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Efficient Microorganisms (EM) are commonly used in organic crops; however, there are no studies on their effects on the production of citrus seedlings. The work aimed to evaluate the impact of applying the inoculants Native Efficient Microorganisms (NEM) and the commercial product EM1® in forming the seedling of the rootstock Poncirus trifoliata (L.) Raf and in the development of young plants of Sweet Orange “Valência” (Citrus sinensis (L.) Osbeck) and Murcott tangor (Citrus sinensis x Citrus reticulata Blanco). The inoculant based on efficient microorganisms from the homemade technology of capture and multiplication, native efficient microorganisms (NEM), showed greater microbial diversity when compared to the commercial product EM1®. The results obtained from the dry mass analysis of the Valência orange and Murcott tangor plants indicate that positive effects resulting from the use of EM1® and NEM inoculums can be obtained by cultivating the respective crops in a system with oat straw cover. It was observed that the use of efficient microorganisms, as microbial natural bioactive formulation, has potential use in citrus and that farmers with fewer resources will be able to produce the microorganisms on their properties.

Abstract Pretreatment of keratinous residues using an ultrasonic reaction system provides greater enzymatic production in less time. This is a promising technology for measuring enzyme activity and microwave processes. In the present work, an ultrasonic probe reaction system was used to evaluate the potential of swine hair pretreatment. The pretreated material was submerged with non-pretreated residues for 9 days to obtain the enzyme. Enzyme activity was measured in the extracts obtained using the ultrasonic probe, ultrasonic bath, and microwave. We also used the enzymatic concentration technique with NaCl and acetone. Homemade enzymatic extracts were evaluated for their ability to degrade swine hair and chicken feathers by comparing them with the activities commercial enzymes. Macrobeads gave greater energy dissipation in less time, providing greater enzyme activity (50.8 U/mL over 3 days). In terms of waste degradation, non-pretreated swine hair was more promising. The ultrasonic probe reaction system had the potential to evaluate increased enzyme activity (38.4% relative activity) and the enzyme concentration increased activity by 53.5%. The homemade enzymatic extract showed promise for degradation of keratinous residues.

A disposição final de Resíduos Sólidos Urbanos (RSU) em aterros corresponde a técnica de tratamento de resíduos mais difundida no mundo, porém, estes locais apresentam fontes potenciais de poluição, necessitando do constante monitoramento ambiental. Assim, este estudo avaliou a relação entre qualidade do lixiviado gerado no aterro sanitário de Palmeira das Missões e da água subterrânea local. Para tanto, realizou-se uma avaliação histórica da qualidade da água subterrânea e de informações do efluente bruto e tratado. Os dados dos parâmetros da qualidade da água subterrânea foram submetidos à estatística descritiva e ao Teste t de Student. A avaliação da qualidade do lixiviado tratado revelou que, dos 40 parâmetros avaliados, 9 apresentaram concentrações acima do valor máximo permitido (VMP) estabelecidos nas resoluções brasileiras. Para a água subterrânea, dentre os 30 parâmetros avaliados, 10 estão presentes em concentrações superiores ao VMP. O teste estatístico revelou que a alcalinidade total, Pb, OD, DBO5 SDT e ST apresentaram um aumento significativo em pelo menos uma das análises dos poços à jusante em relação ao poço à montante, porém, somente o Pb e a DBO5 estão presentes em concentração superior ao VMP. Tais resultados demonstraram que o lixiviado gerado no aterro está afetando a qualidade da água subterrânea local e, também, espera-se que contribuam para a melhor gestão dos RSU e dos recursos hídricos subterrâneos.

In recent years, synthetic herbicides' intense and disordered use has triggered severe contamination of soils and water bodies, causing damage to living organisms, including vegetal herbicide-resistance. In-part, biological herbicides, offer promise in addressing these problems, especially for sustainable weed management in both agricultural and natural resource management contexts. The search for culture media to serve as alternatives to the existing conventional synthetic media has focused on microalgae biomass. The natural properties of these organisms make them ideal raw materials for fermentative processes. Therefore, this study aimed to integrate bioprocesses producing bioherbicidal extract using a submerged fermentation process. For this, a substrate of microalgae recycled biomass to replace commercially used media for fungal growth for relatively cheap biomass obtained from wastewater phycoremediation after anaerobic treatment (UASB). We also verified its potential for weed control. Preliminary tests of microalgae fermentation were conducted in the raw and lyophilized form, using the fungus Trichoderma koningiopsis. To evaluate their phytotoxic potential, the biocompounds were applied to Bidens pilosa, Conyza bonariensis, Urochloa plantaginea, and Euphorbia heterophylla weeds. A central composite rotatable design (CCRD) was used to evaluate the influence of temperature (20–45°C), agitation (0–200 RPM), and pH (3–14) on the improvement of enzyme activities, fungal growth and the effects on Cucumis sativus germination tests. We found that microalgae could be used as a substrate for obtaining bioherbicides. The biocompounds produced in this study were relevant for pre- and post-emergence control of model plants (Cucumis sativus), with vigor indexes of up to 8.05% and herbicide-resistant plants (Conyza bonariensis) with phytotoxic damage of up to 100% after 15 days. From the experiments' design, we found that agitation was the variable that had the most significant effect on enzyme and biomass production, followed by pH and temperature. The enzymes also showed synergistic action when acting together with microalgae and fungi, potentiating the control effect on weeds. Finally, the system integrated bioprocesses through agro-industrial effluent recovery and reuse, considered one of the essential economic viability mechanisms by enhancing the development of more sustainable technologies that embrace the principles of a circular economy.

Meliponinae eusocial bees are among the most important pollinators in the Neotropics and their beekeeping has been growing as both recreational and economic activity. Information on the pollen preferences and niche overlap among species coexisting in the same location is still scarce. This study focused on the use of pollen resources by three native species of Meliponinae in the Atlantic Forest, Melipona quadrifasciata quadrifasciata (Lepeletier 1836), Scaptotrigona depilis (Moure 1942), and Tetragonisca angustula (Latreille 1811), at two different sites. The use of pollen resources was evaluated from reserves inside hives collected monthly between February 2015 and January 2016. It was also estimated the Mean Minimal Distance (Dm) traveled by the bees to obtain pollen. The bees differed regarding the diversity of pollen types, Dm, and proportion of pollen from different plant life-form. Local factor promoted differences only for Dm. M. q. quadrifasciata foraged a low diversity of pollen species and traveled greater distances with a higher proportion of trees plus palm species. Tetragonisca angustula foraged a higher diversity of pollen and flew shorter distances with a lower proportion of trees and palms. The species factor predominates over the local factor in the clustering pattern, based on pollen profile similarity.

The prospection of bioherbicides has been an alternative to weed control, aiming at mitigating chemical risks to human, animal and environmental health due to extreme use of synthetic herbicides. In the present study, various fungi were isolated from plants with symptoms of fungal diseases for bioherbicide purposes against weeds (Urochloa plantaginea, Euphorbia heterophylla and Bidens pilosa). Fungi isolated were identified by molecular methods and enzymatic products obtained by fungi fermentation (cellulase, lipase, peroxidase, and amylase) were quantified. Bioherbicide selectivity study was performed on crops (soybean and corn), as well as on resistant weeds. Among the isolated fungi, Fusarium oxysporum, Fusarium ploriferatum, and Trichoderma koningiopsis presented bioherbicide potential. T. koningiopsis, in particular, presented the highest effect on Euphorbia heterophylla (popular name - Mexican fire plant), causing up to 60% of foliar damage, without presenting phytotoxicity against corn crop. New perspectives for weeds control and their use in corn crops were prospected, considering the bioherbicide selectivity described in this study.

Bean weevil [Acanthoscelides obtectus Say (Coleoptera: Bruchidae)] is considered the main storage pest of the bean crop. Its control is performed mainly by chemical treatment, which has potential to cause resistance in pests, as well as environmental contamination. This study aimed at evaluating the insecticidal and repellent effect of Salvia officinalis L. essential oil against bean weevil. The doses used for the insecticidal test were: 0 L t-1, 0.5 L t-1, 1.0 L t-1, 1.5 L t-1, 2.5 L t-1 and 5.0 L t-1 of bean grains. For the mortality test, the experimental design was completely randomized, in a 6 × 7 (dose × time) factorial scheme, with five replications. The number of dead insects was counted at 2, 6, 12, 24, 48, 72 and 96 h after the insect introduction. The repellency test was conducted in arenas, under a completely randomized design, using the same doses applied to evaluate the insecticidal effect. Counts were performed 24 h after the introduction of insects. The insecticidal effect of the S. officinalis essential oil on A. obtectus resulted in mortality rates higher than 95 %, after 6 h of insect introduction, for all doses tested. Repellency effect was also detected for all doses tested.

A compreensão da diversidade genética fornece elementos básicos sobre a dinâmica e funcionamento de populações, auxiliando na conservação e uso sustentável das espécies. Supõe-se que populações sucessionais precoces poderiam ser geneticamente mais diferenciadas do que populações sucessionais mais tardias. Visando testar esta hipótese, o presente trabalho teve como objetivo analisar a variabilidade genética de populações de Eugenia uniflora L. em manchas florestais em diferentes estádios sucessionais. Foram selecionadas duas áreas em diferentes estádios de sucessão, sendo a primeira em estádio inicial e a segunda em estádio avançado. A área de estudo apresenta um remanescente florestal em transição de Floresta Ombrófila Mista e Floresta Estacional Semidecídua. Por meio da técnica de RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) e análise multivariada, a diversidade gênica esperada e a porcentagem de loci polimórficos foram estimadas, além da similaridade genética entre as populações de cada mancha florestal e a diversidade de cada área por meio do índice de diversidade de Simpson. Os resultados indicaram 79% de loci polimórficos para a área em estádio avançado e 70% para a área em estádio inicial de sucessão. A similaridade genética entre pares de indivíduos variou entre 0,55 e 0,86 na área em estádio inicial de sucessão e entre 0,45 e 0,78 para a área em estádio avançado. Não houve diferenças significativas entre a diversidade das duas áreas (P = 89). Um escalonamento multidimensional não-métrico indicou menor distância genética entre os indivíduos da área em estádio inicial. Da mesma forma, uma análise de similaridade - ANOSIM indicou separação entre os indivíduos das duas áreas.Knowledge on genetic diversity provides basic information about population dynamics and functioning aiming both to conservation and sustainable use of species. It is assumed that early successional populations could genetically be more differentiated than those in late sucessional stages. To test this hypothesis, the genetic variability of Eugenia uniflora L. populations at different successional stages was investigated. Two areas at different successional stages were selected; one at early successional stage, showing several pioneer trees, and another at late successional stage. The area in study (27º54'S and 52º13'W) is covered by a remnant forest in transition from Mixed Rain Forest to Seasonal Semideciduous Forest. RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) and multivariate analysis were used to evaluate the expected genetic diversity and percentage of polymorphism as well as genetic similarity within and between areas and the genetic diversity by the Simpson diversity index. Results indicated 79% of polymorphic loci for the area at late successional stage and 70% for the area at early successional stage. Pairwise genetic similarity varied from 0.55 to 0.86 in the area at early successional stage and from 0.45 to 0.78 in the area at late successional stage. No differences were found for diversity between the areas (P = 0.89). A non-metric multidimensional scaling showed lower genetic distances among individuals from the area at early successional stage. Similarly, the analysis of similarities - ANOSIM -indicated a split between individuals of both areas.

A compreensão da diversidade genética fornece elementos básicos sobre a dinâmica e funcionamento de populações, auxiliando na conservação e uso sustentável das espécies. Supõe-se que populações sucessionais precoces poderiam ser geneticamente mais diferenciadas do que populações sucessionais mais tardias. Visando testar esta hipótese, o presente trabalho teve como objetivo analisar a variabilidade genética de populações de Eugenia uniflora L. em manchas florestais em diferentes estádios sucessionais. Foram selecionadas duas áreas em diferentes estádios de sucessão, sendo a primeira em estádio inicial e a segunda em estádio avançado. A área de estudo apresenta um remanescente florestal em transição de Floresta Ombrófila Mista e Floresta Estacional Semidecídua. Por meio da técnica de RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) e análise multivariada, a diversidade gênica esperada e a porcentagem de loci polimórficos foram estimadas, além da similaridade genética entre as populações de cada mancha florestal e a diversidade de cada área por meio do índice de diversidade de Simpson. Os resultados indicaram 79% de loci polimórficos para a área em estádio avançado e 70% para a área em estádio inicial de sucessão. A similaridade genética entre pares de indivíduos variou entre 0,55 e 0,86 na área em estádio inicial de sucessão e entre 0,45 e 0,78 para a área em estádio avançado. Não houve diferenças significativas entre a diversidade das duas áreas (P = 89). Um escalonamento multidimensional não-métrico indicou menor distância genética entre os indivíduos da área em estádio inicial. Da mesma forma, uma análise de similaridade - ANOSIM indicou separação entre os indivíduos das duas áreas.

This work is focused on the chemical distribution of volatile and semi-volatile compounds of 18 native populations of Maytenus ilicifolia collected all over Brazil. The extracts of bulk samples (30 plants) of each population were obtained by supercritical CO2 extraction technique, and analyzed by GC/MS. The quantification of compounds (phytol, squalene, vitamin E, limonene, stigmasterol, friedelan-3-ol, friedelin, fridelan-3-one, palmitic acid and geranyl acetate) showed significant variations within the different populations, which could be related tom microclimate characteristics.

A progeny of Cambona-4, a female maté plant (Ilex paraguariensis) selected by its agronomical characteristics and mild flavor, was evaluated using RAPD markers in order to identify its male parents. Using RAPD markers specifics of each one of the four potential males, the paternity of 84 out of 107 offsprings was confirmed. The majority of the offsprings (83.3%) were ascribed to pollen donor A, while male plants B, C, and D represented 11.9, 4.8, and 0%, respectively. The highly desirable agronomical characteristics and product quality of Cambona-4/pollen donor A offsprings, identified by RAPD markers, lead to the planting of an orchard Cambona-4 and pollinator A to obtain bi-clonal commercial seeds.Uma progênie da matriz feminina de erva-mate (Ilex paraguariensis) denominada Cambona-4, selecionada pelas suas características agronômicas e sabor suave, foi avaliada por marcadores RAPD para a identificação dos respectivos parentais masculinos. Usando-se fragmentos específicos de RAPD de cada um dos quatro polinizadores potenciais, a paternidade de 84 de 107 descendentes foi confirmada. A maioria dos descendentes (83,3%) foi atribuída ao polinizador A, enquanto os polinizadores B, C e D representaram 11,9; 4,8 e 0%, respectivamente. As características agronômicas e de qualidade do produto, oriundas da progênie Cambona-4/polinizador A, identificado pelos marcadores RAPD, direcionaram o plantio de um pomar a partir do cruzamento destas para obtenção de sementes comerciais biclonais.

Resistência de pragas a inseticidas, danos ao ambiente em função da poluição do solo e de recursos hídricos vem sendo observados pelo uso de inseticidas químicos no controle de pragas em grãos armazenados. Com o intuito de minimizar estes problemas, estão sendo estudadas alternativas como o uso de inseticidas botânicos. Este trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito do óleo essencial de Tagetes patula L. sobre, Sitophilus zeamais Motschulsky, 1855 em milho sob condições de laboratório. O óleo essencial de T. patula foi obtido através de arraste a vapor com aparelho clevenger. A caracterização química dos compostos encontrados no óleo essencial de T. patula foi realizada através de cromatografia gasosa acoplado a espectrometria de massas, sendo observados: limoneno (37,05%), terpinoleno (32,61%), piperitone (14,40%), eofitadieno (5,91%), sabineno (2,88%), trans-ocimeno (2,02%), beta-cariofileno (1,98%), farnesol (1,84%) e alfa-pineno (1,30%). Os insetos utilizados nos bioensaios foram mantidos em temperatura e umidade relativa controlada. Foram avaliados os efeitos do óleo essencial de T. patula sobre o comportamento (atratividade e/ou repelência) e atividade inseticida sobre adultos de S. zeamais através de dois bioensaios. Pelos resultados pode-se observar o efeito repelente e inseticida do óleo essencial de T. patula sobre S. zeamais, na concentração de 10 µL (pCountless problems due to the use of chemical insecticides for the control of pests in stored grains have been observed. In order to minimize these problems, alternative measures have been developed, including the use of botanical insecticides. This work was carried out with the objective of evaluating the effect of the essential oil of Tagetes patula L. on, Sitophilus zeamais (Mots., 1855) in corn kernels in laboratory conditions. The T. patula essential oil was obtained through hidrodestilation with the Clevenger device. The chemical characterization of the compounds found in the essential oil of T. patula was carried by gas chromatography connected to the mass spectrometer. The compounds found were: limonene (37.05%), terpinolene (32.61%), piperitone (14.40%), neophitadiene (5.91%), sabinene (2.88%), trans-ocimene (2.02%), beta-cariphilene (1.98%), farnesol (1.84%), and alpha-pinene (1.30%). The insects used in the bio-test were kept under controled temperature and relative humidity environment. Two bioassays were carried out to evaluate the effect of the essential oil of T. patula on the behavior (activity/repellence) and insecticide activity on adults of S. zeamais. The results showed that this essential oil was efficient (concentration of 10 µL) to control adults of S. zeamais adults.

The use of compressed carbon towards extracting semi-volatile compounds present in maté leaves (Ilex paraguariensis St. Hil.) is due to the growing interest in mate constituents to develop new products in the cosmetic, pharmaceutical and food industries. The objective of this work was to assess the chemical distribution of semi-volatile compounds in 20 native populations of maté collected all over Brazil. The extracts of bulk samples (30 plants) of each population were obtained by the high-pressure carbon dioxide extraction technique, and analyzed by GC/MSD. The quantification of compounds (caffeine, theobromine, phytol, squalene, vitamin E, eicosane, pentatriacontane, and stigmasterol) showed significant variations within the different populations and compounds analyzed, which are not related to geographical origin or macroclimate characteristics. The results pointed out to the importance of genetic and local environmental factors on the chemical composition of this species.A extração empregando dióxido de carbono a altas pressões em erva-mate (Ilex paraguariensis St. Hil.), tem sido justificada pelo crescente interesse desta matriz vegetal ou de parte de seus constituintes na formulação de novos produtos, tais como cosméticos e medicamentos, entre outros. Neste contexto, o objetivo do presente trabalho é avaliar a distribuição química de compostos semi-voláteis em 20 populações de erva-mate coletadas em toda área de distribuição desta espécie no Brasil. 30 plantas foram selecionadas para produzir a amostra de cada população. Os extratos de cada amostra foram obtidos por extração com dióxido de carbono a alta pressão e, posteriormente, foram analisados por CG/EM. A quantificação de alguns compostos semi-voláteis presentes nos extratos (cafeína, teobromina, fitol, esqualeno, vitamina E, eicosano, pentatriacontano e stigmasterol), apresentaram variações significativas entre as concentrações dos diferentes compostos analisados nas diferentes populações, os quais não estão relacionados com origem geográfica ou com características de macroclima. Os resultados apontam para a importância dos fatores genéticos e/ou fatores de microclima sobre a composição química desta espécie.

This work reports extraction yield and chemical characterization of the extracts obtained by high-pressure CO2 extraction of a cultivar of Ocimum basilicum L. The experiments were performed in the temperature range of 20 to 50 °C, from 100 to 250 atm of pressure. Chemical analyses were carried out by gas chromatography coupled to mass spectrometry, permitting to identify 23 compounds that were grouped into five chemical classes. Results showed that temperature and solvent density influenced positively the extraction yield. At 20 °C and 0.41 g cm-3 occurred a rise in the concentration of monoterpenes, oxygenated monoterpenes, sesquiterpenes and oxygenated sesquiterpenes.

Um dos principais problemas relacionados com a fertilidade do solo para as plantas medicinais e aromáticas é que só existem recomendações oficiais de calagem e adubação para poucas espécies. Isto é consequência direta do baixo número de trabalhos de pesquisa desenvolvidos nesta área. Assim, pouco se sabe a respeito do tipo ideal de solo, da resposta à adubação e calagem e dos efeitos dos nutrientes na concentração de compostos biologicamente ativos dessas culturas. Este trabalho objetivou avaliar o efeito de diferentes doses de NPK de fontes químicas (uréia, super triplo e cloreto de potássio) e de cama de aviário sobre a produção de matéria verde e seca, a concentração de nutrientes e o teor de óleo essencial na parte aérea da espécie Baccharis trimera (carqueja). O experimento foi realizado a campo, num Latossolo Vermelho Aluminoférrico típico, com os seguintes tratamentos: T1 (Testemunha); T2 (100 kg ha-1 da fórmula 10-30-15); T3 (150 kg ha-1 da fórmula 10-30-15); T4 (200 kg ha-1 da fórmula 10-30-15); T5 (250 kg ha-1 da fórmula 10-30-15); T6 (5 t ha-1 de cama de aviário); T7 (10 t ha-1 de cama de aviário) e T8 (15 t ha-1 de cama de aviário). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso com três repetições. Os rendimentos médios de matéria seca e de óleo essencial foram de 10,3 t ha-1 e 134,5 L ha-1, respectivamente. Tais produtividades podem ser consideradas altas. Contudo, não foram diferentes estatisticamente, em relação aos tratamentos utilizados. Os resultados do trabalho indicam que em solos previamente corrigidos, cultivados anteriormente com outras culturas e com teor médio de matéria orgânica, a Bacharis trimera poderá ser conduzida aproveitando os nutrientes residuais já disponíveis no solo, pelo menos para o primeiro corte. O acúmulo de macro e micronutrientes na parte aérea foi independente das fontes de adubação e das doses utilizadas. O rendimento de óleo foi independente dos teores de nutrientes na parte aérea da cultura. Os resultados obtidos permitiram concluir que não houve resposta da carqueja a adubação química e orgânica.

O objetivo deste trabalho foi avaliar as condições microbiológicas do ar ambiente, das mãos dos manipuladores e de utensílios e equipamentos utilizados na preparação dos alimentos em uma Unidade de Alimentação e Nutrição (UAN). Para detecção de Staphylococcus aureus, bactérias mesófi las, bolores e leveduras, foram efetuadas três coletas em três dias diferentes, no período de março e abril de 2009. Oito ambientes foram avaliados pela técnica de sedimentação simples. Seis manipuladores e quatro equipamentos e utensílios (bancada de preparo de carnes, faca e tábua de corte e um processador de alimentos manual) foram submetidos à avaliação microbiológica. A análise dos ambientes mostrou não haver diferença signifi cativa na contagem de bolores e leveduras, mas redução signifi cativa na média da terceira coleta, após alterações no layout da UAN. As contagens variaram de 1,7 x 102 a 1,0 x 104 UFC/cm2/semana. Encontrou-se Staphylococcus aureus nas mãos de todos os manipuladores avaliados (1,1 x 101 a 6,7 x 101 UFC/mãos). A análise dos utensílios e equipamentos mostrou que as maiores contagens microbianas foram obtidas na bancada de preparo de carnes e no processador manual (2,2 x 104 e 1,5 x 104 UFC/cm2). A tábua de corte e a faca apresentaram as menores contagens (6,3 x 103 e 8,1 x 102 UFC/cm2). A inefi ciência nas técnicas de processamento e nos procedimentos de higienização praticados no estabelecimento podem originar desde alterações de ordem sensorial nos alimentos produzidos, até a ocorrência de toxinfecções alimentares.

A progeny of Cambona-4, a female maté plant (Ilex paraguariensis) selected by its agronomical characteristics and mild flavor, was evaluated using RAPD markers in order to identify its male parents. Using RAPD markers specifics of each one of the four potential males, the paternity of 84 out of 107 offsprings was confirmed. The majority of the offsprings (83.3%) were ascribed to pollen donor A, while male plants B, C, and D represented 11.9, 4.8, and 0%, respectively. The highly desirable agronomical characteristics and product quality of Cambona-4/pollen donor A offsprings, identified by RAPD markers, lead to the planting of an orchard Cambona-4 and pollinator A to obtain bi-clonal commercial seeds.

ABSTRACT Understanding the genetic structure and diversity of plants is fundamental to their conservation and permits their sustainable use by local communities. The genus Maytenus (Celastraceae) is composed of plants possessing pharmacological and antioxidant properties. However, the genetic and economic properties of the species M. dasyclada, a typical species of Araucaria forests in Brazil and Uruguay, have been little studied. In this work, the genetic structure and diversity of natural populations of M. dasyclada located in unprotected and preserved forest remnants were investigated using RAPD and isozymes markers. The results demonstrated that in areas of preservation, populations of M. dasyclada possess a relatively high degree of polymorphism and high values for Na, Ne, Shannon index, He and Ho, indicating high genetic variability. Moreover, these protected populations are very close to each other and potentially experience significant gene flow. The results presented here highlight the relevance of preservation areas for the conservation of M. dasyclada, and that populations inhabiting these areas could serve as a genetic source for the recovery of populations in regions where genetic diversity has been lost.