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Déterminer les indications et résultats des entérocystoplasties d’agrandissement (ECP) durant la dernière décennie dans un centre de neuro-urologie à l’ère de la toxine botulique.

Malgré les résultats objectifs clairs de l’entérocystoplastie d’agrandissement (ECP) en 3eligne du traitement de l’hyperactivité détrusorienne neurogène (HDN) en cas d’échec des injections de toxine botulique A (TBA), il existe peu de données dans la littérature mesurant l’impact sur la qualité de vie (QdV) de l’ECP chez des patients souffrant d’HDN. L’objectif de notre étude était de comparer la qualité de vie (QdV) chez les mêmes patients d’abord traités par injections de TBA pour HDN puis par ECP.

Le traitement de référence pour la sténose urétérale (SU) après une transplantation rénale (TR) est la reprise chirurgicale de l’anastomose, alors que l’alternative est le maintien d’un drainage urinaire à demeure de façon palliative. L’objectif de cette étude a été d’évaluer les résultats de ces deux approches et d’analyser les facteurs influençant le choix du traitement et les résultats à long terme.

Étudier les aspects évolutifs de l’incontinence urinaire d’effort et de l’incontinence urinaire par urgenturie après HoLEP à travers une série de 200 cas consecutif du même chirurgien puis de rechercher secondairement les facteurs prédictifs de survenue au service d’urologie du Centre hospitalier de Martigues.

La débitmétrie urinaire (DU) est un examen urodynamique non invasif clé pour l’évaluation de la phase de vidange chez patients avec des symptômes du bas appareil urinaire (SBAU). La DU libre traditionnelle (DULT), réalisée de manière unique en consultation, est limitée par une difficulté à capter une miction normale et par une forte variabilité intrapatient des paramètres du débit urinaire. La mesure du débit urinaire à domicile par le patient pourrait être un moyen d’obtenir des données multiples en conditions de vie réelle, répondant à ses limites. L’objectif de cet article était de faire une revue de la littérature des différentes techniques de débitmétrie urinaire à domicile (DUD) et de leur intérêt clinique, en particulier par rapport à la DULT.

Pratiquée depuis les années 1970, l’auto-sondage est la méthode de référence de drainage des urines en cas de rétention urinaire d’origine neurologique (paraplégie, sclérose en plaque…) et non neurologique (hypertrophie bénigne de la prostatique, vessie acontractile du sujet âgé…). L’objectif principal est de permettre l’alternance physiologique de phase de remplissage et de vidange complète, pour préserver la fonction rénale et prévenir les infections urinaires. L’apprentissage du geste est simple mais nécessite une séance d’éducation thérapeutique avec un personnel formé, à domicile ou dans un centre spécialisé. Les troubles cognitifs, une mauvaise vision, un manque de dextérité ou la non-connaissance de l’anatomie uro-génitale sont les principales limites à leur mise en place. Leur succès repose sur la fréquence des sondages (toutes les 4h) qui sont réalisées de façon propre mais non stérile. Le rapport bénéfice/risque est largement en faveur de leur utilisation afin de remplacer la sonde à demeure chaque fois que possible.

To compare the perioperative complications of patients who underwent flexible ureteroscopy (fURS) for the treatment of urinary stones according to the type of ureteroscope used, single-use (suURS) or reusable (rURS) flexible ureteroscope.

S’il existe un spectre de 11 méthodes contraceptives différentes pour les femmes, il n’y en a que 3 couramment utilisées par les hommes : le préservatif et le retrait, avec leur taux d’échecs élevés, ainsi que la vasectomie, considérée comme une méthode irréversible. Depuis 40 ans, de nombreuses études ont été réalisées pour développer des contraceptifs masculins hormonaux et non hormonaux sûrs et efficaces. Bien qu’elles aient fait la preuve de leur efficacité, les contraceptions masculines hormonale et thermique restent encore peu utilisées. Les principes, protocoles, efficacité, réversibilité et acceptabilité de ces deux méthodes sont présentées, ainsi que les éléments pratiques, pour leur prescription et leur suivi. Nous décrivons également de nouvelles méthodes en cours de développement (contraceptifs hormonaux masculins oraux ou transdermiques, méthodes d’occlusion déférentielle). D’autres recherches sont nécessaires pour l’amélioration et la diffusion de méthodes contraceptives masculines efficaces, réversibles et sûres qui permettront aux hommes autant qu’aux femmes de jouer un rôle actif dans la planification familiale.

I sintomi del basso apparato urinario (LUTS) sono una causa frequente di consultazione in urologia. Ne fanno parte la sindrome clinica da iperattività vescicale (OAB) e alcune forme di ritenzione urinaria. Quando non viene rilevata alcuna eziologia e i trattamenti di prima linea sono un fallimento, può essere proposta una neuromodulazione sacrale; consiste nell’applicare un campo elettrico sul ramo ventrale del nervo spinale S3 attraverso un elettrodo situato nel terzo forame sacrale. Il sistema impiantabile InterStim® (Medtronic) è, attualmente, l’unico dispositivo disponibile in Francia per il trattamento prolungato dei LUTS mediante neuromodulazione sacrale. Questa terapia di seconda linea è indicata per i disturbi della fase di stoccaggio, OAB idiopatica o neurogena con o senza incontinenza, e per i disturbi della fase di svuotamento, ritenzione riflessa senza ostacolo anatomico (compatibile o meno con la sindrome di Fowler). La neuromodulazione sacrale ha anche un’indicazione in coloproctologia nell’incontinenza fecale a sfintere conservato o leso in seconda linea dopo fallimento della rieducazione. Ecco che la neuromodulazione sacrale è un trattamento di scelta per la doppia incontinenza (urinaria e fecale).

La prise en charge des patients d’urologie est bouleversée par l’épidémie de COVID-19. En urologie fonctionnelle, certaines situations cliniques sont à haut risque de complication en cas de retard de prise en charge et il existe une grande hétérogénéité de délais souhaitables de reprogrammation en cas d’annulation. Une hiérarchisation de la priorité accordée aux actes d’urologie fonctionnelle est donc nécessaire pour adapter les prises en charge durant la crise COVID-19 et mieux organiser la reprise d’activité post-épidémie.

Our objective was to provide guidelines covering all aspects of intermittent catheterisation (intermittent self-catheterisation and third-party intermittent catheterisation).

Les transplantations rénales avec donneur vivant apparenté offrent les meilleurs résultats en terme de fonction rénale et sont une des principales solutions à la pénurie de transplants. Cependant la sélection des donneurs et l’évaluation de la fonction rénale post don sont essentielles. L’objectif de cette étude était d’évaluer la prévalence et identifier les facteurs prédictifs de l’insuffisance rénale (IRC) chez le donneur, après néphrectomie donneur vivant.

L’objectif de notre étude était d’évaluer, dans une revue de la littérature, l’impact de l’urétéroscopie (URS) diagnostique avant nephro-ureterectomie totale (NUT) sur le risque de récidive vésicale.

La lithotritie extracorporelle (LEC) et l’urétéroscopie souple (URSS) sont les deux traitements de référence des calculs rénaux. Ces deux thérapies peuvent laisser des fragments caliciels résiduels, difficiles à éliminer, augmentant au long cours le risque de complications et de ré-intervention. Actuellement il n’existe aucun traitement adjuvant à la LEC ou à l’URSS optimisant l’élimination de ces fragments. En 2005 Chiong et al. ont rapporté une technique associant kinésithérapie en position de Trendelenburg et hyperdiurèse (posturothérapie) afin d’augmenter la clairance de ces fragments. Depuis deux ans nous prescrivons la posturothérapie aux patients le désirant pour les calculs/fragments caliciels moyens et inférieurs de moins de 5mm.

L’observatoire REVELA13 est un outil épidémiologique unique recensant les nouveaux cas de tumeur du rein, de vessie et de leucémies aiguës dans le département des Bouches-du-Rhône. L’objectif de ce travail était d’analyser pour la première fois les données de cet observatoire pour les nouveaux cas de tumeurs de vessie de la femme≥T1 dans les Bouches-du-Rhône de 2012 à 2014.

Training on laparoscopic box trainer (BT) improves surgical skills in the operating room (OR). Despite a large consensus on the educational value of the BT, its use is currently left up to local initiatives among French residency programs. This study evaluated the impact of a requirement to complete the Fundamentals of Laparoscopic Surgery (FLS) curriculum before starting companionship in the OR.

L’implantation du sphincter urinaire artificiel robot-assistée (ISUARA) chez la femme a été initialement décrite par abord antérieur du col vésical. En 2019, nous avons décrit une nouvelle technique d’ISUARA par abord postérieur du col vésical. L’objectif était d’évaluer la faisabilité, la sécurité et l’efficacité de cette procédure.

Les délais de prise en charge des urgences en urologie après consultation aux urgences sont très variables et nécessitent d’être améliorés. L’objectif principal de notre étude était d’évaluer la faisabilité de la mise en place d’une filière post-urgence en urologie dans un CHU français. Les objectifs secondaires étaient d’évaluer les motifs de consultations post-urgence (CPU) et les délais de prise en charge après celles-ci.

Décrire les pratiques d’évaluation avant et pendant la phase de neuromodulation sacrée (NMS) dans les troubles de la vidange, et étudier les facteurs qui président à sa réalisation.

Évaluer les facteurs prédictifs d’implantation de la neuromodulation sacrée (NMS) dans les troubles de la vidange vésicale neurologiques et non neurologiques, et développer un outil prédictif basé sur les paramètres préopératoires.

Les troubles vésicosphinctériens (TVS) sont fréquents en cas de syndrome parkinsonien (SP) et leur traitement particulier du fait des limites d’utilisation de certains médicaments et l’évolution de la pathologie. La stimulation du nerf tibial par TENS, facile d’utilisation et bien tolérée, est un traitement ayant montré son efficacité sur les TVS. L’objectif était d’en étudier l’efficacité chez des patients ayant un SP.

Notre objectif était de valider le score SVPI (score visuel prostatique en images) en langue française dans la détermination et le suivi des symptômes du bas appareil urinaire (SBAU) associés à une hyperplasie bénigne de la prostate (HBP) en pratique urologique.

Préciser les symptômes du bas appareil urinaire (SBAU) liés à la pathologie diabétique, proposer des modalités de dépistage, d’évaluation, de suivi et décrire les spécificités de la prise en charge urologique de ces patients.

À ce jour, il n’existe ni définition de l’échec d’une première injection intra-détrusorienne de toxine botulique Botox®200 U pour hyperactivité détrusorienne neurogène (HDN), ni recommandation sur sa prise en charge. L’objectif principal de cette enquête était de déterminer la définition en pratique de cet échec et l’objectif secondaire de rapporter les pratiques actuelles dans sa prise en charge.

Faire une revue de la littérature de l’efficacité et la tolérance de la toxine botulinique A (onabotulinumtoxinA, BOTOX®, Allergan, Irvine, CA, États-Unis) dans l’hyperactivité vésicale idiopathique (HAVi) réfractaire.

Les patients neuro-urologiques développent des tumeurs de vessie (TV) diagnostiquées à un stade tardif de la maladie après une longue évolution de la maladie neuro-urologique. Les caractéristiques épidémiologiques de ces TV restent mal connues.

Le développement de la cœlioscopie robot-assistée a permis l’adaptation technique de nombreuses interventions, comme l’implantation de sphincter urinaire artificiel (SUA) chez la femme. L’objectif de l’étude était d’analyser les résultats périopératoires de deux variations techniques décrites dans la littérature concernant l’abord du col vésical, lors de la primo-implantation d’un SUA robot assisté chez la femme présentant une incontinence urinaire d’effort par insuffisance sphinctérienne sévère.

La fistule vésicovaginale (FVV) constitue un problème majeur de santé publique pour les pays en développement. La transsection complète est la forme la plus grave des FVV où le pôle inférieur de la vessie et la partie proximale de l’urètre sont complètement détruits de façon circulaire. L’objectif de cette étude était de déterminer les facteurs de risque de survenue d’une transsection complète.

Décrire l’efficacité et la morbidité des ballons périurétraux ajustables (BPUA) utilisés pour traiter l’incontinence urinaire d’effort (IUE) par insuffisance sphinctérienne (IS).

Les injections intra-détrusoriennes de toxine botulinique A ont maintenant une extension d’autorisation de mise sur le marché pour le traitement de l’hyperactivité réfractaire idiopathique. L’objectif de cette étude était de faire le point concernant ce traitement.

Provide guidelines for practical usage of botulinum toxin type A (BoNTA) for refractory idiopathic overactive bladder management.

Décrire et résumer la physiopathologie, le diagnostic, le traitement et la prévention de l’hyper-réflexie autonome (HRA) dans le contexte de l’urologie.

Le département des Bouches-du-Rhône présente une surincidence de cancers de la vessie chez l'homme. L'objectif était de déterminer si cette surincidence était homogène sur le territoire ou s'il existait des zones de surincidence identifiables à une échelle infracommunale.

Définir des recommandations pour l’utilisation pratique de la toxine botulinique de type A (BoNTA) dans l’hyperactivité vésicale réfractaire idiopathique (HAVRI).

Évaluer le taux de tumeur résiduelle lors d’une résection transurétrale de vessie (RTUV) de second looken lumière bleue après une primo-résection avec diagnostic photodynamique macroscopiquement complète d’une tumeur de vessie non infiltrant le muscle (TVNIM) à haut risque.

Évaluer l’efficacité et la sécurité de la chirurgie de désobstruction prostatique après une rétention aiguë d’urines (RAU) en échec de désondage.

Une fistule vésicovaginale (FVV) est une communication congénitale ou acquise entre vessie et vagin. Dans les pays riches, elles sont rares, souvent iatrogènes et responsables d’un fort taux de recours médicolégal. Nous étudions à partir du PMSI leur épidémiologie globale. L’objectif de ce travail était de décrire et d’analyser plus précisément l’incidence, les étiologies et le devenir des FVV survenues en France durant l’année 2017.

Le traitement de l’incontinence urinaire d’effort (IUE) de la femme est chirurgical après échec de la rééducation. L’IUE simple est traitée le plus souvent par bandelette sous-urétrale. Le traitement des formes complexes (insuffisance sphinctérienne [IS] majoritaire neurogène ou non, récidivée après chirurgie, post-radiothérapie) est moins bien défini. Les ballons péri-urétraux ajustables (BPUA) ont une place mal définie dans le traitement de l’IUE complexe.

Ptprv is a member of the transmembrane tyrosine phosphatase gene family reported to be expressed in osteoblasts and gonads. To better define the developmental and tissue specificity of Ptprv expression, we generated knock-in mice expressing a nuclear localised β-galactosidase reporter under the control of resident Ptprv regulatory elements. Histochemical staining of Ptprv-nLacZ mice revealed that Ptprv expression is readily detectable in the foetal gonadal ridge of both sexes and in adult gonads where it is localised to Sertoli cells of the testis and celomic epithelial cells of the ovaries. During early limb development, Ptprv expression is prominent in the apical ectodermal ridge of the limb bud. At latter stages of development, Ptprv is predominantly expressed in the perichondrial and periosteal region of long bones, known as the bone collar. In contrast to previous indications from in vitro studies, there is little if any expression in mature osteoblasts in vivo. Analysis of Ptprv mRNA localisation by in situ hybridization in parallel with molecular markers of chondrocytes and osteoblasts confirmed the specific expression of Ptprv in immature bone collar cells. The specificity of Ptprv expression in these cells may be a useful tool to elucidate their role in the transition of skeletal elements from cartilage template to bone. Developmental Dynamics 229:826–834, 2004. © 2004 Wiley-Liss, Inc.

Chondrocyte hypertrophy is a mandatory step during endochondral ossification. Cbfa1-deficient mice lack hypertrophic chondrocytes in some skeletal elements, indicating that Cbfa1 may control hypertrophic chondrocyte differentiation. To address this question we generated transgenic mice expressing Cbfa1 in nonhypertrophic chondrocytes (alpha1(II) Cbfa1). This continuous expression of Cbfa1 in nonhypertrophic chondrocytes induced chondrocyte hypertrophy and endochondral ossification in locations where it normally never occurs. To determine if this was caused by transdifferentiation of chondrocytes into osteoblasts or by a specific hypertrophic chondrocyte differentiation ability of Cbfa1, we used the alpha1(II) Cbfa1 transgene to restore Cbfa1 expression in mesenchymal condensations of the Cbfa1-deficient mice. The transgene restored chondrocyte hypertrophy and vascular invasion in the bones of the mutant mice but did not induce osteoblast differentiation. This rescue occurred cell-autonomously, as skeletal elements not expressing the transgene were not affected. Despite the absence of osteoblasts in the rescued animals there were multinucleated, TRAP-positive cells resorbing the hypertrophic cartilage matrix. These results identify Cbfa1 as a hypertrophic chondrocyte differentiation factor and provide a genetic argument for a common regulation of osteoblast and chondrocyte differentiation mediated by Cbfa1.

The bone-specific transcription factor, Cbfa1, regulates expression of the osteocalcin (OCN) gene and is essential for bone formation. However, little is known about the mechanisms regulating Cbfa1 activity. This work examines the role of the MAPK pathway in regulating Cbfa1-dependent transcription. Stimulation of MAPK by transfecting a constitutively active form of MEK1, MEK(SP), into MC3T3-E1 preosteoblast cells increased endogenous OCN mRNA, while a dominant negative mutant, MEK(DN), was inhibitory. MEK(SP) also stimulated activity of a 147-base pair minimal OCN promoter, and this stimulation required an intact copy of OSE2, the DNA binding site for Cbfa1. Effects of MEK(SP) were specific to Cbfa1-positive osteoblast-like cells. A purified His-tagged Cbfa1 fusion protein was directly phosphorylated by activated recombinant MAPK in vitro. Furthermore, (32)P metabolic labeling studies demonstrated that MEK(SP) clearly enhanced phosphorylation of Cbfa1 in intact cells, while MEK(DN) decreased phosphorylation. The specific MEK1/MEK2 inhibitor, PD98059, inhibited extracellular matrix-dependent up-regulation of the OCN promoter, indicating that the MAPK pathway and, presumably, Cbfa1 phosphorylation are also required for responsiveness of osteoblasts to extracellular matrix signals. This study is the first demonstration that Cbfa1 is controlled by MAPKs and suggests that this pathway has an important role in the control of osteoblast-specific gene expression.

Drosophila Runt is the founding member of a family of related transcription factors involved in the regulation of a variety of cell-differentiation events in invertebrates and vertebrates. Runt-related proteins act as both transactivators and transcriptional repressors, suggesting that context-dependent mechanisms modulate their transcriptional properties. The aim of this study was to elucidate the molecular mechanisms that contribute to the regulation of the functions of the mammalian Runt-related protein, Cbfa1. Here we provide the first demonstration that Cbfa1 (as well as the related protein, Cbfa2/AML1) physically interacts with the basic helix loop helix transcription factor, HES-1, a mammalian counterpart of the Drosophila Hairy and Enhancer of split proteins. This interaction is mediated by the carboxyl-terminal domains of Cbfa1 and HES-1, but does not require their respective tetrapeptide motifs, WRPY and WRPW. Our studies also show that HES-1 can antagonize the binding of Cbfa1 to mammalian transcriptional corepressors of the Groucho family. Moreover, HES-1 can potentiate Cbfa1-mediated transactivation in transfected cells. Taken together, these findings implicate HES-1 in the transcriptional functions of Cbfa1 and suggest that the concerted activities of Groucho and HES proteins modulate the functions of mammalian Runt-related proteins.

Évaluer la faisabilité, l’efficacité et les facteurs prédictifs de succès thérapeutiques de la posturothérapie pour l’élimination de calculs rénaux.

La radiothérapie pelvienne (RTP) féminine à une toxicité urinaire tardive liée aux lésions vasculaires progressives aboutissant à la fibrose. L’incontinence urinaire y est souvent mixte par réduction de la capacité vésicale et insuffisance sphinctérienne. Les traitements classiques de l’IUE, peu étudiés dans cette indication, sont décevants et/ou morbides. L’objectif était d’évaluer les ballons péri-urétraux ajustables (BPUA – ACT™) dans le traitement de l’IUE post-RTP.

The molecular mechanisms controlling bone extracellular matrix (ECM) deposition by differentiated osteoblasts in postnatal life, called hereafter bone formation, are unknown. This contrasts with the growing knowledge about the genetic control of osteoblast differentiation during embryonic development. Cbfa1, a transcriptional activator of osteoblast differentiation during embryonic development, is also expressed in differentiated osteoblasts postnatally. The perinatal lethality occurring in Cbfa1-deficient mice has prevented so far the study of its function after birth. To determine if Cbfa1 plays a role during bone formation we generated transgenic mice overexpressing Cbfa1 DNA-binding domain (DeltaCbfa1) in differentiated osteoblasts only postnatally. DeltaCbfa1 has a higher affinity for DNA than Cbfa1 itself, has no transcriptional activity on its own, and can act in a dominant-negative manner in DNA cotransfection assays. DeltaCbfa1-expressing mice have a normal skeleton at birth but develop an osteopenic phenotype thereafter. Dynamic histomorphometric studies show that this phenotype is caused by a major decrease in the bone formation rate in the face of a normal number of osteoblasts thus indicating that once osteoblasts are differentiated Cbfa1 regulates their function. Molecular analyses reveal that the expression of the genes expressed in osteoblasts and encoding bone ECM proteins is nearly abolished in transgenic mice, and ex vivo assays demonstrated that DeltaCbfa1-expressing osteoblasts were less active than wild-type osteoblasts. We also show that Cbfa1 regulates positively the activity of its own promoter, which has the highest affinity Cbfa1-binding sites characterized. This study demonstrates that beyond its differentiation function Cbfa1 is the first transcriptional activator of bone formation identified to date and illustrates that developmentally important genes control physiological processes postnatally.

Osteoblasts and odontoblasts, cells that are responsible for the formation of bone and dentin matrices respectively, share several molecular characteristics. Recently, Cbfa1 was shown to be a critical transcriptional regulator of osteoblast differentiation. Mutations in this gene cause cleidocranial dysplasia (CCD), an autosomal dominant disorder in humans and mice characterized by defective bone formation. CCD also results in dental defects that include supernumerary teeth and delayed eruption of permanent dentition. The dental abnormalities in CCD suggest an important role for this molecule in the formation of dentition. Here we describe results of studies aimed at understanding the functions of Cbfa1 in tooth formation. RT-PCR and in situ hybridization analyses show that Cbfa1 has a unique expression pattern in dental mesenchyme from the bud to early bell stages during active epithelial morphogenesis. Unlike that observed in osteoblast differentiation, Cbfa1 is downregulated in fully differentiated odontoblasts and is surprisingly expressed in ectodermally derived ameloblasts during the maturation phase of enamel formation. The role of Cbfa1 in tooth morphogenesis is further illustrated by the misshapen and severely hypoplastic tooth organs in Cbfa1-/- mice. These tooth organs lacked overt odontoblast and ameloblast differentiation and normal dentin and enamel matrices. Epithelial-mesenchymal recombinants demonstrate that dental epithelium regulates mesenchymal Cbfa1 expression during the bud and cap stages and that these effects are mimicked by the FGFs but not by the BMPs as shown by our bead implantation assays. We propose that Cbfa1 regulates the expression of molecules in mesenchyme that act reciprocally on dental epithelium to control its growth and differentiation. Taken together, our data indicate a non-redundant role for Cbfa1 in tooth development that may be distinct from that in bone formation. In odontogenesis, Cbfa1 is not involved in the early signaling networks regulating tooth initiation and early morphogenesis but regulates key epithelial-mesenchymal interactions that control advancing morphogenesis and histodifferentiation of the epithelial enamel organ.

The cAMP pathway, a major intracellular pathway mediating parathyroid hormone signal, regulates osteoblastic function. Parathyroid hormone (through activation of protein kinase A) has also been shown to stimulate ubiquitin/proteasome activity in osteoblasts. Since the osteoblast-specific transcription factor Osf2/Cbfa1 is important for differentiation of osteoblastic cells, we examined the roles of the cAMP and ubiquitin/proteasome pathways in regulation of Cbfa1. In the osteoblastic cell line, MC3T3-E1, continuous treatment with cAMP elevating agents inhibited both osteoblastic differentiation based on alkaline phosphatase assay and DNA binding ability of Cbfa1 based on a gel retardation assay. Cbfa1 inhibition was paralleled by an inhibitory effect of forskolin on Cbfa1-regulated genes. Northern and Western blot analyses suggested that the inhibition of Cbfa1 by forskolin was mainly at the protein level. Pretreatment with proteasome inhibitors prior to forskolin treatment reversed the effect of forskolin. Furthermore, addition of proteasome inhibitors to forskolin-pretreated samples resulted in recovery of Cbfa1 protein levels and accumulation of polyubiquitinated forms of Cbfa1, indicating a role for the proteasome pathway in the degradation of Cbfa1. These results suggest that suppression of osteoblastic function by the cAMP pathway is through proteolytic degradation of Cbfa1 involving a ubiquitin/proteasome-dependent mechanism.

To elucidate the mechanisms of osteoblast-specific gene expression we are studying the regulation of osteocalcin, the most osteoblast-specific gene. Previous studies of OG2, one of the two mouse osteocalcin genes, identified two osteoblast-specific cis-acting elements, OSE1 and OSE2, the latter being the binding site of Cbfa1, the only osteoblast-specific transcription factor known to date. Here we show that OSE1 is a cis-acting element as important as OSE2 for the osteoblast-specific expression of OG2 in cell culture and transgenic mice. We also show that OSE1 is present in the promoter of several osteoblast-specific genes including Cbfa1 itself. These biological features demonstrate the importance of OSE1 and led us to further characterize this site and the factor binding to it, provisionally termed Osf1. We first defined the core OSE1 sequence, 5'-TTACATCA-3', which is necessary and sufficient for Osf1 binding to DNA. This sequence has no strong homology to any known transcription factor-binding sites. As a first step in identifying Osf1, we performed an analytical purification of this protein using nuclear extracts from two different osteoblastic cell lines. We purified Osf1 to homogeneity through a five-step procedure including a renaturation experiment and found that its apparent molecular mass is 40 kDa. In conclusion, this study indicates the existence of multiple osteoblast-specific cis-acting elements of equal importance in controlling OG2 promoter activity and provides the first biochemical characterization of Osf1, a novel osteoblast-specific transcription factor.