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The presence of salts in the culture medium and the addition of phytohormones, necessary to break seed dormancy in the in vitro germination of passion fruit, can induce critical values of osmotic potential. This can change the membrane permeability of seeds, affecting the hydration rate, enzyme release, ion transport, pH, and inhibitor values, which may decrease germination percentage. The aim of this study was to evaluate different types of culture media, composed of other substances, combined with mechanical techniques of tegument removal to determine the most appropriate culture medium for the in vitro germination of Passiflora edulis (Sims flavicarpa Deg.) seeds obtained by open pollination. The experimental design was completely randomized in a 10 × 3 factorial scheme (10 culture media × three types of seed-intact, scarified, and cut), with eight replicates and five seeds per plot. Scarified seeds cultivated in a medium composed of a commercial substrate and gibberellic acid presented a higher percentage of germination than intact or cut seeds cultivated in different concentrations of Murashige & Skoog (MS) medium. Scarification is a satisfactory method for breaking the dormancy of passion fruit seeds, and commercial substrates Bioflora® enriched with gibberellic acid may replace in vitro germination. RESUMO A presença de sais no meio de cultura e a adição de fitohormônios, necessários para quebrar a dormência das sementes na germinação in vitro do maracujá, podem levar o potencial osmótico a níveis críticos. Isso pode alterar a permeabilidade da membrana das sementes, afetando a taxa de hidratação, a liberação de enzimas, o transporte iônico, o pH e os teores de inibidores, o que pode acarretar na diminuição do percentual de germinação. O objetivo desta pesquisa foi avaliar diversos tipos de meios de cultura, compostos por diferentes substâncias, combinados com técnicas mecânicas de remoção do tegumento, para determinar o tratamento mais adequado para a germinação in vitro de sementes de Passiflora edulis (Sims flavicarpa Deg.) obtidas por polinização aberta. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 10 × 3 (10 meios de cultura × três tipos de sementes - intactas, escarificadas e cortadas), com oito repetições e cinco sementes por parcela. Sementes escarificadas cultivadas em meio composto de substrato comercial e ácido giberélico apresentaram taxa de germinação superior às sementes intactas ou cortadas cultivadas em diferentes concentrações de meio Murashige & Skoog (MS). A escarificação é um método satisfatório de quebra de dormência de sementes de maracujá e substratos comerciais Bioflora® enriquecidos com ácido giberélico podem substituir o meio MS na germinação in vitro.

Gerbera (Gerbera jamesonii Bolus ex Hook. F.; Asteraceae), is one of the most economically important ornamental plants due to its aesthetic value. In the present study, we established a micropropagation method for the large-scale production of quality planting material of gerbera ‘Pink Melody’. Eighty-six percent of the capitulum explants produced adventitious shoots (15.44 ± 0.34 shoots per capitulum) on Murashige and Skoogs (MS) medium containing 2 mg L−1 6-benzylaminopurine (BAP) after six weeks of incubation. The highest shoot multiplication rate (17 shoots per explant) was obtained on MS medium supplemented with BAP and meta-Topolin (each at 2 mg L−1) after eight weeks. The micro-shoots were successfully rooted (91.35%) on half-strength MS medium containing 2 mg L−1 indole-3-butyric acid (IBA) within four weeks. The micropropagated plantlets were acclimatized with a 97.5% survival rate and produced flowers with no visible morphological aberrations. RESUMO A Gérbera (Gerbera jamesonii Bolus ex Hook. F.; Asteraceae) é uma das plantas ornamentais economicamente mais importantes devido ao seu valor estético. No presente estudo, estabelecemos um método de micropropagação para a produção em larga escala de material de plantio de qualidade de gérbera ‘Pink Melody’. Oitenta e seis por cento dos explantes do capítulo produziram brotos adventícios (15,44 ± 0,34 brotos por capítulo) em meio Murashige e Skoogs (MS) contendo 2 mg L-1 de 6-benzilaminopurina (BAP) após seis semanas de incubação. A maior taxa de multiplicação de brotos (17 brotos por explante) foi obtida em meio MS suplementado com BAP e meta-Topolina (cada um a 2 mg L-1) após oito semanas. Os micro-brotações foram enraizados com sucesso (91,35%) em meio MS de meia força contendo 2 mg L-1 de ácido indol-3-butírico (AIB) em quatro semanas. As plântulas micropropagadas foram aclimatadas com uma taxa de sobrevivência de 97,5% e produziram flores sem aberrações morfológicas visíveis.

Physalis ixocarpa Brot. ex Horm. is considered the most economically important species of the genus. Tissue culture is pointed out as a strategy for its propagation, but researches indicate that in vitro responses are genotype-dependent. This study aimed to evaluate the in vitro morphogenesis of the P. ixocarpa green and purple varieties, in view of the massive propagation of the species. The morphogenic capacity of the explants cotyledonary node, hypocotyl and cotyledon was evaluated in Murashige & Skoog medium supplemented with benzylaminopurine - BAP (0.00, 2.5, 5.0, 7.5 or 10.0 μM) and naphthaleneacetic acid - NAA (0.00 or 2.5 μM), using a completely randomized experimental design, in a 3 x 5 x 2 factorial scheme, with 30 treatments for each variety. The number of shoots per direct and indirect organogenesis and the percentage of explants with callus were analyzed. The in vitro morphogenetic expression of P. ixocarpa is influenced by the type of explant and by the plant regulators BAP and NAA. The cotyledonary node explant is efficient for the production of shoots via direct organogenesis in the two varieties studied. RESUMO Physalis ixocarpa Brot. ex Horm. é considerada a espécie economicamente mais importante do gênero. A cultura de tecidos é apontada como uma estratégia para a sua propagação; no entanto, pesquisas indicam que as respostas in vitro são genótipo-dependentes. Objetivou-se avaliar a morfogênese in vitro das variedades verde e roxa de P. ixocarpa, tendo-se em vista a propagação massiva da espécie. A capacidade morfogênica dos explantes nó cotiledonar, hipocótilo e cotilédone foi avaliada em meio Murashige & Skoog suplementado com benzilaminopurina - BAP (0,00; 2,5; 5,0; 7,5; ou 10,0 µM) e ácido naftalenoacético - ANA (0,00 ou 2,5 μM), utilizando-se delineamento experimental inteiramente casualizado, em esquema fatorial 3 x 5 x 2, sendo 30 tratamentos para cada variedade. Foram analisados o número de brotos por organogênese direta e indireta e a porcentagem de explantes com calo. A expressão morfogenética in vitro de P. ixocarpa é influenciada pelo tipo de explante e pelos reguladores vegetais BAP e ANA. O explante nó cotiledonar é eficiente para a produção de brotos via organogênese direta nas duas variedades estudadas.

The banana tree is one of the most cultivated fruit globally; however, some diseases significantly affect its production, such as Fusarium wilt. The most appropriate measure for controlling this disease in areas with inoculum pressure is the use of resistant cultivars. Therefore, this study aimed to generate banana somaclones of the cultivar ‘Prata-Anã’ resistant to Fusarium wilt by inducing somaclonal variation. ‘Prata-Anã’ stem apexes were established in vitro in MS culture medium and, on a monthly basis, subcultivated in AIA and adenine sulfate supplemented MS medium with added plant regulators: 6-benzylaminopurine (BAP, 4 ml L-1), Thidiazuron (TDZ, 1 ml L-1), and Paclobutrazol (PBZ, 10 ml L-1). The treatments were: T0: no regulator, T1: BAP, T2: TDZ, T3: PBZ, T4: BAP + TDZ, T5: BAP + PBZ, T6: TDZ + PBZ, and T7: BAP + TDZ + PBZ. After the twelfth subculture, the regenerated plants were planted in boxes containing sterile soil infected with Fusarium oxysporum f. sp. cubense, and evaluated after 90 days for resistance to the pathogen. Somaclonal variants T2-1 and T2-2, generated in Treatment 2, with TDZ, were selected as resistant. This result is promising for the launch of a new Fusarium race 1-resistant banana variety. Resumo A bananeira é uma das frutíferas mais cultivadas no mundo; entretanto, algumas doenças têm afetado sua produção, como a murcha de Fusarium. Em áreas onde há pressão de inóculo a, medida mais adequada no controle da doença é a utilização de cultivares resistentes. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi obter somaclones de bananeira da cultivar ‘Prata-Anã’ resistentes à murcha de Fusarium pela indução de variação somaclonal. Para isso, ápices caulinares de bananeira ‘Prata-Anã’ foram estabelecidos in vitro, em meio de cultura MS. Em seguida, foram transferidos e subcuetivados mensalmente para meio MS, suplementado com AIA e sulfato de adenina, acrescidos de diferentes combinações de reguladores: 6-benzilaminopurina BAP (4 ml.L-1), Thidiazuron TDZ (1 ml.L-1) e Paclobutrazol PBZ (10 ml.L-1). Os tratamentos foram: T0: sem regulador; T1: BAP; T2: TDZ; T3: PBZ; T4: BAP + TDZ; T5: BAP + PBZ; T6: TDZ + PBZ; 7: BAP + TDZ + PBZ. As plantas regeneradas, após o décimo segundo subcultivo, foram posteriormente plantadas em caixas d’água contendo solo estéril e infestado com Foc,e aos 90 dias foram avaliadas quanto à resistência ao patógeno. Foram selecionados os variantes somaclonais T2-1 e T2-2, resultantes do tratamento 2 com TDZ, como resistentes. Esse resultado é promissor para o lançamento de uma nova variedade de bananeira resistente à murcha de Fusarium raça 1.

The objective of the research was to evaluate cytokinin concentrations and agricultural residues as physical structuring agents of the culture medium in the in vitro propagation of highbush blueberry (Vaccinium corymbosum ‘Duke’). To that end, three different concentrations of 2-isopentenyladenine (2iP) (0, 5, and 10 mg L-1)in woody plant medium (WPM) and five structuring agents (in natura rice husks, carbonized rice husks, coconut fiber, S-10 Beifort®, and agar)were tested. After 60days of culture, the following parameters were evaluated: survival (%),sprout and shoot lengths (cm),propagation rate, number of sprouts, and shoot dry mass (g). The substrates used as structuring agents were analyzed in terms of pH and electrical conductivity. The in natura rice husk, S-10 Beifort®, and carbonized rice husk did not differ from the agar in terms of the sprout length. The shoots were longer (1.64 cm) in cultures within natura rice husk than in other treatments. In the absence of 2iP, S-10 Beifort® resulted in the highest propagation rate (2.97). Concerning the number of sprouts, S-10 Beifort®, in natura rice husks, and carbonized rice husks did not differ from agar. However, when the regulator was added, the agar performed better in comparison to the other residues. Thus, in natura rice husks, carbonized rice husks, and S-10 Beifort®are potential physical structuring agents of the culture medium that can be used without 2iP. RESUMO: O objetivo deste trabalho foi avaliar concentrações de citocinina e resíduos agrícolas como agentes físicos de estruturação do meio na multiplicação in vitro de mirtileiro (Vaccinium corymbosum) ‘Duke’. Para isso, foram testadas três concentrações de 2-isopenteniladenina (2iP) (0; 5 e 10 mg L-1) no meio WPM (Wood Plant Media); e cinco agentes estruturantes (casca de arroz in natura, casca de arroz carbonizada, fibra de coco, S-10 Beifort® e ágar). Após 60 dias foram avaliados: sobrevivência (%); comprimento de brotações e de parte aérea (cm); taxa de multiplicação; número de brotações e massa seca de parte aérea (g). Analisou-se os substratos utilizados como agentes estruturantes quanto ao pH e condutividade elétrica. A casca de arroz in natura, o S-10 Beifort®, e a casca de arroz carbonizada não diferiram do ágar quanto ao comprimento de brotações. Na casca de arroz in natura obteve-se o maior comprimento de parte aérea (1,64 cm), diferindo dos demais tratamentos. Na ausência de 2iP o S-10 Beifort® apresentou a maior taxa de multiplicação (2,97). Para o número de brotações o S-10 Beifort®, a casca de arroz in natura e carbonizada não diferiram do ágar. Entretanto, quando acrescido de regulador, o ágar apresenta um desempenho maior em relação aos resíduos. Sendo assim, a casca de arroz in natura, a casca de arroz carbonizada, e o S-10 Beifort® apresentam-se como potencias estruturadores físicos do meio de cultura, podendo ser utilizados sem o uso de 2iP.

Poincianella pyramidalis (Tul.) L.P. Queiroz, is an arboreal species endemic to Brazil’s Caatinga biome and an important source of lumber and also of medicinal substances. This study aimed to evaluate the effect of the osmotic agents sucrose, sorbitol and mannitol and the growth retardant paclobutrazol (PBZ) on the induction of slow growth in vitro of P. pyramidalis, seeking to establish alternative techniques for ex situ conservation of the species. In the first experiment, plantlets with seven days of age were inoculated on Woody Plant Medium (WPM) supplemented with four concentrations of sucrose (87.64, 131.46, 175.28 or 219.10 mM) combined with 0.0 or 87.64 mM sorbitol or mannitol. In the second experiment, these plantlets were inoculated on WPM medium with 0.0, 1.5, 3.0, 4.5 or 6.0 µM PBZ and supplemented with 87.64 mM sucrose. For both experiments, the survival percentage of the plants was evaluated every 60 days, and at the end of 240 days, the following parameters were recorded: number of green leaves and senescent leaves; length of the aerial part and longest root; and dry mass of the aerial part and roots. The best results to maintain the quality of the P. pyramidalis plants conserved in vitro were obtained on medium supplemented with 219.10 mM sucrose for up to 240 days without subculture. With respect to PBZ, the concentration of 6.0 μM can be recommended for in vitro conservation of P. pyramidalis for 240 days without the need of subculturing. RESUMO Poincianella pyramidalis (Tul.) L.P. Queiroz, é uma espécie endêmica da Caatinga, se destaca pela importância nas atividades madeireira e medicinal. Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito dos agentes osmóticos sacarose, sorbitol e manitol e o retardante de crescimento paclobutrazol (PBZ) na indução do crescimento mínimo in vitro de P. pyramidalis, visando o estabelecimento de técnicas alternativas para conservação ex situ da espécie. No primeiro experimento, plântulas com sete dias de idade foram inoculadas em meio WPM suplementado com quatro concentrações de sacarose (87,64, 131,46, 175,28 ou 219,10 mM) combinadas com 0,0 ou 87,64 mM de sorbitol ou manitol. No segundo experimento, essas plântulas foram inoculadas em meio WPM contendo diferentes concentrações (0,0, 1,5, 3,0, 4,5 ou 6,0 µM) de PBZ e suplementadas com 87,64 mM de sacarose. Para ambos os experimentos, foi avaliado a porcentagem de sobrevivência das plantas a cada 60 dias. Ao final de 240 dias, foram analisados o número de folhas verdes e folhas senescentes, comprimento da parte aérea e da maior raiz, e massa seca da parte aérea e da raiz. Os melhores resultados para manter a qualidade das plantas de P. pyramidalis conservadas in vitro foram obtidos em meio suplementado com 219,10 mM de sacarose isolada por até 240 dias sem subcultivo. Com relação ao PBZ, a concentração de 6,0 μM pode ser recomendada para conservação in vitro de P. pyramidalis por um período de 240 dias sem a necessidade de subcultivos.

The objective of this work was to evaluate the effects of temperature and osmotic agents on the in vitro conservation of Cape gooseberry (Physalis peruviana). Temperatures at 18 and 25°C, as well as the osmotic agents sucrose, mannitol, and sorbitol were tested. A short-term in vitro conservation of Cape gooseberry can be achieved at 18°C, using 30 g L-1 sucrose. Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da temperatura e de agentes osmóticos na conservação in vitro de físalis (Physalis peruviana). Foram testadas as temperaturas de 18 e 25°C, bem como os agentes osmóticos sacarose, manitol e sorbitol. A conservação de físalis in vitro, em curto prazo, pode ser conseguida a 18°C, em meio com adição de 30 g L-1 de sacarose.

The objective of this work was to evaluate how salt concentrations in media used for in vitro cultures affect the early development of “barueiro” (Dipteryx alata) seedlings obtained from the shoot apex. Two different in vitro culture media - Murashige & Skoog (MS) and wood plant medium (WPM) - in different salt concentrations (25, 50, 75, and 100%) were used. At 120 days, the D. alata seedlings in the MS medium, in its original concentration (100%), developed better than in other concentrations or in the WPM. Therefore, the MS medium was considered the most suitable for ensuring in vitro establishment because it provided greater root length (27.65 cm) and number of leaves per plant (26 leaves) than the other medium. Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar como concentrações de sais que compõe os principais meios utilizados em cultivo in vitro influenciam o desenvolvimento inicial de mudas de barueiro (Dipteryx alata), proveniente de ápice caulinar. Foram utilizados dois meios de cultivo in vitro - Murashige & Skoog (MS) e “wood plant medium” (WPM) - em diferentes concentrações de sais (25, 50, 75 e 100%). Aos 120 dias, as plântulas de D. alata no meio MS, em sua concentração original (100%), apresentaram melhor desenvolvimento que as em outras concentrações ou em meio WPM. Portanto, o meio MS mostrou ser o mais indicado para garantir o estabelecimento in vitro, uma vez que propiciou maior comprimento da raiz (27,65 cm) e número de folhas por planta (26 folhas) que o outro meio.

Lavender is an aromatic ornamental plant that is used widely in the perfume, pharmaceutical, cosmetical and food industries. That is why it is important to study ways to promote a production of lavender raw material. For this, four experiments were carried out in order to study the germination and initial in vitro development of lavender. In the first part the efficiency of the use of hydrogen peroxide in the pre-treatment of seeds inoculated in culture media with different concentrations of gibberellic acid was evaluated. Besides that, the influence of the use of Growlux lamps and white fluorescent lamps on plantlets cultivated in MS and LS media at salts concentrations of 50 and 100% was evaluated. Finally, the effect of the gibberellic acid, putrescine, spermine and spermidine in different concentrations was evaluated. Better results were estimated when hydrogen peroxide pretreatment was applied to the seeds with subsequent inoculation in a medium containing 2,5 mg L-1 of gibberellic acid. The use of Growlux lamps did not influence the characteristics observed when compared to the use of white fluorescent lamps, however it was concluded that the species develops more in a LS medium. Concerning the use of polyamines was found that germination, aerial part and number of leaves of the seedlings were generally favored at the concentration of 0,5 mg L-1 except when spermine was applied, which resulted in a lower number of leaves under this condition. RESUMO: Lavanda é uma planta ornamental aromática que é amplamente utilizada nas indústrias de perfumaria, farmacêutica, cosmética e alimentícia e por isso é importante estudar maneiras de promover a produção dessa matéria-prima. Para tanto, foram realizados quatro experimentos com o objetivo de estudar a germinação e o desenvolvimento inicial in vitro da lavanda. No primeiro experimento testou-se a eficiência do uso de peróxido de hidrogênio no pré-tratamento de sementes inoculadas em meios de cultura com diferentes concentrações de ácido giberélico. Além disso, foi avaliado a influência do uso de lâmpadas Growlux e de lâmpadas fluorescentes brancas em plântulas cultivadas nos meios MS e LS em concentrações de sais de 50 e 100%. Por fim, também estudou-se o efeito dos reguladores ácido giberélico, putrescina, espermina e espermidina em diferentes concentrações. Melhores resultados foram encontrados quando o pré-tratamento com peróxido de hidrogênio foi aplicado às sementes com posterior inoculação em meio contendo 2,5 mg L-1 de ácido giberélico. O uso de lâmpadas Growlux não influenciou as características avaliadas quando comparado ao uso de lâmpadas fluorescentes brancas, entretanto observou-se que as espécies se desenvolvem melhor em meio LS. Com relação ao uso de poliaminas, verificou-se que a germinação, parte aérea e número de folhas das plântulas foram favorecidas na concentração de 0,5 mg L-1, exceto quando se aplicou espermina, que resultou em menor número de folhas nessa condição.

EnglishHyptis marrubioides (Lamiaceae) is a medicinal plant that is native from Brazilian Cerrado. In vitro propagation techniques make use of elicitors to alter metabolic pathways, affecting how molecules are produced both qualitatively and quantitatively. This research aimed to evaluate how abiotic elicitors salicylic acid (SA) and silver nitrate (SN) at concentrations of 30µM or 60µM influence Hyptis marrubioides seedling growth by two different in vitro culture methods. The rutin content was quantified by HPLC-DAD. Compared to an untreated culture, the H. marrubioides methanolic extracts cultured in MS medium for 10 days followed by culture in MS medium containing SN (30µM) for 20 days had 1.28 times higher rutin content. In a second experiment, seedlings were cultured in MS medium for 20 days, and then the desired elicitor was added to the culture and allowed to remain in contact with the medium for three and six days. SA (30µM) gave the best results: rutin production was 16.56-foldhigher than the control after six days. SN (30µM) increased the rutin content by 1.17-fold. At the two concentrations evaluated during the elicitation experiments, neither SA nor SN altered the growth parameters shoot length, leaf number, and fresh and dry weight of H. marrubioides seedlings grown in vitro as compared to the control. Based on these results, the abiotic elicitors SA and SN successfully provide Hyptis marrubioides with increased rutin content in vitro. Key words: salicylic acid; HPLC-DAD; tissue culture; silver nitrate; elicitation; plant growth regulators portuguesHyptis marrubioides (Lamiaceae) e uma planta medicinal nativa do Cerrado brasileiro. Tecnicas de propagacao in vitro fazem uso de elicitores para alterar as vias metabolicas, afetando a producao de moleculas qualitativa e quantitativamente. Este trabalho teve como objetivo avaliar como os elicitores abioticos acido salicilico (SA) e nitrato de prata (SN) nas concentracoes de 30µM ou 60µM influenciam no crescimento de plântulas de Hyptis marrubioides por dois diferentes metodos de cultivo in vitro. O teor de rutina foi quantificado por CLAE-DAD. Em comparacao com uma cultura nao tratada, os extratos metanolicos de H. marrubioides cultivados em meio MS por 10 dias, seguidos de cultura em meio MS contendo SN (30µM) por 20 dias, apresentaram 1,28 vezes maior teor de rutina. Em um segundo experimento, as plântulas foram cultivadas em meio MS por 20 dias, e entao o elicitor desejado foi adicionado a cultura e deixado em contato com o meio por tres e seis dias. SA (30µM) forneceu os melhores resultados na producao de rutina, sendo 16,56 vezes maior do que o controle apos seis dias. SN (30µM) aumentou o teor de rutina em 1,17 vezes. Nas duas concentracoes avaliadas durante os experimentos de elicitacao, nem SA nem SN alteraram os parâmetros de crescimento, como comprimento da parte aerea, numero de folhas ou peso fresco e seco das plântulas de H. marrubioides cultivadas in vitro em relacao ao controle. Com base nestes resultados, os elicitores abioticos SA e SN forneceram com sucesso Hyptis marrubioides in vitro com maior conteudo de rutina. Palavras-chave: acido salicilico; CLAE-DAD; cultura de tecidos; elicitacao; nitrato de prata; reguladores de crescimento vegetal

Physalis peruviana L. (Solanaceae) is an herbaceous fruit-bearing species that has been gaining market acceptance due to its nutritional and medicinal potential. The main limitations to its cultivation are the short reproductive cycle, the susceptibility of the fruits to pests and the lack of information about the crop management. Hence, studies are necessary to develop strategies for its propagation. This study aimed to evaluate the effects of 6-benzylaminopurine (BAP) and explants on the morphogenetic potential of P. peruviana, as well as to establish a protocol for the micropropagation of the species via direct organogenesis. To evaluate the morphogenesis, cotyledonary node, cotyledon, leaf, epicotyl, hypocotyl and root explants were inoculated in Murashige & Skoog culture medium with half the normal concentration of salts and supplemented with cytokinin BAP (0.00 µM, 2.22 µM, 4.44 µM, 6.66 µM or 8.88 µM), plus 30 g L-1 of sucrose and 7 g L-1 of agar. Aiming at a direct production of shoots, the cotyledonary node explant was submitted to 0.00 µM, 2.22 µM, 4.44 µM, 6.66 µM, 8.88 µM, 13.32 µM, 17.76 µM or 22.20 µM of BAP. The obtained shoots were tested regarding their rooting potential in media with and without the addition of activated charcoal and then were transferred for acclimatation. The cotyledonary node and leaf explants were the most efficient sources for the regeneration of shoots via direct and indirect organogenesis, respectively. The most significant results for direct shoot production were obtained with 12.50 µM of BAP. These shoots were successfully rooted in vitro in medium without activated charcoal, and the microplants acclimated in vegetable earth attained 100 % of survival after 90 days of acclimatation. RESUMO Physalis peruviana L. (Solanaceae) é uma frutífera herbácea, que vem se consolidando no mercado em virtude de suas potencialidades nutricionais e medicinais. As limitações à sua produção são o ciclo reprodutivo curto, o acometimento dos frutos por pragas e a carência de estudos, o que justifica a busca de estratégias para a sua propagação. Objetivou-se avaliar os efeitos de 6-benzilaminopurina (BAP) e explantes no potencial morfogênico de P. peruviana, bem como estabelecer um protocolo para a micropropagação da espécie via organogênese direta. Para avaliar a morfogênese, explantes (nó cotiledonar, cotilédone, folha, epicótilo, hipocótilo e raiz) foram inoculados em meio de cultura Murashige & Skoog com metade das concentrações salinas e suplementado com a citocinina BAP (0,00 µM; 2,22 µM; 4,44 µM; 6,66 µM; ou 8,88 µM), acrescido de 30 g L-1 de sacarose e 7 g L-1 de ágar. Visando à produção de brotos via direta, o explante nó cotiledonar foi submetido a 0,00 µM; 2,22 µM; 4,44 µM; 6,66 µM; 8,88 µM; 13,32 µM; 17,76 µM; ou 22,20 µM de BAP. Os brotos obtidos foram submetidos ao enraizamento em meios com e sem adição de carvão ativado e, posteriormente, transferidos para aclimatização. Verificou-se que o nó cotiledonar e a folha foram as fontes de explantes mais eficientes para a regeneração dos brotos via organogênese direta e indireta, respectivamente. Os resultados mais significativos para a produção de brotos via direta foram obtidos com 12,50 µM de BAP. Estes brotos foram enraizados in vitro em meio isento de carvão, e as microplantas aclimatizadas em terra vegetal alcançaram 100 % de sobrevivência aos 90 dias da aclimatização.

Papaya (Carica papaya L.) is a fruit tree of great economic and food interest worldwide. Its propagation can occur both sexually and asexually. Traditionally, it is propagated by seeds; however, vegetative propagation has been often used with the use of in vitro and ex vitro culture techniques. In vegetative propagation, the cutting method has been extensively explored. Research has also been developed using grafting. In recent years, papaya cultivation has also become a model for other fruit plants in the use of biotechnological techniques aiming applications ranging from germplasm conservation to genetic transformation of plants. Since the beginning of the 1970s, the culture of papaya tree tissues has been intensely studied, allowing greater control of in vitro development, especially for micropropagation, organogenesis and somatic embryogenesis techniques. Resumo O mamoeiro (Carica papaya L.) é uma fruteira de bastante interesse econômico e alimentar em todo o mundo. Sua propagação pode ocorrer tanto por via sexuada como assexuada. Tradicionalmente é propagado por sementes, entretanto, a propagação vegetativa vem sendo frequentemente utilizada com o uso de técnicas de cultura in vitro e ex vitro. Na propagação vegetativa o método de estaquia tem sido bastante explorado. Pesquisas também tem sido desenvolvidas utilizando-se a enxertia. A cultura do mamoeiro tem se tornado também, nos últimos anos, um modelo para outras fruteiras no que diz respeito ao uso de técnicas biotecnológicas, visando aplicações que vão da conservação de germoplasma a transformação genética de plantas. Desde o início da década de 70, a cultura de tecidos do mamoeiro vem sendo intensamente estudada, permitindo maior controle do desenvolvimento in vitro, especialmente para as técnicas de micropropagação, organogênese e embriogênese somática.

portuguesNeste estudo, realizamos BSA para identificar marcadores geneticos ligados a tolerância ao sal. Testamos a diversidade genetica entre quatro amostras de DNA volumoso de clones mutantes induzidos por EMS, e uma amostra de DNA volumoso de clone nao mutado de Petunia para tolerância a sal em culturas de calos in vitro usando marcadores RAPD e ISSR. Dos 36 primers RAPD e 16 ISSR identificados, 25 e 13 foram efetivamente usados para amplificar o DNA genomico de todas as cinco amostras, respectivamente. No total, foram obtidos 114 produtos de amplificacao RAPD, dos quais 28% eram polimorficos e 2% eram bandas especificas de genotipos. Dos 64 produtos de amplificacao ISSR obtidos, 51% eram polimorficos e 1% eram bandas especificas de genotipo. Os resultados deste estudo indicam a existencia de dois padroes de segregacao distorcida entre os marcadores estudados. O primeiro indica as diferencas entre os clones nao mutantes de Petunia e seus mutantes putativos. O segundo foi observado apenas entre mutantes putativos e mutantes putativos testados quanto a tolerância ao sal em cultura in vitro. Tanto a analise RAPD quanto a ISSR detectaram com sucesso a associacao com alteracoes induzidas por mutagenese quimica e salinidade. Alem disso, nossos resultados indicam que o metodo BSA pode ser util na deteccao rapida de marcadores moleculares para posterior selecao assistida por marcadores. Palavras-chave: analise segregante a granel; mutagenese quimica; ISSR; RAPD; Petunia × atkinsiana D. Don; estresse salino; cultura de tecidos. EnglishIn this study, we performed BSA to identify genetic markers linked to salt tolerance. We tested the genetic diversity among four bulked DNA samples of EMS induced mutant clones and one bulked DNA sample of non-mutated clone of Petunia for salt tolerance in in vitro callus cultures using RAPD and ISSR markers. Out of the 36 RAPD and 16 ISSR primers identified, 25 and 13 were effectively used to amplify genomic DNA of all the five bulked samples, respectively. In total, 114 RAPD amplifications products were obtained, of which 28% were polymorphic and 2% were genotype-specific bands. Out of the 64 ISSR amplification products obtained, 51% were polymorphic and 1% was genotype-specific bands. Results of this study indicated the existence of two patterns of distorted segregation among the studied markers. The first one indicates the differences between non-mutated clones of Petunia and its putative mutants. The second one was observed only between putative mutants and putative mutants tested for salt tolerance in in vitro culture. Both RAPD and ISSR analysis successfully detected the association with changes induced by chemical mutagenesis and salinity. Furthermore, our results indicate that BSA method can be useful in the rapid detection of molecular markers for further marker-assisted selection. Key words: bulk segregant analysis; chemical mutagenesis; ISSR; RAPD; Petunia × atkinsiana D. Don; salt stress; tissue culture.

Nursery trees of stone fruits (Prunus spp.) are traditionally produced by union of two distinct genotypes - the rootstock and the scion - which, by grafting, form a composite plant that will be maintained throughout of all plant life. In Brazil, the rootstocks are predominantly seed propagated and therefore usually results in heterogeneous trees for vigor and edaphic adaptation. However, with advances in rootstock breeding programs that released cultivars and certification in several countries (notably in Europe), the system will come gradually evolving for vegetative propagation (cuttings and tissue culture) and use of seeds of selected rootstocks with specific characteristics and potted nursery trees production. For scion cultivar propagation, the budding system (with its many variations) has predominantly been adopted in major producing countries. This review had as objective to comment main propagation methods adopted for rootstocks and scion in peach, nectarine and plum, and recent technical progress obtained as well as the needs of improvement for nursery tree production. RESUMO Mudas de frutíferas de caroço (Prunus spp.) são tradicionalmente produzidas pela união de dois genótipos distintos - o porta-enxerto e a cultivar copa - que, por meio da enxertia, formam uma planta composta. No Brasil, os porta-enxertos são predominantemente obtidos de sementes, normalmente resultando em plantas com heterogeneidade de suas características. Com os avanços nos programas de melhoramento genético de porta-enxertos, lançamentos de cultivares e programas de certificação de mudas em diversos países (notadamente na Europa), o sistema vêm gradativamente evoluindo para a propagação vegetativa (estaquia e cultura de tecidos), uso de sementes de genótipos selecionados com características específicas e produção de mudas em embalagens. Para a propagação das cultivares copa, a enxertia (com suas diversas variações) têm sido predominantemente adotada nos principais países produtores. O objetivo desta revisão bibliográfica é abordar os principais métodos de propagação adotados para porta-enxertos e para copas em pessegueiro, nectarineira e ameixeira, e os avanços técnicos obtidos, bem como as necessidades de melhorias para a produção de mudas de qualidade.

O objetivo deste trabalho foi determinar a concentração de manitol para a germinação e crescimento mínimo in vitro do coqueiro (Cocos nucifera). Os seguintes acessos foram utilizados: Anão-vermelho-do brasil-de-gramame (BRDG), Anão-amarelo-da-malásia (MYD), Gigante-do-brasil-praia-do-forte (BRA), Gigante-da-polinésia (PYT) e Gigante-de-rennel (RIT). Os embriões foram colocados em meio de cultura Y3 a diferentes concentrações de manitol (0, 0,1, 0,2, 0,3 e 0,4 mol L-1). Verificou-se inibição do crescimento da parte aérea na presença de 0,1, 0,2 e 0,3 mol L-1, para MYD e BRDG, e de 0,1 e 0,2 mol L-1, para PYT, BRA e RIT. O uso do manitol é uma estratégia promissora para a conservação por crescimento mínimo.

O objetivo deste trabalho foi avaliar as características florais e carpométricas, a viabilidade dos grãos de pólen e a capacidade germinativa de sementes de cultivares de amoreira‑preta. Foram avaliadas as cultivares Brazos, Caingangue, Cherokee, Choctaw, Comanche, Guarani, BRS Tupy e Ébano. Utilizou-se um delineamento experimental inteiramente casualizado com as oito cultivares e dez repetições. Foram feitas avaliações quanto a: número de estames, carpelos, pétalas e sépalas; composição do meio de cultura; número de grãos de pólen por antera e por flor; taxa de germinação de grãos de pólen; percentagem de frutificação; massa de matéria fresca, dimensões e número de sementes dos frutos; massa e dimensões dos drupetes; e percentagem de emergência de plântulas. O meio de cultura estabelecido para as cultivares de amoreira‑preta foi acrescido de 90 g L‑1 de sacarose e 400 mg L‑1 de ácido bórico, com pH aferido para 6,5 e meio solidificado com 8 g L‑1 de ágar. 'Caingangue', 'Ébano' e 'BRS Tupy' apresentaram baixa germinação de grãos de pólen. 'Ébano' apresentou frutos arredondados e com poucos drupetes. 'Choctaw' e 'Comanche' apresentaram baixa percentagem de emergência de plântulas. 'Brazos' destacou-se na maioria das características avaliadas e é considerada como boa progenitora para programas de melhoramento genético. The objective of this work was to evaluate the floral and fruit characteristics, pollen grain viability, and seed germination capability of blackberry cultivars. The cultivars Brazos, Caingangue, Cherokee, Choctaw, Comanche, Guarani, BRS Tupy and Ébano were evaluated. A completely randomized experimental design was used, with the eight cultivars and ten replicates. Evaluations were made for: number of stamens, carpels, petals, and sepals; basic composition of the culture medium; number of pollen grains per anther, and per flower; germination rate of pollen grains; percentage of fruiting; fresh biomass, dimension, and number of fruit seeds; mass and dimension of drupets; and percentage of seedling emergence. The established culture medium for the cultivars was added with 90 g L‑1 sucrose and 400 mg L‑1 boric acid, with adjusted pH to 6.5, and solidified medium with 8 g L‑1 agar. 'Caingangue', 'Ébano' and 'BRS Tupy' showed low‑pollen grain germination. 'Ébano' showed round fruit with few drupets. 'Choctaw' and 'Comanche' had low percentage of seedling emergence. 'Brazos' stood out for most of the evaluated characteristics, and it is considered as a good parent for breeding programs.

The aim of this research was to evaluate the use of light emitting diodes (LEDs) instead of white fluorescent lamps as light source and adequate growth-medium sucrose concentration for sugarcane micropropagation (Saccharum officinarum L.). Sugarcane (RB 872552 variety) bud explants were evaluated during the multiplication and rooting phases under controlled growth-room conditions. Different light sources (blue, red and green LEDs; Growlux and white fluorescent lamps) and different medium sucrose concentrations (0; 15; 30 and 45g L-1) were used, maintaining constant light intensity (20µmol m-2 s-1), photoperiod (16h) and temperature (25+2°C). The experiment was a completely randomized design, and treatments were arranged in a 5x4 factorial (five light sources and four medium sucrose concentrations) with six replications. Sugarcane bud growth was satisfactory under the three LED types studied. The presence of sucrose in growth media was essential for bud multiplication and rooting. Nevertheless, each light source requires the respective medium sucrose concentration adjustment for best results. Red LEDs provided a significantly high multiplication rate (although not the highest) with 8.5 buds per sub-culture and 34.9g L-1 of sucrose; also, the highest bud length (33.3mm) and the best plantlet acclimatization. Therefore, LED sources can advantageously substitute fluorescent lamps in laboratories of sugarcane micropropagation.

The tissue culture can contribute to the propagation of several economic species, such as the bromeliads. This research aimed at evaluating the auxins type and concentration in the in vitro and ex vitro rhizogenesis of Neoregelia concentrica bromeliad. N. concentrica shoots were induced in a growth medium with 15.0 µM of 6-benzylaminopurine, for 80 days, followed by sub-cultivation in phytoregulator-free medium, for 45 days. In the in vitro rhizogenesis, the shoots grew in a medium supplemented with indole-3-butyric acid (IBA) or naphthalene-acetic acid (NAA), at the concentrations of 0.0 µM, 1.0 µM, 2.0 µM, 3.0 µM and 4.0 µM. In the ex vitro rhizogenesis, the bases of shoots were immersed, for 60 minutes, in IBA or NAA solutions, at the concentrations of 0.0 µM, 5.0 µM, 10.0 µM and 15.0 µM. After immersion, the shoots were planted in plastic trays with vermiculite. At the end of each rhizogenesis method, the phytotechnical parameters analysis was carried out. For the in vitro rhizogenesis, a higher number of roots were observed when the shoots were cultivated in concentrations higher than 1.0 µM of NAA, when compared to the IBA. However, the rooting rate differed only at 30 days after the in vitro growth, with a higher root induction in the shoots grown with NAA. At 60 days, the rooting rate was higher than 90% and statistically similar in all treatments. In the ex vitro rhizogenesis, a better formation of the rooting system was observed when 5.0 µM of IBA was applied, with higher rooting averages and number of roots. A cultura de tecidos pode contribuir na propagação de várias espécies de interesse comercial, como as bromeliáceas. Objetivou-se avaliar o tipo e a concentração de auxinas na rizogênese in vitro e ex vitro da bromélia Neoregelia concentrica. Brotos de N. concentrica foram induzidos em meio de cultivo com 15,0 µM de 6-benzilaminopurina, por 80 dias, com posterior subcultivo em meio isento de fitorreguladores, por 45 dias. Na rizogênese in vitro, os brotos foram cultivados em meios suplementados com ácido indol-3-butírico (AIB) ou ácido-naftaleno-acético (ANA), nas concentrações de 0,0 µM; 1,0 µM; 2,0 µM; 3,0 µM; e 4,0 µM. Para a rizogênese ex vitro, os brotos tiveram suas bases imersas, por 60 minutos, em solução de AIB ou ANA, nas concentrações de 0,0 µM; 5,0 µM; 10,0 µM; e 15,0 µM. Após imersão, os brotos foram plantados em bandejas plásticas contendo vermiculita. Ao final de cada método de rizogênese, foi realizada a análise de parâmetros fitotécnicos. Na rizogênese in vitro, observou-se maior número de raízes quando os brotos foram cultivados com concentrações superiores a 1,0 µM de ANA, em relação ao AIB. Contudo, a percentagem de enraizamento diferiu apenas aos 30 dias de cultivo in vitro, com maior indução de raízes nos brotos cultivados com ANA. Aos 60 dias, o enraizamento foi superior a 90% e estatisticamente semelhante em todos os tratamentos. Na rizogênese ex vitro, observou-se melhor formação do sistema radicular quando aplicados 5,0 µM de AIB, com as maiores médias para enraizamento e número de raízes.

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The goal of the present study was to evaluate the germination, initial growth, and in vitro co-cultivation of Comanthera curralensis Moldenke, a "sempre viva" native of the Chapada Diamantina state of Bahia. Full strength (MS) and half-strength MS (MS1/2) growth media supplemented with two different sucrose concentrations (15 and 30g L-1) were tested for germination and initial plant growth. Three different plant densities were tested by in vitro culture (8, 10 and 12 plants per container). MS1/2 medium with 15g L-1 sucrose resulted in a higher percentage of germination and plant growth for the in vitro establishment of C. curralensis. The use of 12 plants per container is indicated for cost reduction in C. curralensis in vitro production. RESUMO: Este trabalho teve como objetivo avaliar a germinação, o crescimento inicial e o co-cultivo in vitro de Comanthera curralensis Moldenke, uma "sempre viva" nativa da Chapada Diamantina-BA. Para germinação e crescimento inicial, foram testados os meios de cultura MS completo e MS1/2 suplementados com duas concentrações de sacarose (15 e 30gL-1); no cultivo in vitro, foram testadas três quantidades de plantas por recipiente (8,10 e 12). A utilização do meio MS1/2 com 15gL-1 de sacarose proporcionou maiores porcentagem de germinação crescimento das plantas no estabelecimento in vitro de C. curralensis , e o uso de 12 plantas por recipiente é indicado para a redução de custos na produção in vitro da espécie.

In micropropagation, especially for mangaba tree botanical variety of Northeastern Brazil, limiting aspects such as ethylene accumulation in the cultivation flask and loss of vigor in subcultures have been observed. This study was aimed at assessing the technical and scientific knowledge of the in vitro propagation of botanical mangaba tree variety and at improving the micropropagation protocol, establishing the in vitro cultivation time, the best type of flask sealing and explant at different micropropagation stages. For the establishment phase and for the first and second subcultures, the MS medium with 3% sucrose and 0.6% agar, supplemented with 1 mg L-1 IAA and 1 mg L-1 BA was used. Evaluations were performed at 30, 50 and 65 days of in vitro cultivation. The best types of flask sealing for the establishment phase were the PVC film and Para-film® and for the first subculture the Para-film® seal. In the second subculture the PVC film and Para-film® seals promoted the best growth. The median and basal nodal segments presented the best performance in the first subculture. No significant effect of explant type was observed in the second subculture. The ideal subculture interval in the establishment phase and the first and second subcultures is 50 days. Na micropropagação, especialmente para mangaba, variedade botânica da árvore do Nordeste do Brasil, aspectos limitantes, como acúmulo de etileno no recipiente de cultivo e perda de vigor em subculturas têm sido observados. Neste estudo, objetivou-se avaliar o conhecimento técnico e científico da propagação in vitro de mangabeira, variedade botânica do Nordeste do Brasil, e melhorar o protocolo de micropropagação, o melhor tipo de vedação frasco e explante em diferentes etapas. Para a fase de estabelecimento e para as subculturas primeiro e segundo, foi utlizado o meio MS com 3% de sacarose e agar 0,6%, suplementado com 1 mg L-1 de AIA e 1 mg L-1 de BAP. As avaliações foram realizadas aos 30, 50 e 65 dias de cultivo in vitro. Os melhores tipos de vedação para a fase de estabelecimento foram o filme PVC e Para-filme® e, para o primeiro subcultivo, o Para-filme®. No segundo subcultivo, o filme PVC e Para-filme® promoveram o melhor crescimento in vitro. Os segmentos nodais médio e basal apresentaram melhor desempenho no primeiro subcultivo. Nenhum efeito significativo do tipo de explante foi observado no segundo subcultivo. O intervalo de tempo ideal para as fases de estabelecimento, primeiro e segundo subcultivos é de 50 dias.

Em batata, a cultura de tecidos é utilizada para recuperar cultivares infectadas por viroses, entretanto, o cultivo in vitro pode conduzir à variação somaclonal. O presente estudo teve como objetivos identificar somaclones e avaliar o efeito do tipo de explante e do tempo de subcultivo sobre a ocorrência de variantes somaclonais nas cultivares 'Asterix' e 'Macaca'. Tubérculos produzidos em plantas regeneradas por organogênese direta e indireta de explantes derivados do cultivo de ápices caulinares de clones em subcultivo há 12 (clone novo) ou 70 (clone velho) meses em meio nutritivo MS e cultivadas em campo foram avaliados em relação a seis descritores mínimos da batata. As médias observadas foram comparadas aos padrões descritos para as cultivares e somente foram consideradas somaclones aquelas que foram enquadradas em uma classe fenotípica diferente do padrão da cultivar respectiva. Em 'Asterix' e 'Macaca' ocorreram somaclones em quatro e dois descritores, respectivamente, contudo, apenas no formato e cor da polpa do tubérculo, houve variação somaclonal, simultaneamente, nas duas cultivares. Variantes somaclonais podem ser identificadas pelo uso dos descritores mínimos de tubérculo. 'Asterix' e 'Macaca' são, igualmente, suscetíveis à ocorrência de variação somaclonal, mas esse fenômeno afeta de maneira diferenciada os descritores mínimos nas duas cultivares. O tempo de subcultivo age diferencialmente sobre as características morfoagronômicas.Doze meses de subcultivo já são suficientes para originar somaclones. Segmentos apicais caulinares e segmentos nodais, originados por organogênese direta ou indireta, são explantes igualmente instáveis para a produção de batata-semente. In potato, tissue culture is used to retrieve cultivars infected by viruses, however, in vitro culture can lead to somaclonal variation. This study aimed to identify somaclones and evaluate the effect of type of explant and subculture time on the occurrence of somaclonal variants in cultivars 'Asterix' and 'Macaca'. Tubers produced in plants regenerated by direct and indirect organogenesis of shoot apical and nodal segments derived from the culture of shoot tips of clones in subculture for 12 (young clone) or 70 (old clone) months in nutritive medium MS and cultivated in field were assessed in six minima descriptors of the potato. The averages were compared to patterns described for the cultivars and somaclones were considered only those that were framed in a different phenotypic class from standard of cultivar. In 'Asterix' and 'Macaca' somaclonal variants were observed in four and two descriptors, respectively, however, only in the tuber shape and flesh color occurred somaclonal variation simultaneously in both cultivars. Moreover, remained stable the depth of the eyes and the greening of the tuber. Somaclonal variants can be identified by use of minima descriptors of tuber. 'Asterix' and 'Macaca' are equally susceptible to somaclonal variation. Twelve months of subculture is enough to cause somaclones in both cultivars. Shoot apical and nodal segments derived by direct or indirect organogenesis, are explants equally unstable to the production of seed potatoes.

Transformação genética é considerada uma importante ferramenta auxiliar no melhoramento genético de plantas cítricas. Entretanto, a eficiência de transformação pode variar em função de diversos fatores, incluindo a própria construção gênica utilizada. Este trabalho buscou avaliar a eficiência de transformação genética de plantas de citrange 'Carrizo' [Poncirus trifoliata (L.) Raf. x Citrus sinensis (L.) Osbeck] com duas construções gênicas diferentes contendo o gene uidA (GUS) sob o controle dos promotores Arabidopsis thaliana phloem protein 2 (AtPhP2) e Arabidopsis thaliana sucrose transporter 2 (AtSuT2). Segmentos de epicótilo de plântulas germinadas in vitro foram utilizados como explantes. O gene nptII, que confere resistência ao antibiótico canamicina, foi utilizado nas construções gênicas como agente de seleção para regeneração de plantas transgênicas. O ensaio histoquímico com X-GLUC foi realizado em todas as brotações regeneradas para verificar a expressão do gene uidA. Dos 4.790 segmentos de epicótilo utilizados, registrou-se a regeneração de 366 brotações com reação positiva no ensaio histoquímico, as quais foram enxertadas em porta-enxertos cultivados in vitro. Cinco dessas brotações, de cada construção gênica, foram selecionadas para análise da PCR, com primers específicos para amplificação da sequência do gene uidA. A inserção do transgene foi confirmada por PCR em todas as brotações selecionadas. A eficiência de transformação e o número de brotos escapes, avaliada pelo teste histoquímico, variaram em função das construções gênicas utilizadas. Genetic transformation is considered an important tool to be applied in citrus genetic improvement. However, transformation efficiency may vary according to several factors, including the genetic construction utilized. This work aimed to evaluate the transformation efficiency of 'Carrizo' citrange [Poncirus trifoliata (L.) Raf. x Citrus sinensis (L.) Osbeck], containing two different gene constructions including the uidA (GUS) gene controlled by the promoters Arabidopsis thaliana phloem protein 2 (AtPhP2) and Arabidopsis thaliana sucrose transporter 2 (AtSuT2). Epicotil segments from in vitro germinated seedlings were used as explants. The nptII gene, which confers resistance to the antibiotic kanamycin, was used in the constructions as a selection agent to regenerate transgenic plants. X-GLUC histochemical analysis was performed in all regenerated shoots in order to verify the expression of the uidA gene. From the 4790 epicotyl segments utilized, 366 shoots had a positive reaction in the histochemical analysis, and were further grafted on in vitro grown rootstocks. Five out of these shoots, from each gene construction, were selected to perform PCR analysis, with specific primers for uidA gene sequence amplification. All selected plants evaluated by PCR confirmed gene integration. Transformation efficiency and number of non-transformed shoots, evaluated by histochemical analysis, varied among gene constructions utilized

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T19:03:39Z No. of bitstreams: 1 S1413-70542010000600018.pdf: 79757 bytes, checksum: d0011e3ab6e80bb3cfe297ad12c96c21 (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T19:03:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S1413-70542010000600018.pdf: 79757 bytes, checksum: d0011e3ab6e80bb3cfe297ad12c96c21 (MD5) Previous issue date: 2010-12-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T20:05:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1413-70542010000600018.pdf: 79757 bytes, checksum: d0011e3ab6e80bb3cfe297ad12c96c21 (MD5) S1413-70542010000600018.pdf.txt: 22217 bytes, checksum: dee3ed001e72933712f7433b4debc1d4 (MD5) Previous issue date: 2010-12-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:21:30Z No. of bitstreams: 2 S1413-70542010000600018.pdf: 79757 bytes, checksum: d0011e3ab6e80bb3cfe297ad12c96c21 (MD5) S1413-70542010000600018.pdf.txt: 22217 bytes, checksum: dee3ed001e72933712f7433b4debc1d4 (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:21:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S1413-70542010000600018.pdf: 79757 bytes, checksum: d0011e3ab6e80bb3cfe297ad12c96c21 (MD5) S1413-70542010000600018.pdf.txt: 22217 bytes, checksum: dee3ed001e72933712f7433b4debc1d4 (MD5) Previous issue date: 2010-12-01 A pesquisa da composição do meio de cultura mais adequado à espécie vegetal e ao tipo de explante empregado é o fator de maior relevância da cultura de tecidos. O cultivo de ápice caulinar com recuperação da planta matriz é uma técnica de grande impacto para a propagação de plantas in vitro, regeneração de plantas livres de vírus, conservação de germoplasma e modificação genética. Objetivou-se, neste trabalho, avaliar composições do meio de cultivo para organogênese direta in vitro a partir de ápices caulinares pertencentes à população FCA-UNESP-PB de mamoneira (Ricinus communis L.), com vistas à propagação clonal de genótipos elite. Foram testadas quatro formulações: MS básico (T1), MS modificado 1 (T2), MS modificado 2 (T3) e WPM (T4), em delineamento experimental inteiramente casualizado, com 20 repetições em cada tratamento, sendo a repetição 1 ápice caulinar/frasco. O T3 apresentou-se superior e diferiu significativamente dos outros tratamentos apresentando 35% dos ápices caulinares diferenciados e desenvolvidos; seguiu-se o T2 com 10% e os tratamentos T1 e T4 não apresentaram diferenciação de tecidos. Os resultados permitiram concluir que os balanceamentos de sais minerais nos meios de cultura avaliados, especialmente a relação NO3 / NH4 e ausência de FeSO4.7H2O, indicaram grande influência no desenvolvimento de ápices caulinares de mamoneira. The research of the culture medium composition suitable for plant species and the type of explant to be used is the most significant factor in plant tissue culture. The culture of stem tips with plant donor recovery is a technique of great impact for the in vitro plant production, regeneration of virus-free plants, germoplasm conservation and genetic modification. The objective of this study was to evaluate culture media composition in vitro on direct organogenesis of the FCA-UNESP-PB population of castor bean (Ricinus communis L.), from stem tips for clonal propagation of elite genotypes. Four formulations were tested: basic MS (T1), modified MS 1 (T2), modified MS 2 (T3) and WPM (T4) in a completely randomized experimental design with 20 replicates pertreatment with 1stem tip/flask. The treatment T3was superior, and differed significantly from the other treatments, with 35% of stem tips developed, followed by 10% in T2. T1 and T4 showed no plant tissue differentiation. The results allowed to conclude that the balance of mineral salts and culture media evaluated especially the rate NO3 / NH4 and the absence of FeSO4.7H2O showed nigh influence on the development of stem tips of castor bean. Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agronômicas Universidade Estadual Paulista Faculdade de Ciências Agronômicas

Realizou-se um estudo para avaliar o efeito de fontes de luz na micropropagação de morangueiro, com níveis crescentes de BAP no meio de cultivo. Para tanto, inocularam-se gemas de brotações da cultivar 'Sabrosa' em meio MS com 30g L-1 de sacarose, 100mg L-1 de mio-inositol, 7g L-1 de ágar e BAP (0; 0,3; 0,6; 0,9; e 1,5mg L-1), em pH 5,8. Os explantes foram cultivados a 25+2°C, com 16 horas de fotoperíodo e luminosidade de 20µmol m-2 s-1, esta última fornecida por diferentes fontes de luz (LED azul-EDEB 3LA1, LED verde-EDET 3LA1, LED vermelho-EDER 3LA3, lâmpada fluorescente Growlux e lâmpada fluorescente branca). Os tratamentos foram dispostos em delineamento inteiramente ao acaso em um fatorial 5x5 (concentrações de BAP x fontes de luz), com seis repetições. O experimento foi repetido em três subcultivos sucessivos de 35 dias cada. Nestes avaliaram-se o número de brotações por explante e a altura das brotações. Ao final do terceiro subcultivo, determinaram-se, ainda, as concentrações de carotenoides e de clorofilas a e b, independentemente do nível de BAP. Maior número de brotações por explante foi obtido sob LEDs vermelhos e verdes. Concentrações de BAP no meio de cultura entre 0,82 e 1,22mg L-1, dependendo da fonte de luz, proporcionaram maior multiplicação in vitro de brotações. Sob todas as fontes de luz foram obtidas brotações de maior comprimento em meio isento de BAP. Brotações cultivadas sob LEDs vermelhos apresentaram maior quantidade de pigmentos fotossintéticos, enquanto aquelas sob LEDs verdes e lâmpadas Growlux apresentaram a menor. The objective of this research was to evaluate the effect of different sources of light in strawberry micropropagation, under increasing levels of BAP in culture medium. 'Sabrosa' shoots were inoculated in MS medium supplemented with 30g L-1 sucrose, 100mg L-1 myo-inositol, 7 agar g L-1 and BAP (0; 0.3; 0.6; 0.9; e 1.5mg L-1), pH 5.8. The explants were cultivated at 25+2°C, 16 hours photoperiod and 20µmol m-2 s-1. The luminosity was supplied by different sources of light (blue-EDEB 3LA1 LED, green-EDET 3LA1 LED, red-EDER 3LA3 LED, Growlux fluorescent lamp and white fluorescent lamp). The experimental design was a factorial entirely randomized (5 concentrations of BAP x 5 light sources) with six replications. The experiment was repeated in three successive subcultures of 35 days each, being evaluated the shoot number per explant and shoot height. The carotenoids and chlorophyll a and b determinations were carried out after the third subculture, independently of BAP concentration. Shoot number per explant was higher under red and green LEDs. BAP concentrations between 0.82 and 1.22mg L-1 in culture medium showed higher multiplication rate depending on the light source. Shoot length was highest in culture medium without BAP under all light sources. Shoots cultivated under red LEDs showed higher concentration of photosynthetic pigments, while those under green LEDs and Growlux light bulbs showed the lowest.

As espécies florestais possuem grande importância econômica, pois oferecem diversos produtos fundamentais para a sociedade. Técnicas de melhoramento podem aumentar a produtividade das florestas plantadas, oferecer características desejadas à indústria e reduzir impactos ambientais. No entanto, a baixa variabilidade existente em espécies florestais de crescimento rápido, o longo período para os ciclos reprodutivos e as dificuldades encontradas para a realização de cruzamentos controlados podem inviabilizar tais procedimentos. O objetivo deste trabalho foi realizar uma revisão sobre a contribuição do Melhoramento Genético em espécies perenes, relatando técnicas convencionais e dando especial ênfase à biotecnologia. A cultura de tecidos, a utilização de marcadores moleculares e a transformação genética oferecem soluções únicas para o melhoramento florestal. As principais características que vêm sendo melhoradas estão ligadas à produção de biomassa, alteração na composição de lignina, resistência a pragas, tolerância a herbicidas, macho-esterilidade e fitorremediação. Contribuições significativas para a indústria e o ambiente têm sido alcançadas por meio dessas técnicas. Forest species have great economic importance due to the wide range of important products offered to society. Techniques improvement can increase the productivity of planted forests, providing the desired characteristics to industry, as well as, reducing environmental impacts. However, the low variability existing in fast-growing species, the long reproductive cycles period and the difficulties encountered when conducting controlled crossings may prevent such procedures. The aim of this research was to carry out a review on the contribution of genetic improvement in perennial species. Conventional techniques with special emphasis on biotechnology were reported. The tissue culture, the use of molecular markers and genetic transformation offer unique solutions to forestry improvement. The major features that have been improved are linked to production of biomass, changes in the composition of lignin, resistance to pests, tolerance to herbicides, male-sterility and phytoremediation. Significant contributions to industry and environment have been achieved through these techniques.

Pesquisas acerca das modificações estruturais e fisiológicas inerentes ao processo de micropropagação são fundamentais para compreender os efeitos desta técnica, desenvolver protocolos mais eficientes e, sobretudo, reduzir perdas ex vitro. O objetivo neste trabalho foi avaliar e quantificar as modificações na anatomia foliar de bananeiras provenientes de micropropagação, durante a fase de aclimatização em casa de vegetação. Para tanto, brotações axilares de bananeira cv. Japira, provenientes da multiplicação in vitro, foram enraizadas em meio MS, acrescido de ANA (1mg L-1) e ágar (6g L-1), e mantidas à temperatura de 25°C±2°C e 16 horas de irradiância a 35µmol m-2 s-1, por 35 dias. Posteriormente, as plantas foram submetidas a diferentes períodos de aclimatização (zero, 21, 42, 63, 84 e 120 dias) e avaliadas quanto à anatomia, por meio de seções transversais e paradérmicas foliares. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado. Verificou-se que as maiores alterações anatômicas ocorrem após 42 dias do transplantio ex vitro, com acentuado espessamento dos parênquimas clorofilianos e limbo foliar, bem como diferenciação da maioria dos tecidos. Quanto aos estômatos, estes estão distribuídos em ambas às faces da epiderme, com maior número na face abaxial e em folhas oriundas de primórdios foliares formados in vitro. Researches about structural and physiological modifications in different stages of the micropropagation are fundamental to understand the effects of this technology to improve protocols and to reduce losses in the acclimatization. The objective of this study was to assess and to quantify the variations in the foliar anatomy of micropropagated banana plants during the ex vitro acclimatization in greenhouse. Thus, axillary buds from in vitro multiplication of Japira cultivar, were rooted in MS medium, added of NAA (1mg L-1) and agar (6g L-1), and kept at room temperature (25°C ±2°C) under 16 hours photoperiod and irradiation of 35µmol m-2 s-1, for 35 days. Subsequently, the plants were submitted to different acclimatization periods (zero, 21, 42, 63, 84 e 120 days) being the leaf anatomy of the plants evaluated by transversal and paradermal sections. A completely randomized design was used. The largest anatomical alterations it were verified after 42 days of the transplantation to ex vitro conditions, with pronounced thickness of chlorophyllian parenchyma and leaf blade, as well, as the differentiation of the majority of foliar tissues. The stomata were distributed on both sides of the leaves, with higher number on the undersurface and on leaves formed from in vitro foliar primordia.

A micropropagação in vitro tem-se apresentado como técnica que possibilita várias metodologias que, por sua vez, contribuem com a redução no tempo, para a obtenção de novas cultivares. Objetivou-se com esse trabalho avaliar o comportamento dos genótipos BRS-Verde, BRS-200-Marrom, 6M-Mocó-Branco e BRs(-1)87 8H Branco na indução do superbrotamento em diferentes combinações de reguladores de crescimento. As sementes, para obtenção do material de partida, foram desinfectadas em solução de hipoclorito de sódio a 1% de cloro ativo por 20 min. Os brotos foram induzidos, a partir de explante de nós cotiledonares em meio básico MS, suplementado com 6-benzylaminopurine (BAP), Cinetina ( KIN) e Tiadiazuron (TDZ), isolados ou associados em diferentes concentrações. O material foi mantido por 40 dias em sala de crescimento, sob condições ambientais controladas. Utilizou-se 10 tubos de ensaio por tratamento com um explante por frasco, em um delineamento inteiramente casualizado, com arranjo fatorial de 4 x 17 (quatro genótipos x dezessete meios). Observou-se que o meio MS suplementado com BAP (2,0 mg L-1) isolado ou associado com KIN (1,0 mg L-1), promoveu maior capacidade de regeneração e altura de brotos; o meio MS suplementado com BAP (2,5 mg L-1) estimulou maior altura de brotos e o meio MS suplementado com TDZ (1,0, 0,50 e 0,25 mg L-1) afetou a capacidade de regeneração de brotos, observando-se maior formação de calos. The micropropagation in vitro has been presented as a technique that allows various methodologies which, for in turn, contribute to a reduction in the time to obtain new cultivares. The objective of this work was to evaluate the behavior of the genotypes BRS-Verde, BRS-200-Marrom, 6M-Mocó-white and BRs(-1)87-8H- white, in the induction of the multiple shoots in different combinations of growth regulators. The seeds, to obtain the initial material, were placed in a solution of 1% sodium hypochlorite of active chlorine for 20 min. The shoot had been induced, in the explant of cotiledonary nodes in MS medium basic, supplemented with 6-benzylaminopurine (BAP), Cinetina (KIN) and Tiadiazuron (TDZ), isolated or associated in different concentrations. The material was kept for 40 days in growth chamber, under controlled ambient conditions. 10 mL of medium was used for treatment with a explant for culture tube, in an entirely randomized design, with factorial arrangement of 4 x 17 (four genotypes x seventeen medium). It was observed that the MS medium supplemented with BAP (2.0 mg L-1) isolated or associated with KIN (1.0 mg L-1), promoted greater capacity of regeneration and height of sprouts; MS medium supplemented with BAP (2.5 mg L-1) stimulated greater height of sprouts and the MS medium supplemented with TDZ (1.0, 0.50 and 0.25 mg L-1) affected the capacity of regeneration of sprouts, a larger formation of calluses was observed.

Este trabalho teve como objetivo ajustar a concentração de macronutrientes, micronutrientes e vitaminas do meio de cultura Murashige & Tucker (MT), de modo a permitir a germinação de embriões imaturos, menores que 3 mm, de tangerineira 'Cleópatra'. As sementes foram obtidas a partir de frutos com 4 a 5 meses após a antese, cujos embriões não germinam nos meios de cultura atualmente indicados para citros. Inicialmente, os embriões foram cultivados em meio de cultura básico contendo sacarose e ágar, seguindo uma seqüência de etapas, procedendo-se a ajustes da concentração normal dos macronutrientes (1/1, ½ e ¼), micronutrientes (1/1, ½, ¼ e 1/1, 3/2, 2/1) e vitaminas (2/1, 1/1 e ½) do meio MT. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em um esquema fatorial 3 (concentrações do MT) x 4 (comprimentos de embriões), com 10 repetições. As variáveis, porcentagem de germinação de embriões, porcentagem de plântulas normais e comprimentos dessas plântulas foram avaliadas 30 dias após a inoculação dos embriões em meio de cultura. Os melhores resultados foram obtidos utilizando-se de metade da concentração normal de macronutrientes, não havendo necessidade de alterar as concentrações de micronutrientes e vitaminas. The objective of the present work was to adjust the macronutrient, micronutrient and vitamin concentrations of the Murashige & Tucker (MT) culture medium in order to promote the germination of ´Cleopatra´ Tangerine immature embryos, smaller than 3 mm. Seeds from fruits, 4 to 5 months after anthesis, in which the embryos do not germinate in recently indicated culture media for citrus, were used. Initially, the embryos were cultivated in basic culture medium containing sucrose and agar, followed by a sequence of steps, carrying out the adjustments of the normal concentration of macronutrients (1/1, ½ and ¼), micronutrients (1/1, ½, ¼ and 1/1, 3/2, 2/1) and vitamins (2/1, 1/1 e ½) of the MT medium. The experimental design was completely randomized in factorial scheme 3 (concentrations of MT) x 4 (embryo size), with 10 repetitions. The following variables were evaluated thirty days after embryo inoculation in culture medium: percentage of germination, percentage of normal plantlets and plantlet length. The best results were obtained using half the normal concentration of macronutrients, whereas the concentrations of micronutrients and vitamins remained unaltered.

A violeta-africana (Saintpaulia ionantha Wendl.) é uma espécie cultivada como ornamental pela beleza de suas flores e folhagem. A Benzilaminopurina (BAP) pode ser utilizada na multiplicação in vitro dessa espécie, no entanto, inexistem informações mais detalhadas sobre as respostas obtidas sobre a multiplicação, em uma faixa ampla de concentrações. Objetivou-se com este trabalho determinar o efeito do BAP na multiplicação in vitro de violeta-africana. Foram utilizados, como explantes, tufos de brotações das cultivares Optimara Miki, Optimara Maki e Optimara Akemi, com tamanhos entre 0,8 e 2,0 cm. Empregou-se o meio MS, com concentrações de nutrientes minerais e vitaminas reduzidas à metade, suplementado com mio-inositol (100mg L-1), sacarose (30 g L-1) e ágar (7 g L-1). Os tratamentos utilizados foram: 0,0; 0,44; 1,78; 3,08 e 4,44 mM de BAP. O pH do meio foi ajustado para 5,8 antes da esterilização. O material vegetal permaneceu em temperatura de 24 ± 2 ºC, fotoperíodo de 14 horas e densidade de fluxo luminoso de 40 mmol c4m-2 s-1. As avaliações do número total de brotações e do número e altura de brotações maiores que 3 mm foram realizadas aos 46 dias. A adição de BAP ao meio de cultura foi essencial para a multiplicação das culturas. As respostas aos tratamentos variaram entre os genótipos utilizados. Maiores resultados de número total de brotações e número de brotações superiores que três milímetros foram observados em concentrações de BAP situadas entre 1,78 e 4,44 mM. A altura das brotações decresceu com a utilização de BAP. African-Violet (Saintpaulia ionantha Wendl.) is an ornamental plant widely cultivated, because of its beautiful foliage and flowers. Benzylaminopurine (BAP) can be used to violet multiplication, but there weren't information about results with several concentrations. The aim of this work was to determine the effect of different concentrations of BAP on the multiplication of violet cultures. One utilized, as explants, shoot clusters of cultivars Optimara Miki, Optimara Maki e Optimara Akemfrom, with height from 0,8 to 2,0 cm. One utilized MS medium, with half concentration of mineral nutrients and vitamins, suplementated with myo-inositol (100 mg L-1), sucrose (30 g L-1) and agar (7 g L-1). The treatments applied were: 0.0, 0.44, 1.78, 3,08 e 4,44 mM of BAP. The pH of the medium was adjusted to 5,8 before sterilization. Cultures remained at 24 ± 2 ºC, photoperiod of 14 hours and 40 mmol cm-2 s-1 of light density flux. Total shoot number and number and height of shoots with more than three millimeters were evaluated at 46 days. Addition of BAP to the culture medium was essential to multiplication of cultures. Responses of treatments varied between cultivars. Best results of total shoot number and number shoots with more than three millimeters were found with concentrations between 1.78 e 4.44 mM. The height of shoots decreased with the addition of BAP.

A escolha adequada do meio de cultura é um fator relevante para a micropropagação, devido ao importante papel dos componentes minerais no processo de regeneração. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito dos meios de cultura MS/2, NN, WPM, QL e C2D, no cultivo inicial, a partir de segmentos nodais e em três subcultivos do porta-enxerto de videira "VR043-43". O delineamento experimental foi em blocos casualizados com quatro repetições. Os meios de cultura não tiveram efeito significativo sobre o número de brotações por explante no cultivo inicial e nos subcultivos. No primeiro subcultivo, os melhores resultados para o número de microestacas por explante inicial foram encontrados com os meios de cultura MS/2, QL e C2D, e, no segundo subcultivo, não houve diferenças estatísticas entre os tratamentos. A altura das brotações no cultivo inicial, no primeiro e no segundo subcultivos aumentou com o meio de cultura QL. No primeiro subcultivo, 83,3% das brotações enraizaram no meio de cultura QL. Para o cultivo inicial do porta-enxerto de videira "VR043-43" in vitro, a partir de segmentos nodais e para a multiplicação das microestacas, o meio de cultura QL apresenta-se adequado para o desenvolvimento das brotações. The right choice of the culture medium is an important factor for micropropagation mainly because of the mineral component role during the regeneration process. This research was aimed at evaluating the effect of the MS/2, NN, WPM, QL and C2D culture medium on the establishment of nodal segments and multiplication of grapevine rootstock 'VR043-43'. The data was analyzed according to a randomized complete block design with four replications. The culture medium had no significant effect on the number of shoots per explant in the initial culture and subcultures. For the first subculture, the best number of microcuttings per initial explant was obtained using the MS/2, QL and C2D culture medium. For the second subculture no statistical differences were observed between treatments. Shoot height in the initial, first and second subcultures increased with QL culture medium. For the first subculture, 83.3% of rooting was found on shoots growing in the QL culture medium. The best results of shoot development for the initial culture of the grapevine rootstock of 'VR043-43' in vitro using nodal segments and its microcuttings multiplication were obtained with the QL culture medium.

Byrsonima intermedia A. Juss. é uma planta medicinal e frutífera do Cerrado, cuja propagação convencional é difícil, devido à presença do endocarpo extremamente lignificado. Embora o hipoclorito de sódio (NaOCl) seja amplamente utilizado para a desinfestação superficial, existem poucos relatos de seus efeitos sobre o crescimento do explante. Neste trabalho, o objetivo foi estudar o efeito de diferentes pHs e períodos de exposição de sementes de B. intermedia em uma solução de NaOCl. As sementes foram submetidas a diferentes tempos de exposição (1, 5 e 10 minutos) numa solução de NaOCl com diferentes pHs (5, 7, 10 e 12) e, após o tratamento com hipoclorito de sódio, os embriões foram inoculados em meio WPM com a concentração de 50% de sais sem sacarose, ágar a 0,5% e pH 5,8 e, depois de 75 dias de cultivo, o crescimento das plântulas foi avaliado. A utilização de NaOCl é eficaz na desinfestação de sementes de B. intermedia, independente da variação do pH ou dos períodos de exposição. A porcentagem de plântulas normais, o comprimento da parte aérea e o número de folhas são positivamente afetados pela utilização de solução de NaOCl a pH de 8,5-8,9 ou pelo aumento do período de exposição, enquanto o número de raízes é afetado apenas pelo aumento do período de exposição na solução NaOCl. Byrsonima intermedia A. Juss., is a medicinal and fruit plant of the Cerrado in which the conventional propagation is difficult due to the presence of extremely lignified endocarps. Although sodium hypochlorite (NaOCl) is widely used in the surface decontamination, there are few reports of its effects on explant growth. The aim of this work was to study the effect of different pH and exposure periods of B. intermedia seeds to a NaOCl solution. Seeds were subjected to different exposure periods (1, 5 and 10 minutes) to a NaOCl solution at different pH (5, 7, 10 and 12) and after treatment with NaOCl, embryos were inoculated in a WPM medium with 50% concentration of salts without sucrose, 0.5% agar and pH 5.8 and after 75 days of culture the growth of seedlings was evaluated. The use of NaOCl is effective in the decontamination of B. intermedia seeds, independent of pH variation and exposure periods and the parameters such as percentage of normal seedlings, shoot length, and number of leaves are positively affected by the use of NaOCl solution at pH 8.5-8.9 and by increasing the exposure period, however, the number of roots is affected only by increasing the exposure period in the NaOCl solution. HERRERA, R. C. Dr. Docente da Universidade Federal do Pará, Campus Universitário de Altamira, Faculdade de Ciências Biológicas

Com o presente trabalho objetivou-se avaliar a influência de concentrações de sacarose e a idade fisiológica da semente na germinação in vitro de embriões zigóticos de murmuru. Frutos em dois estágios de desenvolvimento coletados de plantas do campo tiveram os embriões excisados, desinfestados e inoculados em meio de cultura de MS com 75% das concentrações de sais, suplementado com 2,5 g.L-1 de ácido giberélico e diferentes concentrações de sacarose: 15, 30 e 45 g.L-1. Em sala de crescimento, o material foi mantido por 30 dias no escuro, sendo transferido em seguida para condições luminosas de 30 me.m-2.s-1, temperatura de 25±2ºC e fotoperíodo de 16 horas para completo desenvolvimento. O delineamento estatístico utilizado foi inteiramente casualizado em arranjo fatorial 2 x 3, com seis repetições e cinco embriões por parcela. Após 30 dias foi avaliada a porcentagem de germinação e altura das plântulas. Verificou-se que embriões provenientes de frutos imaturos apresentaram maior porcentagem de germinação, sendo a concentração de 30 g.L-1 de sacarosea que proporcionou os melhores resultados dentre as demais testadas. Embriões provenientes de frutos maduros apresentaram altura de plântulas significativamente maior aos imaturos e também para essa variável, a concentração de 30 g.L-1 de sacarose foi a que proporcionou os melhores resultados.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência da enxertia in vitro na propagação de dois clones híbridos de Eucalyptus urophylla e E. grandis. Foram utilizados porta-enxertos juvenis obtidos de sementes de E. grandis e E. urophylla germinadas in vitro. As plantas enxertadas apresentaram pegamento de até 93% aos 50 dias de idade para as combinações de enxerto e porta-enxerto. Quanto ao crescimento em altura, verificaram-se melhores resultados em relação ao porta-enxerto E. urophylla. A análise histológica das plantas enxertadas comprovou a eficiência do processo de cicatrização do calo formado na região de conexão, seguida da reconstituição vascular.

Este trabalho objetivou otimizar o protocolo de micropropagação de Pfaffia tuberosa, uma espécie medicinal encontrada em várias regiões do Brasil. O tratamento da planta matriz com benomyl (0,1%) e o uso sucessivo de soluções com detergente comercial (duas gotas/100mL de água, durante dois minutos), etanol (70%, por 10 segundos), hipoclorito de sódio (1%) + detergente comercial (duas gotas/100mL de água, por 10 minutos) e HgCl2 (0,1%, por 5 minutos) na etapa de desinfestação dos explantes foram eficazes para a limpeza e regeneração de plantas. As plantas devem ser subcultivadas para um novo meio MS a cada 30 dias de cultivo. Explantes provenientes de segmentos nodais apresentaram uma maior taxa de multiplicação quando comparados com os apicais. Não foi observado declínio na taxa de propagação no decorrer de cinco subcultivos in vitro. As mudas apresentaram um índice elevado de sobrevivência durante a fase de aclimatização. This work aimed at optimizing the micropropagation protocol of Pfaffia tuberosa, a medicinal species found in several regions of Brazil. The treatment of donor plants with benomyl (1%), successively followed with solutions of commercial bleach (2 drops/100mL water; for 2 min), ethanol (70%; for 10 seconds), sodium hypochloride (1%) + commercial bleach (2 drops/100mL water; for 10 minutes) and HgCl2 (0.1%; for 5 min) on the disinfection step of explants were suitable for disinfection and plant regeneration. in vitro plantlets must be subcultivated to a new MS medium at 30 days intervals. Explants from nodal segments showed a higher multiplication rate when compared to apical segments. A decline was not observed on the propagation rate during five successive subcultives in vitro. Plantlets showed an elevated index of survival in the acclimatization step.

In vitro organogenesis of passion fruit was studied by the induction of adventitious buds from leaf discs in culture media supplemented with benzyladenine (BAP) or thidiazuron (TDZ). To minimize adverse effects of ethylene accumulation on shoot development, silver nitrate (AgNO3) was added to the induction media. Both BAP (0; 2.2; 4.4; 6.6 µmol L-1) and TDZ (0; 1.1; 2.2; 3.4 µmol L-1) were effective in promoting shoot development. Although no significant differences were detected using AgNO3 (23.5 µmol L-1), buds grown in AgNO3-supplemented media were more vigorous. The number of explants with buds obtained using TDZ and AgNO3-supplemented media (5.6) were higher than those obtained using BAP and AgNO3 (3.0). MSM + giberrellic acid (GA3), MSM + coconut water, and ½ MSM culture media were tested for shoot bud elongation, incubated in flasks covered with either non-vented or vented lids. Best results were obtained by culturing buds in MSM + coconut water media in flasks covered with vented lids. Plantlets transferred to MSM + indol butyric acid (IBA) media rooted in a 30-day period. Passion fruit organogenesis was enhanced by using TDZ and AgNO3 for bud induction. Transferring the buds to MSM + coconut water media and incubating in flasks with vented lids favored shoot elongation and plantlet development. A organogênese in vitro de maracujá foi estudada pela indução de gemas adventícias em discos de folha cultivados em meio de cultura suplementado com benziladenina (BAP) ou thidiazuron (TDZ). Nitrato de prata (AgNO3) foi adicionado ao meio de cultura de indução de gemas adventícias para minimizar o efeito do acúmulo de etileno no desenvolvimento dos brotos. Tanto BAP (0; 2,2; 4,4; 6,6 µmol L-1) como TDZ (0; 1,1; 2,2; 3,4 µmol L-1) foram eficientes em promover o desenvolvimento de brotos. Embora diferenças significativas no uso de AgNO3 (23,5 µmol L-1) não tenham sido detectadas, gemas adventícias desenvolvidas em meio de cultura suplementado com AgNO3 eram mais vigorosas. O número de explantes com gemas obtidos no meio de cultura suplementado com TDZ e AgNO3 (5,6) foi maior do que aquele obtido com BAP e AgNO3 (3,0). Os meios de cultura MSM + ácido giberélico (GA3), MSM + água de coco ou ½ MSM foram utilizados para o alongamento dos brotos, os quais foram incubados em frascos com tampas ventiladas ou tampas normais. Os melhores resultados foram obtidos cultivando-se as gemas adventícias no meio de cultura MSM + água de coco em frascos com tampas ventiladas. As plântulas transferidas para meio de cultura MSM + ácido indol butírico enraizaram num período de 30 dias. A organogênese in vitro de maracujazeiro foi otimizada utilizando-se TDZ + AgNO3 para a indução de gemas adventícias. A transferência das gemas para meio de cultura MSM + água de coco e a incubação em frascos com tampas ventiladas favoreceu o alongamento e o desenvolvimento de plântulas.

O objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de um protocolo para a embriogênese somática do caquizeiro. Como explantes, foram utilizados embriões zigóticos em diversos estádios de desenvolvimento, retirados de frutos coletados de plantas adultas a campo, a partir de quatro semanas após o pleno florescimento até 22 semanas. O meio básico para os experimentos foi o MS½NO3. O meio inicial de indução foi suplementado com 20µM de 2,4-D e 2µM de cinetina. Os calos escuros obtidos foram repicados para outro meio de indução, com concentrações 10 ou 20 µM de 2,4-D e 2 µM de cinetina. Os calos com massas pró-embriogênicas obtidos foram transferidos para meio de manutenção e multiplicação com 2 µM de cinetina e 2,4-D nas concentrações 2,5; 5,0 e 10 µM. As massas embriogênicas formadas foram transferidas para meio de maturação suplementado com 0,5 µM de AIB e as concentrações 5; 10 e 20 µM de 2-iP. Os embriões formados foram isolados em dois meios de conversão, sendo o primeiro com 5 µM de 2-iP, 5 µM de AG3 e 0,5 µM de AIB e o segundo com 0,5 µM de AG3 e BAP, nas concentrações 0; 0,25; 0,5 e 1,0 µM. Como resultados, obteve-se o padrão indireto de embriogênese somática a partir de embriões zigóticos maduros, com mais de 22 semanas de formação, quando cultivados em meio de cultura com 10 µM de 2,4-D combinado com 2 µM de cinetina. A manutenção e a multiplicação das culturas embriogênicas foram mais eficientes com 5 µM de 2,4-D, na qual os pró-embriões avançaram para o estádio globular. Na fase de maturação, as concentrações de 2-iP testadas atuaram promovendo os embriões globulares a estádios mais avançados da ontogenia como cordiforme, torpedo e cotiledonar. A suplementação do meio de cultura com 1 µM de BAP e 0,5 µM de AG3 gerou a formação de plantas mais desenvolvidas, com maior número e tamanho de folhas. The goal of this work was to develop a protocol for persimmon cloning through somatic embryogenesis. Zygotic embryos excised from fruits collected from adult plants were tested at several developmental phases. They were collected during 22 weeks after 4 weeks blossoming. The basic medium tested was MS½NO3. Initial induction medium was supplemented with 20 µM 2,4-D + 2 µM kinetin. Dark calluses obtained were transferred to induction medium, with concentrations of 10 and 20 µM 2,4-D + 2 µM kinetin. The calli with pro-embryogenic masses were transferred to a maintenance and multiplication medium, with 2 µM kinetin and 2,4-D at the concentrations of 2.5, 5.0 and 10 µM. Embryogenic masses formed were transferred to a maturation medium supplemented with 0.5 µM IBA and 5, 10 and 20 µM 2iP. Embryos formed were isolated in two conversion media, one with 5 µM 2-iP + 5 µM GA3 and 0.5 µM IBA, and another medium with 0.5 µM GA3 and BAP at 0, 0.25, 0.5 and 1.0 µM. Indirect somatic embryogenesis were obtained from mature zygotic embryos collected after 22 weeks, when cultivated in culture medium with 10 µM 2,4D combined with 2 µM kinetin. Embryos maintenance and multiplication were more efficient with 5 µM 2,4-D, in which the pro-embryos advanced to the globular embryos phase. At the maturation phase the concentrations of 2-iP tested promoted globular embryos to more advanced stages of ontogeny, such as cordiform, torpedo and cotiledonary. Supplementation of the culture medium with 1 µM BAP generated better developed plants, with highest number of leaves and size.

A micropropagação é uma ferramenta promissora que pode ser utilizada para propagação e preservação de muitas espécies de plantas medicinais que vêm sendo exploradas de forma indiscriminada e que estão em vias de extinção. Conduziu-se este trabalho com o objetivo de induzir o crescimento in vitro de brotações de macela, em meio de cultura MS com diferentes concentrações de GA3 (0; 0,1 e 0,5 mgL-1) e BAP (0; 1 e 2 mgL-1). Foram utilizadas brotações de macela com diâmetro médio de 1,5 cm, retiradas de plantas preestabelecidas in vitro, inoculadas em frascos contendo 40 ml do meio de cultura e mantidas em sala de crescimento com temperatura média de 26 ± 1oC, fotoperíodo de 16 h e intensidade luminosa em torno de 2000 lux fornecida por lâmpada tipo fluorescente branca fria. Utilizou-se como delineamento experimental um fatorial 3 x 3, num total de nove tratamentos com 15 explantes por tratamento. Aos 30 dias, verificou-se o maior crescimento em altura das plantas, no tratamento com 0,5 mgL-1 de GA3 na ausência de BAP. O maior número de brotações ou crescimento em diâmetro foi observado com maiores concentrações dos reguladores. Porém, na presença dos reguladores ocorreu um maior número de plantas com folhas hiperhídricas e malformadas. Micropropagation is a promising tool that can be utilized for propagation and preservation of many medicinal species that are being explored in an indiscriminated form and are under the risk of extinction. This work had as an objective to induce the growth in vitro of macela clusters in MS culture medium with different concentrations of GA3 (0, 0.1 and 0.5 mgL-1) and BAP (0, 1.0 and 2.0 mgL-1). Macela clusters or buddings with 1.5 cm of average diameter obtained from in vitro established plants were inoculated in glass containing 40ml of culture medium and keept in a growing room with light (2000 lux) supplied by cool white fluorescent lamps for 16 hours daily at 26 ± 1oC. The experiment design was 3 x 3 fatorial using a total of nine treatments with 15 explants each. On the 30th day, the highest plant was observed in the treatment with 0.5 mgL-1 GA3 in the absence of BAP. The greatest number of buddings or diameter growing was observed in the highest levels of growing regulators. However in the presence of growing regulators there was a great number of ill-shaped and vitrified leaves.

The objective of this work was to establish a protocol for the rootstock of 420-A micropropagation. The establishment of the cultures was accomplished with nodal segments, whose source of explants was the budding of woody stakes stored under refrigeration. In the initial cultivation were tested: the effect of 6-benzilaminopurine and kinetin with 0, 1, 5 and 10 µM concentrations, different culture medium (MS, NN and WPM) and dilutions of the basic medium (MS, MS/2, MS/4 and MS/8). In the alongation and multiplication steps were tested the following culture medium: MS, MS/2, NN and WPM. In the rooting were tested: the MS/2 culture medium with or without activated coal (1gL-1). In the acclimatization were tested the substrate vermiculite, Plantmax and carbonized rice hulls. The kinetin didn't present effect on the budding and the growth of the nodal segments. BAP already promoted an increase in the number of sprouts per explant. The increase in the concentration of BAP reduced the number of leaves emitted by explant and increased the vitrification symptoms, being the best results obtained with 1 µM of BAP. In the initial cultivation the MS medium culture with the normal concentration of salts allowed the largest growth of the buddings. The dilutions of the MS medium in ¼ and 1/8 showed very harmful to the development of the rootstock '420-A', being quite harmed the growth of the shoots after the first subcultivation. During the multiplication the medium MS/2 showed more appropriate. The roots happened naturally during the multiplication, being unnecessary the use of activated coal in the culture medium. The acclimatization was accomplished with success in a misty camera, being obtained high survival rates in vermiculite (95,8%) and Plantmax® (87%). It is concluded that the rootstock '420-A' can be micropropagated by initial cultivation of nodal segments in a culture medium of MS+1µM of BAP, multiplication by sectionalizing the shoots in MS/2 medium and acclimatization in vermiculite substratum or Plantmax®.

O presente trabalho avaliou o efeito de diferentes níveis de BAP (0; 2; 4; 6; 8 e 10miM) e de AIB (0; 0,5 e 1miM) na multiplicação in vitro da amoreira-preta cv. Tupy. O meio utilizado foi o MS suplementado com 100mg.-1 de mio-inositol, 30g.-1 de sacarose e 6g.-1 de ágar. Após a inoculação, as culturas foram mantidas em sala de cultura com 16 horas de fotoperíodo, temperatura de 25 ± 2ºC e radiação de 25µmoles.m-2.s-1. O número de gemas e o número de brotações foram avaliados com intervalo semanal, num total de quatro avaliações, e, na última avaliação, considerou-se a altura da brotação, bem como foi determinada a taxa de multiplicação. O maior número de gemas foi obtido com 2miM de BAP e, na ausência de AIB, enquanto o maior número de brotações foi atingido, até a terceira semana de cultivo, com 2 e 4miM de BAP. Para altura das brotações, tanto na ausência como no nível de 1miM de AIB, o aumento nas concentrações de BAP resultou na diminuição do comprimento das brotações linearmente. Observou-se, de modo geral, com o aumento dos níveis de BAP, para todas as doses de AIB, uma redução na altura das brotações. A concentração de 1miM de AIB associado com BAP influenciou negativamente a taxa de multiplicação, até a concentração de 5,9miM de BAP. Quando utilizado isoladamente, o BAP promoveu aumento na taxa de multiplicação até o nível de 5,1miM. O AIB a 0,5miM, em todos os níveis de BAP, não influenciou significativamente na taxa de multiplicação. This work aimed to evaluate the effect of different BAP levels (0; 2; 4; 6; 8 and 10muM) and IBA (0; 0.5 and 1muM) on the in vitro multiplication of blackberry, cv. Tupy. The MS nutrient medium was supplemented with myo-inositol (100mg.-1), sucrose (30g.-1) and agar (6g.-1). The cultures were inoculated and then kept at a 16 hour-photoperiod, temperature of 25 ± 2ºC and 25µmoles.m-2.s-1 radiation. The number of buds and shoots was evaluated weekly for one month. In the final evaluation, it was also taken into consideration the plantlet height and the rate of multiplication. In the absence of IBA, it was observed a higher number of buds, whereas the presence of BAP in the medium, promoted the highest number of buds at 2muM, which was achieved in the third week of cultivation. IBA at 0 and 1mu M promoted a linear decrease in plantlet height when associated with increase in BAP concentrations. It was also observed that an increase in BAP levels for all IBA levels reduced the plantlet height. IBA at 1mu M associated with BAP influenced negatively the rate of multiplication at 5.9muM BAP. BAP with no IBA addition promoted an increase in the rate of multiplication up to 5.1muM. IBA at 0.5muM, associated with all levels of BAP, did not influence significantly the rate of multiplication.

O trabalho objetivou determinar o melhor tipo de explante e a melhor época de coleta destes, visando ao estabelecimento de cultivo in vitro da pereira. No experimento I, gemas e meristemas de pereira das cultivares Carrick e Garber foram isoladas 28 dias após o início da brotação das plantas matrizes. No experimento II, meristemas das cultivares Carrick, Garber e Smith foram isolados aos 28, 35, 42, 49 e 56 dias após o início da brotação. O meio de cultura utilizado foi o MS, acrescido de BAP (4,44miM), ANA (0,054miM) e AG3 (0,29miM). Após a inoculação, os explantes foram submetidos ao escuro sob temperatura de 25 ± 2ºC por um período de 4 dias e, em seguida, transferidos para sala de crescimento com 16 horas de fotoperíodo com radiação de 25µmoes.m-2.s-1 e temperatura de 25 ± 2ºC. Os resultados permitiram concluir que, para o estabelecimento in vitro da cultivar Carrick, foi possível a utilização de gemas ou meristemas. Já para a cultivar Garber, o melhor explante foi o meristema; as épocas de isolamento dos meristemas mostraram comportamento linear para a percentagem de estabelecimento, obtendo-se 92,9% de estabelecimento nos meristemas isolados aos 56 dias após o início da brotação. The work had the purpose to determine the best type of explant and its best time of collection aiming to establish the in vitro culture for pear. In the first trial, pear buds and meristems from Carrick and Garber cultivars were isolated 28 days after the beginning of mother plants shooting. In the second trial, meristems from Carrick, Garber and Smith pear cultivars were isolated at 28, 35, 42, 49 and 56 days after shooting. The culture medium used was the MS salts added with BAP (4.44muM), NAA (0.05muM) and GA3 (0.29muM). After the inoculation the explants were subjected to a dark room for four days at temperature 25 ± 2ºC and then transferred to a growth room in a 16 - hour photoperiod, 25µmoes.m-2.s-1 radiation and at 25 ± 2ºC. It could be concluded that: (i) for the in vitro establishment of the Carrick cultivar buds and meristems could be used, although for Garber cv., meristem is the best explant; and (ii) the time of meristem isolation showed a linear behavior to establish percentage achieving 92.9% for the meristems collected at 56 days after shooting.

Basmati-370 is one of the most preferred aromatic fine quality rice in the world market. It has a pleasant aroma, extra fine grain and a characteristic elongation after cooking, but it is susceptible to some pathotypes of Pyricularia grisea in Brazil. The objective of the present investigation was to assess the degree of blast resistance and some agronomic characteristics in the advanced generations of its somaclones. The evaluations were carried out in R5 to R9 generations, in field trials, in rice blast nursery and greenhouse. Significant variations in grain quality and other agronomic characteristics were not observed. However, some of the somaclones showed higher degree of blast resistance. Nineteen somaclones were registered in the Active Germplasm Bank of Embrapa-Centro Nacional de Pesquisa de Arroz e Feijao as new aromatic rice sources. Two somaclones, SCBAS04 and SBAS16, exhibited a high degree of partial resistance to blast, and were found to be superior to cv. Basmati-370 in aromatic grain characteristic.

A canafístula [Peltophorum dubium (Spreng.) Taub.] é uma espécie florestal nativa do Brasil, dotada de características silviculturais promissoras para fins de (re)florestamento. No entanto, a produção de mudas de alta qualidade por meio da micropropagação é limitada pela reduzida formação de raízes. Em virtude disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito de substratos alternativos ao ágar e do período de cultivo na formação in vitro de raízes de canafístula. Para tanto, foram testados, aos 30 e 60 dias de cultivo in vitro, meios de cultivo compostos por combinações dos substratos vermiculita (V), Plantmax®(P) ou areia fina (AF) ao meio nutritivo MS, contendo 10 µM de ácido 3-indol butírico (AIB), acrescido ou não de ágar (A). Obteve-se elevada sobrevivência das brotações, tanto aos 30 (92,3%) quanto aos 60 (82,6%) dias de cultivo. Em relação aos meios de cultivo, a maioria deles proporcionou uma elevada sobrevivência (91,1 a 100,0%) das brotações; constituíram exceções àqueles que continham (P). Intensa formação calogênica foi observada apenas após 60 dias de cultivo, na testemunha, que incluiu MS e (A), e naqueles outros dois tratamentos contendo (V). O melhor resultado de formação de raízes, tanto quantitativamente (36,78%) como pela qualidade das raízes, foi obtido no tratamento que incluiu (V) e (A), além de MS, aos 60 dias de cultivo. Com a utilização de (V) no meio de cultivo, há intensa formação de calos, aos 60 dias de cultivo, porém, também há maior formação de raízes e melhoria na qualidade do sistema radicular, quando este substrato é combinado ao meio nutritivo MS. Peltophorum dubium (Spreng.) Taub is a forest species native to Brazil endowed with promising forestry features for the purposes of afforestation. However, production of seedlings of high quality through micropropagation is limited by the reduced root formation. As a result, the present study aimed to evaluate the effect of alternative substrates to the agar and the culture period in the in vitro formation of roots. It was tested at 30 and 60 days of in vitro culture, culture media composed of combinations of substrates vermiculite (V), Plantmax® (P) or fine sand (FS) to MS nutritive medium containing 10 µM of 3-indole butyric acid (IBA), with agar or not (A). Was obtained a high survival rate of shoots both the 30 (92.3%) and 60 (82.6%) days of culture. Most culture media yielded high survival (91.1 to 100%) but those containing (P) constituted exceptions. Intense calli formation was observed only after 60 days of culture, in the control, which contained MS and (A), and in those other two treatments containing (V). The best result of root formation as much quantitatively (36.78%) as for the quality were obtained on treatment that included (V) and (A), in addition to MS at 60 days of culture. With the use of (V) in the culture medium there is intense calli formation after 60 days of culture but also there is higher root formation and improvement in the quality when this substrate is combined with nutritive medium MS.

Este trabalho teve como objetivo determinar a melhor concentração de BAP (6-benzilaminopurina) e meio de cultura para a multiplicação in vitro de porta-enxertos de Prunus sp., recentemente introduzidos no Brasil. Os porta-enxertos G x N22, GF 677, Mr.S 2/5, Marianna e Mirabolano foram testados em dois meios de cultura, meio MS e meio MS ¾ (reduzido em 25% dos sais do meio inteiro), combinados com quatro concentrações da citocinina BAP: 0,1; 0,3; 0,5 e 0,7 mg.L-1. Observou-se que os genótipos apresentaram comportamentos diferentes entre si em relação às concentrações de BAP e aos meios. Concluiu-se que, para os porta-enxertos G x N22 e Mr.S 2/5, o melhor meio de multiplicação é o MS ¾ com BAP na concentração de 0,7 mg.L-1; para o porta-enxerto Marianna, o meio MS com BAP na concentração de 0,7 mg.L-1; para o porta-enxerto Mirabolano, o meio MS ¾ com BAP na concentração de 0,5 mg.L-1, sendo que, para este porta-enxerto, o BAP exerce efeito negativo sobre o tamanho das brotações, independentemente do tipo de meio. Já para o porta-enxerto G x N22, este efeito se fez notar apenas no meio MS. O porta-enxerto GF 677 não apresentou bons resultados na propagação in vitro. The purpose of this work was to determine the best BAP concentration and culture media for the in vitro multiplication of Prunus rootstocks starting from nodal segments. The rootstocks G x N22, GF 677, Mr.S 2/5, Marianna and Mirabolano were tested in two culture media (MS and MS ¾) combined with four BAP concentrations (0.1; 0.3; 0.5 and 0.7 mg.L-1). It was observed that the genotypes had different performance as the two media and BAP concentrations are concerned. BAP provided better results in the MS ¾ for the rootstocks G x N22 and Mr.S 2/5. For 'Marianna', the best results were found in the MS at 0.7 mg.L-1 BAP. 'Mirabolano', showed better results in the MS ¾ at 0.5 mg.L-1 BAP and in the two tested media, the shoot length decreased with the increase for BAP. The rootstock G x N22, had the same effect only in the MS medium. The rootstock GF 677 didn't present good results in micropropagation.

O trabalho foi conduzido com o objetivo de estudar a organogênese de macieira (Malus sp), após a obtenção de calo por meio de explantes de folhas do porta-enxerto M.7 multiplicado in vitro. O experimento foi conduzido no Laboratório de Cultura de Tecidos da Embrapa Clima Temperado, utilizando folhas com a superfície abaxial e adaxial em contato com o meio, com ou sem escarificação; associados às citocininas Benzilaminopurina (BAP) e Forchlorfenuron (CPPU) na concentração de 5mM. Utilizou-se o meio básico MS acrescido de sacarose (30 g.L-1 ), mio-inositol (100 mg.L-1) e ágar (6 g.L-1), além do regulador de crescimento Ácido Naftalenoácetico (ANA 0,5mM). Os tratamentos permaneceram por três semanas no escuro sob temperatura ambiente, o que propiciou 100% de formação de calos, sendo em seguida submetidos a fotoperíodo de 16 horas com intensidade luminosa de 20 mE.m-2.s-1 e temperatura de 25 ± 2ºC. Os explantes escarificados proporcionaram maior intensidade de calo do que a utilização de explantes intatos. Explantes escarificados com a superfície abaxial em contato com o meio proporcionaram maior intensidade de calo, independentemente de o meio conter BAP ou CPPU. O uso da escarificação, associado ao CPPU, promoveu uma maior intensidade de calo, independentemente da superfície do disco foliar. A superior regeneração de calos foi alcançada em condição de superfície abaxial do disco foliar associado ao CPPU. Portanto, o uso de explantes escarificados com a superfície abaxial em contato com o meio proporcionou aumento da intensidade de calo. O uso do explante escarificado em meio contendo CPPU proporcionou maior intensidade de calo, independentemente da superfície do disco foliar em contato com o meio. This work was carried out in order to study the apple (Malus sp.) organogenesis after callus formation in M.7 apple rootstock leaf explants multiplied in vitro. The experiment was carried out in the Tissue Culture Laboratory at Embrapa Temperate Climate by using abaxial and adaxial leaves touching the culture media, with or without scarification associated with benzylaminopurine (BAP) and forchlophenuron (CPPU) at 5mM. The MS basal medium used was added to sucrose (30 gL-1), myo-inositol (100mgL-1) and agar (6gL-1). It was also added naphtalene acetic acid (NAA) at 0.5 mM. The treatments remained in darkness for three weeks under room temperature and this led to 100% callus formation and then the material was subjected to 16 hour photoperiod with light intensity of 20 mE.m-2s-1 and temperature of 25 ± 2ºC. The use of scarification associated with CPPU promoted the highest callus intensity independently of the leaf disc surface. Higher callus regeneration was achieved under abaxial surface leaf disks associated with CPPU. So, the use of scarifical explants with the abaxial surface touching the medium led to an increase in callus intensity. The use of scarification and medium containing CPPU, led to the formation of higher callus intensity independently of the leaf disk surface touching the medis.

Submitted by Guilherme Lemeszenski (guilherme@nead.unesp.br) on 2013-08-22T18:47:19Z No. of bitstreams: 1 S0100-29452001000300004.pdf: 1491550 bytes, checksum: 31022ebf04763d88eb6dd4b069da180b (MD5) Made available in DSpace on 2013-08-22T18:47:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 S0100-29452001000300004.pdf: 1491550 bytes, checksum: 31022ebf04763d88eb6dd4b069da180b (MD5) Previous issue date: 2001-12-01 Made available in DSpace on 2013-09-30T17:49:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-29452001000300004.pdf: 1491550 bytes, checksum: 31022ebf04763d88eb6dd4b069da180b (MD5) S0100-29452001000300004.pdf.txt: 18934 bytes, checksum: 27b4f07766657ae3133985f3f121c00b (MD5) Previous issue date: 2001-12-01 Submitted by Vitor Silverio Rodrigues (vitorsrodrigues@reitoria.unesp.br) on 2014-05-20T13:13:17Z No. of bitstreams: 2 S0100-29452001000300004.pdf: 1491550 bytes, checksum: 31022ebf04763d88eb6dd4b069da180b (MD5) S0100-29452001000300004.pdf.txt: 18934 bytes, checksum: 27b4f07766657ae3133985f3f121c00b (MD5) Made available in DSpace on 2014-05-20T13:13:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 S0100-29452001000300004.pdf: 1491550 bytes, checksum: 31022ebf04763d88eb6dd4b069da180b (MD5) S0100-29452001000300004.pdf.txt: 18934 bytes, checksum: 27b4f07766657ae3133985f3f121c00b (MD5) Previous issue date: 2001-12-01 Objetivou-se estudar o efeito da concentração de auxina e do meio líquido sobre o desenvolvimento de calos de cupuaçuzeiro. Segmentos de eixos embrionários e cotilédones, obtidos de frutos de cupuaçu dos tipos Mamorana e Redondo, foram cultivados em 4 meios de cultura diferentes: 1) meio MS (50%), suplementado com 2,4-D (1; 2; 4; 8 mg/L); 2) sais N6 (SIGMA) (4 g/L), acrescidos de 2,4-D (0; 2; 4 mg/L) e ANA (0; 3; 5 mg/L); 3) igual ao anterior, suplementado apenas com ANA (3 mg/L); e 4) meio MS, acrescido com ANA (1 mM). Calos com aspecto branco e brilhante foram observados em segmentos de eixos embrionários e cotilédones, cultivados nas menores concentrações de meio 1 (1 e 2 mg/L), enquanto nas maiores concentrações (4 e 8 mg/L) se observou a formação de calos e massa calosa branco-opaca, em eixos embrionários e em segmentos cotiledonares, estas estruturas tornaram-se escuras dentro de oito semanas. Usando o meio 2, um grande número de raízes foram formadas, enquanto o mesmo meio suplementado apenas com ANA (3; 5 mg/L) originou uma massa calosa. A combinação de ANA e 2,4-D, 3 e 2 mg/L, respectivamente, promoveu a formação de calos brancos e raízes. A transferência das culturas para meio líquido, sem regulador de crescimento, promoveu aumento de tamanho dos explantes e escurecimento dos mesmos. O cultivo desses explantes no meio 3 resultou no aparecimento de calos amarelos, com aspecto friável, que permaneceram com a mesma aparência no meio 4. It was studied the effect of auxin concentration and liquid medium on the development of cupuassu calli. Cupuassu embryonic axes segments and cotyledons, from kinds Mamorana and Redondo, were cultivated in four different culture media : 1) MS medium (50%) supplemented with 2,4-D (1; 2; 4; 8 mg/L); 2) N6 salts (SIGMA) (4 g/L) supplemented with 2,4-D (0; 2; 4 mg/L) and NAA (0; 3; 5 mg/L); 3) similar to the previous medium supplemented only with NAA (3 mg/L) and, 4) MS medium, supplemented with NAA (1 mM). Calli with white and bright aspect were observed in embryonic axes and cotyledons, cultivated in the smallest concentrations of medium 1 (1 and 2 mg/L), while in the largest concentrations (4 and 8 mg/L) opaque white calli and calli mass were formed in embryonic axes and in cotyledons segments, these structures became brownish within eight weeks. Using medium 2, a great number of roots were formed, while this same medium supplemented only with NAA (3; 5 mg/L) originated a calli mass. . The presence of NAA and 2,4-D, 3 and 2 mg/L respectively, promoted the formation of white calli and roots. The transfer of the explants to liquid medium, without growth regulator, promoted an increase of explants size and browning of them. The cultivation of those explants in medium 3 resulted in the formation of yellow calli, with friable aspect, that kept the same aspect in medium 4. Universidade de São Paulo CENA Laboratório de Biotecnologia Vegetal Universidade de São Paulo ESALQ Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) Milho e Sorgo Universidade Estadual Paulista FCAV Depto. de Biologia Aplicada à Agropecuária Universidade Estadual Paulista FCAV Depto. de Biologia Aplicada à Agropecuária

Este trabalho teve como objetivo estudar o efeito da vermiculita e do Plantmax como substratos alternativos ao ágar durante a indução e o desenvolvimento in vitro de raízes dos porta-enxertos de macieira 'Marubakaido' e 'M-26'. Foram utilizadas brotações apicais previamente cultivadas in vitro. O experimento foi dividido em duas fases. Na primeira fase, os tratamentos consistiram no uso de três substratos para a indução do enraizamento: ágar, Plantmax + ágar e vermiculita + ágar, com meio MS/2 acrescido de vitaminas, glicina, mio-inositol, sacarose e ácido indolbutírico (AIB). Após sete dias neste meio, as brotações foram recultivadas para meio MS com ágar (7 g L-1), sem AIB. Na segunda fase, foram testados três substratos para o desenvolvimento das raízes adventícias (ágar, Plantmax e vermiculita, umedecidas com meio MS), após sete dias de indução em meio com ágar (7 g L-1). O efeito dos tratamentos foi estudado no ambiente in vitro e durante a aclimatização das plantas. O ágar, na fase de indução do enraizamento e o ágar ou Plantmax, na fase de desenvolvimento das raízes adventícias, proporcionaram os melhores resultados, tanto para 'Marubakaido' como para 'M-26', no enraizamento in vitro e durante a aclimatização. This work was carried out to study the effect of vermiculite and Plantmax as alternative substrates for agar during both in vitro rooting induction and adventitious root development on 'Marubakaido' and 'M-26' apple (Malus domestica Borkh.) rootstocks. Apical shoots previously maintained in vitro were used. This experiment was divided in two phases. On phase 1, treatments were constituted by three substrates for rooting induction: agar, Plantmax + agar and vermiculite + agar, with MS/2 medium with vitamins, glicyne, myinositol, sucrose and indolebutyric acid (IBA). After seven days in this medium, shoots were transferred to medium with agar (7 g L-1) and without IBA. On phase 2, three substrates were assayed for adventitious roots development (agar, Plantmax and vermiculite, wettish with MS medium) after a seven-day induction time on a medium with agar (7 g L-1). The effect of treatments was evaluated both in vitro and during environment acclimatization. The use of agar during rooting induction and agar or Plantmax, during adventitious root development provided the best results for 'Marubakaido' and 'M-26' plantlets, on in vitro rooting and during acclimatization.

O sucesso de técnicas biotecnológicas no melhoramento in vitro de Citrus depende diretamente do desenvolvimento de protocolos eficientes para regeneração de plantas. Objetivou-se avaliar o efeito de concentrações de 6-benzilaminopuria (BAP) na organogênese in vitro de limão-'Cravo' e laranja-'Pêra', bem como o efeito do seccionamento do explante em laranja-'Valência'. Para o limão-'Cravo', foram utilizados como explante, segmentos internodais de plântulas germinadas in vitro, cultivados em meio MT e variando-se as concentrações de BAP em 0; 2,5; 5; 7,5 e 10 mg.L-1. Nas laranjas-'Pêra' e 'Valência' os explantes foram segmentos do epicótilo de plântulas germinadas in vitro. Os explantes de laranja-'Pêra' foram cultivados em meio MT variando-se as concentrações de BAP em 0; 1; 2; 3 e 4 mg.L-1. Para a laranja-'Valência', metade dos explantes foram seccionados e cultivados em meio MT acrescido de 1,0 mg.L-1 de BAP. Todas as brotações obtidas foram alongadas no meio de cultura MT + 25 g.L-1 de sacarose + 1 mg.L-1 de ácido giberélico (GA3) e enraizadas no meio MT + 25 g.L-1 de sacarose + 0,5 g.L-1 de carvão ativado + 1 mg.L-1 de ácido naftaleno acético (ANA). O melhor resultado para o número de brotações adventícias foi obtido na concentração 2,5 mg.L-1 de BAP para limão-'Cravo', e nas concentrações 1,0 e 2,0 mg.L-1 de BAP para laranja-'Pêra'. O seccionamento dos explantes favoreceu a organogênese in vitro da laranja-'Valência', porém as brotações apresentaram menor índice de enraizamento. The establishment of efficient plant regeneration protocols is essential for the success and application of in vitro breeding biotechnologies in Citrus. The objective of this work was to verify the effect of 6-benzilaminopurine (BAP) on the in vitro organogenesis of Rangpur lime (Citrus limonia (L.) Osbeck) and 'Pera' sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck), and the effect of cutting the explant on the in vitro organogenesis of 'Valencia' sweet orange (Citrus sinensis (L.) Osbeck). For Rangpur lime, internodal explants were cultured in MT medium, with 25g.L-1 sucrose and supplemented with different concentrations of BAP (0; 2.5; 5; 7.5; 10 mg.L-1). Epicotyl explants were used for 'Pera' and 'Valencia' sweet oranges. For 'Pera' sweet orange, the explants were cultured in MT medium, with 25g.L-1 sucrose and supplemented with different concentrations of BAP (0; 1; 2; 3; 4 mg.L-1). For 'Valencia' sweet orange, the epicotyl explants were cut in half and cultured on MT medium, with 25 g.L-1 of sucrose and 1 mg.L-1 of BAP. Shoot elongation was accomplished on MT + 25 g.L-1 sucrose + 1 mg.L-1 gibberelic acid (GA3) and rooted on MT + 25 g.L-1 of sucrose + 0,5 g.L-1 of activated charcoal + 1 mg.L-1 NAA. The best results for number of buds was 2.5 mg.L-1 of BAP in Rangpur lime and 1 and 2 mg.L-1 in 'Pera' sweet orange. The cut of the explant in half was favorable to the in vitro organogenesis in 'Valencia' sweet orange, but it was not for rooting.

Este trabalho objetivou avaliar o efeito da aplicação de baixa temperatura (4±1ºC) sobre o crescimento das brotações micropropagadas de um porta-enxerto de macieira (Malus prunifolia Borkh.), cv.Marubakaido, durante o processo de aclimatização. Durante as duas primeiras semanas de aclimatização, as plântulas foram transferidas para uma câmara de crescimento, e submetidas à temperatura de 4±1ºC por 0, 240, 480, 720, 960, 1.200 e 1.440 horas, sob fotoperíodo de 16 horas e radiação de 5µEm-2s-1. Em seguida, foram conduzidas para casa de vegetação e avaliadas por um período de 90 dias. Ao final do experimento, avaliou-se, ainda, o comprimento dos entrenós, o número de gemas e o peso da matéria seca da parte aérea e das raízes das plantas. A porcentagem de sobrevivência também foi avaliada após um mês de permanência das plantas em casa de vegetação. Houve aumento na altura das plantas e no comprimento dos entrenós, proporcional ao tempo de sua permanência sob baixa temperatura. O frio provocou decréscimo no peso seco das raízes, porém não afetou a sobrevivência das plantas, o número de gemas e o peso da matéria seca da parte aérea. The present work aimed to evaluate the growth of shoots of a rootstock of the plant growth of the apple (Malus prunifolia Borkh, cv.Marubakaido) tree during the acclimatization process. After two weeks of acclimatization, the plantlets were transferred to a growth room and kept under temperature of 4±1ºC, 16-hour photoperiod at 5µEm-2s-1 of radiation for 0, 240, 480, 720, 960, 1,200 and 1,440 hours. So, the plantlets were transferred to the greenhouse where their growth was evaluated every two weeks during 90 days. Internode length, bud number and dry matter weight of aerial part and roots were also evaluated at the end of the experiment. The percentage of plant survival was evaluated after a month in greenhouse. An increase was verified in the plant height and internode length proportional to the time kept under low temperature. Chill did not affect the plant survival, the bud number and the dry weight of aerial part, but it did affect the root dry weight.

A embriogênese somática pode ser uma alternativa para o melhoramento de espécies vegetais, quando associada à transformação genética. A regeneração de plântulas a partir de embriões somáticos é dependente de vários fatores, entre eles, a qualidade do embrião somático. Neste trabalho embriões somáticos com diferentes características morfológicas são descritos. Embriogênese somática de bananeira, cv. Grand Nain e Nanicão Jangada foi induzida a partir de inflorescências funcionalmente masculinas, em meio de indução (MI) seguido de subcultivo em meio de germinação (MG), em ausência de luz. A presença de luz na indução, não favoreceu a resposta embriogênica. Em ausência de luz, os explantes da cv. Nanicão Jangada, durante os seis meses de cultivo, sofreram diversas alterações, como a formação de calos embriogênicos e não embriogênicos, formação de embriões somáticos, continuidade no desenvolvimento do botão floral ou oxidação do explante. A freqüência de resposta embriogênica foi baixa, com apenas 6% dos explantes formando embriões somáticos e 23% com formação de calos embriogênicos. O acompanhamento histológico e morfológico das alterações ocorridas nos explantes permitiu a identificação de embriões somáticos com características morfológicas distintas: com maior freqüência observou-se um tipo de embrião com morfologia semelhante ao embrião zigótico de Musa acuminata; em menor freqüência desenvolveram-se embriões somáticos semelhantes a embriões zigóticos de outras monocotiledôneas, indicando que em um único protocolo de embriogênese somática, é possível ocorrer a formação de diferentes padrões morfológicos de embriões somáticos.