Search

O objetivo do trabalho foi relatar a ocorrência de casos de cães com Leptospira spp. no Hospital Veterinário de Londrina. Foram avaliados 5.454 prontuários, durante os meses de janeiro a dezembro de 2016, e selecionados os que apresentaram solicitação de exame para Lepstopira por meio da técnica de campo escuro (CE). Nos positivos pela técnica CE dados sobre o sexo, sinais clínicos, endereço, data do atendimento e resultado na SAM foram coletados. A análise dos dados foi realizada pelo programa EpiInfo (7.2.3.1), dos 5.454 prontuários nos quais foi solicitado exame CE em 7,06% (385/5.454), e nestes, 13,76% (53/385) foi identificada a presença da espiroqueta. Dos animais positivos na técnica CE, 20,75% (11/53) foram reagentes na SAM. O sorovar Canicola foi o mais frequente em 90,91% (10/11) dos animais, apresentando títulos variados de 100 a 12.800. Para o sorovar Pomona 9,09% (1/11) dos animais apresentaram títulação de 100. Os sinais clínicos mais observados fora apatia em 58,49% (31/53), azotemia em 49,06% (26/53) e êmese em 49,06% (26/53) dos casos. Quanto ao sexo, os machos constituíram 71,70% dos casos e as fêmeas 28,30% (p=0,0015). Os resultados demonstraram a presença de Leptospira spp. entre os animais atendidos no hospital veterinário de Universidade Estadual de Londrina e reforçam a importância do sorovar Canicola entre os cães, visto que este foi o mais frequente entre os sorovares e que apresentou os maiores títulos.

Felines are definitive hosts of Toxoplasma gondii and can shed oocysts in their feces, contaminating the environment. Sporulated oocysts are highly resistant to the environment and have higher infectivity, which are attributed to many toxoplasmosis outbreaks. The aim of the present study was to evaluate a quantitative polymerase chain reaction (qPCR) technique for the detection of T. gondii oocysts shed by cats. Twelve cats from a previous vaccine experiment were challenged orally with 600 cysts of the TgDoveBr8 strain on day 72. Fecal samples were collected daily using the centrifugal flotation technique, with microscopic examination (Sheather technique) and qPCR for 20 days after the challenge. Cats from all groups shed oocysts in their feces. Five negative cats in the Sheather were positive according to qPCR on the 3rd day post-inoculation (dpi). Oocysts were detected on the 4th dpi using the Sheather; however, there was no statistical difference between the two methods (p=0.1116). In addition, there was no statistically significant difference in oocyst shedding between the groups according to the Sheather technique (p=0.6534) and qPCR (p=0.9670). In conclusion, these results demonstrate that qPCR can be used as an alternative to the Sheather to detect and quantify T. gondii oocysts. Resumo Felinos são hospedeiros definitivos do Toxoplasma gondii e podem eliminar oocistos nas fezes, contaminando o meio ambiente. Oocistos esporulados são altamente resistentes ao meio ambiente com elevada infectividade, sendo atribuído a muitos surtos de toxoplasmose. O objetivo do estudo foi avaliar a reação em cadeia da polimerase quantitativa (qPCR) para a detecção de oocistos de T. gondii eliminados por gatos. Doze gatos de um experimento prévio de vacina foram desafiados por via oral com 600 cistos da cepa TgDoveBr8 no dia 72. Amostras fecais foram coletadas diariamente pela técnica de centrifugo-flutuação seguida de exame microscópico (técnica de Sheather) e qPCR por 20 dias após desafio. Gatos de todos os grupos eliminam oocistos nas fezes. Cinco gatos negativos na técnica Sheather foram positivos de acordo com a qPCR no 3º dia pós-inoculação (dpi). Oocistos foram detectados no 4º dpi no Sheather; entretanto, não houve diferença estatística entre os dois métodos (p=0,1116). Não houve diferença estatisticamente significativa na eliminação de oocistos entre os grupos de acordo com a técnica de Sheather (p = 0,6534) e qPCR (p = 0,9670). Em conclusão, esses resultados demonstram que qPCR pode ser usada como uma alternativa ao Sheather para detectar e quantificar oocistos de T. gondii.

Although leptospirosis has been considered a major concern in urban areas, no study to date has spatially and simultaneously compared both owner and dog serology in households of major cities. Accordingly, the aim of the present study was to assess the seroprevalence of Leptospira antibodies, evaluate associated risk factors and conduct spatial analyses in 565 randomly selected households, which included 597 dog owners and 729 dogs in Londrina, Southern Brazil. Seropositivity by MAT were detected in in 11/597 (1.84%) owners and in 155/729 (21.26%) dogs. The risk factors were evaluated with logistic regression analysis and spatial factors and case distribution were evaluated with kernel density analyses. The sera of 14/155 (9.03%) dogs reacted for more than one serovar with the same titer. Canicola was the most frequent serogroup, detected in 3/11 (27.27%) owners and 76/155 (49.03%) dogs. The highest titer among the owners was 1:3,200 and was detected in the same household with a titer of 1:800 in the dog. Simultaneous owner-dog seropositivity was found in 7/565 (1.23%) households, with three reacted against serogroup Canicola. Positive owners were detected in 4/565 (0.70%) households and positive dogs were detected in 141/565 (24.95%) households. The associated risks of infection for dogs were different from those associated with infection in owners. Risk analyses for Canicola also identified specific factors of infection. Regardless of owner and dog cases were not statistically clustered, the kernel map has shown dog positivity occurrence in the same hot locations and near positive owners. The dependent variable analysis and logit model suggested a greater likelihood of peri-domiciliary contact with Leptospira. In conclusion, exposure to Leptospira infection was significantly higher in dogs than in their owners and human cases spatially overlapped dog cases, implicating dogs as potential environmental sentinels for this disease. In addition, the associated risk may vary according to serogroup, and the observed simultaneous Canicola seropositivity of owner and dog has suggested intradomicile-transmitted infection.

Neosporosis is an infectious disease caused by Neospora caninum, a protozoan parasite that has worldwide distribution and is responsible for enormous economic losses in cattle. Birds are considered a good bioindicator of environmental contamination, since they feed on the ground, being exposed to N. caninum oocysts. The aim of this study was to determine the occurrence of antibodies against N. caninum and to verify the presence of parasite DNA in brain from free-ranging eared doves (Zenaida auriculata) from Southern Brazil. For this purpose, blood and brain samples were collected from 249 doves for ELISA and PCR analysis respectively. The prevalence of N. caninum antibodies in doves was 31.72% (79/249) and detection of parasite DNA was not observed in none of birds. This is the first report of antibodies against N. caninum in doves Z. auriculata, what show us that these birds had previously contact with the parasite but since no N. caninum DNA was detected, more studies should be performed to elucidate the real importance of doves in the epidemiologic cycle of the N. caninum.

The aim of the present study was to investigate the occurrence of N. caninum associated with abortions of dairy cattle from Santa Catarina state, southern Brazil by using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), immunohistochemistry (IHC), and polymerase chain reaction (PCR). Blood from dairy cows that aborted along with intrathoracic fluid and tissue samples (brain, heart, liver, and lung) from their fetuses were collected and used for serology; PCR, histopathological, and immunohistochemistry (IHC) evaluations were also conducted. Twenty-one cows (51.2%) out of 41, and eight fetuses (26.7%) out of 30 were ELISA (HerdCheck, IDEXX) positive for N. caninum. Dams > 36 months of age had a higher risk of being serum positive than younger animals. PCR and IHC revealed that 38.8% (14/36) and 25.0% (9/36) of the fetuses were positive for N. caninum, respectively for each of the tests. Seropositive cows had a higher frequency of fetuses that were also positive by either intrathoracic fluid, PCR, or IHC. In summary, the present study observed a high frequency of N. caninum in abortions from dairy cows from southern Brazil, with a higher N. caninum prevalence found in cows that were older than 36 months. In addition, serology, PCR, and IHC should be used all together for better diagnosis of neosporosis in cattle. Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a ocorrência de N. caninum associado a abortamentos em vacas de leite do estado de Santa Catarina, sul do Brasil pelo uso das técnicas de ELISA (HerdCheck, IDEXX), reação em cadeia pela polimerase (PCR) e imunohistoquímica (IHC). O sangue das vacas leiteiras que abortaram, bem como, o líquido intratorácico e amostras de tecidos (cérebro, coração, fígado e pulmão) de seus fetos foram coletados e usados para sorologia, PCR (Np21+ e Np6+), e IHC. Vinte e uma vacas (51,2%) de um total de 41, bem como, oito fetos (26,7%) de um total de 30 foram positivos no ELISA (IDEXX) para N. caninum. As vacas > 36 meses de idade tiveram um maior risco de serem soropositivas do que os animais mais jovens. PCR e IHC revelaram que 38,8% e 25,0% dos fetos foram positivos para N. caninum, respectivamente para cada um dos testes. As vacas soropositivas tiveram uma maior frequência de fetos que também foram positivos no fluído intratorácico, na PCR ou na IHC. Em resumo, o presente estudo observou uma alta frequência de N. caninum em abortos de vacas leiteiras na região estudada, com maior prevalência de N. caninum em vacas com mais de 36 meses de idade. Além disso, sorologia, PCR e IHC deveriam ser utilizadas conjuntamente para melhor diagnóstico de neosporose em bovinos.

The objective of this study was to determine factors associated with vegetable contamination with zoonotic protozoan. Samples of water, soil and vegetables were collected from July/2014 to May/2016, totaling 83 samples, 21 properties of Londrina region, Paraná, Brazil. DNA amplification of Toxoplasma gondii, Cryptosporidium spp. and Giardia intestinalis in the samples was conducted using polymerase chain reaction (PCR). The PCR results were positive for T. gondii in 12.9% (8/62), Cryptosporidium spp. in 11.3% (7/62) and G. intestinalis in 25.8% (16/62) of the samples. DNA sequencing identified C. parvum in five samples and G. intestinalis Assemblage E in three. The statistical associations demonstrated greater probability of positive samples for T. gondii and for at least one of the three protozoa when the source of irrigation water was the river; a greater chance of positive samples for Cryptosporidium spp. when deer were present on the property; and a smaller chance of positive samples for at least one of the three etiologic agents when soil was supplemented with limestone. The results expose some critical contamination points, providing support for training farmers on good management practices during the production process. Resumo O trabalho teve como objetivo determinar os fatores associados à contaminação de vegetais por protozoários zoonóticos. Amostras de água, solo e vegetais foram coletadas de julho/2014 a maio/2016, totalizando 83 amostras de 21 propriedades da região de Londrina, Paraná, Brasil. A amplificação de fragmentos de DNA de T. gondii, Cryptosporidium spp. e Giardia intestinalis foi realizada por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). Os resultados da PCR foram positivos para T. gondii em 12,9% (8/62), Cryptosporidium spp. em 11,3% (7/62) e G. intestinalis. em 25,8% (16/62) das amostras. O sequenciamento de DNA identificou C. parvum em cinco amostras e G. intestinalis, Assemblage E em três amostras. As associações estatísticas evidenciaram maior probabilidade de amostras serem positivas para T. gondii ou para pelo menos um dos três protozoários quando a fonte de água de irrigação era o rio; uma maior chance de amostras positivas para Cryptosporidium spp. quando havia cervos na propriedade; e uma menor chance das amostras serem positivas para pelo menos um dos três agentes etiológicos quando o solo era suplementado com calcário. Os resultados expõem alguns pontos críticos de contaminação, fornecendo suporte para capacitar os agricultores em boas práticas de gestão durante o processo de produção.

Toxoplasma gondii é um protozoário intracelular obrigatório causador da toxoplasmose, uma importante zoonose. Os felídeos, dentre eles o gato doméstico, são hospedeiros definitivos do T. gondii, neles ocorre a formação de oocistos eliminados nas fezes. Visto que poucos estudos são focados em gatos, este teve como objetivo avaliar a expressão de citocinas (IL-6, IL-10, TNF-α, IFN-g) e quantificar oocistos pela técnica de qPCR em gatos imunizados com proteínas recombinantes rROP2 de T. gondii e rHSP70 de Eimeria tenella. Foram utilizados doze gatos, em 3 grupos; 4 animais cada. G1: foi imunizado com 25 μg de rROP2, 25 μg de rHSP70 mais 20 μg de Quil-A; G2: recebeu 25 μg de E. coli (vetor) mais 20 μg do Quil-A; G3: recebeu apenas solução salina; grupo controle. Todas as doses imunizantes foram administradas nos dias 0, 21 e 42 do experimento pela via nasal. O desafio foi feito no dia 0, com 600 cistos da cepa TgDoveBr8 (tipo II). Amostras de sangue foram coletadas de cada animal nos dias 0,7,14, 21 e 35 pós infecção e fezes de todos os animais foram examinadas por 9 dias após o desafio pela técnica de Sheather (centrifugo-flutuação com exame microscópico) e pela qPCR. No 7º dia pós infecção, biopsias de duodeno foram coletadas de seis animais (dois gatos/grupo) para análise histopatológica. A partir do sangue total, realizou-se a separação de leucócitos, extração de RNA, síntese de cDNA e expressão gênica relativa pela qPCR com GAPDH como controle endógeno. A análise histopatológica dos seis animais submetidos à endoscopia duodenal revelou enterite linfohistioplasmocitária moderada e difusa em todos os animais, alguns diferenciais de lesões foram encontrados entre os grupos. Quanto aos sinais clínicos foi observada diarreia leve, de forma intermitente. A expressão gênica relativa de TNF-a (p

EnglishThe present study aimed to investigate an abortion outbreak in a dairy goat herd in the municipality of Arapoti, Parana, Brazil. At the beginning of the outbreak, blood samples were collected from 33 goats with clinical signs; later, of the whole goat herd, two cats and two dogs. Milk samples were collected from 78 lactating goats. Four environmental soil samples and four samples of feed residue from goat feeders were collected too. Immunofluorescence antibody test (IFA) was used for serodiagnosis, the molecular analysis was conducted by means of the polymerase chain reaction (PCR), for the isolation of the etiological agent the bioassay was used. The results of the IFA revealed that 76.53% (137/179) of the goats, two dogs and two cats were seropositive for Toxoplasma gondii. Bioassay revealed one buffy coat and two milk sample having viable T. gondii. In the PCR, 11 whole blood samples, eight milk, three feeder troughs, and all soil samples were positive. The findings of the present study confirmed an outbreak caused by environmental contamination (of soil and feed) with T. gondii oocysts that could have been shed by kittens that lived on the farm and had access to the stock of goat food, facilitating this contamination, which reinforces the need for veterinary assistance and good management practices on farms. Key words: toxoplasma; goats. IFA; PCR; bioassay. portuguesO presente estudo teve como objetivo investigar um surto de aborto em um rebanho de cabras leiteiras no municipio de Arapoti, Parana, Brasil. No inicio do surto, foram coletadas amostras de sangue de 33 cabras com sinais clinicos; mais tarde, de todo o rebanho caprino, dois gatos e dois cachorros. Foram obtidas amostras de leite das 78 cabras em lactacao. Quatro amostras ambientais de solo e quatro de residuos de comedouro tambem foram coletadas. O teste de imunofluorescencia (IFI) foi utilizado para o sorodiagnostico, a analise molecular foi conduzida por meio da reacao em cadeia da polimerase (PCR), para isolamento do agente etiologico utilizou-se o bioensaio. Os resultados da IFI revelaram que 76,53% (137/179) das cabras, todos os caes e gatos eram soropositivos para Toxoplasma gondii. O bioensaio revelou uma amostra de camada leucocitaria e duas de leite contaminadas com T. gondii viavel. Na PCR, 11 amostras de sangue total, oito de leite, tres residuos alimentares e todas as amostras de solo foram positivas. Os resultados do presente estudo confirmaram um surto causado por contaminacao ambiental (de solo e alimentos) com oocistos de T. gondii que, provavelmente, foram eliminados por gatos que permaneceram na fazenda e tinham acesso ao estoque de alimento dos caprinos, reforcando a necessidade de assistencia tecnica veterinaria e boas praticas de manejo. Palavras-chave: toxoplasma; cabras. IFI; PCR; bioensaio.

As enteroparasitoses causadas por helmintos e protozoários infectam humanos e animais no mundo todo, e sua prevalência está relacionada à falta de hábitos de higiene pessoal em consequência do seu ciclo oral-fecal. No Brasil, como não são doenças de notificação obrigatória, é possível que sua prevalência esteja subnotificada. Em Londrina, não existem dados sobre a prevalência dessas parasitoses na população urbana adulta, que ofereçam suporte para delinear programas de saúde preventiva na comunidade. Foram coletadas amostras de fezes de 187 humanos residentes na área urbana de Londrina para pesquisa de enteroparasitas. Dados epidemiológicos foram coletados por meio de um questionário epidemiológico aplicado a todos os participantes. As variáveis associadas ao risco foram analisadas conforme foram relatadas pelos indivíduos parasitados. Foram discutidos: gênero, idade, renda familiar mensal, lavagem das mãos antes da alimentação e após utilizar o banheiro, água de consumo, ocorrência de diarreia nos últimos sete dias, abastecimento de água e rede de esgoto. Foram detectados ovos ou cistos de parasitas em 8/187 (4,27%) amostras investigadas. A ocorrência do protozoário Giardia spp. foi verificada em 7/187 (3,74%) amostras e o helminto Enterobius vermiculares em 1/187 (0,53%). Devido ao ciclo destes parasitas envolver a saúde humana, animal e do ambiente, é sugerido que a ocorrência das enteroparasitoses reduza por meio da abordagem de Saúde Única na área urbana de Londrina, PR.

Made available in DSpace on 2015-11-03T15:29:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-10-01. Added 1 bitstream(s) on 2015-11-04T10:14:47Z : No. of bitstreams: 1 S1984-29612014000400443.pdf: 604594 bytes, checksum: f2dd2f1f3e36bfd53ab7d2708b790958 (MD5) Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) Pombos silvestres (Zenaida auriculata), comuns em áreas urbanas, rurais e selvagens em muitas regiões do Brasil, são frequentemente predados por gatos domésticos. Sendo assim, os isolados de T. gondii obtidos de pombos podem refletir uma maior diversidade ambiental do que os outros hospedeiros. O objetivo do presente estudo foi avaliar a soroprevalência, isolar e genotipar T. gondii de Z. auriculata. Amostras de soro e tecido foram coletadas de 206 pombos para o teste de aglutinação modificado (MAT) e o bioensaio em camundongos. A prevalência de anticorpos contra T. gondii em pombos foi 22,3% (46/206), com títulos variando de 16 a 4096, e T. gondii foi isolado de 12 pombos. Cinco genótipos foram detectados por PCR-RFLP, incluindo os genótipos ToxoDB #1, #6, #17, #65 e um genótipo não descrito anteriormente (ToxoDB#182). Esse é o primeiro relato de isolamento de T. gondii de Z. auriculata. Este estudo também confirmou a diversidade dos isolados de T. gondii e a presença de tipo clonal II (ToxoDB #1) no Brasil. Eared doves (Zenaida auriculata), which are common in urban, rural and wild areas in many regions of Brazil, are frequently prey for domestic cats. Therefore Toxoplasma gondii isolates obtained from doves may reflect greater environmental diversity than those from other hosts. The aim of the present study was to evaluate T. gondii seroprevalence, isolate and genotype strains from Z. auriculata. Serum and tissue samples were collected from 206 doves for use in the modified agglutination test (MAT) and mouse bioassay. The prevalence of T. gondii antibodies in the doves was 22.3% (46/206), with titers ranging from 16 to 4096, and T. gondii strains were isolated from 12 of these doves. Five genotypes were detected by means of PCR-RFLP, including ToxoDB genotypes #1, #6, #17 and #65, and one genotype that had not previously been described (ToxoDB#182). This was the first report on isolation of T. gondii from Z. auriculata. This study confirmed the genetic diversity of T. gondii isolates and the existence of clonal type II (ToxoDB genotype #1) in Brazil. Univ Estadual Londrina, Dept Vet Prevent Med, Lab Protozool, BR-86051990 Londrina, PR, Brazil Univ Tennessee, Dept Microbiol, Knoxville, TN 37996 USA Univ Estadual Paulista, Sch Agr &Vet Sci, Dept Vet Pathol, UNESP, Jaboticabal, SP, Brazil Univ Estadual Paulista, Sch Agr &Vet Sci, Dept Vet Pathol, UNESP, Jaboticabal, SP, Brazil CAPES: 1345/2011 CAPES: 10259/12-0 FAPESP: 2010/01597-2

O objetivo deste trabalho foi detectar anticorposcontra T. gondii emcãescom sinais clínicoscompatíveis com toxoplasmose atendidos em um Hospital Veterinário. Foram submetidos a sorologia 598 cães no período de 1993 a 2013. A pesquisa de anticorpos da classe IgG contra T. gondii foi realizada pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI); amostras com título ≥ 16 foram consideradas positivas. Entre os cães com sinais clínicos, 259 (43,31%) foram soropositivos para T. gondii com títulos variando de 16 a 4096; já entre os animais hígidos, 79 (22,25%) foram reagentes. Os sinais mais evidentes foram os neurológicos (30,43%) e uveíte (8,03%). Entre as variáveis raça, sexo e idade, apenas a última exerceu influência sobre os resultados observados, com maior frequência de soropositivos em cães idosos. Palavras-chave: caninos; RIFI; sinais clínicos; sorologia; Toxoplasma gondii; zoonose.