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Differences in isozyme and RAPD-PCR polymorphisms amongst 33 isolates of Fusarium avenaceum were compared using native polyacrylamide gel electrophoresis and agarose gel electrophoresis. The isolates were collected from different regions of Finland. Amongst eight enzymes analysed clear isozyme polymorphism was detected in five enzymes which could be grouped into 20 different eletrophoretic phenotypes and three main groups at the similarity level of 70% in unweighted pair group method with arithmetic average (UPGMA) analysis. RAPD-PCR analysis differentiated all F. avenaceum strains from each other. The phenotypes resulting from RAPD-PCR analysis were grouped into five main groups by UPGMA analysis at the similarity level of 55%. These main groups had several similarities with the main groups from isozyme analysis. RAPD-PCR patterns of 16 isolates of Fusarium graminearum, F. culmorum, F. equiseti, F. oxysporum and F. redolens were also studied and strains from each Fusarium species formed individual groups in UPGMA and principal components analyses. Thus. the extent of isozyme and RAPD-PCR polymorphisms found in Fusarium strains potentially provides a method for identifying the fungi both at strain and species level. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The effect of a cell wall extract of Staphylococcus aureus on the inflammatory response induced in the mammary gland by endotoxin was studied. Quarters of lactating cows were infused with 10 μg endotoxin with or without the cell wall extract. In the quarters receiving the cell wall extract, the clinical response was delayed and markedly diminished. Changes in levels of antitrypsin, which reflect changes in vascular permeability, followed a similar pattern. There were no differences in the somatic cell count and NAGase levels in the inoculated quarters. The growth stimulating effect for S. aureus in the whey was delayed in the quarters which received the cell wall extract. The specificity of the antiinflammatory effect of the cell wall extract therefore extends to endotoxin. Zusammenfassung Wirkung eines Zellwandfaktors von Staphylokokken auf die durch Endotoxin ausgelöste Mastitis bei Milchkühen Untersucht wurde die Wirkung eines Zellwandextraktes von Staphylococcus aureus auf die durch Endotoxin hervorgerufene Entzündung der Milchdrüse. In Eutervierteln laktierender Kühe wurden jeweils 10 μg Endotoxin mit und ohne Zellwandextrakt appliziert. Klinische Symptome traten in den mit Zellwandextrakt behandelten Vierteln verzögert beziehungsweise in verminderter Intensität auf. In den entsprechenden Molkeproben waren sowohl der Anstieg des Antitrypsinspiegels, der Veränderungen der Gefäßpermeabilität anzeigt, als auch das Auftreten des wachstumsstimulierenden Faktors für S. aureus verzögert. In bezug auf Zell-und NAGase-Gehalt der Milch ergaben sich keine Unterschiede zwischen den behandelten Eutervierteln. Der entzündungshemmende Effekt des Zellwandextraktes beruht somit möglicherweise auf einer dem Endotoxin entgegengerichteten Wirkung. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Growth of Str. agalactiae, S. aureus and E. coli was analyzed in 20 milk and whey samples, half of which were from mastitic quarters and the other half from healthy quarters of the same cows. The increase in bacterial biomass in whole milk was followed by monitoring ATP by a luciferin-luciferase luminometric procedure. Bacterial growth in whey cultures was monitored by a tubidometric microtechnique. Bacteria showed significantly enhanced replication rates in mastitic milk and whey samples as compared with samples from control quarters. This was true for all three strains of bacteria used as inoculums. The increase in bacterial ATP showed a good correlation with the inflammatory markers for mastitis: SCC, NAGase, antitrypsin, BSA and plasmin. Monitoring bacterial growth by ATP is suggested as a marker for mastitis, keeping in mind the pathogenetic aspect of mastitis where the inflammation induces a change in milk which stimulates bacterial growth. Zusammenfassung Das Wachstum von Bakterien in Milch- und Molkenproben aus an Mastitis erkrankten Eutervierteln Das Wachstum von Str. agalactiae, S. aureus und E. coli wurde in 20 Milch- und Molkenproben untersucht. Die Hälfte der Proben stammte aus an Mastitis erkrankten Eutervierteln und die andere Hälfte von gesunden Vierteln derselben Kühe. Die Zunahme der bakteriellen Biomasse in der Vollmilch wurde mittels ATP-Bestimmung durch eine Luciferin-Luciferase-Lumineszenzmethode untersucht. Das Bakterienwachstum in den Molkenkulturen wurde mit einer turbidimetrischen Mikrotechnik dargestellt. Im Vergleich zu den Proben aus den gesunden Eutervierteln ließ sich in den Milch- und Molkeproben aus den kranken Vierteln eine deutlich gesteigerte Vermehrungsrate der Bakterien nachweisen. Dies galt für alle drei Bakterienstämme, die als Impfmaterial benutzt wurden. Die ATP-Zunahme der Bakterien zeigte eine gute Korrelation mit den Entzündungssymptomen der Mastitis: SCC, NAGase, Antitrypsin, BSA und Plasmin. Da durch eine Entzündung eine Veränderung in der Milch hervorgerufen wird, die das Bakterienwachstum anregt, wird zur Erkennung der Mastitis eine Überwachung des Bakterienwachstums durch den ATP-Nachweis vorgeschlagen. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Composite milk samples were collected monthly during one year from 80 Ayrshire cows in order to analyze the influence of lactation stage, parity and daily milk yield on milk antitrypsin, N-acetyl-β-D-glucosaminidase (NAGase) and plasmin activities. Growth of S. aureus and E. coli was analyzed parallelly in whey. The levels of milk antitrypsin, NAGase and plasmin as well as replication rates of E. coli and S. aureus, were high in early-lactation and decreased during the first months of lactation. The levels of these mastitis parameters started to increase again at 3-4 months and continued until the end of lactation. The latter increasing tendency became largely eliminated when daily output values were calculated and used rather than concentration values. Milk NAGase and plasmin increased constantly with increasing parity. One can therefore, improve the function of the mastitis parameters by eliminating sources of 'non-mastitic' variation. NAGase and plasmin showed strong association with decreased milk yield and so these parameters seem to be useful when predicting production loss due to subclinical mastitis. Whey was supportive for the growth of E. coli and S. aureus during early and endlactation when the daily milk yield was lowest. Zusammenfassung Milch-Antitrypsin, NAGase, Plasmin und bakterielle Replikationsrate in Molke Einfluß des Laktationsstadiums, der Anzahl der Geburten (Parität) und des täglichen Milchertrags Von 80 Kühen der Rasse Ayrshire wurden während eines Jahres monatlich Sammelmilchproben gewonnen, um den Einfluß des Laktationsstadiums, der Anzahl der Geburten und des täglichen Milchertrags auf die Aktivitäten des Milch-Antitrypsins, der N-acetyl-β-D-Glucosaminase (NAGase) und des Plasmins zu analysieren. Parallel dazu wurde in der Molke das Wachstum von S. aureus und E. coli untersucht. Die Spiegel von Milch-Antitrypsin, NAGase und Plasmin waren ebenso, wie die Replikationsrate von E. coli und S. aureus in der Frühlaktation hoch und fielen während der ersten Monate der Laktation ab. Nach 3-4 Monaten bis zum Ende der Laktation begannen die Spiegel dieser Mastitisparameter erneut zu steigen. Letztere Tendenz wurde weitgehend beseitigt, sofern tägliche Ausstoßwerte berechnet und Konzentrationswerten vorgezogen wurden. Milch-NAGase und Plasmin stiegen konstant mit zunehmender Parität an. Deshalb kann man die Funktion der Mastitisparameter durch die Beseitigung der Quellen nicht mastitisbedingter Veränderungen verbessern. NAGase und Plasmin zeigten eine starke Beziehung zu sinkendem Milchertrag und so scheinen diese Parameter zur Voraussage von Produktionseinbußen infolge subklinischer Mastitis nützlich zu sein. Molke war während der Frühlaktation und dem Laktationsende, als der tägliche Milchertrag am niedrigsten war, zum Wachstum von E. coli und S. aureus förderlich. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Experimental mastitis was induced in nine lactating dairy cows with Staphylococcus aureus, Streptococcus dysgalactiae and Streptococcus uberis (three cows in each group). One quarter of each cow was inoculated with organisms, the contralateral one remained untreated and served as a control. Inflammatory changes were monitored by measurements of somatic cell count, NAGase and antitrypsin. The whey was analyzed for its quality as a growth medium for E. coli. Clinical signs and the increase in the levels of the inflammatory parameters occurred 24 hours after inoculation; S. aureus caused more severe inflammatory changes than did streptococci. Infections by 5. aureus persisted longer than the others. The inflammation declined slowly after the infection had been cleared by the udder. The whey became an inhibitor for the growth of bacteria in vitro during the early inflammatory period in half of the infused quarters. Whey was found to stimulate bacterial growth later in the course of inflammation in all experimentally infected quarters. Zusammenfassung Durch Staphylococcus aureus, Streptococcus dysgalactiae und Streptococcus uberis während der experimentellen Mastitis hervorgerufene entzündliche Veränderungen: Bei neun laktierenden Kühen wurde mittels Staphylococcus aureus, Streptococcus dysgalactiae und Streptococcus uberis (drei Kühe pro Gruppe) experimentell eine Mastitis induziert. Jeweils in ein Euterviertel wurden die betreffenden Keime inoculiert, das contralaterale Viertel blieb unbehandelt und diente als Kontrolle. Die entzündlichen Veränderungen wurden mit Hilfe der Zellzahl, der NAGase und dem Antitrypsin der Milch verfolgt. Die Molke wurde auf ihre Eignung als Wachstumsmedium für E. coli geprüft. Klinische Symptome sowie ein Anstieg der Werte der Entzündungsparameter traten 24 h nach den Inoculation in Erscheinung. S. aureus verursachte deutlichere entzündliche Veränderungen als dies bei Streptococcen der Fall war. Die Infektionen mit S. aureus persistierten länger als die anderen Infektionen. Die Entzündung ging nach dem Verschwinden der Euterinfektion langsam zurück. Die Molke wirkte während des Anfangsstadiums der Entzündung bei der Hälfte der inoculierten Euterviertel hemmend auf das Bakterienwachstum. Im weiteren Verlauf der Infektion wirkte die Molke bei allen experimentell infizierten Vierteln stimulierend auf das Bakterienwachstum. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Strains of Staphylococcus aureus producing either diffuse or compact colonies in serum-soft agar were grown in bovine normal and mastitic whey. Bacterial growth was followed by automated turbidometry. Compact strains multiplied faster and to higher final numbers in mastitic whey than diffuse strains, whereas diffuse strains grew to higher numbers in normal whey. Nutrients (hemolysed bovine blood, bovine serum, proteose-peptone) were added to normal whey to enhance bacterial growth as in mastitic whey. The growth-promoting effect of these nutrients was dose-dependent for compact strains but not for diffuse strains. The difference in the growth characteristics of diffuse and compact strains in bovine whey explains some aspects of the pathogenesis of bovine mastitis.