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Frequentes falhas de manejo da Sarna da Macieira (SDM) nos pomares, associadas aos problemas ambientais devido a utilização incorreta dos fungicidas, impulsionam o desenvolvimento de medidas alternativas. Assim, o objetivo do presente estudo foi verificar a possibilidade de uso dos bioestimulantes de forma isolada ou em mistura com fungicidas para o manejo da SDM. Para isto plantas de macieira ‘Gala’ foram pulverizadas de setembro a novembro dos anos de 2014 a 2018, entre um e dois dias antes de um período chuvoso com diferentes classes de bioestimulantes (aminoácidos, fosfitos, regulador de crescimento, fertilizantes foliares a base de extrato vegetal, algas e minerais). Alguns bioestimulantes testados reduziram a incidência da SDM em folhas e/ou frutos, bem como melhoraram os parâmetros de qualidade, no entanto este efeito foi dependente da classe de bioestimulante utilizado, forma que foi aplicado (isolado ou mistura), e ciclo da macieira avaliado.

The causal agents of apple bull?s-eye rot in southern Brazil have recently been described as Neofabraea actinidiae and N. brasiliensis. Isolates of both species were evaluated for response of mycelial growth index (MGI) to different temperatures, enzyme production, mycelial growth inhibition and effective concentrations (EC 50 and EC 100 ) of the fungicides tri fl umizole, pyrimethanil and thiophanate methyl, as well as aggres- siveness on fruits of "Fuji " hybrid and " Pink Lady " . There was signi ficantly lower mycelium growth in N. brasiliensis compared with N. actinidiae at all temperatures tested. Neither species grew at 3 and 32°C. There were minor differences in production of enzymes in the two species, with all N. brasiliensis isolates showing no production of pectolyase at pH 7. The lowest EC 50 and EC 100 values were observed with thiophanate methyl. In general, " Fuji " fruits were more susceptible to Neofabraea infection and had larger lesions, while N. brasiliensis isolates showed greater aggressiveness on " Fuji " hybrid and " Pink lady " fruits compared with N. actinidiae. Made available in DSpace on 2018-03-03T00:34:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CharacterizationofNeofabraeaactinidiaeandNbrasiliensisascausalagentsofapplebullseyerotinsouthernBrazil.pdf: 563520 bytes, checksum: a0be3950124fd2c673c066146382a841 (MD5) Previous issue date: 2018-03-02

European apple canker (EC) is caused by Neonectria ditissima, a pathogen officially registered as a quarantine pest in 2012. Thirty-five isolates of N. ditissima of different geographical regions of southern Brazil from apple branches showing symptoms of EC were identified by the specific pair primers Ch1 and Ch2 and analyzed concerning the virulence on Gala apple cultivar and morphophysiological characteristics. The disease symptoms were characterized and the isolates compared based on average mycelium growth (AMG), mycelium growth index (MGI), colony color, conidia type, dimensions and growth on potato dextrose agar (PDA), malt agar (AM), and synthetic SNAY (SN) culture media. Nineteen isolates showed the greatest AMG on PDA, forming three growth groups of 35.56 (GI), 52.71 (GII), and 62.67mm (GIII). Seven isolates showed MGI greater than 4.0mm diameter on PDA compared with that on AM and SN. The highest conidia production was on SN, and the predominant colony color in all media was white to beige with central pigmentation of brown and borders colored in shades of beige. There were significant differences among the average dimensions of micro- and macroconidia on PDA, AM, and SN. The pathogenicity was confirmed for all isolates despite of different morphophysiological characteristics. There was no correlation among isolates morphophysiological variability, virulence, and geographical origin. RESUMO: O cancro europeu (CE) da macieira é causado pelo fungo Neonectria ditissima e foi oficialmente registrado como praga quarentenária em 2012. Foram avaliados 35 isolados de N. ditissima provenientes de ramos de macieira com sintomas típicos de CE de diferentes regiões do sul do Brasil. Os isolados foram identificados pelos primers específicos Ch1 e Ch2 e analisados quanto as características morfofisiológicas e virulência na cultivar de macieira Gala. Os sintomas foram caracterizados e os isolados comparados com base no crescimento micelial médio (CMM), índice de crescimento micelial (ICM), coloração das colônias e tipos, dimensões e produção de conídios em meios de cultura batata-dextrose-ágar (BDA), malte-ágar (MA) e meio sintético SNAY (SS). Dezenove isolados tiveram os maiores CMM sobre BDA, formando três grupos de crescimento de 35.56 (GI), 52.71 (GII) e 62.67mm (GIII). Sete isolados tiveram ICM maior de 4mm de diâmetro sobre BDA quando comparados com os meios MA e SS. A maior produção de conídios ocorreu sobre o meio SS e a coloração predominante foi de branco-à-bege com pigmentação central marrom e bordas de colônia em tons de bege. Foram observadas diferenças significativas nas dimensões médias dos micro- e macroconídios sobre os meios de culturas BDA, MA e SS. Todos os isolados foram patogênicos na cultivar de macieira gala, independentemente das diferenças morfofisiológicas. Não foram observadas correlações entre a variabilidade morfofisiológicas, virulência e origem geográfica dos isolados.

A podridão olho de boi causada por Cryptosporiopsis perennansé a principal doença de maçãs em pós-colheita no Brasil. Objetivou-se neste trabalho avaliar a) o uso de sais de fosfito de potássio em associação ou não ao fungicida captan no controle da doença em condições de campo e in vitro, b) as modificações físico-químicas nos frutos e, c) o efeito desses sais na atividade da peroxidase e da fenilalanina amonia-liase em maçãs inoculadas artificialmente. As aplicações dos sais de fosfito de potássio e captan foram realizadas na safra 2007/08, município de Vacaria, em pomar da cv. Pink Lady(r) a partir dos 45 dias antes da colheita ou 24 h antes da colheita. A atividade da peroxidase e da fenilalanina amônia-liase foi determinada em frutos 24 h e 14 dias após as inoculações com o patógeno. Aplicações de fosfito de potássio + captan reduziram em 60% os danos pela podridão olho de boi em pós-colheita, além de reduzir 66% da quantidade de inóculo na superfície das maçãs em aplicação realizada no dia anterior à colheita. O fosfito de potássio inibiu o desenvolvimento in vitrodo fungo sem alterar a atividade das enzimas peroxidase e fenilalanina amônia-liase. Os fosfitos de potássio mostraram ação fungicida erradicante, com potencial de uso no manejo integrado da podridão olho de boi. The bull's eye rot, caused by Cryptosporiopsis perennans, is the most important postharvest disease of apples in Brazil. The aims of this study were to evaluate a) the use of potassium phosphite salts isolated or in mixture with the fungicide captan for disease control in the field and in vitro; b) the physical/chemical alterations of fruits and, c) the effect of these salts on peroxidase and phenylalanine ammonia-lyase activity in artificially inoculated apples. Potassium phosphites and captan were applied in the 2007/08 season, at Vacaria City, to an orchard of cv. Pink Lady(r), starting at 45 days or 24h prior to harvest. The activity of peroxidase and phenylalanine ammonia-lyase was measured for apple fruits at 24h and 14 days after inoculations with the pathogen. Applications of potassium phosphite + captan reduced by 60% the postharvest loss caused by bull's eye rot, besides decreasing 66% of the inocula produced on apple surface when applied on the day prior to harvest. Potassium phosphite inhibited the in vitrogrowth of the fungus without affecting peroxidase and phenylalanine ammonia-lyase activity. Potassium phosphites showed eradicating fungicide action and potential to be used in the integrated management of bull's eye rot.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a distribuição da deposição de agrotóxicos pulverizados em duas cultivares de maçã (Malus domestica Borkh). Uma calda com traçador Rodamina B foi pulverizada, com equipamento do tipo carreta com cortina de ar, com dois tipos de calibrações. Em uma calibração foram utilizados bicos cones JA-1, JA-2 e JA-3 e na outra, bicos leque AVI 110 ISO-04 e bicos JA-1. Não houve diferenças entre as calibrações, mas a deposição nas plantas foi decrescente da região apical para a basal. Nas calibrações testadas, 25% do traçador aplicado perdeu-se no solo. The objective of this work was to evaluate the distribution of pesticide deposition on two apple varieties (Malus domestica Borkh). Liquid spray with Rhodamine as tracer was sprayed by trailed aircarrier equipment, with two types of calibrations. In one of them it was used the JA-1, JA-2 and JA-3 cone nozzles, and in the other, AVI 110 ISO-04 fan nozzles and JA-1 cone nozzles. There were no differences among the calibrations, but the deposition on the plants decreased from the apical to the basal region. On all tested calibrations, 25% of the applied tracer was wasted on the soil.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a distribuição da deposição de agrotóxicos pulverizados em duas cultivares de maçã (Malus domestica Borkh). Uma calda com traçador Rodamina B foi pulverizada, com equipamento do tipo carreta com cortina de ar, com dois tipos de calibrações. Em uma calibração foram utilizados bicos cones JA-1, JA-2 e JA-3 e na outra, bicos leque AVI 110 ISO-04 e bicos JA-1. Não houve diferenças entre as calibrações, mas a deposição nas plantas foi decrescente da região apical para a basal. Nas calibrações testadas, 25% do traçador aplicado perdeu-se no solo.The objective of this work was to evaluate the distribution of pesticide deposition on two apple varieties (Malus domestica Borkh). Liquid spray with Rhodamine as tracer was sprayed by trailed aircarrier equipment, with two types of calibrations. In one of them it was used the JA-1, JA-2 and JA-3 cone nozzles, and in the other, AVI 110 ISO-04 fan nozzles and JA-1 cone nozzles. There were no differences among the calibrations, but the deposition on the plants decreased from the apical to the basal region. On all tested calibrations, 25% of the applied tracer was wasted on the soil.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a colonização de Cryptosporiopsis perennans na epiderme de maçãs e a eficiência da aplicação de água aquecida e radiação UV-C no controle desse patógeno. Em maçãs submetidas à inoculação de C. perennans, a colonização de lenticelas e das áreas adjacentes pelo patógeno foi avaliada por microscopia eletrônica de varredura. A sensibilidade dos conídios de C. perennans aos tratamentos foi avaliada em suspensão aquosa, às temperaturas de 28, 45, 50 e 55ºC, por 15 e 30 s, e às doses de radiação UV-C de 0,018, 0,037, 0,075, 0,150, 0,375, 0,750, 1,500 e 3,000 kJ m-2. Em maçãs submetidas à inoculação de C. perennans, foram avaliados os efeitos de 0,375, 0,750 e 1,500 kJ m-2 de radiação UV-C e da aspersão de água aquecida à 50ºC, por 15 e 30 s no controle do patógeno. O fungo produziu abundante micélio e conídios nas lenticelas e nas áreas adjacentes, na epiderme das maçãs. A água aquecida a 50ºC por 15 s e à dose de radiação de UV-C de 0,750 kJ m-2 reduzem em mais de 99% a sobrevivência de conídios. A aspersão de água aquecida a 50ºC por 15 s e à dose de radiação de UV-C de 0,375 kJ m-2, controlam C. perennans em maçãs.

A eficiência de diferentes formulações comerciais de fosfitos de potássio foi avaliada no controle de Colletotrichum gloeosporioides em experimentos in vitro e in vivo. Nos testes in vitro, foram utilizadas doses semelhantes de íon fosfito, das formulações N-P-K 0-40-20, 0-30-20 e 0-20-20, que foram incorporados ao meio de cultura BDA. Um disco de meio com o fungo foi transferido para cada placa de Petri e 7 dias após, avaliou-se o diâmetro da colônia. Mudas de macieira 'Gala' foram inoculadas com C. gloeosporioides e após 48 h pulverizadas com as doses de registro das seguintes formulações (p.c.) dos fertilizantes N-P-K: 0-40-20 (a:1,5µL/mL), (b:1,5µL/mL); 0-30-20 (c:1,5µL/mL), (d: 2,5µL/mL); 0-20-20 (e:2µL/mL), (f: 3µL/mL); água (testemunha). Em outro ensaio, utilizaram-se somente fosfitos de potássio de formulação 0-40-20. Avaliou-se a percentagem de lesões 10 dias após a inoculação. Os fosfitos de formulação 0-40-20 (pH 3) interferiram no desenvolvimento do C. gloeosporioides, causando diminuição de 94% no crescimento micelial das colônias. Quando pulverizado 48 h após a inoculação, somente uma formulação de fosfito 0-40-20 reduziu significativamente a severidade da mancha foliar de Glomerella, isto é, em 62%. The efficiency of different commercial formulations of potassium phosphite on Colletotrichum gloeosporioides was evaluated in vitro and in vivo. In in vitro tests similar doses of phosphite ion in N-P-K formulations 0-40-20, 0-30-20 and 0-20-20 were incorporated into PDA medium in Petri dishes. A disk of the medium with the fungus was transferred to each Petri dish and colony diameter was measured after 7 days. Plants of apple 'Gala' were inoculated with C. gloeosporioides and after 48 h were sprayed with recommended doses of the following formulations (p.c.) of N-P-K fertilizers: 0-40-20 (a:1.5µL/mL), (b:1.5µL/mL); 0-30-20 (c:1.5µL/mL), (d: 2.5µL/mL); 0-20-20 (e:2µL/mL), (f: 3µL/mL), water (control). In a second experiment, only potassium phosphite in the formulation 0-40-20 was used. Disease severity was evaluated 10 days after inoculation. The phosphites in the formulation 0-40-20 (pH 3) interferred with mycelial development of C. gloeosporioides and reduced colony diameter by 94%. In plants sprayed at 48 h after inoculation, only one formulation of phosphite (0-40-20) significantly reduced the severity of Glomerella leaf spot and did so by 62%.

O crescimento micelial e a esporulação de nove isolados de Cryptosporiopsis perennans foram avaliados nos meios de cultura batata-dextrose-ágar acidificado (BDA-acid), ágar extrato de malte (AEM) e V8-ágar (V8) sob o regime de fotoperiodo de 12 h a 21°C. Discos de 5 mm de diâmetro, retirados de colônias crescidas em meio BDA por 14 dias, foram transferidos para placas de Petri contendo 20 mL de cada meio. Morfologia das colônias, crescimento micelial, esporulação e dimensão dos esporos foram determinadas ao 13° dias de incubação. Observou-se que os efeitos dos meios de cultura variaram dependendo do isolado. Verificou-se crescimento micelial e produção de conídios em todos os meios testados, porém com uma ampla variação de aspecto e coloração de colônias. Maior crescimento micelial e produção de conídios foram observados nos meios de cultura V8 e AEM, para a maioria dos isolados de C. perennans avaliados. Em todos os meios de cultura todos isolados produziram microconídios fusiformes. The mycelial growth and conidial production of nine isolates of Cryptosporiopsis perennans were evaluated on the culture media of potato-dextrose-agar acidified (PDA-acid), malt extract agar (MEA) and V8-agar (V8) under 12 hours of photoperiod at 21°C. Five mm-diameter disks taken from colonies grown for 14 days on PDA medium under 12 hours of photoperiod at 21°C were transferred to Petri dishes with 20 mL of each medium. Colonial morphology, mycelial growth, sporulation and spore dimension were evaluated after 13 days of incubation. The effect of the culture media varied according to isolates. Mycelial growth and conidial production were observed in all tested media. The culture medium V8 was the best medium tested for mycelial growth and conidial production, followed by MEA for all C. perennans isolates. In all culture media the isolates presented a fusiform conidial shape.

Este trabalho teve como objetivo estudar comparativamente a ação do fosfito de potássio e do polissacarídeo ulvana sobre Colletotrichum gloeosporioides " in vitro" e em plântulas de macieira (Malus domestica). Em meio BDA, avaliou-se o efeito de concentrações de fosfito de potássio (0, 0,0625, 0,125, 0,25 e 0,5 µL/mL; 40% P2O5 - 20% K2O) e ulvana (0, 1, 5, 10 e 20 mg/mL) sobre o crescimento micelial do fungo. Para verificar o efeito preventivo, em plântulas de macieira cultivadas em casa-de-vegetação, pulverizou-se fosfito (3 µL/mL) ou ulvana (10 mg/mL) somente nas folhas inferiores e inoculou-se uma suspensão de 3 x 10(5) conídios/mL 3 e 6 dias após o tratamento. Aos 4, 6 e 8 dias após a inoculação, a porcentagem de área foliar necrosada foi avaliada em folhas inferiores e superiores e com estes dados calculou-se a AACPD. Na verificação do efeito curativo, aplicou-se fosfito ou ulvana 24 h após a inoculação. Em meio de cultura, o fosfito reduziu o crescimento micelial, enquanto a ulvana não afetou o fungo. O tratamento preventivo de ulvana reduziu a severidade local e sistemica em 65%. Ao contrário da ulvana, o fosfito teve efeito curativo quando aplicado 24 h após a inoculação. Os resultados indicam que o fosfito de potássio tem ação direta sobre o fungo, enquanto a ulvana provavelmente induz resistência à mancha foliar da gala em macieira. This work aimed to make a comparative study of the mode of action of potassium phosphite and the polysaccharide ulvan on Colletotrichum gloeosporioides " in vitro" and on apple seedlings. Different concentrations of potassium phosphite (0, 0.0625, 0.125, 0.25 and 0.50 µL/mL; 40% P2O5 - 20% K2O) and ulvan (0, 1, 5, 10 and 20 mg/mL) were evaluated against fungus mycelium growth on PDA-medium. To verify the preventive effect, apple seedlings were grown in greenhouse, their lower leaves sprayed with phosphite (3 µL/mL) or ulvan (10 mg/mL) and inoculated with a suspension of 3 x 10(5) conidia/mL, 3 or 6 days after treatment. On the 4th, 6th and 8th day after inoculation, the percentage of leaf area with necrosis was evaluated on lower as well as upper leaves and the AUDPC was calculated. To verify the curative effect, phosphite or ulvan was applied 24 h after inoculation. Phosphite reduced mycelial growth on culture medium, while ulvan did not affect it. The preventive treatment of ulvan reduced disease severity locally and systemically by 65%. In contrast to ulvan, phosphite presented a curative effect when applied 24 h after inoculation. The results indicate that potassium phosphite has a direct effect on fungus, whereas ulvan probably induces resistance to ‘Gala’ leaf spot in apple plants.

As podridões pós-colheita podem ocasionar perdas substanciais em maçãs (Malus domestica). O mofo azul (Penicillium expansum), a podridão amarga (Glomerella cingulata) e a podridão olho-de-boi (Pezicula malicorticis) estão entre as mais comuns. Grande atenção tem sido dada ao uso de alternativas de controle às doenças pós-colheita. A aplicação pós-colheita de leveduras, como o Cryptococcus laurentii, é uma das opções. Neste estudo testou-se a eficiência de C. laurentii (isolado 36) para o controle de podridões em maçãs 'Fuji' e 'Gala'. Após aplicação dos produtos, através de imersão, os frutos foram armazenados em laboratório (15-20 ºC / 60-70% UR) ou em câmara fria (1 ºC / 90-95% UR). Os patógenos foram inoculados na concentração de 10² conídios ml-1, a levedura a 10(7) células ml-1 e os fungicidas a 150 mg l-1. Em testes de laboratório, a aplicação de C. laurentii reduziu as podridões (G. cingulata, P. expansum e P. malicorticis) da maçã tanto quanto os fungicidas testados (thiabendazol e iprodione). Nos testes efetuados em câmara fria, constatou-se que, após o armazenamento, o tratamento de maçãs com C. laurentii foi tão eficiente quanto os tratamentos com fungicidas (thiabendazol, iprodione, digluconato de clorohexidina, dicloro-s-triazinatriona sódica, dicloroisocianurato de sódio e hipoclorito de sódio) na redução da podridão causada por P. expansum. Aplicação de C. laurentii não alterou a firmeza de polpa nem o teor de sólidos solúveis totais (°Brix) dos frutos. Rots might be responsible for substantial post harvest losses in apples (Malus domestica). The blue mold caused by Penicillium expansum, the bitter rot caused by Glomerella cingulata, and the 'bull's-eye rot' induced by Pezicula malicorticis are among of the most common rots. Great attention has been given to less environmental damaging alternatives for the control of postharvest diseases. The post harvest application of east-like fungi, such as Cryptococcus laurentii, is one option for controlling fruit rot. This study was carried out to test the efficiency of C. laurentii on fruit rot control in 'Fuji' and 'Gala' apples. After application of treatments, by immersion, the fruits were stored in the laboratory (15-20 °C / 60-70% RH) or in cold storage (1 °C / 90-95% RH). The pathogens were applied at a concentration of 10² conidia ml-1, the yeast at 10(7) cells ml-1, and the fungicides at 150 mg l-1. The Cryptococcus laurentii was as efficient in reducing apple fruit rots (G. cingulata , P. expansum , and P. malicorticis) as were the fungicides thiabendazole and iprodione. In cold storage trials, C. laurentii was as efficient as the fungicides (thiabendazole, iprodione, chlorhexidine digluconate, sodium dichloro-s-triazinetrione, sodium dicloroisocyanurate, and sodium hypochloride) in reducing P. expansum fruit rot. The application of C. laurentii did not affect flesh firmness and the total soluble solids content (°Brix) of the fruits.

A estrutura mais superficial da epiderme dos frutos é constituída por fina camada de cera, responsável por mecanismos de proteção, principalmente relacionados à evapotranspiração e ao ataque de patógenos. A visualização de cera por microscopia eletrônica de varredura apresenta dificuldades no processamento da amostra, pois os métodos rotineiramente utilizados ocasionam sérios danos a esta camada ou, simplesmente, provocam sua eliminação devido ao processo de solubilização causado pelos reagentes utilizados. Alguns autores têm utilizado temperaturas baixas (-90ºC) para o processamento de amostras. No Brasil, tentativas de observação de cera em maçãs, utilizando a microscopia eletrônica de varredura, têm sido realizadas; entretanto, os resultados não foram satisfatórios. No Laboratório de Microscopia Eletrônica da Embrapa Clima Temperado, foi adaptado um método simples e que tem apresentado bons resultados. Para este experimento, foram retiradas pequenas porções da casca de maçãs da região equatorial dos frutos. As amostras foram fixadas em lâminas histológicas, utilizando fita adesiva nas extremidades. Posteriormente, foram colocadas em dessecador contendo sílica gel, para que ocorresse a desidratação. Após 72 horas, foram retirados fragmentos para fixação em stubs e metalização com ouro. Foi usado um microscópio eletrônico ZEISS (DSM-940A), regulado à distância de trabalho de 15mm, voltagem de aceleração de 10 kV e ampliação de 3.000 X. As imagens obtidas permitiram avaliar a interferência dos fatores ambientais utilizados no processo de frigoconservação de maçãs. The fruit epidermis is covered by a thin layer of wax which gives protection to the fruit, mainly against water loss and pathogenic organisms. Several studies using scanning electron microscope have been developed to study that wax. The wax layer visualization through the scanning microscope is difficult due to some problems of sample preparation. The usual procedures cause serious damages to the wax layer or even eliminate it because of its solubilization by some of the reagents. Several researchers have kept the samples at very low temperature (-90ºC) during the preparation. Wax observations in Brazil by using electronic scanning microscope have been performed, however in some of them results were not consistent. A relatively simple procedure at the Laboratory of Electron Microscopy at Embrapa Temperate Climate has been tried to overcome such difficulties. Such procedure consists of collecting a small piece of the fruit epidermis (1cm²) taken from the equatorial part of the apples. After sampling it the piece of epidermis is placed on a glass slide hold by the extremes with a sticky tape. The sample on glass slide is kept for 72 hours into a dessicator containing drierite for the sample dehydration. Then, small pieces of the sample (2 mm²) were taken and hold on stubs followed by metalization in gold. Following that, the sample is observed using a Zeiss (DSM - 940A) electronic microscope at a working distance of 15 mm and acceleration voltage of 10 KV. The obtained images made possible to evaluate the action of some experimental treatments which have been used on apples during cold storage.

A estrutura mais superficial da epiderme dos frutos é constituída por fina camada de cera, responsável por mecanismos de proteção, principalmente relacionados à evapotranspiração e ao ataque de patógenos. A visualização de cera por microscopia eletrônica de varredura apresenta dificuldades no processamento da amostra, pois os métodos rotineiramente utilizados ocasionam sérios danos a esta camada ou, simplesmente, provocam sua eliminação devido ao processo de solubilização causado pelos reagentes utilizados. Alguns autores têm utilizado temperaturas baixas (-90ºC) para o processamento de amostras. No Brasil, tentativas de observação de cera em maçãs, utilizando a microscopia eletrônica de varredura, têm sido realizadas; entretanto, os resultados não foram satisfatórios. No Laboratório de Microscopia Eletrônica da Embrapa Clima Temperado, foi adaptado um método simples e que tem apresentado bons resultados. Para este experimento, foram retiradas pequenas porções da casca de maçãs da região equatorial dos frutos. As amostras foram fixadas em lâminas histológicas, utilizando fita adesiva nas extremidades. Posteriormente, foram colocadas em dessecador contendo sílica gel, para que ocorresse a desidratação. Após 72 horas, foram retirados fragmentos para fixação em stubs e metalização com ouro. Foi usado um microscópio eletrônico ZEISS (DSM-940A), regulado à distância de trabalho de 15mm, voltagem de aceleração de 10 kV e ampliação de 3.000 X. As imagens obtidas permitiram avaliar a interferência dos fatores ambientais utilizados no processo de frigoconservação de maçãs.The fruit epidermis is covered by a thin layer of wax which gives protection to the fruit, mainly against water loss and pathogenic organisms. Several studies using scanning electron microscope have been developed to study that wax. The wax layer visualization through the scanning microscope is difficult due to some problems of sample preparation. The usual procedures cause serious damages to the wax layer or even eliminate it because of its solubilization by some of the reagents. Several researchers have kept the samples at very low temperature (-90ºC) during the preparation. Wax observations in Brazil by using electronic scanning microscope have been performed, however in some of them results were not consistent. A relatively simple procedure at the Laboratory of Electron Microscopy at Embrapa Temperate Climate has been tried to overcome such difficulties. Such procedure consists of collecting a small piece of the fruit epidermis (1cm²) taken from the equatorial part of the apples. After sampling it the piece of epidermis is placed on a glass slide hold by the extremes with a sticky tape. The sample on glass slide is kept for 72 hours into a dessicator containing drierite for the sample dehydration. Then, small pieces of the sample (2 mm²) were taken and hold on stubs followed by metalization in gold. Following that, the sample is observed using a Zeiss (DSM - 940A) electronic microscope at a working distance of 15 mm and acceleration voltage of 10 KV. The obtained images made possible to evaluate the action of some experimental treatments which have been used on apples during cold storage.

Notas Científica.