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Trabajo presentado a la: XXVII Reunión de la Sociedad Española de Anatomía Patológica Veterinaria. (Barcelona, España, 17 al 19 Junio, 2015).

Trabajo presentado en el Euroclay, celebrado en Edimburgo (Escocia), del 5 al 10 de julio de 2015, Quantitative phase analysis (QPA) of clayey materials using X-Ray diffraction data has always been a challenge. While quantitative methods based on Rietveld analysis offer excellent results for non-clay minerals, they become problematic when high crystallochemical and order degree variations are present in the phases, as is the case of most clay minerals. In the summer of 2014, the Spanish Clay Society (Sociedad Española de Arcillas, SEA) proposed a collective QPA experiment to its members. The aim was to compare the results obtained in different clay laboratories studying the same samples by X-Ray diffraction. This comparative study is a starting point for a long-term work focused on the development of an optimized QPA guide for clay minerals adapted to modern equipment and software. The results presented in this talk are those from the 2014 preliminary study in which the 22 participant laboratories analyzed three samples following their own laboratory routines. The only condition was not to use other complementary techniques for the quantification (e.g. IR spectroscopy, thermal or chemical analysis). The samples were mixtures of nearly pure quartz, feldspar, calcite, alunite, and different clays. Clay minerals included two different smectites (with low and high crystallinity), sepiolite, kaolinite and palygorskite. The set of procedures, technical characteristics of the equipment, and software used in each laboratory was very different and, as a consequence, comparison of the results is not straightforward. The results were classified into "Reflecting Powers Method" (RPM) and “Relative Intensity Ratio (RIR) – Rietveld methods” groups. As it is well known RPM is based on the peaks areas while RIR is based on the peak intensities. As expected, a high dispersion of the results was found both globally and per group. At first glance, RPM returned, on average, better approximations to the true composition of the samples. Interestingly that trend was clearer in samples with clay minerals having higher variability in crystallochemistry and crystalline range order.

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/2085207 [EN] This is the first study on the experimental susceptibility of the following species of molluscs: Cernuella (X.) cespitum arigonis, Helicella (H.) itala, Helicella ordunensis, Cochlicella barbara, Cepaea nemoralis and Helix (C.) aspersa, as intermediare hosts for the combination of both C. ocreatus and M. capillaris, pulmonary parasites in ruminants. Furthermore, the larval development of C. ocreatus and N. linearis, the two taken together, has been followed in Cernuella (X.) cespitum arigonis, H. ordunensis and C. nemoralis. Approximately 40 specimens of each of the above-mentioned species of molluscs were infected with the parasites listed. Bearing in mind the results obtained, we believe that while Cernuella (X.) cespitum arigonis, H. ordunensis, C. nemoralis, C. barbara and Helicella (H.) itala are suitable intermediate hosts for the larval combination of C. ocreatus and M. capillaris, the same cannot be said of Helix (C.) aspersa. Likewise, the first 3 species of molluscs quoted are ideal for the joint larval development of C. ocreatus and N. linearis. It seems that double infections favour larval development. [GER] Dies ist die erste Studie zur experimentellen Empfänglichkeit folgender Schneckenarten als Zwischenwirte für die Kombination von C. ocreatus/M. capillaris (Lungenparasiten von Wiederkäuem): Cernuella (X.) cespitum arigonis, Helicella (H.) itala, H. ordunensis, Cochlicella barbara, Cepaea nemoralis und Helix (C.) aspersa. Weiter wurde die kombinierte Larvalentwicklung von C. ocreatus und N. linearis in Cernuella (X.) cespitum arigonis, H. ordunensis und C. nemoralis verfolgt. Etwa 40 Exemplare jeder der genannten Schneckenarten wurde mit den erwähnten Parasitenkombinationen infiziert. Auf Grund der Ergebnisse nehmen wir an, daß Cernuella (X.) cespitum arigonis, H. ordunensis, C. nemoralis, C. barbara und Helicella (H.) itala empfängliche Zwischenwirte für die larvale Kombination von C. ocreatus und M. capillaris sind, während dies für Helix (C.) aspersa nicht zutrifft. Die ersten 3 genannten Schneckenarten sind dabei ideal für die kombinierte Larvalentwicklung von C. ocreatus und N. linearis. Es scheint, daß Doppelinfektionen die Larvalentwicklung begünstigen. This work was supported, in part, by both CAICYT (Project number 142/85) and CSIC (ID-211)

9 pages, 3 tables, 7 figures.--http://cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=8152178, The larval development of Neostrongylus linearis was studies in a total of 1,200 specimens of Cernuella (Xeromagna) cespitum arigonis, infected monthly (throughout one year) with 200 L-I, and kept outdoors under controlled conditions. ln the parasitological study of each mollusc, the degree of development, the percentage of L-III, the total number of larvae (I + II + III)and of L-III, was taken into account, and likewise the d when L-II and L-III first appreared. The development of the infection was optimum between the end of spring and autumn. The percentage and total number of L-III are, generally, related in a positive way to the thermic integral, but an obvious connection with the relative humidity was not observed. It was in the May-September and in the June-August experiments, when the period of staged development from L-I and L-II and from L-II to L-III was the shortest, respectively. There were not statistically significant differences between the mortality rate of the infected molluscs and that of the control snails., This work was supported in part jointly by the CAICYT and CSIC (Project nº 62151-01)

8 pages, 3 tables, 2 figures, [ES] Debido a la frecuencia con que se encuentran en la naturaleza moluscos albergando dos o más especies de Protostrongylidae, se han probado experimentalmente y de forma simultánea con larvas de Muellerius capillaris y Neostrongylus linearis, 6 especies de moluscos Helicidae. Para seguir el desarrollo larvario conjunto de ambos parásitos, se utilizaron sobre 40 moluscos adultos de cada especie, que se mataron seriadamente a partir del 6º día pi. De los resultados obtenidos referentes a las larvas I que penetraron en cada molusco, y las que de ellas prosiguieron a L-ll y L-lll, así como los períodos de tiempo que requirieron para ello, consideramos que el orden de idoneidad de las especies de moluscos probadas, para el desarrollo larvario conjunto de M. capillaris y N. linearis, fue: Cernuella (Xeromagna) cespitum arigonis, Cochlicella barbara, Helicella ordunensis, Cepaea nemoralis, Helicella (Helicella) itala y HeIix (Cryptomphalus) aspersa. Parece que M. capillaris y N. linearis evolucionan mejor en las infestaciones dobles que en las monoespecíficas., [EN] Due to the fact that molluscs harbouring two or more species of Protostrongylidae are frequently found in natural habitats, 6 species of Helicidae molluscs were experimentally infected on with Muellerius capillaris and Neostrongylus linearis larvae. Approximately 40 adult molluscs of each species were proved and killed in series from the 6th day post-infection, so that the joint larval development of both parasites could be followed. The results referring to the larvae I which penetrated each mollusc and those of them which reached to L-ll and L-lll, as well as the time required to do so, make us think that, from amongst the molluscs species investigated, the most suitable for the joint larval development of M. capillaris and N. linearis are in decreasing order: Cernuella (Xeromagna) cespitum arigonis, Cochlicella barbara, Helicella ordunensis, Cepaea nemoralis, Helicella (Helicella) itala and HeIix (Cryptomphalus) aspersa. It seems that M. capillaris and N. linearis evolve better in double infections than in the monospecific one., Este trabajo ha sido financiado, en parte, por el proyecto de la CICYT nº PB87- 0397

1 página.-- Trabajo presentado a las Primeras Jornadas de Investigación Científica y Técnica INVESPAÑA 80 (Madrid, octubre, 1980), La importancia del ganado ovino en España y la frecuencia de las parasitosis que requieren un molusco terrestre como Intermediario...

8 pages, 4 tables, 7 figures., The experimental susceptibility of Portugala inchoata, Euomphalia (M.) brigantina, Ponentina ponentina, Hygromia (P.) cantabrica cantabrica and Hygromia (P.) cantabrica covadongae to Neostrongylus linearis larvae were studied for the first time. The total number of molluscs used in the infections was 207 and they were killed in series between day 6 and 5O post-infection. In order to define the suitability of the molluscs as intermediate hosts for this parasite, the number of L-I that penetrated the foot and developed to L-I, L-II and L-III has been taken into account, as well as the first days on which the different stages were observed. One way analysis of variance showed statistically significant differences for the penetration and development of the larvae among the species of molluscs examined. Statistically significant differences concerning the susceptibility of the adult and young examples of P. inchoata and E. (M.) brigantina to N. linearis were confirmed by using the chi-square test. The most susceptible species of molluscs to N. linearis using experimental infections were in decreasing order: P. inchoata, E.(M.) brigantina, H.(P.) cantabrica covadongae, P. ponentina and H.(P.) cantabrica cantabrica., This work was supported, in part, by both the CAICYT (Project number 142/83) and CSIC (211)

Trabajo presentado al: VII Congreso Nacional de Malacología (Sevilla, 23-26 de noviembre de 1988), Es la primera vez que se estudia el desarrollo larvario conjunto de Muellerius capillaris y Neostrongylus linearis (nematodos broncopulmonares de pequeños rumiantes) en Cernuella (Xeromagna) cespitum arigonis, Helicella ordunensisy Helix (Cryptomphalus) aspersa (moluscos hospedadores intermediarios). También se ha seguido dicho desarrollo en Helicella (Helicella) itala, Cochlicella barbara y Cepaea nemoralis...

Trabajo presentado a la IV Reunión Anual de la Asociación de Parasitólogos Españoles (Madrid, 26 a 28 de septiembre, 1984), El estudio se ha llevado a cabo sobre 2613 ejemplares de moluscos recogidos, en su mayoría, entre 1979 y 1984, pertenecientes a diversas especies de los géneros Candidula (108), Cernuella (642), Helicella (178), Cochlicella (218), Monacha (203), Portugala (lo), Hygomia (69), Ponentina (54), Euomphalia (28), Oestophora (86), Cepaea (118) y Helix (236) (Helicidae), y los géneros Arion (77), Deroceras (568), Lehmannia (8) y Milax (16) (Pulmonados desnudos). Los muestreos se realizaron al azar y en su mayor parte en la provincia de León...

Trabajo presentado al: Septième Congrès International de Malacologie (Perpignan-Banyuls, Francia, 31 de agosto al 7 de septiembre de 1980), This work summarizes facts about natural infection by Protostrongylinae of the 8 Heicella spp. which, according to studies by GITTENBERGER & MANGA (1977) and MANGA (1977) are to be found in the province of León. These species belong to the Helicellinae Subfamily...

Trabajo presentado al: 2º Congreso Nacional de parasitología (León, 1 al 4 de octubre de 1979)., Se han infestado 560 caracoles, en lotes de ca.40 ejemplares, mantenidos a temperaturas de l7—25º C y sacrificados seriadamente a partir del 6º día p.i. Muellerius capillaris se ha desarrollado óptimamente en Cernuella (C.) virgata seguida de Cepaea nemoralis y, con pocas diferencias, en Helicella 1eiolema y Cernuella (X.) cespitum arigonis...

Trabajo presentado al: 9th International Conference of World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology (W.A.A.V.P.) (Budapest, Hungría, 13 al 17 de julio, 1981)., 4,625 snails (11 spp. of Helicidae) were studied — for natural infection by Protostrongylinae. 7 Cernuella & Helicella spp. were found infected by C.o., M.c., N.l. & Protostrongylus spp. Experimentally the most convenient hosts were: Cernuella (C.) virgata for C.o.; Monacha (A.) granulata for M.c.; Cochlicella barbara for N.l...

Tesis doctoral de la Universidad de León. Facultad de Biología. Leída el 25 de junio de 1985. Para la realización de esta Tesis, se han aplicado fondos procedentes del Plan de Formación de Personal Investigador, del que ha sido becaria la interesada durante los años 1978 al 1981, ambos inclusive., En este trabajo se ha seguido experimentalmente el desarrollo larvario de Neostrongylus linearis, Muellerius capillaris y Cystocaulus ocreatus (en infestaciones puras o pluriespecíficas), en diversas especies de Helicidae de la provincia de León, mantenidas en el laboratorio o en condiciones controladas de campo. En el primer caso se estudió la receptividad a dichos parásitos, en infestación monoespecífica y en sus posibles combinaciones multiespecíficas, de 3240 moluscos (agrupados en lotes de 40) pertenecientes a 23, 13 y 8 especies de Helicidae, respectivamente. Al mismo tiempo se llevó a cabo un estudio similar, pero en condiciones controladas de campo, con 2400 ejemplares de Cernuella (Xeromagna) cespitum arigonis agrupados en lotes de 100. En todas las infestaciones se determinó el porcentaje de penetración de las Larvas I (L-I) en cada molusco y, posteriormente, para seguir el desarrollo larvario, se sacrificaron seriadamente los caracoles de cada lote, desde el día 6º hasta el 40º- 50º día post-infección (p.i.). Se anotó siempre el número de larvas (I + II + III) y de L-III hallado en cada molusco. Teniendo en cuenta estos números, y basándonos en las larvas que habían penetrado, se calcularon los correspondientes porcentajes de evolución y de L-III. También se anotaron los días de observación de los distintos estadios larvarios. En las infestaciones monoespecíficas realizadas con N. linearis o M. capillaris, en las que se infestaron y mantuvieron dos lotes, en cada caso, de la misma especie de caracol a distinta temperatura, se comprobó, mediante “Ji cuadrado”, la influencia de la temperatura respecto a la penetración y posterior evolución larvaria de N. linearis, pero no de M. capillaris. De igual modo, al tener en cuenta la edad de los moluscos, se obtuvieron diferencias estadísticamente significativas para las dos variables en N. linearis y sólo para la penetración en M. capillaris. Tanto en las infestaciones monoespecíficas como en las pluriespecíficas de todas las especies de moluscos estudiadas, mediante los correspondientes análisis de varianza, se comprobó la existencia de diferencias estadísticamente significativas, respecto a los porcentajes de penetración, evolución y L-III. Asimismo, se constató, con el coeficiente de correlación, que los porcentajes de penetración y evolución no están correlacionados entre sí positivamente, pero sí los de evolución y L-III. En las infestaciones dobles y triples, se observaron diferencias estadísticamente significativas en la penetración y posterior evolución larvaria de N. linearis y M. capillaris, en los caracoles probados. Estas diferencias se pusieron de manifiesto con la “t” de Student, en el primer caso de “dos colas” y en el segundo de “muestras apareadas”., En general, se observaron diferencias estadísticamente significativas (“Ji“ cuadrado) en la evolución de los tres parásitos, cuando se compararon las infestaciones pluriespecíficas con las monoespecíficas. No se apreciaron marcadas diferencias en los días de observación de las L-II, pero sí de las L-III entre las especies de parásitos utilizadas en las infestaciones puras y triples. Si tenemos en cuenta los criterios de receptividad establecidos por nosotros (número total de larvas y de L-III/molusco, porcentajes de penetración y L-II, así como los días de observación de los distintos estadios larvarios), en general, las especies de caracoles, más adecuadas como hospedadoras intermediarias para los tres parásitos y sus posibles combinaciones fueron: Cernuella (Xeromagna) cespitum arigonis, Cochicella barbara, Monacha (Asfordia.) granulata y Cernuella (Cernuella) virgata. Tanto en las infestaciones puras como en las pluriespecíficas de los caracoles mantenidos en el laboratorio, el mayor desarrollo larvario correspondió a M. capillaris, seguido de N. linearis y de C. ocreatus. También en los moluscos mantenidos en condiciones controladas de campo, se desarrolló mejor el primer parásito que el segundo, lo que podría explicar el mayor porcentaje de infestación por M. capillaris en los ovinos de nuestra provincia. En el trabajo realizado en la finca experimental, se observó una mayor mortalidad en los lotes de C. (X.) cespitum arigonis, infestados monoespecificamente con M. capillaris o N. linearis, que en los testigos. Al mismo tiempo se apreció que el desarrollo larvario fue más lento en los meses más fríos (aunque nunca se detuvo por completo) que en los más cálidos, hecho más acentuado en N. linearis. Al tener en cuenta los valores alcanzados en el desarrollo de ambos Protostrongylidae, los máximos fueron similares, mientras que los mínimos de N. linearis fueron siempre inferiores a los de M. capillaris. Tanto el porcentaje como el número de L-III de M. capillaris y N. linearis están relacionados positivamente con la integral térmica, excepto en la experiencia de junio para el primer parásito y en la de junio y octubre para el segundo. No parece existir una clara relación entre la media de la humedad relativa, por sí sola, y las dos variables consideradas. Las cifras máximas de L-III de M. capillaris y N. linearis, en C. (X.) cespitum arigonis, se hallaron desde finales de primavera a últimos de otoño, por lo que consideramos este periodo como el de mayor riesgo para la infestación de los ovinos de la provincia de León.

1 página.-- Ponencia presentada en el 2º Congreso Nacional de Parasitología (León, España, 1-4 octubre, 1979, En 149 ejemplares de Cernuella (C.) virgata de 9 localidades, sin datos de verano, se encontró un 1’7% de parasitados, solo en el invierno, siendo doble la parasitación por Müellerius capillaris que por Cystocaulus ocreatus. Nº de larvas por caracol: 3. En 137 ejemplares de Cernuella (Microxeromagna) vestita de 3 localidades, recolectados en primavera y otoño, se halló, en la 1ª un 0’8% de Neostrongylus linearis. Nº de larvas por caracol: 1. En 880 moluscos de Cernuella (Xeromagna) cespitum arigonis de 66 localidades, se encontró en la primavera un 0’8% parasitados, pero solo se identificó un 20% de las larvas, que fueron de N. linearis. El % de moluscos parasitado, en el verano, fue 1’8 y el de larvas identificadas de 50, siendo 57’1% M. capillaris, 28´6% de N. linearis y 14’3% C. ocreatus. En el otoño, el % de moluscos parasitados fue 4’9 y el de larvas identificadas de 40, 43’2% de M. capillaris, 40’5% de N. linearis, 10’8% de C. ocreatus y 5’4% de Protostrongylus spp. En el invierno el % de infestados fue 0’6 de Protostrongylus spp. Nº de larvas por caracol: 1—38 (media 9’8). En 357 ejemplares de Helicella leiolema de 37 localidades, se halló 3’3% moluscos infestados, en el otoño, habiendose identificado el 80% de las larvas, siendo mitad de C. ocreatus y mitad de M. capillaris. Nº larvas por caracol: 14 (media 2’5).

To further unravel the mechanisms responsible for attenuation of the tuberculosis vaccine Mycobacterium bovis BCG, comparative genomics was used to identify single nucleotide polymorphisms (SNPs) that differed between sequenced strains of Mycobacterium bovis and M. bovis BCG. SNPs were assayed in M. bovis isolates from France and the United Kingdom and from different BCG vaccines in order to identify those that arose during the attenuation process which gave rise to BCG. Informative data sets were obtained for 658 SNPs from 21 virulent M. bovis strains and 13 BCG strains; these SNPs showed phylogenetic clustering that was consistent with the geographical origin of the strains and previous schemes for BCG genealogies. The data revealed a closer relationship between BCG Tice and BCG Pasteur than was previously appreciated, while we were able to position BCG Beijing within a grouping of BCG Denmark-derived strains. Only 186 SNPs were identified between virulent M. bovis strains and all BCG strains, with 115 nonsynonymous SNPs affecting important functions such as global regulators, transcriptional factors, and central metabolism, which might impact on virulence. We therefore refine previous genealogies of BCG vaccines and define a minimal set of SNPs between virulent M. bovis strains and the attenuated BCG strain that will underpin future functional analyses.