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[ES] Las plantas de vid (Vitis vinifera L.) están expuestas a una gran variedad de patógenos. En la actualidad, las enfermedades fúngicas de la madera de la vid (GTDs) se encuentran entre los principales factores que limitan la productividad de este cultivo. Una vez las vides están infectadas, la productividad de la planta disminuye, provocando una muerte lenta o apoplética. La investigación de agentes de control biológico (BCAs) capaces de prevenir, o al menos minimizar, el impacto de las GTDs, se considera una prioridad de investigación. En esta Tesis Doctoral se caracterizó un agente de biocontrol potencial y, junto con un producto comercial biológico ya registrado, fueron probados contra varios patógenos agentes causales de GTDs, en invernadero bajo condiciones controladas, y también durante el proceso de propagación de la vid en vivero. Los resultados del análisis genómico completo de Bacillus subtilis PTA-271 muestran un sistema funcional de motilidad de enjambre, una fuerte capacidad de supervivencia y un conjunto de genes que codifican sustancias bioactivas conocidas por estimular el crecimiento o las defensas de las plantas, influir en la microbiota beneficiosa y contrarrestar la agresividad de los patógenos. Cuando Bs PTA-271 se probó contra Neofusicoccum parvum BT67 en plantas injertadas de invernadero, Bs PTA-271 y Ta SC1 demostraron que el cultivar contribuye a los efectos beneficiosos de Bs PTA-271 y Ta SC1 contra Np-Bt67. La aplicación simultánea de ambos BCAs demostró ser beneficiosa contra este patógeno en vides del cultivar Tempranillo. El análisis transcriptómico de las mismas muestras mostró ampliamente los cambios en la fisiología de la planta inducidos tanto por Bs PTA-271 como por Ta SC1 para proteger la vid ante la infección por Np-Bt67. En Chardonnay, las plantas infectadas con Np-Bt67 presentan genes sobreexpresados que están implicados en las vías de señalización del acido absicico (ABA). En Tempranillo, la infección con Np-Bt67 provoca cambios de expresión en más de 200 genes, relacionados sobre todo con la importación de aminoácidos, procesos relacionados con el cloroplasto y el fotosistema, respuestas de la planta a estímulos bióticos y biosíntesis de metabolitos secundarios. La protección de Ta SC1 en las plantas de Tempranilllo implica un mayor número de cambios, que abarcan tanto el metabolismo primario como el secundario, relacionados con cambios en las señales hormonales, como con el aicdo absicico (ABA). Durante el proceso de producción de la vid en vivero, los resultados demostraron una reducción significativa del porcentaje de plantas infectadas con los patógenos asociados a las enfermedades de decaimiento por Botryosphaeria y Pie negro en el material de vivero tratado con Ta SC1 y Bs PTA-271 respectivamente. Los tratamientos simultáneos con ambos BCAs presentaron una reducción en el porcentaje de plantas infectadas con ambos tipos de patógenos. Al probar el efecto de Bs PTA-271 y Ta SC1 en el microbioma de la rizosfera de la vid de dos suelos diferentes infectados con patógenos del pie negro, los resultados muestran que la inoculación de los BCAs parece mejorar las redes del microbioma de la rizosfera y el estado de saneamiento, sin embargo, el efecto beneficioso de los BCAs puede ser dependiente del suelo. En general, este estudio aportó nuevos conocimientos sobre el uso de uno o más BCAs contra varios patógenos asociados a las GTDs, tanto en el vivero como en vides adultas (viñedo). Además, se destacó el modo de acción de ambos BCAs en la protección de la vid. Por lo tanto, estos hallazgos proporcionan, no sólo una mejor comprensión de las interacciones entre los BCAs, la vid y los patógenos, sino que también son una fuerte contribución a una estrategia de gestión sostenible de las GTDs., [CA] Les plantes de vinya (Vitis vinifera L.) estan exposades a una gran varietat de patògens. En l'actualitat, les malalties fúngiques de la fusta de la vinya (GTDs) es troben entre els principals factors que limiten la productivitat d'aquest cultiu. Una vegada les vinyes estan infectades, la productivitat de la planta disminueix, provocant una mort lenta o apoplética. La investigació d'agents de control biològic (BCAs) capaços de previndre, o almenys minimitzar, l'impacte de les GTDs, es considera una prioritat d'investigació. En aquesta Tesi Doctoral es va caracteritzar en profunditat un agent de biocontrol potencial i, juntament amb un producte comercial biològic ja registrat, tots dos BCAs van ser provats contra diversos patògens agents causals de GTDs, en hivernacle sota condicions controlades, i també durant el procés de propagació de la vinya en viver. Els resultats de l'anàlisi genòmica completa de Bs PTA-271 mostren un sistema funcional de motilitat d'eixam, una forta capacitat de supervivència i un conjunt de gens que codifiquen substàncies bioactivas conegudes per estimular el creixement o les defenses de les plantes, influir en la microbiota beneficiosa i contrarestar l'agressivitat dels patògens. Quan Bs PTA-271 es va provar contra Np BT67 en plantes empeltades d'hivernacle, Bs PTA-271 i Ta SC1 van demostrar que la cultivar contribueix als efectes beneficiosos de Bs PTA-271 i Ta SC1 contra Np-Bt67. L'aplicació simultània de tots dos BCAs va demostrar ser beneficiosa contra aquest patogen en vinyes del cultivar Ull de llebre. L'anàlisi transcriptómico de les mateixes mostres va mostrar àmpliament els canvis en la fisiologia de la planta induïts tant per Bs PTA-271 com per Ta SC1 per a protegir la vinya davant la infecció per Np-Bt67. En Chardonnay, les plantes infectades amb Np-Bt67 presenten gens sobreexpresados que estan implicats en les vies de senyalització de l'acidifique absicico (ABA). En Ull de llebre, la infecció amb Np-Bt67 provoca canvis d'expressió en més de 200 gens, relacionats sobretot amb la importació d'aminoàcids, processos relacionats amb el cloroplast i el fotosistema, respostes de la planta a estímuls biòtics i biosíntesis de metabòlits secundaris. La protecció de Bs PTA-271 en Chardonnay implica gens relacionats amb la biosíntesi d'ABA, les vies dels fenilpropanoides, els metabòlits secundaris, i l'estructura i organització de la paret cellular. La protecció de Ta SC1 en les plantes de Tempranilllo implica un major nombre de canvis, que abasten tant el metabolisme primari com el secundari, relacionats amb canvis en els senyals hormonals, com amb l'acid abcísic (ABA). Durant el procés de producció de la vinya en viver, els resultats van demostrar una reducció significativa del percentatge de plantes infectades amb els patògens associats a les malalties de decaïment per Botryosphaeria i Peu negre en el material de viver tractat amb Ta SC1 i Bs PTA-271 respectivament. Els tractaments simultanis amb tots dos BCAs van presentar una reducció en el percentatge de plantes infectades amb tots dos tipus de patògens. En provar l'efecte de Bs PTA-271 i Ta SC1 en el microbioma de la rizosfera de la vinya de dos sòls diferents infectats amb patògens del Peu negre, els resultats mostren que la inoculació dels BCAs sembla millorar les xarxes del microbioma de la rizosfera i l'estat de sanejament, no obstant això, l'efecte beneficiós dels BCAs pot ser dependent del sòl. En general, aquest estudi va aportar nous coneixements sobre l'ús d'un o més BCAs contra diversos patògens associats a les GTDs, tant en el viver com en vinyes adultes. A més, es va destacar la manera d'acció de tots dos BCAs en la protecció de la vinya. Per tant, aquestes troballes proporcionen, no sols una millor comprensió de les interaccions entre els BCAs, la vinya i els patògens, sinó que també són una forta contribució a una estratègia de gestió sostenible de les GTDs., [EN] Grapevine (Vitis vinifera L.) plants are exposed to a wide variety of pathogens. Nowadays, grapevine fungal trunk diseases (GTDs) are amongst the main constraints for the productivity of this crop. Once infected, plant productivity is decreased, leading to a plant slow or apoplectic death. Investigation of biocontrol agents (BCAs) capable to forestall or at least to minimize the impact of GTDs, while being a sustainable treatment, is viewed as a research priority. One potential BCA was deeply characterized, and together with a biological commercial product, both BCAs were tested against several GTD pathogens, in greenhouse under controlled conditions, and during the grapevine propagation process. Results from the full genomic analysis of Bacillus subtilis PTA-271 (as BCA with a potential) show a functional swarming motility system, strong survival capacities and a set of genes encoding for bioactive substances known to stimulate plant growth or defenses, influence beneficial microbiota, and counteract pathogen aggressiveness. When tested against Neofusicoccum parvum Bt67 (thereafter Np-Bt67) in greenhouse cuttings, B. subtilis PTA-271 (Bs PTA-271) and T. atroviride SC1 (Ta SC1) proved that the cultivar contributes to their beneficial effects against Np-Bt67. The simultaneous application of both BCAs was further proved to be even more effective to protect Tempranillo cuttings. Moreover, the transcriptomic analysis from the same samples showed extensively the plant physiology changes induced by the pathogen but also by each BCA, Bs PTA-271 on Chardonnay and Ta SC1 on Tempranillo, to protect grapevine from Np-Bt67 infection. Thus, Chardonnay cuttings infected with Np-Bt67 showed overexpressed genes implicated on abscisic acid (ABA) biosynthesis and signaling pathways. In Tempranillo, the infection with Np-Bt67 leads to more substantial changes in gene expression, related mostly with amino acid import, chloroplast and photosystem related processes, plant responses to biotic stimulus, and biosynthesis of secondary metabolites. Protection induced by Bs PTA-271 in Chardonnay targets genes related to ABA biosynthesis, phenylpropanoid pathways and secondary metabolites, and cell wall structure/organization in relationship with carbohydrate metabolism that requires much more consideration. Protection with Ta SC1 in Tempranilllo requires a larger number of changes related to transporters, cell wall integrity and extension, cell division and pathogen induced cell death, multidirectional active proteins, and microbiome interactions. During the grapevine nursery process, the results demonstrated a significant reduction on the percentage of infected plants with Botryosphaeria dieback and Black-foot pathogens in the material treated with Ta SC1 and Bs PTA-271 respectively. The simultaneous treatments with both BCAs presented a reduction on infected plants with both Botryosphaeria dieback and Black foot pathogens. When testing the effect of Bs PTA- 271 and Ta SC1 in grapevine rhizosphere microbiome of two different soil infected with Black foot pathogens, results show that the inoculation of BCAs seems to improve the rhizosphere microbiome networks and sanitation status, however, the beneficial effect of BCAs can be soil-dependent. Moreover, as observed in the other experiments, the combination of both BCAs improves their beneficial effect in the rhizosphere microbiome. Overall, this study brought new insights on the use of one or more BCAs against several GTD pathogens, from nursery to adult grapevines. Moreover, highlighted both BCAs mode of action in grapevine protection. Thus, these findings provide, not only a better understanding of BCAs, grapevine, and pathogens interactions, but are also a strong contribution for the future development of sustainable GTDs management strategies.

El objetivo de esta investigación fue comparar y establecer relaciones entre los diferentes indicadores de crecimiento entre plantas de vid con dos niveles de infestación (alto y leve) de Meloidogyne spp. El estudio se realizó en un viñedo cv Merlot, situado en Agrelo, Mendoza, donde se escogieron 2 parcelas, con y sin nematodos, con diferentes niveles de crecimiento vegetativo. Los indicadores a evaluar fueron: peso y número de racimos por planta, peso de poda, cantidad de entrenudos y área foliar de hojas y feminelas. El grado de infestación de nematodos de cada parcela se determinó mediante la técnica flotación - centrifugación. Para el análisis estadístico se utilizó la prueba de wilcoxon (Mann Whitney U) y el test de student. Además, mediante un análisis de regresión lineal, se comprobó si existía relación entre los indicadores evaluados y la densidad de población de Meloidogyne spp. expresado en número de estados juveniles (J2) presentes en el suelo. Los resultados indicaron que la parcela con menor densidad poblacional de juveniles de Meloidogyne spp., presentó mayor peso promedio de madera de poda, así como también un área foliar de hojas y feminelas superior. Con respecto al peso promedio de racimos por planta, dicha parcela también superó a aquella con alta concentración de nematodos. The aim of this research was to compare and establish relationships between different growth indicators of grapevines with two levels of infestation (high and low) of Meloidogyne spp. The study was conducted in a vineyard cv Merlot, located in Agrelo, Mendoza, where two plots (A and B), with and without nematodes, and with different levels of vegetative growth were chosen. The evaluated indicators were: weight and number of bunch stems per plant, pruning weight, number of internodes, and leaf and feminelle area. The degree of nematode infestation per plot was determined by the flotation - centrifugation technique. Statistical analyses were performed through the Wilcoxon (Mann Whitney U) test and Student Test. Furthermore, a linear regression analysis was used to verify the existence of a relationship between the assessed indicators and the population density of Meloidogyne spp., expressed as the number of juvenile states (J2) in the soil. The results indicate that plot with the lower population density of juveniles of Meloidogyne spp., showed a greater average weight of pruning wood, as well as superior leaf and feminelle area. Regarding the average weight of bunch stems per plant, this plot also out performed the plot with a high concentration of nematodes.

Phytophthora root and crown rot is a plant disease responsible for important economic losses in protected pepper crops. A greenhouse experiment was carried out in a temperate climate region (northern Spain) to assess the effects of repeated biodisinfection after three consecutive crop seasons with different organic amendments (a non-composted mixture of sheep manure and chicken litter, a semicomposted mixture of horse manure and chicken litter, Brassica carinata dehydrated pellets plus Sinapis alba fresh green manure) on disease incidence, crop yield and soil quality. Biodisinfection treatments were found to improve soil water properties through reduction in soil bulk density and increased water infiltration. Biodisinfested soils showed higher values of physicochemical and microbial properties than control (untreated) and plastic-mulched soils. In plots treated with the non-composted or semicomposted mixture, the observed higher levels of microbial activity were strongly related with an increase in soil microbial biomass. Brassica-Sinapis treatment had a weaker effect on soil properties than animal manure-based treatments. However, highest counts of total bacteria, actinomycetes and Pseudomonas spp. were found in Brassica-Sinapis-treated soils. It was concluded that repeated biodisinfection for the control of Phytophthora root and crown rot in protected pepper crops located in temperate climate regions can improve soil quality and suppressiveness, as well as allow for a reduction in the dose of organic amendment needed for biodisinfection. Among the studied organic amendments, the semicomposted amendment was the best option in terms of reduction in disease incidence., La podredumbre radicular y del cuello causada por Phytophthora es una enfermedad que genera importantes pérdidas económicas en cultivos de pimiento en invernadero. En una región de clima templado (norte de España) se realizó ensayo en invernadero para evaluar la reiteración de tratamientos de biodesinfección después de tres ciclos de cultivo consecutivos con diferentes enmiendas orgánicas (mezcla no-compostada de estiércol de oveja y gallinaza, mezcla semicompostada de estiércol de caballo y gallinaza, pellets deshidratados de Brassica carinata más Sinapis alba como abono verde fresco) sobre la incidencia de la enfermedad, la producción y la calidad del suelo. La biodesinfección mejoró las propiedades hídricas del suelo al reducir la densidad aparente y aumentar la infiltración. Los suelos biodesinfectados mostraron valores más altos en las propiedades físico-químicas y microbianas que los suelos control (no tratado) y acolchado con plástico. En las enmiendas no-compostada y semicompostada, los valores más altos de actividad microbiana estuvieron fuertemente relacionados con un aumento en la biomasa microbiana. La biodesinfección con Brassica-Sinapis tuvo menor efecto sobre las propiedades del suelo que con ambas enmiendas animales. No obstante, los recuentos de bacterias totales, actinomicetos y Pseudomonas spp. fueron más altos en los suelos tratados con Brassica-Sinapis. La biodesinfección reiterada para controlar la podredumbre radicular y del cuello causada por Phytophthora en cultivos de pimiento en invernadero en regiones de clima templado, puede mejorar la calidad del suelo y su supresividad, así como reducir dosis de enmienda requerida. La enmienda semicompostada fue la mejor en disminuir la incidencia de enfermedad.

In addition to the agronomical characteristics of strawberries (Fragaria ×ananassa Duch.), strawberry breeding programs should take into account its resistance to pathogens. The main goal of this study was to evaluate the resistance of strawberry cultivars against crown and root rot caused by Phytophthora cactorum (Lebert & Cohn) J. Schröt., Verticillium wilt caused by Verticillium dahliae Kleb. and V. albo-atrum Reinke et Berth., and angular leaf spot caused by Xanthomonas fragariae Kennedy and King, all of which are important diseases in strawberry plant nurseries in Spain. Ten strawberry cultivars were used for resistance testing against P. cactorum; nine cultivars were used for resistance testing against V. dahliae and V. albo-atrum; and eight strawberry cultivars were used for resistance testing against two strains of X. fragariae, IVIA349.9a and NCPPB 1469. These assays were conducted under greenhouse conditions for P. cactorum, and under growth chamber conditions for V.dahliae and V. albo-atrum and X. fragariae. ‘Sabrosa’, was classified as being resistant to P. cactorum and V.dahliae and V. albo-atrum and only ‘Sieger’ was classified as being resistant to both strains of X. fragariae. These results emphasize the importance of screening for disease resistance before using strawberry cultivars in commercial strawberry production in Spain., Los programas de mejora de la fresa (Fragaria ×ananassa Duch.) deberían tener en cuenta, además de las características agronómicas de la fresa, su resistencia a patógenos. El objetivo principal de este estudio fue evaluar la resistencia de varios cultivares de fresa contra la podredumbre de corona y radicular causada por Phytophthora cactorum (Lebert and Cohn) J. Schröt., la Verticilosis causada por Verticillium dahliae Kleb. y V. albo-atrum Reinke et Berth., y la mancha angular causada por Xanthomonas fragariae Kennedy and King, todas las cuales son importantes enfermedades en los viveros de fresa en España. Diez cultivares de fresa, se utilizaron para evaluar la resistencia frente a P. cactorum; nueve cultivares se utilizaron para evaluar la resistencia frente a V. dahliae y V. albo-atrum y ocho cultivares fueron utilizados para probar la resistencia frente a dos cepas de X. fragariae, IVIA349.9a y NCPPB 1469. Estos ensayos se realizaron en condiciones de invernadero en el caso de P. cactorum, y en condiciones de cámara de crecimiento en los casos de V.dahliae y V. albo-atrum y X. fragariae. 'Sabrosa' fue clasificada como resistente a P. cactorum y V.dahliae y V. albo-atrum, mientras que sólo 'Sieger' se clasificó como resistente a ambas cepas de X. fragariae. Estos resultados señalan la importancia de evaluar la resistencia de los cultivares de fresa a las diferentes enfermedades presentes en España antes de utilizarlos en la producción comercial de fresas en España.

RESUMEN Este trabajo se basó en la necesidad de incorporar una estrategia de control de la broca del café, Hypothenemus hampei (Ferrari) (Coleóptera: Curculionidae) factible de ser utilizada por los productores de café. En la localidad de Caspo, estado Lara, Venezuela, se evaluó la captura de adultos de broca utilizando un tipo de trampa artesanal construida con envases plásticos desechables de bebidas gaseosas. Mediante un ensayo completamente al azar con cuatro repeticiones se evaluaron los siguientes ocho tratamientos: mezcla de alcoholes metílico (M) y etílico (E) en proporción 1:1; mezcla 3:1 de M y E; mezcla 1:1:1 de M, E y café molido; alcohol isopropílico (I); mezcla 1:1:1 de M, E e I; aguardiente de Agave cocuy; aguardiente de caña de azúcar; y vinagre de pulpa de café. Las mayores capturas de adultos se presentaron en las mezclas que contenían los alcoholes metílico y etílico, pero que no incluían el isopropílico, con promedios superiores a 400 adultos/trampa/semana, superando significativamente al resto de los tratamientos. Un segundo ensayo realizado con estos tres tratamientos para determinar la mejor altura de colocación de las trampas en el cafetal no mostró diferencias significativas entre las dos alturas evaluadas de 0,2 y 1,0 m. En conclusión, el uso de estas trampas utilizando atrayentes que contengan alcohol metílico y etílico colocadas entre 0,2 y 1,0 m de altura se recomienda como una alternativa efectiva para el control de broca en plantaciones altamente infestadas. ABSTRACT This assay was based on the need of developing strategies to control the coffee berry borer Hypothenemus hampei (Ferrari) (Coleoptera: Curculionidae) affordable by farmers. In the locality of Caspo, Lara State, Venezuela, the capture of adults of the insect using handmade traps constructed with soft drink disposable plastic bottles was evaluated in a completely randomized test with four repetitions and the following eight attractants: mix of methylic (M) and ethylic (E) alcohols at 1:1 ratio; mix of M and E at 3:1; mix of M, E and coffee powder at 1:1:1; isopropilic alcohol (I); mix of M, E and I at 1:1:1; Agave cocuy liquor; sugar cane liquor; and coffee pulp vinegar. The greater captures of adults occurred in the treatments that included mixes of methyl and ethyl alcohol, but lacking isopropilic alcohol with averages above 400 adults/trap/week, being significantly higher than the rest of treatments. A second assay established with those three treatments to determine the best height to position the traps in the coffee plantation did not show differences between the two evaluated heights of 0.2 and 1.0 m. The use of these traps using attractants containing mixes of methylic and ethylic alcohols placed between 0.2 and 1.0 m may be an option for controlling the coffee berry borer at high infested plantations.