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Pheretima posthuma (Vaillant, 1868), a native earthworm of Pakistan and Southeast Asia, has wide utilization in vermicomposting and bioremediation process. In this study, P. posthuma coelomic fluid (PCF) and body paste (PBP) was evaluated as antibacterial agent against ampicillin (AMP) resistant five Gram positive and four Gram negative clinical isolates. The antibacterial effect of different doses (i.e. 25-100 µg/ml) of PCF and PBP along with AMP and azithromycin (AZM) (negative and positive controls, respectively) were observed through disc diffusion and micro-dilution methods. All nine clinical isolates were noticed as AMP resistant and AZM sensitive. Antibacterial effects of PCF and PBP were dose dependent and zone of inhibitions (ZI) against all clinical isolates were between 23.4 ± 0.92 to 0 ± 00 mm. The sensitivity profile of PCF and PBP against clinical isolates was noticed as 44.44 and 55.56%, respectively. Both PCF and PBP showed bacteriostatic (BTS) action against S. aureus, S. pyogenes, K. pneumonia, N. gonorrhoeae. Moreover, the cumulative BTS potential of PCF and PBP against all isolates was 66.67 and 55.56%, respectively. The MICs of PCF and PBP were ranged from 50-200 µg/ml against selected isolates. The bacterial growth curves indicated that PCF and PBP inhibited the growth of all isolates at their specific MIC concentrations. However, PBP has better antibacterial potential compared to PCF against selected isolates. Therefore, it is concluded that both PCF and PBP of P. posthuma possess antibacterial and BTS potential against ampicillin resistant clinical isolates. This organism might be considered as a second choice of antibacterial agents and can further be utilized in pharmaceutical industries for novel drug manufacturing by prospecting bioactive potential agents. Resumo Pheretima posthuma (Vaillant, 1868), uma minhoca nativa do Paquistão e sudeste da Ásia, tem ampla utilização em processos de vermicompostagem e biorremediação. Neste estudo, o fluido celômico de P. posthuma (PCF) e a pasta corporal (PBP) foram avaliados como agente antibacteriano contra cinco isolados clínicos Gram-positivos e quatro Gram-negativos resistentes à ampicilina (AMP). O efeito antibacteriano de diferentes doses (ou seja, 25-100 µg / ml) de PCF e PBP juntamente com AMP e azitromicina (AZM) (controles negativo e positivo, respectivamente) foi observado por meio de métodos de difusão em disco e microdiluição. Todos os nove isolados clínicos foram notados como resistentes a AMP e sensíveis a AZM. Os efeitos antibacterianos de PCF e PBP foram dependentes da dose e a zona de inibição (ZI) contra todos os isolados clínicos foi entre 23,4 ± 0,92 a 0 ± 00 mm. O perfil de sensibilidade do PCF e PBP contra isolados clínicos foi observado como 44,44% e 55,56%, respectivamente. Tanto o PCF quanto o PBP mostraram ação bacteriostática (BTS) contra S. aureus, S. pyogenes, K. pneumonia, N. gonorrhoeae. Além disso, o potencial BTS cumulativo de PCF e PBP contra todos os isolados foi de 66,67% e 55,56%, respectivamente. Os MICs de PCF e PBP variaram de 50-200 µg / ml contra isolados selecionados. As curvas de crescimento bacteriano indicaram que o PCF e o PBP inibiram o crescimento de todos os isolados em suas concentrações específicas de MIC. No entanto, PBP tem melhor potencial antibacteriano em comparação com PCF contra isolados selecionados. Portanto, conclui-se que tanto o PCF quanto o PBP de P. posthuma possuem potencial antibacteriano e BTS contra isolados clínicos resistentes à ampicilina. Esse organismo pode ser considerado como uma segunda escolha de agentes antibacterianos e pode ainda ser utilizado nas indústrias farmacêuticas para a fabricação de novos medicamentos por meio da prospecção de agentes com potencial bioativo.

The Brazilian propolis market has expanded greatly, leading the processing sector to pursue the best way to produce extracts with biological activities. The purpose of this research was to optimize the green propolis extraction by the antifungal activity and perform incorporation into a chitosan biofilm. The extracts were prepared using ethanol, acetone, ethyl acetate and isopropanol according to the three designs. The minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum fungicidal concentration (MFC) were determined against Candida albicans, Candida tropicalis e Candida glabrata. From the MIC, the response surface analysis was carry out to find the optimal conditions for the extraction for each design. The optimized extracts were incorporate into chitosan biofilm that were subsequently evaluate for thickness, water vapor permeation, water solubility and anti-Candida activity. It was establish that all extracts tested showed antifungal activity against the three Candida species. The extract obtained with acetone/ethanol stood out because it presented the lowest values of MIC and MFC (0.76 – 2.50 mg/mL). It was observe that the optimal extraction points of each design were the blend of acetone/isopropanol, acetone/ethanol and ethyl acetate/isopropanol yet the biofilms incorporated with these extracts showed few differences in thickness, vapor permeability and water solubility in relation to the control design. The biofilm obtained by acetone/isopropanol displayed the higher activity anti-Candida. This results show the importance of optimizing propolis processes for the application and product development. O mercado de própolis brasileiro sofreu grande expansão, levando o setor de beneficiamento a buscar a melhor forma de produzir extratos com atividades biológicas. O objetivo deste trabalho foi otimizar a extração de própolis verde pela atividade antifúngica e realizar a incorporação em um biofilme de quitosana. Os extratos foram preparados utilizando etanol, acetona, acetato de etila e isopropanol, de acordo com três planejamentos, e a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração fungicida mínima (CFM) foram determinadas contra Candida albicans, Candida tropicalis e Candida glabrata. A partir da CIM, realizou-se a análise de superfície de resposta, para encontrar as condições ótimas de extração para cada planejamento. Os extratos otimizados foram incorporados em biofilmes de quitosana que, posteriormente, foram avaliados quanto a espessura, permeação de vapor de água, solubilidade em água e atividade anti-Candida. Verificou-se que todos os extratos testados apresentaram atividade antifúngica contra as três espécies de Candida. Destacou-se o extrato obtido com acetona/etanol que apresentou os menores valores de CIM e CFM (0,76 - 2,50 mg/mL). Observou-se que os pontos ótimos de extração de cada planejamento foram as misturas de: acetona/isopropanol, acetona/etanol e acetato de etila/isopropanol e os biofilmes incorporados com estes extratos mostraram poucas diferenças de espessura, permeabilidade de vapor e solubilidade em água em relação ao controle. O biofilme contendo extrato obtido por acetona/isopropanol foi o que demonstrou maior atividade anti-Candida. Estes resultados mostram a importância da otimização dos processos de extração de própolis para aplicação e desenvolvimento de produtos.

Made available in DSpace on 2021-06-25T10:23:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2021-01-01 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Strawberry is a highly desirable fruit with a unique taste and a good source of bioactive compounds beneficial to human health. However, it has a short post-harvest shelf life, mainly due to the soft rot caused by Rhizopus stolonifer. This study aimed to evaluate the antimicrobial properties of essential oils (EOs) of Mentha piperita, Cymbopogon martinii, Cinnamomum camphora, and Mentha spicata using spore germination and micro-well dilution assays, and to test the effects of the vaporphase application of M. spicata and C. martini on the incidence and severity of soft rot in strawberry artificially inoculated with R. stolonifer. In in vitro tests, C. martinii and M. spicata EOs were the most effective, inhibiting more than 95% of the spore germination. Additionally, in the microwell dilution test, these EOs had the lowest minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) (5 and 10 μg/mL, respectively), and for the microwell dilution test, the lowest MIC (5 μg/mL and 10 μg/mL, respectively) and MFC (10 μg/mL for both). High in vivo inhibitory effects of M. spicata and C. martinii EOs were observed at 10% concentration, with 100 and 78% reduction, respectively, in the R. stolonifer-induced spoilage. Our results suggest that C. martinii and M. spicata EOs can be used as efficient natural fungicides and can be an alternative to synthetic fungicides for preserving fresh strawberries from soft rot. São Paulo State University (UNESP) School of Pharmaceutical Sciences Department of Biotechnology Federal University of São Carlos Goiano Federal Institute of Education Science and Technology Brazilian Agricultural Research Corporation Embrapa Agroindústria Tropical Brazilian Agricultural Research Corporation Embrapa Instrumentação São Paulo State University (UNESP) School of Pharmaceutical Sciences CNPq: (302381/2016-3 CAPES: 001 CNPq: 101117/2018-3 FAPESP: 2018/24612-9 CNPq: 407956/2016-6

Mikania hirsutíssima (family), commonly known in Brazil by the name of "cipó-cabeludo", is widely used in folk medicine. The antimicrobial activities have already been investigated, however, no studies have been carried out to evaluate the plant's antifungal activities. Therefore, the objective of this work was to evaluate the antifungal activity of Mikania cf hirsutissima extract in clinical isolates and standard strains of Candida albicans resistant to fluconazole and itraconazole. After the collection of Mikania cf hirsutissima, it was dried, crushed and weighed, leaving the material on waste in absolute alcohol. After the rest, the crude extract of the stem and leaf was obtained. Clinical isolates of Candida albicans and standard strains were used. Different ethanolic concentrations of leaves and stems were used. To determine the in vitro antioxidant activity of the ethanol extract, the DPPH free radical method was applied. The antifungal activity of ethanolic extracts in Candida albicans strains showed satisfactory results, where the 100 mg/mL stem extract showed average halos of 4.5 mm. All strains were resistant to the antifungals itraconazole and fluconazole. The extract concentrations tested for the evaluation of antioxidant activity showed antioxidant capacity compared to the standard of BHA. The results showed antifungal activity in Candida albicans isolates, where all parts showed fungicidal potential, even in those resistant to Fluconazole and Itraconazole. Thus, the positioning of these compounds in clinical practice may contribute to expand the possibilities of treating infections caused by this species of yeast. Mikania hirsutíssima (familia), comúnmente conocida en Brasil con el nombre de "cipó-cabeludo", es ampliamente utilizada en la medicina popular. Las actividades antimicrobianas ya han sido investigadas, sin embargo, no se han realizado estudios para evaluar las actividades antifúngicas de la planta. Por tanto, el objetivo de este trabajo fue evaluar la actividad antifúngica del extracto de Mikania cf hirsutissima en aislados clínicos y cepas estándar de Candida albicans resistentes a fluconazol e itraconazol. Después de la colecta de Mikania cf hirsutissima, se secó, trituró y pesó, dejando el material de desecho en alcohol absoluto. Luego del reposo se obtuvo el extracto crudo de tallo y hoja. Se utilizaron aislados clínicos de Candida albicans y cepas estándar. Se utilizaron diferentes concentraciones etanólicas de hojas y tallos. Para determinar la actividad antioxidante in vitro del extracto etanólico se aplicó el método de radicales libres DPPH. La actividad antifúngica de los extractos etanólicos en cepas de Candida albicans mostró resultados satisfactorios, donde el extracto de tallo de 100 mg/mL presentó halos promedio de 4,5 mm. Todas las cepas fueron resistentes a los antifúngicos itraconazol y fluconazol. Las concentraciones de extracto probadas para la evaluación de la actividad antioxidante mostraron capacidad antioxidante en comparación con el estándar de BHA. Los resultados mostraron actividad antifúngica en aislamientos de Candida albicans, donde todas las partes mostraron potencial fungicida, incluso en aquellas resistentes a Fluconazol e Itraconazol. Así, el posicionamiento de estos compuestos en la práctica clínica puede contribuir a ampliar las posibilidades de tratamiento de infecciones causadas por esta especie de levadura. Mikania hirsutíssima (família), comumente conhecida no Brasil pelo nome de "cipó-cabeludo", é amplamente utilizada na medicina popular. As atividades antimicrobianas já foram investigadas, entretanto, nenhum estudo foi realizado para avaliar atividades antifúngicas da planta. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antifúngica do extrato de Mikania cf hirsutissima em isolados clínicos e cepas padrão de Candida albicans resistentes ao fluconazol e itraconazol. Após a coleta da Mikania cf hirsutissima foi realizada a secagem, trituração e pesagem, deixando o material em refugo em álcool absoluto. Posteriormente ao descanso ocorreu a obtenção do extrato bruto do caule e da folha. Foram utilizados isolados clínicos de Candida albicans e cepas padrão. Diferentes concentrações etanólicas de folhas e caule foram utilizadas. Para determinar a atividade antioxidante in vitro do extrato etanólico aplicou-se o método do radical livre DPPH. A atividade antifúngica dos extratos etanólicos em cepas de Candida albicans apresentou resultados satisfatórios, onde o extrato do caule de 100 mg/mL apresentou halos médios de 4,5 mm. Todas as cepas eram resistentes aos antifúngicos itraconazol e fluconazol. As concentrações de extrato testadas para avaliação da atividade antioxidante mostraram capacidade antioxidante em comparação com o padrão de BHA. Os resultados demonstraram atividade antifúngica em isolados de Candida albicans, onde todas as partes apresentaram potencial fungicida, mesmo naqueles resistentes ao Fluconazol e Itraconazol. Assim, o posicionamento desses compostos na prática clínica pode contribuir para ampliar as possibilidades de tratamento de infecções causadas por essa espécie de leveduras.

Staphylococcus is one of the most frequent etiological agents of bovine mastitis, causing economic losses to milk farming. This study aimed to describe the milk production and management practices in 15 herds located in three microregions of the State of Rondônia and to identify the antimicrobial resistance profile of 97 isolates of the genus Staphylococcus from these herds. The isolates were subjected to antimicrobial susceptibility tests using the agar diffusion method. Twenty-nine S. aureus isolates were selected to determine their minimum inhibitory concentration (MIC). In the farms studied, the breeding system was semi-intensive, with the Girolando breed being predominant. Milking was performed predominantly using a mechanical milking system (86.7%), twice a day (66.7%), in the presence of the calf (53.8%). The average number of lactating cows in the farms was 24, with an average milk production of 204.9 L d-1 and a milk productivity of 10.2 L animal-1 d-1. The use of antimicrobials for the treatment and prevention of bovine mastitis was reported for all properties, and therapy for dry cows was adopted in 80% of the herds. The percent susceptibility to antimicrobials ranged from 85.5% to 100% for S. aureus, 22.2% to 88.9% for coagulase-positive staphylococci (CPS), and 69.2% to 100% for coagulase-negative staphylococci (CNS), with the highest resistance frequencies for penicillin, ampicillin, and tetracycline. Among the S. aureus isolates, 100% susceptibility to oxacillin, cefalexin, and gentamicin was observed, and among the CNS isolates, 100% susceptibility to gentamicin was observed. None of the antimicrobials tested showed 100% in vitro effectiveness for CPS. CPS and CNS presented lower percentages of susceptibility to penicillin, ampicillin, and tetracycline than the S. aureus isolates. Twelve resistance patterns were detected, six of which were multiresistance patterns. The most prevalent resistance patterns were penicillin and ampicillin (PEN-AMP) and penicillin, ampicillin, and tetracycline (PEN-AMP-TET). Results of the MIC assay revealed that all 29 S. aureus isolates were susceptible to cephalothin, cefoxitin, tetracycline, and erythromycin, whereas 25 (86.2%) were susceptible to penicillin. RESUMO - O gênero Staphylococcus destaca-se como um dos agentes etiológicos mais frequentes da mastite bovina, causando prejuízos econômicos à pecuária de leite. Este estudo teve o objetivo de descrever a produção de leite e práticas de manejo de 15 rebanhos localizados em três microrregiões do Estado de Rondônia, e identificar o perfil de resistência aos antimicrobianos de 97 isolados do gênero Staphylococcus provenientes destes rebanhos. Os isolados foram submetidos a testes de suscetibilidade a antimicrobianos, utilizandose a técnica de difusão em ágar. Foram selecionados 29 isolados de Staphylococcus aureus (S. aureus) para determinação da concentração inibitória mínima (CIM). Nas propriedades estudadas, o sistema de criação era semi-intensivo, com predomínio da raça Girolando. A ordenha era realizada predominantemente em sistema de ordenha mecânica (86,7%), duas vezes ao dia (66,7%) e com a presença do bezerro (53,8%). A média do número de vacas em lactação das propriedades era de 24 animais, com média de produção de leite de 204,9 L d-1 e produtividade de leite de 10,2 L animal-1 d-1. O uso de antimicrobianos para o tratamento e prevenção da mastite bovina foi relatado em todas as propriedades, sendo adotada a terapia da vaca seca em 80% dos rebanhos. A percentagem de susceptibilidade aos antimicrobianos variou de 85,5 a 100% para S. aureus, 22,2 a 88,9% para Staphylococcus coagulase positivos (SCP) e 69,2 a 100% para Staphylococcus coagulase negativos (SCN), sendo as maiores frequências de resistência para penicilina, ampicilina e tetraciclina. Entre os isolados de S. aureus foi observada 100% de susceptibilidade aos antimicrobianos oxacilina, cefalexina e gentamicina, e entre os isolados de SCN, 100% de susceptibilidade à gentamicina. Nenhum dos antimicrobianos testados apresentou 100% de efetividade in vitro para SCP. SCP e SCN apresentaram menores percentagens de susceptibilidade à penicilina, ampicilina e tetraciclina do que os isolados de S. aureus. Foram observados 12 padrões de resistência, sendo seis padrões de multirresistência. Os padrões de resistência mais prevalentes foram resistência à penicilina e ampicilina (PEN-AMP) e à penicilina, ampicilina e tetraciclina (PEN-AMP-TET). A determinação da CIM dos 29 isolados de S. aureus mostraram que todos foram susceptíveis à cefalotina, cefoxitina, tetraciclina e eritromicina, e 25 (86,2%) foram susceptíveis à penicilina. Made available in DSpace on 2022-05-03T21:12:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Antimicrobial-resistance.pdf: 228790 bytes, checksum: 6a53e48a68cd5fd21a1f6b4ab4dd8e0d (MD5) Previous issue date: 2022 Short communications.

The medicinal species Glechon spathulata Benth, belonging to the family Lamiaceae, known as the "Mangeroninha-do-campo". The objective of the study was to evaluate the antimicrobial activity of the crude extract and fractions obtained in open - column chromatography of G. spathulata through the broth microdilution method, to test against different gram positive and gram-negative bacteria. According to the results obtained, the greatest inhibitory potential occurred against gram negative bacteria. The fractions C and E, G fraction and crude extract presented better results against gram negative bacteria, and the highest inhibitory potential occurred in relation to the two strains of Escherichia coli (ATCC 35218 and ATCC 25922). The crude extract and C and F fractions showed a greater inhibitory effect against Salmonella tiphymurium ATCC 52117. There was also an inhibitory potential against Staphylococcus aureus strains ATCC 25923, both for the crude extract, as well as fractions C and B And fractions F and G. Inhibition of Staphylococcus epidermidis strains ATCC 12228 occurred only in crude extract and ethyl acetate fractions. Both the crude extract and the fractions of G. spathulata presented a potential antibacterial activity. The extract and the fractions presented better activity against the strain of Salmonella tiphymurium when compared to studies that used the same plant and plants of the same family. This study showed that both the crude extract and some fractions of Glechon spathulata Benth are potential candidates for the development of new antimicrobial agents. La especie medicinal Glechon spathulata Benth perteneciente a la familia Lamiaceae, conocida como “Manjeroninha-do-campo”. El objetivo del estudio fue evaluar la actividad antimicrobiana del extracto crudo y fracciones obtenidas por cromatografía en columna abierta) de G. spathulata mediante el método de microdilución en caldo, para contrastar diferentes bacterias gram positivas y gram negativas. Según los resultados obtenidos, el mayor potencial inhibitorio se presentó frente a bacterias gram negativas. Las fracciones C y E, la fracción G y el extracto crudo mostraron mejores resultados contra bacterias gramnegativas, con el mayor potencial inhibitorio ocurriendo contra las cepas de Escherichia coli (ATCC 35218 y ATCC 25922). El extracto crudo y las fracciones C y F mostraron un mayor efecto inhibidor frente a Salmonella tiphymurium ATCC 52117. También existió un potencial inhibitorio frente a cepas de Staphylococcus aureus ATCC 25923, tanto para el extracto crudo como para las fracciones C y B y fracciones F y G. La inhibición de las cepas de Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 se produjo sólo en el extracto crudo y en las fracciones de acetato de etilo. Tanto el extracto crudo como las fracciones de G. spathulata mostraron una potencial actividad antibacteriana. El extracto y las fracciones mostraron una mejor actividad contra la cepa de Salmonella tiphymurium en comparación con los estudios que utilizaron la misma planta y plantas de la misma familia. Este estudio mostró que tanto el extracto crudo como algunas fracciones de Gelchon spathulata Benth son candidatos potenciales para el desarrollo de nuevos agentes antimicrobianos. A espécie medicinal Glechon spathulata Benth pertencente à família Lamiaceae, conhecida como “Manjeroninha-do-campo”. O objetivo do estudo, foi avaliar a atividade antimicrobiana do extrato bruto e frações obtida em cromatografia em coluna aberta de G. spathulata através do método de microdiluição em caldo, para testar frente a diferentes bactérias gram positivas e gram negativas. De acordo com os resultados obtidos, o maior potencial inibitório ocorreu frente às bactérias gram negativas. As frações C e E, fração G e o extrato bruto apresentaram melhores resultados frente a bactérias gram negativas, sendo que o maior potencial inibitório ocorreu frente às duas cepas de Escherichia coli (ATCC 35218 e ATCC 25922). O extrato bruto e as frações C e F apresentaram um maior efeito inibitório frente à Salmonella tiphymurium ATCC 52117. Também houve um potencial inibitório frente às cepas de Staphylococcus aureus ATCC 25923, tanto pelo extrato bruto, como pelas frações C e B e frações F e G. A inibição das cepas de Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 ocorreu somente no extrato bruto e nas frações de acetato de etila. Tanto o extrato bruto quanto as frações de G. spathulata apresentaram potencial atividade antibacteriana. O extrato e as frações apresentaram melhor atividade frente à cepa de Salmonella tiphymurium quando comparado a estudos que utilizaram a mesma planta e plantas da mesma família. Este estudo mostrou que tanto o extrato bruto, quanto algumas frações de Gelchon spathulata Benth são candidatos potenciais para o desenvolvimento de novos agentes antimicrobianos.

Orientador: Patricia da Silva Melo, Priscyla Daniely Marcato Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Aplicadas Resumo: Com o objetivo de entender melhor a toxicidade das nanopartículas de prata biogênicas, estas foram preparadas utilizando a rota biotecnológica e extracelular com o fungo Fusarium oxysporum. As nanopartículas de prata biogênicas foram caracterizadas por microscopia eletrônica de transmissão (TEM) e absorbância na região do UV/Visível. O tamanho das nanopartículas foi determinado pela a técnica de análise de rastreamento de nanopartículas (NTA) utilizando o equipamento NanoSight, e por espectroscopia de correlação de fótons utilizando o equipamento ZetaSizer. O potencial zeta das partículas também foi avaliado no ZetaSizer. A atividade antimicrobiana, a citotoxicidade e os mecanismos de ação das nanopartículas de prata biogênicas em células V79 também foram investigados. A produção de nanopartículas de prata foi evidenciada pela presença da banda de absorção de plasma ('lâmbda' = 450 nm) e por TEM sendo observadas partículas esféricas com o tamanho de 15-22 nm. A atividade antibacteriana e antifúngica das nanopartículas de prata foi avaliada contra Staphylococcus aureus (MIC 1,47 µg mL-1), Salmonella typhymurium (MIC 0,36 µg mL-1), Escherichia coli (MIC 0,73 µg mL-1), Aspergillus niger (MIC 5,90 µg mL-1) e Trichophytum rubrum (MIC 2,95 µg mL-1). Além disso, a atividade bactericida das nanopartículas de prata foi diminuída na presença de glutationa reduzida, indicando que a eficácia antimicrobiana está provavelmente relacionada com a indução de estresse oxidativo. As nanopartículas de prata exibiram citotoxicidade dose dependente em células V79. Na concentração de 8,49 µg mL-1 as nanopartículas de prata promoveram 51% de morte celular avaliada pela redução do MTT e 37 % em ensaios de DNA. A presença de glutationa (307,3 µg mL-1) aumentou em 17 % a viabilidade celular, atingindo 66% de células viáveis no ensaio MTT e em 25 % no ensaio de DNA, atingindo 88% de células viáveis. Estes resultados podem indicar que os efeitos citotóxicos induzidos pelo tratamento de nanopartículas de prata biogênicas podem estar relacionadas com o estresse oxidativo. Este efeito pode ser muito importante na terapia de câncer e de antibióticos, e também para tratamento de doenças neurodegenerativas entre outras Abstract: Aiming to understand better the toxicity of biogenic silver nanoparticles, these were prepared using biotechnological extracellular route and fungus Fusarium oxysporum. biogenic silver nanoparticles were then characterized by transmission electron microscopy and UV/Vis. Their size and zeta potential were determined using the nanoparticle tracking analysis software by Nanosight, photon correlation spectroscopy and zeta potential techniques. The antimicrobial activity, cytotoxicity and in vitro mechanism of biogenic silver nanoparticles action in V79 cells were also investigated. The biogenic silver nanoparticles production was evidenced by the presence of the plasmon absorption band ('lâmbda'= 450 nm) and spherical particles with the size of 15-22 nm were obtained. The biogenic silver nanoparticles antimicrobial and antifungal activity against Staphylococcus aureus (MIC 1.47 'mu'g mL-1), Salmonella typhymurium (MIC 0.36 'mu'g mL-1), Escherichia coli (MIC 0.73 ?g mL-1), Aspergillus niger (MIC 5.90 ?g mL-1) and Trichophytum rubrum (MIC 2.95 'mu'g mL-1) were measured. Furthermore, the bactericidal activity of AgNPbio decreased in the presence of reduced glutathione (GSH) indicating that antimicrobial effectiveness is probably related to oxidative stress induction. The biogenic silver nanoparticles exhibited cytotoxicty in some extent regarding V79 cells. At the concentration of 8.49 'mu'g mL-1 biogenic silver nanoparticles provoked 51% cell death in the MTT and 37% in DNA assays. The presence of glutathione (GSH, 307.3 ng mL-1) increased 17% cell viability on MTT and 25% on DNA assays. Obtained results may point out that the cytotoxic effects induced by biogenic silver nanoparticles treatment could be related to the oxidative stress. This effect can be very important in the cancer and antibiotic therapy and also for neurodegenerative and many other diseases treatments Mestrado Metabolismo e Biologia Molecular Mestra em Ciências da Nutrição e do Esporte e Metabolismo

Orientador: Fabiana Fantinatti-Garboggini Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Nas últimas décadas um grande número de compostos de interesse biotecnológico, como por exemplo, citotoxinas, agentes antifúngicos, antimicrobianos, antivirais e anticancerígenos têm sido isolados de esponjas marinhas. Entretanto, estudos comprovam que, em muitos casos, os compostos ativos desses animais são oriundos de micro-organismos associados, que podem compor até 60% do volume tecidual das esponjas. A presente proposta teve por objetivo a caracterização taxonômica da diversidade de bactérias cultiváveis associadas às esponjas coletadas no litoral norte do estado de São Paulo, Brasil, e a avaliação da atividade antimicrobiana a partir de extratos orgânicos brutos dessas bactérias. Um total de 86 bactérias foi recuperado das esponjas Axinella corrugata, Dragmacidon reticulata, Chelonaplysilla erecta e Petromica citrina utilizando diferentes meios de cultivo. A diversidade das bactérias foi caracterizada utilizando dados de morfologia, ARDRA (Amplified Ribossomal Restriction Analysis) e sequenciamento do gene RNA ribossomal 16S, cuja análise permitiu a identificação de membros pertencentes aos filos Proteobacteria, Actinobacteria, Bacteroidetes e Firmicutes num total de 15 gêneros distintos. O gênero Pseudovibrio foi o único presente em todas as esponjas amostradas, e os gêneros Bacillus, Ruegeria, Vibrio, Staphylococcus e Erythrobacter estavam presentes em mais de uma esponja. A esponja Dragmacidon reticulata apresentou a maior diversidade bacteriana, englobando oito diferentes gêneros, dentre eles, um representate do gênero Cyclobacterium, o qual até onde se sabe, foi isolado pela primeira vez de uma esponja marinha. O gênero Bacillus esteve presente em três esponjas, mas na Petromica citrina, endêmica do Brasil, o gênero ficou representado em 74% dos isolados obtidos. Este estudo foi o primerio relato sobre a diversidade de bactérias cultiváveis da esponja Petromica critrina. Todos os isolados foram avaliados quanto à presença ou ausência dos fragmentos dos genes PKS (Polyketide Synthases) e NRPS (Non Ribossomal Peptide Synthetases), visando à investigação do potencial biotecnológico das bactérias, e mais da metade delas apresentaram pelo menos um dos genes estudados. Uma triagem da atividade antimicrobiana utilizando o método da difusão em bloco de ágar demonstrou que 21 isolados foram promissores para produção de antimicrobianos. Destes isolados foram obtidos os extratos orgâncios brutos, os quais foram testados quanto à determinação da concentração inibitória mínima contra oito micro-organismos indicadores. Um total de 13 extratos orgânicos brutos, em sua maioria respresentantes do gênero Bacillus, demonstraram ação contra o micro-organismo Bacillus subtilis ATCC 6051 e um deles demonstrou ação contra o micro-organismo Escherichia coli ATCC 11775. A numerosa inibição de estirpes de Bacillus por outros Bacillus sugere que a atividade possa ser gerada por bacteriocinas, polipeptídeos produzidos pela via ribossomal que atuam na inibição de crescimento de grupos próximos de micro-organismos. Sua possível função no meio ambiente é prover vantagem seletiva através da eliminação de um competidor relativamente próximo. Ainda, um representante do gênero Exiguobacterium apresentou atividade antimicrobiana contra B. subtilis, resultado este não descrito até o presente na literatura Abstract: In recent decades a large number of compounds of biotechnological interest, such as cytotoxins, antifungal, antimicrobial, antiviral and anticancer substances have been isolated from marine sponges, however, studies show that, in many cases, the active compounds are actually produced by associated microorganisms, which can comprise up to 60% of the volume of sponge tissue. This proposal aimed to characterize the taxonomic diversity of culturable bacteria associated with sponges collected in the northern coast of São Paulo, Brazil, and to evaluate the antimicrobial activity from crude organic extracts of these bacteria. A total of 86 bacteria were recovered from sponges the Axinella corrugata, Dragmacidon reticulata, Petromica citrina and Chelonaplysilla erecta using different culture media. The diversity of bacteria was characterized using data from morphology, ARDRA (Amplified Ribossomal Restriction Analysis) and sequencing of 16S ribosomal RNA gene, whose analysis allowed the identification of members belonging to the phyla Proteobacteria, Actinobacteria, Bacteroidetes and Firmicutes, in a total of 15 distinct genera. The genus Pseudovibrio was the only one present in all sponges sampled, and the genera Bacillus, Ruegeria, Vibrio, Staphylococcus and Erythrobacter were present in more than one sponge sampled. The sponge Dragmacidon reticulata showed the highest bacterial diversity, encompassing eight different genera, among which the genus Cyclobacterium, which, as far as is known, was first isolated from a marine sponge. The genus Bacillus was present in three sponges, but in Petromica citrina, endemic to Brazil, the genus accounted for 74% of the isolates. This study was the first report on the diversity of culturable bacteria from the sponge Petromica critrina. All isolates were evaluated for the presence or absence of NRPS (non ribossomal peptide synthetases) and PKS (polyketide synthase) genes in order to investigate the biotechnological potential of bacteria, and over half of the isolates had at least one of these genes. A screening of antimicrobial activity using the diffusion agar disk method showed that 21 isolates were promising for the production of antibiotics. Crude organic extracts from these isolates were produced and tested against eight indicator microorganisms to determine the minimum inhibitory concentration (MIC). A total of 13 crude organic extracts, most of the genus Bacillus, showed inhibitory activity against the microorganism Bacillus subtilis ATCC 6051, and one of them showed activity against the microorganism Escherichia coli ATCC 11775. The large inhibition of Bacillus strains to other Bacillus strains suggests that the activity can be generated by bacteriocins produced through ribosomal polypeptides that inhibit close groups of microorganisms. Its possible role in the environment is to provide a selective advantage by eliminating a relatively close competitor. Still, a representative of the genus Exiguobacterium showed antimicrobial activity against B. subtilis, which was not described in the literature up to date Mestrado Microbiologia Mestre em Genética e Biologia Molecular

Western medicine has been trying to use natural means for the treatment of infections caused by bacteria, in this context, it is very noticeable the great interest of therapeutic agents coming from natural products, more specifically those derived from plants. In this sense, a review of the integrative literature on the antimicrobial activity of the essential oil of oregano has been carried out. For this review of integrative literature 24 scientific articles were used. The studies showed that the essential oil of Origanum vulgare L. (Lamiaceae) has been used as an element of scientific research in laboratories as an antimicrobial strategy against innumerable types of bacteria, where its high therapeutic and antimicrobial content has been proven. The essential oil of O. vulgare exposes a variable range of active compounds, being the monoterpenes carvacrol and thymol the majority compounds of this essential oil, which corresponds between 80,2 and 98% of the total composition of this essential oil. In view of this, the results that were described in this review could suggest that the compounds cited have antimicrobial activity, damaging the lipidic plasma membranes, compromising the pH homeostasis and the balance of organic ions, preventing cell division and causing dehydration in bacterial cells. La medicina occidental ha intentado utilizar medios naturales para el tratamiento de las infecciones causadas por bacterias. En este contexto, es muy notable el gran interés de los agentes terapéuticos procedentes de productos naturales, más concretamente los derivados de las plantas. En este sentido, se ha realizado una revisión de la literatura integradora sobre la actividad antimicrobiana del aceite esencial de orégano. Para esta revisión de la literatura integradora se utilizaron 24 artículos científicos. Los estudios demostraron que el aceite esencial de Origanum vulgare L. (Lamiaceae) se ha utilizado como elemento de investigación científica en los laboratorios como estrategia antimicrobiana contra numerosos tipos de bacterias, donde se ha demostrado su alto contenido terapéutico y antimicrobiano. El aceite esencial de O. vulgare expone una gama variable de compuestos activos, siendo los monoterpenos carvacrol y timol los compuestos mayoritarios de este aceite esencial, que corresponde a entre el 80,2 y el 98% de la composición total de este aceite esencial. En vista de esto, los resultados que se describieron en esta revisión pudieron sugerir que los compuestos mencionados tienen actividad antimicrobiana, dañando las membranas plasmáticas lipídicas, comprometiendo la homeostasis del pH y el equilibrio de los iones orgánicos, impidiendo la división celular y causando deshidratación en las células bacterianas. A medicina ocidental vem tentando utilizar meios naturais para o tratamento de infecções causadas por bactérias, diante desse contexto, é muito perceptível o grande interesse de agentes terapêuticos vindo de produtos naturais, mais especificadamente aqueles que são derivados de plantas. Neste sentido, objetivou-se realizar uma revisão de literatura integrativa sobre a atividade antimicrobiana do óleo essencial de orégano. Para esta revisão de literatura integrativa foram utilizados 24 artigos científicos. Os estudos evidenciaram que o óleo essencial de Origanum vulgare L. (Lamiaceae) tem sido usado como um elemento de pesquisas científicas em laboratórios como estratégia antimicrobiana contra inúmeros tipos de bactéria, onde foi comprovado o seu alto teor terapêutico e antimicrobiano. O óleo essencial de O. vulgare expõe uma gama variável de compostos ativos, sendo os monoterpenos carvacrol e timol os compostos majoritários deste óleo essencial, o que corresponde entre 80,2 e 98% da composição total deste óleo essencial. Diante disso, os resultados que foram descritos nessa revisão puderam sugerir que os compostos citados possuem atividade antimicrobiana, lesionando as membranas plasmáticas lipídicas, comprometendo a homeostase do pH e o equilíbrio de íons orgânicos, impedindo a divisão celular e causando desidratação nas células bacterianas.

Resumo: O objetivo deste trabalho foi apresentar uma revisão sobre a atividade do óleo essencial de Cinnamomum. cassia contra Staphylococcus aureus por meio de pesquisas nas bases Web of Science, Science Direct, Scopus, Lilacs e Medline. Para tanto, foram utilizados artigos que abordam os componentes químicos do óleo essencial (OE) de Cinnamomum cassia e sua atividade contra Staphylococcus aureus por meio de dados de diâmetro de inibição, Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Bactericida Mínima (CBM), publicados entre 2011 a 2021. De 98 estudos identificados, 26 preencheram os critérios de inclusão. Os componentes químicos mais comumente encontrados no óleo essencial de C. cassia foram nesta ordem; cinamaldeído, na forma Trans/E, acetato de cinamila/ benzaldeido e cumarina/ eugenol. Os resultados mostraram que a parte da planta mais utilizada para a produção do óleo essencial foi a casca. Os resultados de CIM indicam que a maioria dos trabalhos apresentou atividade antimicrobiana do OE de C. cassia contra S. aureus e tiveram como principal resultado o uso deste óleo como um agente antimicrobiano natural no controle de patógenos de origem alimentar. Nas bases Scopus e Web of Science foi obtido o maior número de artigos. ? Abstract: The aim of this work was to present a review on the activity of Cinnamomum cassia essential oil against Staphylococcus aureus through research in the Web of Science, Science Direct, Scopus, Lilacs and Medline databases. Therefore, articles that address the chemical components of Cinnamomum cassia essential oil and its activity against Staphylococcus aureus were used through inhibition diameter data, Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (CBM), published between 2011 to 2021 Of 98 identified studies, 26 met the inclusion criteria. The chemical components most commonly found in C. cassia essential oil were in this order; Cinnamaldehyde in the form Trans/E, cinnamyl acetate/ benzaldehyde and coumarin/eugenol. The results showed that the most used part of the plant for the production of essential oil was the bark. The MIC results indicate that most of the works showed the antimicrobial activity of C. cassia essential oil against S. aureus and had as main result the use of this oil as a natural antimicrobial agent in the control of foodborne pathogens. The results showed the Scopus and Web of Science as the databases where more articles were found. Made available in DSpace on 2021-12-08T19:01:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Penteado-Avaliacao-oleo-2021.pdf: 441858 bytes, checksum: a1792de9e0678b639c58da984f06b9c7 (MD5) Previous issue date: 2021

Tese de Doutoramento em Ciências (Área do Conhecimento em Biologia), Plantas do gênero Hyptis distribuídas por regiões tropicais e subtropicais apresentam grande utilização na medicina tradicional para tratamento de distúrbios gastrointestinais, infecções na pele, úlceras, inflamação, dores, câncer, problemas respiratórios, gripe, cãibras, malária, secreções nos brônquios, febre e infecções por microrganismos. Mesmo com toda a demanda para fins medicinais, faltam estudos que comprovem cientificamente seus benefícios à saúde humana. O objetivo desta Tese foi avaliar a atividade antimicrobiana, antioxidante, citotóxica, citoprotetora e anti-inflamatória in vitro de extratos de folhas de Hyptis marrubioides (Hm), Hyptis pectinata (Hp) e Hyptis suaveolens (Hs) oriundas do cerrado brasileiro, bem como determinar seu perfil fitoquímico. Além disso, culturas de células em suspensão (CCS) destas espécies foram estabelecidas, eliciadas com estressores bióticos e abióticos e avaliadas quanto à produção de ácido rosmarínico (AR). A presença de ácidos fenólicos nos extratos foi confirmada por HPLC-DAD, bem como a presença de flavonóis e flavonas. CCS de Hs eliciadas com MeJ e de Hm eliciadas com MeJ e AS demostraram um significativo aumento de AR quando comparadas ao controle. Nos ensaios antioxidantes os extratos atingiram EC50 a diferentes concentrações e, portanto, apresentaram potencial antioxidante para as diferentes metodologias utilizadas. Nos ensaios antimicrobianos, verificou-se atividade antibiótica frente as cepas S. aureus (ATCC® 25923TM), S. aureus (ATCC® 29213TM), E. coli (ATCC® 10536TM), S. Cholerasuis (ATCC® 10708TM), P. aeruginosa (ATCC® 9027TM) e P. aeruginosa (ATCC® 27853TM) o que corrobora a utilização destas plantas na medicina tradicional. Os extratos também, indicaram efeitos não citotóxicos e ação antioxidante ao protegerem as células HepG2 de danos induzidos por insultos oxidativos, em condições de co-tratamento e pré-tratamento. Constatou-se que os extratos à concentração de 100μg/ml atuaram no controle da produção de EROs induzidos por t-BHP garantindo o efeito citoprotetor. Os extratos de Hp e Hs promoveram a inibição da produção de NO em células BV2 sem prejuízo da viabilidade demostrando uma possível ação anti-inflamatória. As informações contidas neste trabalho proporcionam auxílio para futuros estudos que busquem compreender a relação entre os metabólitos secundários presentes nos extratos e os mecanismos implícitos a suas potencialidades antioxidante, anti-inflamatória e citoprotetora., Hyptis plants distributed in tropical and subtropical regions are widely used in traditional medicine to treat gastrointestinal disorders, skin infections, ulcers, inflammation, pain, cancer, respiratory problems, influenza, cramps, malaria, bronchial secretions, fever and infections by microorganisms. Even with all the demand for medicinal purposes, studies that scientifically prove its benefits to human health are lacking. The aim of this thesis was to evaluate the in vitro antimicrobial, antioxidant, cytotoxic, cytoprotective and anti-inflammatory activity of extracts of Hyptis marrubioides (Hm), Hyptis pectinata (Hp) and Hyptis suaveolens (Hs) from the Brazilian Cerrado as well as to determine your phytochemical profile. In addition, suspension cell cultures (SCC) of these species were established, elicited with biotic and abiotic stressors and evaluated for rosmarinic acid (AR) production. The presence of phenolic acids in extracts was confirmed by HPLC-DAD, as well as the presence of flavonols and flavones. SCC of Hs elicited with MeJ and of the Hm elicited with MeJ and AS showed a significant increase in AR when compared to the control. In the antioxidant assays the extracts reached EC50 at different concentrations and, therefore, presented antioxidant potential for the different methodologies used. In the antimicrobial assays, antibiotic activity was verified against S. aureus (ATCC® 25923TM), S. aureus (ATCC® 29213TM), E. coli (ATCC® 10536TM) strains. , S. Cholerasuis (ATCC® 10708TM), P. aeruginosa (ATCC® 9027TM) and P. aeruginosa (ATCC® 27853TM) which corroborates the use of these plants in traditional medicine. The extracts also indicated non-cytotoxic effects and antioxidant action while protecting HepG2 cells from damage induced by oxidative insults under cotreatment and pretreatment conditions. It was found that extracts at 100μg / ml concentration controlled the production of t-BHP-induced ROS guaranteeing the cytoprotective effect. The extracts of Hp and Hs promoted the inhibition of NO production in BV2 cells without impairing viability showing a possible antiinflammatory action. The information contained in this work provides help for future studies that seek to understand the relationship between the secondary metabolites present in the extracts and the mechanisms implicit to their antioxidant, anti-inflammatory and cytoprotective potentialities.

Resumen Este estudio se centró en la formulación y caracterización de nanopartículas de plata (AgNP) funcionalizadas con d-limoneno. Las nanopartículas se funcionalizaron por inversión de fase y la síntesis de las nanopartículas se realizó in situ; se determinó el tamaño de partícula por difracción laser, potencial zeta y estabilidad coloidal óptica utilizando Multiscan 20 por un periodo de 24 horas a 37 °C; se determinó la concentración mínima inhibitorio (CMI) y la concentración mínima bactericida (CMB) del material formulado sobre las bacterias Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 29213, Klebsiella oxytoca ATCC 700324, Enterococcus casseliflavus ATCC 700327, Escherichia coli BLEE+, Pseudomona aeruginosa resistente a carbapenémicos. Las nanopartículas presentaron estabilidad coloidal a una concentración de d-limoneno del 3,93 %, iones plata al 1,61x0-3 %, coadyuvante no iónico al 24 % y ácido ascórbico al 5,88 %; cómo sistema regulador se utilizó ácido cítrico/citrato (1:1) 0,48M para un pH de 4,5. La formulación se clasificó como un sistema polidisperso (PD = 0,0851), con una potencial zeta de -11,6 mV y tamaño promedio de partícula de 81,5 ± 0,9 nm. Se evidenció una velocidad de migración de partícula de -0,199 ± 0,006 mm h-1, un perfil de transmisión constante y perfil de retrodispersión con variaciones del 10 %, lo que representa una formulación estable. Las nanopartículas presentaron una CMI y una CMB de 28 μg mL-1 (5,6x10-2 % d-limoneno y 4,7x10-5 % AgNP) contra todas las bacterias probadas. Abstract This study focused on the formulation and characterization of silver nanoparticles (AgNP) functionalized with d-limonene. The nanoparticles were functionalized by phase inversion and the synthesis of the nanoparticles was performed in situ; the particle size was determined by laser diffraction, zeta potential and colloidal optical stability using Multiscan 20 for a period of 24 hours at 37 °C; the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (CMB) of the formulated material on the bacterias Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 29213, Klebsiella oxytoca ATCC 700324, Enterococcus casseliflavus ATCC 700327, Escherichia coli BLEE, Pseudomona aeruginosa resistant to carbapenems. The nanoparticles showed colloidal stability at a concentration of 3.93 % d-limonene, 1.6x10-3 % silver ions, 24 % non-ionic adjuvant and 5.88 % ascorbic acid, citric acid/citrate was used as a regulatory system (1:1) 0.48 M for a pH of 4.5. The formulation was classified as a polydispersed system (PD = 0.0851), with a zeta potential of -11.6 mV and average particle size of 81.5 ± 0.9 nm. A particle migration rate of -0.199 ± 0.006 mm h-1 was evidenced, a constant transmission profile, a backscatter profile with variations of 10 %, which represents a stable formulation. The nanoparticles presented an MIC and an MIB of 28 μg mL-1 (5.6x10-2 % limonene, 4.7x10-5 % AgNP) against all the bacteria tested. Resumo Este estudo focou na formulação e caracterização de nanopartículas de prata AgNP funcionalizadas com d-limoneno. As nanopartículas foram funcionalizadas por inversão de fase e a síntese das nanopartículas foi realizada in situ; o tamanho das partículas foi determinado por difração a laser, potencial zeta e estabilidade óptica coloidal usando o Multiscan 20 por um período de 24 horas a 37 °C; a concentração inibitória mínima (CMI) e a concentração bactericida mínima (CMB) do material formulado na bactéria Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 29213, Klebsiella oxytoca ATCC 700324, Enterococcus casseliflavus ATCC 700327, Escherichia coli BLEE, Pseudomona aeres. As nanopartículas apresentaram estabilidade coloidal na concentração de 3,93 % de d-limoneno, 1,6x10-3 % de íons de prata, 24 % de adjuvante não iônico e 5,88 % de ácido ascórbico, ácido cítrico/ citrato (1:1) 0,48 M foi usado como sistema regulador para um pH de 4,5. A formulação foi classificada como um sistema polidisperso (PD = 0,0851), com um potencial zeta de -11,6 mV e tamanho médio de partícula de 81,5 ± 0,9 nm. Era evidente uma taxa de migração de partículas de -0,199 ± 0,006 mm h-1, um perfil de transmissão constante, um perfil de retroespalhamento com variações de 10 %, o que representa uma formulação estável. A nanopartículas apresentou CIM e MIB de 28 μg mL-1 (d-limoneno 5,6x10-2 %, AgNP 4,7x10-5 %) contra todas as bactérias testadas.

Ao longo dos anos, diversos microrganismos adaptaram-se e adquiriram resistência aos fármacos. A resistência aos antimicrobianos é considerada um problema global para os sistemas de saúde, no âmbito humano e animal. Salmonella consta como um dos patógenos de veiculação alimentar de grande impacto para a saúde pública. A ocorrência de isolados com perfis de multirresistência é real em todos os continentes e métodos alternativos devem ser investigados. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antimicrobiano de extratos de própolis verde sobre Salmonella enterica, bem como determinar o teor de compostos bioativos e perfil de sensibilidade a antimicrobianos convencionais no uso terapêutico. A própolis foi submetida a dois tipos de extração, etanólica e ultrassônica, decorrendo em extratos de igual terminologia. Foram quantificados os compostos fenólicos totais, teor de flavonoides totais e atividade antioxidante total pelo radical livre DPPH. Estes extratos foram diluídos em etanol nas concentrações: 100; 50; 25; 12,5; 6,25; 3,125; 1,56; 0,8; 0,4; 0,2 e 0,1 mg/mL-1. Duas cepas referenciais e 30 isolados do gênero Salmonella procedentes de alimento avícola e do ambiente subsidiaram os ensaios de viabilidade celular pelo método de microdiluição. Analisou-se o perfil de suscetibilidade de todas as cepas para amicacina (30μg), norfloxacina (10μg), ceftriaxona (30μg), ceftiofur (30μg) e doxiciclina (30μg), pelo método de disco-difusão. Os resultados evidenciaram que os isolados de campo apresentaram resistência cruzada e múltipla, sendo que 83,3% (25/30) das amostras foram resistentes a um ou mais agentes antimicrobianos utilizados, apenas cinco isolados não apresentaram resistência e 21 isolados foram multirresistentes. A resistência cruzada ocorreu em 63,3% (19/30) dos isolados frente as cefalosporinas. Em relação à ação do extrato etanólico de própolis verde, identificou-se que para os sorotipos Agona, Anatum, Cerro, Saintpaul e todas as estirpes de Schwarzengrund apresentaram respostas igualitárias quanto à concentração inibitória mínima. Para os sorovar Heidelberg observou-se variabilidade para CIM, encontrando-se concentrações de 6,25 a 25 mg/mL-1 bem como para a concentração bactericida mínima com variações entre 50 e 100 mg/mL-1. Para o extrato ultrassônico de própolis verde à CIM apresentou respostas iguais para os sorotipos Agona, Cerro e Saintpaul. Para o sorovar Heidelberg ocorreu variação para CIM entre 6,25 a 25 mg/mL-1, para o sorovar Schwarzengrund ocorreu variação entre 6,25 a 12,5 mg/mL-1. Conclui-se que isolados de campo reforçam o alerta sobre cepas multirresistentes para bases antimicrobianas eleitas para uso terapêutico no contexto da saúde animal e humana. Os extratos de própolis verde, por suas concentrações de compostos fenólicos/ flavonoides e seus componentes antioxidantes, apresentaram ação biológica antimicrobiana que inibiram, em concentrações variadas, sorotipos de Salmonella enterica oriundos do ambiente avícola. Por tais observações, pode-se considerar ambos extratos de própolis verde como alternativa dose-dependente à inibição de Salmonella. Over the years, several microorganisms have adapted and bought resistance to drugs. Antimicrobial resistance is considered a global problem for health systems, with no human and animal scope. Salmonella consumes as one of the foodborne pathogens of great impact on public health. The occurrence of episodes with multidrug resistance is real on all continents and alternative methods should be investigated. In this context, the aim of this study was to evaluate the antimicrobial effect of green propolis extracts on Salmonella enterica, as well as to determine the content of bioactive compounds and the sensitivity profile to antimicrobials used in therapeutic use. A propolis was subjected to two types of extraction, ethanolic and ultrasonic, resulting from equal extractions of terminology. Total phenolic compounds, total flavonoid content and total antioxidant activity were quantified by the free radical DPPH. These extracts were diluted in ethanol in the applications: 100; 50; 25; 12.5; 6.25; 3.125; 1.56; 0.8; 0.4; 0.2 and 0.1 mg / mL-1. Two reference strains and 30 species of Salmonella genus processed by agricultural food and environment subsidized by cell viability tests using the microdilution method. Analyze the susceptibility profile of all strains for amikacin (30μg), norfloxacin (10μg), ceftriaxone (30μg), ceftiofur (30μg) and doxycycline (30μg), using the disk-diffusion method. The results showed those that presented a studied and crossed resistance field, and 83.3% (25/30) of the samples were resistant to one or more antimicrobial agents used, only five times without resistance and 21 caused by multiresistants. Cross resistance occurred in 63.3% (19/30) of individuals facing cephalosporins. Regarding the action of ethanol extraction of green propolis, it was identified that the serotypes Agona, Anatum, Cerro, Saintpaul and all as strains of Schwarzengrund are the same or equal responses to minimal inhibition. To serovar, Heidelberg reduced the variability for MIC, using 6.25 to 25 mg / mL-1, as well as for the minimum bactericidal concentration with variations between 50 and 100 mg / mL-1. To extract ultrasound of green propolis from CIM, it presents equal responses for serotypes Agona, Cerro and Saintpaul. For Heidelberg serovar there was a variation for MIC between 6.25 to 25 mg / mL-1, for Schwarzengrund serovar there was a variation between 6.25 to 12.5 mg / mL-1. It is concluded that field isolates reinforce the alert about multidrug-resistant strains for antimicrobial bases chosen for therapeutic use in the context of animal and human health. The extracts of green propolis, due to their concentration of phenolic / flavonoid compounds and their antioxidant components, showed biological antimicrobial action that inhibited, in varying concentrations, Salmonella enterica serotypes from the poultry environment. For these observations, both extracts of green propolis can be considered as a dose-dependent alternative to Salmonella inhibition. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Submitted by Letícia de Queiroz Mozaner (leticia.mozaner@unesp.br) on 2020-03-04T02:14:09Z No. of bitstreams: 1 dissertação final corrigida.pdf: 1977677 bytes, checksum: c1a0913ab153da147e753972bc58af01 (MD5) Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2020-03-04T19:03:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mozaner_lq_me_sjrp_par.pdf: 265085 bytes, checksum: 1cc42f393530037ff055e9f7095e2700 (MD5) Made available in DSpace on 2020-03-04T19:03:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mozaner_lq_me_sjrp_par.pdf: 265085 bytes, checksum: 1cc42f393530037ff055e9f7095e2700 (MD5) Previous issue date: 2020-02-11 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Esse trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antifúngica de diferentes derivados anfifílicos de quitosana contra cepas de Candida sp., um fungo responsável por infecções que impactam o sistema de saúde, pois além de atingir milhares de pessoas tem se tornado cada vez mais resistente aos tratamentos usuais. Considerando a importância desse fungo e o potencial para uso tópico dos derivados de quitosana, no presente trabalho buscou-se avaliar a atividade antifúngica de diferentes séries de polímeros. Os polímeros previamente sintetizados foram divididos em duas séries: 1) derivados contendo porção hidrofóbica e hidrofílica constante (40% N,N- dietilaminaetila (DEAE) e 20% dodecil (DOD)) com diferentes massas moleculares, e 2) derivados com porção hidrofóbica e massa molecular constante (4% DOD e 137 kDa) com diferentes porcentagens de grupos quaternários (pentiltrimetilamônio). A série composta de diferentes conteúdos de grupos carregados negativamente (carboxietil) e grupo hidrofóbico (octil/dodecil) foi sintetizada e caracterizada por Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio (RMN H1). Para as 3 diferentes séries de derivados foram analisados os graus de ionização e foi observado que no pH de 6,4 (pH próximo ao sanguíneo) os polímeros das séries 1 e 2 apresentaram valores próximos a 70% e os da série 3 próximos a 80%. As citotoxicidades dos polímeros foram determinadas em concentrações crescentes e não apresentaram toxicidade, exceto os da série 1- 25 kDa e 60 kDa que apresentaram moderada inibição de células viáveis nas maiores concentrações (1 e 0,75 mg mL-1). Foi avaliada a Concentração Inibitória Mínima (CIM), nas mesmas concentrações estudadas no ensaio de citotoxicidade contra: Candida albicans (C. albicans), Candida glabrata (C. glabrata), Candida krusei (C.krusei) e Candida parapsilosis (C. parapsilosis), cepas ATCCs e de isolados clínicos de diferentes pacientes. Os resultados mostraram que os polímeros das séries 1 e 2 inibiram em até 90% o crescimento da maioria das cepas, exceto as de Candida albicans e os polímeros da série 3 não apresentaram inibição para as cepas estudadas. A partir dos valores de CIM para os polímeros das séries 1 e 2, foram realizados estudos para determinação da Concentração Fungicida Mínima (CFM). Os derivados das séries 1 e 2, que apresentaram menores valores de CFM, foram estudados para determinação do time kill com todas as cepas. A inibição total foi atingida no período máximo de 5 horas para todas as cepas e derivados testados. A microscopia confocal pemitiu verificar alteração na morfologia da célula, possivelmente devido ao rompimento da parede celular. This study aimed to evaluate the antifungal activity of different amphiphilic derivatives of chitosan against Candida sp., a yeast responsible for infections that impact the public health because reaches thousands of people and has become increasingly resistant to the treatments. Considering the importance of this fungus and the potential for topical use of chitosan derivatives, the present study aimed to evaluate the antifungal activity of a groups of previously synthesized polymers and synthesize new group. The polymers previously synthesized were divided into two groups: derivatives with constants concentrations hydrophobic and hydrofilic (40% diethylamineethyl (DEAE) and 20% dodecyl (DOD)) with different molecular weights, and derivatives with constant hydrophobic moiety and molecular weight (4% DOD and 137 kDa) with different percentages of positive charge (pentyltrimethylammonium group). The serie of amphiphilic derivatives containing different contents of negatively charged groups (carboxyethyl) and hydrophobic group (octyl / dodecyl) were synthesized and characterized by Nuclear Magnetic Resonance of Hydrogen (NMR H1). For the three series were analized the degree of ionization and it was observed that at pH 6.4 (approximate blood pH) the derivatives of series 1 and 2 presented values close to 70% and those of series 3 near 80%. The cytotoxicity of the polymers was assessed in different concentrations and showed no toxicity, except those in the serie 1- 25 kDa and 60 kDa that showed moderate inhibition of viable cells at the highest concentrations (1 and 0.75 mg mL -1). Subsequently, the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) was evaluate, at the same concentrations studied in the cytotoxicity assay, against Candida albicans (C. albicans), Candida glabrata (C. glabrata), Candida krusei (C.krusei) e Candida parapsilosis (C. parapsilosis), ATCCs strains and clinical isolates. The polymers of series 1 and 2 showed 90% of inhibition against most strains, except Candida albicans, that showed no significant inhibition by any polymer. The derivatives of serie 3 showed no significant inhibition of any strain. From the values obtained from MICs, the Minimum Fungicidal Concentration (MFC) was determined. For the derivatives of series 1 and 2 that presented lower values of MFC, the time kill with all the strains was analyzed, and total inhibition was reached in a maximum of five hours for all strains and derivatives tested. Confocal microscopy allowed to verify the effect of antifungal on the morphology of the strains, possibly due to cell disruption and fragments. CAPES: 001

Objetivo: avaliar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Bactericida Mínima (CBM) de extratos metanóicos e etanólicos de Tambja stegossauriformis (subordem Nudibranquios) contra microrganismos cariogênicos: Streptococcus mutans ATCC 25175 e Lactobacillus casei ATCC 393. Material e Método: diferentes concentrações de T. stegossauriformis (2,35 a 0,0011 mg / mL) foram testados. Os extratos etanólicos e metanóicos foram obtidos e depois reunidos para avaliação de MIC e MBC. A clorexidina (0,05%) foi utilizada como controle positivo e as substâncias sem inóculo compreendiam o controle em branco. Resultados: o extrato de T. stegossauriformis apresentou ação bacteriostática contra S. mutans (MIC = 1,175 mg / mL) e L. casei (MIC = 0,5875 mg / mL). Conclusão: os resultados sugerem que o extrato de T. stegossauriformis é um potencial candidato sendo necessária uma investigação mais profunda para o desenvolvimento de novas estratégias de tratamento para infecções bacterianas bucais.

The objective of this study was to evaluate the antimicrobial susceptibility profile of bacteria isolated from the eyes of dogs with keratoconjunctivitis sicca (KCS). We evaluated 65 dogs diagnosed with KCS and 30 healthy dogs (Control Group). Conjunctival swab samples were collected after KCS was diagnosed. Microbiological examinations were performed, including aerobic culture, antimicrobial susceptibility testing and minimum inhibitory concentration (MIC) determination for chloramphenicol, tobramycin, ofloxacin and moxifloxacin. MICs of the fifteen most resistant strains of Staphylococcus pseudintermedius (Staphylococcus intermedius Group, SIG) and the fifteen most resistant strains of gram-negative bacteria were determined. By percentage, the microorganisms exhibited the highest susceptibility to polymyxin B, tobramycin and chloramphenicol and the lowest to tetracycline. Three multi-drug-resistant strains of SIG were detected: one displayed isolated susceptibility to cefazolin, another to vancomycin, and another to polymyxin B and amikacin. The species of bacteria isolated from the eyes of dogs with KCS presented variable susceptibility to the antibiotics tested. We found evidence of the emergence of quinolone-resistant strains of SIG and further evidence of increased ocular prevalence. These findings reinforce the need to identify the bacteria involved and their antimicrobial susceptibility profile, as secondary infections can serve as exacerbating and perpetuating factors in KCS. RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de susceptibilidade antimicrobiana de bactérias isoladas de olhos de cães com ceratoconjuntivite seca (CCS). Foram avaliados 65 cães com diagnóstico de CCS e 30 cães saudáveis (Grupo Controle). Depois do diagnosticado de CCS, suabes conjuntivais foram coletados. Exames microbiológicos foram realizados, incluindo cultura aeróbia, teste de susceptibilidade antimicrobiana e determinação da concentração inibitória mínima (CIM) para cloranfenicol, tobramicina, ofloxacina e moxifloxacina. Para determinar a CIM, foram selecionadas as quinze cepas mais resistentes de Staphylococcus pseudintermedius (Staphylococcus intermedius Group-SIG) e as quinze cepas mais resistentes de bactérias gram-negativas. Os microrganismos apresentaram maior suscetibilidade percentual à polimixina B, tobramicina e cloranfenicol e menor suscetibilidade à tetraciclina. Três cepas de SIG resistentes a múltiplos medicamentos foram detectadas, do quais um demonstrou suscetibilidade isolada à cefazolina, outro à vancomicina e outro à polimixina B e à amicacina. As espécies de bactérias isoladas dos olhos de cães com CCS apresentaram suscetibilidade variável aos antibióticos testados. Encontramos evidências do surgimento de cepas resistentes à quinolona de S. pseudintermedius e outras evidências de aumento da prevalência ocular. Esses achados reforçam a necessidade de identificar as bactérias envolvidas e seu perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos, pois as infecções secundárias podem servir como fatores exacerbantes e perpetuantes na CCS.

Control of infectious microorganisms is sometimes ineffective even with the development of innovative antibacterial drugs. As a result, pathogens are proving resistant to most known drugs impacting the premature death of approximately 300 million people, including hospital and environmental infections, with a $ 100 trillion loss to the global economy by 2050. Based on these The World Health Organization (WHO) has named antimicrobial resistance as one of the three most important public health threats of the 21st century. This fact brings a look at the ability of microorganisms to live in communities called biofilms, developing their metabolism linked to a surface, thus, such a problem encourages the search for alternatives that bypass the problem of bacterial resistance and looks back to natural products, where various extracts of medicinal plants have shown antibacterial effects that may represent a promising therapeutic alternative. As is the case with medicinal plants of the Solanaceae family, which have alkaloids as major compounds, which are known as potent antimicrobial agents. Thus, the present work aimed to verify if Datura suaveolens crude extract (popularly known as trumpeter, white skirt or devil's breath) is capable of inhibiting the growth of microorganisms in their planktonic form and in the form of biofilms. , besides quantifying biofilm of clinical isolates of Klebsiella pneumoniae. Susceptibility tests were performed by broth disc diffusion and microdilution methods. In order to determine the inhibition and destruction concentration of the biofilm the crude extract was tested at minimum inhibitory concentration (MIC) and subinhibitory concentrations. The results showed that D. suaveolens crude extract has discrete antibacterial activity for planktonic microorganisms, between clinical isolates and standard strains, with concentrations between 10 and 1.5 mg/mL. Clinical isolates of K. pneumoniae were classified as strong biofilm formers. D. suaveolens crude extract was able to discreetly inhibit the biofilm of Pseudomonas aeruginosa (PA01) and a clinical isolate of K. pneumoniae at subinhibitory concentrations of 0.625 mg/mL and 1.25 mg/mL, respectively. however, it was unable to destroy the biofilm formed from both strains, revealing that the plant material in question acts in the early stages of biofilm formation. O controle de microrganismos infecciosos às vezes é ineficaz mesmo com o desenvolvimento de fármacos antibacterianos inovadores. Por conseguinte, os patógenos estão se mostrando resistentes à maioria dos medicamentos conhecidos impactando na morte prematura de aproximadamente 300 milhões de pessoas, entre infecções hospitalares e ambientais, com uma perda de US$ 100 trilhões para a economia global, até 2050. Com base nestes dados a Organização Mundial da Saúde (OMS) nomeou a resistência aos antimicrobianos como uma das três ameaças mais importantes à saúde pública do século XXI. Este fato traz um olhar para a habilidade que os microrganismos possuem de viver em comunidades chamadas de biofilmes, desenvolvendo seu metabolismo ligado a uma superfície, deste modo, tal problemática incentiva a procura por alternativas que contornem o problema da resistência bacteriana e volta o olhar para os produtos naturais, onde diversos extratos de plantas medicinais tem apresentado efeitos antibacterianos que podem representar uma alternativa terapêutica promissora. Como é o caso das plantas medicinais da família Solanaceae, que possuem alcaloides como compostos majoritários, os quais são conhecidos como potentes agentes antimicrobianos. Desse modo, o presente trabalho teve por objetivo verificar se o extrato bruto de Datura suaveolens (popularmente conhecida como trombeteiro, saia-branca ou sopro-do-diabo) é capaz de inibir o crescimento de microrganismos em sua forma planctônica e na forma de biofilmes, além de quantificar biofilme de isolados clínicos de Klebsiella pneumoniae. Os testes de suscetibilidade foram realizados pelos métodos de disco-difusão e microdiluição em caldo. Para a determinação da Concentração de inibição e de destruição do Biofilme o extrato bruto foi testado na Concentração Inibitória Mínima (CIM) e em concentrações subinibitórias. Os resultados demonstraram que o extrato bruto de D. suaveolens possui discreta atividade antibacteriana para microrganismos na forma planctônica, entre isolados clínicos e cepas padrões, com concentrações entre 10 e 1,5 mg/mL. Os isolados clínicos de K. pneumoniae foram classificados como forte formadores de biofilme. O extrato bruto de D. suaveolens foi capaz de inibir, discretamente, o biofilme de Pseudomonas aeruginosa (PA01) e de um isolado clínico de K. pneumoniae, em concentrações subinibitórias de 0,625 mg/mL e 1,25 mg/mL, respectivamente, entretanto não foi capaz de destruir o biofilme formado de ambas as cepas, revelando que o material vegetal em questão atua nas fases iniciais da formação do biofilme.

Orientador: Prof. Dr. Anderson Orzari Ribeiro Coorientadora: Profa. Dra. Fernanda Dias da Silva Tese (doutorado) - Universidade Federal do ABC. Programa de Pós-Graduação em Ciência e Tecnologia/Química, 2019. Com o aumento de casos de resistencia microbiana a tratamentos comuns (antibioticos e antimicrobianos), a terapia fotodinamica antimicrobiana (TFDa) aparece como uma nova modalidade de tratamento, pois a interacao de tres componentes: um fotossensibilizador (FS), luz e oxigenio do meio, resulta na formacao de especies reativas capazes de atingir diferentes alvos celulares (proteinas, enzimas, lipidios) levando a comprometimentos da parede e da membrana celular. Este trabalho avalia a eficiencia da hipericina como FS em Staphylococcus aureus (S. aureus) e Escherichia coli (E. coli). Analisamos a concentracao inibitoria minima (CIM) por testes liquidos de inibicao para a determinacao da condicao de tratamento. A captacao de hipericina pela bacteria foi realizada a partir de estudos indiretos utilizando o metodo do espectrofotometro ultravioleta-visivel e citometria de fluxo. O estudo tambem determinou o mecanismo de acao desencadeado pela aTFD, a partir da cinetica de crescimento microbiano sob as melhores condicoes de tratamento. Os resultados apresentaram CIM50 na concentracao de 10 ¿ÊM de hipericina e nao foram observadas diferencas significativas no ensaio de captacao para ambas as bacterias. Ao avaliarmos o tempo de pre-incubacao e a dose de luz, observamos que o tempo de pre-incubacao nao foi um fator determinante no estudo, sendo estabelecido em 5 minutos (min) para ambos os microrganismos, entretanto, a dose de luz induziu uma maior inibicao do crescimento das colonias, sendo de 38,4 e 57,6 J/cm2 para E. coli e S. aureus, tal fato foi evidenciado pelo teste de cinetica, que demonstrou a acao antimicrobiana da hipericina como um composto bacteriostatico. Em conclusao, a hipericina foi capaz de inibir as celulas microbianas, por um mecanismo bacteriostatico, demostrando sua potencial aplicacao na aTFD. With the increase of cases of microbial resistance to common treatments (antibiotics and antimicrobials), the antimicrobial photodynamic therapy (aPDT) appears as a new treatment modality, the interaction of three components: a photosensitizer (PS), light and oxygen of the medium, resulting in the formation of reactive species capable of to reach different cellular targets (proteins, enzymes, lipids) leading to cell wall and membrane compromises. In this work we analized the efficiency of hypericin as a PS on Staphylococcus aureus (S. aureus) and Escherichia coli (E. coli). We analyzed the minimum inhibition concentration (MIC) by liquid inhibition tests to determine the treatment condition. Bacterial uptake of hypericin was performed from indirect studies using the ultraviolet-visible spectrophotometer method and flow cytometry. The study also determined the mechanism of action triggered by aTFD from microbial growth kinetics under the best treatment conditions. For MIC determination tests we obtained a MIC50 at a concentration of 10 ¿ÊM hypericin and no significant differences were observed in the uptake assay for both bacteria. When evaluating the pre-incubation time and the light dose, we observed that the incubation time was not a determining factor in the study, being established at 5minutes for both microorganisms, however, the light dose induced the inhibition of colony growth, being 38,4 and 57.=,6 J/cm2 for E. coli and S. aureus, this fact was evidenced by the kinetic test, which demonstrated the antimicrobial action of hypericin as a bacteriostatic compound. In conclusion, hypericin was able to inhibit microbial cells by a bacteriostatic mechanism, demonstrating its potential application in aTFD.

Submitted by Bianca Gottardo de Almeida (bianca.gottardo.almeida@hotmail.com) on 2018-12-21T12:18:16Z No. of bitstreams: 1 Bianca Gottardo de Almeida Dissertação.pdf: 2658136 bytes, checksum: bfefc7bfa81140bea4f9fd36faf3b238 (MD5) Approved for entry into archive by Elza Mitiko Sato null (elzasato@ibilce.unesp.br) on 2018-12-21T14:03:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 almeida_bg_me_sjrp_par.pdf: 774477 bytes, checksum: 0db27cc8a62b6489dd750a48fd93db6e (MD5) Made available in DSpace on 2018-12-21T14:03:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 almeida_bg_me_sjrp_par.pdf: 774477 bytes, checksum: 0db27cc8a62b6489dd750a48fd93db6e (MD5) Previous issue date: 2018-12-19 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) O impacto de doenças fúngicas e a resistência aos agentes antimicrobianos por fungos patogênicos tornou-se um desafio global para a saúde da população. No presente trabalho, a síntese de nanocompósitos a base de prata-hidroxiapatita (Ag-HAP), foram sintetizados por um método solvotérmico assistido por micro-ondas com diferentes concentrações de peso de prata, testadas contra espécies de Candida sensíveis e resistentes aos azólicos comumente utilizado na plática clínica. Estudos antifúngicos foram conduzidos por método de microdiluição – seguindo o protocolo M27 A3 - CLSI. Para todas as espécies de Candida testadas, a amostra Ag pura mostrou baixa atividade antifúngica quando comparada com as amostras combinadas de Ag-HAP, com claro efeito sinérgico, uma vez que a atividade antifúngica foi molhorada quando colocados juntos. O principal efeito inibitório foi observado em Ag4%HAP e Ag8%-HAP contra Candida krusei, com concentração inibitória mínima (CIM) de 31,2µg / mL, seguido por Candida parapsilosis stricto sensu (62,5 µg / mL), Candida tropicalis, (62,5 µg / mL), Candida glabrata (125 µg / mL) e Candida albicans (125 µg / mL). Além disso, ensaios toxicicológicos foram realizados com modelo in vivo, Galleria mellonella devido à similaridade de resposta imunológica e níveis de toxicidade entre mamíferos. O teste foi executado de duas maneiras: banho e inoculação de todos os nanocompósitos, com a mesma concentração utilizada nos testes de microdiluição. Todos NCs não apresentaram toxicidade para este modelo. A atividade antifúngica específica encontrada por aanálise quantitativa demonstra que os nanocompósitos agem de forma diferente conforme os alvos, considerando espécies de Candida. Estes resultados mostram um novo potencial antifúngico para aplicações tecnológicas e coatings. The impact of fungal diseases and the battle for antimicrobial agents against pathogenic fungi has emerged as a main global healthcare challenge. Here, the antifungal activity of silver-hydroxyapatite (Ag-HAP) nanocomposites (NCs) with different Ag concentrations synthesized by the one-pot microwave-assisted solvothermal method was evaluated against sensitive and resistant Candida species. Antifungal studies were conducted by microdilution method – protocol from the Clinical and Laboratory Standard Institute. The main inhibitory effect was seen to Ag4%-HAP against Candida krusei, with minimum inhibitory concentration (MIC) of 31.2 µg/mL, followed by Candida parapsilosis Sensu Stricto (62.5 µg/mL), Candida tropicalis, (62.5 µg/mL), Candida glabrata (125 µg/mL) and Candida albicans (125 µg/mL). Furthermore, the toxicity assay was performed in the in vivo model Galleria mellonella. The test was executed by bathing or inoculating with the same NCs concentration used in the previous microdilution tests. For both approaches, all NCs concentrations were not toxic to G. mellonella. The specific antifungal activity demonstrates that NCs act efficiently against species of Candida. These results show a potential antifungal application for well-designed nanostructured Ag-HAP composites.