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En France, la récente apparition et implantation de l’espèce Fusarium langsethiae sur les orges de brasserie est devenue une source d’inquiétude. Ce champignon étant connu comme producteur de toxines T-2 et HT-2 cela pose le problème de la présence éventuelle de ces mycotoxines dans la bière. Des études ont proposé la levure Geotrichum candidum comme possible outil de contrôle du niveau de contamination par ces molécules. Par contre, le mécanisme d’action est encore inconnu. L’objectif de ce travail était de comprendre l’interaction entre F. langsethiae et G. candidum pour évaluer l’effet sur le développement de F. langsethiae et sur sa production de la toxine T-2. Nous avons évalué l’interaction entre ces micro-organismes en utilisant des cultures séquentielles et des co-cultures. Dans ce dernier cas la différentiation des deux micro-organismes a été faite par DOPE-FISH et par quantification de l’ADN. Les résultats ont montré que la croissance de F. langsethiae n’est pas inhibée dans un milieu pré-fermenté par G. candidum. Par contre, la présence d’un agent actif thermorésistant produit lors du développement de G. candidum affecte la concentration de la toxine T-2. Uneréduction supérieure à 90% est observée en comparaison au témoin. Dans les co-cultures on obtient le même pourcentage de réduction de la concentration de la toxine par rapport au témoin. Dans ce cas les deux micro-organismes se développent mais en moindre quantité que dans leur culture pure, F. langsethiae semblant plus inhibé que G. candidum.

Aflatoxin B1 (AFB1) and T-2 toxin are mycotoxins, secondary metabolites from fungi that sporadically contaminate food and feed, particularly cereals. The mains objectives of our work were to determine in pigs, a target species and highly sensitive to mycotoxin, the toxic effects of AFB1 and T-2 toxin on two defence systems, liver drug-metabolizing enzymes activities et the immune system. We also evaluate in vivo the protective effect of a potent mycotoxin binder. In pigs, AFB1 exposure for the doses investigated did not induce major clinical sign of intoxication. But, we observed lesions in liver tissue, a specific impairment of liver drug-metabolizing enzymes activities (monooxygenase cytochrome P450 dependant) and during immunization we showed a reduced cellular-mediated immune response specific for the vaccine antigen. T-2 toxin exposure did not induce any clinical sign of intoxication, or any tissue lesion in pigs. We observed a specific impairment of liver drug-metabolizing enzymes activities in liver, and during immunization T-2 toxin reduced the production of antibodies specific for the antigen. The addition of glucomannans in feed reduced the toxic effects of both mycotoxins..., L'aflatoxine B1 (AFB1) et la toxine T-2 sont des mycotoxines, métabolites secondaires de micromycètes qui peuvent contaminer les denrées alimentaires notamment les céréales. Les objectifs de nos travaux ont été de déterminer chez le porc, une espèce cible et sensible aux mycotoxines, les effets toxiques de l'AFB1 et de la toxine T-2 sur deux systèmes de défense, les enzymes de biotransformation et l'immunité. De plus, nous avons évalué in vivo l'effet protecteur d'un potentiel liant de toxine. Chez le porc, l'exposition à l'AFB1 aux doses testées n'a pas provoqué de manifestations cliniques majeures d'intoxication. Toutefois, nous avons observé des lésions du tissu hépatique, une altération spécifique de certaines activités de biotransformation (mono-oxygénases cytochrome P450 dépendantes), et lors du protocole d'immunisation nous avons montré un défaut d'activation de la réponse à médiation cellulaire spécifique de l'antigène vaccinal. L'exposition à la toxine T-2 n'a provoqué aucune manifestation d'intoxication ni lésion tissulaire chez le porc. Nous avons montré une altération spécifique de certaines activités de biotransformation, et lors du protocole d'immunisation cette toxine a diminué la production d'anticorps spécifiques de l'antigène vaccinal. L'ajout de glucomannanes dans la ration alimentaire a réduit les effets toxiques des deux mycotoxines étudiées. Dans le cas de l'AFB1, bien que nous n'ayons observé aucune réduction de l'absorption de la toxine, les glucomannanes ont amélioré les activités hépatiques de biotransformation et restauré la réponse immunitaire à médiation cellulaire...

L'implémentation des espèces Fusarium sur l’orge, notamment F. langsethiae et F. sporotrichioides, producteurs de la toxine T-2, est devenu une préoccupation majeure pendant le maltage. Des études ont montré que l'utilisation de la levure filamenteuse Geotrichum candidum, connue comme agent de biocontrôle contre plusieurs micro-organismes, peut réduire la contamination de la toxine T-2 pendant le maltage. Néanmoins, le mécanisme d'action est encore inconnu. G. candidum produit des composés antimicrobiens tels que l'acide phényllactique (PLA) qui, selon la littérature, induit des modifications comportementales et structurelles chez des bactéries telles que L. monocytogenes et inhibe leur croissance. Le premier objectif était d’élucider in vitro les mécanismes d'interaction entre G. candidum et les deux espèces Fusarium. Le PLA produit par G. candidum a été identifié comme responsable de la réduction de la croissance fongique et de la concentration en toxine T-2. L’étude de la cinétique de croissance de G. candidum était essentielle pour comprendre son comportement, déterminer le temps de fermentation optimal et le taux de production de PLA. Ce dernier a été produit au début de la phase de croissance de la levure, et a atteint son pic après 24h et 48h d'incubation. Ceci a été corrélé avec les réductions de concentration de la toxine T-2 les plus élevées dans les conditions de culture avec les souches fongiques. Enfin, tester l’effet du PLA pur sur la croissance fongique et la concentration de la toxine T-2 a permis de valider les résultats précédents. Le second objectif était de reproduire ces résultats à l'échelle du micro-maltage en mimant les conditions industrielles et de déterminer les conditions idéales pour limiter la présence de la toxine. Les résultats ont démontré que l'activation de G. candidum avant le processus permettait une production plus précoce de PLA et donc une réduction de 90% de la concentration de toxine T-2 après 3 jours de maltage. Cependant, l'extension du processus à une durée de 5 jours pourrait entraîner une concentration plus élevée de toxine. Une solution possible à cela est de doubler la concentration d'inoculation de G. candidum dès le début de l'étape de maltage. Enfin, pour optimiser ultérieurement l'utilisation de G. candidum à un niveau industriel, l'influence de plusieurs paramètres sur la croissance de la levure et la production de PLA a été testée in vitro. La composition des milieux de culture a joué un rôle important dans l'amélioration de la croissance et de la production de PLA. En effet, G. candidum s'est développée abondamment et a produit de plus grandes quantités de PLA lorsque la phénylalanine était ajoutée au milieu.

Les mycotoxines sont des métabolites secondaires des moisissures qui peuvent naturellement contaminer de nombreux supports (céréales, fruits, papiers peints, compost). Dans ces travaux de thèse, nous avons focalisé notre intérêt sur deux mycotoxines produites principalement par les champignons du genre Fusarium, appartenant toutes deux au même groupe des trichothécènes, le déoxynivalénol (DON) et la toxine T-2 (T-2). Les objectifs de cette thèse ont été de déterminer les effets de ces deux toxines sur la mise en place des réponses immunitaires au sein de la muqueuse respiratoire et intestinale. L’ensemble de ces études a été réalisé chez le porc, espèce cible de ces contaminants et animal modèle pour l’Homme. Les résultats de ces travaux ont montré que ces deux toxines affectent la réponse immunitaire. Au niveau du tractus respiratoire, une faible dose de toxine T-2 altère l’activation des macrophages alvéolaires lorsqu’ils sont stimulés par les agonistes des TLRs -4, -2/6 (lipopolysaccharides et acides lipoteichoïques, respectivement) en diminuant la synthèse du composé antimicrobien NO et des cytokines pro-inflammatoires IL-1β et TNF-α. Cette immunosuppression pourrait alors conduire à une susceptibilité plus accrue des porcs à des infections opportunistes. Au niveau du tractus intestinal, à l’état basal, nous avons mis en évidence que le DON comme la toxine T-2 induit une forte réponse inflammatoire innée associée à la stimulation de la voie IL-17 en inhibant le développement des cellules T régulatrices. Des études mécanistiques ont permis de déterminer que les cytokines associées à la voie IL-17 suite à une exposition aux trichothécènes, sont produites par une des sous-populations de cellules T innées, les cellules Tγδ productrices d’IL-17. La troisième partie de ce travail a porté sur l’utilisation de la souche Lactobacillus sobrius DSM 16698T dans le but de lutter contre les effets immunomodulateurs générés lors d’une exposition aux trichothécènes. Les résultats de ce travail ont montré que cette souche bactérienne est capable de réduire les effets inflammatoires IL-17 et de rétablir les paramètres impliqués dans les fonctions de la barrière intestinale, suite à une exposition ex vivo et in vivo au DON. En revanche, cette souche a peu d’effet contre la toxine T-2. L’ensemble de ce travail de thèse suggère donc qu’une exposition à de faibles doses de trichothécènes pourrait accroître la susceptibilité des animaux aux perturbations de nature infectieuse ou inflammatoire.

Depuis les 15 dernières années, de nombreuses études ont mis en évidence le rôle majeur de l’architecture nucléaire dans la régulation de l’expression des gènes et ceci dans une grande diversité de processus biologiques. Bien que la réponse immunitaire soit un de ces processus, peu de données existent sur l’organisation spatiale du génome dans les cellules immunitaires et son impact sur la régulation des gènes dans le contexte d’une réponse à l’infection bactérienne. En utilisant le porc comme organisme modèle, nous avons concentré notre étude sur les macrophages dérivés de monocytes, premières lignes de défense contre les pathogènes. Les cellules immunitaires étant les cibles des mycotoxines, nous nous sommes également intéressés aux effets de la toxine T-2 sur les macrophages et leur réponse induite par les récepteurs TLR. Un effet cytotoxique de la T-2 à une dose de 10 nM, ainsi que des effets inhibiteurs sur certaines réponses liées aux récepteurs TLR ont été mis en évidence. Nous avons ensuite examiné si les changements dans l'expression des gènes dus à l'activation impliquent un repositionnement dans l'espace nucléaire. Une analyse du transcriptome a permis d’identifier les gènes différentiellement exprimés dans les macrophages activés par le mélange LPS-IFNγ et de mettre en évidence des réseaux de gènes impliqués lors de l’activation. Les 4 gènes les plus sur-exprimés (IL1β, IL8, CXCL10 et TNFα) et les 4 gènes les plus sous-exprimés (VIM, LGALS3, TUBA3 et IGF2) ont été sélectionnés pour analyser leur comportement dans l'espace nucléaire au cours de l’activation des macrophages en utilisant la technique FISH 3D. Parmi les 4 gènes sur-exprimés, 3 présentent des modifications de leur position durant le processus d'activation alors que les 4 gènes sous-exprimés ne montent pas de variation de leur position. L'analyse de la position des gènes par rapport à leurs territoires chromosomiques (TC) a été étendue à un second type de cellules immunitaires : les neutrophiles. Des résultats similaires ont été obtenus. Les analyses ont été ensuite complétées par l'étude des 4 gènes sur-exprimés dans un type cellulaire indépendant de la réponse immunitaire (fibroblastes). Nos données suggèrent que les relocalisations dans l'espace nucléaire des gènes différentiellement exprimés dans les cellules immunitaires activées sont gène spécifique, type cellulaire spécifique et concernent essentiellement ceux qui sont sur-exprimés.

Les trichothécènes possèdent une toxicité variable mais qui se manifeste par des troubles similaires : baisses de performances, vomissements, lésions cutanées, digestives et hématopoïétiques ainsi qu'une modulation des défenses immunitaires (le plus souvent une immunodépression). Le porc et les volailles sont les espèces les plus sensibles. Ces toxines ne sont ni cancérigènes ni tératogènes. Elles agissent sur la membrane plasmique, inhibent la traduction et induisent un stress oxydatif. Si leurs mécanismes d'action sont communs, leur potentiel toxique est influencé par leur cinétique et leur capacité à atteindre et à se lier à leurs cibles intracellulaires. Bien que les profils cinétiques varient selon les espèces et les toxines, les trichothécènes sont rapidement absorbés après un métabolisme digestif intense, se distribuent très largement dans l'organisme et sont intensément métabolisés dans le foie et rapidement éliminés.

Ce travail est consacré à l'étude des propriétés et des conditions d'apparition dans les aliments des trichothécènes des groupes A et B. Ces composés contaminent les céréales du monde entier. Les Fusarium qui les synthétisent se développent sur les cultures encore sur pied, lors de mauvaises conditions climatiques. Des concentrations importantes de toxines peuvent être ponctuellement trouvées ; la quasi-totalité des denrées étant contaminées avec des concentrations plus faibles. Le tri sélectif des grains contaminés et sains est une des rares méthodes applicable à l'industrie. Les méthodes chimiques et biologiques de décontamination sont insuffisamment évaluées pour avoir de réelles applications. Les principaux moyens de lutte visent donc à prévenir la contamination fongique des matières premières. Ils passent par une hygiène stricte des semis, l'emploi de fongicides et des mesures agronomiques.

Zusammenfassung Zehn Trichothecene wurden in vitro gepruft, in welchen Konzentrationen sie noch die Phythamagglutinin-induzierte Transformation von Schweinelymphozyten hemmen konnen. Bezuglich der Wirksamkeit ergab sich folgende Reihung: T-2 Toxin > Diaceto-xyscirpenol > HT-2 Toxin > Neosolaniol = Fusarenon × > T-2 Triol = T-2 Tetraol = Nivalenol = Deoxynivalenol > Verrucarol. Die Ergebnisse zeigen, das im Organismus entstehende T-2 Toxin-Metaboliten (HT-2 Toxin, T-2 Triol, T-2 Tetraol, Neosolaniol) immer noch eine immunsuppressive Aktivitat besitzen, wenn auch in geringerem Ausmafs. Summary Influence of trichothecenes on phytomitogen induced lymphocyte transformation Ten trichothecenes were examined in vitro in order to test the concentrations in which they are still able to inhibit the phytomitogen induced transformation of peripheral blood lymphocytes of swine. The efficacy of the compounds tested was as follows: T-2 Toxin > Diacetoxyscirpenol > HT-2 Toxin > Neosolaniol = Fusarenon × > T-2 Triol = T-2 Tetraol = Nivalenol = Deoxynivalenol > Verrucarol. The results show that T-2 Toxin metabolites produced in the organism still possess immunosuppressive activities although to a lesser degree. Resume Influence de la transformation des lymphocytes induite par des phytomitogenes avec des trichothecenes Dix trichothecenes ont ete examines in vitro a des concentrations qui pouvaient encore inhiber la transformation induite par phytohemagglutinine des lymphocytes du porc. La classification per efficacite fut la suivante: T-2 toxine > diacetoxyscirpenol > HT-2 toxine > reosolaniolfusarenon × > T-2 triol = T-2 tetraol = nivalenol = deoxynivalenol > verrucarol. Les resultats montrent que les metabolites de toxine T-2 dans l'organisme (HT-2 toxine, T-2 triol, T-2 tetraol, neosolanol) possedent toujours encore une activite immunosuppressive, meme a faible quantite. Resumen La influenciacion de la transformacion de linfocitos, inducida por fitomitogenos, por tricotecenos Se analizaron «in vitro» diez tricotecenos con la intencion de averiguar hasta que concentraciones pueden inhibir aun la transformacion de linfocitos porcinos, inducida por las fitohemoaglutininas. Con respecto a la efectividad se constato la ringla siguiente: toxina T-2 > diacetoxiescirpenol > toxina HT-2 > neosolaniol = fusarenona × > triol T-2 = tetraol T-2 = nivalenol = deoxinivalenol > verrucarol. Muestran los resultados que los metabolitos de la toxina T-2 que se forman en el organismo (toxina HT-2, triol T-2, tetraol T-2, neosolaniol) poseen aun una actividad inmunosupresiva, aunque tambien en grado menor.

The purpose of this study was to investigate the T-2 toxin level of contaminated cereal and pulse products in Turkey. T-2 toxin was detected using high performance liquid chromatography (HPLC) with UV detection at 208 nm and thin layer chromatography (TLC) was used for confirmation of the T-2 toxin-contaminated samples (≥ 1 ppm). The recovery was 93 ± 3.3% (SD 3.29, n = 5) for chickpea spiked with a known amount of T-2 toxin (1 ppm). The detection limits for T-2 toxin for HPLC and TLC were 25 ng per injection and 50 ng per spot, respectively. A total of 50 commercially available cereal and pulse product samples, collected from markets and street bazaars, were analysed. Incidences of T-2 toxin detected in cereal and pulse products were 23.5% and 31.2%, respectively and the maximum detected amount was 1.9 ppm in a sample of dried beans. The incidence of toxin-contaminated specimens is not so low relative to the volume of specimens produced. La toxine T-2 peut se former dans les produits agricoles avant la recolte et pendant le stockage. Elle est produite par des especes variees de Fusarium qui sont des moisissures repandues dans les plantes et dans le sol dans les regions a temperature douce. Elle est tres toxique pour l'homme et les animaux. Le sujet de cette etude est de definir le taux de toxine T-2 dans des cereales et les legumineuses contamines en Turquie. La toxine T-2 est detectee par HPLC et la chromatographie sur couche mince est utilisee pour la confirmation des echantillons contamines. L'incidence de la toxine T-2 detectee dans les cereales et les legumineuses est respectivement de 23,5% et 31,2%.

Les comparaisons des teneurs et frequences de contaminations par des mycotoxines de Fusarium (deoxynivalenol [DON], nivalenol, HT-2 toxine, T-2 toxine, 3-acetyl-DON, zearalenone, fumonisines) d’ Aspergillus et de Penicillium (aflatoxines, ochratoxine A) dans les cereales et produits derives issus des filieres biologiques (« bio ») et conventionnelles des pays europeens donnent des resultats contrastes et ne dessinent pas une tendance nette en faveur des produits « bio » ou de leurs homologues conventionnels. Contrairement aux etudes anterieures, la plupart des etudes recentes conduisent a l’observation de difference non significative de contaminations entre ces deux types de produits. De plus, une variation significative des teneurs en mycotoxines entre les differentes productions (au cours de la meme annee de production) attenue l’interet de cette comparaison et necessite alors l’utilisation de traitements statistiques plus robustes, ce qui n’est pas toujours le cas meme dans les etudes publiees. Des lors, les interpretations des resultats doivent etre faites de facon critique. L’evaluation du degre d’exposition des consommateurs aux mycotoxines via les produits des filieres « bio » et conventionnelles est menee dans la plupart des cas sur la base des valeurs obtenues pour des cereales brutes. En consequence, les niveaux d’exposition sont surestimes, car on ne tient pas compte de la biotransformation et/ou de l’elimination d’une proportion non negligeable des mycotoxines au cours des processus de transformation des cereales en aliments. Cette evaluation ne permet pas non plus de degager une tendance nette en faveur des produits « bio » ou conventionnels. Toutefois, il apparait interessant de suivre la situation dans les deux systemes de production en raison de l’influence parfois importante de facteurs incontrolables, mais aussi etant donne l’evolution des techniques de production et du professionnalisme des agriculteurs.

Summary Six Hungarian Large White × Duroc F1 gilts, weaned at 28 days of age, were fed T-2 toxin at 5 ppm. dietary level for 25 days, after a 7-day preliminary period. Six gilts of the same breed and age served as untreated controls. T-2 treatment accounted for 49—77% feed refusal and so for a considerable decrease in weight gain. The T-2 treated pigs showed a relative decrease in the total leucocyte count, but did not develop leukopenia during the 3 weeks of treatment. Treatment with T-2 also gave rise to a significant increase in adrenocortical activity. In vitro testing for blast transformation, immune-rosette-formation, and IF-detectable IgG-positive cell counts showed that T-2 caused a 40—50% suppression of immune responsiveness. Toxin-neutralizing titres to necrotic enteritis B vaccine were significantly lower in the sera of the experimental than the control pigs. It follows that, under the conditions of the experiment, T-2 had a distinct immunosuppressive action on growing pigs during the early phase of immune induction, by disturbing the function of both T- and B-lymphocytes. Zusammenfassung Einflus des Fusarium-Toxins T-2 auf die Nebennierenrindenfunktion und Immunreaktivitat der Jungschweine Sechs im Alter von 28 Tagen abgesetzte weibliche Jungschweine der Ungarisches Landschwein × Duroc-F-1-Generation wurden nach einer 7tagigen Vorperiode 25 Tage lang mit 5 ppm T-2 Toxin uber das Futter behandelt. Weitere sechs weibliche Tiere des gleichen Alters und der gleichen Rasse dienten als nichtbehandelte Kontrolle. Die Behandlung mit T-2 bewirkte Zuruckweisung von 49 bis 77% des Futters, und dadurch eine betrachtliche Verminderung der Gewichtszunahme. Bei den mit dem Toxin behandelten Tieren nahm die Gesamtzahl der Leukozyten im Vergleich zur Kontrolle ab, aber eine Leukopenie wurde wahrend der Behandlungszeit nicht entwickelt. Die Toxinbehandlung regte des weiteren eine statistisch gesicherte Erhohung der Nebennierenrinden-Aktivitat an. In vitro-Untersuchungen der Blast-Transformation, Immunrosettenbildung sowie der mittels IF nachweisbaren IgG-positiven Zellzahlen liesen eine 40-bis 50%ige Suppression der Immunreaktivitat durch das Toxin T-2 erkennen. Die mit T-2 behandelten Tiere zeigten im Vergleich zur Kontrolle tatsachlich eine statistisch gesicherte Erniedrigung der toxinneutralisierenden Titerwertes nach Immunisierung mit einer (B) Vakzine gegen nekrotische Enteritis. Daraus kann gefolgert werden, das unter den gegebenen Versuchsbedingungen das Toxin T2 eine stark immunsuppressive Wirkung auf die Jungschweine entfaltete, durch Storung der Funktion sowohl der T- als auch der B-Lymphozyten im Fruhstadium der Immuninduktion. Resume Influence de la toxine T-2 de Fusarium sur la fonction du cortex des glandes surrenales et la reaction immunitaire chez des jeunes porcs Six porcelets femelles sevres de 28 jours de la generation F-1 porc blanc hongrois × Duroc ont recu 5 ppm T-2 de toxine dans l'aliment durant 25 jours apres pre-periode de 7 jours. Six autres animaux femelles identiques ont servi de temoins. Le traitement avec T-2 a provoque un refus de 49 a 77% de l'aliment et une diminution marquee de l'augmentation du poids. Le nombre total des leucocytes a diminue chez des animaux traites a la toxine par rapport aux controles, mais une leucopenie ne s'est pas developpee durant le temps du traitement. Le traitement a la toxine provoqua une augmentation statistiquement demontree de l'activite du cortex des glandes surrenales. Des recherches in vitro de la transformation blastique, de la formation des immunrosettes et les nombres de cellules IgG positives mises en evidence par IF ont permis de reconnaitre une suppression de 40 a 50% de l'activite immunologique due a la toxine T-2. Les animaux traites au T-2 ont presente par rapport aux controles, un abaissement statistiquement prouve de la valeur du titre neutralisant la toxine apres une immunisation avec un vaccin B anti-enterite necrosante. La toxine T-2 a provoque dans les conditions decrites une forte action immunsuppressive sur les porcelets en derangeant la fonction aussi bien des lymphocytes T que B au stade precoce de l'induction immunologique. Resumen El influjo de la toxina de Fusarium T-2 sobre la funcion de la corteza anterrenal y la reactividad inmunologica de los lechones destetados Seis lechones hembras, destetados a la edad de 28 dias, de la generacion F-1 del cruce cerdo rural hungaro × Durox, fueron tratados tras un periodo previo de 7 dias durante 25 dias con 5 ppm de toxina T-2 a traves del pienso. Otras seis hembras de la misma edad y de la misma mezcla racial sirvieron como testigos no tratados. El tratamiento con T-2 provoco el rechazo del 49 hasta 77% del pienso, y con ello una disminucion considerable del aumento de peso. En los animales tratados con la toxina disminuyo la cifra total de leucocitos en comparacion con los testigos, pero durante el tiempo que duro la experiencia no se desarrollo ninguna leucopenia. El tratamiento a base de la toxina estimulo ademas el aumento de la actividad de la corteza anterrenal, el cual fue asegurado estadisticamente. Los estudios in vitro sobre la transformacion del blastemo, formacion de rosetas inmunologicas asi como las cifras celulares IgG-positivas, identificables mediante IF, permitieron reconocer una supresion del 40 hasta 50% de la reactividad inmunologica por la toxina T-2. De hecho, los animales tratados con T-2 mostraban en comparacion con los testigos una reduccion asegurada estadisticamente del titulo de neutralizacion de la toxina tras la inmunizacion con una vacuna (B) contra la enteritis necrotizante. De aqui se puede sacar la conclusion que bajo las condiciones de experiencia dadas desarrollaba la toxina T-2 una actividad inmunosupresiva enorme sobre los cerdos jovenes, perturbando la funcion tanto de los linfocitos T como la de los B en el estadio precoz de la inmunoinduccion.