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Biomolekule entstehen und funktionieren in einer dicht gepackten und heterogenen zellularen Umgebung. Diese Bedingungen werden im Reagenzglas oft durch Zugabe kunstlicher makromolekularer “Crowding”-Reagentien imitiert. Dennoch ist es unklar, ob solche Kosolventien tatsachlich die physikalischen und chemischen Eigenschaften der zellularen Umgebung widerspiegeln, da der zellulare “Crowding”-Effekt bisher nicht quantifiziert wurde. Wir haben einen makromolekularen “Crowding”-Sensor, der auf einem FRET-markiertem Polymer basiert, entwickelt, um diese Effekte zu untersuchen. Die Ergebnisse zeigen, dass die Volumenausschlusseffekte zu keiner Kompression des Sensors in der Zelle fuhren. Die durchschnittliche Konformation des Sensors ist dabei ahnlich zu der im verdunnten Puffer sowie im Zell-Lysat. Ferner ist der zellulare “Crowding”-Effekt heterogen verteilt und verandert sich signifikant wahrend eines osmotischen Schocks. Mithilfe dieser Methode lasst sich der zellulare “Crowding”-Effekt als Regulator von biomolekularen Reaktionen systematisch untersuchen.