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Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es La resistencia generalmente se presenta como un carácter de herencia monogénica (dominante o recesivo). Estos caracteres se pueden incorporar mediante el método de retrocruza de mejoramiento genético. La mejora asistida por marcadores moleculares facilita la detección de los individuos portadores del gen de resistencia en campo, sin recurrir a otras pruebas que conllevan más tiempo y recursos. En este ensayo se propone identificar plántulas de tomate que presenten el gen Mi-1, el cual les confiere resistencia a nematodos, áfidos y moscas blancas. Objetivo: Empleando cebadores específicos para los alelos Mi-1 y mi-1, se propone analizar el genotipo de las muestras problema con la finalidad de identificar individuos homocigóticos dominantes (resistentes), homocigóticos recesivos (susceptibles) y heterocigóticos (resistentes).

Gui��n de trabajo para el laboratorio virtual ��Cibertorio�� en Biomodel.UAH.es La neoplasia MEN2A aparece como consecuencia de mutaciones del protooncog��n RET. Se puede realizar un diagn��stico presintom��tico detectando directamente en una muestra de DNA gen��mico la mutaci��n m��s frecuente, que hace aparecer una secuencia diana para la enzima de restricci��n Hin 6I. Objetivo: Analizar el material gen��tico obtenido de muestras de varios pacientes, empleando una pareja de cebadores espec��fica para una regi��n del ex��n 11 que incluye el punto polim��rfico donde se ubica la mutaci��n T>C responsable de MEN2A. Se amplifica con PCR la regi��n de inter��s del DNA gen��mico de los pacientes y a continuaci��n se analizan en electroforesis los fragmentos resultantes de la acci��n de la enzima de restricci��n.

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es La neoplasia MEN2A aparece como consecuencia de mutaciones del protooncogén RET. Se puede realizar un diagnóstico presintomático detectando directamente en una muestra de DNA genómico la mutación más frecuente, que hace aparecer una secuencia diana para la enzima de restricción Hin6I. Objetivo: Analizar el material genético obtenido de muestras de varios pacientes, empleando una pareja de cebadores específica para una región del exón 11 que incluye el punto polimórfico donde se ubica la mutación T>C responsable de MEN2A. Se amplifica con PCR la región de interés del DNA genómico de los pacientes y a continuación se analizan en electroforesis los fragmentos resultantes de la acción de la enzima de restricción.

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es El diferente valor de mercado de los aceites vegetales de diverso origen hace necesario disponer de técnicas analíticas para valorar su composición. La secuencia del DNA del cloroplasto presenta diferencias entre especies que pueden aprovecharse para realizar un análisis molecular. En este ensayo se analizan muestras obtenidas mediante amplificación por PCR del DNA extraído del aceite. Mediante corte con enzimas de restricción y posterior electroforesis es posible detectar la adulteración del aceite de oliva con girasol, soja, maíz, colza, palma o cacahuete. Objetivo: Empleando enzimas de restricción e información de secuencias, analizar el origen de varias muestras. Se parte de muestras problema de aceite de oliva que puede estar mezclado con otras especies vegetales. Se trata con enzimas de restricción y se separan los segmentos resultantes mediante electroforesis. &nbsp

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es Las pruebas de identidad genética, a menudo llamadas huella dactilar genética o identificación mediante pruebas de ADN (DNA) se basan en la diversidad genética de los individuos, es decir, que unas personas nos diferenciamos de otras en la secuencia de nucleótidos presente en diversas regiones del genoma, lo que se denomina polimorfismo genético. Lo más frecuente es el empleo de regiones polimórficas del genoma que no codifican ningún producto (proteína o RNA) y, por ello, no representan ninguna ventaja ni desventaja funcionales y sus variantes (alelos) se distribuyen en la población con una gran diversidad. En concreto, este ensayo se centra en regiones conocidas como STR (short tandem repeats, repeticiones cortas en tándem) que forman parte de uno de los grupos de marcadores de referencia internacional, los marcadores del CoDIS conocidos por ser los utilizados por el FBI. La diferencia entre los alelos presentes en distintos individuos está en el número de unidades repetidas y, en consecuencia, en la longitud de los fragmentos de DNA que se amplificarán mediante PCR y se analizarán mediante electroforesis. Como material de partida disponemos de muestras de DNA (virtuales) correspondientes a la prueba del delito (por tanto, DNA del delincuente desconocido) y a varios sospechosos. Objetivo: Empleando varios cebadores para PCR dirigidos a las regiones polimórficas STR, realizar la identificación del delincuente, es decir, la comparación de los sospechosos con la prueba del delito.

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es Se habla de diversidad genética de los individuos como el resultado de que, en diversas regiones del genoma, unas personas tenemos secuencias de nucleótidos que nos diferencian de otras; esto se denomina polimorfismo genético. Cuando estas regiones polimórficas corresponden a zonas codificantes de un producto, existen consecuencias funcionales. El diagnóstico y el pronóstico de la enfermedad celíaca son complejos pero incluyen como uno de los indicios el análisis del genotipo en los genes DQA1 y DQB1 (pertenecientes a la familia de antígenos leucocitarios humanos, HLA). En este ensayo se detectan las diferencias entre los alelos más comunes de estos genes polimórficos, utilizando PCR con cebadores específicos para cada alelo. A continuación, los segmentos amplificados se analizarán mediante electroforesis. Es posible así diagnosticar en las muestras los haplotipos DQ2 y DQ8 asociados a la aparición de celiaquía. Objetivo: Empleando cebadores específicos para algunos de los alelos más frecuentes, analizar el genotipo de varios pacientes. Se parte de muestras de DNA de los pacientes, se realiza la amplificación por PCR múltiplex y se separan los segmentos amplificados mediante electroforesis.

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es La anemia drepanocítica (anemia de células falciformes) se origina por la mutación de un solo nucleótido en el gen de globina beta humana. Esto genera en la población un polimorfismo, definido por la presencia del alelo normal o el mutado, en cada uno de los dos cromosomas 11 homólogos. En esta práctica se pretende el diagnóstico genético de esta enfermedad en muestras de varios pacientes a través de un polimorfismo RFLP, es decir, mediante restricción y electroforesis. Objetivo: Empleando una enzima de restricción elegida previamente, que corta de forma diferente los alelos normal y mutado del gen de globina beta, realizar el diagnóstico genético de varios pacientes.

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es La anemia drepanocítica (anemia de células falciformes) se origina por la mutación de un solo nucleótido en el gen de globina beta humana. Esto genera en la población un polimorfismo, definido por la presencia del alelo normal o el mutado, en cada uno de los dos cromosomas 11 homólogos. En esta práctica se pretende el diagnóstico genético de esta enfermedad en muestras de varios pacientes a través de un polimorfismo RFLP, es decir, mediante restricción y electroforesis.

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es Se habla de diversidad genética de los individuos como el resultado de que, en diversas regiones del genoma, unas personas tenemos secuencias de nucleótidos que nos diferencian de otras; esto se denomina polimorfismo genético. Cuando estas regiones polimórficas corresponden a zonas codificantes de un producto, existen consecuencias funcionales. La superfamilia enzimática citocromo P450 juega un papel crucial en el metabolismo de numerosos fármacos y de otros compuestos xenobióticos. El polimorfismo existente en los genes de estas enzimas hace que la respuesta a los fármacos sea diferente entre individuos. En concreto, este ensayo se centra en el polimorfismo genético de la isoforma CYP2C9. La diferencia entre los alelos presentes en distintos individuos puede detectarse utilizando PCR con cebadores específicos para cada alelo. A continuación, los segmentos amplificados se analizan mediante electroforesis. Objetivo: Empleando cebadores específicos para algunos de los alelos más frecuentes, analizar el genotipo de varios pacientes. Se parte de muestras de DNA de los pacientes, se realiza la amplificación por PCR múltiplex y se separan los segmentos amplificados mediante electroforesis.

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es Las pruebas de identidad genética, a menudo llamadas huella dactilar genética o identificación mediante pruebas de ADN (DNA) se basan en la diversidad genética de los individuos, es decir, que unas personas nos diferenciamos de otras en la secuencia de nucleótidos presente en diversas regiones del genoma, lo que se denomina polimorfismo genético. Una de las formas conceptualmente más simples de realizar un ensayo de este tipo (aunque no es la más usada en la actualidad) es aprovechar un polimorfismo RFLP, es decir, que afecta a los puntos de corte por una o varias enzimas de restricción. La restricción va seguida de un análisis de los fragmentos de DNA mediante electroforesis. Como material de partida disponemos de muestras de DNA (virtuales) correspondientes a la prueba del delito (por tanto, DNA del delincuente desconocido) y a varios sospechosos. Objetivo: Empleando una o varias enzimas de restricción, realizar la identificación del delincuente, es decir, la comparación de los sospechosos con la prueba del delito.

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es La secuencia del DNA mitocondrial presenta diferencias entre especies que pueden aprovecharse para realizar un análisis molecular que demuestre la procedencia de una muestra. En este ensayo se analizan muestras de queso supuestamente de cabra, utilizando PCR con cebadores específicos para el DNA mitocondrial de cada especie. A continuación, los segmentos amplificados se analizarán mediante electroforesis. Es posible así detectar la adulteración de la leche de cabra con leche de oveja o de vaca. Objetivo: Empleando cebadores específicos para el DNA mitocondrial de cada especie, analizar el origen de varias muestras. Se parte de muestras de referencia de DNA de vaca, oveja y cabra, así como DNA extraido de 3 muestras de queso, se realiza la amplificación por PCR múltiplex y se separan los segmentos amplificados mediante electroforesis.

Las pruebas de paternidad se basan en el patrón mendeliano de herencia junto con la diversidad genética de los individuos (polimorfismo genético). Este ensayo en concreto se centra en varias regiones polimórficas conocidas como STR que forman parte de uno de los grupos de marcadores de referencia internacional, los marcadores del CoDIS conocidos por ser los utilizados por el FBI. La diferencia entre los alelos presentes en distintos individuos está en el número de unidades repetidas y, en consecuencia, en la longitud de los fragmentos de DNA que se amplificarán mediante PCR y se analizarán mediante electroforesis. Objetivo: Analizar los marcadores polimórficos para determinar cuál de los candidatos es el padre. El ensayo consiste en, partiendo de las muestras de DNA de cada uno de los padres potenciales, de la madre y del hijo/a, realizar una amplificación por PCR de varios marcadores STR y separar los fragmentos amplificados mediante electroforesis. Por comparación de los patrones de bandas, se deducirá cuál de los candidatos es el padre (o bien se descartarán los cuatro)

Guión de trabajo para el laboratorio virtual «Cibertorio» en Biomodel.UAH.es La anemia drepanocítica (anemia de células falciformes) se origina por la mutación de un solo nucleótido en el gen de globina beta humana. Esto genera en la población un polimorfismo, definido por la presencia del alelo normal o el mutado, en cada uno de los dos cromosomas 11 homólogos. En el contexto del estudio molecular de esta enfermedad y su diagnóstico genético, vamos a estudiar las secuencias depositadas en las bases de datos del genoma correspondientes al gen de globina beta y su punto polimórfico. Objetivo: Obtener información sobre el polimorfismo del gen de globina beta que da lugar a la hemoglobina S y causa la drepanocitosis. Familiarizarse con las bases de datos de secuencia, diferencias entre DNA genómico y cDNA, conceptos de intrón y exón.