Search

The goal of this retrospective cohort study was to compare survival, implantation, clinical and ongoing pregnancy rates between blastocysts that were vitrified on post-fertilization days 5, 6 and 7. Before vitrification, blastocysts were evaluated in terms of morphology and blastocyst expansion, inner cell mass and trophectoderm quality. They were thawed and transfered in a subsequent artificial cycle. Embryo implantation rates were 39%, 25% and 25% for blastocysts that were vitrified on days 5, 6, and 7, respectively (p = 0.006). Clinical and ongoing pregnancy rates were 19%, 12%, 13% (p = 0.100) and 9%, 7%, 12% (p = 0.99) for days 5, 6 and 7 blastocysts, respectively. Day 5 blastocysts had significantly higher full-collapsing score after assisted-hatching compared to days 6 and 7 blastocysts (p = 0.014). As blastocyst quality increased, implantation and clinical pregnancy rates increased in all groups and both parameters were statistically significantly higher on day 5 blastocysts than on days 6 or 7 (p = 0.001). It was clearly found that good quality blastocysts obtained on day 5 have higher implantation and clinical pregnancy rates than 6th and 7th day cryopreserved embryos. There were no statistically significant differences between the cryopreserved embryos on days 6 and 7 regarding the implantation, clinic and ongoing pregnancy rates.

Today, morphological parameters of blastocyst that determine live birth, chances of pregnancy and implantation are still controversial. The relationship between morphological parameters of embryo and clinical outcomes after embryo transfer is not yet fully understood and there is no consensus. In our study, we aimed to evaluate the effectiveness of some quantitative morphologic parameters (blastocyst and blastocyte diameter and area, trophectoderm cell number and inner cell mass area) that could be utilized objectively in selecting good quality embryos for implantation and clinical outcome. The main finding of our study was that the rate of ongoing implantation and clinical pregnancy was associated with embryo quality score; blastocyst area/diameter; blastosol area/diameter and the number of TE cells. The results showed that the ICM area/diameter, ICM roundness index and ZP thickness were not effective on clinical pregnancy rates., Günümüzde canlı doğum, gebelik şansı ve implantasyon oranını belirleyici blastosist morfolojik parametreleri halen tartışmalıdır. Embriyo morfolojik parametreleri ile transferi sonrası klinik sonuçlar arasındaki ilişki henüz tam olarak anlaşılamamış ve fikir birliği oluşmamıştır. Bu amaçla iyi kalite embriyo seçiminde objektif olarak kullanılabilecek kantitatif bazı morfolojik parametrelerin implantasyon ve klinik sonuçları belirlemedeki etkinliğini değerlendirebilmek amacı ile; bu çalışmada blastosist ve blastosöl çevre ve alan hesaplamaları, trofoektoderm (TE) hücre sayısı ve iç hücre kitlesi (ICM) alanının implantasyon üzerine etkileri değerlendirilmiştir. Çalışmanın temel bulgusu blastosist transferi ardından, implantasyon ve sonrasında devam eden klinik gebelik oranının; embriyo kalite skoru, blastosist alan ve çevresi, blastosöl alanı, çevresi ve TE hücre sayısı ile ilişkili olduğudur. Embriyo ICM alan ve çevresi, dairesellik indeksi ve ZP kalınlığının, klinik gebelik oranları üzerinde etkin olmadığı sonucuna varılmıştır.

The integrity of sperm chromatin may play an important role for fertilization success, particularly in ICSI applications. Decreased nuclear chromatin condensation is assessed by using stain and fluorochroms such as aniline blue, acridine orange and chromamycine A3 (CMA3). Aniline blue is a stain that evaluates sperm morphology together with chromatin condensation anomalies. Fluorochroms are suggested that they are the most reliable stain for assessment of correlation between condensation anomalies and fertilization success. There are used different fixation protocols for these staining methods. .In this study, it is aimed to find the most practical and brief fixation protocole for evaluation of chromatin condensation. A total of 5 semen samples prepared by swim-up technic were fixed with Carnoy's solution for 5 minutes at 4ºC or 2 hours at room temperature or 3% glutaraldehite for 20 minutes at room temperature. Aniline blue, acridine orange and CMA3 were applied on slides fixed with different fixatives. No staining quality difference was observed between groups. Our results showed that fixation with Carnoy's solution for 5 minutes at 4ºC is satisfactory for all of the staining methods., Sperm kromatininin bütünlüğü, özellikle ICSI uygulamalarında, fertilizasyon başarısında önemli rol oynar. Nüklear kromatin kondansasyonundaki azalış aniline blue, acridine orange, chromamycine A3 (CMA3) gibi boya ve fluorokromlarla değerlendirilir. Aniline blue, kondansasyon anomalisi ile birlikte morfolojisini de değerlendiren bir boyadır. Fluorokromlar fertilizasyon başarı hızı ile kondansasyon anomalisi arasındaki korelasyonu saptamada en güvenilir boyalar olarak bildirilmiştir. Kısıtlı miktarda olan ICSI materyaline uygulanan bu boyalarda farklı fiksasyon protokolleri uygulanır. Bu çalışmada kromatin kondansasyonunu değerlendirmede uygulanan boyama metotlarında kullanılan en kısa ve pratik fiksasyon protokolünü bulmak amaçlandı. Toplam 5 hastanın swim-up yöntemi ile hazırlanan semen örnekleri Carnoy'un solüsyonunda 4ºC'de 5 dk, oda sıcaklığında 2 saat ve % 3'lük glutaraldehitte 20 dk fikse edildi. Farklı protokollerle fikse edilen preparatlara aniline blue, acridine orange ve CMA3 boyamaları uygulandı. Boyanma kalitesi açısından gruplarda fark görülmedi. Her üç boyamada da Carnoy'un solüsyonunda 4ºC'de 5 dk fiksasyonun yeterli olduğu görüşüne varıldı.

Microwave application is recommended for the fixation of nerve tissue in light microscopic analyses and various neuroanatomical staining methods to increase the quality of the preparation and standardization as well as achieve an economical study concerning the consumed time and chemicals. The purpose of this study is to obtain qualitatively equal preparations by using microwave irradiation in fixation and staining steps of the light microscopic analyses of the myelin in the central nervous system and, by shorthening the preparation time, to achive a concise staining procedure in order to apply on archieve paraffin blocks and to use for the diagnosis of demyelinating diseases in pathology laboratories. The myelinated fibers of rat brain tissue were stained by Weil and Kluver-Barrera methods which are routinely used for myelin staining. The fixation was obtained in 16.5-18.5 minutes in the microwave-group while it takes 2 days in conventional conditions. In the Weil's method the fixation time was shortened to 2 minutes and in Kluver-Barrera's method to 15 minutes. No morphological disturbance was detected due to the time reductions. As the result of the study, it is suggested that, in order to obtain qualified staining in a short time, microwave applications can be used during light microscopic fixation of myelin in the diagnosis of demyelinating diseases as well as for normal myelin staining when the time is limited., Sinir dokusunun ışık mikroskobik fiksasyonunda ve birçok nöroanatomik boyama metotlarında mikrodalga kullanımı, kaliteyi arttırmak, standardizasyonu sağlamak, zaman ve kullanılan kimyasallar açısından ekonomik bir çalışma gerçekleştirmek amacıyla önerilmektedir. Bu çalışmada amaç; santral sinir sisteminde myelinin ışık mikroskobik incelenmesinde fiksasyon ve boyanma aşamalarında mikrodalga ışınımını kullanarak eşit kalitede preparat elde etmek, preparasyon süresini kısaltarak patoloji laboratuvarlarında arşiv parafin bloklarında uygulanabilecek, demyelinizan hastalıkların tanısında kullanılabilecek kısa süreli boyama prosedürünü gerçekleştirmektir. Sıçan beyin dokusu myelinli lifleri, normal myelin boyanmasında kullanılan Weil ve Kluver-Barrera metotları uygulanarak boyandı.Konvansiyonel şartlarda iki gün süren fiksasyon, mikrodalga grubunda 16.5-18.5 dakikada gerçekleşti. Weil metodunda boyama süresi 2 dakikaya, Kluver-Barrera metodunda 15 dakikaya düşürüldü. Süre kısalmalarının yanısıra morfolojik yapıda bozulmaya rastlanılmadı. Çalışmanın sonunda demyelinizan hastalıkların saptanmasında, myelinin ışık mikroskobik fiksasyonunda ve normal myelinin boyanmasında zamanın kısıtlı olduğu durumlarda hem kısa sürede, hem de kaliteli boyanmayı elde etmek amacıyla mikrodalga ışınımının kullanılabileceği düşünüldü.