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Affinity chromatographic supports is nowadays one of the most used and expensive consumable material for protein purification at the laboratory and industrial scale. The introduction of cost-effective materials is an important issue to address to spread the usefulness of this technology. Cotton fibres are a highly available natural material with excellent mechanical and structural properties which can be used for this propose. Nevertheless, fibre insolubility and low chemical reactivity are the major drawbacks to use this material for protein chromatography.In this work, a composite material prepared from polymethacrylate/cellulose fibres were used for the preparation of chromatographic materials containing immobilised proteins as adsorptive ligands. A green fluorescent protein and a protein A simil ligand containing cysteine in the terminal tags were immobilised onto the fibres by the epoxy-thiol chemistry. Buffer salt, pH, reaction time and pre-swelling procedure were optimised. Materials were characterised by fluorescence and electron microscopes, in addition to the binding capacity of the adsorbent materials. Fil: Carbajal, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB | Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB | Universidad Nacional de La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB; Argentina Fil: Kikot, Pamela Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB | Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB | Universidad Nacional de La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB; Argentina Fil: Torchio, Gabriela María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB | Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB | Universidad Nacional de La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB; Argentina Fil: Fernandez Lahore, M.. Universitat Bremen. School of Enigineerring and Science Jacobs; Alemania Fil: Grasselli, Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB | Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB | Universidad Nacional de La Plata. Instituto Multidisciplinario de Biología Celular. Grupo Vinculado al IMBICE - Grupo de Biología Estructural y Biotecnología - Universidad Nacional de Quilmes - GBEyB; Argentina

Serum immunoglobulins from sea bass and sea bream were purified using affinity chromatography methods. Fish were immunized with purified goat IgG, and the specific fish antibodies purified from the immune serum on a goat IgG-immobilized agarose gel. Native molecular weights of the immunoglobulins were determined by size sieving chromatography as 855 000 Da for sea bass, and 830 000 Da for gilthead sea bream. Analysis of the immunoglobulins by reducing SDS-PAGE showed them to be composed of a single μ-like heavy chain, weighing about 78 kDa for D. labrax and 75 kDa for S. aurata. Certain differences were found for the light chains, which were resolved as two (27·5 and 28·5 kDa) polypeptides in D. labrax samples, and three (27, 28 and 29 kDa) bands in S. aurata. Rabbit polyclonal antisera against both immunoglobulins were produced and tested by ELISA and immunoblotting techniques. The antisera reacted mainly with the high molecular weight chain of the immunoglobulins at high dilutions. Both immunoglobulins are similar tetrameric forms, but differences in the molecular weight of their constituent chains suggest some structural heterogeneity., This work was supported by the research grant AGF92-0199 from Spanish CICYT. O.P. was recipient of a grant from the ‘Departamento de Educación, Universidades e Investigación del Gobierno Vasco’. We thank J. A. Rielo for his help in animal handling