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The specific aim of this study was to characterize human anti-Rh monoclonal antibodies cross-reacting with self-antigens. We studied supernatants from man-mouse hybridomas and from lymphoblastoid cell lines. Man-mouse hybridomas were established by fusion of peripheral blood lymphocytes from healthy individuals recently immunized against Rh alloantigens, with mouse myeloma (or man-mouse heteromyeloma) cell lines. Lymphoblastoid cell lines were produced by Epstein-Barr virus induction of lymphocytes from identical sources. Of the 55 monoclonal alloantibodies studied, 11 also reacted with intracellular self-antigens as demonstrated by immunofluorescence assay on cryostat sections of human tissues. This cross-reactivity was mainly a property of monoclonal alloantibodies belonging to the IgM isotype (among the 11 cross-reacting mAbs 10 were IgM). The cross-reactivities of these monoclonal antibodies were ascertained by absorption of alloreacting antibodies with red blood cells. Similar results were obtained on a panel of purified cellular antigens by ELISA. The results confirm that during an immune response against a foreign antigen (alloantigen), B cells that produce polyreactive antibodies are not excluded from the pool of responding cells. Therefore, polyreactive autoantibodies present in sera from healthy individuals may be the result of an immune response against foreign antigens.

The efficacy of moxidectin 2% oral gel (Equest(R), Fort-Dodge) against European worm strains was studied through post-mortem worm counts and feacal egg counts (FECs) in 12 young ponies naturally infected. The animals were allocated in two groups of six ponies each: the first one was treated at 0.4 mg/kg b.w. and the second one received a placebo and served as control. All the ponies were necropsied 14 days post-treatment. The efficacy of moxidectin in reducing strongyle FECs ranged from 99.8% to 100% from 3 to 14 days after treatment. Moxidectin efficacy was 100% against Trichostrongylus axei and Triodontophorus spp., > 99.9% against Cyathostomes adults and L-5, 92% against S. edentatus L-5, 100% against O. equi L-5, 99% against O. equi L-4, and 92% against G. intestinalis. No animal treated with moxidectin was harbouring P. equorum, Habronema spp., G. pecorum nor G. nasalis, while the control group was slightly infected with these parasites. This experiment confirms the post-mortem worm count results obtained in the United States and the FECs results reported in Europe. Moxidectin showed to be safe in young ponies. (C) 1998 Elsevier Science B.V.

Introduction Le depistage systematique du VHC n’est pas recommande dans la population generale mais propose a des populations a risque [1]. Le but de notre etude etait de determiner les facteurs associes a la pratique du depistage du virus de l’hepatite C (VHC) chez les femmes jeunes. Patients et Methodes La population d’etude etait issue des 300 femmes enceintes ayant participe a l’etude ALHICE [1] realisee entre 1998 et 2002 dont le critere d’inclusion etait la presence d’une serologie VHC positive, connue ou pas avant leur participation. Le moment de la decouverte du VHC, les antecedents medicaux et les facteurs de risque lies a leur contamination ont ete recueillis par questionnaire realise en entretien. La population cible du depistage a ete identifiee selon les recommandations de l’ANAES (janvier 2001) qui regroupe les populations dites a risque eleve (prevalence VHC > 2 %) et celle a risque faible (prevalence VHC Resultats Le moment de la decouverte du VHC n’etant pas renseigne pour 3 femmes, l’analyse a ete menee chez 297 femmes. Parmi elles, 224 (75 %) avaient ete diagnostiquees avant l’etude ALHICE ; 279 (94 %) presentaient un des criteres definis dans les recommandations (population globale cible), 203 (68 %) appartenaient au groupe de risque eleve et 76 au groupe a risque faible. Parmi les 279 femmes de la population globale cible, 68 (24 %) n’avaient pas ete diagnostiquees avant leur entree dans l’etude. Chez les 18 (6 %) femmes ne reunissant pas un des criteres de depistage, 5 (28 %) ont decouvert leur seropositivite au moment de leur participation a l’etude. Le depistage du VHC avant la grossesse etait significativement associe a un antecedent d’usage de drogues (62 % versus 28 %, p Conclusion Pour ameliorer le depistage du VHC chez la population de femmes jeunes, les efforts devraient etre concentres vers les femmes nees dans une des zones a risque (Afrique, Amerique du Sud, Asie du Sud-Est, Moyen-Orient) ainsi que vers celles en situation de precarite. Remerciements, financements, autres Etude financee par l’ANRS et la Fondation de France.

In vitro secretion of antibodies to cytomegalovirus was investigated by analysis of peripheral blood mononuclear cell culture supernatants from subjects infected with cytomegalovirus. Patients with primary or recurrent cytomegalovirus infection showed transient in vitro cytomegalovirus-specific antibody secretion. A high proportion of patients infected with human immunodeficiency virus and sero-positive for cytomegalovirus showed in vitro cytomegalovirus-specific antibody secretion. All peripheral blood mononuclear cell cultures from patients with symptomatic human immunodeficiency virus infection were found to secrete in vitro antibodies to cytomegalovirus, despite the fact that isolation of cytomegalovirus from some of these patients was not achieved. In human immunodeficiency virus-infected patients, in vitro secretion of anti-cytomegalovirus antibodies appeared to be persistent. In vitro cytomegalovirus-specific antibody secretion by peripheral blood lymphocytes probably reflects an in vitro cytomegalovirus-specific B cell activation. This new assay could be considered an interesting method for detecting both acute or chronic cytomegalovirus infection, with potential use in routine laboratory practice.

The authors report a family in which the father is Ax, the mother B, the paternal grandmother Ax; 3 children out of 6 are A2B and the other three Ax. One of A2B children is married to an O subject, and she had a son of phenotype Ax. It was observed that Ax gene in position trans of a B gene behaves phenotypically as an A2.

Summary The authors have studied in particular hepatitis B virus markers and the ratio of OKT4+/OKT8+ cells in two subgroups of 52 deprived asymptomatic drug addicts. In the group 1 (deprived for 19 days on an average), 52% of the subjects showed a ratio of OKT4+/OKT8+ HBV markers were present in 90% of the subjects in each group. We would like to point out the high frequency of the anti-HBc positivity without other markers in these two groups, respectively 20% in the group 1 and 32% in the group 2. These results emphasize the interest in screening systematically this marker in all blood donors.

The Basques were previously shown to present a high frequency of HLA-B18 and BfF1, which are known to be associated with insulin dependent diabetes mellitus (IDDM). During the VIII International Histocompatibility Workshop, we studied HLA-A, B, C, DR; Bf, C4 and GLO.I polymorphisms in 51 unrelated French Basque IDDM patients and in 50 controls. Haplotypes were established by family studies in all controls and some patients. Two haplotypes were frequently found in the controls: HLA-A1, Bw57, BfS, C4 F1S, DR7 and HLA-Aw30, Cw5, B18, Bf F1, C4Fs degree, DR3. The first one was not found in the patients. All the components of the second haplotype had increased frequencies possibly as a consequence of linkage disequilibrium with HLA-DR3: a highly significant association between IDDM and HLA-DR3 was observed (90.2% vs 24.0%, relative risk (RR) = 29.1, P less than 10(-11)). The HLA-DR4 frequency was slightly increased (37.3% vs 16.0%), and HLA-DR2 was not found. The silent allele C4s degree was particularly associated with early diagnosed IDDM (86.7% in patients with age at onset under 20 years vs 57.1% in other patients, P less than 0.02). The high relative risk for HLA-DR3/DR4 heterozygous vs that of individuals, possibly HLA-DR3 homozygous, supported the hypothesis that two HLA-DR linked genetic factors could be involved in the inheritance of IDDM susceptibility.

Summary Since its creation by Doctor Matte , the Groupamatic concept had been chosen by the Blood Center of Toulouse in order to enable blood typing on the continuously growing number of blood donors. The complete system suggested by the manufacturer presented a serious point of restraint : the use of relatively static and preestablished blood typing logics. We adopted a compromise solution : developing a specific software for the processing of Groupamatic data on our PDP 12 computer which directly controls the electromechanical unit. The various phases of blood group determination of blood donors and of result validation are presented: 1. Control of the electromechanical unit by the PDP 12 : -- First run of samples on Groupamatic : First ABO Rh blood typing with a logic which does not recognize the A subgroups. Memorization of results. -- Second run of samples on Groupamatic. Second ABO Rh blood typing including A1 A2 typing and weak A typing. Memorization of results. 2. Further processing of results : -- Delayed validation of ABO Rh groups ; -- Print out of validated results only of self adhesive labels for the blood units ; -- Print out of documents used by the Laboratory of Erythrocyte Immunology.

We report here the experience of 3 years of irregular antibody automated screening with Groupamatic, that is to say of 661,511 samples tested in Paris and 269, 162 samples tested in Toulouse. The positive reactions in Paris were 16,296 (2.46%) out of which 2,021 irregular antibodies were identified (0.30%). The positive reactions in Toulouse were 8,266 (3.07%) out of which 2,138 irregular antibodies were identified (0,79%). The difference between the number of screened positive reactions and the identified one is due to false positive reactions (half of the cases) and to autoantibodies whose number is roughly the same than the number of identified alloantibodies. During the years 1970, 1971 and 1972, the irregular antibodies were systematically screened in Toulouse on all blood donors with a manual technique on opaline plate using enzyme treated red cell tests (papain). 7,147 positive reactions were detected, out of 240,080 tests (2.98%). 1,954 (0,81%) were alloantibodies and 1,529 (0.64%) autoantibodies; 3.455 were false positive reactions and 209 were non identified antibodies. These figures are superimposed with those obtained with Groupamatic during the following years, thus pointing out the interest of this equipment.

Resume La constatation de discordances dans l'agglutination de certains sujets avec divers anticorps anti-C et anti-CD a ete le point de depart d'une experimentation effectuee sur les donneurs de sang et les malades examines au Centre de Transfusion Sanguine de Toulouse. On a pu demontrer que les sujets porteurs du chromosome Cde associe a cdE etaient agglutines par tous les serums anti-C et anti-CD alors que les sujets CdE n'etaient agglutines que par certains d'entre eux dans les conditions normales. Par contre, ils etaient agglutines par tous apres papainisation ou en utilisant le test de Coombs indirect. Ceci souligne la grande heterogeneite des reactifs anti-C qui sont en realite des melanges de plusieurs types d'anticorps et en particulier d'anti-C et d'anti-Ce. La meconnaissance de ces notions peut entrainer des erreurs dans la determination des phenotypes Rh.

Resume Les auteurs comparent les diverses methodes actuelles de depistage des anticorps d'histocompatibilite. Leur experience porte sur pres de 2000 titrages. La leuco-agglutination sur sang preleve sur sequestrene est la methode qui permet d'obtenir le plus grand nombre de resultats positifs. Chez les polytransfuses, il parait necessaire d'associer plusieurs methodes.

Resume Les auteurs decrivent leur technique personnelle de realisation du test de transformation blastique. Ils insistent sur certaines modalites ou precautions a observer. Ils rapportent ensuite leurs resultats, d'une part dans la recherche de l'allergie medicamenteuse, d'autre part dans celle de l'allergie microbienne (antigene M du streptocoque). Leur interpretation est discutee, ainsi que les correlations entre les resultats du laboratoire et la clinique. Ils soulignent en terminant l'interet que revet la realisation du test de transformation blastique en routine et en recherche.

Resume Des taches experimentales ont ete pratiquees sur tissu a l'aide de sang provenant de sujets Vw− et Vw+. Cent quarante deux taches Vw+ et quatre vingt neuf Vw− ont ete ainsi etudiees a des periodes variant entre quelques jours et vingt quatre mois apres leur realisation. Un quart de cm2 a un cm2 de tissu tache est mis a incuber a + 4°C avec 0,15 ml de serum anti-Vw pendant des temps allant de douze a cinquante heures. L'absorption eventuelle des anticorps est definie en comparant les titres des serums mis a incuber avec les taches d'une part, avec leur support non tache de l'autre. D'une facon generale, on n'observe pas d'absorption avec les taches Vw− ou si elle existe elle reste discrete. Par contre les taches Vw+ entrainent une absorption qui est fonction de l'âge de la tache, de sa quantite, du temps d'incubation avec l'anti-Vw. Il est donc possible, dans certaines limites (de temps en particulier) d'identifier les antigenes Vw dans les taches de sang. Cette recherche peut dans des cas, certes tres rares, etre particulierement importante en raison de la haute valeur d'identification de cet antigene de tres faible frequence.

Resume Les auteurs ont recherche les anticorps anti-V w dans le serum de 34 098 donneurs de sang ; ils l'ont retrouve dans 165 cas, soit 0,48 %. L'anticorps anti-Mi a n'a pu etre mis en evidence dans aucun des 18 333 serums etudies. Ceci contraste avec la frequence de ces anticorps dans le serum de sujets atteints d'anemie hemolytique acquise. Les caracteres des anticorps anti-V w depistes sont decrits : il s'agit d'anticorps de type naturel, tres specifiques, dont certains sont susceptibles de servir a la preparation des serums tests. Les anticorps anti-Mi a sont le plus souvent associes dans le meme serum aux anticorps anti-V w : il est pratiquement impossible de les separer. L'antigene V w a ete retrouve avec une frequence de 0,07 % sur la meme population de donneurs ce qui concorde avec les donnees de la litterature. Les problemes poses par l'identification de l'antigene Mi a paraissent beaucoup plus complexes et le present travail met en lumiere des differences de conception existant a ce sujet entre certains auteurs.

Resume Les resultats de notre experimentation nous paraissent mettre en lumiere deux notions. La premiere concerne la specificite de la formation des rosettes et les rapports existant entre la production des CFR et celle des anticorps seriques. La seconde, d'ordre plus pratique, a trait a la possibilite de mettre en evidence, au moment ou il se produit, un processus immunitaire actif chez certains sujets : affections auto-immunes, femmes enceintes immunisees contre le facteur Rh.

Resume Les auteurs ont titre a l'aide d'hematies d'adultes et de nouveaunes des serums anti-A ou anti-B provenant de sujets non immunises et des serums anti-A ou anti-B provenant de sujets immunises par ces facteurs. Dans leurs conditions experimentales, ils ont montre que l'on pouvait distinguer deux groupes d'enfants, ceux dont l'antigenicite A ou B est nettement plus faible que celle de l'adulte (146 cas sur 164) et ceux dont l'antigenicite est tres voisine de celle de l'adulte (11 % des cas). Outre les interessants problemes theoriques ainsi poses ces notions sont d'un grand interet pratique. En effet, elles permettent d'expliquer d'une part l'anemie secondaire de la M.H.N.N. ABO et d'autre part ses formes graves qui ne se voient que chez les enfants d'antigenicite forte.

Resume Cent cinquante huit taches experimentales ont ete pratiquees a partir de sang d'adulte et deux cents a partir de sang de cordon. Les antigenes I et i ont ete recherches a l'aide d'anticorps anti-I provenant de donneurs de sang I + . Les serums anti-i ou anti-I proviennent soit de sujets en bonne sante, soit de malades. Par dilution dans du serum physiologique ou du serum AB, le titrage du serum anti-I est ramene au 1/16. Les serums anti-i de titre plus faible n'ont pas ete dilues. Il est a noter que ceux d'entre eux qui proviennent de malades sont inhibes specifiquement par le serum normal et ne pourraient done etre dilues en serum AB. Par contre, les serums anti-i provenant de sujets sains ne sont pas inhibes par le serum normal. Les serums de sujets possedant un anticorps anti-i ne contiennent pas la substance inhibitrice. La presence des antigenes I ou i est deduite de l'absorption eventuelle des anticorps correspondants. Les details de la technique sont decrits ainsi que les resultats qui sont moins nettement tranches que ceux fournis par l'identification d'autres antigenes erythrocytaires. La recherche des antigenes I et i peut etre precise en medecine legale lorsqu'il s'agit de differencier le sang adulte de sang fœtal ou neonatal. Elle doit alors etre associee a la recherche des antigenes A 1 et H (suivant le groupe ABO de la tache a examiner) puisque ceux-ci n'existent qu'exceptionnellement et en petite quantite dans le sang fœtal ou neo-natal.

Resume Les problemes immunologiques generaux poses par la grossesse sont d'abord evoques. Il existe de multiples differences antigeniques entre la mere et le fœtus au niveau des erythrocytes, des plaquettes, des leucocytes, des proteines seriques et des tissus ; les elements fœtaux correspondants, ou tout au moins une partie d'entre eux, sont certainement en contact avec les cellules immunologiquement competentes de la mere : celle-ci devrait donc s'immuniser contre eux. En fait, l'experience de tous les jours prouve que cette immunisation constitue l'exception et non la regle ; la grossesse correspond donc a une homogreffe privilegiee. Les hypotheses emises pour expliquer ces faits sont rapidement discutees. L'immunisation vis-a-vis des antigenes erythrocytaires ayant fait l'objet de rapports precedents, les phenomenes d'immunisation vis-a-vis des autres antigenes sont ensuite decrits. Des anticorps contre certains de ceux-ci en particulier des antigenes leuco-plaquettaires, sont retrouves chez les multipares avec une frequence notable. D'une facon generale les anticorps sont capables de traverser le placenta pour gagner la circulation fœtale mais les accidents cliniquement decelables sont cependant tres exceptionnels : ils sont envisages et tout specialement les thrombopenies et leucopenies neo-natales. D'autres problemes immunologiques sont effleures enfin : phenomenes peut-etre immunologiques observes au cours de certaines immunisations fœto-maternelles anti-erythrocytaires et ne paraissant pas etre directement expliques par le conflit immunologique principal ; possibilite pour le fœtus de s'immuniser contre un antigene maternel.

Resume Les auteurs rapportent les resultats de l'etude immunologique et cytogenetique d'une observation de double population d'hematies chez deux jumeaux hetero-caryotes.

Summary A considerable number of blood group antigens can be detected in dry bloodstains, but it is a difficult job which can only be undertaken by experienced workers. If the quality and quantity of the bloodstains are optimal, results are exeunt. But as the amount of dry blood available is rarely sufficient to be tested for all the antigens which can be detected, it is usually advisable to restrict the search to antigens of high identification value, e. g., antigens present in the blood of a suspected person but not in that of the victim, or vice versa. The most difficult task for the expert is to define the value of the opinion he gives in an individual case. Such questions as: Which antigens should be looked for? How far can the failure to demonstrate a certain antigen be trusted ? can only be answered by studying the case thoroughly and by having a large experience of this type of examination. Zusammenfassung Es ist heute moglich, in trockenen Blutflecken eine grose Anzahl von Blutgruppenantigenen nachzuweisen. Die Bestimmungstechnik ist jedoch schwierig. Deswegen sollten Blutfleckenuntersuchungen nur in spezialisierten Laboratorien durchgefuhrt werden. In gunstigen Fallen, d. h. wenn der Fleck ausreichende Mengen yon gut konservierten Erythrozyten enthalt, gelingt es, zuverlassige Ergebnisse zu erzielen. Nur in seltenen Fallen reicht die angetrocknete Blutmenge aus, um alle oben erwahnten Antigene zu bestimmen. Es ist deshalb zweckmasig, zunachst diejenigen Antigene zu bestimmen, denen im betreffenden Fall eine besondere forensische Bedeutung zukommen konnte, da sie z. B. beim Opfer fehlen und beim fraglichen Tater vorkommen. Es ist fur den Experten nach wie vor schwierig, die Grenzen seines Untersuchungsberichtes abzustecken und sich in der Wahl der Antigene festzulegen. Der forensische Wert eines negativen Antigennachweises ist im konkreten Fall unter Urnstanden schwierig zu beurteilen. All dies zeigt, das die serologische Blutfleckenanalyse nur bei kritischer Wurdigung ihrer biologischen Grundlagen durch erfahrene Untersucher dem Richter schlussige Ergebnisse zur Verfugung stellen kann.

Resume Les erreurs ou les discordances dans la determination du facteur Rho existent et revetent un tres grand interet en raison de divers aspects que revet ce probleme : genetique, biologique, medico-legal et pratique dans le cadre de la transfusion sanguine et des accidents d'iso-immunisation. Ces discordances peuvent etre dues soit a des erreurs de laboratoire, soit a la constitution antigenique un peu particuliere de certains sujets. Les erreurs de laboratoire que nous avons ete appeles a reveler etaient dues : a la presence d'une double population d'hematies Rh+ et Rh− ; a l'existence d'auto-anticorps chauds ; a l'action agglomerante de diverses substances : dysglobulinemies, gelee de Warthon, propriete auto-agglutinante du serum en presence d'albumine bovine ; a l'action inhibitrice de perfusions lipidiques ; a des fautes grossieres enfin provenant soit du biologiste, soit du fabricant du serum-test. L'existence de differences entre la constitution antigenique du facteur Rho chez divers sujets entraine des differences de reactivite avec les serums anti-D qui les font classer Rh+ par quelques-uns, Rh− par d'autres, Du par la plupart. En realite leur etude a l'aide d'anticorps anti-D individuels convenablement choisis permet de les classer en deux groupes principaux (qu'il est encore possible de subdiviser) : les Du et les Rh partiel. Les criteres permettant de les definir sont discutes a lumiere des resultats de l'experimentation realisee et sont replaces dans le contexte plus general de la genetique du systeme Rhesus.

Fourteen HLA-A and 18 HLA-B antigens were studied in three samples of Pyrenean populations: 198 unrelated individuals of a “Pays Basque” group; 212 non-Basque individuals from a valley in Beam, l'Ouzom; and 73 non-Basque individuals from the neighboring valley of Bareges. The results in the Basque and the non-Basque people from l'Ouzom were comparable: the gene frequencies of HLA-A29, Aw19.2, B17 were increased and the haplotypes HLA - Aw 19.2, B18; A29, B12; A2, B5; Al, B17 were found frequently with a striking linkage disequilibrium; HLA-B18 had an increased gene frequency in all these Pyrenean populations, while Bw35 was frequent in l'Ouzom and Bareges, but not among the Basques. The characteristics of Bareges were very different: the gene frequencies of HLA-A2, All, B7 were increased while the frequency of HLA-B5 was low; the most characteristic haplotypes were HLA-A2, B12; A2, B18; All, Bw35; All, B27. It is interesting to note discrepancies between ethnic and HLA classification of the Basques and the non-Basque population of l'Ouzom. The HLA characteristics are quite different in the Bareges sample, more closely resembling those of Northern Europe.

The study of the Bod. family seems to show the existence of a gene Yy controlling the synthesis of A factor on the red cell. The mother is A1 and the father A2. Four of the five children were studied: one is O, two are A1 and the fourth is Am. The existence of an O child implies that both parents are heterozygous at locus ABO (A1O, A20). Thus, the appearance of an Am subject suggests that, in this specific case, this phenotype is not due to a mutation at ABO locus, but rather to a recessive y gene carried by an independent locus, and which would inhibit the normal synthesis of A on the red cell. This y gene would be heterozygous in each parent (Yy) and homozygous in an Am child; this could explain the inhibition of A factor on the red cell of the subject.