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O processo da memória é dividido em fases. A extinção é a fase final, na qual as informações previamente estabelecidas são suprimidas, a partir de um novo processo de aprendizagem. Objetivo: investigar a possível interferência da Sonata K448 de Mozart na extinção da memória de medo ao ambiente. Métodos: Foram utilizados camundongos da linhagem C57BL/6J, divididos em: G1: Mozart (n=7); G2: Ambiente (n=7); e G3: Controle (n=6). Apenas o grupo G1 foi exposto à música a partir da vida intrauterina. Nos dias 50º ao 53º após o nascimento, os animais foram submetidos à Habituação. No 54º dia, realizou-se um Treino Aversivo apenas com G1 e G2. No 55º dia, iniciou-se o Teste de Extinção por doze dias consecutivos com os três grupos. No 81º dia, todos os grupos passaram pelo Teste de Recordação. Os testes foram gravados em vídeo para análise. Os dados foram analisados pelo teste ANOVA de medidas repetidas, sendo considerados significativos p≤0,05. Resultados: Não foi observado efeito principal dos grupos (F (2;16) =2,46; p=0,118), assim como não foi verificada interação dias vs. grupos (F (4,08;32,62) =1,42; p=0,250). Conclusão: N ossos resultados não encontraram alterações na extinção da memória de medo em animais expostos à música clássica, uma vez que o comportamento dos grupos foi semelhante ao longo do tempo. The memory process is divided into phases. Extinction is the final phase, in which previously established information is suppressed, starting with a new learning process. Objective: To investigate the interference of Mozart's Sonata K448 in the extinction of the memory of fear of the environment. Methods: C57BL/6J mice were used, divided into: G1: Mozart (n=7); G2: Environment (n=7); and G3: Control (n=6). Only the G1 group was exposed to music from intrauterine life onwards. On days 50 to 53 after birth, the animals were subjected to Habituation. On the 54th day, an Aversive Training was performed only with G1 and G2. On the 55th day, the Extinction Test started, lasting twelve consecutive days with the three groups. On the 81st day, all groups passed the Recall Test. The tests were videotaped for analysis. Data were analyzed using the repeated measures ANOVA test, with p≤0.05 being considered significant. Results: There was no groups main effect (F (2;16) =2.46; p=0.118), nor an interaction between days vs. groups (F (4.08;32.62) =1.42; p=0.250). Conclusion: Our results did not show alterations o the extinction memory of animals exposed classical, since the groups´ results were similar over time. Introducción: El proceso de la memoria se divide en fases. La extinción es la fase final, en la que se suprime la información previamente establecida, iniciándose un nuevo proceso de aprendizaje. Objetivo: investigar la posible interferencia de la Sonata K448 de Mozart en la extinción de la memoria del miedo al medio ambiente. Métodos: se utilizaron ratones C57BL/6J divididos en: G1: Mozart (n=7); G2: Ambiente (n=7); y G3: Control (n=6). Solo el grupo G1 estuvo expuesto a la música de la vida intrauterina. En los días 50 a 53 después del nacimiento, los animales fueron sometidos a Habituación. El día 54 se realizó un Entrenamiento Aversivo solo con G1 y G2. El día 55 se inició el Test de Extinción durante doce días consecutivos con los tres grupos. El día 81, todos los grupos pasaron la Prueba de Recordación. Las pruebas fueron grabadas en video para su análisis. Los datos fueron analizados mediante la prueba ANOVA de medidas repetidas, considerándose significativo p≤0,05. Resultados: No hubo efecto principal de los grupos (F (2;16) =2.46; p=0.118), y no hubo interacción entre días vs. grupos (F (4,08;32,62) =1,42; p=0,250). Conclusión: Nuestros resultados no encontraron cambios en la extinción de la memoria del miedo en animales expuestos a música clásica, ya que el comportamiento de los grupos fue similar a lo largo del tiempo.

The association between advanced paternal age and impaired reproductive outcomes is still controversial. Several studies relate decrease in semen quality, impaired embryo/fetal development and offspring health to increased paternal age. However, some retrospective studies observed no alterations on both seminal status and reproductive outcomes in older men. Such inconsistency may be due to the influence of intrinsic and external factors, such as genetics, race, diet, social class, lifestyle and obvious ethical issues that may bias the assessment of reproductive status in humans. The use of the murine model enables prospective study and owes the establishment of homogeneous and controlled groups. This study aimed to evaluate the effect of paternal age on in vitro embryo development at 4.5 day post conception and on in vivo fetal development at 16 days of gestation. Murine females (2–4 months of age) were mated with young (4–6 months of age) or senile (18–24 months of age) males. We observed decreased in vitro cleavage, blastocyst, and embryo development rates; lighter and shorter fetuses in the senile compared to the young group. This study indicated that advanced paternal age negatively impacts subsequent embryo and fetal development.

Since ancient times, animals have been used in scientific experiments and continue being used in numerous medical investigations. Research with animal models hasbeen fundamental for findings in the biomedical area, such as blood pressure regulation, for example. Contrarily to many countries that have laws regulating research with animal models, there is no such legislation in Brazil. Animals used in research models shouldbe treated appropriately and researchers must avoid unnecessary pain and suffering., Animais são utilizados em experimentos científicos desde a antigüidade. Inúmeras investigações utilizando animais foram e continuam sendo realizadas até os dias atuais. Muitas descobertas na área biomédica, como a pressão sangüínea, por exemplo, resultaram de experimentações em animais. Não existe no Brasil nenhuma legislação específica que regulamente o uso de animais para fins experimentais, ao contrário deoutros países. Do ponto de vista ético, os animais utilizados em pesquisas científicas devem ser tratados de forma adequada, sendo que os pesquisadores têm o dever de evitar a dor e o sofrimento desnecessários.

Background: Transcranial Doppler has been tested in the evaluation of cerebral hemodynamics as a non-invasive assessment of intracranial pressure (ICP), but there is controversy in the literature about its actual benefit and usefulness in this situation. Objective: To investigate cerebral blood flow assessed by Doppler technique and correlate with the variations of the ICP in the acute phase of intracranial hypertension in an animal model. Methods: An experimental animal model of intracranial hypertension was used. The experiment consisted of two groups of animals in which intracranial balloons were implanted and inflated with 4 mL (A) and 7 mL (B) for controlled simulation of different volumes of hematoma. The values of ICP and Doppler parameters (systolic [FVs], diastolic [FVd], and mean [FVm] cerebral blood flow velocities and pulsatility index [PI]) were collected during the entire procedure (before and during hematoma simulations and venous hypertonic saline infusion intervention). Comparisons between Doppler parameters and ICP monitoring were performed. Results: Twenty pigs were studied, 10 in group A and 10 in group B. A significant correlation between PI and ICP was obtained, especially shortly after abrupt elevation of ICP. There was no correlation between ICP and FVs, FVd or FVm separately. There was also no significant change in ICP after intravenous infusion of hypertonic saline solution. Conclusions: These results demonstrate the potential of PI as a parameter for the evaluation of patients with suspected ICP elevation. RESUMO Antecedentes: O Doppler transcraniano (DTC) é uma técnica não invasiva para a avaliação da hemodinâmica cerebral, porém existem controvérsias na literatura sobre sua aplicabilidade preditiva em situações de elevada pressão intracraniana (PIC). Objetivo: Investigar o fluxo sanguíneo cerebral pelo DTC e correlacioná-lo com as variações da PIC na fase aguda da hipertensão intracraniana em modelo animal. Métodos: Dois grupos de animais (suínos) foram submetidos a hipertensão intracraniana secundária à indução de diferentes volumes de hematoma, por meio da insuflação de balão intracraniano controlado com 4 e 7 mL de solução salina fisiológica (grupos A e B, respectivamente). Em seguida, administrou-se infusão venosa de solução salina hipertônica (SSH 3%). Foram coletados os valores dos parâmetros de PIC e DTC (velocidade sistólica [FVs], diastólica [FVd] e média [FVm] do fluxo sanguíneo cerebral), bem como o índice de pulsatilidade (IP). Comparações entre os parâmetros do DTC e o monitoramento da PIC foram realizadas. Resultados: Vinte porcos foram estudados, dez no grupo A e dez no grupo B. Correlação significativa entre IP e PIC foi obtida, principalmente logo após a elevação abrupta da PIC. Não houve correlação entre PIC e FVs, FVd ou FVm separadamente. Também não houve alteração significativa na PIC após a infusão de SSH. Conclusões: Esses resultados demonstram o potencial do IP como um bom parâmetro para a avaliação de pacientes com suspeita de elevação da PIC.

RESUMO Introdução: A microcirurgia reparadora é ramo hoje indissociável e imprescindível na cirurgia plástica. O treinamento é longo, custo financeiro relativamente alto e exige muito dos proponentes. Para melhorar essa equação a favor da formação de novos microcirurgiões no Brasil, é fundamental facilitar o acesso ao treinamento experimental, utilizando materiais simples. Huaraca descreveu uma técnica utilizando um simples fio mononylon 5-0 para substituir o clamp vascular, que é instrumento indispensável da anastomose microcirúrgica e geralmente de alto custo. O objetivo é comparar a técnica de Huaraca com fio de mononylon e o clamp metálico tradicional durante anastomose microcirúrgica vascular. Métodos: Seis ratos da raça Wistar cujas duas artérias femorais foram aleatoriamente selecionadas para sutura término-terminal após secção completa, sendo um dos lados realizado com clamp vascular habitual e o contralateral com técnica de Huaraca, no mesmo tempo cirúrgico e pelo mesmo cirurgião. Resultados: Em ambas as situações, a taxa de patência foi de 67% após 72 horas, sendo que o tempo médio foi de 26 minutos com a técnica de Huaraca e de 18 minutos com o clamp tradicional (p=0,001). Conclusão: Apesar do tempo de execução mais longo, a técnica de Huaraca é medida simples e de baixo custo que pode substituir o clamp vascular tradicional. ABSTRACT Introduction: Reconstructive microsurgery is now an inseparable and essential branch of plastic surgery. The training is long, has a relatively high financial cost and requires a lot of the proponents. To improve this equation in favor of the formation of new microsurgeons in Brazil, it is essential to facilitate access to experimental training, using simple materials. Huaraca described a technique using a simple 5-0 mononylon thread to replace the vascular clamp, which is an indispensable instrument for microsurgical anastomosis and is generally expensive. The objective is to compare the Huaraca technique with mononylon thread and the traditional metal clamp during vascular microsurgical anastomosis. Methods: Six Wistar rats whose both femoral arteries were randomly selected for end-to-end suture after complete section, with one side performed with usual vascular clamp and the contralateral with Huaraca technique, at the same surgical time and by the same surgeon. Results: In both situations, the patency rate was 67% after 72 hours, with an average time of 26 minutes with the Huaraca technique and 18 minutes with the traditional clamp (p=0.001). Conclusion: Despite the longer execution time, the Huaraca technique is a simple and low-cost measure that can replace the traditional vascular clamp.

Introduction During open surgical dislocated hip reduction, several anatomical structures, such as the round ligament, are approached. However, there is controversy over both the possibility of preserving the ligament and its functional importance. Materials and Methods This experimental study used skeletally immature rabbits as a model for congenital hip dislocation. Thirty-six rabbits comprised the sample that was submitted to the round ligament analysis. The sample was stratified for analysis (biomechanics, zymography, histology, and immunohistochemistry). Statistical analysis compared the unstable side to the control side of each rabbit. Results Biomechanical assays showed that the mean maximal strength of the round ligament on the unstable side was similar to that of the control side (p = 0.594), which was also the case with maximum deformation (p = 0.328). Histologically, there was a statistically significant increase in cellularity on the unstable side (p

Introdução: Nos últimos 40 anos, a agricultura brasileira se desenvolveu de tal forma que o país será um dos grandes fornecedores de alimentos do futuro. Esse setor vem desempenhando um importante papel na economia do Brasil, devido à grande produção de grãos, que é representada por todas as macrorregiões. De fato, para manter tal produção, o setor agrícola utiliza intensivamente insumos químicos como fertilizantes e agrotóxicos, corroborando para que o Brasil seja um dos maiores consumidores de pesticidas do mundo. Os Etilenobisditiocarbamatos (EBDCs), são um grupo de fungicidas que tem sido amplamente utilizado no mundo, sendo o Manganese Ethylenebis (Mancozebe), um dos seus principais representantes. Sua toxicidade já foi evidenciada em diversos estudos. No entanto, sua influência na estrutura e diversidade da microbiota intestinal permanece desconhecida. Objetivo: investigar o impacto do Mancozebe na microbiota intestinal utilizando um modelo com roedores. Material e Métodos: a proposta foi um estudo experimental com 27 ratos machos Wistar, classificados em 3 grupos de 9 ratos. Grupo Controle (GC) recebeu Solução salina 0,9%, Grupo Intervenção I (MZ1) recebeu 250 mg\kg uma vez por semana e Grupo intervenção II (MZ2) recebeu 500 mg\kg com a mesma frequência. Após 12 semanas de experimento, os animais foram eutanasiados e as fezes presentes no intestino foram coletadas. Após a extração do ácido desoxirribonucleico (DNA) fecal, a região V4 do gene 16S do ácido ribonucleico ribossômico (rRNA) foi amplificada seguida de sequenciamento em um sistema Ion Torrent PGM™ para avaliação da microbiota bacteriana. Resultados: A análise de diversidade alfa e beta demonstrou diferenças significativas entre os grupos Controle e Mancozebe (MZ1 e MZ2), mas não foi observada diferença entre MZ1 e MZ2. Além disso, sete gêneros aumentaram significativamente em abundância após a exposição ao Mancozebe, enquanto que cinco gêneros diminuíram, na análise da microbiota. Conclusão: A exposição ao Mancozebe apresentou efeitos 8 colaterais alterando a estrutura e composição da diversidade bacteriana, provavelmente deve-se ao efeito do fungicida sobre o micobioma intestinal, inviabilizando a proliferação de fungos. Introduction: In the last 40 years, Brazilian agriculture has developed to such an extent that the country will be one of the great food suppliers of the future. This sector has played a major role in the Brazilian economy, because of the high grain production in all macroregions. To keep up this production, the agricultural sector makes intensive use of chemical inputs such as fertilizers and pesticides, thus corroborating the fact that Brazil is one of the greatest pesticide consumers in the world. Ethylenebis dithiocarbamates (EBDCs) are a group of fungicides that have been widely utilized worldwide, and Manganese Ethylenebis (Mancozeb) is one of their main representatives. Its toxicity has already been evidenced in several studies. However, its influence on the structure and diversity of the gut microbiota remains unknown. Objective: investigate the impact of Mancozeb on the intestinal microbiota using a rodent model. Material and Methods: the proposal was an experimental study with 27 male Wistar rats, divided into 3 groups of 9 rats. Control Group (GC) received 0.9% saline solution, Intervention Group I (MZ1) received 250mg\kg once a week and Intervention Group II (MZ2) received 500mg\kg at the same frequency. After 12 weeks of experiment, animals were euthanized, and feces present in the intestine were collected. After fecal DNA extraction, the V4 region of the 16S rRNA gene was amplified followed by sequencing in an Ion Torrent PGM™ System for intestinal microbiota analysis. Results: Alpha and beta diversity analysis showed significant differences between Control and Mancozeb groups (MZ1 e MZ2), but no difference between MZ1 e MZ2 was observed. In addition, seven genera significantly increased in abundance following Mancozeb exposure, while five genera decreased, in microbiota analysis. Conclusion: exposure to Mancozeb has harmful effects altering the structure and composition of the microbiota in rats and increasing bacterial diversity regardless of the dose used. The increase in diversity is explained by a potential effect of the fungicide on the intestinal mycobiome.

Introdução: A doença hepática gordurosa não-alcoólica (DHGNA) é a doença hepática crônica cuja incidência mais cresce em todo o mundo devido à sua associação com obesidade e síndrome metabólica. Embora pioglitazona e Vitamina E (VitE) possam ser recomendadas em populações selecionadas, seu tratamento específico ainda não está bem estabelecido e alternativas têm sido estudadas. O objetivo deste estudo é avaliar o efeito da associação de aspartato de ornitina (LOLA) e VitE em modelo animal de DHGNA. Métodos: Ratos Sprague Dawley machos (n=40) receberam dieta hiperlipidica deficiente em colina (DHDC) ou ração habitual (n=10) por 28 semanas. A partir da 16ª semana foram administrados, durante 12 semanas, por gavagem, água destilada esterilizada (grupo DHGNA, n=10, grupo controle, n=10), aspartato de ornitina (LOLA; n=10), vitamina E (VitE; n=10) ou a associação de aspartato de ornitina com vitamina E (LOLA+VitE; n=10). Na eutanásia foram coletadas amostras de sangue, tecido hepático, intestinal, cardíaco, gordura epicárdica e fezes. Resultados: Ao final, os animais dos grupos intervenção apresentaram maior variação do peso desde o início do estudo, e aumento da circunferência abdominal, tecido adiposo visceral e peso do fígado fresco em relação ao controle (p

A obesidade é decorrente do desequilíbrio crônico entre a ingestão de calorias e o gasto energético. Sabe-se que é causada pela combinação de fatores genéticos, ambientais e epigenéticos. A metilação do DNA, uma das principais alterações epigenéticas, regula negativamente a expressão gênica em resposta a fatores ambientais. Por mais que alguns estudos sugiram que genes diferencialmente metilados (GDMs) estão associados ao desenvolvimento da obesidade, os resultados ainda são inconclusivos. Embora a suscetibilidade genética desempenhe um papel fundamental no estabelecimento da obesidade, fatores ambientais, como sedentarismo e padrões de dieta, são atualmente considerados fatores importantes por trás do aumento exponencial de doenças metabólicas relacionadas à obesidade. A exposição à dieta de cafeteria (CAF) em camundongos mimetiza os padrões de consumo alimentar humano e serve como modelo para estudo da obesidade; entretanto, as alterações metabólicas e genéticas nesse modelo são ainda pouco conhecidas. Sendo assim, realizou-se uma análise integrativa de dados de transcriptômica e metilação do DNA e um estudo experimental com um modelo animal de obesidade induzido com dieta de cafeteria. Os objetivos foram identificar perfis de metilação de DNA e expressão gênica associados à obesidade em pacientes com obesidade e o efeito da dieta CAF em parâmetros antropométricos, alterações metabólicas e de expressão gênica em camundongos C57BL/6. Na nossa análise in sílico de dados de expressão gênica e metilação obtidos do banco público GEO, identificamos 54 genes diferencialmente expressos regulados por metilação (MeGDEs) após a sobreposição dos 274 genes diferencialmente expressos (GDEs) e 11,556 GDMs encontrados. Entre eles, 25 genes apresentaram padrão hipermetilado-expressão reduzida e 29 apresentaram padrão hipometilado-expressão aumentada no tecido adiposo subcutâneo de indivíduos com obesidade. A rede de interação entre esses MeGDEs apresentou 3 genes hub-bottleneck (PTGS2, TNFAIP3 e FBXL20) e um módulo funcional. Além disso, os MeGDEs estão envolvidos na regulação da produção do fator de crescimento de fibroblastos, na função molecular do ácido araquidônico e na atividade da ubiquitina-proteína transferase. Dos 54 MeDGEs, 11 genes foram confirmados como envolvidos na obesidade com os dados coletados do DisGeNET. Os resultados desse estudo sugerem MeGDEs envolvidos na obesidade, bem como identifica as vias em que eles atuam, fornecendo uma compreensão mais profunda dos mecanismos reguladores da obesidade mediados pela metilação. No estudo experimental, após as 16 semanas de exposição a dieta CAF, o grupo CAF ganhou mais peso e apresentou uma glicemia média maior comparado aos controles. No teste oral de tolerância a glicose (TOTG), o grupo CAF exibiu níveis glicêmicos aumentados comparado ao controle. Níveis de insulina e índice homeostatic model assessment for insulin resistance (HOMA-IR) foram mais elevados no grupo CAF vs. controles. As expressões no tecido adiposo branco visceral dos genes Lep, Adipor, Cpt-1 e Tnf foram maiores no grupo CAF do que nos controles. Interessantemente, as expressões dos genes Adipo, Ins1 e Pgc-1α foram maiores no grupo controle do que no CAF. As expressões de Pparα, Lepr e Ins2 não diferiram entre os grupos. Além disso, os níveis séricos de Leptina e Adiponectina foram aumentados no grupo CAF. Portanto, a dieta de cafeteria induz um maior ganho de peso nos camundongos C57BL/6, causando obesidade, bem como alterações na homeostase glicêmica, resistência à insulina e na expressão de genes relacionados à rota das adipocitocinas. Obesity is caused by a chronic imbalance between calorie intake and energy expenditure. A combination of genetic, environmental and epigenetic factors is known to cause obesity. DNA methylation, one of the main epigenetic alterations, negatively regulates gene expression in response to environmental factors. Even though some studies suggest that differentially methylated genes (DMGs) are associated with the development of obesity, the results are still inconclusive. Although genetic susceptibility plays a key role in the establishment of obesity, environmental factors, such as a sedentary lifestyle and diet patterns are currently considered to be important factors behind the exponential increase in obesity-related metabolic diseases. Exposure to cafeteria diet (CAFD) in mice mimics human food consumption patterns and serves as a model for the study of obesity; however, the metabolic and genetic alterations of this model are still poorly understood. Therefore, an integrative transcriptomics and DNA methylation data analysis and an experimental study with an animal model of CAFD induced-obesity were performed. The aims were to identify DNA methylation and gene expression profiles associated with obesity in patients with obesity and the effect of CAFD on anthropometric parameters, metabolism and gene expression alterations in C57BL/6 mice. In our in-silico analysis of gene expression and methylation from data obtained from the GEO public database, we identified 54 Methylation-regulated Differentially Expressed Genes (MeDEGs) after the overlap of 274 Differentially Expressed Genes (DEGs) and 11,556 DMGs found. Among them, 25 genes showed a hypermethylated-reduced expression pattern and 29 showed a hypomethylated-increased expression pattern in the subcutaneous adipose tissue of individuals with obesity. The interaction network between these MeGDEs presented 3 hub-bottleneck genes (PTGS2, TNFAIP3 and FBXL20) and a functional module. In addition, the MeGDEs are involved in the regulation of fibroblast growth factor production, the molecular function of arachidonic acid, and ubiquitin-protein transferase activity. Out of 54 MeDEGs, 11 genes were confirmed to be involved in obesity with data collected from DisGeNET. The results of this study suggest MeGDEs involved in obesity, as well as identify in which pathways they act, providing a deeper understanding of obesity regulatory mechanisms mediated by methylation. In the experimental study, after 16 weeks of exposure to CAFD, the CAFD group gained more weight and had higher mean glycemia compared to controls. In the oral glucose tolerance test (OGTT), the CAFD group exhibited increased glycemic levels compared to the controls. Insulin levels and HOMA-IR index were higher in the CAFD group vs. controls. Expressions in visceral white adipose tissue of the genes Lep, Adipor, Cpt-1 and Tnf were higher in the CAF group than in controls. Interestingly, the expressions of Adipo, Ins1 and Pgc-1α genes were higher in the control group than in the CAF. The expressions of Pparα, Lepr and Ins2 did not differ between groups. In addition, serum levels of Leptin and Adiponectin were increased in the CAFD group. Therefore, the cafeteria diet induces greater weight gain in C57BL/6 mice, causing obesity, as well as alterations in glycemic homeostasis, insulin tolerance/resistance and in the expression of genes related to adipocytokines pathways.

Denture stomatitis is the most prevalent form of oral candidiasis and the most frequent oral lesion in removable prosthesis wearers. It is characterized by an inflammatory response of the denture-bearing mucosa, especially the palatal mucosa, and its clinical signs include chronic edema and erythema, and papillary hyperplasia. Despite having a multifactorial etiology, its main etiological agent is the infection by Candida albicans. Given its high treatment failure rates, an in vivo model of denture stomatitis should be established to test alternative treatments. The aim of this study is to review the existing denture stomatitis models and to provide an overview of the main methodological differences between them. Over the last 40 years, different animal models were developed in order to study denture stomatitis etiopathogenesis and to assess novel therapies. Many approaches, including the use of antibiotics and immunosuppressors, have to be further investigated in order to establish which protocol is more appropriate and effective for the development of an animal model of denture stomatitis.

[Resumen]: La artrosis (osteoarthritis, OA) es la forma más común de artritis, consistiendo en el desgaste y pérdida progresiva del cartílago articular hialino, siendo la principal causa de dolor y discapacidad a nivel mundial. Aunque ha sido ampliamente estudiada en modelos animales mamíferos, en el presente proyecto se propone el pez cebra (Danio rerio) como alternativa para el estudio de la enfermedad, ya que este posee una articulación sinovial en la mandíbula, muy similar a la de los humanos. Se ha visto que la modulación de los microARNs en la articulación puede tener un importante efecto en la OA, en concreto el miR-140, el cual está reducido en el tejido con OA. De este modo, se inyectará el anti-miR-140 en los embriones wild type para silenciarlo. Posteriormente, mediante una serie de tinciones histológicas y técnicas inmunohistoquímicas, se valorará, según el score OARSI, como afecta este microARN al cartílago articular y los cambios osteoartríticos que se producen en la mandíbula del pez cebra. Creando, de este modo, una línea para futuras investigaciones en el tratamiento de la enfermedad. [Resumo]: A artrose (osteoarthritis, OA) é a forma máis común de artrites, consistindo no desgaste e perdida progresiva do cartilaxe articular hialino, sendo a principal causa de dor e discapacidade a nivel mundial. Aínda que foi amplamente estudada en modelos animais mamíferos, no presente proxecto proponse o peixe cebra (Danio rerio) como alternativa para o estudo da enfermidade, xa que este posúe unha articulación sinovial na mandíbula, moi similar á dos humanos. Veuse que a modulación dos microARNs na articulación pode ter un importante efecto na OA, en concreto, o miR-140, o cal aparece reducido no tecido con OA. Deste modo, inxectarase o anti-miR-140 nos embrións wild type para silencialo. Posteriormente, mediante unha serie de tincións histolóxicas e técnicas inmunohistoquímicas, valorarase, segundo o score OARSI, como afecta este microARN ao cartilaxe articular e os cambios osteoartríticos que se produce na mandíbula do peixe cebra. Creando, deste modo, una liña para futuras investigacións no tratamento da enfermidade. [Abstract]: Osteoarthritis (OA) is the most common form of arthritis, consisting of the progressive wear and tear and loss of hyaline joint cartilage, and is the main cause of pain and disability worldwide. Although it has been extensively studied in mammalian animal models, this project proposes the zebrafish (Danio rerio) as an alternative for the study of the disease, as it has a synovial joint in the jaw, very similar of humans. It has been shown that modulation of miRNAs in the joint can have an important effect on OA, in particular miR-140, which is reduced in OA tissue. Thus, anti-miR-140 will be injected into wild type embryos to silence it. Subsequently, a series of histological staining and immunohistochemical techniques will be used to assess, according to the OARSI score, how this miRNA affects articular cartilage and the osteoarthritic changes that occur in the zebrafish jaw. Creating a line for future research into the treatment of the disease. Traballo fin de grao (UDC.CIE). Bioloxía. Curso 2021/2022

Glutaric acidemia type I (GA-I) is an inborn error of metabolism of lysine, hydroxylysine, and tryptophan, caused by glutaryl-CoA-dehydrogenase (GCDH) deficiency, characterized by the buildup of toxic organic acids predominantly in the brain. After acute catabolic states, patients usually develop striatal degeneration, but the mechanisms behind this damage are still unknown. Quinolinic acid (QA), a metabolite of the kynurenine pathway, increases especially during infections/inflammatory processes, and could act synergically with organic acids, contributing to the neurological features of GA-I. The aim of this study was to investigate whether QA increases seizure susceptibility and modifies brain oscillation patterns in an animal model of GA-I, the Gcdh−/− mice taking high-lysine diet (Gcdh−/−-Lys). Therefore, the characteristics of QA-induced seizures and changes in brain oscillatory patterns were evaluated by video-electroencephalography (EEG) analysis recorded in Gcdh−/−-Lys, Gcdh+/+-Lys, and Gcdh−/−-N (normal diet) animals. We found that the number of seizures per animal was similar for all groups receiving QA, Gcdh−/−-Lys-QA, Gcdh+/+-Lys-QA, and Gcdh−/−-N-QA. However, severe seizures were observed in the majority of Gcdh−/−-Lys-QA mice (82%), and only in 25% of Gcdh+/+-Lys-QA and 44% of Gcdh−/−-N-QA mice. All Gcdh−/−-Lys animals developed spontaneous recurrent seizures (SRS), but Gcdh−/−-Lys-QA animals had increased number of SRS, higher mortality rate, and significant predominance of lower frequency oscillations on EEG. Our results suggest that QA plays an important role in the neurological features of GA-I, as Gcdh−/−-Lys mice exhibit increased susceptibility to intrastriatal QA-induced seizures and long-term changes in brain oscillations.

Introdução: A doença hepática alcoólica (DHA) embora seja a principal causa hepática de internação e óbito, ainda recebe pouca atenção. Ademais, exceto a abstenção alcoólica, não há tratamento farmacológico estabelecido. A disbiose intestinal está associada à DHA, e é um alvo terapêutico a ser explorado. Modelos experimentais são úteis para testar novas alternativas, mas os modelos de DHA são difíceis de reproduzir e onerosos. Objetivos: Desenvolver modelo experimental de DHA que seja reprodutível e de baixo custo, avaliar a indução de disbiose intestinal, através da análise da composição e diversidade da microbiota entérica, e estimar sua relação com a lesão hepática. Métodos: Foram randomizados 24 ratos Wistar machos em três grupos experimentais: controle (CONT; n=8), alimentados com ração padrão e água com 0,05% de sacarina sódica ad libitum por 4 semanas; álcool 4 (ALC4; n=8), que receberam semente de girassol e etanol a 10% com 0,05% de sacarina sódica ad libitum por 4 semanas; e álcool 8 (ALC8; n=8) que receberam semente de girassol e etanol a 10% com 0,05% de sacarina sódica ad libitum por 8 semanas. Os animais dos grupos ALC4 e ALC8 receberam, por gavagem, 9 horas antes da eutanásia, sobrecarga alcoólica (5g/kg); os animais do grupo CONT receberam água estéril pela mesma via. Foram coletados dados de ingestão alimentar, peso e altura dos animais para avaliação de consumo alimentar e cálculo do índice de Lee; soro e fígado para avaliação bioquímica e de marcadores inflamatórios; e fezes para análise da microbiota intestinal. Todos os procedimentos foram aprovados pela Comissão de Ética para Uso de Animais do HCPA (n° 2018-0257). Resultados: Todos os animais completaram o período de experimentação antes da sobrecarga alcoólica. O consumo total de calorias, líquidos, alimentos sólidos, carboidratos e proteínas foi menor nos grupos ALC4 e ALC8 que nos animais CONT (p

Orientadores: Sidney Figueroba Raimundo, Francisco Carlos Groppo Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba Resumo: O desenvolvimento de osteoartrite (OA) leva a degeneração articular, e o da artrite reumatoide (AR) pode causar destruição da superfície articular. Alguns estudos demonstraram os efeitos benéficos dos ácidos graxos poli-insaturados ômega-3 ('omega'3), no processo inflamatório da articulação temporomandibular (ATM). O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do 'omega'3 na ATM de ratos com OA e AR. A OA foi induzida com CFA+colágeno bovino tipo II (CII) injetados diretamente na ATM e a AR injetado diretamente na ATM e na base da cauda dos ratos. Foram tratados 36 ratos adultos por gavagem e divididos aleatoriamente em 6 grupos. Ensaio 1 - G1: Controle – Injeção de 50 µL de NaCl 0,9% na base da cauda e em cada ATM, tratado com NaCl; G2: OA – Injeção de 50 µL de CFA+CII em cada ATM, tratado com NaCl; G3: OA+AR – Injeção de 100 µL de CFA+CII na base da cauda e de 50 µL de CFA+CII em cada ATM, tratado com NaCl... O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: The development of osteoarthritis (OA) leads to joint degeneration, and that of rheumatoid arthritis (RA) leads to destruction of the joint surface. Some studies have demonstrated the beneficial effects of omega 3 polyunsaturated fatty acids ('omega'3) on the TMJ inflammatory process. The aim of this study was to evaluate the effect of 'omega'3 on the TMJ of rats with OA and RA. OA was induced with FCA and bovine collagen type II (CII) injected directly into the TMJ and RA injected directly into the TMJ and base of the tail. 36 adult rats were treated by gavage and randomly divided into 6 groups. Test 1- G1: Control – Injection of 50 µL of 0.89% NaCl at the base of the tail and in each TMJ, treated with NaCl; G2: OA – Injection of 50 µL of CFA + CII in each TMJ, treated with NaCl; G3: OA+RA – Injection of 100 µL of CFA + CII at the base of the tail and 50 µL of CFA+CII in each TMJ, treated with NaCl... The abstract is available with the full electronic document Mestrado Farmacologia, Anestesiologia e Terapêutica Mestra em Odontologia CNPQ 400957/2016-7

O Transtorno de Déficit de Atenção e Hiperatividade (TDAH) é um transtorno do neurodesenvolvimento caracterizado por sintomas de desatenção, hiperatividade e impulsividade, com a hiperatividade mais frequente em meninos e a desatenção mais frequente em meninas. Alterações no desenvolvimento cerebral e nos sistemas dopaminérgico e noradrenérgico já foram reportadas como alterações fisiopatológicas no TDAH. Do ponto de vista funcional, é sugerido que alterações nas oscilações cerebrais entre os hemisférios podem desempenhar um papel na neurobiologia não só do TDAH, mas de transtornos psiquiátricos em geral. Porém, elas foram pouco estudadas abordando diferenças sexuais. Nosso objetivo foi investigar as alterações comportamentais e avaliar as assimetrias nas oscilações cerebrais e neuroquímicas em ambos os sexos em um dos modelos murinos mais utilizados para o estudo do TDAH, os animais SHR (ratos espontaneamente hipertensos, do inglês Spontaneously Hypertensive Rats). Ratos machos e fêmeas das linhagens do modelo do TDAH e controle Wistar Kyoto (KYO) foram submetidos à cirurgia para implantação de eletrodos superficiais para os registros eletroencefalográficos (EEG) entre os dias pós-natal (DPN) 48-52. Após 7 dias de recuperação, nos DPN 55-59, foram realizados os registros do EEG concomitantemente com a análise da atividade locomotora e exploratória pela exposição ao aparato de campo aberto por 20 minutos. Após a realização da tarefa, os animais foram eutanasiados e foram avaliados os imunoconteúdos do transportador de dopamina (DAT), do transportador de noradrenalina (NET) e da proteína sináptica sinaptofisina, e de forma separada nos hemisférios cerebrais direito (HD) e esquerdo (HE) do córtex frontal e do hipocampo. Os dados foram analisados por ANOVA de duas vias, por teste t pareado ou pelo teste de Wilcoxon. Os animais SHR apresentaram um aumento da distância percorrida e da velocidade média no campo aberto, além de maior número de paradas, rearings e groomings. No EEG, as fêmeas SHR exibiram maior potência de ondas alfa, beta e gama no HD do córtex frontal em relação ao HE. O imunoconteúdo de NET dos ratos KYO de ambos os sexos apresentou aumento no HD do córtex frontal em relação ao HE, e nenhuma outra assimetria foi encontrada para o córtex frontal e hipocampo de ambas as linhagens. As assimetrias encontradas no padrão do EEG nas fêmeas do modelo animal do transtorno são descritas nas comorbidades envolvendo transtornos de humor, como depressão e ansiedade. Estes achados podem corroborar com os dados clínicos em que meninas diagnosticadas com TDAH apresentam transtornos de humor como comorbidades com uma maior frequência que meninos. Nossos resultados revelaram dimorfismo sexual nas assimetrias das oscilações cerebrais no modelo do TDAH. Entretanto, os sistemas de neurotransmissão mais afetados no TDAH não apresentaram assimetrias e, portanto, é fundamental para a compreensão da heterogeneidade dos sintomas conhecer o substrato neurobiológico envolvido nessas alterações eletroencefalográficas observadas nas fêmeas do modelo do TDAH. Nossos dados sugerem que as diferenças de sexo presentes no TDAH podem ser influenciadas por assimetrias cerebrais e reforçam a necessidade de futuras investigações sobre o fenótipo. Attention-Deficit/Hyperactivity Disorder (ADHD) is a neurodevelopmental disorder characterized by hyperactivity, impulsivity and inattention with sex differences in the symptom’s presentation. Dopaminergic and noradrenergic systems dysfunction have been implicated in the ADHD etiology. Electroencephalography has been used as a potential biomarker in neuropsychiatric disorders. In this sense, alterations in the brain oscillations pattern have been documented in ADHD patients, but interhemispheric analysis considering sex differences have not been investigated yet. In this work, asymmetries in brain oscillations were investigated over the course of locomotor activity as well as the immunocontent of dopamine (DAT) and norepinephrine (NET) transporters in both sexes of an ADHD animal model. Adolescent Spontaneously hypertensive rats (SHR, used as ADHD model) and Wistar Kyoto rats (KYO, used as control strain). Electroencephalographic recordings were obtained from superficial electrodes implanted in the frontal and parietal cortex during the open field task. Right (RH) and left (LH) hemispheres from frontal cortex and hippocampus were separated for quantification of DAT, NET, and synaptophysin protein immunocontent. In the open field task, the ADHD rat model exhibited hyperlocomotion by an increased distance traveled, mean speed, number of stops, rearing, and grooming. In the frontal cortex, females from the ADHD model showed asymmetries in alpha, beta, and gamma with higher power in the RH than in the LH. NET immunocontent was increased in the frontal cortex of the RH compared to the LH in the control strain (KYO). Our findings revealed that DAT and NET were not associated with the inter hemispheric asymmetries in brain oscillations observed in females from the ADHD model. Considering that EEG asymmetries described were similar to those found in mood disorders such as depression and anxiety, our data suggest that these sex differences may be relevant for the neurobiology of the ADHD and its comorbidities, reinforcing the need for future research on the phenotype.

Introdução: A constituição da memória se dá através de fases diante de estímulos variados. O som constitui importante fonte de tal estimulação. A extinção, com a qual informações anteriormente estabelecidas são suprimidas, representa um novo processo de aprendizagem. Objetivo: Investigar a possível interferência da Sonata K448 de Mozart na extinção da memória de medo ao som. Métodos: Foram utilizados camundongos da linhagem C57BL/6J, divididos em: G1: Mozart (n=7); G2: Ambiente (n=6); e G3: Controle (n=6). Apenas o grupo G1 foi exposto à música a partir da vida intrauterina. Nos dias 50º ao 53º após o nascimento, os animais foram submetidos à Habituação. No 54º dia, realizou-se um Treino Aversivo com G1 e G2. No 55º dia, iniciou-se o Teste de Extinção por doze dias consecutivos com os três grupos. No 81º dia, todos os grupos passaram pelo Teste de Recordação. Os testes foram gravados em vídeo para análise. Os dados foram analisados pelo teste ANOVA de medidas repetidas, sendo considerados significativos p≤0,05. Resultados: Não foi observado efeito principal dos grupos (F(2;16)=2,70; p=0,098), assim como não foi verificada interação grupo x dia (F(2,16;17,30)=1,58; p=0,147). Conclusão: Embora não se tenha observado diferença estatisticamente significativa entre os grupos, futuros estudos com amostras maiores podem ser oportunos para elucidar melhor a influência da música na memória. Introduction: The process of memory occurs through phases due to various stimuli. Sound is an important source of such stimulation. Extinction, with which previously established information is suppressed, represents a new learning process. Objective: To investigate the interference of Mozart's Sonata K448 in the extinction of the memory of fear of the sound. Methods: C57BL/6J mice were used, divided into: G1: Mozart (n=7); G2: Environment (n=6); and G3: Control (n=6). Only the G1 group was exposed to music from intrauterine life onwards. On days 50 to 53 after birth, the animals were subjected to Habituation. On the 54th day, an Aversive Training was performed only with G1 and G2. On the 55th day, the Extinction Test started, lasting twelve consecutive days with the three groups. On the 81st day, all groups passed the Recall Test. The tests were videotaped for analysis. Data were analyzed using the repeated measures ANOVA test, with p≤0.05 being considered significant. Results: There was no groups main effect (F(2;16)=2,70; p=0,098), nor an interaction between groups x days (F(2,16;17,30)=1,58; p=0,147). Conclusion: Although no statistically significant difference was observed between the groups, future studies with larger samples may be opportune to better elucidate the influence of music on memory. Introducción: La constitución de la memoria se da por fases ante diversos estímulos. El sonido es una fuente importante de tal estimulación. La extinción, con la que se suprime la información previamente establecida, representa un nuevo proceso de aprendizaje. Objetivo: Investigar la posible interferencia de la Sonata K448 de Mozart en la extinción de la memoria del miedo al sonido. Métodos: se utilizaron ratones C57BL/6J divididos en: G1: Mozart (n=7); G2: Ambiente (n=6); y G3: Control (n=6). Solo el grupo G1 estuvo expuesto a la música de la vida intrauterina. En los días 50 a 53 después del nacimiento, los animales fueron sometidos a Habituación. El día 54 se realizó un Entrenamiento Aversivo con G1 y G2. El día 55 se inició el Test de Extinción durante doce días consecutivos con los tres grupos. El día 81, todos los grupos pasaron la Prueba de Recordación. Las pruebas fueron grabadas en video para su análisis. Los datos fueron analizados mediante la prueba ANOVA de medidas repetidas, considerándose significativo p≤0,05. Resultados: No hubo efecto principal de los grupos (F(2;16)=2.70; p=0.098), así como tampoco hubo interacción grupo x día (F(2.16;17.30)=1.58 ; p=0.147). Conclusión: Aunque no se observó una diferencia estadísticamente significativa entre los grupos, futuros estudios con muestras más grandes pueden ser oportunos para dilucidar mejor la influencia de la música en la memoria.