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doi: 10.5216/ree.v12i3.6472Candida species are of common occurrence in the buccal cavity and these yeasts are present in about 50% of healthy individuals. This percentage can change depending on the studied population. The infectious processes caused by Candida vary of benign clinical pictures, to serious and fatal pictures as the invasive infections and disseminated. In this study it was evaluated the colonization of yeasts of the Candida genus on 312 saliva sample of the hospital workers from "Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás" in the city of Goiania-Goiás/Brazil, during the period from July to December of 2007. Candida species were identified by production of germ-tube, chlamydospore formation, assimilation sugar tests and culture on CHROMagar® Candida. The hospital workers analyzed presented colonization of the saliva by yeasts of the Candida genus in 61.9% from samples studied, being isolated C. albicans (58.5%), C. parapsilosis (24.4%), C. krusei (8.3%) and C. famata (3.6%). The publication of these results can serve as an aid for the prevention and control of oral candidiasis in the workers of the area of health that live in contact with individuals susceptible to infections. Descriptors: Candida; Saliva; Health personnel. doi: 10.5216/ree.v12i3.6472Especies de Candida son de ocurrencia común en la cavidad bucal y estas levaduras están presentes en cerca del 50% de individuos sanos. La frecuencia varía, dependiendo de las personas investigadas. Los procesos infecciosos causados por Candida varían de cuadros clínicos benignos, a los cuadros serios y fatales como las infecciones invasivas y diseminadas. En este estudio ha sido evaluado la colonización de las especies de Candida en la saliva de los obreros del Hospital das Clínicas de la Universidad Federal de Goiás en Goiânia, Brasil, entre julio y diciembre de 2007. El trabajo se llevó a cabo con 312 muestras de saliva. Las especies de Candida aisladas de la saliva fueron identificadas a través de la formación de tubo germinal y de clamidoconídio, asimilación de carbohidratos y cultivo en CHROMagar® Candida. En nuestro estudio, 61.9% de los trabajadores analizados del hospital presentaron colonización de la saliva por las levaduras del género Candida, estar aislado C. albicans (58.5%), C. parapsilosis (24,4%), C. krusei (8,3%) y C. famata (3,6%). La divulgación de estos resultados puede servir como una ayuda para la prevención y control de candidíase bucal en los trabajadores del área de salud que viven en contacto constante con individuos susceptibles a las infecciones. Descriptores: Candida; Saliva; Personal de salud. doi: 10.5216/ree.v12i3.6472As espécies de Candida são de ocorrência comum na cavidade bucal sendo que estas leveduras estão presentes em cerca de 50% de indivíduos saudáveis, podendo este porcentual variar dependendo da população estudada. Os processos infecciosos causados por Candida variam de quadros clínicos benignos, a quadros graves e fatais como as infecções invasivas e disseminadas. Neste estudo foi avaliada a colonização de leveduras do gênero Candida em 312 amostras de saliva de profissionais do Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás, na cidade de Goiânia, Goiás, Brasil, durante o período de julho a dezembro de 2007. As espécies de Candida isoladas da saliva foram identificadas através da produção de tubo germinativo e de clamidoconídios, assimilação de carboidratos e cultivo em meio CHROMagar® Candida. Os profissionais estudados mostraram colonização por leveduras do gênero Candida em 61,9% das amostras analisadas, sendo isolados C. albicans (58,5%), C. parapsilosis (24,4%), C. krusei (8,3%) e C. famata (3,6%). A divulgação destes resultados pode servir como um auxílio para a prevenção e controle de candidíase bucal nos trabalhadores da área de saúde que vivem em contato constante com indivíduos altamente suscetíveis a infecções.Descritores: Cândida; Saliva; Pessoal de saúde.

Phospholipase and proteinase production and the ability of adhesion to buccal epithelial cells (BEC) of 112 Candida isolates originated from oral cavity of HIV infected patients and from blood and catheter of intensive care unit patients were investigated. The proteinase production was detected by inoculation into bovine serum albumin (BSA) agar and the phospholipase activity was performed using egg yolk emulsion. A yeast suspension of each test strain was incubated with buccal epithelial cells and the number of adherence yeast to epithelial cells was counted. A percentage of 88.1% and 55.9% of Candida albicans and 69.8% and 37.7% of non-albicans Candida isolates produced proteinase and phospholipase, respectively. Non-albicans Candida isolated from catheter were more proteolytic than C. albicans isolates. Blood isolates were more proteolytic than catheter and oral cavity isolates while oral cavity isolates produced more phospholipase than those from blood and catheter. C. albicans isolates from oral cavity and from catheter were more adherent to BEC than non-albicans Candida isolates, but the adhesion was not different among the three sources analyzed. The results indicated differences in the production of phospholipase and proteinase and in the ability of adhesion to BEC among Candida spp. isolates from different sources. This study suggests that the pathogenicity of Candida can be correlated with the infected site. A produção de proteinase e fosfolipase e habilidade de adesão à célula epitelial bucal de 112 isolados de Candida originadas da cavidade bucal de pacientes infectados pelo HIV e de sangue e cateter de pacientes hospitalizados foram investigados. A produção de proteinase foi detectada por inoculação em ágar soro albumina bovina e a atividade de fosfolipase foi realizada usando emulsão de gema de ovo. A suspensão de levedura de cada isolado foi incubada com célula epitelial e o número de leveduras aderidas a célula epitelial foi contada. Uma porcentagem de 88,1 e 55,9% de C. albicans e 69,8 e 37,7% de isolados de Candida não albicans produziram proteinase e fosfolipase, respectivamente. Candida não albicans obtidas do cateter foram mais proteolíticos que isolados de Candida albicans (p < 0,001). Isolados do sangue foram mais proteolíticos do que isolados do cateter e cavidade bucal, enquanto isolados da cavidade bucal produziram mais fosfolipase do que aqueles isolados do sangue e cateter. C. albicans isoladas da cavidade bucal e do cateter foram mais aderentes à célula epitelial bucal do que isolados de Candida não albicans, mas não houve diferença na adesão entre os três locais analisados. Os resultados indicaram diferenças na produção de fosfolipase e proteinase e na habilidade de adesão à célula epitelial bucal entre os isolados de Candida das diferentes fontes. Este estudo sugere que a patogenicidade de Candida spp pode estar correlacionada ao local infectado.

A CVV (CVV) é a segunda infecção mais comum em mulheres em idade fértil, sendo que em 70 a 90% dos casos, o agente etiológico associado é Candida albicans. O aumento da incidência de espécies não-albicans, tem levado ao aparecimento de casos de resistência aos antifúngicos, por isso a importância de novas abordagens no tratamento. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver e testar in vivo um sistema nanoestruturado contendo fluconazol e própolis verde para o tratamento de CVV. As nanopartículas contendo fluconazol e própolis verde foram preparadas seguindo a técnica de gelificação iônica e apresentaram características físicas satisfatórias para a finalidade pretendida. A eficiência de associação para os compostos complexados foi realizada utilizando a técnica de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e espectrofotometria UV. As Concentrações Inibitórias Mínimas (CIM) para o Fluconazol, Própolis verde e nanopartículas foram investigadas, apresentando eficácia como ação fungistática sobre C. albicans ATCC 10231. Análises de liberação de até 72 horas com estabilização até 96 horas foram verificadas nas nanopartículas. Os ensaios de toxicidade em hemácias e em Galleria mellonella demonstraram resultados positivos para a própolis e negativas para as nanopartículas, sugerindo segurança para o seu uso no modelo murino para a CVV. Ensaios in vivo foram realizados com indicação de eficácia para a formulação proposta. Vulvovaginal Candidiasis is the second most common infection in women of childbearing age, in about 70 to 90% of cases; the associated etiologic agent is C. albicans. The increase in the incidence of non-albicans species has led to the emergence of cases of resistance to antifungals, which is why the importance of new approaches in treatment. The objective of the present work was to develop and test in vivo a nanostructured system containing fluconazole and Green Propolis for the treatment of Vulvovaginal Candidiasis. The nanoparticles containing Fluconazole and Green Propolis were prepared following the technique of ionic gelation and presented satisfactory physical characteristics for the intended purpose. The association efficiency for the complexed compounds was performed using the technique of High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and UV spectrophotometry. The Minimum Inhibitory Concentrations (MIC) for Fluconazole, Green Propolis and nanoparticles were determined, showing efficacy for use and fungistatic action on C. albicans ATCC 10231. Release analyzes of up to 72 hours with stabilization up to 96 hours were verified in the nanoparticles. The toxicity tests by hemolysis and Galleria mellonella, demonstrated positive results for propolis and negative for nanoparticles, suggesting safety in their use in a method with a murine model. In vivo tests were performed with an indication of efficacy for the proposed formulation. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Introdução: a elevada incidência e taxa de mortalidade por infecções fúngicas despertam o interesse pela busca por fármacos mais eficazes e menos tóxicos para o tratamento dessas infecções. Plantas medicinais representam uma promissora fonte de descoberta de agentes antifúngicos. Dentre as plantas medicinais, a Lafoensia pacari A. St.-Hil (Lythraceae), planta do cerrado, destaca-se por apresentar propriedades medicinais conhecidas popularmente no Brasil. A punicalagina, um metabólito secundário extraído da folha da L. pacari, apresenta comprovadas atividades biológicas. Objetivo: neste trabalho foi avaliada a atividade biológica de punicalagina sobre leveduras pertencentes ao complexo Cryptococcus neoformans e espécies de Candida. Métodos: a suscetibilidade in vitro das leveduras ao composto punicalagina, foi verificada usando-se o método de microdiluição em caldo. O possível mecanismo de ação foi verificado por diferentes métodos como: doseamento de ergosterol da membrana da célula fúngica, por análises morfológicas e ultraestruturais das leveduras, por citometria de fluxo (ciclo celular, lesão da membrana citoplasmática, produção de espécies reativas de oxigênio e perda do potencial da membrana mitocondrial). A citotoxicidade in vitro de punicalagina foi verificada utilizando-se células Balb/c 3T3, células de carcinoma pulmonar A549 e eritrócitos de carneiro. Resultados: a punicalagina foi capaz de inibir o crescimento das leveduras em concentrações ≤ 4 µg/mL com concentração fungicida mínima (CFM) de > 256 µg/mL. A punicalagina reduziu a síntese de ergosterol da membrana celular fúngica e promoveu alterações na morfologia e no arranjo celular das leveduras. O mecanismo de ação analisado por citometria de fluxo mostrou alteração do ciclo celular com aumento das fases G0/G1 e redução das fases G2/M, interferindo na divisão celular do DNA das células fúngicas. O composto mostrou baixa toxicidade sobre as células Balb/c 3T3, A549 e eritrócitos de carneiro. Conclusão: os resultados apresentados pela ação da punicalagina mostraram que este composto apresenta baixa citotoxicidade para as células animais, com importante atividade antifúngica para as leveduras do complexo Cryptococcus neoformans e Candida. Introduction: the high incidence and mortality rate due to fungal infections arouse interest in the search for more effective and less toxic drugs for the treatment of these infections. Medicinal plants represent a promising source of discovery of antifungal agents. Among the medicinal plants, Lafoensia pacari A. St.-Hil (Lythraceae), plant of the cerrado, stands out for having medicinal properties popularly known in Brazil. Punicalagina, a secondary metabolite extracted from L. pacari leaf, has proven biological activities. Objective: in this work the biological activity of punicalagin on yeasts belonging to the Cryptococcus neoformans species complex and Candida species was evaluated. Methods: the in vitro susceptibility of the yeast to the compound punicalagin was verified using the broth microdilution method. The possible mechanism of action was verified by different methods such as: ergosterol assay of the fungal cell membrane, by morphological and ultrastructural analyzes of the yeasts, by flow cytometry (cell cycle, cytoplasmic membrane injury, reactive oxygen species production and loss of the mitochondrial membrane potential). The in vitro cytotoxicity of punicalagin was verified using Balb/c 3T3 cells, A549 lung carcinoma cells and sheep erythrocytes. Results: the punicalagin was able to inhibit yeast growth at concentrations ≤4 μg/mL with minimum fungicidal concentration (CFM) of >256 μg/mL. The punicalagin reduced the ergosterol synthesis of the fungal cell membrane and promoted alterations in the morphology and the cellular arrangement of the yeasts. The action mechanism analyzed by flow cytometry showed alteration of the cell cycle with increase of the G0/G1 phases and reduction of the G2/M phases, interfering in the cellular division of the DNA of the fungal cells. The compound showed low toxicity on the Balb/c cells 3T3, A549 and sheep erythrocytes. Conclusion: the results presented by punicalagin showed that this compound presents low cytotoxicity to the animal cells, with important antifungal activity against the yeasts of the Cryptococcus neoformans species complex and Candida species. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

As infecções causadas por leveduras do gênero Candida são denominadas candidíase e são consideradas doenças oportunísticas com características superficiais e sistêmicas. Espécies de Candida podem desenvolver mecanismos de defesa aos principais antifúngicos disponíveis para uso clínico contra infecções, dificultando e limitando o tratamento. Produtos naturais podem ser fonte de compostos bioativos contra doenças infecciosas, como por exemplo a planta Curcuma longa Linn ou açafrão como é popularmente conhecida que apresenta em sua constituição o composto curcumina. Esse vegetal é utilizado em grande escala pela população como condimento alimentar e como medicamento natural contra doenças inflamatórias e doenças infecciosas. Os compostos sintetizados laboratorialmente têm sido de interesse em biotecnologia médica, entre esses, os derivados hidrazonas estão associados com atividade antimicrobiana incluindo antifúngica, antioxidante, antiparasitária, anticonvulsiva, analgésica, anti-inflamatória e antitumoral. Os objetivos deste trabalho foram determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração fungicida mínima (CFM) dos compostos curcumina e N-acilhidrazona, e ainda verificar a curva de morte de Candida, quantificar o ergosterol e avaliar a hemólise de hemácias após ação de ambos compostos. Foram utilizados 20 isolados Candida spp. no teste de microdiluição em caldo para avaliação da CIM e CFM dos compostos. A curva de morte e doseamento de ergosterol foram verificados após tratamento de C. albicans ATCC 28367 com os compostos. Para avaliação da citotoxicidade destes compostos utilizou-se hemácias de carneiro. O composto curcumina apresentou valores de CIM entre 16 e 256 μg/mL e CFM entre 128 a valores maiores que 512 μg/mL. Para o derivado Nacilhidrazona os valores de CIM variaram de 2 a 128 μg/mL e a variação de CFM foi entre 256 a valores maiores que 512 μg/mL. Os compostos mostraram ação fungistática sobre a cinética de crescimento de Candida ao longo de 48 horas. O doseamento de ergosterol após contato com os agentes na CIM de 64 μg/mL da curcumina e 16 μg/mL de N-acilhidrazona mostrou-se reduzido em 29,56 e 53,57%, respectivamente. Os compostos apresentaram atividade hemolítica em concentrações a partir de 512 μg/mL. Os resultados observados neste trabalho evidenciam que curcumina e o derivado N-acilhidrazona apresentam propriedades antifúngicas promissoras. Infections caused by yeasts of the genus Candida are called candidiasis and are considered opportunistic diseases with characteristics ranging from superficial to disseminate. Candida species may develop defense mechanisms to the major antifungal agents available for clinical use against infections, making it difficult and limiting treatment. Natural products can be a source of bioactive compounds against infectious diseases, such as the Curcuma longa Linn or saffron plant as it is popularly known that it has the compound curcumin. This vegetable is used in large scale by the population as food condiment and as natural medicine against inflammatory diseases and infectious diseases. Laboratory-synthesized compounds have been to interest in medical biotechnology, among which the hydrazone derivatives are associated with antimicrobial including antifungal, antioxidant, antiparasitic, anticonvulsive, analgesic, anti-inflammatory and antitumor activity. The objectives were to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) of curcumin and n-acylhydrazone compounds, and also to verify the time-kill curve of Candida, to quantify ergosterol and to evaluate hemolysis of red blood cells after action of both compounds. Twenty isolates Candida spp. in the broth microdilution test for evaluation of the MIC and MFC of the compounds. The time-kill curve and ergosterol assay were checked after treatment of C. albicans ATCC 28367 with the compounds. To evaluate the cytotoxicity of these compounds sheep red blood cells were used. The compound curcumin showed MIC values between 16 and 256 μg/mL and MFC between 128 and values greater than 512 μg/mL. For the n-acylhydrazone derivative the MIC values ranged from 2 to 128 μg/mL and the MFC variation ranged from 256 to values greater than 512 μg/mL. The compounds showed fungistatic action on the growth kinetics of Candida over 48 hours. The determination of ergosterol after contact with the agents in MIC of 64 μg/mL of curcumin and 16 μg/mL of nacylhydrazone was reduced by 29.56 and 53.57%, respectively. The compounds showed hemolytic activity at concentrations of 512 μg/mL. The results observed in this work show that the curcumin and the n- acylhydrazone derivative have promising antifungal properties. Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG