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Tesis doctoral realizada en el Instituto de Bioquímica de La Plata. Doctorado de Ciencias Exactas Área Ciencias Biológicas. La tesis trata del estudio del gorgojo de la harina, Tribolium castaneum, plaga en granos almacenados, en interacción con el hongo entomopatógeno Beauveria bassiana., Facultad de Ciencias Exactas

Incluye tablas, gráficas e imágenes La presente investigación se centró en evaluar productos para el control de palomillas de los cereales Sitotroga cerealella y gorgojos de la especie Tribolium castaneum en granos almacenados de arroz variedad Victoriosa 10-39 los cuales fueron Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Bacillus thuringiensis, Ají, Pimienta Negra, Laurel, Tierra de Diatomea, K-Obiol y un testigo. El estudio se llevó a cabo en el laboratorio de la empresa SEMILLANO S.A.S. La investigación está comprendida de dos fases toxicidad de insectos y repelencia de insectos. Posteriormente se hicieron evaluaciones de germinación a semillas de arroz que estuvieron en contacto con los tratamientos e insectos, con el fin de determinar si los productos tenían efecto en el porcentaje de germinación en las semillas. The present investigation focused on evaluating products for the control of moths from Sitotroga cerealella cereals and weevils of the Tribolium castaneum species in stored grains of rice variety Victoriosa 10-39, which were Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana, Bacillus thuringiensis, Ají, Pepper Black, Laurel, Diatomaceous Earth, K-Obiol and a witness. The study was carried out in the laboratory of the company SEMILLANO S.A.S. The investigation is comprised of two phases: insect toxicity and insect repellency. Later germination evaluations were made to rice seeds that were in contact with the treatments and insects, in order to determine if the products had an effect on the germination percentage in the seeds. Agradecimientos. – Resumen. – Abstract. -- 1 Introducción. -- 2 Planteamiento del problema. -- 3 Justificación. -- 4 Objetivos. -- 4.1 Objetivo general. -- 4.2 Objetivos específicos. -- 5 Marco teórico. -- 5.1 palomilla de los cereales (sitotroga cerealella). -- 5.1.1 Taxonomía. -- 5.1.2 Reconocimiento. -- 5.1.3 Biología. -- 5.1.4 Hábitos. -- 5.1.5 Comportamiento dañino. -- 5.1.6 Ciclo de vida. -- 5.2 gorgojo castaño de la harina (tribolium castaneum). -- 5.2.1 Taxonomía. -- 5.2.2 Reconocimiento. 5.2.3 Biología. -- 5.2.4 Hábitos. -- 5.2.5 Comportamiento dañino. -- 5.2.6 Ciclo de vida. -- 6 Métodos de control. -- 6.1 Control natural. -- Ají en polvo (capsicum annum). -- Taxonomía. -- Usos como insecticida. -- Laurel en polvo (laurus nobilis). – Taxonomía. -- Uso como insecticida. -- Pimienta negra en polvo (piper nigrum). – Taxonomía. -- Usos como insecticida. -- 6.2 Control físico. -- Tierra de diatomea. -- 6.3 Control biológico. -- Bacillus thuringiensis. -- 6.4 Control químico. -- K-obiol. --7 Ubicación. -- 8 Obtención de los productos a evaluar. -- 9 Fase de laboratorio tratamientos repelentes. -- 10 Fase de laboratorio productos tóxicos. -- 11 Dosis de los productos a emplear. -- 12 Diseño experimental en laboratorio productos tóxicos. -- 13 Resultados y discusión. -- 13.1 resultados de repelencia en sitotroga cerealella. -- 13.2 Resultados de repelencia en tribolium castaneum. -- 13.3 Resultados de control en s. Cerealella (productos tóxicos). -- 13.4 Resultados de control en t. Castaneum (productos tóxicos). -- 14 Evaluación de germinación en semillas de arroz victoriosa 10-39. -- 15 Conclusiones. -- 16 Recomendaciones. – Bibliografía. Pregrado Ingeniero(a) Agrónomo(a) Ingeniería Agronómica

El uso de insecticidas sintéticos tradicionales para el control de Tribolium castaneum ha generado problemas de salud pública debido a su alta toxicidad y baja selectividad, haciéndose necesario el desarrollo de nuevos agentes fitosanitarios que sean seguros y eficientes. En esta investigación se determinó el potencial fumigante de algunos AEs obtenidos de especies aromáticas colombianas. Asimismo, se evaluaron los posibles mecanismos de acción a través de la inhibición de la actividad catalítica de enzimas vitales y desintoxicantes de T. castaneum. Por medio del método experimental desarrollado se logró evaluar la acción fumigante de 45 aceites esenciales (AEs) mediante el método de vial en vial. Los valores CL30, CL50 y CL90 de los AEs más activos fueron determinados mediante un análisis PROBIT y se caracterizaron químicamente mediante GC-MS. La letalidad y composición química de los AEs se utilizó para establecer grupos a través de un análisis clúster. El grupo de los AEs promisorios fue sometido a evaluación para determinar su efecto inhibidor sobre la actividad catalítica de las enzimas acetilcolinesterasa (AChE), glutatión-s-transferasa (GST) y catalasa mediante métodos espectrofotométricos. Como resultados se encontró que 23 de 45 AEs mostraron ser promisorios ya que tuvieron CL50 entre 16.23 y 264.59 µL/L aire. La composición química de los AEs más activos fue muy variada, observándose principalmente aceites monoterpénicos y fenilpropánicos. El análisis clúster agrupó los 23 AEs en dos grupos principales, encontrándose que en el grupo uno están los AEs más activos y aquellos en los que los fenilpropanos son los componentes más significativos. En este grupo destacan el aceite de Foeniculum vulgare con CL50 de 16.23 µL/L aire, seguido por Artemisia dracunculus con CL50 22.78 µL/L aire. Con respecto al segundo grupo, los AEs son menos activos y del tipo monoterpénico, como el caso de Citrus sinensis y Coleonema album con valores de CL50 de 138.32 y 264.59 µL/L aire, respectivamente. Estos resultados sugieren que la fumigancia de los AEs puede mejorar con un mayor contenido de fenilpropanos. De igual manera, se cuantificaron las enzimas de importancia metabólica en homogenizados proteicos obtenidos de T. castaneum, donde se evidenció que en dicho extracto están, en diferentes proporciones, las enzimas de interés; destacándose en mayor proporción la catalasa. Para determinar la inhibición de la actividad catalítica de dichas enzimas, se usó una concentración de 500 ppm de cada uno AE promisorios. Como resultados se encontró que, para el caso de la AChE, los 23 AEs promisorios tuvieron variados efectos de inhibición, sobresaliendo los AEs de Piper nigrum y Rosmarinus officinalis con porcentajes superiores al 60 %. Con respecto a la inhibición de la GST, los AEs tuvieron un rango de inhibición entre 10 y el 57 %, destacándose los AEs de Citrus sinensis, Piper aduncum y Zanthoxylum monophyllum. Del mismo modo se evidenció una inhibición catalítica de la catalasa entre el 30 y el 80 %, por parte de los AEs promisorios sobresaliendo los de las especies de Schinus molle, Lavandula angustifolia e Hypericum juniperinum. Con base en estos resultados es posible concluir que los AEs evaluados en la presente investigación pueden llegar a tener variados mecanismos de acción relacionados con la mortalidad de T. castaneum, lo que los convierte en un buen reservorio de sustancias que, en primer lugar, controlen la plaga en cuestión y, en segundo, prevengan los inconvenientes de los insecticidas convencionales como la resistencia. Colciencias The use of synthetic insecticides for the control of Tribolium castaneum has generated public health issues such as high toxicity and low selectivity, making necessary the development of new phytosanitary agents that are safe and efficient. In this investigation, the fumigant potential of some essential oils extracted from Colombian aromatic species was determined. Likewise, the possible mechanisms of action were evaluated through the inhibition of vital and detoxifying enzymes catalytic activity from T. castaneum. Throughout the developed experimental method, it was possible to evaluate the fumigant action of 45 essential oils (AEs) through the “vial en vial” method. The CL30, CL50 and CL90 values from the most active AEs were determined by a PROBIT analysis and they were chemically characterized through GC-MS. The AEs lethality and the chemical composition were used to establish activity groups by means of cluster analysis. The group of promising AEs was evaluated to determinate its inhibitory effect on catalytic activity of the enzymes acetylcholinesterase (AChE), glutathione-s-transferase (GST) and catalase according to spectrophotometric methods. As results, 23 from the 45 AEs showed promising activity with CL50 values between 16.23 and 264.59 µL/L air. The composition of the most active AEs was very varied, observing mainly monoterpenes and phenilpropanoids oils. The cluster analysis grouped these 23 AEs into two main groups finding that in the group number one are found the most active AEs and those in which the phenylpropanes are the most significant components. In this group, stand out the Foeniculum vulgare oil with CL50 of 16.23 µL/L air, followed by Artemisia dracunculus with CL50 of 22.78 µL/L. In regards the second group, the AEs are less active and monoterpenic type, such as Citrus sinensis and Coleonema album with CL50 values of 138.32 y 264.59 µL/L air, respectively. These results suggest the AEs fumigant activity can be improved with a higher phenylpropanes content. In the same way, the enzymes with metabolic importance were quantified in protein homogenates obtained from T. castaneum, where it was found that, in that extract there is activity of the enzymes of interest, in different proportions, being the catalase the one with prominent proportion. To determine the catalytic activity inhibition of theses enzymes, a concentration of 500 ppm of each promising AEs was used. The results show that for the AChE case, the 23 promising AEs had different inhibition effects, with the AEs of Piper nigrum and Rosmarinus officinalis standing out with percentages higher than 60%. Regarding the GST catalytic activity inhibition, the AEs had a range of inhibition between 10 and 57%, highlighting the AEs of Citrus sinensis, Piper aduncum y Zanthoxylum monophylum. Alike, an inhibition of catalytic activity of catalase between 30 and 80% was evidenced by the promising AEs especially those of Schinus mole, Lavandula angustifolia and Hypericum juniperinum. Based in these results, it is possible to conclude that the AEs evaluated in the present investigation may have various mechanisms of action related to the mortality of T. castaneum, which make them a good reservoir of substances that, in first place, control the plague indicated and secondly, prevent the inconveniences of conventional insecticides such as resistance. Magíster en Ciencias Biológicas Maestría

Este capítulo pretende dar una visión crítica de los diferentes métodos de bioensayo y control de una plaga secundaria (Tribolium castaneum) que afect a a granos almacenados, utilizando aceites esenciales y sus componentes principales. También pretende dar una relación de estructura actividad. Fil: Zunino, María Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; Argentina

Los bioinsecticidas basados en Bacillus thuringiensis (Bt) constituyen una herramienta de gran valor para el control de plagas de insectos, ya que presentan una forma de aplicación muy específica e inocua para los usuarios y el medio ambiente. Entender, tanto el mecanismo de toxicidad de estos bioinsecticidas como la respuesta desencadenada en los insectos diana, tiene como objetivo proporcionar una base útil para el desarrollo de insecticidas mejorados dirigidos contra estas importantes plagas agrícolas, permitiendo ampliar el rango y los niveles de toxicidad de las proteínas insecticidas y abordar problemas como la aparición de resistencia. La presente tesis se ha centrado en el estudio del modo de acción de las toxinas Cry de Bt en insectos coleópteros, orden en el cual el modo de acción de este bioinsecticida está poco estudiado. Para ello se ha escogido dos especies de insecto relevantes en este orden: la especie modelo Tribolium castaneum por su condición de plaga, la disponibilidad de la secuencia de su genoma y las numerosas herramientas genéticas y genómicas desarrolladas en dicho organismo que facilitan enormemente el análisis funcional y Leptinotarsa decemlineata, una de las plagas más importantes a nivel mundial en este orden. En T. castaneum se evaluó la actividad insecticida de diferentes cepas de Bt y se realizó un análisis proteómico global en las larvas del insecto después de ser tratadas con las cepas de Bt productoras de las toxinas Cry3Ba y Cry23/37, que resultaron activas, con el objetivo de identificar proteínas diferencialmente reguladas en respuesta a los tratamientos. Tres proteínas del insecto aumentaron tras los tratamientos y pueden participar en la defensa del insecto y la respuesta inmune, siendo una proteína de hemolinfa de unión a odorantes la que más aumentó. También cabe destacar el papel de la apolipoforina III en la respuesta inmune, cuya actuación vía activación de la cascada de la profenoloxidasa se ha demostrado. Cuatro proteínas disminuyeron tras los tratamientos y pueden estar implicadas en el metabolismo y desarrollo del insecto. También en T. castaneum, se identificaron proteínas de unión de la toxina Cry3Ba en el intestino de las larvas y se confirmó que una E-cadherina y un simportador de sodio-soluto son receptores funcionales de ésta. Un fragmento del simportador que contenía el epítopo de unión a toxinas Cry en otros insectos incrementó la susceptibilidad de las larvas al ser suministrado conjuntamente con la toxina Cry3Ba, confirmando la implicación por primera vez de un simportador de sodio en el modo de acción de Bt. En L. decemlineata, se confirmó la relevancia del motivo de reconocimiento de la toxina Cry3Aa de Bt, tóxica para este insecto, por una metaloproteasa tipo ADAM presente en el epitelio intestinal de las larvas, tanto en la proteólisis de la toxina asociada a la membrana intestinal como en su actividad insecticida. A su vez, la prohibitina 1 presentó capacidad de unión a esta toxina, y resultó ser una proteína esencial para las larvas de este insecto. El tratamiento combinado de la toxina Cry3Aa junto con el silenciamiento del gen codificante de la prohibitina 1 produjo un efecto tóxico sinérgico que puede ser utilizado para el control de esta plaga. Bacillus thuringiensis (Bt)-based bioinsecticides represent a very specific and an environmentally safe alternative to chemical pesticides. Understanding Bt mode of action and insect response to this enthomopathogenic bacteria and its toxins provides useful information to develop new improved insecticides and avoid insect resistance. This thesis focuses in the study of Bt Cry toxins mode of action in coleopteran insects, a group of insects in which this toxicity mechanism is not well known. We have selected two relevant insect species in this order: the coleopteran model Tribolium castaneum, for its pest condition, genome availability, and abundance of genetic and genomic tools developed in this insect, which makes easier the functional analysis, and Leptinotarsa decemlineata, one of the most important pests in this order. Several Bt strains have been evaluated in T. castaneum and a global proteomic analysis was performed in larvae treated with Cry3Ba and Cry23/37 Bt producing strains, which were found toxic, in order to identify differentially regulated proteins in response to treatments. Proteins showing a statistically significant change in treated larvae compared to non-intoxicated larvae fell into two major categories. Up-regulated proteins were involved in host defense and immune response, among which Odorant binding protein C12 showed the highest change. Remarkably, the participation of Apolipophorin-III in T. castaneum immune response via prophenoloxidase cascade activation was also demonstrated. Downregulated proteins were linked to metabolic pathways affecting larval metabolism and development. In this work, a Cadherin and a Sodium solute symporter have been identified by ligand blot as putative Cry3Ba toxin binding proteins, and their role as functional receptors was also demonstrated. A Sodium solute symporter fragment which contains Cry toxin binding epitope found in other insects enhanced Cry3Ba toxic action, confirming the involvement of a sodium symporter in Bt mode of action for the first time. In L. decemlinetata, the relevance of Bt Cry3Aa membrane associated proteolysis and toxicity through the predicted recognition motif Cry3Aa–ADAM metalloproteinase interaction was assessed. L. decemlineata Prohibitin 1 also bound Cry3Aa toxin and its silencing evidenced this protein is essential to this insect. Cry3Aa and Prohibitin gene silencing combined treatments produced a synergistic effect which reveals an effective strategy to improve crop protection.

Fil: Rodríguez, Silvia Marta. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Producción Vegetal. Cátedra de Zoología Agrícola. Buenos Aires, Argentina. Fil: Carrizo, Paola Irene. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Producción Vegetal. Cátedra de Zoología Agrícola. Buenos Aires, Argentina. Fil: Regonat, Marisa Elizabeth. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Producción Vegetal. Cátedra de Zoología Agrícola. Buenos Aires, Argentina. Fil: Hendrich, Paulina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Producción Vegetal. Cátedra de Zoología Agrícola. Buenos Aires, Argentina. Fil: Heit, Guillermo Eugenio. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomía. Departamento de Producción Vegetal. Cátedra de Zoología Agrícola. Buenos Aires, Argentina. Fil: Márquez, Adolfo M. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacobotánica. Buenos Aires. Argentina. Fil: Wagner, Marcelo Luis. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacobotánica. Buenos Aires. Argentina. Fil: Gurni, Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Farmacología. Cátedra de Farmacobotánica. Buenos Aires. Argentina. En condiciones controladas de laboratorio se evaluó el efecto de los extractos de acetato de etilo, acetona y etanol de Picrasma crenata (palo amargo) en la mortalidad por contacto en adultos de Sitophilus oryzae (L.), Oryzaephilus surinamensis (L.) y Tribolium castaneum (Herbst), mediante topicación en el abdomen. En T.castaneum se midió además, el efecto por alimentación producido por dos dosis diferentes, en la mortalidad de los adultos y en la duración de los estados inmaduros. Para estos últimos se consideró el efecto de los reguladores del crecimiento Linurón y Novalurón como base de comparación. Las observaciones para mortalidad se consideraron hasta los 30 días desde el tratamiento. Las pruebas por alimentación fueron realizadas mezclando los extractos en polvo con la dieta base. Los resultados fueron analizados mediante análisis de varianza. La mortalidad acumulada por contacto en adultos de S. oryzae, fue de 50% para los extractos de acetato de etilo y acetona, sin efecto significativo por ninguno de los extractos en las otras dos especies. La mortalidad acumulada por alimentación con dieta y extractos sobre adultos de T. castaneum fue de 90% para la dosis más alta del extracto de etanol, 70% para la dosis más alta del extracto de acetona y 40% para la dosis más alta del extracto de acetato de etilo. La duración de sus etapas inmaduras fue afectada de modo significativo por todos los extractos, y el efecto del de acetato de etilo fue el más eficaz y semejante al producido por los reguladores de crecimiento. fot.

Se evaluó la actividad repelente, toxicidad, efecto fumigante, índices nutricionales y actividad fagodisuasiva del aceite esencial de hojas de Tagetes terniflora, en larvas y adultos de Tribolium castaneum Herbst (Coleoptera:Tenebrionidae). La actividad repelente en larvas de 25 días fue evaluada a las 2 y 24 h A las 2 h, la repelencia incrementó a medida que aumentaron las concentraciones. Sin embargo, a las 24 h al 0,4 % (p/v) se observó atractancia. El efecto repelente, en adultos aumentó con la concentración. En aplicaciones tópicas, el aceite esencial de T. terniflora no resultó tóxico a las concentraciones evaluadas en larvas de 25 días. Con referencia a la actividad fumigante, el aceite no produjo toxicidad ni en larvas ni en adultos de T. castaneum. El bioensayo de Índices Nutricionales demostró que el aceite de T. terniflora en adultos, redujo la tasa de crecimiento a las concentraciones del 0,4 y 4,0% (p/v), disminuyó la utilización del alimento a las concentraciones de 0,4, 1,0 y 4,0 %(p/v) y se observó un leve efecto fagodisuasivo a la concentración del 2,0 % (p/v). En larvas no se produjo reducción en la tasa de crecimiento, en la tasa de consumo y en la utilización del alimento. Repellent activity on fifth instars was evaluated at two and twenty four hours. At two hour, repellency increased with concentration. However, at twenty four hours at 0,4%(w/v), the essential oil showed attractancy. On adults, repellency increased with concentration. In topical application and fumigant activity, the essential oil was not found to be toxic to any of the stages evaluated. Bioassays of Nutritional indices showed that the essential oil reduced the growth rate at 0,4% and 4%, food utilisation decreased at 0,4%, 1% and 4% and had no effect on food consumption; at 2% there was relatively little feeding deterrence action observed on adults. In larvae, the essential oil had no effect on growth rate, food consumption and food utilisation. However, a slight feeding deterrence effect was observed at 0,4%. Fil: Stefanazzi, Natalia. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina Fil: Gutierrez, M. M.. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina Fil: Stadler, Teodoro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Regional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas. Laboratorio de Investigaciones y Servicios Ambientales Mendoza; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Regional de Investigaciones Cientifícas y Tecnológicas; Argentina Fil: Bonini, N. A.. Universidad Nacional de Salta; Argentina Fil: Ferrero, Adriana Alicia. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia; Argentina

Tribolium castaneum (Herbst) is reported as new intermediate host of Hymenolepis diminuta from Peru., Tribolium castaneum (Herbst) es reportado como un nuevo hospedero intermediario de Hymenolepis diminuta en el Perú.

Tribolium castaneum (Herbst) es reportado como un nuevo hospedero intermediario de Hymenolepis diminuta en el Perú. Tribolium castaneum (Herbst) is reported as new intermediate host of Hymenolepis diminuta from Peru.

Se investigó el efecto biológico de productos extraídos de plantasde Salpichroa origanífolia y Datura ferox sobre Tribolium castaneum y Musca domestica. Los productos evaluados fueron: extractos de S.origanifolia, withanólidos A, C y G (salpicrólidos) aislados de S.origanifolia, cinco análogos modificados a partir de los compuestos A y G,y withaferoxólido aislado de D. ferox. Los productos se incorporaron a ladieta de larvas y adultos o se aplicaron en forma tópica en adultos. Seprodujeron demoras significativas en el desarrollo de T. castaneum desdelarva a adulto con A, C, G y withaferoxólido, resultando los mejorescompuestos A y G, que además produjeron efectos letales. El compuesto A produjo demoras significativas en el desarrollo de M. domestica desdelarva a adulto, mientras que la aplicación de A, C y G produjo mortalidad,siendo G el compuesto más activo. Se observaron efectos subletalessimilares cuando se ofreció como alimento dietas de bajo valor nutritivosin withanólidos. Cuando se efectuaron tratamientos con salpicrólido Acon adultos, se evitó la permanencia de T. castaneum en la proximidaddel alimento, produciéndose entonces inhibición de la alimentación. También se observaron efectos letales y subletales con algunos de losanálogos modificados. Estos resultados sugieren que la actividadbiológica puede deberse a un efecto de disuasividad alimentaria. The biological effect of products extracted from plants of Salpichroaoriganifolia and Datura ferox on Tribolium castaneum and Muscadomestica was studied. Products tested were: extracts of S. origanifolia,withanolides A, C and G (salpichrolides) isolated from S. origanifolia, fivechemically modified analogs of compounds A and G, and withaferoxolide,isolated from D. ferox. The products were incorporated to the diet oflarvae and adults or topically applied to adults. Significant developmentdelay from larva to adult of T. castaneum was produced by A, C, G andwithaferoxolide, the best results corresponding to A and G, which alsocaused lethal effects. Significant development delay from larva to adult of M. domestica was produced by A, while application of A, C and G resultedin mortality, being G the most active compound. Similar sublethal effectswere observed when poor nutritional diets without withanolides wereoffered as food. When salpichrolide A was applied in treatments to adultsthe permanence of T. castaneum in the proximity of food was avoided,producing in this way feeding inhibition. Similar lethal and sublethaleffects with some of the chemically modified analogs were also observed. These results suggests that biological activity may be due to a feedant:deterrant effect. Fil: Mareggiani, Graciela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina.