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10 páginas, 1 tabla, 4 figuras, A laboratory experiment was carried out to investigate the response of the microbial communities in acid agricultural soils located in the NW Iberian Peninsula to the presence of clarithromycin. Four soils, with different organic C content and similar pH, and seven different concentrations of clarithromycin (0.49, 1.95, 7.81, 31.25, 125, 500 and 2,000 mg kg−1 of soil) were used, and microbial estimates were made after 8 and 42 incubation days. The phospholipid fatty acids (PLFA) technique was used to estimate the total microbial biomass and biomass of specific microbial groups as well as the microbial community structure (PLFA pattern). The microbial biomass (total and specific groups) was different in the four studied soils, the lowest values being exhibited by soils with the lowest organic C. The antibiotic addition showed a positive effect on microbial biomass (total and specific groups), especially at the highest dose; the effect being similar or even more accentuated with time passed after the addition (42 days ≥8 days). Principal component analysis (PCA) of the PLFA data carried out with the whole data set showed that the main determining factors of the microbial structure followed the order: soil > time incubation ≥ antibiotic dose. When the PCA was performed individually for each incubation time, the results indicated that microbial communities of the four soils were different. Likewise, for each soil, different microbial communities were observed depending on antibiotic concentration. The microbial biomass and PLFA pattern data were coincidentally showing that the clarithromycin addition favored fungi and G− bacteria more that bacteria and G+ bacteria; the effect being dose-dependent. Our data (microbial biomass, PLFA pattern) also demonstrated that the effect of clarithromycin addition on microbial communities in these four acid agricultural soils persisted even after 42 incubation days., This study has been funded by the Spanish Ministry of Science, Innovation and Universities through the projects RTI2018-099574-B-C21 and RTI2018-099574-B-C22 (FEDER Funds). VS-M holds a postdoctoral fellowship (ED481B-2022-081) financed by Xunta de Galicia. LR-G hold a pre-doctoral fellowship (FPU21/04206) financed by Spanish Ministry of Universities. Funding for open access charge: Universidade de Vigo/CISUG

[ES] A lo largo de la Tesis Doctoral se han seguido diferentes aproximaciones para estudiar TCS de S. coelicolor implicados en la producción de antibióticos de cara a su aplicación biotecnológica. Resulta esencial tanto terminar de esclarecer las cascadas de señalización de sistemas ya descritos, como identificar y caracterizar sistemas que no hayan sido estudiados previamente, de cara a completar el complejo entramado regulatorio que presenta este organismo. Así mismo, el desarrollo de nuevas herramientas metodológicas para el estudio de estos sistemas es fundamental para facilitar y ampliar las futuras investigaciones. Los objetivos de este trabajo fueron: 1. Caracterizar el papel fisiológico del Sistema de Dos Componentes SCO2165/66 (abrB1/B2) de Streptomyces coelicolor y su implicación en la producción de antibióticos. 2. Identificar los genes diana del Regulador de Respuesta huérfano Aor1 (SCO2281) de Streptomyces coelicolor. 3. Diseñar y construir una plataforma para la identificación de las señales de activación de las Histidina Quinasas en Streptomyces. Las conclusiones del trabajo son: CAPÍTULO 1. El Sistema de Dos Componentes AbrB1/B2 • El Sistema de Dos Componentes AbrB1/B2, constituido por los genes SCO2165/66 de Streptomyces coelicolor, se encuentra muy conservado en las bacterias del género Streptomyces. • El sistema AbrB1/B2 es un regulador negativo de la producción de los antibióticos actinorrodina y undecilprodigiosina, y no está implicado en la regulación del crecimiento ni el desarrollo morfológico. Este sistema parece actuar a través de la represión de los reguladores positivos de la producción de antibióticos EcrA1/A2 y ScbR2. • El sistema AbrB1/B2 es un regulador positivo de la resistencia a vancomicina, lo que da lugar a alteraciones en diversos procesos metabólicos y de respuesta a estrés; además, es homólogo de VraR/S (Staphylococcus aureus) y LiaR/S (Enterococcus faecium), implicados en la respuesta a daño en la pared celular. • La cepa de Streptomyces coelicolor en la que se ha delecionado AbrB1/B2 presenta ventajas sobre la cepa silvestre para la expresión de rutas heterólogas de antibióticos y antitumorales como lo demuestra el hecho de la mayor expresión de las rutas de oviedomicina y mitramicina en la cepa mutante. • La obtención de un mutante de Streptomyces coelicolor en los dos Sistemas de Dos Componentes AbrA1/A2 y AbrB1/B2 demuestra que, a nivel fenotípico, la mutación AbrB1/B2 predomina sobre la de AbrA1/A2. CAPÍTULO 2. El Regulador de Respuesta huérfano Aor1 • El Regulador de Respuesta huérfano Aor1 se produce en Streptomyces coelicolor principalmente al final de la fase exponencial de crecimiento (36 horas) y su sobreexpresión con distintas etiquetas en el extremo amino-terminal resulta tóxica. • Aun disponiendo de anticuerpos específicos frente a Aor1, no se ha podido completar la identificación de las secuencias diana de Aor1 por ChIP-Seq debido a problemas en el proceso de inmunoprecipitación. CAPÍTULO 3. Plataforma HKASP • Se ha completado el diseño y construcción de una plataforma para la identificación de las señales de activación de las distintas Histidina Quinasas en Streptomyces. Sin embargo, no se ha podido completar su validación durante la realización de este trabajo.

[ES] Se plantea que casi la mitad de los pacientes hospitalizados reciben antibióticos y hasta en un 50 % su uso es innecesario o inapropiado, lo que se traduce en una elevada frecuencia de DRP asociados al uso de antibióticos que no solo genera complicaciones en el paciente, sino que también, favorece la resistencia microbiana, conduciendo a que los costes institucionales se eleven de forma innecesaria. En relación a esta problemática, diferentes investigaciones a nivel internacional resaltan el importante papel que ha jugado el farmacéutico clínico en la prevención, identificación y resolución de los DRP incluidos aquellos asociados al uso inadecuado de antibióticos en la PAP. El objetivo general es evaluar la utilización de antibióticos en pacientes sometidas a procedimientos quirúrgicos gineco-obstétricos en el Hospital General Ambato de Ecuador y proponer protocolos de uso de profilaxis antibiótica preoperatoria acordes a las recomendaciones locales e internacionales actuales. Los objetivos específicos son: Conocer las estrategias actuales de uso de la profilaxis antibiótica preoperatoria en procedimientos quirúrgicos gineco-obstétricos; Analizar el cumplimiento de las recomendaciones nacionales e internacionales de uso de la profilaxis antibiótica preoperatoria; Estudiar la influencia de distintas variables en la adherencia a las citadas recomendaciones y en la aparición de infección de la herida quirúrgica; Identificar y categorizar los problemas relacionados con el uso de antibióticos en las pacientes estudiadas y las causas de los mismos; Estimar el coste asociado al uso inadecuado de antibióticos en las pacientes estudiadas; y proponer un protocolo de profilaxis antibiótica preoperatoria para procedimientos quirúrgicos gineco-obstétricos en el Hospital General Ambato.

207 [ES] La resistencia a los antimicrobianos es una amenaza global para la salud pública y el medioambiente derivada del uso prolongado y frecuentemente inadecuado de antibióticos en medicina humana y veterinaria. En producción animal se han descrito diversos factores que pueden repercutir en el uso de antibióticos y, en consecuencia, en las resistencias, entre los que destacan el sistema de producción y las medidas de bioseguridad implementadas en la granja. En este sentido, las producciones de cerdo ibérico ecológica y extensiva se basan en sistemas de cría sostenibles y respetuosos con el entorno, constituyendo una excelente oportunidad para evaluar cómo las diferencias sostenidas de las distintas formas de uso de antibióticos repercuten en las resistencias antimicrobianas, no solo en los animales, sino también en el ambiente de la granja. El objetivo general de la presente tesis doctoral es ofrecer una descripción exhaustiva de las resistencias antimicrobianas en la producción porcina española, tanto en granjas intensivas como en las de producción ecológica-extensiva. Los estudios realizados se desarrollan en cuatro capítulos que abordan la evaluación del potencial de los microorganismos centinela en la monitorización de resistencias a los antimicrobianos y la caracterización genómica y metagenómica del resistoma y del mobiloma de las explotaciones porcinas. Las bacterias centinela recuperadas de granjas de producción ecológica-extensiva presentaron de forma sistemática menores resistencias antimicrobianas que aquellas procedentes de explotaciones porcinas intensivas, siendo el uso de antibióticos el factor más influyente. Además, aunque no se observó una relación directa entre el uso de antibióticos y la bioseguridad en las granjas, ciertas medidas, como la aplicación de protocolos de limpieza y desinfección adecuados, tuvieron un impacto aparente en la reducción de resistencias en Escherichia coli y Enterococcus spp. de granjas intensivas. La combinación de la caracterización fenotípica y genotípica de las resistencias antimicrobianas demostró el potencial de Escherichia coli, Enterococcus spp. y Staphylococcus spp. en la monitorización de resistencias en porcino, ya que estas bacterias resultaron ser importantes reservorios de determinantes de resistencia potencialmente movilizables. La vigilancia de las resistencias en Campylobacter coli también se demostró útil, pese a portar un menor número de determinantes de resistencia en su genoma. Por el contrario, los resultados de Salmonella enterica indicaron que no es un buen indicador de resistencia en estas granjas debido a su presencia esporádica en porcino y que su resistencia a los antimicrobianos está condicionada por el serotipo. El estudio genómico de las bacterias centinela demostró que la estructura tanto del resistoma como del mobiloma dependía del taxón, con mayores similitudes entre aquellas bacterias más relacionadas filogenéticamente. Este hecho fue corroborado en el estudio metagenómico, donde se observó que la composición del resistoma estaba primariamente asociada al tipo de muestra debido a cambios en las poblaciones bacterianas predominantes en cada nicho biológico. Por último, tanto el abordaje genómico como el metagenómico revelaron una clara interacción del resistoma y el mobiloma, la cual era más compleja en las granjas intensivas. En conjunto, esta tesis doctoral demuestra que el desarrollo de resistencias a los antimicrobianos está fuertemente ligado a los elementos genéticos móviles y al uso de antimicrobianos. [EN] Antimicrobial resistance is a global threat to public health and the environment derived from the prolonged and often inappropriate use of antimicrobials in human and veterinary medicine. In food-producing animals, several factors have been described that may have an impact on the use of antimicrobials and, consequently, on antimicrobial resistance, among which we can highlight the production system and the biosecurity measures implemented on the farm. In this sense, organic and extensive Iberian pig productions are based on sustainable and eco-friendly farming systems, providing an excellent opportunity to evaluate how sustained differences in the various forms of antimicrobial use impact antimicrobial resistance, not only in the animals, but also in the farm environment. The general objective of this doctoral thesis is to provide an in-depth characterization of antimicrobial resistance in Spanish swine production, both on intensive and organic-extensive farms. The studies carried out are developed in four chapters that address the evaluation of the potential of sentinel microorganisms in the monitoring of antimicrobial resistance and the genomic and metagenomic characterization of the resistome and mobilome of pig farms. Sentinel bacteria recovered from organic-extensive farms consistently showed lower antimicrobial resistance than those from intensive pig herds, with antimicrobial use as the most influential factor. In addition, although no direct relationship was observed between antimicrobial use and on-farm biosecurity, certain measures, such as the application of standardized cleaning and disinfection protocols, had an apparent impact on the reduction of antimicrobial resistance in Escherichia coli and Enterococcus spp. recovered from intensive pig herds. The combination of phenotypic and genotypic characterization of antimicrobial resistance demonstrated the potential of Escherichia coli, Enterococcus spp. and Staphylococcus spp. as sentinel microorganisms for antimicrobial resistance surveillance in swine, as these bacteria emerged as important reservoirs of potentially mobilizable antimicrobial resistance determinants. Likewise, antimicrobial resistance monitoring in Campylobacter coli proved to be useful even though this species harbored a reduced number of antimicrobial resistance determinants in its genome. In contrast, Salmonella enterica was not a good bioindicator due to its sporadic presence in swine production and the serotype-biased antimicrobial resistance. The genomic study of sentinel bacteria evidenced that the structure of both the resistome and mobilome was taxon-dependent, with greater similarities among those bacteria more phylogenetically related. This fact was corroborated in the metagenomic study, in which it was observed that the composition of the resistome was primarily determined by the type of sample due to changes in the predominant bacterial populations in each microecosystem. Finally, both genomic and metagenomic approaches revealed a clear interaction of the resistome and the mobilome, which was more complex on intensive farms. Overall, this doctoral thesis demonstrates that the development of antimicrobial resistance is strongly associated with mobile genetic elements and antimicrobial use.

Financiado para publicación en acceso aberto: Universidade de Vigo/CISUG Background: Antibiotic resistance is one of the current threats to human health, forcing the use of drugs that are more noxious, costlier, and with low efficiency. There are several causes behind antibiotic resistance, including over-prescription of antibiotics in both humans and livestock. In this scenario, researchers are shifting to new alternatives to fight back this concerning situation. Scope and approach: Nanoparticles have emerged as new tools that can be used to combat deadly bacterial infections directly or indirectly to overcome antibiotic resistance. Although nanoparticles are being used in the pharmaceutical industry, there is a constant concern about their toxicity toward human health because of the involvement of well-known toxic chemicals (i.e., sodium/potassium borohydride) making their use very risky for eukaryotic cells. Key findings and conclusions: Multiple nanoparticle-based approaches to counter bacterial infections, providing crucial insight into the design of elements that play critical roles in the creation of antimicrobial nanotherapeutic drugs, are currently underway. In this context, plant-based nanoparticles will be less toxic than many other forms, which constitute promising candidates to avoid widespread damage to the microbiome associated with current practices. This article aims to review the actual knowledge on plant-based nanoparticle products for antibiotic resistance and the possible replacement of antibiotics to treat multidrug-resistant bacterial infections. Xunta de Galicia | Ref. ED431F 2020/12 Xunta de Galicia | Ref. ED481A 2021/313 Ministerio de Ciencia, Innovación y Universidades | Ref. RYC-2017-22891

Funding Information: The author V.T. would like to thank the Department of Science and Technology (DST), Science and Engineering Research Board (SERB), Government of India (file no ECR/2017/001809) for financial support. Publisher Copyright: © 2021 by the authors. Copyright: Copyright 2021 Elsevier B.V., All rights reserved. The disposal of municipal solid waste (MSW) directly at landfills or open dump areas, without segregation and treatment, is a significant concern due to its hazardous contents of antibioticresistant bacteria (ARB), antibiotic resistance genes (ARGs), and metal resistance genes (MGEs). The released leachate from landfills greatly effects the soil physicochemical, biological, and groundwater properties associated with agricultural activity and human health. The abundance of ARB, ARGs, and MGEs have been reported worldwide, including MSW landfill sites, animal husbandry, wastewater, groundwater, soil, and aerosol. This review elucidates the occurrence and abundance of ARB, ARGs, and MRGs, which are regarded as emerging contaminants (ECs). Recently, ECs have received global attention because of their prevalence in leachate as a substantial threat to environmental and public health, including an economic burden for developing nations. The present review exclusively discusses the demands to develop a novel eco-friendly management strategy to combat these global issues. This review also gives an intrinsic discussion about the insights of different aspects of environmental and public health concerns caused due to massive leachate generation, the abundance of antibiotics resistance (AR), and the effects of released leachate on the various environmental reservoirs and human health. Furthermore, the current review throws light on the source and fate of different ECs of landfill leachate and their possible impact on the nearby environments (groundwater, surface water, and soil) affecting human health. The present review strongly suggests the demand for future research focuses on the advancement of the removal efficiency of contaminants with the improvement of relevant landfill management to reduce the potential effects of disposable waste. We propose the necessity of the identification and monitoring of potential environmental and human health risks associated with landfill leachate contaminants.

Los antibióticos veterinarios se utilizan extensamente a nivel mundial como agentes terapéuticos y como promotores del crecimiento en la ganadería intensiva. Entre un 30 y un 80 % de los mismos son excretados a través de orina y heces, acumulándose en estiércoles y purines que, al ser aplicados al suelo, pasan al medio natural. Para estimar el destino de los antibióticos y su comportamiento en el medio ambiente resulta necesario conocer su dinámica en el suelo, que depende tanto de las características del antibiótico como de las propiedades del suelo. En muchas regiones este problema no fue suficientemente abordado, como es el caso de Galicia, donde la actividad agrícola y ganadera tiene mucho peso. Por lo tanto, el principal objetivo de este proyecto de Tesis es conocer la dinámica de antibióticos (Tetraciclinas y Sulfonamidas) en suelos de cultivo y en praderías que reciben purines en diferentes zonas agrícolas de Galicia. Para esto, se estudiarán los principales procesos que afectan a la dinámica de estos compuestos en el suelo: adsorción y desorción, transporte, fotodegradación, biodegradación y degradación química. El conocimiento de estos procesos permitirá identificar áreas de alto riesgo de contaminación por dichos compuestos y valorar medidas para reducir su concentración en los suelos y evitar su paso a la cadena alimentaria y a las aguas. Os antibióticos veterinarios empréganse extensamente a nivel mundial como axentes terapéuticos e como promotores do crecemento na gandería intensiva. Entre un 30 e un 80 % dos mesmos son excretados a través de urina e feces, acumulándose en estercos e xurros que, ó ser aplicados ó solo, pasan ó medio natural. Para estimar o destino dos antibióticos e o seu comportamento no medio ambiente resulta necesario coñecer a súa dinámica no solo, que depende tanto das características do antibiótico como das propiedades do solo. En moitas rexións este problema non foi suficientemente abordado, como é o caso de Galiza, onde a actividade agrícola e gandeira ten moito peso. Polo tanto, o principal obxectivo deste proxecto de Tese é coñecer a dinámica de antibióticos (Tetraciclinas e Sulfonamidas) en solos de cultivo e en pradarías que reciben xurros en diferentes zonas agrícolas de Galiza. Para isto, estudaranse os principais procesos que afectan á dinámica destes compostos no solo: adsorción e desorción, transporte, fotodegradación, biodegradación e degradación química. O coñecemento destes procesos permitirá identificar áreas de alto risco de contaminación por ditos compostos e valorar medidas para reducir a súa concentración nos solos e evitar o seu paso á cadea alimentaria e ás augas. Veterinary antibiotics are widely used as therapeutic agents and promoters of growth in intensive animal husbandry. Between 30 and 80 % of them are excreted through urine and feces, accumulating in manures that, when applied to the soil, pass into the natural environment. To determine the fate of antibiotics and their behavior in the environment, it is necessary to know their dynamics in the soil, which depends both on the characteristics of the antibiotic and soil properties. In many regions this problem has not been sufficiently addressed, as is the case of Galicia, where the agricultural and livestock activities are very important. Therefore, the main objective of this Ph.D. thesis project is to understand the dynamics of two groups of antibiotics (Tetracyclines and Sulfonamides) in agricultural soils and pastures receiving animal manures. For this, the main processes that affect the dynamics of these compounds in the soil will be studied: adsorption and desorption, transport, photodegradation, biodegradation and chemical degradation. Knowledge of these processes will allow the identification of areas with high-risk of contamination by these compounds and assessment of measures to reduce their concentration in soils and prevent their transfer into the food chain and waters. Ministerio de Economía y Competitividad (España) | Ref. CGL2015-67333-C2-2-R Ministerio de Economía y Competitividad (España) | Ref. CGL2015-67333-C2-1-R Ministerio de Educación, Cultura y Deporte (España) | Ref. FPU15/0280

The increasing concern about bacterial resistance has made the rational prescription of antibiotics even more urgent. The non-pharmacological measures established to reduce the impact of the SARS-CoV-2 pandemic have modified the epidemiology of pediatric infections and, consequently, the use of antibiotics. Interrupted time series (ITS) analyses are quasi-experimental studies that allow for the estimation of causal effects with observational data in “natural experiments”, such as changes in health policies or pandemics. The effect of the SARS-CoV-2 pandemic on the incidence of infectious diseases and the use of antibiotics between 2018 and 2020 in the Health Area of Vigo (Galicia, Spain) was quantified and analyzed. This paper outlines a real-world data study with administrative records from primary care services provided for the pediatric population. The records were related to episodes classified as infectious by the International Classification of Primary Care (ICPC-2) and oral medication in the therapeutic subgroup J01, corresponding to antibiotics for systemic use, according to the World Health Organization’s Anatomical Therapeutic Chemical (ATC) classification system. The records were classified according to incident episodes, age, dose per inhabitant, and year. Segmented regression models were applied using an algorithm that automatically identifies the number and position of the change points. During the SARS-CoV-2 pandemic, the number of infectious diseases being transmitted between individuals, through the air and through the fecal–oral route, significantly decreased, and a slight decrease in infections transmitted via other mechanisms (urinary tract infections) was also found. In parallel, during the months of the pandemic, there has been a marked and significant reduction in antibacterial agent utilization, mainly of penicillins, cephalosporins, and macrolides. ISCIII Network for Research on Chronicity, Primary Care, and Health Promotion | Ref. RD21/0016/0022

Memoria ID-036. Ayudas de la Universidad de Salamanca para la innovación docente, curso 2019-2020., [ES]Los objetivos generales fueron compaginar el aprendizaje de nuestros alumnos con su contribución activa en resolver un problema actual y acuciante de la salud como es la resistencia a antibióticos, actuando en colaboración con otros agentes de la sociedad como son los alumnos de Secundaria y Bachillerato, y fomentar la vocación científica.

Debido al mal uso de los antimicrobianos, y a la falta de nuevos fármacos, nos encontramos ante una crisis mundial que cada vez preocupa más en el ámbito sanitario: La aparición de microorganismos multirresistentes. Esta preocupación es mayor aún en las Unidades de Cuidados Intensivos, dado el tipo de paciente que se maneja, por lo que a finales de los años 90 se ideó un método para combatir y disminuir esta tendencia a las resistencias de los antimicrobianos. Este método se llamó Programa de Optimización del uso de Antibióticos, también llamado PROA. El programa consiste en la formación de un equipo formado por profesionales de distintas especialidades, los cuales se reúnen periódicamente para discutir e intentar realizar un mejor tratamiento dirigido a los pacientes que precisen tratamiento antimicrobiano. Nuestro estudio consiste en la instauración de un equipo PROA en una Unidad de Cuidados Intensivos de un hospital de tercer nivel, recogiendo y luego analizando los datos de pacientes durante el transcurso de un año. A lo largo del estudio se realizaron 230 intervenciones sobre 110 pacientes, siendo ampliamente aceptadas por la unidad, además, se redujo de forma significativa tanto el consumo de antibióticos como el gasto asociado a ellos., Grado en Medicina

This work examines the results of a soil incubation experiment in the laboratory, under controlled conditions of humidity and temperature. The purpose was to determine the medium-term influence of the presence of antibiotics on the total and specific microbial biomass, determined by means of the phospholipid fatty acids (PLFAs) analysis (total microbial biomass, and specific fungal, bacterial, actinobacterial, Gram-negative bacterial and Gram-positive bacterial biomass), as well as the relationship between some of these groups (fungal biomass/bacterial biomass, Gram-negative-bacterial /Gram-positive bacterial). The experiment was performed with four different cultivated soils with a similar pH but different organic matter (OM) content, to which eight doses of three antibiotics of the tetracycline group (tetracycline, oxytetracycline and chlorotetracycline) were added. Microbial biomass measurements (total and specific groups) were performed after 42 days of incubation. As expected, the total and specific microbial biomass values were different in the four soils studied. Both the total and the specific microbial biomass showed a similar response to the presence of antibiotics, although in several cases the data were inconsistent and difficult to interpret. In general, in all soils the addition of chlorotetracycline and tetracycline slightly modified or increased, to a greater or lesser extent, the values of both total and specific microbial biomass, particularly at higher doses. However, in certain cases, biomass values decreased due to the addition of the highest dose of oxytetracycline. With regard to fungal/bacterial and Grambacteria/Gram bacterial biomass ratios, values slightly changed after the addition of the antibiotics. [ES] En este trabajo se examinan los resultados de una experiencia de incubación de suelos en el laboratorio, bajo condiciones controladas de humedad y temperatura, cuya finalidad fue determinar la influencia a medio plazo de la presencia de antibióticos en la biomasa microbiana total y específica, establecida a partir de los ácidos grasos de los fosfolípidos (biomasa microbiana total, biomasa fúngica, bacteriana, de actinobacterias, de bacterias Gramnegativas y de bacterias Gram-positivas) y de la relación entre algunos de estos grupos (hongos/bacterias, bacterias Gram-negativas/bacterias Gram-positivas). La experiencia se realizó con cuatro suelos de cultivo diferentes con un pH similar y con un diferente contenido de materia orgánica, a los que se aplicaron 8 dosis de tres antibióticos del grupo de las tetraciclinas (tetraciclina, oxitetraciclina y clorotetraciclina). Las medidas de biomasa microbiana (total y grupos específicos) se realizaron después de 42 días de incubación. Tal como era de esperar, los valores de la biomasa microbiana total y específica fueron diferentes en los cuatro suelos estudiados. Tanto la biomasa microbiana total como la específica mostraron una respuesta similar frente a la presencia de los antibióticos, aunque en varios casos los datos fueron inconsistentes y difíciles de interpretar. En general, en todos los suelos la adición de la clorotetraciclina y la tetraciclina modificó o incrementó en mayor o menor medida los valores tanto de la biomasa microbiana total e específica, particularmente a las dosis más altas. Sin embargo, en determinados casos, como consecuencia de la adición de la dosis más alta de oxitetraciclina, los valores de biomasa disminuyeron. En lo que respecta a las relaciones biomasa fúngica/bacteriana y biomasa bacterias Gram-positivas/bacterias Gram-negativas, los valores apenas variaron tras la adición de los antibióticos. [PT] Este artigo examina os resultados de uma experiência de incubação do solo em laboratório, sob condições controladas de humidade e temperatura. O objetivo foi determinar a influência, a médio prazo, da presença de antibióticos na biomassa microbiana total e em grupos específicos de microrganismos, a partir da análise de ácidos gordos fosfolipídicos (biomassa microbiana total, biomassa fúngica, biomassa bacteriana e de actinobactérias, e de biomassa de bactérias Gram-negativas e de bactérias Gram-positivas), assim como a relação entre alguns desses grupos (biomassa fúngica/biomassa bacteriana, bactérias Gram-negativas/bactérias Gram-positivas). A experiência foi realizada com quatro solos cultivados diferentes, com pH semelhante e com um conteúdo diferente de matéria orgânica, aos quais foram aplicadas oito doses de três antibióticos do grupo das tetraciclinas (tetraciclina, oxitetraciclina e clorotetraciclina). As determinações de biomassa microbiana (total e grupos específicos) foram realizadas após 42 dias de incubação. Como esperado, os valores da biomassa microbiana total e específica foram diferentes nos quatro solos estudados. Tanto a biomassa total como a específica mostraram uma resposta semelhante à presença de antibióticos, embora em vários casos os dados sejam inconsistentes e difíceis de interpretar. Em geral, em todos os solos, a adição de clorotetraciclina e tetraciclina modificou ou aumentou, em maior ou menor grau, os valores da biomassa microbiana total e específica, particularmente nas doses mais altas. Contudo, em certos casos, como resultado da adição de uma dose mais alta de oxitetraciclina, os valores de biomassa diminuíram. Em relação às razões biomassa fúngica/biomassa bacteriana e biomassa de bactérias Gram-negativas/biomassa de bactérias Gram-positivas, os valores variaram ligeiramente após a adição de antibiótico. Spanish Ministry of Economy and Competitiveness through the projects CGL2015-67333-C2-1-R and -2-R (FEDER Funds)

275 p. La proteína ABCG2/BCRP es un transportador de todo tipo de sustancias que se expresa en multitud de tejidos y órganos como el hígado, el intestino, la barrera hematoencefálica y la glándula mamaria). La presente memoria tiene como objetivo principal la caracterización del efecto del polimorfismo bovino Y581S in vivo así como la determinación de los efectos de dietas específicas sobre la secreción en leche de fármacos mediada por ABCG2 de rumiantes.Los estudios concluyeron que el polimorfismo bovino Y581S de ABCG2 tiene efectos específicos sobre propiedades fisicoquímicas de la leche como la conductividad y la cantidad de lactosa. También se observaron efectos generales sobre la metabolómica de las vacas portadoras del polimorfismo, aumentando la concentración de ciertos metabolitos en leche y orina y reduciéndose en plasma. Los resultados obtenidos en la presente memoria aportan información relevante acerca del papel de ABCG2 en la concentración de fármacos y compuestos naturales en la leche, así como la posibilidad de modular su actividad para obtener productos de mayor calidad para la industria y los consumidores.

Memoria presentada por D. Sergio Rico García para optar al grado de Doctor por la Universidad de Salamanca., La producción de antibióticos en bacterias del género Streptomyces es un proceso que responde a múltiples señales y se encuentra estrictamente regulado a distintos niveles. Los Sistemas de Dos Componentes (TCS) son las principales vías de transducción de señales en estos microorganismos, al igual que en el resto de las bacterias, y están formados por una Histidina Quinasa sensora (HK) y un Regulador de Respuesta (RR). El sistema AbrC1/C2/C3 de Streptomyces coelicolor es un TCS conservado y atípico, formado por dos HKs (AbrC1 y AbrC2) y un RR (AbrC3), y que está involucrado en la regulación positiva de la producción de los antibióticos actinorrodina (ACT), undecilprodiginina (RED) y el antibiótico dependiente de calcio (CDA) y también de la diferenciación morfológica. El objetivo de esta tesis ha sido estudiar la relevancia del RR AbrC3 en la producción de antibióticos de forma independiente a las HKs del sistema en S. coelicolor. El análisis fenotípico del mutante carente de abrC3 ha mostrado que esta cepa, al igual que el triple mutante de todo el sistema, produce menor cantidad de ACT y RED, pero no de CDA y la diferenciación morfológica también se encuentra retrasada. Estudios de transcriptómica, realizados mediante microarrays, han detectado la subexpresión de la mayoría de los genes del cluster de la ACT en el mutante que carece del gen abrC3. Entre ellos actII-ORF4, el activador final de la expresión del cluster. Otros genes subexpresados relacionados con el metabolismo primario son acdH y rplP, con el metabolismo secundario como absR1, afsS y sIHF y con la diferenciación morfológica como bdtA y wblE. Entre los genes regulados negativamente por AbrC3 se encuentra rplP, codificante de la proteína ribosomal L16 de la subunidad 50S., Ensayos ChiP-chip y ensayos de retardo en gel (EMSAs) permitieron identificar in vivo los genes cuya expresión se encuentran directamente regulada por el RR. Los resultados han mostrado que AbrC3 reconoce la secuencia de diez nucleótidos 5-GAASGSGRMS-3 en los genes cuya expresión regula como actII-ORF4, abrC3, absR1, SCO0736, bfr, bdtA y SCO6809. Además, la sobreexpresión de abrC3 en bajo número de copias ha mostrado un efecto inductor de la producción de ACT en S. coelicolor y S. lividans, y en S. argillaceus estimula la síntesis de metabolitos secundarios no identificados. Ensayos de sobreexpresión de abrC3 en alto número de copias y de complementación de la cepa mutante triple han mostrado que AbrC2 presenta mayor actividad que AbrC1 a la hora de fosforilar a AbrC3. Por último, para continuar estudiando la cascada de señalización en la que interviene el TCS AbrC1/C2/C3 se han construido las cepas mutantes de algunos reguladores relacionados con el sistema como el RR huérfano Aor1 y el factor de transcripción AbsR1, siendo un activador y un represor respectivamente, de la síntesis de antibióticos y de la diferenciación morfológica

La utilización inadecuada, las resistencias bacterianas y la disminución en la síntesis de nuevas moléculas antiinfeccionsas marcan la problemática actual de la terapia antibiótica. Las diferentes estrategias para la optimización del uso antibiótico cobran especial relevancia en los pacientes con insuficiencia renal, un grupo de especial riesgo dado que los medicamentos en su organismo presentan un comportamiento farmacodinámico y farmacocinético distinto al resto de la población. Estudios recientes reflejan la edad avanzada, los problemas cardiovasculares y la diabetes están ínitmamente ligadas a la insfuciencia renal, por lo que en general estos enfermos son de avanzada edad, pluripatológicos y de número creciente de sociedades desarrolladas. Esta tesis doctoral evalúa la eficacia de un programa de atención farmacéutica como parte integradora de los equipos multidisciplinares que actualmente prestan labor asistencial a los pacientes con insuficiencia renal. La evolución clínica de los pacientes, la duración de la estancia hospitalaria y los costes económicos son los principales aspectos de análisis durante la fase de tratamiento antibiótico a la que se ven sometidos estos pacientes. El estudio se ha basado en el seguimiento inidvidualizado por parte del especialista en Farmacia Hospitalaria de un total de 477 pacientes durante 18 meses.Dentro del programa diseñado, se han realizado ajustes del tratamiento relacionados con la indicación, eficacia y la seguridad, tales como ajustes en la dosificación, reacciones adversas, interacciones con otros medicamentos, cambios en la vía de la administración, etc. Los resultados de los análisis microbiológicos fueron una herramiento fundamental para el farmacéutico en asesoramiento y recomendaciones farmacológicas efectuadas al equipo médico. Los pacientes ingresados en este programa presentaron en conjunto una evolución clímica más favorable, con menos recaídas y reingresos, además de reducir su estancia hospitalaria en dos días de media. Esta evolución favorable se acompaña de un imipacto económico positivo, con un ahorro medio de unos 1000€ por paciente, una vez restados los costes de implantación.

203 p. Se ha determinado la concentración de flumequina en plasma, pared del colon y contenido intestinal en cerdos tras la administración de una formulación de flumequina de uso veterinario a la dosis de 12 mg/kg en el agua de bebida durante 5 días. Previamente, y para ello, se han validado tres métodos analíticos para la determinación y cuantificación de la flumequina en plasma, contenido intestinal y pared intestinal de cerdo siguiendo las normas establecidas en la Guía EMEA/CHMP/EWP/192217/2009, en un rango de concentraciones que van de 0,5 µg/mL a 10 µg/mL. Los métodos cumplen con los parámetros de calidad representados por: selectividad, arrastre, límite inferior de cuantificación (LLOQ), linealidad, reproductibilidad y precisión y estabilidad establecidos en dicha guía. Tras la administración de flumequina a cerdos no se alcanzaron concentraciones cuantificables de flumequina ni en plasma ni en pared intestinal de colon a los 3, 6 y 7 días del estudio. En el caso del contenido intestinal, las concentraciones de flumequina oscilaron entre 0,944 y 2,837 µg/g en colon descendente, y entre 0,952 y 1,646 µg/g en colon trasverso en los días 3 y 6 tras la primera administración, no observándose niveles cuantificables en el colon ascendente. No se alcanzaron concentraciones cuantificables de flumequina a los 7 días del estudio en ninguno de los tramos del colon analizados.