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Damage caused by phytophagous mites is one of the main phytosanitary problems on blackberry crop. The mite species identification is a very significant activity to implement a program of integrated pest management. The aim of this study was to identify the species of phytophagous mites, predators, and other mites associated with blackberry crop in two locations of Michoacan, Mexico. The research was performed in two blackberry orchards located at Ziracuaretiro and Tacambaro municipalities, which had different type of management: conventional and non-conventional, respectively. In each orchard, 18 samples were collected at 15 d-intervals during an annual cycle, from June 2015 to May 2016. The collected mites were mounted in permanent slide for their taxonomic determination with specific keys with specific keys. Seventeen mite species belonging to ten families were identified, which six were phytophagous species, six were predatory, and five had varied habits. Six of the 17 taxa identified are new records of mites associated with blackberry crop. Most of the mites were collected in the conventional crop (65.4 %), while the abundance of predator mites was highest in the no-conventional crop.

RESUMEN. Los enrolladores de hojas Argyrotaenia montezumae Walsingham y Amorbia sp. son espe-cies de tortricidos asociados a plantas de zarzamora, en Michoacan, Mexico. En este estudio se analiza y compara la abundancia y diversidad de parasitoides asociados a estas especies de enrolladores en dos plantaciones comerciales en Los Reyes, Michoacan. Se recolectaron 1682 hojas tiernas infestadas con larvas de enrolladores, de donde se obtuvieron 994 ejemplares de cuatro especies de parasitoides. Los parasitoides obtenidos fueron Chelonus sp. (41.6%), Apanteles n. sp. (34.2%), Colpoclypeus michoaca-nensis Sanchez y Figueroa (23.1%) y Bracon sp. (1%). Apanteles n. sp. registro el porcentaje de parasi-tismo mas alto (26.9%) y el que con mayor periodicidad se presento. Palabras clave: Zarzamora, tortricidos, parasitismo natural, periodicidad, control biologico Martinez, A. M., Barreto-Barriga, O., Pineda, S., Rebollar-Alviter, A., Chavarrieta, J. M. & Figueroa, J. I. 2014. Parasitoids associated with the blackberry leafrollers

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Maestría en Producción Agropecuaria The production of berries in Mexico has increased notably in recent years; however, this sector is exposed to various factors that negatively affect its development and production, among them the damage caused by phytophagous mites. The objective of this study was to identify the mites associated with two blueberry orchards (Tancítaro and Ziracuaretiro municipalities) and two raspberry orchards (Los Reyes and Madero municipalities) in the state of Michoacán. Their abundance, population fluctuation, and diversity were also analyzed. The samplings were performed monthly during a year (October 2018-September 2019). For this, the plants were randomly selected, and 30 and 40 samples of vegetative material (leaves, flowers, and fruits) were taken per blueberry and raspberry orchards, respectively. In the laboratory, the mites were counted and placed in fixed preparations. The identification was performed based on taxonomic keys. The relative abundance of the species recorded in each of the orchards was calculated. In addition, an estimate of richness by family and by species was carried out with the estimators of Chao 2, Jackknife 1, and Jackknife 2. A simple correlation analysis was also performed between the number of mites of the Tetranychidae family and the temperature (T) and relative humidity (RH). In total, 11,369 mites (6,043 ?, 762 ?, 3,645 nymphs and 919 larvae) of three orders, seven families, and 20 species were collected. The raspberry crop presented the highest species richness (16 species) and abundance (11,271 specimens), while in the blueberry crop only four species were identified and 98 specimens were collected. Los Reyes was the orchard with the highest abundance of mites, with a total of 8,555 (75%), while the least abundant was Ziracuaretiro, with 35 specimens, since in Los Reyes there was a season of highest populations of mites of the family Tretranychidae. La producción de frutillas en México ha aumentado notablemente durante los últimos años; sin embargo, este sector se encuentra expuesto a diversos factores que afectan negativamente a su desarrollo y producción, entre ellos los daños causados por los ácaros fitófagos. El objetivo de este estudio fue identificar los ácaros asociados a dos huertos de arándano (municipios de Tancítaro y Ziracuaretiro) y dos huertos de frambuesa (municipios de Los Reyes y Madero) en el estado de Michoacán. También se analizó su abundancia, fluctuación poblacional y diversidad. Los muestreos se realizaron mensualmente durante un año (octubre de 2018- septiembre de 2019). Para ello, las plantas se eligieron al azar y se tomaron 30 y 40 muestras de material vegetativo (hojas, flores y frutos) por huerto para arándano y frambuesa, respectivamente. En el laboratorio, los ácaros se contabilizaron y se colocaron en preparaciones fijas. La identificación se realizó con base en claves taxonómicas. Se calculó la abundancia relativa las especies registradas en cada uno de los huertos revisados. Además, se realizó una estimación de riqueza por familia y por especie con los estimadores de Chao 2, Jackknife 1 y Jackknife 2. También se realizó un análisis de correlación simple entre el número de ácaros de la familia Tetranychidae y las variables de temperatura (T) y humedad relativa (HR). En total se recolectaron 11,369 ácaros (6043 ?, 762 ?, 3645 ninfas y 919 larvas) de tres órdenes, siete familias y 20 especies. El cultivo de frambuesa fue el que presentó una mayor riqueza de especies (16 especies) y abundancia (11,271 ejemplares), mientras que en el cultivo de arándano sólo se identificaron cuatro especies y se recolectaron 98 ejemplares.

El maíz es un cultivo de gran importancia a nivel mundial; sin embargo, diversos factores climatológicos, así como las enfermedades y plagas, lo afectan frecuentemente y ponen en riesgo su producción. Para combatir a las plagas, se usan plaguicidas de origen químico sintético, que por lo general son de amplio espectro y de alta residualidad, causando grandes problemas ecológicos. Para contribuir a la reducción de este tipo de productos y proponer alternativas más ecológicas, es necesario estudiar y evaluar agentes de control biológico para las plagas que afectan este cultivo, tal es el caso de la principal plaga del maíz, el gusano cogollero Spodoptera frugiperda (J. E. Smith). Por esta razón, el presente estudio tuvo por objetivos: determinar la presencia en campo de parasitoides y entomopatógenos de dicha especie y evaluar la persistencia e infectividad del nucleopoliedrovirus múltiple de Spodoptera frugiperda (SfMNPV) en suelo bajo diferentes condiciones experimentales. En un primer estudio, se determinó la presencia natural de parasitoides y entomopatógenos en S. frugiperda en 190 campos de cultivos de maíz en el norte del estado de Sinaloa, México, durante los ciclos agrícolas 2016 y 2017. Larvas de S. frugiperda se recolectaron en plantas de maíz cultivado y de maíz voluntario. Los parasitoides se identificaron mediante claves taxonómicas. Las larvas con signos de infección por patógenos virales, bacterianos o fúngicos, fueron analizadas mediante PCR. Los parasitoides obtenidos fueron Meteorus laphygmae, Chelonus insularis, Cotesia marginiventris, Chelonus sonorensis, Pristomerus spinator y Lespesia sp. La mortalidad causada por parasitoides osciló entre 7 y 9.3%, en 2016 y 2017, respectivamente. Las larvas recolectadas en maíz voluntario registraron parasitismo entre 12.5 y 16.5% en 2016 y 2017, respectivamente. Los parasitoides encontrados más frecuentemente fueron M. laphygmae, C. insularis y C. marginiventris, que en conjunto representaron 9.5% del parasitismo total. La mortalidad idiopática fue del 2.6% en todo el estudio, pero no se encontraron entomopatógenos. Es necesario realizar más estudios para determinar su potencial como agentes de control biológico y para evaluar si el tipo de maíz influye en su abundancia. El segundo estudio surgió a raíz de los hallazgos del anterior, en el que no se registraron entomopatógenos virales en las muestras de larvas en campo de cultivo. En este trabajo, se evaluó la infectividad y persistencia de los cuerpos de oclusión (OB) del SfMNPV en suelos agrícolas de la misma área de estudio. Se eligieron suelos con diferentes texturas: arenosa, limosa o arcillosa, los cuales tienen diferentes valores de pH. Estos suelos se evaluaron experimentalmente bajo tres condiciones ambientales: (i) en condiciones naturales, (ii) bajo malla sombra a temperatura ambiente y (iii) en oscuridad a temperatura constante de 25 °C. La infectividad y persistencia viral se determinaron cuantificando la mortalidad de larvas de segundo instar de S. frugiperda mensualmente en cinco periodos, desde el tiempo cero al inicio del experimento, hasta el cuarto mes post exposición. Los resultados indicaron que, bajo condiciones naturales, la infectividad y persistencia de OB disminuyeron constantemente desde el primer mes, mientras que bajo condiciones controladas (25 °C y en oscuridad), los OB preservaron su infectividad y persistencia, independientemente del tipo de suelo usado. No obstante, el tipo de suelo también influyó en la infectividad y persistencia viral, siendo los suelos arcillosos con pH 8.0 los que más afectaron la infectividad/persistencia, mientras que los suelos limosos pH 7.5 y arenosos pH 7.0 contribuyeron a preservarlos. Se concluye que las condiciones naturales como tipo de suelo y factores ambientales como radiación UV y temperatura, contribuyen principalmente a la reducción en la persistencia viral en los campos de cultivo en el norte de Sinaloa. Otros factores que pueden contribuir a la reducción de la persistencia viral en suelo sería la textura del suelo, el pH y posiblemente uso de plaguicidas agroquímicos, ya que pueden reducir las poblaciones de hospederos de estos patógenos aún en épocas que no hay cultivos, haciendo más difícil la presencia de dichos entomopatógenos en la zona. Por lo anterior, el presente estudio proporcionó datos importantes sobre el papel de parasitoides y factores que afectan la infectividad/persistencia de virus entomopatogenos, para incluirlos dentro de un manejo integrado del gusano cogollero en cultivos de maíz en México. Tesis

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Instituto de Investigaciones sobre los Recursos Naturales. Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Doctorado en Ciencias Biológicas The ectoparasitoid Tamarixia triozae (Hymenoptera: Eulophidae) and the predator Engytatus varians (Hemiptera: Miridae) are two important natural enemies (NE) of the tomato psyllid Bactericera cockerelli (Sulcer) (Hemiptera: Triozidae), one of the most detrimental pests of several solanaceous crops in Mexico. The B. cockerelli populations are controlled with insecticides of different toxicological groups that can affect NE and compromise their performance. The objective of this work was to know the lethal and sublethal effects of insecticides on these NE. In the first part of this study, the parasitism, host feeding, and transgenerational effects of T. triozae females exposed, in egg, larval, and pupal stages, to the insecticides refined soybean oil, imidacloprid, and abamectin were evaluated. Three concentrations of each compound were used: minimum field-registered concentration (MiFRC), one-half the MiFRC (½MiFRC), and LC50 for B. cockerelli fourth-instars, the most preferred stage by the parasitoid. The parasitoid had access to a mixture of host instars (2nd, 3rd, 4th, and 5th) for parasitism and feeding. In general, the parasitism was significantly higher on 4th instars (42-96%), followed by 5th (0-81%) and 3rd instars (6-59%) of the host, across all treatments. No parasitism on 2nd instars was observed. Tamarixia triozae females consumed more B. cockerelli 2nd instars (11-70%), followed by 3rd (12-50%), 4th (0-22%), and 5th instars (0- 17%). Any insecticide modified the sex ratio in the F2 generation. In the second part of this study, the degradation of spinosad, flufenoxuron, imidacloprid, and dimethoate, sprayed on tomato plants (Solanum lycopersicum L.) in the greenhouse, as well as the residuality of these compounds on E. varians adults was evaluated. El ectoparasitoide Tamarixia triozae (Hymenoptera: Eulophidae) y el depredador Engytatus varians (Hemiptera: Miridae) son dos enemigos naturales (EN) del psílido del tomate, Bactericera cockerelli (Sulcer) (Hemiptera: Triozidae), una de las plagas más destructivas de diversos cultivos de solanáceas en México. Las poblaciones de B. cockerelli se combaten con insecticidas de distintos grupos toxicológicos que pueden afectar a los EN y comprometer su desempeño. El objetivo de este trabajo fue conocer los efectos letales y subletales de los insecticidas sobre estos EN. En la primera parte de este estudio se evaluó el parasitismo, alimentación y los efectos transgeneracionales de las hembras de T. triozae expuestas, en etapa de huevo, larva y pupa, a aceite refinado de soya, imidacloprid y abamectina. Se usaron tres concentraciones de cada compuesto: concentración mínima registrada en campo (CMiRC), la mitad de la CMiRC (½CMiRC) y la concentración letal media (CL50) para ninfas de cuarto ínstar de B. cockerelli, el cual es el ínstar más preferido por el parasitoide. El parasitoide tuvo acceso a una mezcla de ínstares del huésped (2do, 3ro, 4to y 5to) para parasitismo y alimentación. En general, el parasismo fue significativamente mayor sobre las ninfas de 4to ínstar (42-96%), seguido por las de 5to (0-81%) y 3ro (6-59%). No se registró parasitismo sobre las ninfas de 2do ínstar. Las hembras de T. triozae consumieron más ninfas de 2do ínstar (11- 70%) de B. cockerelli, seguido por las de 3ro (12-50%), 4to (0-22%) y 5to ínstar (0-17%). Ninguno de los insecticidas modificó la proporción sexual en la generación F2. En la segunda parte de este trabajo, se evaluó la degradación de spinosad, flufenoxuron, imidacloprid y dimetoato, cuando se asperjaron sobre plantas de Solanum lycopersicum L. (tomate) en invernadero, así como la residualidad de estos compuestos sobre los adultos de E. varians.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Maestría en Producción Agropecuaria Arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) and baculoviruses can improve the quality of agricultural crops and effectively control some insect pests, respectively. The multiple nucleopolyhedrovirus of Spodoptera frugiperda (SfMNPV) has been isolated from natural populations of the fall armyworm (Spodoptera frugiperda J. E. Smith; Lepidoptera: Noctuidae) and, due to the infective characteristics and high specificity, this pathogen has a high potential to be used as a bioinsecticide. In the present study, the effect of a native consortium of AMF on the development of maize plants (Zea mays L.), the herbivory by S. frugiperda, and the insect condition (weight gain) was determined, under the influence of two levels of nitrogen fertilization. For this, a multifactorial experiment was designed with three factors and two or three levels for each: i) soil condition (sterile soil and soil with AMF), ii) fertilization with nitrogen (50 and 100% from plant requirement), and iii) insect (presence and absence of S. frugiperda). The treatments were maintained under greenhouse conditions. Plants treated with AMF had a lower biomass compared to untreated plants. The level of foliar damage and the weight of the insect depended on nitrogen level. On the other hand, the effect of AMF and plant nutrition on the maize-insect-SfMNPV interaction was evaluated. In this case, the same first two factors that were described in the previous experiment were included. In addition, larval mortality from the viruses was included as a third factor with three levels: SfMNPV absence, lethal concentration 25 (LC25 = 4,065.8 OBs [occlusion bodies]/ml), and lethal concentration 50 (LC50 = 2,6575 OBs/ml). The crop of maize plants and the application of the virus were carried out in greenhouse and laboratory conditions, respectively. Los hongos micorrízicos arbusculares (HMA) y los baculovirus pueden mejorar la calidad de los cultivos agrícolas y controlar eficazmente algunos insectos plaga, respectivamente. El nucleopoliedrovirus múltiple de Spodoptera frugiperda (SfMNPV) ha sido aislado de poblaciones naturales del gusano cogollero (Spodoptera frugiperda J. E. Smith; Lepidoptera: Noctuidae) y, debido a las características infectivas y de alta especificidad, este patógeno tiene un alto potencial para ser utilizado como un bioinsecticida. En el presente estudio se determinó, bajo la influencia de dos niveles de fertilización de nitrógeno, el efecto de un consorcio nativo de HMA sobre el desarrollo de las plantas de maíz (Zea mays L.), la herbivoría por S. frugiperda y la condición del insecto (ganancia de peso). Para ello, se diseñó un experimento multifactorial con tres factores y dos o tres niveles para cada uno: i) condición del suelo (suelo estéril y suelo con HMA), ii) fertilización con nitrógeno (50 y 100% del requerimiento de la planta) y iii) insecto (presencia y ausencia de S. frugiperda). Los tratamientos se mantuvieron bajo condiciones de invernadero. Las plantas tratadas con los HMA tuvieron una menor biomasa comparado con las no tratadas. El nivel de daño foliar y el peso del insecto dependieron del nivel del nitrógeno aplicado. Por otro lado, se evaluó el efecto de los HMA y la nutrición vegetal sobre la interacción maíz-insecto-SfMNPV. En este caso, se incluyeron los mismos dos primeros factores descritos en el experimento anterior. Además, la mortalidad larvaria por virus se incluyó como un tercer factor con tres niveles: ausencia del SfMNPV, concentración letal 25 (CL25 = 4,065.8 OBs [cuerpos de inclusión por sus siglas en inglés]/ml) y concentración letal 50 (CL50 = 2,6575 OBs/ml). El cultivo de las plantas de maíz y la aplicación del virus se realizaron en condiciones de invernadero y laboratorio, respectivamente.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Agrobiología. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Maestría en Ciencias Biológicas The excessive use of chemical insecticides for the control of pests has a negative impact on the populations of benefic organisms and can cause the development of resistance. An alternative to this problem is the use of entomopathogens, such is the case of baculoviruses. In the present study, the genetic characteristics and the biological activity of a native isolate of the multiple nucleopolyhedrovirus of Spodoptera frugiperda (SfMNPV) were determined on larvae of its host, S. frugiperda J. E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae), the most important maize pest in Mexico. The native virus was genetically compared with another local virus and an isolate from Nicaragua. The genetic comparison was made through the partial sequencing of gene polh. The sequences of the three SfMNPV isolates were aligned and analyzed in a public database using BLAST, which showed a similarity of 99%. To observe the biological activity, bioassays were carried out using third instar S. frugiperda, where a positive relationship between mortality and concentration was observed. The highest mortality was observed at 120 h post-inoculation (hpi) and the adjustment of median lethal concentration (LC50) was obtained at 192 hpi. A production of 1.21 x 10⁸ ± 2.59 x 10⁷ OBs (occlusion bodies)/larva was determined when third instar larvae of S. frugiperda were inoculated with a concentration of 9.5 x 105 OBs/ml. In addition, the effect of a CL40 (4.8 x 104 OBs/ml) on the development and the reproduction of the insect was evaluated. El uso excesivo de los insecticidas químicos para el control de plagas tiene un impacto negativo en las poblaciones de organismos benéficos y puede causar el desarrollo de resistencia. Una alternativa a esta problemática es el uso de entomopatógenos, tal es el caso de los baculovirus. En el presente estudio se determinaron las características genéticas y la actividad biológica de un aislado nativo del nucleopoliedrovirus múltiple de Spodoptera frugiperda (SfMNPV) sobre larvas de su huésped, S. frugiperda J. E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae), la plaga de mayor importancia económica del cultivo del maíz en México. El virus nativo se comparó genéticamente con otro virus local y un aislado procedente de Nicaragua. La comparación se realizó a través de la secuenciación parcial del gen polh. Las secuencias de los tres aislados del SfMNPV se alinearon y se analizaron en una base de datos pública mediante BLAST mostrando una similitud de 99%. Para observar la actividad biológica se realizaron bioensayos con larvas de tercer estadio de S. frugiperda, donde se observó una relación positiva entre la mortalidad y la concentración. La mayor mortalidad se observó a las 120 h post-inoculación (hpi) y el ajuste de la concentración letal cincuenta (CL50) se obtuvo a las 192 hpi. Se determinó una producción de 1.21 x 108 ± 2.59 x 107 OBs (cuerpos de inclusión por sus siglas en inglés)/larva cuando se inocularon larvas de tercer estadio de S. frugiperda con una concentración de 9.5 x 105 OBs/ml. Además, se evaluó el efecto de una CL40 (4.8 x 104 OBs/ml) sobre el desarrollo y reproducción del insecto.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Maestría en Producción Agropecuaria The armyworm, Spodoptera frugiperda J. E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae), is the most important pest of maize, Zea mays L., in the Americas and its multiple nucleopolyhedrovirus (SfMNPV) is a highly pathogenic baculovirus that can be a control alternative to use of chemical insecticides. The first objective of this study was evaluated the effect of three semi-synthetic diets, elaborated based on soybean, corn and chickpea flour, on the development and reproduction of this insect. Spodoptera frugiperda developed satisfactorily on the three diets tested because they did not observe significant differences in larval weight or reproduction. In the second objective, three systems were evaluated for the semi-massive production of a Mexican isolate of SfMNPV (Sf-MER). In two of these systems, fourth-intar larvae of S. frugiperda were individualized in plastic containers for virus replication (continuous exposition of virus throughout the experiment or for 24 h only) and, in the other system, the pathogen was replicated in larvae maintained in groups. In the three systems, the diet based on soybean flour was used and the larvae were inoculated with a concentration of the virus at 1 × 109 OBs (occlusion bodies)/ml. The productivity of the virus in one of the systems of individualized larvae (2.85 × 109 OBs/mg larva) was significantly equal to that obtained in the infection of larvae in the group (2.50 × 109 OBs/mg larva), but in the latter there was a 29% loss of larvae due to cannibalism. El gusano cogollero, Spodoptera frugiperda J. E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae), es la plaga de mayor importancia del maíz, Zea mays L., en América y su nucleopoliedrovirus múltiple (SfMNPV) es un baculovirus altamente patogénico que puede ser una alternativa de control al uso de los insecticidas químicos. En el primer objetivo de este estudio se evaluó el efecto de tres dietas semi-sintéticas, elaboradas a base de harina de soya, sémola de maíz y harina de garbanzo, sobre el desarrollo y reproducción de este insecto. Spodoptera frugiperda se desarrolló satisfactoriamente sobre las tres dietas ensayadas debido a que no observaron diferencias significativas en el peso de las larvas ni en la reproducción. En el segundo objetivo se evaluaron tres sistemas para la producción semi-masiva de un aislado mexicano del SfMNPV (Sf-MER). En dos de estos sistemas, las larvas de cuarto estadio de S. frugiperda se individualizaron en contenedores de plástico para la replicación del virus (exposición al virus durante todo el experimento o sólo por 24 h) y, en el otro sistema, la replicación del patógeno se realizó en larvas mantenidas en grupos. En los tres sistemas se usó como base la dieta elaborada con harina de soya y las larvas se inocularon con una concentración del virus de 1×109 OBs/ml (del inglés occlusion body). La productividad del virus en uno de los sistemas de larvas individualizadas (2.85×109 OBs/mg larva) fue significativamente igual a la obtenida en la infección de larvas en grupo (2.50×109 OBs/mg larva), pero en este último hubo una pérdida de 29% de larvas por canibalismo.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Instituto de Investigaciones sobre los Recursos Naturales. Instituto de Investigaciones Químico Biológicas. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Doctorado en Ciencias Biológicas Baculoviruses (BVs) are pathogens viruses of insects, which are used currently around the world as bioinsecticides for the control of different agricultural pest. The Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus (SeMNPV) have a high specificity, pathogenicity, and virulence. Due that, it is considered as a promising alternative for controlling its host Spodoptera exigua (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae), one of the most important pest of worldwide of vegetables. It is widely known that the genotypic composition and insecticidal properties of BVs can differ among isolates from the same host as well as from different geographical regions. Therefore, selection of most effective isolate for a determined pest is very important in the development of a bioinsecticide. The first objective of this work was to study the genetic diversity and biological activity of four isolates of SeMNPV (SeSIN6, SeSIN8, SeSLP6, and SeSLP8) collected in two agricultural regions of Mexico (Chapter II). These isolates were compared with two characterized SeMNPV from the United States (SeUS1 and SeUS2) and one from Spain (SeSP2). Analysis of the viral genome with restriction enzymes confirmed that all Mexican isolates were SeMNPV isolates. However, molecular differences between the Mexican and the reference isolates were observed using PCR combined with restriction fragment length polymorphism (RFLP). For example, the Mexican isolates SeSLP6 and SeSIN6 were considered genotypic variants of the SeMNPV, while SeSIN8 and SeSLP8 isolates had a very similar pattern of DNA compared to the SeUS1 isolate. Los baculovirus (BVs) son virus patógenos de insectos, que actualmente son utilizados a nivel mundial como bioinsecticidas para el control de diferentes plagas de importancia agrícola. El nucleopoliedrovirus múltiple de Spodoptera exigua (SeMNPV, por sus siglas en inglés) es un virus que posee una alta especificidad, patogenicidad y virulencia. Debido a ello, es considerado como una prometedora alternativa para el control de su hospedero, Spodoptera exigua (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae), una de las plagas más importantes de hortalizas a nivel mundial. Es ampliamente conocido que la composición genotípica y propiedades insecticidas de los BVs pueden diferir entre aislados que proceden de un mismo hospedero, así como de distintas zonas geográficas. Por tanto, la selección de un aislado más efectivo para una determinada especie plaga es un importante elemento para desarrollar un bioinsecticida. El primer objetivo de este estudio fue estudiar la diversidad genética y la actividad biológica de cuatro aislados del SeMNPV (SeSIN6, SeSIN8, SeSLP6 y SeSLP8) colectados en dos zonas agrícolas de México (Capítulo II). Estos aislados se compararon con dos aislados previamente caracterizados de este mismo virus, procedentes de Estados Unidos (SeUS1 y SeUS2) y uno de España (SeSP2). El análisis del genoma viral mediante enzimas de restricción confirmó que todos los aislados mexicanos son aislados del SeMNPV. Sin embargo, con el uso de la técnica de reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en ingles) en combinación con la técnica de polimorfismo de longitud de fragmento de restricción (RFLP, por sus siglas en ingles), se observaron diferencias moleculares entre éstos y los aislados de referencia. Por ejemplo, los aislados mexicanos SeSLP6 y SeSIN6 se consideraron como variantes genotípicas del SeMNPV, mientras que los aislados SeSIN8 y SeSLP8 tuvieron un patrón muy similar de ADN comparado con el virus SeUS1.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Agrobiología. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Maestría en Ciencias Biológicas Baculoviruses are arthropod-specific viruses currently used as biological insecticides in several countries of the world. In this study, the biological activity of three isolates of nucleopolyhedrovirus of Spodoptera frugiperda (SfMNPV-CHI, SfMNPV-MER y SfMNPV-NIC, from the State of Chiapas, Merida and Nicaragua, respectively) was evaluated in different Mexican populations of the fall armyworm (FAW), the principal pest of maize, Zea mays L., in Mexico. The insect populations were collected in the states of Chiapas (Sf-CHI), Michoacan (Sf-MICH), Guanajuato (Sf-GTO), and Sinaloa (Sf-SIN). As reference, a laboratory colony (Sf-LEA) was used. No differences were observed in the LC50s values among isolates evaluated on the Sf-SIN population (range from 5.30 x 104 to 4.56 x 104 OB/ml) (OB, oclusion bodies) and the Sf-LEA colony (range from of 1.14 x 104 to 2.59 x 104 OBs/ml). Similarly, the LC50s values of SfMNPV-NIC and SfMNPV-CHI isolates were no different in all insect populations tested. In contrast, the SfMNPV-MER isolate was 7.6-fold less active than SfMNPV-NIC isolate in the Sf-CHI population, but this was 6.5 and 3.1-fold more pathogenic in Sf-MICH and Sf-GTO populations, respectively. The lowest values of time mean to death were observed in Sf-LEA colony (range from 89 to 100 hpi), while the highest values were observed in the Sf-GTO population (range from 142 to 156 hpi). The production of OBs per larva was observed between 2.12 and 16.8 x 107. Los baculovirus son un grupo de virus patógenos, específicos de artrópodos, que en la actualidad se utilizan como bioinsecticidas en varios países del mundo. En este estudio se evaluó la actividad biológica de tres aislados del nucleopoliedrovirus múltiple de S. frugiperda (SfMNPV-CHI, SfMNPV-MER y SfMNPV-NIC, provenientes del estado de Chiapas, Mérida y Nicaragua, respectivamente) sobre distintas poblaciones mexicanas del gusano cogollero (GC), Spodoptera frugiperda, J. E. Smith (Lepidoptera: Noctuidae), la plaga más importante del maíz, Zea mays L., en México. Las poblaciones de este insecto se colectaron en los estados de Chiapas (Sf-CHI), Michoacán (Sf-MICH), Guanajuato (Sf-GTO) y Sinaloa (Sf-SIN). Además, se utilizó una colonia de laboratorio como referencia (Sf-LEA). Entre la población de campo (Sf-SIN) (rango de 5.30 x 104 a 4.56 x 104 OBs/ml) (OBs, cuerpos de inclusión por sus siglas en inglés) y la colonia Sf-LEA (rango de 1.14 x 104 a 2.59 x 104 OBs/ml) no se observaron diferencias entre los valores de las CL50s de los distintos virus evaluados. Similarmente, los valores de la CL50 de los aislados SfMNPV-NIC y SfMNPV-CHI no mostraron diferencias en las poblaciones de S. frugiperda. En contraste, el virus SfMNPV-MER fue 7.6 veces menos activo que el virus SfMNPV-NIC en la población Sf-CHI, pero éste último fue 6.5 y 3.1 veces más patogénico en las poblaciones Sf-MICH y Sf-GTO, respectivamente. Los valores menores del tiempo medio para morir se observaron en la población Sf-LEA (rango de 89 a 100 hpi), mientras que los mayores se observaron en la población de Sf-GTO (rango de 142 a 156 hpi). La producción de OBs/larva se observó en un rango entre 2.12 y 16.8 x 107.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Maestría en Producción Agropecuaria The Asian citrus psyllid, Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae) is one of the most important pest of citrus crops worldwide that transmits the causal pathogen Huanglongbing. The resistance of three populations of adults and nymphs of D. citri (Dci- Antúnez, Dci- CParácauro, Dci- El Junco) to bifenthrin, malathion, and cloripirifos, collected in the Valley of Apatzingán, Michoacán, was monitored in this study. Two populations of adults (Dci- CParácuaro and Dci-El Junco), collected in November, and one of the nymphs (Dci-El Junco), collected in August, showed low but significant resistance to bifenthrin, with resistance ratios (RR) between 5-7 compared with the susceptible population. In contrast, with exception to Dci-El Junco population collected in June, all the three populations of adults and nymphs showed significant resistance to malathion (RR between 145-343 for adults and 310-432 for nymphs) and clorpirofos (RR between 1175-2425 for adults and 405-1412 for nymphs). In the second part of this study, the natural parasitism of Tamarixia radiata Waterston (Hemiptera: Eulophidae) was determined at different dates of collection on nymphs of D. citri in five sites, including the three where insecticide resistance was monitored. Parasitism was only observed on third instar nymphs (up to 2.3%), fourth (up to 29%) and fifth (up to 7%). The establishment of a management resistance program is proposed that preserves the parasitoid T. radiata and that maintaining low the D. citri populations. El psílido asiático de los cítricos, Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Liviidae) es una de las plagas mas importantes del cultivo de los cítricos en todo el mundo, que transmite el agente causal del Huanglongbing o HLB de los cítricos. Se monitoreó la resistencia de tres poblaciones (Dci-Antúnez, Dci-CParácuaro y Dci-El Junco) de adultos y ninfas de D. citri, colectadas en el Valle de Apatzingán, Michoacán, hacia los insecticidas bifentrina, malation y cloripirifos. Dos poblaciones de adultos (Dci-CParácuaro y Dci-El Junco), colectadas en el mes de noviembre, y una de ninfas (Dci-El Junco), colectada en el mes de agosto, mostraron baja, pero significante, resistencia hacia bifentrina, con proporciones de resistencia (PR) entre 5-7 comparado con la población susceptible. En contraste, con excepción de la población Dci-El Junco colectada en el mes de junio, las tres poblaciones de adultos y ninfas mostraron significante resistencia a malation (PR entre 145-343 para adultos y 310-432 para ninfas) y clorpirofos (PR entre 1175-2425 para adultos y 405-1412 para ninfas). En la segunda parte de este estudio, se determinó, en diferentes fechas de colecta, el parasitismo natural de Tamarixia radiata Waterston (Hemiptera: Eulophidae) sobre ninfas de D. citri en cinco sitios, incluidos los tres donde se realizó el estudio de resistencia. Solo se observó parasitismo sobre las ninfas de tercero (hasta 2.3%), cuarto (hasta 29%) y quinto (hasta 7%) ínstar. Se propone establecer un programa de manejo de la resistencia que conserve al parasitoide T. radiata con objetivo de mantener bajas las poblaciones de D. citri.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Maestría en Producción Agropecuaria The psyllid, Bactericera cockerelli (Sulc) (Hemiptera: Triozidae) is one of the most important pest in solanaceous crops. The most important damage caused by this insect is the transmission of the bacterium Candidatus Liberibacter solanacearum, which is associated with the zebra chip disease in potatoes. The parasitoid Tamarixia triozae (Burks) (Hymenoptera: Eulophidae) can be a control alternative of this pest. However, is necessary to determine its compatibility with different compounds. In this study was determined the lethal and sublethal effects caused by the insecticides EPA90® (an oil soybean), imidacloprid (a neonicotinoid) and abamectin (a avermectin) on developmental stages of egg, larva and pupa of T. triozae. Three concentrations of EPA (1,620, 810 and 443 mg of active ingredient [a.i.]/liter), abamectin (9, 4.5 and 0.03 mg a.i./liter), and imidacloprid (260, 130 and 3 mg a.i./litro)were used to. The mortality caused by EPA on egg and larva stages of the parasitoid was between 26-62% and 6-19%, respectively, in imidacloprid was ≤19% and in abamectin between 4 a 100%. Imidacloprid caused a mortality ≤ 9% on pupae of the parasitoid, while that abamectina between 6%-68% and EPA not affected this development stage of the parasitoid. In addition, was recorded a mortality between 1-39%of larvae and pupae derived from treated egg and between 1-10% of pupa derived from treated larvae with the three insecticides bioassayed. El psílido, Bactericera cockerelli (Sulc) (Hemiptera: Triozidae) es una de las plagas principales en cultivos de solanáceas. El daño más importante causado por este insecto es la trasmisión de la bacteria Candidatus Liberibacter solanacearum, la cual está asociada con la enfermedad zebra chip en papa. El parasitoide Tamarixia triozae (Burks) (Hymenoptera: Eulophidae) puede ser una alternativa de control de esta plaga. Sin embargo, es necesario determinar su compatibilidad con diferentes compuestos. En este estudio se determinaron los efectos letales y subletales causados por los insecticidas EPA 90® (un aceite de soya), imidacloprid (un neonicotenoide) y abamectina (una avermectina) sobre los estados de huevo, larva y pupa de T. triozae. Se utilizaron tres concentraciones de EPA (1,620; 810 y 443 mg de ingrediente activo [i.a.]/litro), abamectina (9, 4.5 y 0.03 mg i.a./litro) e imidacloprid (260, 130 y 3 mg i.a./litro). La mortalidad causada por EPA sobre los estados de huevo y larva del parasitoide estuvo comprendida entre 26-62% y 6-19% respectivamente, en imidacloprid fue ≤19%y en abamectina entre 4 a 100%. Imidacloprid causó una mortalidad ≤9% sobre la pupa del parasitoide, mientras que abamectina entre 6%-68% y EPA no afectó a esta etapa de desarrollo del parasitoide. Además, se registró una mortalidad de entre 1-39% en larvas y pupas provenientes de huevos tratados y de entre 1-10% de pupas provenientes de larvas tratadas con los tres insecticidas ensayados.

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Agrobiología. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Maestría en Ciencias Biológicas The beet armyworm, Spodoptera exigua (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae), is an insect widely distributed in tropical and subtropical regions of the world. Larvae of this pest can fed of several vegetables crops including sweet pepper, tomato, aubergine, melon and watermelon in greenhouses and open field. To combat the pest, growers use synthetic organic insecticides, but the control achieved is not successful because of the insect’s high capacity to develop resistance toward the majority of conventional compounds. The nucleopolyhedrovirus (NPVs) (Baculoviridae) and azadirachtin (AZA) are two biorational insecticides that are actually used in many different countries against several insect pests. In this work, the genetic diversity of NPVs isolates from infected S. exigua larvae collected in two different agricultural regions of Mexico (Sinaloa and San Luis Potosí) on 2006 and 2008 (SIN6, SIN8, SLP6, and SLP8) was studied. In addition, the potential insecticide of these isolates and the biological activity of AZA on third instar S. exigua was also studied. The molecular studies were made through the combination of following techniques: the polymerase chain reaction, restriction fragment length polymorphism (PCR–RFLP) and genome sequencing of specific fragments. Eighty infected S. exigua larvae were used, which only one was used from each NPV isolate. Larvae infected with the S. exigua multiple nucleopolyhedrovirus (SeMNPV), from the commercial product Spod-X® (SPX), were also analyzed as reference. Partial sequences from lef-8, polh genes and the complete sequence from the hr3 homologous region were analyzed. In addition, a PCR –RFLP with BglII was used for hr1 and hr3. The results showed that NPVs isolates from S. exigua larvae collected at Sinaloa and San Luis Potosí on 2006 and 2008 belong to the SeMNPV. El gusano soldado, Spodoptera exigua (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae), es un insecto que se distribuye en todas las regiones tropicales y subtropicales del mundo. Las larvas de esta plaga pueden alimentarse de varios vegetales incluyendo pimiento dulce, tomate, berenjena, melón y sandía en condiciones de invernadero y campo abierto. Para combatir esta plaga, los agricultores utilizan insecticidas orgánicos sintéticos, pero el control no ha sido exitoso debido a la alta capacidad que tiene este insecto para desarrollar resistencia hacia la mayoría de los compuestos convencionales. Los nucleopoliedrovirus (NPVs) (Baculoviridae) y la azadiractina son dos insecticidas biorracionales que se utilizan en diferentes partes del mundo para el control de insectos. En el presente trabajo se estudió la diversidad genética de un grupo de NPVs obtenidos de larvas de S. exigua colectadas en dos zonas agrícolas (Sinaloa y San Luis Potosí) de México en los años 2006 y 2008 (SIN6, SIN8, SLP6 y SLP8). Además, se estudió el potencial insecticida de estos aislamientos y la actividad biológica de azadiractina (AZA) en larvas de tercer estadio de S. exigua. Los estudios moleculares se realizaron mediante una combinación de las técnicas: Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), PCR-Polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción (RFLP) y secuenciación de fragmentos específicos del genoma. En total se procesaron 80 larvas, de las cuales se tomó una muestra para cada aislamiento. También se analizaron como referencia larvas infectadas con el nucleopolihedrovirus múltiple de S. exigua (SeMNPV) procedente del producto comercial Spod-X® (SPX). Se analizaron secuencias parciales de los genes lef-8, polh y la secuencia completa de la región homóloga hr3, así mismo se realizó un PCR -RFLP usando la enzima BglII para hr3 y hr5. Los resultados mostraron que los aislamientos que se obtuvieron de las larvas de S. exigua colectadas en Sinaloa y San Luis Potosí pertenecen al NPV de S. exigua (SeMNPV).

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Agrobiología. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Maestría en Ciencias Biológicas Because fruit flies (Diptera: Tephritidae) are one of the groups of insects with a great economic impact on the fruit growing worldwide, several methods have been implemented for their control. An alternative to controlling this pest is biological control through the use of natural enemies such as parasitoids. Among the species of parasitoids used in augmented releases for the control of tephritid pests are Diachasmimorpha tryoni Cameron and Diachasmimorpha longicaudata Ashmead (Hymenoptera: Braconidae). There is also a large guild of native parasitoids of the genus Anastrepha Schiner, with an abundance of hymenoptera: Doryctobracon areolatus Szépligeti, Doryctobracon crawfordi Viereck, Opius hirtus Fischer (Braconidae), among others. In the present work the behavior (superparasitism and discrimination capacity) of females of two species of parasitoids D. tryoni, an introduced species, and D. crawfordi, a native species, were evaluated using host larvae of Anastrepha ludens Loew (Diptera: Tephritidae) of 8 days of age. To evaluate the autosuperparasitism, under laboratory conditions, 20 larvae of A. Ludens fruit flies were exposed to females of each species of parasitoid acting alone. Likewise, to determine the conespecific superparasitism, fruit fly larvae were exposed to groups of five females of the same species of parasitoid, for each of the species. In both cases a total of 40 repetitions were made. In all experiments the number of scars / pupa and number of immature (first stage larvae) / pupa attacked were recorded. The relationship between the number of scars / pupae with survival and fecundity of progeny of both parasitoid species, at three levels of scars present in the pupae (1, 2-4 and> 5 scars, respectively) was also determined. Debido a que las moscas de la fruta (Diptera: Tephritidae) son uno de los grupos de insectos con gran impacto económico sobre la fruticultura a nivel mundial, se han implementado diversos métodos para su control. Una alternativa al control de esta plaga es el control biológico mediante el uso de enemigos naturales como los parasitoides. Entre las especies de parasitoides utilizadas en liberaciones aumentativas para el control de tefrítidos plaga, se encuentran Diachasmimorpha tryoni Cameron y Diachasmimorpha longicaudata Ashmead (Hymenoptera: Braconidae). También existe un amplio gremio de parasitoides nativos del género Anastrepha Schiner, destacando por su abundancia los himenópteros: Doryctobracon areolatus Szépligeti, Doryctobracon crawfordi Viereck, Opius hirtus Fischer (Braconidae), entre otros. En el presente trabajo se evaluó el comportamiento (superparasitismo y capacidad de discriminación) de hembras de dos especies de parasitoides D. tryoni, una especie introducida, y D. crawfordi, una especie nativa, utilizando como hospederos larvas de Anastrepha ludens Loew (Diptera: Tephritidae) de 8 días de edad. Para evaluar el autosuperparasitismo, bajo condiciones de laboratorio, se expusieron 20 larvas de A. Ludens moscas de la fruta a hembras de cada especie de parasitoide actuando en solitario. Así mismo, para determinar el superparasitismo conespecífico, se expusieron larvas de la mosca de la fruta a grupos de cinco hembras de la misma especie de parasitoide, para cada una de las especies. En ambos casos se hicieron un total de 40 repeticiones. En todos los experimentos se registró el número de cicatrices/pupa y el número de inmaduros (larvas de primer estadio) /pupa atacada. También se determinó la relación entre el número de cicatrices/pupa con la supervivencia y la fecundidad de la progenie de ambas especies de parasitoides, a tres niveles de cicatrices presentes en las pupas (1, 2-4 y >5 cicatrices, respectivamente).

Instituto de Investigaciones Agropecuarias y Forestales. Facultad de Biología. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Facultad de Agrobiología. Facultad de Químico Farmacobiología. Programa Institucional de Maestría en Ciencias Biológicas Entomopathogenic fungi are active against a broad host range and have been used as biological control agent. Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin (Hypocreales: Clavicipitaceae) has been tested for the control of Mexican bean beetle, Epilachna varivestis Mulsant (Coleoptera: Coccinellidae), one of the most important pest for bean production in Mexico. In this study, we compared the insecticidal activity of four B. bassiana native isolates (Bb37, Bb38, Bb40, and Bb45) against the commercial product Mycotrol® (strain GHA) on E. varivestis adults. Isolates were obtained from different species of insects collected in maize in Guanajuato state. Adults were exposed by an immersion method at a single concentration of each isolate (1 x 10 8 conidia/mL) including the GHA strain. Mortality during 10 d after inoculation (dai) at 24-h intervals, was evaluated. Isolates Bb37, Bb38, and Bb40 significantly reduced adult survival (range from 25 to 41%) compared with the commercial strain GHA (77%) and control (71%) at 10 dai. In a second experiment, bioassays were conducted to determine Lethal Concentration (LC 50) and Mean Time to Death (MTD) of the most active isolates (Bb37 and Bb40) in third instar and adults. We used a range of five concentrations for each isolate (1 x 10 5 - 1 x 10 9 conidia/mL). Los hongos entomopatógenos son activos contra un amplio rango de hospederos y tienen un alto potencial como agentes de control biológico. En el presente estudio, se evaluó la actividad de cuatro aislamientos nativos (Bb37, Bb38, Bb40 y Bb45) del hongo Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin (Hypocreales: Clavicipitaceae) y el producto comercial Mycotrol ® (cepa GHA) sobre adultos de la conchuela del frijol, Epilachna varivestis Mulsant (Coleoptera: Coccinellidae), una de las plagas de mayor importancia económica del cultivo del frijol en México. Los aislamientos nativos se obtuvieron de diferentes especies de insectos colectados en cultivos de maíz en el estado de Guanajuato. Los insectos se expusieron mediante inmersión a una sola concentración de cada aislamiento (1 x 10 8 conidios viables/mL) incluyendo a la cepa GHA. La mortalidad se evaluó cada 24 h durante 10 d posteriores a la inoculación (dpi). Tres de los cuatro aislamientos (Bb37, Bb38 y Bb40) redujeron significativamente la sobrevivencia (rango de 25 al 41 %) de los adultos de E. Varivestis comparado con la cepa comercial GHA (77 %) y el testigo (71 %) a los 10 dpi. En un segundo experimento, se realizaron bioensayos para determinar la Concentración Letal Media (CL 50) y el Tiempo Medio para Morir (TMM) de dos de los aislamientos más activos (Bb37 y Bb40) en larvas de tercer estadio y adultos de E. varivestis. Para el primer caso, se utilizó un rango de cinco concentraciones para cada aislamiento (1 x 10 5 a 1 x 10 9 conidios viables/mL).