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Introduction La bronchopneumopathie chronique obstructive represente la 4e cause de mortalite dans le monde et ne dispose a ce jour d’aucun traitement curatif. L’emphyseme, qui en est une des composantes, resulte de la destruction progressive des septums inter-alveolaires, conduisant a une insuffisance respiratoire. Parmi les marqueurs de senescence, des etudes montrent une surexpression du suppresseur de tumeurs p16 Ink4a dans les poumons de patients ayant un emphyseme compare aux fumeurs ou non-fumeurs sains. D’autres etudes ont montre l’influence de p16 Ink4a sur l’adipogenese. L’objectif est de determiner si la deletion de p16 Ink4a previent le developpement d’un emphyseme pulmonaire induit par une instillation d’elastase a un temps precoce ou tardif ainsi que les mecanismes impliques, en particulier l’induction de la lipogenese et l’activation des lipofibroblastes. Methodes Des souris adultes p16 Ink4a ko et sauvages (WT) ont recu une instillation intratracheale de 2UI d’elastase porcine pancreatique. Les souris ont ete sacrifiees 21 jours ou 90 jours apres l’instillation pour quantification morphometrique de l’emphyseme, evaluation de la septation secondaire et analyse de l’expression des genes de l’adipogenese et des marqueurs de pneumocytes. Evaluation dans un second temps des remaniements de la matrice extracellulaire. Resultats A 21 jours, la deletion de p16 Ink4a n’influence pas le degre d’emphyseme mais entraine une proliferation des pneumocytes de types 2, atteste par qPCR ou immunohistochimie ainsi qu’une activation de la lipogenese par rapport aux souris WT. A 90 jours, les souris p16 Ink4a presentaient un emphyseme significativement moins severe, des marqueurs de proliferation de pneumocytes 2 mais pas d’activation de l’adipogenese. A ce temps tardif, apparaissaient chez les souris p16 Ink4a des remaniements fibrotiques. Conclusion La deletion de p16 Ink4a ne protege pas de l’emphyseme induit par l’elastase dans un premier temps mais est associee a une amelioration des lesions a un temps tardif. Cet effet sous-tend un processus de regeneration alveolaire avec un remaniement secondaire la matrice extracellulaire.

Introduction La dysplasie bronchopulmonaire (DBP) est une pathologie du nouveau-ne premature favorisee par une oxygenotherapie precoce et caracterisee par un developpement pulmonaire anormal avec elargissement des espaces aeriens. L’hypoalveolisation et le defaut de septation des saccules primitifs correspondent a un defaut de production d’elastine par les fibroblastes. Les pneumocytes 2 pourraient aussi jouer un role en se differenciant en pneumocytes 1 si ceux-ci sont alteres. Cependant, la physiopathologie de cette maladie reste mal connue. La senescence, dont p16Ink4a est un acteur cle, est un arret permanent de la proliferation limitant le renouvellement des tissus et pourrait etre impliquee dans ce processus par le biais d’un defaut de differenciation et/ou reparation. L’objectif de ce travail est de determiner le role causal de p16 et de la senescence cellulaire sur la DBP dans un modele murin. Methodes Des souriceaux sauvages et p16-/-, ont ete exposes a une FiO 2 a 85 %, dans une enceinte hermetique, pendant la periode d’alveolisation, de j3 apres la naissance a j14. La morphometrie (intercepte lineaire moyen, surface alveolaire), la quantite d’elastine et sa distribution (coloration de Weigert) ont ete evaluees. La senescence a ete quantifiee par mesure de l’activite beta-galactosidase sur poumon frais et par l’expression en qPCR sur poumon total de p21. La division cellulaire a ete mesuree par immunohistochimie (Ki67). L’expression de l’elastine et de marqueurs inflammatoire (IL6, IL1β) a ete evaluee par qPCR sur poumon total. Resultats Apres exposition a l’hyperoxie, les souriceaux presentaient (1) une diminution de la surface alveolaire, une augmentation de l’intercepte lineaire moyen, une diminution de la quantite d’elastine et du nombre de cretes d’elastine, semblables aux lesions de poumons dysplasiques, (2) des marqueurs de senescence augmentes (expression accrue de la beta-galactosidase et de l’ARNm de p21), (3) une inflammation (IL6 et Il1β en ARNm). Il n’existait pas de difference entre les souriceaux sauvages et p16-/- pour les parametres sus-cites. En revanche, les souriceaux p16-/- en hyperoxie, compares aux sauvages, presentaient une division cellulaire accrue (Ki67), au sein du parenchyme pulmonaire. Conclusion Le modele d’hyperoxie se caracterise par une hypoalveolisation et une senescence majoree, non modulees par p16. En revanche, la deletion de p16, via une division cellulaire accrue, pourrait permettre une meilleure reparation a l’âge adulte.

We examined the effects of platelet-activating factor (PAF) on lung epithelial permeability by measuring the clearance of intratracheally administered 99m-technetium-labeled diethylene triamine penta-acetic acid (99mTc-DTPA) in guinea-pigs which were anaesthetised, paralysed and mechanically ventilated. The clearance of the radiolabeled tracer molecule 99mTc-DTPA from airways to the blood was expressed as changes in counts/min corrected for background. For each guinea-pig, 99mTc-DTPA clearance was assessed before and after i.v. PAF administration, when tracheal pressure had returned to near control values. Doses of 10, 50 and 100 ng/kg of PAF caused dose-dependent increases in 99mTc-DTPA clearance of 7 +/- 3%, 38 +/- 7% and 65 +/- 11% respectively. The respective effects of 0.5 mg/kg of the beta 2-adrenergic agonist salbutamol and 0.3 mg/kg of the alpha 1-adrenergic agonist methoxamine on the increase in lung epithelial permeability induced by 50 ng/kg PAF were also studied. Salbutamol significantly reduced the acute bronchoconstrictor effects of PAF, but did not affect the increase in lung epithelial permeability, which was 58 +/- 10%. Conversely, methoxamine significantly enhanced the bronchoconstrictor effects of PAF but inhibited the lung epithelial permeability increase, which was only 10 +/- 13%. In the absence of PAF, salbutamol significantly increased this permeability by 49 +/- 11%, whereas methoxamine alone slightly reduced, it by -11 +/- 4%. These results demonstrate that PAF increases lung epithelial permeability and suggest that vascular surface area recruitment may explain this increase.