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Orientador: Vera Lucia Garcia Rehder Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: The abstract is available with the full electronic document Mestrado Fármacos, Medicamentos e Insumos para Saúde Mestre em Biociências e Tecnologia de Produtos Bioativos

CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior O Cerrado possui frutíferas nativas pouco conhecidas e pesquisadas, contemplando possíveis fontes de metabólitos secundários com importantes propriedades fitoquímicas a serem exploradas. Assim, este trabalho buscou avaliar a capacidade sequestradora dos radicais livres DPPH, ABTS, redução do Complexo de Fosfomolibdênio e quantificar compostos fenólicos, flavonoides, antocianinas e carotenoides totais nos extratos aquosos dos frutos das espécies vegetais Campomanesia adamantium, C. guazumifolia, C. lineatifolia e C. sessiliflora encontradas no Cerrado na Região do Alto Paranaíba em Minas Gerais. O teor de compostos fenólicos foi determinado pelo método de Folin-Ciocalteu, flavonoides e antocianinas totais pelo de Lees e Francis (1972) e carotenoides totais pelo de Lichtenthaler (1987). O extrato de C. guazumifolia apresentou maiores índices de compostos fenólicos (2.953,42 ± 141,22 mg EAG 100 g -1), flavonoides (43,17 ± 2,25 mg 100 g-1), antocianinas (7,96 ± 0,38 mg 100 g-1), carotenoides (64,06 ± 12,55 mg g-1) e de atividade antioxidante pelo DPPH (568,3 mg EBHT g-1) e ABTS (105,3 mg EBHT g-1), evidenciando elevado potencial anti-radicalar in vitro. C. adamantium também demonstrou resultados significativos de fenólicos (1.547,44 ± 79,49 mg EAG 100 g-1), flavonoides (36,63 ± 0,17 mg 100 g-1), antocianinas (1,74 ± 0,10 mg 100 g-1), carotenoides (20,65 ± 0,43 mg g-1 ), DPPH (49,1 mg EBHT g-1), ABTS (83,7 mg EBHT g-1) e complexação do fosfomolibdênio (105,1 mg EBHT g-1) evidenciando elevado potencial redutor. Sendo assim, os extratos de C. guazumifolia e C. adamantium apresentam-se potencialmente promissores para a atividade antioxidante podendo ser utilizados na prevenção e tratamento de patologias relacionadas ao estresse oxidativo. The Cerrado has little-known and researched native fruits, contemplating possible sources of secondary metabolites with important phytochemical properties to be explored. Thus, this work sought to evaluate the scavenging capacity of DPPH, ABTS free radicals, reduction of the Phosphomolybdenum Complex and to quantify phenolic compounds, flavonoids, anthocyanins and total carotenoids in the aqueous extracts of the fruits of the plant species Campomanesia adamantium, C. guazumifolia, C. lineatifolia and C. sessiliflora found in the Cerrado in the Alto Paranaíba Region in Minas Gerais. The content of phenolic compounds was determined by the Folin-Ciocalteu method, total flavonoids and anthocyanins by Lees and Francis (1972) and total carotenoids by Lichtenthaler (1987). The C. guazumifolia extract showed higher levels of phenolic compounds (2,953.42 ± 141.22 mg EAG 100 g -1), flavonoids (43.17 ± 2.25 mg 100 g-1), anthocyanins (7.96 ± 0.38 mg 100 g-1), carotenoids (64.06 ± 12.55 mg g-1) and antioxidant activity by DPPH (568.3 mg EBHT g-1) and ABTS (105.3 mg EBHT g- 1), showing high antiradical potential in vitro. C. Adamantium also demonstrated significant results for phenolics (1,547.44 ± 79.49 mg EAG 100 g-1), flavonoids (36.63 ± 0.17 mg 100 g-1), anthocyanins (1.74 ± 0.10 mg 100 g-1), carotenoids (20.65 ± 0.43 mg g-1), DPPH (49.1 mg EBHT g-1), ABTS (83.7 mg EBHT g-1) and phosphomolybdenum complexation (105.1 mg EBHT g-1) showing a high reducing potential. Thus, the extracts of C. guazumifolia and C. adamantium are potentially promising for antioxidant activity and can be used in the prevention and treatment of pathologies related to oxidative stress. Dissertação (Mestrado) 2022-08-28

Orientador: Fernanda Janku Cabral Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O "Schistosoma mansoni", agente causador da esquistossomose, tem um processo de desenvolvimento complexo, devido aos diferentes estágios e habitats que o parasita possui. Recentemente, tem sido investigados aspectos da maquinaria epigenética envolvidos em seu ciclo. Objetivou-se investigar a transcrição dos genes das enzimas modificadoras de histonas e determinar a modificação pós-traducional do ciclo de vida de S. mansoni. Sendo assim, uma busca em bancos de dados GeneDB e NCBI foi realizada para as sequências dos genes que codificam essas enzimas. A partir disso, foram obtidos resultados através de qRT-PCR que permitiu uma análise geral do perfil de transcrição ao longo dos diferentes estágios do parasita que teve maior número de genes com expressão aumentada, em cercária e esquistossômulo 3 dias. Os genes encontrados nessas fases pertenciam a classe das metilases e deacetilases e os transcritos que se sobressaíram foram: Smp_091990, Smp_191310, Smp_160700, Smp_121610 e Smp_1368770, demonstrando potenciais alvos terapêuticos. Para verificar as modificações pós-traducionais da histona presentes ao longo do ciclo, foi padronizado um método de extração de histonas propioniladas que demonstrou-se eficaz em comparação as histonas não-propioniladas. As modificações identificadas foram, sobretudo, metilações no estágio de cercária. Além disso, em verme adulto macho foi visto marcas nunca vistas antes em analises por espectrometria de massas como a ubiquitinação e crotonilação. Portanto, conclui-se que os dados obtidos com a espectrometria validaram a análise de expressão dos transcritos que codificam as enzimas modificadoras de histona, tendo visto alta metilação em cercária em ambas análises Abstract: "Schistosoma mansoni", an agent that causes schistosomiasis, has a complex development process due to different stages and habitats that the parasite has. Recently, aspects of epigenetic machines involved in its cycle have been investigated. The objective was to investigate a gene transcription of histone-modifying enzymes and to determine the post-traditional alteration of the S. mansoni life cycle. Therefore, a search in the GeneDB and NCBI databases was carried out for gene sequences that encode these enzymes. From that, results were obtained through qRT-PCR that allowed a general analysis of the transcription profile and over the different stages of the parasite that had the highest number of genes with increased expression, in cercariae and schistosomal 3 days. The genes found in these phases belong to a class of methylases and deacetylases and the transcripts that stand out were: Smp_091990, Smp_191310, Smp_160700, Smp_121610 and Smp_1368770, demonstrating the therapeutic risks. In order to verify how post-traditional changes in history present throughout the cycle, a method of extracting propionylated histories was standardized which proved to be effective in comparison with non-propionylated histories. The identified modifications were mainly methylations in the cercariae stage. In addition, in the adult male worm, ubiquitination and crotonylation has been seen by mass spectroscopy. Therefore, we conclude that the data obtained with spectrometry validated an analysis of transcript expression that encodes as histone-modifying enzymes, having seen high methylation in cercariae in exhibitions Mestrado Parasitologia Mestra em Parasitologia FAPESP 2017/07364-9 CAPES 001 FAEPEX 2547/17; 2813/18; 2476/18

Os insetos pertencentes à ordem Díptera, família Psychodidae e subfamília Phebotominae, conhecidos popularmente como mosquito palha ou birigui, são considerados vetores das leishmanioses. As leishmanioses são um complexo de doenças infecciosas causadas por protozoários do gênero Leishmania spp., caracterizadas como zoonoses negligenciadas e de grande importância em saúde pública. Neste contexto, e em decorrência do aumento do número de casos de leishmaniose, objetivou-se com o presente estudo, investigar a fauna flebotomínica em três municípios da região nordeste do estado de São Paulo (Rifaina, Franca e Pedregulho) e em Delfinópolis-Minas Gerais. As capturas entomológicas foram realizadas durante cinco noites consecutivas em cada munícipio, no período de abril a julho de 2019. Como critério de seleção de pontos estratégicos, foram selecionados bairros ou região com incidência de casos de leishmaniose canina, notificados pela vigilância sanitária nos municípios avaliados. Após a coleta, os insetos foram analisados para verificação da presença de flebotomíneos, seguida da identificação morfológica para diferenciação entre as espécies. Um total de 26, 233, 146, 34 flebotomíneos foram capturados nos municípios de Franca, Pedregulho, Rifaina e Delfinópolis respectivamente. Nas quatro áreas estudadas, houve variação quanto à fauna flebotomínica e foram identificados o total de 17 espécies, pertencentes a subfamília Phebotominae, Subtribos Psychodopygina Brumptomyiina, Sergentomyiina, Lutzomyiina. Dentre as espécies identificadas, três estão relacionadas ao ciclo de transmissão da Leshimaniose tegumentar e visceral, sendo elas respectivamente Nyssomyia whitmani, Migonemyia (Migonemyia) migonei e Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis, este último relatado pela primeira vez cientificamente na região. Desse modo conclui-se que, o levantamento das espécies em cada região pode esclarecer pontos importantes no entendimento na transmissão da doença e reforçar as políticas de saúde pública em áreas específicas de presença de flebotomíneos. Insects belonging to the order Diptera, family Psychodidae and subfamily Phebotominae, popularly known as mosquito straw or birigui, are considered vectors of leishmaniasis. Leishmaniasis is a complex of infectious diseases caused by protozoa of the genus Leishmania spp., Characterized as neglected zoonoses of major public health importance. In this context, and due to the increase in the number of leishmaniasis cases, the objective of this study was to investigate the phlebotomine fauna in three municipalities of the northeast region of São Paulo (Rifaina, Franca and Pedregulho) and in Delfinópolis-Minas Gerais. The entomological captures were performed during five consecutive nights in each municipality, from April to July 2019. As criterion for selection of strategic points, neighborhoods or regions with incidence of canine leishmaniasis cases, notified by health surveillance in the evaluated municipalities, were selected. After collection, the insects were analyzed for the presence of sand flies, followed by municipalities of Franca, Pedregulho, Rifaina and Delfinópolis respectively. In the four studied areas, there was variation in the phlebotomine fauna and were identified the total of 17 species, belonging to the subfamily Phebotominae, Subtribos Psychodopygina Brumptomyiina, Sergentomyiina, Lutzomyiina. Among the identified species, three are related to the transmission cycle of cutaneous and visceral Leshimaniasis, namely Nyssomyia whitmani, Migonemyia (Migonemyia) migonei and Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis, the latter reported for the first time scientifically in the region. Thus, it is concluded that the survey of species in each region can clarify important points in understanding the transmission of the disease and strengthen public health policies in specific areas of presence of sandflies.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa de Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. Schistosomiasis is a neglected tropical disease that affect millions of people worldwide and it is caused by the infection with parasites of the genus Schistosoma. When caused by S. mansoni, schistosomiasis is characterized by the formation of liver granuloma, due to the presence of eggs trapped in the tissue, and the concurrent development of liver fibrosis that could lead to life lasting chronic complications. In this context, the spleen has been demonstrated to be a very responsible organ, with splenomegaly being one of the major hallmarks of schistosomiasis. Nevertheless, it has received little attention in terms of which immune and molecular mechanisms could be governing this host-parasite interplay and the development of this condition. In this study, we used mass spectrometry-based shotgun proteomics combined with systems biology tools to explore the complex molecular dynamic in the spleen at the acute phase of inflammation in a mice model of infection by S. mansoni. More than fifty hundred proteins were identified in the spleen proteome, and 325 of them were differentially expressed between infected and control individuals. Functional enrichment analyses showed that most differentially expressed proteins were categorized within pathways of innate and adaptive immunity, DNA replication, vesicle transport and catabolic metabolism. There was a significant enrichment of pathways associated with antigen processing and presentation, with an increased expression of MHC class II proteins and the negative regulation of cysteine and serine proteases. Indications of metabolic reprogramming were also found, with the downregulation of a set of proteins related to mitochondrial metabolism. It was also possible to establish a link between the variation in protein expression in the spleens with variations in subpopulations of spleen cells as revealed by flow cytometry analyses. These suggested the increased proportion of MHC-II-presenting macrophages with the higher abundance of MHC-II proteins measured by mass spectrometry. With this, we presented the first proteomic shotgun analysis of the spleen during schistosomiasis, offering new insights on the understanding of immune mechanisms associated with the establishment of the disease and other processes of immune modulation related to the host-parasite interplay.

De acordo com a Organização Mundial da Saúde, a esquistossomose afeta mais de 207 milhões de pessoas em todo o mundo. No Brasil, a área endêmica abrange 19 estados com aproximadamente 42 milhões de habitantes expostos ao risco de infecção. Deste total, cerca de 7 milhões de indivíduos estão atualmente infectados, fazendo desta doença um dos mais sérios problemas de saúde nos países em desenvolvimento. Dentre todas as plantas medicinais comumente utilizadas pela população brasileira, as árvores do gênero Copaifera, conhecidas popularmente como “copaíbas, copaibeiras ou pau d´óleo”, podem ser destacadas em função de suas aplicações farmacológicas historicamente comprovadas pela medicina popular, tais como, antiinflamatório, antiparasitário entre outros. Visando explorar este potencial, neste trabalho encontram-se descritos os processos de isolamento e identificação dos metabólitos encontrados na parte fixa do balsamo de C. duckei, além dos ensaios realizados com a óleorresina e os principais metabólitos isolados dessa espécie, com ênfase principal nos diterpenos ácidos (constituintes da fração fixa da oleorresina), frente ao Schistosoma mansoni. Os resultados demonstram que a oleorresina apresenta valores de concentração letal de 50% dos parasitos (CL50) de 75,8, 50,6 e 47,2 µg/mL após 24, 48 e 72 horas de incubação respectivamente, e o seu metabólito majoritário, o ácido poliáltico (Cd1) apresenta valores de CL50 de 133,4 µM (41,7µg/ml), 116,3 µM (36,2 µg/ml) e 107,9 µM (33,4 µg/ml), em 24, 48 e 72 horas de incubação respectivamente. Outros aspectos analisados como por exemplo a ovoposição, desenvolvimento dos ovos e atividade contra vermes jovens denotam o potencial desse estudo na busca de novos princípios esquistossomicidas. According to the World Health Organization, schistosomiasis affects over 207 million people worldwide. In Brazil, the endemic area covers 19 states with approximately 42 million people at risk of infection. Of this total, about 7 million people are currently infected, making this disease one of the most serious health problems in developing countries. Of all the medicinal plants commonly used by the Brazilian population, the trees of the genus Copaifera, known popularly as "copaiba, copaibeiras or stick d'óleo" can be highlighted due to their pharmacological applications historically proven by popular medicine, such as antiinflammatory , antiparasitic and others. In order to exploit this potential, in this paper are described the isolation procedures and identification of metabolites found in the fixed part of balm C. duckei, in addition to trials with the oleoresin and the main metabolites isolated this species, with main emphasis on diterpenes acids (constituents of fixed fraction of the oleoresin), against Schistosoma mansoni. The results demonstrate that the oleoresin has a lethal concentration values 50% of parasites (LC50) of 75.8, 50.6 and 47.2 µg/mL after 24, 48 and 72 hours incubation respectively, and its major metabolite the poliáltico acid (Cd1) has LC50 values of 133.4 μM (41,7μg/ml), 116.3 µM (36.2 μg/ml) and 107.9 µM (33.4 μg/ml), 24, 48 and 72 hours of incubation respectively. Other aspects analyzed such as oviposition, egg development and activity against young worms denote the potential of this study to find new schistosomicide principles.

A estimulação dos mastócitos via receptor de alta afinidade FcεRI, desencadeia uma cascata de sinalização que leva a secreção de mediadores estocados em seus grânulos, que desempenham um papel fundamental no processo inflamatório e consequentemente na resposta a um alergêneo. Assim, a não desgranulação dos mastócitos é um efeito desejado quando um antiinflamatório é utilizado em uma determinada terapia. Dessa forma, o estudo dos mastócitos representa um importante caminho para o desenvolvimento de novos fármacos para o tratamento de diversas patologias. Portanto, este trabalho procurou contribuir com a análise do comportamento do mastócito quando incubado com o diterpeno ácido pimaradienóico (AP). Eventos de sinalização em mastócitos mediados por IgE levam ao aumento da concentração de Ca2+ intracelular, provocando a ativação e desgranulação dessas células. Este trabalho teve como objetivo avaliar o papel do (AP) sobre a ativação dos mastócitos e consequentemente a liberação dos fatores pré-formados os quais estão estocados nos grânulos secretórios dos mastócitos. Avaliamos também o efeito do AP sobre a via de transcrição NFAT e NFkB em células RBL-2H3NFAT-GFP e RBL-2H3NFkB-GFP. NFAT e NFkB atuam na síntese dos fatores neo-sintetizados dos mastócitos. Os resultados demonstraram que o AP não ativou mastócitos via o receptor FcεRI a partir da incubação com células da linhagem NFkB2 e V9 e que não ocorre ativação dos fatores de transcrição NFAT e NF-kB. Concluímos assim que o AP pode ser considerado como um possível protótipo para um futuro fármaco utilizado para auxiliar no tratamento de patologias que envolvam a ativação das vias inflamatórias. Activation of mast cells via high affinity receptor FcεRI initiates a cascade of signaling events, in its turn, leads to secretion of mediators from granules of mast cells. These mediators play a key role in the inflammatory process and consequently in response to allergens. Thus, the non-activation of mast cells is an intended effect when an anti-inflammatory drug is used in a specific therapy. Thereby, studying mast cells represent an important way for development of new drugs for the treatment of several pathologies. Therefore, this study aimed to analyze the behavior of mast cells when incubated in the presence of diterpene acid pimaradienóico (AP). Signaling events mediated by IgE on mast cells lead to the increase of intracellular Ca2+ concentration, which causes the activation of these cells. This study aimed to evaluate the role of (AP) on the activation of mast cells which release preformed factors and are present in the secretory granules of mast cells. We also evaluated the effect of AP on transcription via of both NFAT and NFkB in RBL-2H3NFAT-GFP and RBL-2H3NFkB-GFP cells. NFAT and NFkB acts on the synthesis of the mast cells neo-synthesized factors. Results demonstrated that AP did not activate mast cells via receptor FcεRI from the incubation with cell lineage NFkB2 and V9 and does not occurs activation of the transcription factors NFAT and NF-kB. We conclude that the AP can be regarded as a possible prototype for a future drug used to aid in the treatment of pathologies which involving the activation of inflammatory pathways.

Orientadores: Silmara Marques Allegretti, Vera Lúcia Garcia Rehder Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: A propagação da esquistossomose e a ameaça de tolerância e resistência ao fármaco de escolha, o praziquantel, têm intensificado as pesquisas utilizando plantas medicinais com o intuito de promover o desenvolvimento de novos fármacos esquistossomicidas. A planta Phyllanthus amarus (quebra-pedra) possui atividades antiinflamatória e hepatoprotetora já comprovadas cientificamente, o que fez com que a mesma fosse selecionada para este estudo, uma vez que a principal patologia da esquistossomose é a formação de granulomas (processo inflamatório) no fígado. Esse trabalho teve como objetivo fazer um fracionamento biomonitorado do extrato etanólico de P. amarus por meio de ensaios in vitro e in vivo com o intuito de verificar a ação esquistossomicida dessa planta contra o S. mansoni linhagem BH. Para a realização dos testes in vitro, os vermes adultos coletados foram incubados em placas contendo meio de cultura RPMI 1640, um casal de verme e amostras de extrato etanólico bruto, frações de diferentes polaridades ou lignanas isoladas nas concentrações 200, 100, 50 e 25 ?g/mL. Os vermes foram observados por um período de 72 horas, sendo avaliados a taxa de mortalidade, a oviposição, o acasalamento e as alterações tegumentares. A melhor atividade in vitro foi observada com a fração 2 butanólica, pois foi letal para 100% dos vermes em 48 h de observação, sendo assim selecionada para os testes in vivo. A fração 2 butanólica é composta majoritariamente por lignanas, por isso algumas delas (nirantina, filantina + nirantina e filantina + filtetralina + nirtetralina), mesmo não sendo efetivas nos testes in vitro, foram selecionadas para avaliação in vivo. Nos testes in vivo camundongos Balb/c foram tratados oralmente, 45 ou 60 dias após a infecção. No 45° dia de infecção os animais foram tratados com 100 e 200 mg/kg da fração 2 butanólica, 100 mg/kg das lignanas nirantina, filantina + nirantina e filantina + filtetralina + nirtetralina em dose única e 100 mg/kg da fração 2 butanólica distribuídos em 3 dias consecutivos. Já no 60° dia de infecção o tratamento foi feito em dose única com a fração 2 butanólica, nirantina, filantina + nirantina e filantina + filtetralina + nirtetralina (100mg/kg). A atividade in vivo foi avaliada com base nos seguintes parâmetros: ação sobre os vermes adultos, ovos eliminados nas fezes, oograma, formação das reações granulomatosas, e ação sobre o tegumento (feita por microscopia eletrônica de varredura - MEV). Os tratamentos mais efetivos no 45° dia de infecção foram apresentados pelos grupos tratados com filantina + nirantina e nirantina (100mg/kg). A lignana nirantina apresentou taxa de redução do número de ovos de 90,3% e a associação da filantina + nirantina, 63,8%. Os resultados referentes aos demais parâmetros (redução do total de vermes, de vermes fêmeas e do número de granulomas) foram semelhantes, apresentando taxas de redução em torno de 58%. Além dessas alterações, as imagens obtidas por MEV mostraram extensas lesões no tegumento dos vermes machos. No 60° dia de infecção, a associação de lignanas filantina + nirantina e a fração 2 butanólica (100mg/kg) apresentaram as taxas de redução mais significativas: 50,8% e 46,7% para o número total de vermes, 47,2% e 42,7% para o número de vermes fêmeas, 87,5% e 98,3% para o número de ovos e 44% e 18% para o número de granulomas, respectivamente. Assim sendo, de acordo com os parâmetros biológicos avaliados neste trabalho, a associação das lignanas filantina: nirantina na concentração de 100 mg/kg revelou um efeito esquistossomicida promissor, uma vez que foi efetiva nos dois períodos estudados Abstract: The dissemination of schistosomiasis and the threat of its causing agents becoming resistant to the drug of choice, i.e., praziquantel, have intensified the research with medicinal plants to promote the development of new schistosomicidal drugs. Phyllanthus amarus (stone-breaker) is a plant whose anti-inflammatory and hepatoprotective activities have already been attested, which is the reason why it was chosen for this study, as the main pathology of schistosomiasis is the formation of granulomas (inflammatory process) in the liver. The aim of this work was to carry out a bioguided fractionation of the ethanol extract of P. amarus by means of in vitro and in vivo assays in order to verify the schistosomicidal potential of that plant against S. mansoni, BH strain. To carry out the in vitro assays, the collected adult worms were incubated in plates containing RPMI 1640 medium, a pair of mating worms, and samples of crude ethanol extract, fractions of different polarities or isolated lignans at the concentrations of 200, 100, 50 and 25 ?g/mL. The worms were observed over a period of 72 hours, in which mortality rate, egg laying, mating, and tegumentary changes were evaluated. The best in vitro activity was provided by butanol fraction 2, as it proved lethal for 100% of the worms over 48 hours of observation, and so it was used in the in vivo assays. Butanol fraction 2 is mainly composed of lignans, and some of them (nirantin, filantin: nirantin, and filantin + filtetralin + nirtetralin), albeit not effective in the in vitro assays, were selected for in vivo evaluation. In the in vivo assays, Balb/c mice were treated orally 45 or 60 days following infection. On the 45th day following infection, the animals were treated with 100 and 200 mg/kg of butanol fraction 2, 100 mg/kg of filantina:nirantin and filantin + filtetralin + nirtetralin in a single dose, and 100 mg/kg of butanol fraction 2 distributed over 3 consecutive days. On the 60th day following infection, the treatment was carried out in a single dose with 100 mg/kg of butanol fraction 2, nirantin, filantina:nirantin, and filantin + filtetralin + nirtetralin. The in vivo activity was evaluated based on the following parameters: action on adult worms, eggs eliminated in the stool, egg counting, granulomatous reactions, and action on the tegument of the worms (using scanning electron microscopy (SEM). The most effective treatments on the 45th day were those carried out with 100 mg/kg of filantina:nirantin, and nirantin. The association of filantina:nirantin provided a reduction of 63.8% in the number of eggs, whereas nirantin achieved a reduction rate of 90.3%. The results for the other parameters (reduction in the total number of worms, number of females, and number of granulomas) were similar with reduction rates around 58%. In addition to such changes, images obtained by SEM showed extensive lesions on the tegument of male worms. On the 60th day following infection, the filantin + nirantin association and butanol fraction 2 at 100 mg/kg achieved the most significant xxiii reduction rates: 50.8% and 46.7% in the total number of worms, respectively; 47.2% and 42.7% in the number of females, respectively; 87.5% and 98.3% in the number of eggs, respectively; and 44% and 18% in the number of granulomas, respectively. Therefore, according to the biological parameters evaluated in this work, the association of the lignans filantina:nirantin at 100 mg/kg has a promising schistosomicidal activity, as it was effective over two periods of treatment Doutorado Parasitologia Doutora em Parasitologia

Roupala montana Aubl. é uma espécie da família Proteaceae com pouquíssimos ou quase nenhum relato sobre o seu perfil fitoquímico e/ou estudos biológicos, o que torna esta pesquisa inédita. Assim, este trabalho enfoca o preparo de um extrato bruto das partes aéreas de Roupala montana, seguido de um fracionamento com diferentes solventes de polaridades crescentes, obtendo-se as frações Hexânica (RP1), Acetato de etila (RP2), n-butanólica (RP3) e Hidrometanólica (RP4), e os seus respectivos ensaios biológicos (esquistossomicida, antimicrobiana e acetilcolinesterásica). A partir do fracionamento, houve o monitoramento das frações (RP1, RP2, RP3 e RP4) através de ensaios cromatográficos por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), o qual se selecionou a fração RP1 para procedimentos cromatográficos por CG-EM objetivando traçar seu perfil fitoquímico. Através do estudo fitoquímico da fração RP1 por CG-EM, permitiu-se a identificação de 2 (dois) diterpenos (Fitol e Neofitadieno), 3 (três) triterpenos (β-amirina, α-amirina e Lupeol), 2 (dois) carotenóis (δ-tocoferol e γ-tocoferol) e 1 (um) éster de ácido graxo (Éster etílico do ácido Palmítico), como constituintes majoritários. O potencial esquistossomicida do extrato bruto (RP) e das frações provenientes da partição líquido-líquido foi avaliado in vitro frente aos vermes adultos de Schistosoma mansoni. Os resultados indicam que a fração RP2 foi a mais ativa dentre as amostras testadas, sendo que esta promoveu a morte de 100% dos parasitas na dose de 50 µg/mL no quinto dia de tratamento. Adicionalmente, os resultados obtidos frente à atividade antimicrobiana do extrato bruto e das frações de Roupala montana demonstraram valores de CIM intermediários, sendo que apenas a fração RP2 inibiu fracamente o crescimento de Streptococcus pneumoniae, com CIM de 200 µg/mL, o que se poderia sugerir seu uso como auxiliar no controle e redução dos microrganismos patogênicos. Paralelamente, a ação acetilcolinesterásica de Roupala montana revelou que as frações RP1, RP2 e RP3 apontaram ligeiro potencial de inibição frente à esta enzima, sendo que apresentou uma mancha branca no mesmo Fator de Retenção (Rf) Roupala montana is a species of the family Proteaceae with very few or almost no reports on the phytochemical profile and / or biological studies, which makes this original research. This work focuses on the preparation of a crude extract of aerial parts of Roupala montana, followed by fractionation with different solvents of increasing polarity, yielding hexane fractions (RP1), Ethyl acetate (RP2), n-butanol ( RP3) and hydromethanol (P4), and their respective biological assays (schistosomicidal, antimicrobial and acetilcolinesterásica). The fractionation, the fractions were monitored (RP1, RP2, RP3 and RP4) by chromatographic assays by High Performance Liquid Chromatography (HPLC), which was selected for chromatographic procedures RP1 fraction by GC-MS trace its objective phytochemical profile. Through the phytochemical study of RP1 fraction by GC-MS allowed the identification of two (2) diterpenes (Phytol and Neofitadieno), 3 (three) triterpenes (β-amyrin, α-amyrin and lupeol), two (2) carotenóis (γ-tocopherol and δtocopherol) and 1 (a) ester of fatty acid (palmitic acid ethyl ester), as major constituents. The potential schistosomicidal crude extract (RP) and the fractions from the liquid-liquid partition was evaluated in vitro against the adult worms of Schistosoma mansoni. The results indicate that the P2 fraction was the most active among the samples tested, this being promoted 100% death of the parasites on the dose of 50 mg / mL in the fifth day of treatment. Additionally, the results obtained against the antimicrobial activity of crude extract and fractions Roupala montana showed MIC values intermediate, and only a fraction RP2 weakly inhibited the growth of Streptococcus pneumoniae, with MIC of 200 mg / mL, which could suggest its use as an aid in the control and reduction of pathogenic microorganisms. In addition, the action acetilcolinesterasica of Roupala montana fractions revealed that RP1, RP2 and RP3 had a slight potential to inhibit this enzyme front, and had a white spot at the same retention factor (Rf).