Search

Abgesehen von histopathologischen, allerdings eingeschrankt reproduzierbaren Merkmalen sind keine Kriterien bekannt, die die Entwicklung einer Myelofibrose (MF) als typische Komplikation myeloproliferativer Neoplasien (MPN; chronische myeloproliferative Erkrankungen nach alter Nomenklatur) in fruhen noch unverfaserten Stadien vorhersagen. Altersassoziierte klonale Hamatopoese („age-related clonal hematopoiesis“, ARCH, oder „clonal hematopoiesis of indetermined potential“, CHIP) wird ab dem 65. Lebensjahr in bis zu 10 % dieser Alterskohorte angetroffen. ARCH wurde kombiniert mit typischen Treibermutationen (JAK2, MPL und CALR) bei MPN beschrieben. Um die Auswirkung von ARCH auf das Fibroserisiko von primarer Myelofibrose (PMF) im unverfaserten Fruhstadium (MF 0) zu ermitteln, wurden in dieser Studie 77 Falle von fruher PMF mit spaterer Entwicklung einer Myelofibrose (MF 2 und 3) im Verlauf (Median 6,2 Jahre) hinsichtlich ihres Mutationsstatus untersucht. Als Vergleichskollektiv dienten PMF-Falle (n = 27) ohne Entwicklung einer Myelofibrose mit einer medianen Beobachtungszeit von 7,2 Jahren. Die haufigsten ARCH-Mutationen, die Gene TET2, ASXL1 und DNMT3A betreffend, zeigten dabei keine Korrelation mit dem fibrotischen Progress, wenn sie bereits in der initialen Biopsie bestanden. Andere, eher beim myelodysplastischen Syndrom (MDS) und nicht bei ARCH anzutreffende Mutationen der Hamatopoese wie SRSF2, U2AF1, SF3B1, IDH1/2 und EZH2 fanden sich bei 24,7 % der prafibrotischen PMF-Falle mit spaterem fibrotischen Progress, aber in keinem der prafibrotischen PMF-Falle ohne Fibroseentwicklung (p = 0,0028). Aus diesen Befunden ergibt sich, dass die haufigen ARCH/CHIP-Mutationen TET2, ASXL1 und DNMT3A kein gesteigertes Fibroserisiko bei PMF im unverfaserten Fruhstadium bewirken, wahrend die MDS- und Nicht-ARCH-assoziierten Mutationen SRSF2, U2AF1, SF3B1, IDH1/2 und EZH2 einen signifikanten Risikofaktor fur den schnellen Progress in eine MF (Median 2 Jahre) darstellen.

Chromosomal translocations resulting in fusion genes represent important oncogenic drivers and potential therapeutic targets in rare leukemia subtypes. Formalin-fixed, paraffin-embedded trephines are frequently used in hematologic diagnostic tests and provide relevant access to leukemic cells for further studies, for example, phenotyping in bone marrow fibrosis. However, high-throughput molecular analysis of nucleic acids obtained from this material is challenging, especially the reliable detection of RNA transcripts. Sixty-three formalin-fixed, paraffin-embedded bone marrow trephines of patients with chronic eosinophilic leukemia, chronic myeloid leukemia, acute myeloid leukemia, and myeloproliferative neoplasms were analyzed for gene mutations and the presence of fusion transcripts with a commercial amplicon-based next-generation sequencing approach. Fusion transcripts relevant for diagnosis and therapy could be detected and validated (by RT-PCR) in 25 patients (39.7%). Retrospectively selected material, up to 10 years old, was used for this purpose, and only one sample failed in the RNA analysis (1.6%). This study concludes that amplicon-based fusion transcript detection in bone marrow trephines is feasible and that bone marrow trephines taken for histologic assessment can also be applied for high-throughput molecular analysis.

Besides histopathological findings there are no indicators of increased risk for fibrotic progression in myeloproliferative neoplasms (MPN). Age-related clonal hematopoiesis (ARCH/CHIP) is a frequent finding in the elderly and combinations with MPN driver mutations (JAK2, MPL, and CALR) have been described. To determine the impact of ARCH/CHIP-related mutations for development of fibrosis in primary myelofibrosis (PMF), the mutational status of cases with fibrotic progression from grade 0 to grade 2/3 (n = 77) as evidenced by follow-up bone marrow biopsies (median 6.2 years) was compared with prefibrotic PMF samples without development of fibrosis (n = 27; median follow-up 7.3 years). Frequent ARCH/CHIP-associated mutations (TET2, ASXL1, and DNMT3A) demonstrable at presentation were not connected with fibrotic progression. However, mutations which are rarely found in ARCH/CHIP (SRSF2, U2AF1, SF3B1, IDH1/2, and EZH2) were present in 24.7% of cases with later development of fibrosis and not detectable in cases staying free from fibrosis (P = 0.0028). Determination of the tumor mutational burden (TMB) in a subgroup of cases (n = 32) did not show significant differences (7.68 mutations/MB vs. 6.85 mutations/MB). We conclude that mutations rarely found in ARCH/CHIP provide an independent risk factor for rapid fibrotic progression (median 2.0 years) when manifest already at first presentation.