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Orchids are valued as ornamental plants, bioindicators, and medicinal plants, which implies that some species may be overcollected. Some inhabit very fragile environments and are under threat by the misuse of habitats and anthropogenic impacts. The search for beautiful plants and flowers has increased the number of facilities for micropropagation either by seeding or by cloning plants using in vitro techniques. However, not all species have appropriate media for growth and development that would help in conservation efforts. Cyrtopodium aliciae is an endemic species of rupestrian grassland in Brazil t. It has appeal as an ornamental plant or for use in hybridisation programs dueo its small size and white brownish-purple dotted flowers. This study compared three different media, namely 1/2 concentration Murashige and Skoog (MS), Vacin and Wendt, and Knudson C, during plant growth and their effect on the acclimatization of Cyrtopodium aliciae. The number and length of shoots and roots, increase in mass, and survival in vitro and ex vitro were analyzed. The experiment was conducted as completely random with a factorial arrangement of treatments (3 Ã--3) with 10 repetitions per treatment containing 10 plants for the in vitro experiment and 3 repetitions of 10 plants for the ex vitro experiment. Cyrtopodium aliciae performed better in the ½ concentration MS medium with a higher increase in mass, plant development, and survival under both in vitro and ex vitro conditions. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Lippia gracilis Schauer (Verbenaceae), popularly known as alecrim de tabuleirol is used in folk medicine to treat colds, coughs, sinusitis, bronchitis, headache and externally skin conditions, burns, wounds, and ulcers. The tissue culture method of micropropagation has produced the greatest impact on plant production. It allows large scale plant multiplication within short periods of time using a limited physical space during any season of the year. The objective of this study was to evaluate the explant type, its position and the culture medium used for the establishment and in vitro culture of Lippia gracilis. For the establishment experiment, the treatments were: two types of explants (apical and nodal) taken from two cultivation environments (field and greenhouse), and inoculated in two types of culture medium (MS and MS/2). In order to verify the influence of the explant position, the treatments consisted of explants horizontally or vertically inoculated. For the evaluation of sucrose in the culture medium, the concentrations of 7.5; 15; 30 and 60 g L-1 were tested, while for salt concentration, the treatments consisted of 4 different salt concentrations: 1/4 MS; 1/2 MS; MS and 2MS. In all experiments, a completely randomized design was used. Half of the salt concentration and the use of explants from a greenhouse reduced the rates of contamination, oxidation, and necrosis in the in vitro establishment of Lippia gracilis. The sucrose concentration of 30 g L-1 and 1/2 MS culture medium showed the best growth results for the species. Although the production of dry matter was reduced in this concentration of salts, the plantlets were more vigorous to proceed to acclimatization. Explants from a greenhouse inoculated horizontally in 1/2 MS medium supplemented with 30 g L-1 of sucrose increase growth parameters and the multiplication rate in the in vitro propagation of L. gracilis. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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Peach palm is a domesticated palm commercially important for the production of fruits and hearts of palm. Somatic embryogenesis, an effective technique for mass propagation, was successfully established for this species. Furthermore, a temporary immersion system improved plant regeneration. However, production can be further improved by understanding the peach palm's growth dynamic and modifications of culture media. The aims of this study were to evaluate the growth of plantlets cultured in different culture media in a temporary immersion system and to correlate the results with nutrient uptake during the growth period. Somatic embryo-derived young plantlets approximately 1 cm in length were cultivated for 12 weeks in a twin flask system containing MS, Y3 or N6 salts, Morel and Wetmore vitamins and 3% sucrose, with a monthly medium refreshment. Growth was measured and mineral analysis of the plantlets was carried out after 12 weeks of culture. The Y3 and MS salts were the most appropriate for the plant growth. Number of roots was 52.52% higher and the root size was 40.42% between the N6 and MS medium and the root number in Y3 medium was 37.74% greater than in MS medium, which is important for post acclimatization survival. K and Na are important elements for peach palm. N is not required at such a high concentration as in Murashige and Skoog formulation. The Chu (N6) medium did not generate high quality plantlets, possibly due to the absence of some micronutrients, like Mo, Cu and Co. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Balanced levels of macronutrients and sucrose may ensure the success of micropropagation of the endangered ones. This study aimed to evaluate the effect of levels of salts in the culture medium on in vitro culture of Lomatozona artemisiifolia, as well as to determine the influence of light emitting diode (LED) on the shoot proliferation and rooting of the species. Nodal segments were used to evaluate the different macronutrient concentrations of MS medium (25, 50 and 100%), as well as sucrose concentrations (0.0 mM; 0.34 mM; 0.68 mM and 1.03 mM). Five light conditions were evaluated at shoots proliferation and rooting [100% blue (455 nm); 100% red (630 nm); 30% blue + 70% red; 30% red + 70% blue or fluorescent white]. Low levels of macronutrients in MS (50% and 25%) and sucrose (0.00 mM and 0.34 mM) resulted in plants with higher height, number of shoots and higher production of photosynthetic pigments. The 100% red light promoted rooting of 100% of the plants, and in 100% red or 70% red + 30% blue, higher plants were observed. These results demonstrate that under in vitro conditions, L. artemisiifolia has low nutritional needs, typical of plants that live in rupestrian fields. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

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Curcuma longa L. is a plant widely used for its pharmacological and medicinal properties, however, does not have a conclusive micropropagation protocol. The objective was to evaluate how growth regulators, sucrose and potassium influence the growth and biochemical activity of Curcuma longa seedlings grown in vitro. Shoots were inoculated in culture medium supplemented with 6-benzylaminpurine - BAP (8.88 and 17.76 µM), Kinetin - KIN (0.92 and 2.16 µM) and naphthalene acetic acid - NAA (2.16 and 7.20 µM), potassium iodide KI (25 and 50 µM) and sucrose (30 and 60 gL-1). Growth regulators at the lowest concentration and 30 gL-1 sucrose promoted increases in growth of C. longa. Antioxidant activity was high in all treatments. The activity of the enzymes catalase and ascorbato peroxidase were increased in the two treatments that contained the highest concentrations of growth regulators. It is concluded that the addition of growth regulators such as cytokinins and auxins are fundamental to increase the number of leaves and growth of shoots in C. longa. Since the best concentrations are in the range of 4.44 to 8.88 µM of (BAP) and 2.16 of NAA. The addition of supplemental potassium in the culture medium is not necessary, and the beneficial effects of doubling the usual sucrose concentration are nullified if other constituents of the medium are altered. The antioxidant activity and enzymes had their activity altered, especially in treatments that did not contain growth regulators. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

O cultivo in vitro de kiwizeiro em sistema dupla-fase aparece como alternativa para melhoria da taxa de multiplicação da espécie. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP) na multiplicação in vitro de kiwizeiro em sistema dupla-fase. O experimento foi realizado no Laboratório de Micropropagação Vegetal pertencente à Universidade do Estado de Santa Catarina – Centro de Ciências Agroveterinárias (UDESC/CAV), em Lages. Os tratamentos consistiram na adição de três concentrações de BAP (0,0; 1,0 e 2,0 mg L-1) ao meio de cultura MS em sistema dupla-fase. As variáveis analisadas aos 30 dias de cultivo dos explantes in vitro foram: número de brotações, comprimento médio de brotações, número de folhas e comprimento médio de folhas. A análise de variância foi significativa para a regressão linear e foi possível observar um crescimento nas médias de todas as variáveis analisadas, à medida que se aumentaram as concentrações de BAP no meio de cultivo. Dessa forma, conclui-se que para a multiplicação in vitro de kiwizeiro em sistema dupla-fase a concentração de BAP a ser utilizada é 2 mg L-1.

Cassava (Manihot esculenta Crantz) is an important crop in Brazil and Pará is the major producer of roots. High temperature and humidity of tropical regions favor the development of various diseases, among them the cassava root rot. The objective of this study was to evaluate the effect of luminosity and culture medium on the mycelial growth and sporulation of Phytopythium sp. associated with different methods of inoculation on cassava roots. In vitro tests for pathogen growth were established in a 2 x 6 factorial design (luminosity x culture medium) with five replicates and the means were compared by t test (P=0.05). The culture medium containing sweet cassava root produced greater mycelial development and higher pathogen sporulation and it was the most suitable medium for pathogen culture. The culture under absence of light generated better mycelial growth than culture under 12 hour of light. Regarding the type of inoculation, the response was better when deeper injuries were induced. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

The in vitro cultivation of kiwifruit in double-phase system appears as an alternative for improving the rate of multiplication of the species. Thus, the objective of this study was to evaluate the effect of different concentrations of BAP in the in vitro multiplication of kiwifruit in doublephase system. The experiment was carried out in the Laboratory of Plant Micropropagation belonging to the University of the state of Santa Catarina - Centro de Ciências Agroveterinárias (UDESC/CAV), in Lages. The treatments consisted of adding three concentrations of BAP (0,0; 1,0 and 2,0 mg L-1) to the MS culture medium in a double-phase system. The variables analyzed after 30 days of cultivation of the in vitro explants were: number of shoots, average length of shoots, number of leaves and average length of leaves. The analysis of variance was significant for the linear regression and it was possible to observe a growth in the means of all variables analyzed as the BAP concentrations in the culture medium were increased. Thus, for in vitro multiplication of kiwifruit in a double-phase system the concentration of BAP to be used is 2 mg L-1. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

An adequate concentration of growth regulators as well as the replacement of agar by an alternative medium may be promising from practical and financial points of view to produce orchid plants by micropropagation. The objective of this work was to evaluate different concentrations of growth regulator and alternative substrates for agar replacement in culture medium for in vitro multiplication and rooting of Oncidium baueri. In the explant multiplication phase, two experimental factors were evaluated- various concentrations of 6-benzylaminopurine (BAP) (0.0, 1.0, 2.0, and 3.0 mg L-1) and substrates (agar, vermiculite, and coconut fiber) added to MS medium. In the rooting phase, different concentrations of indole butyric acid (IBA) (0.0, 0.5, 1.0, and 1.5 mg L-1) were added to culture medium containing the same substrate. Six months after the experiments were initiated, the survival percentage, number of leaves, shoots, and roots and length of the aerial part and the major root were evaluated. The results suggested that addition of 1.0 mg L-1 BAP is necessary for the O. baueri in vitro multiplication phase, but IBA is not necessary in the rooting phase. For the substrate, vermiculite is not indicated as an agar replacement. In contrast, coconut fiber can be used in both multiplication and rooting phases of Oncidium baueri in vitro culture.

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The aim of this work was to determine the ideal stage of pollen collection and the best concentrations of sucrose and boric acid in the culture medium for the in vitro germination of inga fruit tree pollen. For this, the work was carried out in two stages, one using concentrations of sucrose in the culture medium (0, 5, 10, 20 and 30%) - experiment 1. Another one using the best sucrose concentration, with concentrations (0, 100, 200 and 300 mg L-1) - experiment 2. In the two experiments, two flowering phases were use: pre-anthesis and post-anthesis. For both experiments, the culture medium contained 1% agar to solidify the medium and all treatments remained in BOD for 24 h at a temperature controlled at 25°C. For the experiment 1 with sucrose, DIC was use in factorial 2 x 5, with 4 replicates, and for the experiment 2 with boric acid, DIC was use in factorial 2 x 4, with 4 replicates. Data were submit to analysis of variance and regression. For pollen grains obtained from pre-anthesis, the maximum technical efficiency point (PMET) was obtain with 11% sucrose added to the culture medium, thus achieving 33% germination. As for pollen grains obtained from flowers in post-anthesis, PMET was reach with 8% of sucrose in the culture medium, obtaining 32% of germination. Within the concentrations evaluated in the experiment, boric acid did not promote increase of in vitro germination of pollen from inga fruit tree. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Abstract Aim: The influence of three different culture media on the growth and biochemical composition of Ankistrodemsus gracilis microalgae is evaluated. Methods Microalgae were placed in a bath culture during 28 days, with inorganic fertilizer (NPK) and macrophyte Eichhornia crassipes as culture medium to compare the growth of microalgae and commercial medium CHU12. Protein and lipid contents, water conditions of the culture medium and physiological parameters were assessed weekly. Results Growth rate, macro-minerals, micro-nutrients and nutritional values were similar to commercial culture medium in the media with inorganic fertilizer and macrophyte. The biological indexes of microalgae were not influenced by weekly differences during the study period. Although lipid contents, nitrogen and growth rate of A. gracilis were higher in inorganic fertilizer and macrophyte media; Mn, B, Cu, S, dry matter, ash content, cell volume, TOC and total length were similar among the media used. The same high cell density 25 x 105 cells.mL-1 was obtained in NPK and in CHU12 medium respectively after 11 and 14 days cultivation. Conclusion Culture media inorganic fertilizer (NPK) and macrophyte (Eichhornia crassipes), were adequate and may replace the commercial medium CHU12 for the cultivation of microalgae A. gracilis, resulting in high nutritional composition, high biomass, high nutrients and low-cost.

O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de sacarose na desinfestação e germinação in vitro de aquênios de Lychnophora pohlii. O experimento foi conduzido no laboratório de Melhoramento florestal da UFVJM. Adotou-se o delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições de cinco aquênios, sendo estudado o efeito de quatro concentrações de sacarose (0, 10, 20 e 30 g L-1). A avaliação do número de aquênios desinfestados e germinados foi feita três vezes por semana, por período de 30 dias. O tratamento constituído por aquênios cultivados em meio de cultura sem adição de sacarose apresentaram maior porcentagem de desinfestação (80%). A maior porcentagem de germinação (45%) foi observada no tratamento com ausência de sacarose. O meio de cultura sem adição de sacarose mostrou-se mais eficiente no controle da desinfestação e proporcionou maior porcentagem de germinação, mas sem diferir significativamente dos demais tratamentos.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o estabelecimento e crescimento in vitro de plantas de grápia (Apuleia leiocarpa (Vogel) J. F. Macbr.) em diferentes condições de cultivo. Sementes de grápia tratadas com ácido sulfúrico (H2SO4) por 20min foram imersas em etanol a 70% por 30s e em hipoclorito de sódio (0; 2,5 ou 5,0% de cloro ativo) por 5, 10 ou 15min. Aos 30 dias de cultivo, as sementes foram avaliadas quanto às porcentagens de desinfestação e germinação. As plantas assépticas foram transferidas para os meios de cultura WPM, MS e ½MS e avaliadas quanto ao comprimento (cm) da parte aérea e total das raízes e ao número de segmentos nodais e folhas aos 15 dias. Sementes de grápia também foram semeadas em meio de cultura WPM, suplementado com 4, 5 ou 6g L-1 de agar combinado com 10, 20 ou 30g L-1 de sacarose, e mantidos sob duas condições de luminosidade: luz durante todo o período de estabelecimento e escuro durante sete dias após a semeadura. Foram avaliados a porcentagem de germinação das sementes, o comprimento (cm) da parte aérea e total das raízes e o número de segmentos nodais e folhas aos 15 dias. Concluiu-se que os tratamentos com ácido sulfúrico e etanol foram suficientes para o estabelecimento in vitro de plantas assépticas de grápia. Plantas assépticas podem ser cultivadas em meio de cultura WPM ou MS, suplementados com 10g L-1 de sacarose e 4g L-1 de agar.

The aim of this study was to evaluate the storage potential of the pollen grains of Brazil Green Dwarf (BGD), Brazilian Tall (BRA) and Cameroon Red Dwarf (CRD) coconut accessions under different storage conditions. Representative plants of BGD, BRA and CRD accessions were selected from the Coconut Active Germplasm Bank of Embrapa Coastal Tablelands. The pollen grains were collected, placed in cryotubes and maintained under the following storage conditions: T1, refrigerator (-4°C); T2, freezer (-20°C); T3, ultra-freezer (- 80°C) and T4, liquid nitrogen (-196°C). The pollen grain viability was determined by staining with 1% acetic carmine and in vitro germination in a Lora culture medium at 30 and 60 days after the storage. Storage under refrigerator (-4°C), freezer (-80°C) and liquid nitrogen (-196°C) conditions promoted a better pollen grain viability of the Brazilian Tall coconut accession. Storage under freezer (-20°C) and liquid nitrogen (-196°C) conditions promoted a better pollen grain viability of the Cameroon Red Dwarf coconut accession. Storage under freezer (-20°C and-80°C) and liquid nitrogen (-196°C) conditions promoted a better pollen grain viability of the Brazil Green Dwarf coconut accession. The pollen grain viability of the Brazilian Tall coconut accession is stable after 30 and 60 days of storage.

Background: paratuberculosis is a slow-developing infectious disease, characterized by chronic granulomatous enterocolitis. This disease has a variable incubation period from 6 months to over 15 years, and is caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP). Its detection by direct and indirect diagnostic techniques has been of special interest. Objective: to report the diagnosis and detection of MAP using several diagnostic tests in a herd of the Northern region of Antioquia, Colombia. Methods: serum samples from the study herd were analyzed, using a commercial ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) kit. Fecal samples were cultured by duplicate using Herrold's egg yolk medium (HEYM), and analyzed by an endpoint IS900-specific nested PCR protocol, and a commercial F57-real-time PCR kit. Results: eight out of 27 serum samples in the study herd resulted ELISA-positive. None of fecal samples resulted positive to HEYM culture by duplicate and none were found to be positive by F57-real-time PCR. Seven of the 27 fecal samples were found to be positive by end-point IS900-specific nested PCR. Agreement was found between ELISA and end-point IS900-specific nested PCR in one of the animals. Conclusion: the present study gives information about the agreement between direct and indirect MAP-detection techniques, using different matrixes from animals under the same husbandry conditions. [ABSTRACT FROM AUTHOR]

Copyright of Revista Ciência Agronômica is the property of Revista Ciencia Agronomica and its content may not be copied or emailed to multiple sites or posted to a listserv without the copyright holder's express written permission. However, users may print, download, or email articles for individual use. This abstract may be abridged. No warranty is given about the accuracy of the copy. Users should refer to the original published version of the material for the full abstract. (Copyright applies to all Abstracts.)

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da rapadura sobre o desenvolvimento, in vitro, de bananeira, cv. Maçã, visando à redução de custos de produção, por cultura de tecidos. Explantes de bananeira foram inoculados em meios nutritivos, formulados à base de rapadura, com quatro concentrações distintas (10, 25, 50 e 75% de solução de rapadura), e os dados obtidos foram comparados com aqueles das plantas cultivadas em meio MS 100% (controle), perfazendo um total de cinco tratamentos. Ao final de 60 dias, foram avaliados os números médios de folhas, brotos e raízes, bem como os números médios de explantes mortos e oxidados. Não houve diferença significativa entre os tratamentos para a maior parte dos parâmetros avaliados, exceto para o número médio de explantes oxidados, que foi maior no tratamento com 75% de rapadura. Concluiu-se que meios nutritivos com até 50% de rapadura em sua composição, sem reguladores vegetais, podem ser utilizados em substituição ao meio MS para o cultivo in vitro de bananeira.

O bacurizeiro é uma das espécies fruteiras nativas de maior importância socioeconômica das regiões Norte e Meio-Norte do Brasil. No entanto, ainda há carência de conhecimentos científicos sobre a espécie, especialmente sobre sua biologia floral, mecanismos reprodutivos e viabilidade do pólen. O conhecimento sobre a viabilidade do pólen é fundamental para o melhoramento genético, especialmente quando se tem em mente a realização de hibridizações controladas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da sacarose e de acessos na viabilidade do pólen de bacurizeiro por meio da germinação in vitro. Avaliaram-se cinco acessos (BGB 6, BGB 11, BGB 48, BGB 32 e BGB 16) de bacurizeiro combinados com um tratamento-controle, sem sacarose, e quatro concentrações de sacarose (5; 7,5; 10 e 20%), em delineamento inteiramente ao acaso, em arranjo fatorial 5 x 5, com oito repetições. Na maioria dos acessos, a germinação in vitro do pólen atingiu um máximo (71,1 e 63,0%) entre as concentrações de sacarose de 9,4 e 9,7% e, a partir daí, caiu de forma drástica até atingir um percentual inferior a 10% de germinação na concentração de 20% de sacarose. Foram encontrados bons percentuais de germinação (entre 63,0 e 77,1%) para todos os acessos, com exceção do acesso BGB 16, que não alcançou 50%.

A imbuia apresenta sementes recalcitrantes, com forte dormência tegumentar, irregularidade e baixa germinação, dificultando sua propagação natural. O objetivo deste trabalho foi avaliar a germinação in vitro de eixos embrionários de imbuia, testando o efeito de diferentes concentrações de sacarose, de carvão ativado e de formulações salinas para acelerar a produção de mudas. Eixos embrionários zigóticos foram inoculados em meio de cultura MS/2 contendo diferentes concentrações de sacarose (15, 30, 60 ou 90 g L-1), de carvão ativado (0, 1, 2 ou 3 g L-1) e diferentes formulações salinas (MS, WPM, MS/2 ou WPM/2). Os resultados indicaram que a adição de 15 g L-1 de sacarose foi insuficiente para promover a germinação dos eixos embrionários e as demais concentrações promoveram entre 45,5 e 59,4% de germinação. Com relação às formulações salinas, os melhores resultados foram obtidos com os meios de cultura MS e MS/2 obtendo-se 67,7 e 74,2% de germinação, respectivamente. A adição de carvão ativado favoreceu a germinação in vitro dos eixos embrionários, enquanto que na ausência de carvão ativado não ocorreu germinação e houve elevada porcentagem de oxidação. A germinação in vitro de imbuia é viável e pode ser obtida com eixos embrionários zigóticos maduros com a formulação salina MS/2, suplementada com 30 g L-1 de sacarose e 1g L-1 de carvão ativado.

The experiment was carried out to determine the appropriate dose of coconut water as supplement for in vitro cultivation of zygotic embryos from 19 olive genotypes. The isolated embryos of the olive seeds were immersed on culture medium containing 0 (control), 25, 50, and 100mL L-1 of fresh and sterile coconut water and kept for 45 days under controlled environment. The percentage of germination, shoot length, number of roots, number of leaves and number of internodes were measured for all 19 olive genotypes. The ANOVA of the parameters evaluated showed significant genotypes x doses of coconut water interaction for shoot length, number of leaves and number of internodes and the dose of 100mL L-1 produced the best results overall as indicated by the means of measured parameters. However, the study showed the importance of determining the appropriate dose of coconut water for each genotype under consideration as shown by significant genotype x dose of coconut water interaction effect.O experimento foi realizado para determinar a dose adequada de água de coco como suplemento para cultivo in vitro de embriões zigóticos de 19 genótipos de oliveira. Os embriões isolados das sementes de oliveira foram imersos em meio de cultura contendo 0 (controle), 25, 50, e 100mL L-1 de água de coco fresca e estéril, em condição de ambiente controlado durante 45 dias. A porcentagem de germinação, comprimento da parte aérea, número de raízes, número de folhas e número de internódios foram medidos para todos os 19 genótipos de oliveira. A ANOVA dos parâmetros avaliados apresentou interação significativa entre genótipos e dose de água de coco para o comprimento da parte aérea, número de folhas e número de internódios, e a dose de 100mL L-1, de forma geral, produziu os melhores resultados, como indicado pelas médias dos parâmetros analisados. No entanto, como mostra a interação significativa observada entre genótipos e tratamentos, é importante determinar a dose adequada de água de coco para cada genótipo.

Hypericum cordatum, planta com possível atividade medicinal foi analisada no presente estudo quanto a sua propagação in vitro e seus principais compostos secundários em comparação com Hypericum perforatum, espécie medicinal utilizada como antidepressivo. Diante das dificuldades que ocorrem na coleta e sua multiplicação por sementes ou via estacas caulinares, iniciou-se a propagação in vitro tendo como resultados: que a indução e o crescimento de brotações foram estimulados pelo regulador 6-benziladenina (2,0 mg L-1), que houve indução de raízes por ácido indol-butírico (0,5 mg L-1), e que as baixas concentrações de auxinas, ácido 2,4-diclorofenoxiacético, ou ácido naftalenoacético (0,01 a 0,4 mg L-1) induziram a formação de calos sendo uma alternativa viável para a multiplicação desta espécie in vitro. Constatou-se com base nas análises bioquímicas e cromatográficas realizadas nesta fase de desenvolvimento das plantas mantidas em culturas in vitro, que as mesmas não contêm hipericina. No entanto, pode-se atribuir o potencial medicinal de H. cordatum às outras substâncias que também possuem importantes atividades biológicas, tais como a xantona e o ácido clorogênico sintetizados nas glândulas foliares de H. cordatum.Hypericum cordatum, a plant with possible medicinal activity, was analyzed in this study for its in vitro propagation and main secondary compounds, compared to Hypericum perforatum, a medicinal species used as antidepressant. Considering the difficulties that occur in its collection and multiplication through seeds or stem cuttings, in vitro propagation was started and showed the following results: the induction and the growth of sprouts were stimulated by the plant regulator 6-benzyladenine (2.0 mg L-1), there was root induction by indolebutyric acid (0.5 mg L-1) and the low concentrations of auxins, 2,4-dichlorophenoxyacetic acid or naphthaleneacetic acid (0.01 to 0.4 mg L-1) induced callus formation, constituting a viable alternative for the in vitro multiplication of this species. Biochemical and chromatographic analyses carried out at this developmental stage of plants kept in in vitro cultures indicated that they do not contain hypericin. However, the medicinal role of H. cordatum can be attributed to other substances that also have important biological activities, such as xanthone and chlorogenic acid, both synthesized in the leaf glands of H. cordatum.

As orquídeas no ambiente natural sofrem exploração devido a sua importância ornamental, levando algumas espécies à extinção. O cultivo in vitro é uma forma alternativa para a conservação ex-situ. Procurou-se determinar um meio de cultura eficiente para a germinação in vitro de sementes e o crescimento inicial de plântulas de Cattleya forbesii, bem como para o crescimento de plântulas in vitro de Cattleya harrisoniana. No primeiro caso, sementes foram inoculadas em meio de cultura básico de Murashige & Skoog (MS) = T1 e MS básico acrescido de 2,5 g L-1 de carvão ativado (CA) = T2. No segundo, plântulas com 1 ± 0,2 cm de altura foram submetidas aos tratamentos T1, T2, MS com a metade da concentração original de macro-micronutrientes (T3) e MS com a metade da concentração original de macro-micronutrientes suplementado com 1,25 g L-1 de CA (T4). Verificou-se aos 30 dias em C. forbesii uma porcentagem de germinação de 45% em T1 e 90% em T2. A adição de CA ao meio de cultura trouxe aumento na altura de plântulas de C. forbesii de acordo com análises realizadas aos 180 dias de cultivo. Em relação ao crescimento de C. harrisoniana, aos 240 dias observou-se que todos os parâmetros médios avaliados (altura da parte aérea, massa de matéria fresca total, número de raízes e folhas, comprimento da maior raiz e diâmetro do pseudocaule) foram significativamente maiores em T2. Dessa forma, sugere-se o uso do meio MS acrescido de 2,5 g L-1 de CA (T2), uma vez que é significativamente favorável tanto para a germinação de sementes quanto para o crescimento de ambas as espécies.

The goal of this project was to evaluate the embryogenic callus induction of two Coffea arabica clones selected for their characteristics of rust resistance and high yield, as well as to compare their multiplication in two different media under both solid and liquid cultivation conditions. The protocol described by Teixeira et al. (2004) was used for callus induction in a randomized block design in which each clone was considered a treatment. Evaluation of callus induction was carried out 180 days after initiation by counting embryogenic calli. For callus multiplication, the treatments consisted of two different media [stage two of Albarran et al. (2004) and the multiplication medium described by Teixeira et al. (2004)] and two cultivation systems (solid and liquid). Evaluations were conducted by weighing calli 21, 42 and 63 days after initiation of the experiment. The two studied clones exhibited the same potential for embryogenic callus induction. The potential for embryogenic callus multiplication was influenced by the plant’s genotype. When compared with the liquid system, the solid system displayed the highest level of embryogenic callus multiplication for the clones studied.Este estudo foi realizado com o objetivo de avaliar a indução de calos embriogênicos de dois clones de Coffea arabica, selecionados para resistência à ferrugem e de alta produtividade e comparar a multiplicação desses calos em dois meios de cultura nos sistemas de cultivo gelatinoso e líquido. Para a indução de calos foi utilizado o protocolo descrito por Teixeira et al. (2004), em delineamento experimental inteiramente casualizado, sendo cada clone considerado um tratamento. A avaliação deste experimento foi realizada 180 dias após a instalação, por meio da contagem de calos embriogênicos formados. Para a multiplicação de calos, os tratamentos constituíram-se de dois meios de cultura (meio do estágio dois de Albarran et al. (2004) e meio de multiplicação de Teixeira et al. (2004)) e dois sistemas de cultivo (gelatinoso e líquido). As avaliações foram realizadas aos 21, 42 e 63 dias após a instalação do experimento, por meio da pesagem dos calos. Verificou-se que os clones avaliados apresentam o mesmo potencial de formação de calos embriogênicos. O potencial de multiplicação de calos embriogênicos é influenciado pelo genótipo. O sistema gelatinoso apresentou maior eficiência na multiplicação de calos embriogênicos dos clones estudados quando comparado ao sistema líquido.

This study was designed to micropropagate E. benthamii x E. dunnii, by testing chlorine concentrations for explant asepsis, the optimal concentrations of benzylaminopurine (BAP) and naphthaleneacetic acid (NAA) for bud proliferation, and the ratio between BAP and gibberellic acid (GA3) in two nutrient media for shoot elongation. Nodal segments from H12, H19 and H20 clones were disinfected with 0.5, 1.0, 1.5 and 2.0% (v v-1) of chlorine. Explants were grown on ½MS medium supplemented with BAP (0, 0.25, 0.50, 0.75 and 1.00 mg L-1) and NAA (0, 0.025, 0.050, 0.075 and 0.100 mg L-1) for bud production. They were elongated on MS and ½MS media supplemented with BAP (0, 0.05 and 0.10 mg L-1) and GA3 (0, 0.1, 0.2 and0.3 mg L-1). The 0.50 mg L-1 BAP and 0.050 mg L-1 NAA combination was optimal for bud proliferation for H12 and H20. GA3 concentrations of 0.10 and 0.20 mg L-1 combined with 0.10 mg L-1 BAP on ½MS resulted in the longest shoots, for H12 and H20, respectively. Regardless of clone, the rooting rate was low, with an average of 12.0% and 14.4% of plants having roots for in vitro and ex vitro conditions, respectively.Objetivou-se micropropagar E. benthamii x E. dunnii, testando concentrações de cloro para a assepsia de explantes, a concentração ótima de benzilaminopurina (BAP) e ácido naftalenoacético (ANA) para a proliferação de gemas e a relação entre BAP e ácido giberélico (GA3) em dois meios de cultura para o alongamento de brotações. Segmentos nodais dos genótipos H12, H19 e H20 foram desinfetados com 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0% (v v-1) de cloro. Os explantes foram multiplicados em meio ½MS suplementado com BAP (0; 0,25; 0,50; 0,75 e 1,00 mg L-1) e ANA (0; 0,025; 0,050; 0,075 e 0,100 mg L-1) para produção de gemas, e alongados nos meios MS e ½MS suplementados com BAP (0; 0,05 e 0,10 mg L-1) e GA3 (0; 0,1; 0,2 e 0,3 mg L-1). A combinação de 0,50 mg L-1 de BAP e 0,050 mg L-1 de ANA proporcionou melhor proliferação de gemas para os genótipos H12 e H20. As concentrações de 0,10 e 0,20 mg L-1 de GA3 combinadas com 0,10 mg L-1 de BAP em ½MS, promoveram os melhores resultados no alongamento, para os clones H12 e H20, respectivamente. O enraizamento foi baixo, com média de 12,0% para condições in vitro e 14,4% ex vitro.

O objetivo deste trabalho foi determinar a fonte de silicio que proporcione melhor crescimento em plantulas de Cattleya loddigesii. Plantulas oriundas de sementes germinadas in vitro com aproximadamente 1,0 cm de comprimento foram inoculadas em tubos de ensaio contendo 15 mL de meio de cultura Knudson C modificado, acrescido de silicato de sodio (0, 5, 10 e 20 mg L-1) e silicato de potassio (0, 5, 10 e 20 mL L-1), em todas as combinacoes possiveis. O meio de cultura teve seu pH ajustado para 5,8 } 0,1 e solidificado com 5 g L-1 de agar antes do processo de autoclavagem a 121oC e 1 atm por 20 min. O cultivo foi mantido em sala de crescimento com irradiancia de 35 ƒÊmol m-2 s-1, temperatura de 25 } 1oC e fotoperiodo de 16h. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema fatorial, com cinco repeticoes e 20 plantulas por tratamento. Plantulas de C. loddigesii apresentam maior crescimento (numero de raizes, comprimento da parte aerea e de raizes) em meio de cultura Knudson C modificado adicionado de 5 mL L-1 de silicato de potassio e de 20 mg L-1 de silicato de sodio. Maiornumero de brotos e verificado com a adicao de 5 mL L-1 de silicato de potassio em meio Knudson C modificado, na ausencia de silicato de sodio.The purpose of this study was to determine the silicon source that provides better growth of Cattleya loddigesii orchid plants. Seedlings from seeds germinated in vitro with approximately 1.0 cm in length were inoculated in tubes containing 15 mL of modified Knudson C culture medium, added with sodium silicate (0, 5, 10 and 20 mg L-1) and potassium silicate (0, 5, 10 and 20 mL L-1), in all possible combinations. The culture medium had its pH adjusted to 5.8 } 0.1 and solidified with 5 g L-1 of agar before the sterilization process at 121‹C and 1 atm for 20 minutes. The cultures were maintained in a growth room with irradiance around 35 ƒÊmol m-2 s-1, temperature of 25}1oC and photoperiod of 16 hours. The experimental design was completely randomized in a factorial scheme with 5 replications and 20 seedlings per treatment. Seedlings of C. loddigesii presented better growth (number of roots, length of the aerial part and of roots) in the modified Knudson C culture medium added with 5 mL L-1 ofpotassium silicate and 20 mg L-1 of sodium silicate. A larger number of shoots is observed with the addition of 5 mL L-1 potassium silicate in culture medium, in the absence of sodium silicate.

O bacurizeiro (Platonia insignis Mart.) é uma frutífera nativa da Amazônia, que apresenta alogamia acentuada e autoincompatibilidade esporofítica. A viabilidade in vitro tem sido utilizada para representar a capacidade potencial do pólen em completar o processo de fertilização O objetivo do presente trabalho foi estudar a viabilidade de polens de bacurizeiro por meio da germinação in vitro , por ser esta uma técnica em que o comportamento germinativo é semelhante in vivo . Os ensaios foram conduzidos em laboratório, em um delineamento inteiramente casualizado, analisados em esquema fatorial 2 x 3 x 4, em que: 2=formas de propagação (pé-franco e enxertada); 3=estágios da antese (pré-antese, antese e pós-antese), e 4=concentrações de sacarose (0; 7,5; 10 e 20%), com 10 repetições. Houve diferença significativa na germinação do pólen, sendo que, via polinização manual, o pólen deve ser coletado na antese, enquanto o melhor meio para a germinação in vitro é com 7,5 g de sacarose.The "bacurizeiro" (Platonia insignis Mart.) is an Amazon fruitful native tree that has marked allogamy and self-sporophytic incompatibility. The aim of this work was to study the pollen germination of "bacury" to admit it is a similar technique to the germination behavior in vivo . The viability in vitro has been used to represent the potential ability of pollen to complete the fertilization process. The tests were conducted under laboratory conditions in a completely randomized design, tested in a 2 x 3 x 4 factorial, where: 2= plant forms (grafted and free-standing 3= pollen stage (pre-anthesis , anthesis and post anthesis) and4 sucrose concentrations (0, 7.5, 10 and 20%), with 10 repetitions. There is difference in pollen germination, and for hand pollination, pollen should be collected at anthesis, while the best medium for the germination in vitro is with 7.5 g of sucrose.

Objetivou-se determinar modificações ao meio de cultura Knudson C, acrescendo-o de iodeto de potássio e cloreto de cobalto, para que proporcione maior crescimento em plântulas de Cattleya loddigesii. Plântulas de orquídea, oriundas de sementes germinadas in vitro, com, aproximadamente, 1,0 cm de comprimento, foram inoculadas em tubos de ensaio contendo 15 mL de meio de cultura Knudson C modificado, acrescido de iodeto de potássio (0; 0,45; 0,9 e 1,35 mg.L-1) e cloreto de cobalto (0; 0,015; 0,030 e 0,045 mg.L-1), em todas as combinações possíveis. O meio de cultura teve seu pH ajustado para 5,8 ± 0,1 e foi solidificado com 5 g.L-1 de ágar antes da autoclavagem a 121ºC e 1 atm por 20 minutos. Após a inoculação os tratamentos foram mantidos em sala de crescimento com irradiância de 35 µmol.m-2.s-1, temperatura de 25 ± 1ºC e fotoperíodo de 16 horas. Ao final de 120 dias, foram avaliados número de raízes, comprimento médio de raízes e da parte aérea e massa de matéria fresca de plântulas. O cloreto de cobalto, em sua maior concentração (0,045 mg L-1), adicionado ao meio Knudson C modificado, sem a suplementação de iodeto de potássio, proporciona melhores resultados quanto ao crescimento in vitro das plântulas de Cattleya loddigesii.

O presente estudo teve como objetivos avaliar a resposta de clones híbridos de Eucalyptus globulus nos meios de cultura MS e JADS durante a fase de multiplicação in vitro. Os explantes foram provenientes da fase de estabelecimento in vitro de 21 clones de Eucalyptus urophylla x E. globulus, sendo 11 clones com três introduções in vitro, e de seis clones de Eucalyptus grandis x E. globulus, sendo dois clones com três introduções. Os clones foram subcultivados mensalmente nos meios de cultura MS e JADS, com 0,5 mg L-1 de BAP (6-benzilaminopurina) e 0,01 mg L-1 de ANA (ácido naftalenoacético). Concluiu-se que: houve tendência de maiores taxas de multiplicação no meio MS; a maioria dos clones se estabeleceu na fase de multiplicação in vitro, enquanto alguns clones se mostraram recalcitrantes nesta fase da micropropagação; a taxa de multiplicação apresentou tendência de aumento nos primeiros subcultivos e posterior queda para a maioria dos clones.

Pest attack, disease and soil fatigue have always been a great problem in fig (Ficus carica L.) nursery tree production, especially when traditional methods that use soil culture are applied. Therefore, as an alternative method, substrate culture could be a sustainable and favorable propagation method for growing healthy nursery fig trees of high quality. No information is available on substrate use and its effect on nursery fig tree production. The present study was aimed to define a favorable substrate to cultivate nursery fig trees in substrate culture, and to examine the effects of substrates on morphological and biochemical characteristics of the fig trees by growing plants in a high-tunnel. Fig cv. "Sarilop" (Calimyrna) cuttings were used in this trial as plant material. Three growth media based on perlite (100%), peat (50%) + perlite (50%), and fine sawdust (100%) were tested using soil as a control. Plants were grown in trough culture from the day of planting cuttings up to the uproot point of fig nursery trees, during eight months, and they were not transplanted into another medium during the growing period. To observe the effect of substrates on the nursery fig trees, some morphological and biochemical characteristics were determined. The use of peat + perlite and perlite led to increased plant growth and quality of fig nursery trees grown in high-tunnel.O ataque de pragas e de doenças e o esgotamento do solo sempre foram grandes problemas na produçào de mudas de figo (Ficus carica L) em estufa, especialmente quando são empregados métodos tradicionais que usam solo como substrato. Por isso o uso de substratos sem solo poderia ser alternativa favorável para obtenção de mudas saudáveis de alta qualidade. Não há informação sobre o uso de substratos e seu efeito sobre a produção de mudas em estufa. No presente estudo procurou-se definir um substrato adequado para obtenção de mudas de figo e examinar os efeitos de substratos sobre características morfológicas e bioquímicas de mudas desenvolvidas em estufa tipo túnel alto. Ramas dos cultivares de figo cv. "Sarilop" (Calimyrna) foram utilizadas em três meios de cultura: perlite (100%), turfa (50%) + perlite (50%), e pó de serra fino (100%) tendo o solo como testemunha. O experimento foi desenvolvido em calhas e se estendeu desde o plantio das ramas até o ponto "uproot", por oito meses, não tendo as mudas sido transplantadas para outro meio durante a fase experimental. Para observar o efeito dos substratos sobre as plantas, algumas características morfológicas e bioquímicas foram avaliadas. O uso de turfa + perlite e de perlite como substrato em estufa tipo túnel alto aumentou o crescimento das plantas e melhorou sua qualidade.

The objective of this study was to evaluate the in vitro germination of beetroot seeds, cv. Early Wonder Tall Top, treated with gibberellic acid and sucrose at different concentrations. A randomized complete block design in a 2 x 5 factorial arrangement with five replications was used. The beetroot seeds ware pre-soaked in gibberellic acid (GA3) and destilated water during six hours, maintained of five concentration of culture medium (0, 15, 30, 45, 60 g L-1). Seeds treated with GA3 and maintained in medium with sucrose in the concentrations of 15 g L-1 presented the highest germination, while seedlings with the highest vigor were obtained with seeds maintained in the medium at 15 and 30 g L-1 of saccharose.O objetivo deste trabalho foi avaliar a germinação in vitro de sementes de beterraba, cv. Early Wonder Tall Top, tratadas com ácido giberélico em diferentes concentrações de sacarose no meio de cultura. Utilizou-se o delineamento em blocos casualizados, em um esquema fatorial 2 x 5, com cinco repetições. Os tratamentos foram sementes pré-embebidas em ácido giberélico (GA3) e sementes pré-embebidas em água destilada por seis horas, mantidas em cinco concentrações de sacarose no meio de cultura (0; 15; 30; 45; e 60 g L-1). Sementes tratadas com GA3, mantidas no meio de cultura com sacarose na concentração de 15 g L-1, apresentam maior porcentagem de germinação, enquanto plântulas mais vigorosas foram obtidas a partir de sementes mantidas nos meios suplementados com 15 e 30 g L-1 de sacarose.

O objetivo do presente trabalho foi otimizar um protocolo de regeneração de explantes cotiledonares de melão, cultivar 'Gaúcho', avaliando a composição de meios de germinação e o tempo de permanência dos explantes nesses meios. Para isso, as sementes foram germinadas em meio MS semi-sólido contendo BAP ou ANA e sem esses reguladores de crescimento. As sementes permaneceram nesses meios por um, dois, três e quatro dias, sendo então seus cotilédones inoculados em meio MS contendo diferentes concentrações de BAP (0,5; 0,9; 1,5 e 2,0mg L-1). As maiores taxas de regeneração ocorreram nos cotilédones oriundos de sementes mantidas durante um e dois dias nos meios contendo 0,5 e 0,9mg L-1 de BAP. O aumento da permanência dos explantes nos meios de germinação e as elevadas concentrações de BAP nos meios de regeneração diminuíram a capacidade organogênica dos explantes e incrementaram a formação de calos.The aim of the present study was to optimize a cv. Gaucho melon cotyledon explant regeneration protocol, evaluating the germination media composition and the explant exposition period in these media. For this purpose, seeds were germinated in semi-solid MS medium containing either BAP or ANA, and without growth regulators. The seeds were kept in these media for one, two, three or four days; afterwards, their cotyledons were inoculated in MS medium containing different BAP concentrations (0.5; 0.9; 1.5 and 2.0mg L-1). The highest regeneration rates occurred with cotyledons from seeds which had been kept for one or two days in media containing 0.5 and 0.9mg L-1 BAP. Both the increase in the explant exposition time in germination media and high BAP concentrations in regeneration media decreased explant organogenic capacity, and increased callus formation.

Annona crassiflora Mart known as 'araticum', 'marolo' or 'field araticum' is a typical fruit from the Cerrado biome of Brazil with socio-economic and medicinal importance. Normally, Annona crassiflora is propagated through seeds. However, due to a deep dormancy that the seeds display at dispersion and the difficulty to obtain uniform plants in a short time period, micropropagation may be a feasible alternative. Concentrations of gibberellic acid (GA3) and naphthalene-acetic acid (NAA) and their interactive effects on in vitro seed germination and seedling development of Annona crassiflora were studied. Mature fruits of Annona crassiflora were depulped and the seeds washed in clear water and dried at room temperature. Seed coat was removed and the seeds were placed on Murashige & Skoog (MS) medium supplemented with gibberellic acid (GA3) and naphthalene-acetic acid (NAA), 30 g L-1 sucrose and 6 g L-1 agar-agar. Seeds were kept under these conditions for 30 days. After this period, seedlings were kept for another 90 days on Wood Plant Medium (WPM) with 20 g L-1 sucrose and 5 g L-1 agar-agar supplemented with the same GA3 and NAA concentrations. Cultures were incubated under controlled conditions at 25 ± 2°C temperature, 16: 8 (light: dark) photoperiod of 32 µmol m-2 s-1 irradiance provided by cool white fluorescent tubes (Philips). Use of WPM medium supplemented with 25-32 mg L-1 GA3 or MS with 26-30 mg L-1 GA3 and 2 mg L-1 NAA promoted rooting and plant growth.O araticum ou marolo (Annona crassiflora Mart.) é uma fruta típica de Cerrado com grande importância sócio-econômico e medicinal. Sua propagação pode ser feita através de sementes, porém devido à dormência das sementes e dificuldade de se obterem plantas uniformes e em curto espaço de tempo, a micropropagação poderá ser uma alternativa. Estudaram-se os efeitos do GA3 associado ao ANA sobre a germinação de sementes e desenvolvimento in vitro de marolo. Frutos maduros foram despolpados e suas sementes lavadas e secas. Em seguida retirou-se o tegumento das sementes e estas foram colocadas em tubos contendo 20 mL de meio MS, acrescido de GA3 e ANA. Ao meio foram adicionados 30 g L-1 de sacarose e 6g L-1 de ágar, permanecendo nestas condições por 30 dias. Ao final dos 30 dias, as plântulas foram colocadas em meio WPM, acrescido de 20 g L-1 de sacarose, 5 g L-1 de ágar e suplementado das mesmas concentrações de GA3 e ANA da etapa anterior, onde permaneceram por 90 dias. Melhores resultados em meio WPM para todas as variáveis analisadas foram obtidos na faixa de 25-32 mg L-1 de GA3. Em meio MS a interação significativa foi observada apenas no comprimento da parte aérea e número de raízes, nos quais melhores resultados foram verificados com 26,92 - 30,13 mg L-1 de GA3 associado a 2 mg L-1 de ANA.

O presente trabalho teve como objetivo identificar 11 isolados de Guignardia citricarpa, agente causal da mancha preta dos citros (MPC), obtidos de frutas cítricas sintomáticas de diferentes regiões geográficas, por meio da PCR e caracterização morfofisiológica das estruturas propagativas, esporulação e crescimento micelial emdiferentes meios de cultura, temperaturas e regimes de luz, nas condições de laboratório. Pelo teste de PCR, todos os isolados foram identificados como o patógeno G. citricarpa. Os isolados caracterizados foram submetidos às temperaturas de 20, 25 e 30ºC, em regime de luz contínua, escuro contínuo e fotoperíodos de 12 horas, durante 24 dias. Utilizaram-se os meios de cultura aveia-ágar (AA), batata-dextrose-ágar (BDA) e cenoura-dextrose-ágar (CDA). Os resultados mostraram que ocorreu interação entre os diferentes meios de cultura, temperaturas e fotoperíodos. O meio de cultura que melhor estimulou o crescimento micelial foi o CDA a 25ºC sob o fotoperíodo de 12h. A maior produção de esporos (conídios) foi verificada no meio BDA a 20ºC, no fotoperíodo de 12 horas. No meio CDA, não ocorreu esporulação de nenhum isolado. Sob a temperatura de 30ºC, foiverificada apenas a produção de hifas e picnídios para a maioria dos isolados, em todos os meios de cultura e fotoperíodo testados.Thepresent work aims to identify 11 isolates of Guignardia citricarpa, the causal agent of the citrus black spot (CBS), obtained from affected fruit in different geographical regions, through PCR and morphophysiological characterization of propagative structures, sporing and mycelial growth in different means of culture, temperatures and photoperiods, under laboratory conditions. Through the PCR test, all isolates were identified as being the G.citricarpa pathogen. The characterized isolates were subjected to evaluations at temperatures of 20, 25 and 30ºC, in continuous light, continuous darkness, and alternating 12 hours light and 12 hours darkness, during 24 days. The study used oat-agar (OA), potato-dextrose-agar (PDA) and carrot-dextrose-agar (CDA) as means of culture. The results showed an interaction between the different means of culture, temperatures and photoperiods. The mean of culture that best stimulated mycelial growth was CDA at 25ºC under the 12-hourphotoperiod. The greatest spore (conidia) production was verified in PDA at 20ºC in the 12-hour photoperiod. There was no sporing of any isolate in the CDA mean of culture. Under the 30ºC temperature, the study verified only the production of hyphae and picnidsin most isolates, in all means of culture and photoperiods.

Apesar de ser considerado um potencial bioagente de controle do amendoim-bravo (Euphorbia heterophylla L.) em cultivos de soja no Brasil, pouco se conhece sobre as características nutricionais do fungo Bipolaris euphorbiae Muchovej & Carvalho. O objetivo deste trabalho foi avaliar diferentes fontes de carbono (glicose, amido, sacarose, lactose e maltose), de nitrogênio (nitrato de sódio, nitrato de amônio, sulfato de amônio, fosfato de amônio dibásico, cloreto de amônio), de fósforo (fosfato de potássio monobásico, fosfato de potássio bibásico, fosfato de cálcio, fosfato de sódio, ácido fosfórico, fosfato de amônio) e a suplementação do meio de cultivo com fontes orgânicas de macro e micronutrientes, para o crescimento e a esporulação de B. euphorbiae. O amido proporcionou o maior crescimento, sendo também considerada a fonte de carbono mais favorável para a esporulação. O melhor crescimento e esporulação de B. euphorbiae foram obtidos usando o nitrato de sódio como fonte de nitrogênio e fosfato de potássio monobásico e fosfato de cálcio como fonte de fósforo, embora as demais fontes de fósforo analisadas, exceto o ácido fosfórico, tenham igualmente favorecido a esporulação. A suplementação do meio de cultivo com peptona e extrato de levedura resultou em melhor crescimento e esporulação do fungo e a adição de vitaminas favoreceu a produção de conídios.Bipolaris euphorbiae Muchovej & Carvalho is considered a potential bioagent for control of selvage peanuts (Euphorbia heterophylla L.) on soybean crops in Brazil. However, little is known about the nutritional characteristics of this fungus. The main objective of this research was to evaluate different sources of carbon (glucose, starch, sucrose, lactose and maltose), of nitrogen (sodium nitrate, ammonium nitrate, ammonium sulphate, bi-basic ammonium phosphate, ammonium chloride), of phosphorus (monobasic potassium phosphate, bi-basic potassium phosphate, calcium phosphate, sodium phosphate, phosphoric acid, ammonium phosphate) and addition of organic sources of macro and micronutrients as supplement in the culture medium for the growth and sporulation of B. euphorbiae. Starch was the carbon source that promoted the greater fungus growth and was considered the most favorable to sporulation. The nitrogen source sodium nitrate and the phosphorus source monobasic potassium phosphate and calcium phosphate provided the best growth and sporulation of B. euphorbiae, but the others phosphorus source analyzed, except phosphoric acid, favored the fungus sporulation. The supplementation of the culture medium with peptone and yeast extract promoted a better growth and sporulation of the fungus and the addition of vitamins favored the production of conidia.

The objective of this study was to establish cell suspension culture and plant regeneration via somatic embryogenesis of a Brazilian plantain, cultivar Terra Maranhão, AAB. Immature male flowers were used as explant source for generating highly embryogenic cultures 45 days after inoculation, which were used for establishment of cell suspension culture and multiplication of secondary somatic embryos. Five semisolid culture media were tested for differentiation, maturation, somatic embryos germination and for plant regeneration. An average of 558 plants per one milliliter of 5% SCV (settled cell volume) were regenerated in the MS medium, with 11.4 µM indolacetic acid and 2.2 µM 6-benzylaminopurine. Regenerated plants showed a normal development, and no visible somaclonal variation was observed in vitro. It is possible to regenerate plants from cell suspensions of plantain banana cultivar Terra using MS medium supplemented with 11.4 µM of IAA and 2.2 µM of BAP.O objetivo deste trabalho foi estabelecer a cultura de células em suspensão e a regeneração de plantas via embriogênese somática de bananeira cultivar Terra Maranhão, AAB. Flores imaturas masculinas foram utilizadas como fonte de explante para obtenção de culturas altamente embriogênicas 45 dias após a inoculação, as quais foram utilizadas para o estabelecimento de suspensões celulares e multiplicação de embriões somáticos secundários. Cinco meios de cultura semi-sólidos foram testados para a diferenciação, maturação, germinação dos embriões somáticos e para a regeneração de plantas. A média de 558 plantas por mililitro de 5% SCV (volume de células sedimentadas) foi regenerada, em meio MS com 11,4 µM de ácido indolacético e 2,2 µM de 6-benzilaminopurina. As plantas regeneradas apresentaram desenvolvimento normal, e não foi observada a ocorrência de variação somaclonal in vitro. É possível a regeneração de plantas a partir de células em suspensão de bananeira 'Terra' utilizando meio MS suplementado com 11,4 µM de AIA e 2,2 µM de BAP.

This work evaluated the effects of Tris (hydroxymethyl)-aminomethane (TRIS) buffer and its interaction with nutrient concentration on the development of Gracilaria birdie, a common species on the Brazilian coast that has been exploited for agar production. Responses to different conditions were assessed through growth rates and pigment content (chlorophyll a, phycoerythrin, phycocyanin and allophycocyanin). Provasoli's nutrient solution with and without TRIS addition was tested at concentrations of 12.5, 25 and 50%. The pH was also monitored. G. birdiae grew better in the absence of TRIS and at low nutrient concentrations, 12.5 and 25% (growth rates of 10.8-11.3%.day-1). Higher contents of phycoerythrin and chlorophyll a were observed without TRIS at 12.5 and 25% (Phycoerythrin, 649.6-698.0 μg g-1 fresh biomass; Chlorophyll a, 156.0-168.6 μg g-1 fresh biomass). These findings highlight the deleterious effect of TRIS on growth and phycoerythrin and chlorophyll a content. They also demonstrate the importance of appropriate nutrient concentration for laboratory cultures, depending on the intrinsic characteristics of each species.O presente trabalho avaliou os efeitos do tampão Tris (hydroxymethyl)-aminomethane (TRIS) e a interação com a concentração de nutrientes no desenvolvimento em Gracilaria birdiae, espécie presente no litoral brasileiro utilizada comercialmente na produção de ágar. As respostas às diferentes condições de cultivo foram avaliadas por meio das taxas de crescimento e conteúdo pigmentar (clorofila a, ficoeritrina, ficocianina e aloficocianina). A solução de nutrientes de Provasoli com e sem adição de TRIS foi testada nas concentrações de 12,5, 25 e 50%. O pH foi também monitorado. G. birdiae cresceu melhor em ausência de TRIS e em baixas concentrações de nutrientes, 12,5 e 25% (taxas de crescimento de 10,8-11,3%.dia-1). As maiores concentrações de ficoeritrina e clorofila a foram observadas na ausência de TRIS em 12,5 e 25% (Ficoeritrina, 649,6-698.0 μg g-1 de biomassa fresca; Clorofila a, 156,0-168,6 μg g-1 de biomassa fresca), evidenciando o efeito deletério do TRIS no crescimento e nos conteúdos de clorofila a e ficoeritrina. Os dados demonstram ainda a importância da utilização de concentrações de nutrientes adequadas em cultivos em laboratório, dependendo das características intrínsecas de cada espécie.

O objetivo do trabalho foi determinar as condições mais favoráveis para a germinação in vitro de sementes e o crescimento inicial de plântulas de mangabeira. Após assepsia, sementes oriundas de frutos maduros foram inoculadas em tubos de ensaio contendo os seguintes tratamentos: T1-15 mL de meio de cultura MS; T2-15 mL de meio de cultura MS + 2,0 g L-1 de carvão ativado; T3-15 mL de meio de cultura ½ MS; e T4-15 mL de meio de cultura ½ MS + 2,0 g L-1 de carvão ativado. Todos os meios de cultura foram gelificados com 0,3 g L-1 de Phytagel® e suplementados com 3,0 g L-1 de sacarose. O experimento foi instalado em delineamento inteiramente casualizado com quatro tratamentos e oito repetições, sendo cada parcela experimental composta de dez tubos de ensaio contendo uma semente cada. Não houve diferença significativa dos tratamentos para a porcentagem de germinação aos 20 dias, que variou de 95 a 100%. Quanto ao comprimento da raiz principal, observou-se que o meio de cultura constituído de ½ MS com 2,0 g L-1 de carvão ativado proporcionou maior crescimento quando comparado com os demais tratamentos. Aos 50 dias, não foi observada a formação de plântulas anormais e nem diferenças significativas do comprimento da parte aérea das plântulas. Entretanto, a diluição em 50% dos sais do meio MS associada à presença de carvão ativado induziu maior crescimento da raiz principal (8,50 cm) quando comparado com meio MS, na presença (6,19 cm) ou ausência (6,00 cm) de carvão ativado.The objective of this study was to determine the most favorable conditions for the in vitro germination of mangaba seeds and initial development of plantlets. After asepsis, emerging seeds of mature fruits were inoculated in tubes contend the next treatments: T1-15 mL of MS culture medium; T2-15 mL of MS culture medium + 2.0 g L-1 of activated charcoal; T3-15 mL of ½ MS culture medium; and T4-15 mL of ½ MS culture medium + 2.0 g L-1 of activated charcoal. All the culture medium were gellified with 0.3 g L-1 of Phytagel® and supplemented with 3.0 g L-1 of sucrose. The statistical design was completely randomized with four treatments, eight repetitions and ten seeds by experimental unit. There was not significant difference of the treatments for the germination percentage at twenty days, which varied from 95 to 100%. The ½ MS with 2.0 g L-1 of activated charcoal promoted higher growth the main root when compared with the others treatments. After 50 days, abnormal plantlets were not observed and neither significant difference were verified among the length of the aerial part. However, the dilution in 50% of the MS culture medium associate to the presence of activated charcoal induced higher growth of the main root (8.50 cm) when compared with MS culture medium in the presence (6.19 cm) or absence (6.00 cm) of activated charcoal.

O objetivo do presente trabalho foi verificar qual o meio de cultura e quais as condições que deveriam ser utilizadas em testes de germinação in vitro do pólen de pitangueira (Eugenia uniflora), bem como verificar a possibilidade de armazenamento em freezer (-18°C). O pólen foi coletado de flores em estádio de balão e logo após a antese, em duas populações desta espécie, na Embrapa Clima Temperado, em Pelotas, Rio Grande do Sul. Os meios de cultura testados foram o padrão (testemunha) (10% de açúcar e 1% de ágar em água destilada) e este acrescido de duas concentrações de H3BO3 (0,65 mM e 1,3 mM).Foram testadas as temperaturas de incubação de 20, 25 e 30ºC. Cinco horas a 25°C, em meio de cultura básico, proporcionou as melhores médias de germinação in vitro. O boro não influenciou a germinação média de pólen de pitangueira. O pólen apresentou grande perda de viabilidade após 105 dias de armazenamento em freezer.The objective of the present work was to check the best medium andconditions for in vitro germination of pollen of Surinam cherry (Eugenia uniflora). Possibility of storage in freezer was also studied. The pollen was collected from flowers at balloon stageand immediately after anthesis in two populations of this species at Embrapa Clima Temperado Research Center, Pelotas, of state Rio Grande do Sul , Brazil. The tested media were the standard (10% sugar, plus 1% agar dissolved in distilled water), and the addition of two H3BO3 concentrations (0.65 mM and 1.3 mM) to this medium. Incubationtemperatures of 20, 25 and 30ºC were tested. The best germination percentage was achieved after five hours incubating at 25°C. Boron did not influence the pollen germination of Surinam cherry. The pollen lost viability after 105 days of storage in freezer.

A propagação de sementes preserva a variabilidade genética da população e ajuda a selecionar características desejáveis. Objetivou-se estudar a germinação in vitro de Hamatocactus setispinus em seis diferentes meios de cultura, 1- meio de cultivo MS; 2- MS ½ força de sais minerais; 3- 1 g L-1 da formulação 15-05-15 Peter’s® CalMag; 4- 0,5 g L-1 da formulação 15-05-15 Peter’s® CalMag; 5- MS com adição de 10% de água de coco e; 6- água e ágar, com e sem carvão ativado, avaliando o índice de velocidade de germinação, o tempo médio de germinação e a taxa de germinação, comprimento da raiz, comprimento da parte aérea e o número de raízes. As plântulas com desenvolvimento superior obtidas da germinação in vitro foram aclimatizadas em dois substratos: Biomix® Floreira; Biomix® Floreira + areia. Foram avaliados: sobrevivência de plântulas, comprimento da parte aérea, diâmetro da parte aérea, comprimento da raiz, número de raízes, matéria fresca da parte aérea, matéria fresca da raiz, matéria seca da parte aérea e matéria seca da raiz. O meio Peter’s 1,0 g L-1 sem carvão ativado levou a melhores resultados no comprimento de raiz (11,36 mm) e número de raízes (3,84). Houve 100% de sobrevivência das mudas. Os substratos de aclimatação não diferiram entre si e, por isso não afetaram o crescimento das mudas.

Sinningia leucotricha é uma planta nativa do Paraná, que está sob risco de extinção. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo para a propagação in vitro de rainha-do-abismo. Os tratamentos foram: (T1) MS, (T2) MS 50%, (T3) MS 200%, (T4) MS + 1,0 g.L-1 de carvão ativado, (T5) MS 50% + 1,0 g.L-1 de carvão ativado, (T6) MS 200% + 1,0 g.L-1 de carvão ativado. O delineamento foi o inteiramente casualizado com 10 repetições e 5 plantas por repetição. Após 120 dias de semeadura, foram avaliados: altura da parte aérea,comprimento da maior raiz, massa fresca total e número de brotações. A porcentagem de pegamento foi avaliada 30 dias após o período de aclimatização. O tratamento que proporcionou as maiores médias para todas as características analisadas foi o MS 50% sem adição de carvão ativado (T2). A porcentagem de pegamento foi de 100% em todos ostratamentos.Sinningia leucotricha is a native plant of Paraná (Brazil), which is considered endangered. The objective of this work was to establish aprotocol for in vitro propagation of Sinningia leucotricha. The treatments were: (T1) MS, (T2) MS 50%, (T3) MS 200%, (T4) MS 100% + 1.0 gL-1 of activated charcoal, (T5) MS 50% + 1.0 gL-1 of activated charcoal and (T6) MS 200% + 1.0 gL-1 of activated charcoal. Theexperimental design was entirely casualized with 10 replications per treatment, and 5 plants per replication. Plant height, root length, total fresh weight and number of shoots were evaluated 120 days after cultivation. After thirty days of seedling acclimatization, thegermination/sticking proportion was evaluated. The higher averages for all analyzed features was the MS 50% without activated charcoal addition (T2), and the germination/ sticking proportion was 100% for all treatments.

The objetive of this work was to rescue immature embryos of apple rootstocks Malus prunifolia (Marubakaido) and Malus pumila (M9) after 40-60 days of pollination and to put them into MS culture media supplemented with agar (6 g L-1) and casein hydrolysate (500 mg L-1). Embryos originated from interspecific crosses and open pollination showed differences in the in vitro responses, depending on the female parent, the developmental stage of the embryo, and the culture medium composition. Embryos of the M. pumila rootstock, rescued within 40 days after pollination and put in culture medium supplemented with indolacetic acid (IAA), gibberellic acid (GA3), kinetin and maltose, resulted in a normal development of plantlets. However, embryos originating from hand-pollination, cultivated in medium supplemented with 14 µM IAA, 5 µM kinetin and 1.5 µM Ga3 (MS1), mainly those of M. prunifolia x M. pumila, showed a high percentage of rusted embryos (96.2%). Embryos from open pollination of M. prunifolia and M. pumila formed calluses. It was possible to identify the influence of the female parent by the enhanced development of M. pumila shoots derived from open or hand-pollination. The crossing of responsive species and the use of the technique of embryo culture provided a rapid and uniform germination and, consequently, the development of fully normal seedlings.O objetivo deste trabalho foi resgatar embriões imaturos de porta-enxertos de macieira Malus prunifolia (Marubakaido) e Malus pumila (M9) depois de 40 e 60 dias de polinização e colocá-los em meio de cultura MS suplementado com ágar (6 g L-1) e hidrolisado de caseína (500 mg L-1). Embriões originados do cruzamento interespecífico dirigido e de polinização aberta mostraram diferenças significativas in vitro, tendo sido observadas diferenças quanto ao progenitor feminino, quanto à fase de desenvolvimento do embrião e à composição do meio de cultura. Embriões do porta-enxerto M. pumila, resgatados aos 40 dias depois da polinização e colocados em meio de cultura suplementado com ácido indolacético (AIA), ácido giberélico (GA3), cinetina e maltose, resultaram em desenvolvimento normal das plantas. Porém, foi observada alta porcentagem de embriões oxidados (96,2%), originados de polinização dirigida, cultivados em meio com 14 µM de AIA, 5 µM de cinetina e 1,5 µM de GA3 (MS1), principalmente para o cruzamento M. prunifolia e M. pumila. Embriões de polinização aberta de M. prunifolia x M. pumila formaram calos. Foi possível identificar a influência do progenitor feminino, pelo incremento de brotações de M. pumila derivada de polinização aberta e dirigida. O cruzamento de espécies responsivas e o uso da técnica de cultura de embrião promoveram germinação rápida e uniforme e, por conseguinte, o desenvolvimento de mudas normais.

Due to the cross-pollinated condition of the plant, which causes variation in the sweetener's composition and in the morphological characteristics in terms of shape and color of the leaves, seed propagation is limiting for commercial purposes, so it is convenient to use asexual propagation systems. In this study, a protocol for In Vitro establishment of Stevia rebaudiana was developed, for which eight disinfection treatments were applied using 5% and 4% concentrations of sodium hypochlorite (NaClO) with different exposure times, 5, 10, 15 and 20 minutes. The best disinfection percentage (76.75%) and sprouting (58.91%) was obtained using a 5% concentration of NaClO with 20 minutes of exposure. [ABSTRACT FROM AUTHOR]