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182 Pag., El objetivo principal de la presente Tesis Doctoral, se centra en la caracterización de los nueve tipos trisómicos primarios de remolacha azucarera, Beta vulgaris L. Esta caracterización se pretende a través de estudios morfológicos, anatómicos y fisiológicos sobre los componentes de una serie trisómica homocigótica y otra heterocigótica, que pueden resumirse en: 1. Morfología de la hoja. 2. Anatomía de la hoja. 3. Número de cloroplastos en las células guarda de los estomas. 4. Desarrollo y reproducción.

Tesis Universidad de Granada. Departamento de Biología

Universidad de Granada. Departamento de Genética. Leída el 3 de febrero de 1983

Esta dissertação/tese está disponível online com base na Resolução CEPE nº 090, de 24 de março de 2015, disponível em http://www.biblioteca.ufla.br/wordpress/wp-content/uploads/res090-2015.pdf, que dispõe sobre a disponibilização da coleção retrospectiva de teses e dissertações online no Repositório Institucional da UFLA, sem autorização prévia dos autores. Parágrafo Único. Caberá ao autor ou orientador a solicitação de restrição quanto à divulgação de teses e dissertações com pedidos de patente ou qualquer embargo similar. Art. 5º A obra depositada no RIUFLA que tenha direitos autorais externos à Universidade Federal de Lavras poderá ser removida mediante solicitação por escrito, exclusivamente do autor, encaminhada à Comissão Técnica da Biblioteca Universitária./ Arquivo gerado por meio da digitalização de material impresso. Alguns caracteres podem ter sido reconhecidos erroneamente. Resumo Indisponível. Resumo Indisponível.

Orientador : William Jose da Silva Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: O presente trabalho teve como objetivo principal gerar conhecimentos sobre a estrutura genética de algumas populações de Coix, em função de seu sistema reprodutivo. Para tanto, efetuou-se uma análise comparativa de várias populações, e realizou-se estudos de aspectos de biologia de reprodução, canalizando-os para a estimativa da taxa de cruzamento dessas populações.Os resultados mostraram que a população Adlay possue características de uma populção domesticada. A população Rosadlay apresentou potencial para produção de grãos e grande massa verde,devendo. portanto ser avaliada como forrageira. ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: The main objective of this work was to generate knowledge about the genetic structureof some Coix populations,based upon their reproductive system. Thus, a comparative reproductive analysis of many populations was carried out, and studies on the biology of reproduction were made, aiming to estimate the crossing rates of such populations.The results suggested that the Adlay population has withholds characteristics of a domesticated population. As the Rosadlay population showed a potentiality for grain yield and green mass, it should therefore be evaluated as a forage crop. ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations Mestrado Genética Mestre em Ciências Biológicas

292 Pag., La mayor parte de la producción de cebada de 6 carreras de nuestro país se realiza en cultivo de secano, con variedades muy antiguas y con una tasa de renovación de las mismas mínima. Por ello, se hace necesario emprender programas de mejora genética para zonas agroclimáticas subóptimas, afectadas frecuentemente por diversos tipos de estré5. Por otra parte, la gran variedad de condiciones agroclimáticas y los distintos tipos, intensidades y épocas en que se desarrolla el estrés, hacen indispensable el estudio “in situ”, de la herencia de los caracteres implicados en la mejora para estas condiciones y que nos ayudaran a determinar los métodos más apropiados. Por esta razón, se ha estudiado la regulación genética de y las implicaciones en la mejora de una serie de caracteres de ciclo, morfológicos, de producción y de estatus hídrico (21 caracteres) en condiciones de secano. Para ello, se ha utilizado como material vegetal un cruzamiento dialélico entre 7 variedades de cebada (Aula Dei 17, Castarlenas de Graus 3, Alpha, Logra, Step—toe, Hatif de crignon y Pané), con distinta toleráncia a sequía, y que incluía parentales, F1, BC1 y F2. El análisis genético se basó en el modelo aditivo—dominante propuesto por Gardner y Eberhart (1966), que permite el estudio de los efectos genéticos y de las interacciones de cada uno de los componentes con el ambiente. Para ello, los materiales se ensayaron en tres ambientes (localidades*año), en condiciones de secano y sometidos a diferente intensidad de estrés. Los resultados de los análisis genéticos nos permiten extraer, con las limitaciones que puede determinar el modelo mixto, las conclusiones siguientes: 1.- Existe variabilidad para la mayor parte de los caracteres estudiados. 2.- Existe una fuerte influencia ambiental en la expresión fenotípica de los caracteres, fundamentalmente en los de ciclo y estatus hídrIco. 3.- La interacción genotipo*ambiente, aunque no tan importante como el efecto genotípico, es significativa en algunos caracteres, lo que obliga al estudio en diferentes ambientes. 4.— El modelo aditivo- dominante utilizado se ajusta adecuadamente para explicar la variación genotípica. 5.— Para buen número de caracteres, la regulación genética es, fundamentalmente, aditiva. 6.— No existe ningún carácter indirecto de la producción absolutamente fiable, aunque en condiciones de estrés, la evaluación agronómica en fase de encaflado es un buen estimador. Finalmente, basándonos en los resultados obtenidos sobre la regulación genética y sobre la importancia de las interacciones genotipo*ambiente, se indica la posible utilidad de cada uno de los caracteres para la selección de parentales, líneas avanzadas o generaciones segregantes y al mismo tiempo, definir el tipo de acción de selección que consideramos más adecuada en un programa de mejora para este tipo de condiciones.

Se indican los números cromosomáticos de 14 táxones estudiados en botones florales procedentes de plantas silvestres, efectuándose la tinción según la técnica de SNOW (1963). Los pliegos testigo se conservan en el herbario del Departamento de Biología Vegetal y Ecología de la Facultad de Ciencias, Universidad de Córdoba.

It is currently possible to transfer a biosynthetic pathway from a plant to another organism. This system has been exploited to transfer the metabolic richness of certain plant species to other plants or even to more simple metabolic organisms such as yeast or bacteria for the production of high added value plant compounds. Another application is to bioconvert substrates into scarcer or biologically more interesting compounds, such as piceatannol and pterostilbene. These two resveratrol-derived stilbenes, which have very promising pharmacological activities, are found in plants only in small amounts. By transferring the human cytochrome P450 hydroxylase 1B1 (HsCYP1B1) gene to tobacco hairy roots and cell cultures, we developed a system able to bioconvert exogenous t-resveratrol into piceatannol in quantities near to mg L−1. Similarly, after heterologous expression of resveratrol O-methyltransferase from Vitis vinifera (VvROMT) in tobacco hairy roots, the exogenous t-resveratrol was bioconverted into pterostilbene. We also observed that both bioconversions can take place in tobacco wild type hairy roots (pRiA4, without any transgene), showing that unspecific tobacco P450 hydroxylases and methyltransferases can perform the bioconversion of t-resveratrol to give the target compounds, albeit at a lower rate than transgenic roots. This work has been supported by a grant from the Spanish Ministry of Science and Innovation (BIO2014-51861-R), Generalitat de Catalunya (2014SGR215). Diego Hidalgo is a predoctoral fellow of Mexican CONACyT.

Resumo: Eucalyptus grandis x E. urophylla se destaca em plantios brasileiros devido às características que herdou de seus parentais, como qualidade da madeira para a produção de papel e celulose. O objetivo deste trabalho foi desenvolver um protocolo de organogênese indireta com explantes foliares e aperfeiçoar aspectos da transformação genética mediante co-cultura com Agrobacterium tumefaciens. Para estabelecer o protocolo de organogênese indireta, na fase de calogênese, testaram-se diferentes concentrações de ANA e, em seguida, de TDZ combinado com ANA ou com 2,4-D no meio de cultura JADS por 30 dias, seguido de subcultura em meio de regeneração, contendo 5,0 ?M de BAP e 0,5 ?M de ANA por mais 30 dias. Nesses meios, os explantes tiveram alta oxidação. A fim de diminuir a oxidação, diferentes meios de cultura foram comparados: WPM, MS, JADS e QL. Obteve-se a maior porcentagem de regeneração e menor taxa de oxidação após cultura em meio WPM seguido de transferência a meio de regeneração. Assim, testaram-se ANA e 2,4-D combinado com TDZ, e em seguida, TDZ e BAP combinado com ANA no meio de cultura WPM. O tratamento mais eficiente em termos de regeneração de gemas foi o meio de cultura WPM e a combinação de 0,25 ?M de TDZ e 0,1 ?M de ANA por 30 dias para a calogênese e, em seguida, 5,0 ?M de BAP e de 0,5?M de ANA por outros 30 dias. Este protocolo proporcionou uma regeneração de brotos de até 46%, com uma baixa oxidação dos tecidos. Observou-se que a idade das brotações utilizadas como fonte de explantes não tinha efeito sobre a organogênese e que pode-se utilizar explantes de 3, 4 ou 5 semanas na última subcultura. Para determinar as concentrações dos agentes seletivos que seriam utilizadas durante a transformação genética, testaram-se diferentes concentrações de canamicina, glufosinato de amônio e manose combinada com sacarose. Os resultados mostraram que se deve iniciar a seleção das plantas transformadas com o gene nptII em 12,5 mg L-1 de canamicina; para plantas transformadas com o gene bar em 0,5 mg L-1 de glufosinato de amônio; para plantas transformadas com o gene pmi em 22,5 g de sacarose e 7,5 g de manose. Experimento visando testar Augmentin® e cefotaxima na eliminação de Agrobacterium tumefaciens também foi realizado. Na presença de Augmentin, os explantes formaram calos brancos e não oxidados, enquanto que, na presença de cefotaxima, os calos oxidaram. Para diminuir a oxidação imediata dos explantes transformados com o gene bar, esses foram deixados um mês sem glufosinato de amônio após a co-cultura, enquanto que no controle os explantes ficaram em meio de cultura com o agente seletivo. Neste experimento, todos os explantes do controle oxidaram e necrosaram, não formando calos, enquanto que os explantes que foram mantidos um mês sem glufosinato de amônio formaram calos. No entanto não houve regeneração de gemas o que impediu avaliar a eficiência da transformação genética. Além da transformação de explantes foliares com o gene bar, realizou-se transformação com o gene nptII, a qual originou brotações resistentes a 50 mg L-1 de canamicina.

Orientadora : Profª. Drª. Marguerite Germaine Ghislaine Quoirin Coorientador : Drª. Juliana Degenhardt-Goldbach Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Agronomia. Defesa: Curitiba, 28/03/2017 Inclui referências ao final de cada capítulo Resumo: RESUMO 0 metilparabeno (MEP) é uma substância amplamente utilizada como conservante em produtos de cuidados pessoais e em alimentos. Devido ao seu uso intenso em aplicações industriais tem sido frequentemente detectado no meio ambiente, indicando que os tratamentos convencionais não estão sendo adequados para a total remoção deste composto. Alguns estudos têm demonstrado que o MEP pode atuar como uma substância desreguladora endócrina, associando-se à ocorrência de câncer em humanos e a toxicidade crônica em organismos aquáticos. 0s processos oxidativos avançados tem se demonstrado eficiente técnica para a remoção de compostos de baixa biodegradabilidade, resistentes a degradação por meio dos processos convencionais. Neste trabalho foi avaliada a degradação e mineralização do composto metilparabeno por meio dos processos oxidativos avançados fotocatálise heterogênea e ozonização. 0s estudos da fotocatálise heterogênea foram realizados em um reator em batelada com uma temperatura controlada em 25ºC, analisando a influência das radiações UV-A, UV-C e Vis em um planejamento fatorial 24, avaliando as condições operacionais: pH inicial da solução (3-9), concentração inicial da solução de metilparabeno (30-50 mgL-1), quantidade do fotocatalisador Ti02 (300-500 mgL-1) e tempo reacional na variável resposta: percentual de degradação do MEP. Foi demonstrada a elevada capacidade de degradação do processo quando aplicado em condições experimentais otimizadas (pH: 9; [MEP]=30 mgL-1;Ti02=500 mgL-1). Nessas condições, a completa degradação do MEP foi alcançada em 75 minutos de reação no processo assistido pelo uso da radiação UV-C, quando se utilizou a radiação UV-A o processo também atingiu uma eficiente degradação, em 90 minutos de reação a taxa de degradação do MEP foi de 88%. Entretanto, nos processos de simulação da radiação solar (Vis), o processo não apresentou alta capacidade para degradar o MEP, indicando um baixo percentual de degradação (23%) em um tempo reacional de 90 minutos. As análises de mineralização mostraram uma maior remoção do carbono orgânico total (T0C) para as reações assistidas com a radiação UV-C, alcançando taxas de 77 % em 90 minutos de reação. 0 modelo cinético de Langmuir-Hinshelwood foi adequado aos dados experimentais obtidos nas reações de fotocatálise heterogênea. Na segunda etapa do trabalho, foi avaliado os processos de ozonização, utilizou-se um planejamento fatorial 24 para investigar a influência da concentração de ozônio (10 a 30 mgL-1), da concentração inicial de MEP (30-50 mgL-1), do pH inicial da solução (3,6 e 9) e da temperatura de reação (20 a 40 ºC) na degradação do MEP . Foi observado que quando se aplicou uma dose de ozônio de 30 mgL-1 , concentração de MEP (30 mg L-1 com pH =9) e a temperatura da reação em 20 ºC, a solução apresentou uma degradação de 98% do composto em 15 minutos de reação. A mineralização nessas mesmas condições, porém em um tempo reacional de 90 minutos, foi de aproximadamente 40%. Além da aplicação do processo ozonização, os processos combinados com ozônio (03/UV e 03/UV/Ti02) foram estudados nas condições ótimas obtidas para a reação de ozonização (ou seja, pH = 9, T = 20ºC, 03 =30 mgL-1 e [MEP]= 30 mgL-1) com o intuito de aumentar a eficiência da mineralização do composto. 0 processo mais eficiente tanto para degradação quanto para a mineralização do MEP foi a combinação 03/UV/Ti02, atingindo a degradação completa em tempos de reação menores que 10 minutos e mineralização superior a 93% em 90 minutos de reação. A ausência da toxicidade da solução de MEP após o tratamento com os processos oxidativos avançados (fotocatálise heterogênea, ozonização e 03/UV/Ti02) foi confirmada por meio dos testes in vivo com o micro crustáceo Artemia Salina. Palavras chave: Desreguladores Endócrinos. Fotocatálise Heterogênea. 0zonização. Ti02. Radiação. Toxicidade ABSTRACT Plantas modelo são usadas para estudos de caracterização de genes e promotores, pois tem seus protocolos de transformação e regeneração definidos. Nicotiana tabacum e Populus sp. são exemplos de plantas modelo que são transformadas facilmente e eficientemente com um DNA exógeno. Neste trabalho foram usadas plantas de Nicotiana tabacum para validar o promotor G02172 fusionado ao gene gus e plantas de Populus tremula x P. alba clone 717-1B4 foram transformadas para validar o fator de transcrição CaHB12. Em trabalhos anteriores, o promotor G02172 foi isolado de Eucalyptus grandis e o gene deste promotor foi definido com expressão específica em raízes. Assim, plantas de tabaco transformadas com este promotor foram estudadas a fim de validar a expressão especifica nas raízes. Dez eventos com o promotor G02172 e um com o promotor CaMV35S, ambos fusionados ao gene gus e ao gene gfp, foram analisados via PCR. Em seguida, foi realizado o teste histoquímico e de quantificação do gene gus para a visualização da atividade da enzima ?-glucuronidase. A presença da proteína não foi especifica nas raízes do tabaco, no entanto houve maior expressão do gene gus nas raízes e nos caules. Portanto, o promotor G02172 foi considerado um promotor preferencialmente expresso em caules e raízes em Nicotiana tabacum. Um segundo estudo de validação foi realizado usando o fator de transcrição CaHB12 da família HD-Zip-I em plantas de Populus tremula x P. alba clone 717-1B4. Este fator de transcrição foi isolado de Coffea arabica e está envolvido na resposta a tolerância à seca. Foram verificados via PCR oito eventos contendo o gene CaHB12. Em seguida, foi realizado o Southern Blot que permitiu estabelecer que quatro dos oito eventos eram o mesmo evento e que tinham duas cópias do gene CaHB12. O evento 1 e plantas não transformadas foram submetidos ao estresse osmótico in vitro. Estas plantas foram mantidas em meio de cultura MS suplementado com 300 mM de manitol, 30 g L-1 de sacarose e 7 g L-1 de ágar. Após 60 dias, observou-se o melhor desenvolvimento dos eventos do que as plantas controle. Estas plantas foram usadas para extração e quantificação de prolina. Não houve diferença estatística na quantidade de prolina entre o evento e o controle. Três eventos foram aclimatizados e avaliados morfologicamente, e após 60 dias, não houve diferenças estatísticas entre eles mostrando que o fenótipo das plantas se manteve inalterado. Dois regimes de estresse hídrico foram aplicados aos três eventos aclimatizados e aos controles. No primeiro regime, houve um estresse severo onde foi cessada a rega por 15 dias e todas as plantas morreram. No segundo, foi realizado um estresse moderado com uma rega semanal. Após 15 dias, estas plantas foram avaliadas para número de folhas, comprimento e largura de folhas. Houve diferenças estatísticas entre os resultados, sendo que as plantas controle sempre obtiveram as médias menores. Assim, pode-se concluir que o fator de transcrição CaHB12 teve influência positiva na tolerância à seca de plantas de Populus tremula x P. alba clone 717-1B4. Palavras-chave: HD-Zip-I, tolerância à seca, promotor raiz-específico. Abstract:Model plants are used for characterization studies of genes and promoters, as they have their transformation and regeneration protocols well defined. Nicotiana tabacum and Populus sp. are examples of model plants that are easily and efficiently with an exogenous DNA transformed. In this study, Nicotiana tabacum plants were used to validate the G02172 promoter fused to the gus gene and plants of Populus tremula x P. alba clone 717-1B4 were transformed to validate the transcription factor CaHB12. In a previous study, the G02172 promoter was isolated from Eucalyptus grandis and it was shown that the promotor gene was specifically expressed in roots Thus, tobacco plants transformed with this promoter were studied in order to validate the specific expression in the roots. Ten events with the G02172 promoter and one with the CaMV35S promoter, both fused to the gus gene and the gfp gene, were analyzed via PCR. Next, the histochemical and quantification test of the gus gene was performed to visualize the activity of the enzyme â-glucuronidase. The presence of the protein was not specific in the tobacco roots; however there was a greater expression of the gus gene in the roots and stems. Therefore, the G02172 promoter was considered a promoter preferentially expressed in stems and roots in Nicotiana tabacum. A second validation study was performed using the CaHB12 transcription factor of the HD-Zip-I family in plants of Populus tremula x P. alba clone 717-1B4. This transcription factor was isolated from Coffea arabica and is involved in the response to drought tolerance. Eight events containing the CaHB12 gene were verified via PCR. Southern Blot was then performed to establish that four of the eight events were the same event and had two copies of the CaHB12 gene. Event 1 and untransformed plants were submitted to osmotic stress in vitro. These plants were maintained in MS culture medium supplemented with 300 mM mannitol, 30 g L-1 sucrose and 7 g L-1 agar. After 60 days, the events had a better development than the control plants. These plants were used for extraction and quantification of proline. There was no statistical difference in the amount of proline between the event and the control. Three events were acclimatized and evaluated morphologically and, after 60 days, there were no statistical differences between them showing that the plant phenotype remained unchanged. Two water stress regimes were applied to the three acclimatized events and control plants. In the first regime wher a severe stress was applied, with watering stopped for 15 days,all the plants died. In the second regime, a moderate stress was carried out with a weekly irrigation. After 15 days, these plants were evaluated for leaf number, length and width. There were statistical differences between the results, and the control plants always obtained the smaller means. Thus, it can be concluded that the transcription factor CaHB12 had a positive influence on the drought tolerance of plants of Populus tremula x P. alba clone 717-1B4. Key words: HD-Zip-I, drought tolerance, root-specific promoter.

10 p., gráf., fot., mapas, The Achillea millefolium aggregate is one of the most diverse polyploid complexes of the Northern hemisphere and has its western Eurasian boundary in the Iberian Peninsula. Four ploidy levels have been detected in A. millefolium, three of which have already been found in Iberia (diploid, hexaploid and octoploid), and a fourth (tetraploid) reported during the preparation of this paper. We collected a sample from 26 Iberian populations comprising all ploidy levels, and we used microsatellite markers analyzed as dominant in view of the high ploidy levels. Our goals were to quantify the genetic diversity of A. millefolium in the Iberian Peninsula, to elucidate its genetic structure, to investigate the differences in ploidy levels, and to analyse the dispersal of the species. The lack of spatial genetic structure recovered is linked to both high levels of gene flow between populations and to the fact that most genetic variability occurs within populations. This in turn suggests the existence of a huge panmictic yarrow population in the Iberian Peninsula. This is consistent with the assumption that recent colonization and rapid expansion occurred throughout this area. Likewise, the low levels of genetic variability recovered suggest that bottlenecks and/or founder events may have been involved in this process, and clonal reproduction may have played an important role in maintaining this genetic impoverishment. Indeed, the ecological and phenologic uniformity present in the A. millefolium agg. in Iberia compared to Eurasia and North America may be responsible for the low number of representatives of this complex of species present in the Iberian Peninsula. The low levels of genetic differentiation between ploidy levels recovered in our work suggest the absence of barriers between them., Dr Joan Uriach Marsal privately funded this research (grant assigned to AS and NGJ). Generalitat de Catalunya partly contributed financial support by grants "Ajuts a Grups de Recerca Consolidats" number 2009SGR/00439 and 2014/SGR/514 to all the authors.

Background: TILLING (Targeting Induced Local Lesions IN Genomes) is a reverse genetic method that combines chemical mutagenesis with high-throughput genome-wide screening for point mutation detection in genes of interest. However, this mutation discovery approach faces a particular problem which is how to obtain a mutant population with a sufficiently high mutation density. Furthermore, plant mutagenesis protocols require two successive generations (M1, M2) for mutation fixation to occur before the analysis of the genotype can begin. Results: Here, we describe a new TILLING approach for rice based on ethyl methanesulfonate (EMS) mutagenesis of mature seed-derived calli and direct screening of in vitro regenerated plants. A high mutagenesis rate was obtained (i.e. one mutation in every 451 Kb) when plants were screened for two senescence-related genes. Screening was carried out in 2400 individuals from a mutant population of 6912. Seven sense change mutations out of 15 point mutations were identified. Conclusions: This new strategy represents a significant advantage in terms of time-savings (i.e. more than eight months), greenhouse space and work during the generation of mutant plant populations. Furthermore, this effective chemical mutagenesis protocol ensures high mutagenesis rates thereby saving in waste removal costs and the total amount of mutagen needed thanks to the mutagenesis volume reduction.

La dosis letal (DL 50 ) y reducción media del crecimiento (RC 50 ) son parámetros utilizados para seleccionar dosis de irradiación adecuadas e inducir mutaciones para realizar mejoramiento genético vegetal. El objetivo fue determinar la DL 50 y RC 50 para conocer la dosis ó p tima de irradiación c on Co 60 en semilla de pasto llorón, buffel, banderita y navajita. Se evaluaron seis dosis de irradiación con Co 60 en semilla : 100, 200, 300, 450, 600 y 900 Gray (Gy) y un tratamiento control (T - 0, sin irradiación). Las variables evaluadas fueron : porcentaj e de germinación (%GE), índice de velocidad de germinación (IVG), longitud de plúmula (LP) y longitud de radícula (LR). Se realizó análisis de regresión y comparación de medias con la prueba de Dunnett. Mediante la ecuación de regresión se estimó la DL 50 p ara el %GE, así como RC 50 para el resto de las variables. La DL 50 se ponderó con 55%, mientras que la RC 50 se ponderó en 15% para cada una de las tres variables restantes. En general, los valores de las variables disminuyeron (P