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Submitted by Juliana Zorzi Colete (julyzorzi@hotmail.com) on 2018-06-19T18:16:47Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado definitiva.pdf: 4321386 bytes, checksum: 3a2fa9f824554157582a69fd369a6bce (MD5) Approved for entry into archive by Ana Paula Rimoli de Oliveira null (anapaula@foa.unesp.br) on 2018-06-19T19:42:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 colete_jz_dr_araca_int.pdf: 4321386 bytes, checksum: 3a2fa9f824554157582a69fd369a6bce (MD5) Made available in DSpace on 2018-06-19T19:42:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 colete_jz_dr_araca_int.pdf: 4321386 bytes, checksum: 3a2fa9f824554157582a69fd369a6bce (MD5) Previous issue date: 2018-05-23 Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Financiadora de Estudos e Projetos (FINEP) Avaliar o reparo ósseo periimplantar em ratas submetidas à ovariectomia e tratadas com Ranelato de Estrôncio (625mg/kg/dia) ou OPG-Fc (10mg/Kg/2 vezes por semana). Material e Método: Sessenta e quatro ratas, com peso aproximado de 300 gramas, divididas em 4 grupos experimentais conforme tratamento medicamentoso e análises: SHAM; OVX; OVX/RE; OVX/OPG-Fc. Cada animal recebeu 2 implantes sendo 1 em cada metáfise tibial. A eutanásia foi realizada aos 42 e 60 dias após a instalação dos implantes. Foram realizadas as análises de microtomografia computadorizada (micro CT), biomecânica (torque reverso) histométrica, por microscopia confocal a laser, análise da expressão gênica por PCR em tempo real, histológica e imunoistoquímica. Os resultados histológicos evidenciaram para o grupo OVX-RE aspecto de neoformação óssea melhorada, com trabéculas mais espessas e baixa presença de tecido conjuntivo, comparado ao grupo OVX. Os resultados imunoistoquímicos demonstraram intensa marcação de OPG para o grupo OVX-RE e intensa marcação de RANKL para o grupo OVX. Já a análise por microscopia confocal evidenciou que o grupo OVX-RE obteve marcação superior para vermelho de alizarina comparado aos outros dois grupos (Tukey test – P < 0,05). Para os parâmetros BV/TV, Tb.Th, o grupo OVX/RE apresentou os maiores valores em relação aos demais grupos. Para Tb.Sp o grupo OVX/OPG-Fc apresentou o melhor resultado (OVX: p0,05), e Tb.N, houve diferença estatisticamente significante na comparação dos resultados entre os grupos OVX e OVX/OPG-Fc (p 0.05), and the Tb.N exhibited a statistical significant difference in the combination of results between the OVX and OVX / OPG - Fc groups (p

Made available in DSpace on 2016-06-07T17:12:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-19. Added 1 bitstream(s) on 2016-06-07T17:16:36Z : No. of bitstreams: 1 000863888.pdf: 1762312 bytes, checksum: 33f6a96aaa02314d08de10f973bdf6e4 (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Introdução: apesar do sucesso quanto à perda de peso e controle das comorbidades, as cirurgias bariátricas, como o Bypass Gástrico em Y de Roux (BGYR), promovem alterações no metabolismo hormonal e do tecido adiposo, as quais podem se associar a maior remodelação e perda ósseas. Entre os possíveis mecanismos envolvidos estão a influência de adipocinas sobre a modulação da expressão do ligante do receptor ativador do fator nuclear kappa β (RANKL) e da osteoprotegerina (OPG) e o aumento da expressão de esclerostina, em resposta à redução da carga mecânica. Objetivos: avaliar o efeito da perda de peso e das alterações hormonais, após o BGYR, sobre o metabolismo ósseo. Casuística e métodos: foram avaliadas mulheres com obesidade graus II e III, no menacme, submetidas ao BGYR no Hospital das Clínicas de Botucatu, antes e após três, 12 e 24 meses de cirurgia, quanto aos dados antropométricos e laboratoriais [paratormônio (PTH), fosfatase alcalina total (FA total) e fração óssea (BSAP), Interligadores C-Terminais do colágeno Tipo I (CTX), 25 hidroxi-vitamina D (25-OH-Vit D), leptina, adiponectina, RANKL, OPG e esclerostina]. Resultados: observou-se redução de leptina [34,4 (14,7; 51,9) para 22,5 (1,9; 52,7) ng/mL] e OPG [3,6 (1,1; 11,5) para 3,4 (1,5; 6) pmol/L] após o procedimento, com aumento de adiponectina [7,4 (1,7; 18,4) para 13,8 (3,0; 34,6) μg/mL], CTX [0,2 (0,1; 2,2) para 0,6 (0,4; 6,0) ng/mL], RANKL [0,1 (0,0; 0,5) para 0,3 (0,0; 2,0)pmol/L] e esclerostina [21,7 (3,2; 75,1) para 34,8 (6,4; 80,5) pmol/L], após três meses de acompanhamento. A BSAP também aumentou, após 12 meses de procedimento [10,1 (5,4; 18,9) para 13,9 (6,9; 30,2) μg/mL] (p

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-31Bitstream added on 2014-06-13T18:44:46Z : No. of bitstreams: 1 sartori_r_dr_arafo.pdf: 1126976 bytes, checksum: b952e5d8db014ff996192d8476649c74 (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Embora a doença periodontal tenha origem infecciosa, ela se caracteriza por uma complexa resposta imune-inflamatória, com a participação de células residentes e não-residentes, produzindo diversas citocinas e mediadores biológicos. A principal característica da doença periodontal destrutiva é a reabsorção do osso alveolar, a qual é uma consequência frequentemente irreversível do processo patológico e das citocinas produzidas pela resposta do hospedeiro. Citocinas específicas atuam diretamente no controle da remodelação óssea, denominadas RANKL (Receptor activator of NF-kB ligand) e OPG (Osteoprotegerin,). RANKL é uma proteína produzida por fibroblastos, osteoblastos, condrócitos, células mesenquimais e células T e B ativadas e sua ligação com o seu receptor RANK (Receptor activator of NF-kB) em células precursoras de osteoclastos é necessário e suficiente para a ativação, diferenciação e sobrevivência de osteoclastos maduros. OPG, a outra proteína envolvida nesta modulação, serve como um falso receptor para RANKL, impedindo dessa forma a ligação RANKL-RANK e levando a uma menor ativação de osteoclastos. Assim, o balanço entre RANKL e OPG é o atual paradigma para a modulação da remodelação óssea. FK-506 (tacrolimo) é uma droga imunossupressora usada para prevenir rejeição de enxertos afetando a ativação de linfócitos T por meio da modulação da via da calcineurina, inibindo a ativação de NFAT e de NF-kB. Estudos prévios demonstraram que o uso de tacrolimo em ratos diminui a resposta inflamatória e reabsorção óssea em modelo experimental de indução de doença periodontal. A proposta deste estudo foi avaliar os efeitos da administração sistêmica do tacrolimo sobre a expressão de RANKL e OPG na doença periodontal induzida em ratos e determinar in vitro, se o tratamento de células residentes do periodonto com tacrolimo... Periodontitis is a well-characterized infectious disease with a complex immune-inflammatory response. In response to the bacterial presence, many resident and non-resident cells into the peridontium produce many cytokines and biologic mediators, causing tissue destruction and alveolar bone loss. These cytokines are the key-factor in osteoclast-mediated bone resorption. The expression ratio between two cytokines is fundamental to bone resorption process: RANKL (Receptor activator of NF-kB ligand) that is necessary to osteoclast differentiation, activation and survival, and OPG (Osteoprotegerin) that acts as the endogenous inhibitor of RANKL by functioning as its decoy receptor. RANKL is expressed by fibroblasts, osteoblasts, chondrocytes, mesenchymal cells and T and B lymphocytes. OPG is secreted primarily by osteoblastic cells, bone marrow stromal celss and fibroblasts and it counter regulates the excessive bone loss antagonizing the RANKL-binding to its receptor RANK in osteoclast precursor cells. The ratio between RANKL and OPG is the current paradigm for modulation of coupled bone turnover. FK-506 is an immunossupressive drug used to reduce and to prevent the risk of organ transplant rejections. It acts affecting T lymphocyte activation by calcinaurin pathway modulation inhibiting NFAT and NF-kB translocation to the nucleus. Previous studies showed that animals with experimental periodontitis treated with FK-506 exhibited less bone resorption and inflammatory infiltrate. The purpose of this study was evaluated effects of FK-506 systemic administration over RANKL and OPG expression in animals with experimental periodontitis; and determines if FK-506-treated periodontium resident cells can affect IL-1- and LPS-induced RANKL and OPG expression. In the in vivo study, two experimental periodontitis models were used (LPS and ligature) in rats. In the test group the animals received dail... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-18Bitstream added on 2014-06-13T18:51:19Z : No. of bitstreams: 1 luvizuto_er_me_araca.pdf: 1006198 bytes, checksum: 7f15315191ddd77cc08393427bd6824f (MD5) Objetivos: Avaliar a interferência da ovariectomia (OVX) e seu tratamento com estrógeno (E2) ou com raloxifeno (RLX) no balanço entre RANKL/OPG na cronologia do processo de reparo alveolar em diferentes períodos (7, 14, 21 e 42 dias) através da imunofluorescência por co-localização e análise histomorfométrica. Materiais e Métodos: Os grupos estudados foram: sham, OVX, OVX+E2, OVX+RLX. Após obtenção dos cortes histológicos corados em hematoxilina e eosina e as reações de co-localização por imunofluorescência de RANKL/OPG, os resultados foram avaliados quantitativamente. Resultados:Aos 7 dias: menor neoformação de trabéculas ósseas,o grupo OVX+RLX apresentou menor valor médio. O grupo OVX apresentou o maior turnover ósseo representado pelas co-localizações de OPG e RANKL. Aos 14 dias o grupo OVX+RLX apresentou menor formação óssea. O grupo sham apresentou intensa atividade celular representada pela alta imunorreatividade à OPG e RANKL observada nas células. Aos 21 dias os grupos experimentais apresentaram maiores níveis de ossificação; não apresentaram diferença estatística. O grupo OVX apresentou o menor turnover ósseo. Aos 42 dias houve diferença estatística na quantidade de formação óssea entre o grupo sham comparado aos demais grupos (p

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-12-10Bitstream added on 2014-06-13T19:01:31Z : No. of bitstreams: 1 manfrin_tm_dr_araca.pdf: 3862156 bytes, checksum: dd6ccb05bd3012f8f38552fa7c669deb (MD5) O sistema OPG, RANK e RANKL é uma das mais importantes descobertas da biologia óssea. Essas proteínas regulam as atividades celulares na remodelação do tecido ósseo e na literatura há diversas investigações nos tecidos dentários. No entanto, no reimplante dentário, ainda não foram encontrados relatos. Foi objetivo deste trabalho, avaliar a imunomarcação das proteínas OPG, RANK e RANKL em dentes reimplantados de rato. Um grupo controle foi formado com quatro ratos no qual o reimplante dentário não foi realizado. Vinte e quatro ratos (Rattus norvegicus, albinus) tiveram seu incisivo superior extraído e depois reimplantado formando os seguintes grupos: grupo I – reimplante imediato; grupo II - reimplante tardio sem tratamento e grupo III - reimplante tardio com tratamento endodôntico (ressecção da papila dentária e preenchimento do canal com pasta de hidróxido de cálcio) e tratamento da superfície radicular (raspagem mecânica do ligamento periodontal necrosado e imersão em solução de flúor fosfato acidulado de sódio a 2,5%). Ao final dos períodos experimentais (10 e 60 dias) os ratos foram eutanasiados. Foram obtidos cortes longitudinais parafinados com 6μm de espessura. Os cortes foram submetidos à reação imunoístoquímica mediante a utilização de anticorpos primários para OPG, RANK e RANKL. Os resultados mostraram que a imunomarcação de OPG e RANKL ocorreu em todos os grupos e períodos estudados, muito embora RANKL não tenha sido observada no grupo reimplante imediato aos 60 dias. RANK foi observada somente aos 10 dias de todos os grupos no qual o reimplante foi realizado. A análise qualitativa dos resultados demonstrou que o sistema OPG, RANK e RANKL apresentou marcação evidente no reimplante tardio, sugerindo a efetiva participação no início do processo de reabsorção radicular, uma vez que aos 60 dias a imunomarcação foi discreta. The OPG, RANK and RANKL system is one of the most important discoveries in bone biology. These proteins are key regulators of bone remodeling and in the literature there are several studies of tooth resorption. However, in tooth replantation, reports have not been found. The purpose of this study was to determine the immunolabeling of OPG, RANK and RANKL in replanted teeth in rats, using immunohistochemistry methodology. A control group (no replanted teeth) was formed by four rats. Twenty-four rats (Rattus norvegicus, albinus) were submitted to the extraction of their upper right incisors. The replantation was performed according to the groups below: group I – immediate replantation; group II – delay replantation without treatment and group III – delay replantation with endodontic treatment (extirpation of papilla and the root canal filled with calcium hydroxide) and root surface treatment (periodontal ligament was removed with scalpel and teeth were immersed in 2% acidulated phosphate sodium fluoride). The animals were euthanized at the end of the experimental periods (10 and 60 days). Longitudinal 6μm slices embedded in paraffin were obtained. The slices were submitted to immunohistochemistry reaction by means of the primary antibodies for OPG, RANK and RANKL proteins. The results showed the expression of OPG in all groups and periods. RANKL expression was observed in all groups, except in the immediate replanted teeth group (60 days). RANK expression was observed only at 10 days in all groups which replantation was performed. The qualitative analysis of our findings indicated that the system OPG, RANK and RANKL presented strong expression in delayed replantation, suggesting effective participation at the beginning of root resorption, since at 60 days the immunostained cells were discreet.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-12-19Bitstream added on 2014-06-13T18:19:49Z : No. of bitstreams: 1 coutinho_ccc_me_araca.pdf: 114919 bytes, checksum: 49f558e8cba145ffdabb2e45dc62ada3 (MD5) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Na dinâmica da reparação óssea os fenômenos de reabsorção e neoformação são dependentes e acoplados. Proteínas efetivamente envolvidas na diferenciação celular determinam ativação ou inibição das atividades que regulam o ganho ou perda de massa óssea. Dentre as proteínas ósseas identificadas e envolvidas na dinâmica óssea podemos destacar a OPG, a RANK e RANKL como marcadores de atividades celulares. O presente trabalho tem como objetivo identificar, nos diferentes períodos da cronologia do processo de reparo alveolar através de técnica imunoistoquímica, a presença das proteínas OPG, RANK e RANKL. Para tanto foram utilizados 60 ratos machos submetidos à exodontia do incisivo superior direito e perfundidos aos 14, 21 e 28 dias pós-operatórios. As hemi-maxilas contendo o alvéolo dental em reparação foram removidas, pósfixadas, descalcificadas em EDTA, crioprotegidas e obtidos cortes longitudinais com 14æm em criostato. Os cortes foram submetidos à reação imunoistoquímica mediante a utilização de anticorpos primários para OPG, RANK e RANKL, como amplificador foi utilizado o sistema avidina-biotina e a diaminobenzidina (DAB) como cromógeno. Os resultados mostram que qualitativamente ocorre um balanço na expressão das proteínas que caracterizam reabsorção e neoformação óssea nos diferentes períodos estudados, onde aos 14 e 21 dias ocorre maior expressão de RANK. Com relação às proteínas OPG e RANKL, observa-se que elas apresentam-se expressas nas células da linhagem osteoblástica de forma similar, sendo que 28 dias é o período de maior expressão destas proteínas. In the bone healing dynamics, the resorption and neoformation processes are dependent. Proteins involved in the cellular differentiation determinate the activation or inhibition of the activities that regulate the gain or loss of bone mass. From all of the identified bone proteins, it may be distinguished the OPG, RANK and RANKL. The present study has the aim to identify, in the different periods of alveolar bone healing chronology, the expression of OPG, RANK and RANKL proteins using the immunohistochemistry methodology. To perform this study, 60 male rats had the right upper incisive extracted and they were perfused at 14, 21 and 28 pos-operative days. The hemimaxilla with the rat extraction socket was removed, pos fixed and decalcified in EDTA. Then, they were cryoprotected and longitudinal slices with 14 ìm thickness were obtained in cryostat. The slices were submitted to immunohistochemistry reaction and the primary antibodies used were against OPG, RANK and RANKL proteins. It was used the avidinbiotin system to amplify the sign and diaminobenzidine was the cromogen. The results show that there is a balance in the expression of the proteins, showing that there is an increase in the expression of RANK at 14 and 21 pos-operative periods. In relation to OPG and RANKL, these proteins presents a similar expression in all of the pos-extraction periods analysed in this study and at 28 days after the extraction there is the greater expression of both proteins.