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Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. Métodos utilizando cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrômetro de massa/massa (LC-MS/MS) foram desenvolvidos para diferentes grupos de micotoxinas e avaliados em castanha-do-Brasil. (a) Desenvolvimento de um Método para Determinação de Aflatoxinas B1, B2, G1, e G2 por LC-MS/MS em castanhas-do-Brasil. O primeiro método foi desenvolvido utilizando ionização química à pressão atmosférica (APCI) no modo positivo [M+H]+, para determinação simultânea das aflatoxinas (AFLs) B1, B2, G1, e G2 em castanhas-do-Brasil. Através da monitoração de múltiplas reações foi possível analisar as transições das AFLs aumentando assim a especificidade e sensibilidade. A separação das AFLs foi realizada utilizando uma coluna C8 e um gradiente de fase móvel composta por água:metanol (ambos com 25 mM de acetato de amônia) em um tempo total de corrida de 7 minutos. A extração das toxinas foi conduzida utilizando uma solução de acetonitrila:água (80:20) e não foi utilizada etapa de limpeza. Os valores de limite de detecção (LOD) e de quantificação (LOQ) do método para AFB1, AFB2, AFG1 e AFG2 foram 0.04; 0.045; 0.050 e 0.060 µg.kg-1 e 0.08, 0.09, 0.10 e 0.12 µg.kg-1 respectivamente. Os coeficientes de correlação para as toxinas foram excelentes e a linearidade foi obtida em uma faixa de 0.005, 0.02 0.25 e 0.04 até 0.5, 2.0, 25 e 4.0 µg.kg-1 para cada toxina respectivamente. Os componentes da matriz não influenciaram a detecção e quantificação das AFLs. Os valores de recuperação ficaram entre 92 e 100 % e valor do AFLs obtidos a partir de amostras naturalmente contaminadas esteve entre 1.2 à 11.5 µg.kg-1. (b) Desenvolvimento de Métodos para 15 Micotoxinas por LC-MS/MS Utilizando Ionização Química por Pressão Atmosférica e por Eletrospray. Neste estudo dois métodos foram desenvolvidos para quantificação de 15 micotoxinas APCI e eletrospray (ESI) como fontes de ionização. A separação foi realizada utilizando uma coluna C18 e gradientes de fase móvel compostas de metanol:água (ambos com 25 mM e acetato de amônia). As toxinas estudadas foram AFLs, citrinina (CTR), fumonisinas (FB1 e FB2), ocratoxina A (OTA), tricotecenos (NEO; 15ADON; 3ADON; DAS; HT2; T2) e zearalenona (ZON). Os tempos cromatográficos para os métodos foram de 11.5 e 9.5 minutos para APCI e ESI respectivamente. APCI não foi capaz de ionizar FB1; FB2; CTR e OTA e a ESI não foi capaz de ionizar as AFLs. Os LOQs utilizando APCI foram 0.25, 2.5, 0.7, 0.01, 0.015, 0.015, 0.02, 0.2, 1.0, HT2, T2 e ZON respectivamente. Utilizando ESI, os LOQs foram de 0.1, 1.5, 0.14, 0.04, 0.08, 0.1, 0.2, 0.08, 2.5, 0.08 e 0.05 µg.kg-1 para NEO; 15ADON; 3ADON; DAS; HT2; T2; FB1; FB2; CTR; OTA e ZON respectivamente. Sete micotoxinas foram ionizadas pelas duas fontes de ionização. Todavia, os LOQs foram menores utilizando ESI. Os dois métodos desenvolvidos mostraram vantagens e desvantagens quando comparados e a escolha da fonte de ionização dependerá do objetivo do estudo. Os dois estudos confirmaram o uso da espectrometria de massas como uma das melhores ferramentas para análise de micotoxinas em alimentos, especialmente devido às restrições das legislações internacionais.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. A presença de patulina (PTL), um metabólito secundário de fungos (Penicillium spp., Aspergillus spp. e Byssoclamys spp.), foi avaliada em produtos de maçã por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por ultravioleta (276 nm) em produtos de maçã (sucos de maçã, purê e maçã desidratada) comercializados na região de Florianópolis. Foram analisadas 201 amostras comercializadas em Florianópolis provenientes da região Sul e Sudeste do Brasil. Do total de amostras analisadas 2 % (4 amostras) estavam contaminadas com PTL e todas com níveis abaixo do limite máximo de resíduos (LMR = 50 µg/L) estabelecido pelo Codex Alimentarius. Todas as amostras positivas foram de sucos artesanais, representando 33,3 % (4), com níveis entre 6,3 e 10,8 µg/L. Quanto as análises físico-químicas, todas as amostras de sucos de maçã apresentaram acidez acima 0,15 g/100 mL (ácido málico) e ºBrix maior que 10,5º, mostrando boa qualidade e de acordo com a legislação brasileira. Foi observado que a PTL aplicada (50; 100 e 200 µg/L) em suco de maçã e submetida à ação de adsorventes: quitosana (QT) e carvão ativado (CA) com níveis de 0,1; 0,2 e 0,3 % foi reduzida para os dois adsorventes para os três níveis de contaminação. Como esperado a maior remoção de PTL foi observada nos sucos que foram aplicados maior quantidade de adsorvente (0,3 %). O CA apresentou maior capacidade de remoção de PTL com médias de 76,4; 79,1 e 80,5 % enquanto a QT com 17,6; 19,7 e 26,1 %. Inclusive, o CA apresentou maior eficácia que a QT na remoção de PTL em suco de maçã independente da quantidade de adsorvente aplicada.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. Foram coletadas 42 amostras de erva-mate adquiridas em estabelecimentos comerciais no período de novembro/2003 a janeiro/2004 nas regiões Oeste, Serrana, Norte e Sul de Santa Catarina nas quais foi analisada a microbiota fúngica, a presença de espécies produtoras de micotoxinas e a presença de aflatoxinas, ocratoxinas e fumonisinas. Quanto à contagem total de fungos e leveduras 28,57 % das marcas de erva-mate analisadas apresentaram valores superiores a 103 UFC/g, acima do limite estabelecido pela legislação brasileira. Os seguintes gêneros fúngicos foram isolados em ágar extrato de malte, em ordem decrescente de freqüência Aspergillus spp., Mucor spp.,Rhizopus spp., Penicillium spp., Paecilomyces spp., Helminthosporium spp., Botrytisspp., Fusarium spp. e fungos não-esporulados. Das cepas de Aspergillius spp. 1,28 % foram produtoras de aflatoxinas do grupo B e 0,11 % de ocratoxina A. A produção de ocratoxina A foi verificada em 50 % das cepas de Penicillium spp. isoladas. A cepa de Fusarium não apresentou potencial toxigênico para a produção de fumonisinas. Nenhuma das micotoxinas analisadas foi detectada nas amostras de erva-mate.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. A contaminação por resíduos de fumonisinas FB1 e FB2 produzidas por Fusarium verticillioides foi analisada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e detecção por fluorescência em (1) amostras de milho para consumo animal e humano, coletado nas regiões Norte, Oeste, Serrana, Sul e Vale do Itajaí do estado de Santa Catarina no ano de 2002 [Título: FUMONISINAS B1 e B2 EM MILHO (Zea mays L.) DESTINADO AO CONSUMO ANIMAL E HUMANO ARMAZENADO EM SANTA CATARINA] e (2) após processamento de fubá de milho integral naturalmente contaminado e preparo de polentas [Título: EFEITO DO PROCESSAMENTO NA ESTABILIDADE DE FUMONISINAS B1 E B2 EM POLENTA]. Em (1), foram analisadas 73 amostras, sendo que do total 97,3 % estavam contaminadas por FBs com os níveis mais altos encontrados nas regiões Sul e Oeste, respectivamente. Os níveis de FB1 atingiram 49,53 mg/g (consumo animal) e 52,46 mg/g (consumo humano). O nível de contaminação atingiu um máximo de 80,92 e 71,14 mg/g de FB1+FB2 no milho para consumo animal e humano, respectivamente. Pela legislação vigente (FDA, 2001) 76,7; 27,4 e 2,7 % do milho analisado estava em desacordo com os limites recomendados para (a) eqüinos (5 mg/g), (b) suínos (20 mg/g) e (c) gado de corte (60 mg/g), respectivamente e 78 % das amostras estavam acima do recomendado para consumo humano (4 mg/g). Em (2), independente dos níveis de contaminação, foram observadas reduções nos teores de FBs inicialmente presentes no fubá após preparo de polenta (8,5 a 54,6 % para FB1 e 24,8 a 56,9 % para FB2). Os resíduos de FB1+FB2 após a cocção para os quatro níveis iniciais foram 59,1; 85,2; 84,0; e 44,9 %, respectivamente. Apesar de ter ocorrido degradação, o processamento não foi suficiente para reduzir as FBs abaixo do MRL para humanos (4 mg/g) pois permaneceram ainda resíduos com 5,79; 12,0; 23,44; e 16,3 mg/g de FBs. Como esperado, o pH não apresentou variações significativas (5,8 - 6,12), bem como não esteve próximo aos limites de degradação para as FBs. Embora a temperatura de cocção (95 a 100 oC) tenha sido baixa, as toxinas ficaram expostas durante um período relativamente longo, o qual pode ter favorecido a degradação nas condições dos experimentos (temperatura+umidade+tempo) hidrolisando as FBs bem como ocorrendo perdas pela evaporação.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos. Resíduos de etilenotiouréia (ETU), produto de degradação dos etilenos bis ditiocarbamatos, com propriedades carcinogênicas, foram analisados por cromatografia líquida de alta eficiência e detecção por ultravioleta (254nm) em: (1) tomates, variedade Longa Vida, provenientes das duas regiões de maior produção do estado de Santa Catarina (SC): região Oeste e da Grande Florianópolis [Titulo: Resíduos de etilenotiouréia em tomates (Lycopersicon esculentum), cultivados no estado de Santa Catarina] e (2) após o processamento de suco e purê de tomate artificialmente contaminado [Titulo: Efeito do processamento de tomate nos níveis de etilenotiouréia em suco e purê]. Em (1), foram analisadas 125 amostras, sendo 76 e 49 provenientes das duas regiões estudadas, respectivamente. Do total de amostras analisadas 76 % estavam contaminadas com ETU e todas estavam acima do limite máximo de resíduos (LMR) europeu (0,05 µg/g). Na cidade de Caçador, 71,1 % das amostras estavam contaminadas, e destas a maioria apresentavam níveis próximos ao LMR (0,05 a 0,5 µg/g). Já, em Santo Amaro da Imperatriz, 83,7 % apresentaram resíduos, sendo que somente em 12,2 % a concentração de ETU estava entre 0,05-0,5 µg/g e o maior número (71,5 %) de amostras apresentavam concentrações mais altas (0,5-2,95 µg/g). Em (2) foi observado que o total de ETU aplicado em tomates in natura contaminados (0,5; 1 e 10 µg/g) e submetido ao processamento para produção de suco e purê reduziu para os dois produtos. Após o processamento, foram encontrados resíduos de 0,39; 0,75 e 2,95 µg/g de ETU no suco, correspondendo a 77,9; 75,1 e 29,5 %, respectivamente. No purê de tomate os resíduos foram um pouco mais elevados com 0,39; 0,87 e 3,6 µg/g (77,7; 86,6 e 36,15 %) para os 3 níveis de contaminação, respectivamente. As etapas que mais afetaram a redução de ETU nos produtos finais foram à liquefação, filtração e concentração. Durante o congelamento (-18ºC) o ETU apresentou também redução: após 30 dias, a perda para suco e purê de tomate variou de 12,8 a 13,3 % e de 8,0 a 10,2 %, respectivamente. Foi observado uma perda total (processamento e congelamento) de ETU de 33,5 e 25,0 % para suco e purê de tomate, respectivamente.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Ciência dos Alimentos Fumonisinas ocorrem amplamente em milho e produtos derivados provocando distúrbios em diferentes espécies animais e estando associada ao câncer de esôfago em algumas regiões do mundo. Com base nos dados acima o presente trabalho teve por objetivo: (i) avaliar a ocorrência de fumonisinas em produtos derivados de milho destinados a consumo humano comercializados no Estado Santa Catarina. Das 82 amostras analisadas (farinha de milho, canjica, flocos de milho e milho de pipoca), 92,68 % apresentaram níveis detectáveis de fumonisinas, sendo a farinha de milho o produto com maior contaminação. Foram analisadas farinha de milho artesanais e industrializadas e os resultados demonstraram níveis detectáveis de FBs em 91,5 % das amostras, sendo que os níveis médios foram de 3,81 e 5,73 mg/g, respectivamente; (ii) analisar as alterações morfológicas em fígado de channel catfish (Ictalurus punctatus) tratados intraperitonealmente com FB1, em doses de 1,0; 5,0 and 10,0 mg FB1/kg p.c./dia, respectivamente, durante 21 dias. Os fígados dos animais tratados apresentaram alterações de leves à drásticas, dependendo da dose e tempo de tratamento a que foram submetidos. Verificaram-se alterações e desestruturação generalizada das estruturas membranosas, dilatação e desenvolvimento anormal do REG, aumento de ribossomos e alterações mitocondriais. Pôde-se constatar ao nível morfológico a ocorrência de processos envolvendo necrose e apoptose. Ao final do tratamento figuras de mielina elétron-densas estavam bem caracterizadas; (iii) considerando-se que o sul do Brasil apresenta alta incidência de câncer de esôfago foi desenvolvido um levantamento de casos desta doença, através de registro hospitalar em Santa Catarina, determinando a prevalência por idade, sexo, atividade profissional e região do Estado, bem como dos hábitos alimentares, tabagismo e álcool. Sendo o câncer uma doença multifatorial, a contaminação por fumonisinas em produtos de milho consumidos por estas populações pode ser um dos fatores relacionados.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Foi realizado uma avaliação da contaminação por resíduos de etileno-tio-uréia (ETU) em maçãs (variedades Gala e Fuji) produzidas na Estação Experimental da EPAGRI em São Joaquim, tratadas com mancozeb e coletadas em diferentes períodos de carência, bem como, o monitoramento dos níveis de resíduos de ETU em maçãs produzidas em Santa Catarina e comercializadas no Companhia de Abastecimento do Estado de Santa Catarina (CEASA/SC). O método para determinação de ETU foi uma adaptação no de Greve e Herbold (1996), com detecção por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). O limite de detecção (LDC) foi de 0,05 mg/Kg e o limite de determinação (LDM) de 0,087 mg/Kg, nas condições de análise do Laboratório de análise de resíduos de Pesticidas/CAL/UFSC. Como esperado foram detectados níveis variados de ETU nas maçãs tratadas com mancozeb, com total de 57,5% amostras contaminadas. Dentre as maçãs variedade Gala, 35% apresentaram resíduos de ETU, atingindo níveis máximos de 0,114 mg/Kg, no entanto, na variedade Fuji, 80% das amostras estavam contaminadas com até 0,344 mg/Kg. É importante salientar que, entre as amostras contaminadas das variedades Gala e Fuji, 57,1% e 31,2%, respectivamente, apresentaram contaminação por traços. Ambas variedades apresentaram contaminação por ETU em todos os períodos de carência analisados (7, 14, 21 e 28 dias após a última aplicação do fungicida). Das amostras de maçã (40) provenientes do CEASA/SC, 13 apresentaram resíduos de ETU, correspondendo a 32,5% do total, sendo 30% com níveis superiores ao LDM e 2,5% entre o LDM e o LDC do método. Estas amostras eram provenientes de Fraiburgo, São Joaquim, Bom Jardim, Urubici e Lages nas porcentagens de 42,5, 25, 20, 7,5 e 5%, respectivamente, o nível máximo de contaminação foi de 1,527 mg/Kg.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Foram pesquisadas a presença de mercadores biológicos para aflatoxina B1 (AFB1), através do aduto AFB1-Lys em residentes da cidade de São Paulo no mês de junho de 1999, mês este de festas juninas, com maior exposição da população à alimentos contaminados com a AFB1, através da ingestão de amendoim, milho e seus derivados.Foram também realizados levantamentos da ocorrência de carcinoma hepatocelular (CHC), um dos efeitos tóxicos crônicos da AFB1, em pacientes de hospitais de São Paulo(Antônio Carlos Camargo - HACC) no periodo de 1953 a 1991 e de Santa Catarina (Infantil Joana de Gusmão - HIJG; Governador Celso Ramos - HGCR e Universitário - HU) no período de 1981 a 1998, correlacionando com hábitos alimentares (AFB1), bem como, possíveis doenças precursoras de CHC (hepatite e cirrose). Todas as amostras avaliadas, apresentaram níveis do aduto AFB1 - Lys( adutode AFB1-Lys por mg de albumina sangüinea), sendo que 62% dos residentes apresentaram níveis acima de 3 pg/mg de aduto AFB1-lys. Estes n´veis, oscilaram de 3 a 57,3pg/mg com teor médio deste aduto de 14,9 pg/mg. As amostras que apresentaram n´veis mais elevados, atingiram 57,1 e 57,3 pg/mg de AFB1-Lys, respectivamente. Todos os residentes eram provenientes da área urbana e a presença do aduto independeu daprofissão e idade. No Estudo de ocorrência de CHC nos hospitais dos Estados de São Pauloe Santa Catarina, foi observado que em São Paulo, o HACC, registrou 122 casos com suspeita de CHC e que 66% foram a óbito. No estudo pela faixa etária, 31% depacientes estavam entre 41 e 80anos e 64% eram do sexo masculino. Dez Estados brasileiros (São Paulo, Bahia, Minas Gerais, Paraná, Mato Grosso, Goiás, Rondônia, PARÁ, Paraíba e Piauí) foram registrados como a residência nos últimos dez anos desses pacientes, com prevalência de São Paulo seguido da Bahia. Somente 7% dos pacientes apresentaram cirrose. Em Santa Catarina, dos hospitais avaliados, o HIJF registrou 14% de CHC e 40% de cirrose, sendo 54% dos pacientes do sexo feminino. AS regiões em que residiam a maior parte dos pacientes foram a Lesta(Grande Florianópolis) e do Vale (Vale do Itajaí) com 29% cada, e 28,6% foram à óbito. No HGCR e HU, 68% foram homens sendo registrados 16,5% de CHC e 51,7% de cirrose, 17,7% foram à óbito por CHC e a faixa etária da maioria dos casos foi dos 41 anos aos 80 anos. Quanto `a residência,56,6% eram da região do Vale do Itajaí e o maior n´mero de DH registrado, ocorreu noano de 1996(11%). A AFB1 pode estar presente em diversos alimentos e sendo esta comprovadamenta carcinogênica, é importante considerar que as crianças são mais susceptíveis aos efeitos tóxicos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. O total de 36 amostras de erva-mate foram coletadas, em sua embalagem original (saco de papel) no comércio de Florianópolis, Santa Catarina, para: (a) contagem de fungos filamentosos e leveduras em meio ágar batata dextrose (ABD), (b) isolamento em ágar Sabouraud e microcultivo em lâmina com o mesmo meio para identificação da micromorfologia dos fungos isolados, (c) avaliação do potencial toxigênico das cepas isoladas em ágar côco, (d) análise de aflatoxinas, ocratoxina A, zearalenona e esterigmatocistina, e (e) avaliação da influência da umidade relativa (UR) no crescimento de Fusarium moniliforme KU 4356 e a produção de fumonisinas em erva-mate. O conteúdo médio de umidade foi de 8.58% (min. 6.72 e máx. 10.30%). A contagem média de fungos filamentosos de 1,9 x 102 (min. 3,5 x 101 e máx. 5,6 x 102 UFC/g). Nenhuma amostra apresentou contaminação superior a 10 x 103 UFC/g. s. A maioria (60%) dos fungos isolados foram dos gêneros Rhyzopus e Mucor. Não foram detectadas nenhuma das micotoxinas estudada, embora 65% das cepas de Aspergillus isolados, fossem toxigênicos para uma ou mais aflatoxinas e 7% das cepas de Penicillium apresentassem potencial ocratoxigênicos. O Fusarium inoculado na erva-mate só apresentou atividade metabólica após 20 dias de incubação a 90,3% de UR, com desenvolvimento ótimo após 25 dias de incubação a 97% de UR, entretanto não foi verificada nenhuma produção de fumonisinas.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. No período de 15 meses (junho/99 a agosto/00), foi realizado um estudo de armazenagem de arroz parboilizado classe longo fino Tipo 1, da cultivar Epagri 108, proveniente da Epagri de Santa Catarina, sul do Brasil, em condições controladas de temperatura e umidade. O presente estudo, teve como objetivos verificar a influência da temperatura e umidade sobre o crescimento fúngico, verificar o grau de contaminação por fungos filamentosos e leveduras, estudar a microbiota fúngica, identificar os fungos filamentosos isolados e determinar as cepas de fungos toxigênicas durante 15 meses de armazenagem. As amostras de arroz parboilizado foram dispostas em três lotes: A, B e C na sala de armazenagem, sendo cada lote composto de 15 amostras. A cada 30 dias eram sorteadas três amostra para analises micológica e determinação do conteúdo de umidade do grão. As condições ambientais de armazenagem foram acompanhadas sendo observado, temperatura máxima média de 31,9 ºC, e mínima média de 13,1 ºC. Umidade relativa máxima de 88% e mínima de 42%. O conteúdo de umidade das amostras variou levemente de 12,6 a 13,4%, com um aumento gradual até dezembro/99, apresentando um decréscimo até abril/00, em seguida estabilizou até o final do período de armazenagem. O isolamento dos fungos foi efetuado utilizando àgar batata dextrosado. A determinação de aflatoxinas (AFs), ocratoxina A (OTA), zearalenona (ZEA), esterigmatocistina (EST) e citrinina (CTR), foram realizadas empregando-se cromatografia em camada delgada. A contagem total viável média para os fungos filamentosos foi de 1,4 x 102 UFC/g. Foram isolados nove gêneros fúngicos, sendo o Penicillium o mais freqüente seguido de Aspergillus, Cladosporium, Alternaria, Mucor, Phoma, Rhizopus, Helmintosporium, Botrytis e fungos não esporulados. O potencial toxigênico dos fungos isolados foi efetuado em àgar côco e.todos os fungos toxigênicos isolados eram do gênero Penicillium. Os fungos toxigênicos isolados foram identificados como Penicillium citrinum Thom representando 28% do total de cepas isoladas, sendo que 16% eram produtoras de citrinina. Não foi observado nenhuma cepa com potencial toxigênico para aflatoxinas e ocratoxina A.Quanto a contaminação por micotoxinas no arroz parboilizado , não foram detectadas nenhuma toxina analisada ( aflatoxinas, ocratoxina A, zearalenona e esterigmatocistina). Em análises quantitativas foram detectados traços de citrinina, no final da armazenagem.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Foram avaliados durante agosto de 1997 a agosto de 1998, os fungos toxigênicos e a contaminação por micotoxinas em amostras de feijão (Phaseolus vulgaris L.) classes preto e cores, proveniente das regiões de (Grande Florianópolis, Norte, Oeste, Planalto Serrano, Sul e Vale do Itajaí,) Santa Catarina (SC). O isolamento dos fungos foi efetuado utilizando ágar dextrose batata. As análises de aflatoxinas (AF),ocratoxina A(OTA), zearalenona (ZEA) e esterigmatocistina (EST) foram realizadas empregando-se cromatografia em camada delgada. A contagem total viável da média para os fungos filamentosos foi de 2,8 x 103 UFC/g e 6,73 x 103 UFC/g, para as classes preto e cores, respectivamente. Doze gêneros fúngicos foram isolados, sendo Aspergillus, Penicillium e Phoma os mais freqüentes, seguidos por Rizopus, Alternaria, Helminthosporium, Cladosporium, Botrytis, Fusarium, Trichoderma, Curvularia, Drescheslera além dos não esporulados. Todos os fungos toxigênicos isolados de feijão classes preto e cores pertenceram aos gêneros Aspergillus e Penicillium. Quanto ao gênero Aspergillus isolados das amostras de feijão classe preto, 24,6% das cepas eram produtoras de micotoxinas, sendo que 13,1% produziram AF e 11,5% OTA, enquanto que do gênero Penicillium 28,9% produziram citrinina (CTR). Para a classe cores, 22,1% das cepas eram produtoras de micotoxinas, sendo que 16,7% produziram AF e 5,4% OTA, e o gênero Penicillium apresentou 35,4% de cepas produtoras de CTR. As espécies toxigênicas isoladas e identificadas foram: A.flavus, A.parasiticus, A.ochraceus e P.citrinum Thom. Quanto a contaminação por micotoxinas nas amostras de feijão classes preto e cores cultivados em SC, foram detectados somente AF e OTA. Nenhuma das classes de feijão estudadas apresentou contaminação por ZEA e EST. Nas amostras de feijão preto a contaminação por AF atingiu 4% das amostras analisadas com limites muito baixos (traços), já a contaminação por OTA chegou a 12% sendo que o níveis variaram de traços a 53,4 ppb. Para o feijão cores a contaminação por AF chegou a 6,3% das amostras analisadas, sendo que a contaminação por OTA também foi de 6,3%. No entanto, os níveis de AF foram muito baixos e não passaram de traços, porém para OTA os níveis foram bastantes elevados, variando de 26,7 a 160,3 ppb. O resultado da análise estatística revelou que as variáveis, contagem total viável de fungos filamentosos e leveduras, isolamento de fungos toxigênicos, umidade e contaminação por micotoxinas, para as duas classes de feijão preto e cores, não apresentou diferença significativa. Realizando a análise de variância entre as cidades de procedência, independente da classe, observou-se que apenas a umidade apresentou diferença significativa (P

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Considerando a necessidade de avaliar outro tipo de poluição a que o mar da Ilha de Santa Catarina está exposto, além da do esgoto sanitário, foi realizado uma pesquisa para avaliar sua contaminação através da rede pluvial. O estudo constou de (a) um levantamento de estabelecimentos da cidade de Florianópolis, que utilizam em sua rotina de trabalho produtos químicos, cujos resíduos são descartados na rede pluvial e (b) uma avaliação desta contaminação no pescado capturado na região. Vinte e dois estabelecimentos foram pesquisados quanto ao tipo dos produtos utilizados, efeitos à saúde e seu modo de descarte, sendo 4 clínicas radiológicas, 7 hospitais, 9 laboratórios de análises químicas e 2 maternidades. Os hospitais e maternidades foram divididos nos seguintes setores: esterilização, lavanderia e radiologia. À partir dos resultados foi observado que, os pontos críticos da cidade onde mais se concentram estes despejos químicos são as baías norte e sul, localizadas na região central de Florianópolis e o mangue do Itacorubi, sendo que este último tem conecção com a baía norte. Todos os estabelecimentos visitados, descartam solventes, reagentes, produtos de radiologia, lavanderia e esterilização na rede pluvial. Entre os produtos descartados estão o benzeno, clorofórmio, glutaraldeído, formaldeído, tetracloreto de carbono, cromato e dicromato de potássio, acetato de chumbo e o cloreto de cádmio todos de efeito carcinogênico; sendo os dois últimos também considerados teratogênico. Embora existam outras vidas marinhas nos locais de descarte dos resíduos acima, tainhotas e paratis (gênero Mugil) são peixes mais encontrados e consumidos pelos nativos e moradores, que utilizam a pesca como meio de sobrevivência na região. Os pontos escolhidos para captura das amostras foram de acordo com a localização dos descartes feitos pelos estabelecimentos anteriormente citados, e denominados de Estação I (mangue do Itacorubi), Estação II (baía norte) e Estação III (baía sul); sendo coletadas amostras em 6, 8 e 6 pontos para cada Estação respectivamente. A captura do pescado foi através de tarrafa: malha 2,5 e braça 24; que após ser colocado em isopor com gelo foram transportadas ao Laboratório de Resíduos Tóxicos das Ciências dos Alimentos/CCA/UFSC para posterior análise. Foi portanto separado para análise a parte comestível do pescado, ou seja o tecido muscular e analisado através de espectrometria por absorção atômica para detecção de metais pesados (cádmio, chumbo e cromo). Não foram detectados tanto cádmio, quanto chumbo ou cromo, dentro do limite de detecção do estudo realizado. Os resultados encontrados indicam que, embora exista poluição na região estudada, esta ainda não chegou a ser transferida para a parte comestível do pescado. Tal fato talvez esteja relacionado que nesta região, não há atividades industriais, que poderiam causar uma poluição à ponto de alterar a composição das águas de escoamento e que provavelmente causaria efeitos adversos a curto prazo sobre os compartimentos do ecossistema aquático das baías norte e sul e mangue do Itacorubi, a ponto destes metais pesados serem detectados no tecido muscular dos peixes. Contudo há indicativos de que a poluição do mar e mangue esteja presente e talvez aumentando gradativamente nas referidas regiões, pelos descartes químicos realizados diariamente, como mencionado na primeira parte da pesquisa e também pelos estudos realizados por Panitz (1986), Laurenti (1992) e Queiróz et al., (1993). Considerando a toxicidade e a diversidade dos produtos utilizados, além do número de estabelecimentos que realizam este descarte; as referidas baías e mangue vem recebendo um volume considerável de poluentes vindo a comprometer as comunidades marinhas e dependendo das condições serem translocados através dos diversos elos da cadeia alimentar. São necessárias medidas para controlar/reduzir estes descartes químicos diários para evitar que num futuro talvez próximo, a comunidade, esteja ingerindo peixe contaminado além de uma alteração maior do ecossistema.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. A identificação de Claviceps africana em sorgo, foi dividida em três distintas etapas, interligadas entre si. Na primeira fase, foram analisadas amostras de panículas frescas de sorgo (Sorghum bicolor [L.] Moench), provenientes de lavoura naturalmente infestada, coletadas nos municípios de Rio do Oeste e Ituporanga, no Estado de Santa Catarina; escleródios de Claviceps spp coletados em sorgo, provenientes do campo de produção de sementes, no município de Capinópolis no Estado de Minas Gerais e escleródios do fungo em estudo, provenientes de plantação em casa-de-vegetação realizada no Departamento de Ciência e Tecnologia de Alimentos, do Centro de Ciências Agrárias, da Universidade Federal de Santa Catarina, para a caracterização morfológica dos escleródios. Tendo sido esta realizada, com o emprego de técnicas de macroscopia para a observação da camada externa da estrutura fúngica, através de microscópio-estereoscópio e, de microscopia nos tecidos internos da estrutura, visualizados por microscópio óptico e microscópio eletrônico de varredura. Na segunda etapa do trabalho de identificação micológica e fitopatológica de C.africana em sorgo, foram aplicados métodos de germinação dos escleródios, com a finalidade de obtenção da fase teleomorfa do fungo. Também, a partir do isolamento da cultura pura das fontes de inóculo do fungo, aplicados no teste de patogenicidade em dois anos consecutivos, para a observação da doença e a comprovação do fungo em estudo. Na última etapa do trabalho, de análise bioquímica para a detecção do alcalóide principal, encontrado no escleródio do fungo, a dihidroergosina (DHE), com a utilização de métodos empregados na determinação de micotoxinas, realizadas com amostras provenientes das etapas anteriores. Os resultados foram submetidos à análise estatística descritas em duas etapas: estatística descritiva e análise de variância, através do programa Statistica TM da Star Soft TM. Como resultado final, foi possível o cruzamento de dados, provenientes de áreas afins complementares, para a confirmação do trabalho proposto, bem como, da experimentação das diferentes técnicas na identificação do fungo.