relationship was observed in intra-farm profiles, among farms and among states. The second project used an in vivo challenge trial in pigs to evaluate the pathogenicity, clinical and molecular characteristics of a B. hyodysenteriae strain isolated from a pig with no clinical signs of swine dysentery, and a strain obtained from an animal with typical clinical signs of the disease. Significant differences were observed between groups, regarding onset of clinical signs, proportion ofclinically affected animals and severity of gross and microscopic lesions.

Made available in DSpace on 2019-12-20T17:29:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 5455_10965.pdf: 833946 bytes, checksum: 426ddfc648a083ec13506561be7acb9a (MD5) Previous issue date: 2017-06-09

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2017 Submitted by Repositório FFUL (repositorio@ff.ul.pt) on 2018-12-21T13:01:46Z No. of bitstreams: 1 MICF_Jose_Oliveira.pdf: 3052519 bytes, checksum: ed038c3c165ba6c7f8ae58cedaee3415 (MD5) Made available in DSpace on 2018-12-21T15:47:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MICF_Jose_Oliveira.pdf: 3052519 bytes, checksum: ed038c3c165ba6c7f8ae58cedaee3415 (MD5) Previous issue date: 2017-12-28

Submitted by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2017-01-12T17:37:51Z No. of bitstreams: 1 PPG_24455.pdf: 4785405 bytes, checksum: caeea6067188332da9fef49df539f92a (MD5) Approved for entry into archive by halves@ufp.pt (halves@ufp.pt) on 2017-01-13T08:37:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PPG_24455.pdf: 4785405 bytes, checksum: caeea6067188332da9fef49df539f92a (MD5) Made available in DSpace on 2017-01-13T08:37:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PPG_24455.pdf: 4785405 bytes, checksum: caeea6067188332da9fef49df539f92a (MD5) Previous issue date: 2016-11-10

O vírus da anemia infecciosa equina (EIAV) é um lentivírus que pode infectar todos os membros da família Equidae, porém a maioria dos estudos, até o momento, foram conduzidos em cavalos (Eqqus caballus) com pouca informação comparativa sobre a infecção nas outras espécies da família. O Brasil possui uma das maiores populações de jumentos (E. asinus) do mundo, concentrada principalmente na região nordeste, sendo que muitos deles vivem de forma errante ou abandonados, com status sanitário desconhecido. O presente trabalho teve dois objetivos: primeiro, determinar a ocorrência da AIE em uma população de jumentos da região de Mossoró-RN, através da associação de testes diagnósticos; em segundo, avaliar a expressão de citocinas importantes na patogênese da AIE em PBMC de cavalos e jumentos, e macrófagos de jumentos infectados in vitro com estirpes do EIAV de diferentes patogenicidades. Os resultados demonstraram que, baseando apenas no teste de IDGA, 1,63% dos jumentos testados foram positivos para AIE. Ao associar rgp90 ELISA, CELISA e imunoblot, o índice de animais positivos aumentou em 50%. Um achado interessante foi que 56,9% dos soros testados no imunoblot reagiram apenas com a proteína do capsídeo viral p26. Nas infecções in vitro com EIAV, foi observada maior tendência de variação na expressão das citocinas TNF- (24 h), IL-6 e IFN- (96 h) nos cultivos de PBMC de cavalos do que de jumentos pós-infecção com EIAVWYO. Não foram observadas diferenças significativas na expressão de TNF-, IL-, IL-6 e TGF- nas infecções de macrófagos de jumentos com estirpe patogênica e não patogênica do EIAV (p0,05). Estudos adicionais são necessários para investigar se os jumentos que reagiram com a p26 são recentemente infectados, ou foram expostos a outras estirpes de EIAV antigenicamente distintas ou outros retrovírus que ainda não foram identificados. A não desregulação de citocinas pelos macrófagos infectados do nosso estudo talvez indique que a patogênese da AIE em jumentos ocorra por mecanismos diferentes daqueles estabelecidos para a espécie equina. Os resultados das infecções in vitro indicam a necessidade de se aprofundar os estudos da resposta imune celular de jumentos ao EIAV, bem como pesquisar outros fatores relacionados ao hospedeiro, como por exemplo receptor de lentivírus equino (ELR) e fatores de restrição retroviral. Equine infectious anemia virus (EIAV) is a lentivirus agent which infects all Equidae members throughout the world however the vast majority of studies have been conducted in horses (Equus caballus) with comparatively little information available for other equid species. Brazil has one of the most abundant donkey (E. asinus) populations of any nation especially in the Northeast of the country where they have been released and allowed pursue na almost feral existence with unknown sanitary status. The present study had two objectives: first, was to conduct a serological survey for EIAV in populations of free living donkeys in Mossoró city and adjacent areas, Rio Grande do Norte state, Brazil using combination of EIA diagnostic tests; second, was to evaluate the cytokine profile of equine and donkeys PBMC and, donkeys macrophages after challenge with virulent and avirulent EIAV strains in vitro. The EIA seropositive rate was 1.63% in officially approved AGID test. However, subsequent testing using CELISA and rgp90 ELISA with IB used to clarify discrepant results found between AGID and both ELISA demonstrated that the EIA rate was underestimated by 50%. A potentially highly significant finding is that 56.9% of the donkey serum samples had reactivity to EIAV p26 only in IB. At the in vitro infections, the equine PBMC showed increased expression of TNF- (24h), IL-6 e IFN- (96 h) after infection with EIAVWYO compared to donkeys PBMC. In the experiments of donkey macrophages infections with virulent and avirulent EIAV strains, it was not observed dysregulations in cytokine expression such as TNF-, IL-1, IL-6 e TGF- (p0,05). Additional studies are needed to investigate whether the donkeys that reacted with p26 only had recent exposure to EIAV strains with envelope glycoproteins that are different from any other that have been previously characterized or other retrovirus not yet described. In our study smaller or not evident dysregulation of cytokines by donkey infected PBMC and macrophages may indicate that the pathogenesis of EIA in donkeys occur by different mechanisms from those established for the equine species. It indicates the need of more studies at donkey cellular immune response against EIAV, searching for other host factors, such as equine lentivirus receptor (ELR) and retroviral restriction factors (RRF).

Trabalho final do 6º ano médico com vista à atribuição do grau de mestre (área científica de gastroenterologia) no âmbito do ciclo de estudos de Mestrado Integrado em Medicina. A Doença de Crohn (DC) é uma doença inflamatória crónica transmural, segmentar e assimétrica do trato gastrointestinal. Apesar das inúmeras investigações, a etiologia permanece desconhecida, contudo são apontadas como potencial causas a combinação de disbiose intestinal, fatores genéticos, ambientais, perda da tolerância a antigénios comensais e alterações na permeabilidade intestinal e nos mecanismos imunitários. Efetivamente, esta conjuntura determina respostas imunes excessivas e alteradas, que culminam na inflamação crónica do trato gastrointestinal. Esta patologia para além dos quadros recorrentes de sintomas gastrointestinais, fístulas e abcessos, cursa com múltiplas manifestações extraintestinais, das quais se destacam as hépato-biliares, dermatológicas, reumatológicas e oculares, sendo assim facilmente dedutível as implicações irrevogáveis que esta tem na qualidade de vida e sobrevida. Atualmente, assiste-se um crescimento exponencial da sua incidência, sendo evidentes maiores prevalências no sexo feminino, alta classe socioeconómica e áreas urbanizadas. Desta forma, nas últimas décadas, a DC foi alvo de múltiplos estudos, o que permitiu obter um vasto leque de conhecimentos, crucial para o desenvolvimento de abordagens terapêuticas transcendentes. O tratamento padrão da DC reside no controlo da sintomatologia, indução e manutenção da remissão por recurso a terapia anti-inflamatória, imunomodeladora, imunossupressora e biológica, contudo, ainda hoje não existe um método eficaz na evicção da recidiva clínica, uma vez que nenhum destes fármacos atua sobre a origem do processo inflamatório. Assim, seja pela ausência de resposta, toxicidade do tratamento ou pela doença perianal subjacente não controlada, os doentes são submetidos a cirurgias agressivas, com múltiplos riscos e sequelas acoplados, podendo ainda estar contraindicada dependendo da localização e extensão das lesões. Perante estas condicionantes, nos últimos anos, foram realizados vários estudos sobre a aplicação de células dendríticas tolerogénicas, hematopoiéticas e células tronco mesenquimais, sendo evidentes resultados auspiciosos, ainda que a amostra seja constituída por um número reduzido de doentes, o que inviabiliza a determinação de conclusões categóricas. De facto, os próximos anos serão cruciais para a fundamentação e consolidação de conhecimento relativos a esta nova abordagem, que poderão ser decisivos para a sua aplicação como método curativo da DC. O principal objetivo desta dissertação reside na execução de uma revisão bibliográfica para sintetização e fundamentação das possíveis etiologias e patogénese da DC, salientando o facto de esta resultar da combinação de uma disbiose intestinal, imunidade inata modificada e perda de tolerância a antigénios comensais, em indivíduos geneticamente suscetíveis, sob a influência de fatores ambientais; clínica, complicações e suas implicações na qualidade de vida do doente; método terapêutico padrão e suas limitações, que poderão ser transpostas por uma nova abordagem, detalhadamente explicita neste trabalho, as células estaminais como potencial método terapêutico curativo. Crohn's disease (CD) is a chronic inflammatory disease transmural, segmental and asymmetric gastrointestinal tract. Despite numerous investigations, the etiology remains unknown, but are identified as potential causes the combination of intestinal dysbiosis, genetic and environmental factors, loss of tolerance to commensal antigens and changes in intestinal permeability in immune mechanisms. In fact, this situation determines excessive, altered immune response, culminating in chronic inflammation of the gastrointestinal tract. This pathology in addition to the recurrent episodes of gastrointestinal symptoms, fistulae and abscesses, courses with multiple extra-intestinal manifestations, which we highlight the hepato-biliary, dermatologic, rheumatologic and ocular, so easily deductible irrevocable implications this has the quality of life and survival. Currently, we are seeing an exponential growth in its incidence, with evident higher prevalence in women, high socio-economic class and urbanized areas. In this way, in recent decades, the CD was multiple studies target, which allowed for a broad range of knowledge, crucial for the development of therapeutic approaches transcendent. The standard CD treatment lies in the control of symptoms, induction and maintenance of remission for use of anti-inflammatory therapy, immunomodulatory, immunosuppressive and biological however, still there is no effective method for avoidance of clinical relapse, since none of these drugs acts on the origin of the inflammatory process. So is the lack of response, toxicity of the treatment or the underlying perianal disease not controlled, patients are subjected to aggressive surgeries with multiple risks and coupled sequelae, and may be contraindicated depending on the location and extent of the injuries. Under these conditions, in recent years, several studies were conducted on the application of tolerogenic dendritic cells, hematopoietic and mesenchymal stem cells, with evident auspicious results, even if the sample is comprised of a small number of patients, which impedes the determination of categorical conclusions. In fact, the coming years will be crucial for the foundation and consolidation of knowledge regarding this new approach, which will be decisive for its application as a dressing of the CD method. The main objective of this thesis lies in the execution of a literature review to summarize and justification of possible etiologies and pathogenesis of DC, highlighting the fact that this result from the combination of an intestinal dysbiosis, modified innate immunity and loss of tolerance to commensal antigens in individuals genetically susceptible, under the influence of environmental factors; clinical, complications and their implications for the quality of life of the patient; Standard therapeutic method and its limitations, which may be implemented by a new approach in this work explains in detail, stem cells as a potential curative therapeutic method.

Trabalho final do 6º ano médico com vista à atribuição do grau de mestre (área científica de fisiopatologia) no âmbito do ciclo de estudos de Mestrado Integrado em Medicina. A Doença Inflamatória Intestinal (DII) é uma patologia crónica com uma incidência crescente, particularmente em países industrializados. A sua etiologia carece ainda de clarificação, apontando os estudos mais recentes para uma interação entre diversos fatores etiológicos, como sejam os fatores ambientais externos e os fatores do hospedeiro, onde se incluem o genótipo, a resposta imunitária e a flora intestinal. Dada a multiplicidade de fatores envolvidos, a Medicina não dispõe ainda de terapêuticas curativas. À luz das mais recentes técnicas de sequenciação do genoma e dos Genome Wide Association Studies, é hoje em dia possível identificar inúmeros loci cuja presença se pensa aumentar a suscetibilidade para desenvolver esta patologia. No campo da microbiota, foi também possível, através da metagenómica e da sequenciação do RNA ribossomal 16S, obter grandes avanços na sua caracterização, e na identificação de alterações da sua composição. Assim, o objetivo deste trabalho é uma revisão da literatura no que de recente se tem publicado na área do genótipo do hospedeiro e da sua flora intestinal, tentando clarificar o seu envolvimento na fisiopatologia da doença. É possível identificar genes, cuja associação é já amplamente aceite como etiopatogenia da doença (como o caso do NOD2 ou o ATG16L1), associados a processos de reconhecimento bacteriano, autofagia e resposta imunitária por parte do epitélio intestinal. No campo da flora microbiana, também os estudos têm tentado esclarecer de que forma a alteração na proporção e diversidade de espécies presentes poderá influenciar o estado pro-inflamatório de base desta doença. Ao mesmo tempo, também a infeção por agentes patogénicos e os mecanismos de imunotolerância à flora comensal são tidos como peças importantes nesta desregulação. Apesar da riqueza de achados e dos avanços feitos na última década, a clarificação da etiopatogenia da doença carece ainda de mais estudos que, para além de identificarem os fatores etiológicos associados, consigam explicar a interação dinâmica entre eles, e de que forma esses fatores e essa interação condiciona a resposta imunitária do organismo.

Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-07T18:26:27Z No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO DE MESTRADO MARIELE GUERRA(PPGIM).pdf: 2138129 bytes, checksum: 16fc71d570a0b0413b7ccbe7d4b343f7 (MD5) Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-02-08T16:13:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO DE MESTRADO MARIELE GUERRA(PPGIM).pdf: 2138129 bytes, checksum: 16fc71d570a0b0413b7ccbe7d4b343f7 (MD5) Made available in DSpace on 2017-02-08T16:13:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO DE MESTRADO MARIELE GUERRA(PPGIM).pdf: 2138129 bytes, checksum: 16fc71d570a0b0413b7ccbe7d4b343f7 (MD5) Capes O vírus linfotrópico de células T humana tipo 1 (HTLV-1) é encontrado no mundo todo. A infecção pelo HTLV-1 é caracterizada por uma resposta imune exacerbada, com produção espontânea de IFN- e TNF. Estas citocinas são responsáveis por aumentar a expressão de quimiocinas e moléculas de adesão e facilitar a entrada de linfócitos ativados para o sistema nervoso central (SNC). O objetivo deste estudo foi avaliar o papel de quimiocinas e moléculas de adesão na patogênese da infecção pelo HTLV-1. Quimiocinas pró-inflamatórias (CXCL9 e CXCL10) e moléculas de adesão solúveis (sICAM-1 e sVCAM-1) foram determinadas por ELISA, no soro e líquor de diferentes grupos de indivíduos infectados pelo HTLV-1 (portador assintomático, indivíduos com bexiga hiperativa e HAM/TSP). Frequência e mediana de intensidade de fluorescência (MIF) de linfócitos e de monócitos expressando ligantes das moléculas de adesão (CD11a e CD49d) e receptor de quimiocinas (CXCR3) foram analisadas por citometria de fluxo. CXCL9 e CXCL10 estavam mais elevados tanto no soro quanto no líquor dos pacientes com HAM/TSP (p>0,05). As moléculas de adesão não diferiram entre os grupos, apesar da tendência de maior produção de sVCAM-1 na HAM/TSP. sVCAM-1 correlacionou-se positivamente com quimiocinas no soro dos indivíduos infectados pelo HTLV-1 (p>0,05). De modo geral, a MIF de células CD4+, CD8+ e CD14+ expressando CD11a e CXCR3 foi menor na HAM/TSP. Estes achados confirmam a participação das quimiocinas na migração das células infectadas pelo HTLV-1 para o SNC e sugerem, porém não são suficientes para atestar a participação das moléculas de adesão na patogênese da HAM/TSP.

A doença de Ledderhose (DL) ou fibromatose plantar é uma patologia benigna relativamente rara caracterizada pela fibromatose da fáscia plantar. Apesar de reconhecida há mais de 100 anos, a DL continua a ser uma entidade complexa no que toca ao seu diagnóstico e tratamento. Os profissionais de saúde devem estar, por isso, atentos a esta patologia dada a tendência crescente de alguns dos factores ambientais a ela associados, nomeadamente a Diabetes e a doença hepática alcoólica. A presença da DL deverá alertar o clínico para a possível coexistência de outras fibromatoses superficiais, nomeadamente as doenças de Dupuytren e de Peyronie. O objectivo deste trabalho centrou-se na revisão bibliográfica da DL a fim de reunir os conhecimentos mais recentes nas várias dimensões desta patologia, nomeadamente definição, epidemiologia, patogénese, diagnóstico e tratamento. Foi realizada uma pesquisa na pubmed/medline com as palavras “fibromatose plantar” e “doença de Ledderhose”, selecionando sobretudo artigos publicados nos últimos 20 anos, incluindo artigos originais e de revisão nas línguas portuguesa e inglesa. The Ledderhose disease (LD) or plantar fibromatosis is a rare and benign condition characterized by plantar fascia fibromatosis. Although known for over 100 years, LD diagnosis and treatment remains complex. Health professionals should be therefore aware of this disease given the growing trend of some of the environmental factors associated with it, including diabetes and alcoholic liver disease. The presence of LD should alert the clinician to the possible presence of other superficial fibromatosis, including Dupuytren’s and Peyronie’s diseases. This article focused on a review of the LD literature in order to obtain the latest knowledge in the various dimensions of this disease, including definition, epidemiology, pathogenesis, diagnosis and treatment. A survey was conducted in Pubmed / Medline with the words “plantar fibromatosis” and “Ledderhose disease,” especially selecting articles published in the last 20 years, including original and review articles in Portuguese and English languages.

Made available in DSpace on 2016-04-01T17:54:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-05-25. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:00:10Z : No. of bitstreams: 1 000860821.pdf: 2915690 bytes, checksum: 1ff5640161c93a6edf44ddc1558a8eeb (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Candida albicans é um fungo oportunista capaz de causar infecções superficiais e até sistêmicas. A maioria das infecções é mediada pela formação de biofilme que confere resistência aos agentes antifúngicos e ao sistema imune, porém os mecanismos de desenvolvimento do biofilme e patogenicidade ainda não foram completamente elucidados. No presente estudo foram selecionados 9 genes de C. albicans com função desconhecida, dentre 34 cepas mutantes que apresentaram fenótipo alterado para formação de biofilme. Os biofilmes foram formados em placas de 96 poços ou discos de poliestireno e avaliados em diferentes tempos de desenvolvimento. A seguir foram construídas 4 cepas complementadas que foram avaliadas quanto à susceptibilidade a agentes estressantes, crescimento sob limitação de nutrientes e testes de filamentação. A arquitetura dos biofilmes foi analisada por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os biofilmes também foram avaliados quanto à quantidade de β-1,3-glucana e quitina. Para os modelos de infecção, células epiteliais bucais (TR-146) foram utilizadas para análise de aderência, invasão e dano. A patogenicidade das cepas foi avaliada em ovos embrionados de galinha durante 7 dias, após a inoculação das cepas. Células planctônicas e biofilmes foram submetidos a testes antifúngicos com os agentes fluconazol, anfotericina B e caspofungina. A reação em cadeia da polimerase quantitativa foi realizada para verificar a expressão dos genes MRV8 e NDT80 em células fúngicas em interação com células epiteliais e MRV8, MRV1 e MRV6 em células crescidas em biofilme. Os resultados foram analisados por teste t de Student, ANOVA, Tukey e testes de Log-rank (Mantel-Cox) (p < 0,05). Foram construídas 4 cepas complementadas para os genes selecionados ORF19.823, ORF19.7170, ORF19.6847 e MRV8. A função de ORF19.823 ainda permanece desconhecida, pois nãofoi observado fenótipo msignificativo para a cepa.... Candida albicans is an opportunistic fungi capable of causing superficial and systemic infections. Most of infections are mediated by biofilm formation which confers resistance to antifungal agents and immune system, but the mechanisms of biofilm development and pathogenicity were not thoroughly elucidated yet. In the presente study, 9 unknown function genes of C. albicans were selected among 34 mutant strains that presented altered phenotype for biofilm formation. The biofilms were formed on 96-well microtitle plates or on polystyrene disks and evaluated in different time intervals. Next, 4 complemented strains were constructed and evaluated for susceptibility to stressor agents, growth under nutrient limitation and filamentation tests. The biofilm architecture was analyzed by scanning electron microscopy (SEM). The biofilms were also assessed as the quantity of β-1,3-glucan and chitin. For the infection models, buccal epithelial cells (TR-146) were used for adherence, invasion and damage assays. The pathogenicity of the strains was evaluated in embrionated chicken eggs for 7 days, after inoculation of the strains. Planktonic cells and biofilms were submitted to antifungal tests with fluconazole, amphotericin B, and caspofungin. Quantitative polymerase chain reaction was performed to verify the expression of MRV8 and NDT80 genes in fungal cells in interaction with epithelial cells and MRV8, MRV1, and MRV6 genes in cells grown in biofilm. The results were submitted to the Student t test, ANOVA, Tukey's test, and Log-rank test (Mantel-Cox) (p < 0.05). Four complemented strains were constructed for the selected genes ORF19.823, ORF19.7170, ORF19.6847, and MRV8. The function of the ORF19.823 is still unknown, because the mutant strain did not show any significative phenotype for the tests performed. The mutant strain for the ORF19.7170 caused less damage on epithelial cells, but the result was not significant and the gene was dispensable... FAPESP: 2011/21346-7

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2015 Made available in DSpace on 2017-03-07T09:42:42Z (GMT). No. of bitstreams: 3 MICF_Sofia_Raquel_Almeida.pdf: 1726484 bytes, checksum: 55439eda7b38b1f5acf7cd292a5e2a08 (MD5) license.txt: 1195 bytes, checksum: 25733b0b84e8845b1d09ead22e7c5a2c (MD5) MICF_Sofia_Raquel_Almeida.pdf: 1726484 bytes, checksum: 55439eda7b38b1f5acf7cd292a5e2a08 (MD5) Previous issue date: 2015

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2015 Made available in DSpace on 2017-03-07T10:48:15Z (GMT). No. of bitstreams: 3 MICF_Soraya_Reis.pdf: 1423870 bytes, checksum: 234cebf4df5d270dc4e81d6e01205e95 (MD5) license.txt: 1195 bytes, checksum: 25733b0b84e8845b1d09ead22e7c5a2c (MD5) MICF_Soraya_Reis.pdf: 1423870 bytes, checksum: 234cebf4df5d270dc4e81d6e01205e95 (MD5) Previous issue date: 2015

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2015 Made available in DSpace on 2017-03-07T10:06:55Z (GMT). No. of bitstreams: 3 MICF_Melissa_Goncalves.pdf: 1005094 bytes, checksum: 44144345e697df047b16d987567e8f50 (MD5) license.txt: 1195 bytes, checksum: 25733b0b84e8845b1d09ead22e7c5a2c (MD5) MICF_Melissa_Goncalves.pdf: 1005094 bytes, checksum: 44144345e697df047b16d987567e8f50 (MD5) Previous issue date: 2015

Introduction: Biologic aging is a process, and oxidative stress theory, which is one of the most accepted biological theories for aging, states that oxidative stress causes cumulative damage to mitochondrial DNA resulting in cellular senescence. Dementia is a neurodegenerative disorder whose major risk factor is aging. Although the exact neuronal lesion mechanisms underlying neurodegenerative disorders, including dementia, are not yet known, most recent studies suggest oxidative stress and mitochondrial dynamics’ role in the process.Objective: Literature review on the role of oxidative stress’ role in aging and dementia.Methods: Literature review of selected arti-cles and books deemed relevant by the authors, supplemented by Medline/Pubmed database search using combinations of the following key-words: “oxidative stress”, “de-mentia”, “aging” and “pathogenesis”, published between 1950 and 2013. References of the selected articles and books were also considered.Results: In the last five years new research has been undertaken that enlightens the relation between oxidative stress and aging. One of the considered hypotheses states that during aging, the homeostatic regulation of biogenesis, dynamics and autophagic turnover of mitochondria disturbs their functioning, resulting in cellular senescence. Consequently, the oxidative burden may reach a critical threshold above which apoptosis is triggered, leading to irreversible mitochondrial derangement and cellular death. Although the exact neuronal lesion mechanisms underlying dementias are not known, multiple studies have consistently found increased oxidative damage in brain of patients with Alzheimer disease and recent data suggests involvement of mitochondrial dynamics in dementia processes, such as in aging.Conclusions: Most recent studies suggest the role of oxidative stress and mitochondrial dynamics’ in aging and dementia, either directly or by indirect pathways, which can influence future perspectives about the pathophysiology of dementia and open new treatment options., Introdução: O envelhecimento biológico é um processo fisiológico normal, não patológico, sendo a teoria do envelhecimento pelo stress oxidativo, uma das mais aceites para explicar o envelhecimento postulando que o stress oxidativo conduz a mutações no DNA mitocondrial responsáveis pelas alterações na senescência. As demências são doenças neurodegenerativas cujo principal factor de risco para o seu aparecimento é o envelhecimento. Apesar de ainda não se conhecerem os mecanismos exactos de lesão neuronal subjacentes às doenças neurodegenerativas em geral e às demências em particular, os dados mais recentes sugerem o envolvimento do stress oxidativo e da dinâmica mitocondrial no processo.Objectivos: Fazer uma revisão da literatura sobre o papel do stress oxidativo na patogénese do envelhecimento e da demência.Métodos: Revisão não sistemática da literatura através da pesquisa em referências bibliográficas consideradas relevantes pelos autores suplementada por artigos obtidos através de pesquisa na base de dados Medline/Pubmed utilizando combinações das seguintes palavras-chave: “oxidative stress”, “dementia”, “aging” e “pathogenesis”, publicados entre 1950 e 2013. Foram também consultadas referências bibliográficas dos artigos obtidos e livros consultados.Resultados: Nos últimos 5 anos têm sido conduzidas novas investigações sobre a relação entre stress oxidativo e envelhecimento. Uma das hipóteses consideradas actualmente é que, durante o envelhecimento, a regulação homeostática da biogénese, dinâmica e turnover por autofagia deixa de conseguir manter eficazmente o funcionamento das mitocôndrias, resultando na senescência celular. Consequentemente, a lesão oxidativa pode ultrapassar um limiar crucial acima do qual a apoptose é desencadeada, levando a alterações substanciais na morfologia mitocondrial e à morte celular irreversível. Relativamente às demências, os dados mais recentes têm vindo a demonstrar de forma consistente a presença de níveis aumentados de stress oxidativo nas regiões cerebrais afectadas pela doença bem como a existência de disfunção na dinâmica e na morfologia das mitocôndrias, tal como ocorre no envelhecimento.Conclusões: Os dados mais recentes sugerem o envolvimento do stress oxidativo e da dinâmica mitocondrial no processo do envelhecimento e na demência, de forma directa ou indirecta, o que poderá vir a influenciar o modelo actual da fisiopatologia das demências bem como alargar as possibilidades de intervenção terapêutica no futuro.