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O hemangiossarcoma (HSA) é uma neoplasia maligna de células endoteliais de vasos sanguíneos e pode ocorrer em diversos tecidos. É frequente em cães e apresenta comportamento biológico agressivo, que associado a protocolos terapêuticos ineficientes resulta em alta mortalidade dos animais. Não há na literatura atual estudos sobre a relação de expressão de marcadores imuno-histoquímicos e prognóstico de cães com HSA cutâneo. O objetivo deste trabalho foi determinar a expressão de marcadores imuno-histoquímicos e relacionar com a sobrevida de cães com HSA cutâneo. Foram avaliados o índice de marcação de fator VIII (fVIII), cicloxigenase-2 (COX-2), fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), proliferationg cell nuclear antigen (PCNA) e caspase-3 (Casp-3) por meio da imuno histoquímica em 60 amostras de HSA cutâneo. Estas variáveis foram relacionadas com a sobrevida dos animais por meio da análise de sobrevivência usando o modelo de riscos competitivos. Adicionalmente, verificou-se a relação da idade, sexo, raça, graduação tumoral, grau de diferenciação histológica e tamanho do tumor com a sobrevida dos cães. A média de idade dos animais foi 8,5 anos. As raças mais frequentes foram sem raça definida, Pit Bull, Boxer e Teckel e as localizações anatômicas mais comuns a inguinal e abdominal. A expressão dos marcadores foi positiva em 80 a 100% das amostras. A intensidade de marcação predominante foi fraca a moderada para fVIII, COX-2 e VEGF. O tempo médio de sobrevida dos cães foi 16,5 meses e a mediana 12 meses. A idade dos cães, graduação tumoral, grau de diferenciação histológica e tamanho dos tumores não apresentaram relação com a sobrevida (p>0,05). Houve uma tendência dos cães de raças predispostas a terem sobrevida maior em comparação aos cães de raças não predispostas. Os cães que apresentaram outras neoplasias primárias concomitantes tiveram curva de sobrevida maior do que cães que tinham apenas HSA, e desse grupo as fêmeas apresentaram sobrevida menor (p=0,03) pelo teste de Gray. O índice de marcação de fVIII, COX-2, VEGF, PCNA e Casp-3 não apresentou relação com a sobrevida, assim como a intensidade de marcação de fVIII, COX-2 e VEGF. Os resultados do presente trabalho indicam que as variáveis imuno-histoquímicas analisadas dos HSA cutâneos não 36 apresentaram associação com a sobrevida dos animais, no entanto a expressão frequente de COX-2 e VEGF sugerem a necessidade de ampliação dos estudos com esses marcadores. Hemangiosarcoma (HSA) is a malignant neoplasm of vascular endothelial cells and may arise in any tissue. It is frequent in dogs and exhibits aggressive biological behavior, which, together with ineffective therapeutic protocols, results in high mortality of the animals. There are no studies in the literature associating immunohistochemical expression of markers and survival of dogs with cutaneous HSA. The aim of this study was to determine the expression of immunohistochemical markers and to correlate with survival of dogs with cutaneous HSA. Was evaluated the index of labeling of factor VIII (fVIII), cycloooxigenase-2 (COX-2), vascular endothelial growth factor (VEGF), proliferationg cell nuclear antigen (PCNA) and caspase-3 (Casp-3) by immunohistochemistry in 60 samples of canine cutaneous HSA. These variables were associated with the survival of animals through the analysis of survival, in the model of competitive risks. In addition, was verified the relation of age, sex, breed, tumor grade, score of histological differentiation and tumor size with survival of the dogs. The mean age of the animals was 8.5 years. The most frequent breeds were mixed breed, Pit Bull, Boxer and Teckel and the most common anatomical locations were inguinal and abdominal. The expression of the markers was positive in 80 to 100% of the samples, predominantly with weak to moderate labeling intensity in fVIII, COX-2 and VEGF and strong in PCNA and Casp-3. The mean survival time of dogs was 16.5 months, and median was 12 months. The age of the dogs, tumor grade, score of histological differentiation and size of tumors were not related to survival (p>0.05). There was a tendency of dogs of predisposed breeds to have greater survival, compared to dogs of not predisposed breeds. The dogs that had other concomitant primary neoplasms had a longer survival curve than dogs that had only HSA, and of this group the females presented lower survival (p=0.03) by the Gray's test. The labelling index of fVIII, COX-2, VEGF, PCNA and Casp-3 had no relation with survival time, as well as the labelling intensity of fVIII, COX-2 and VEGF. Results of the present study indicate that the immunohistochemical variables analyzed in cutaneous HSA were not associated with survival time of the animals. However, the frequent expression of COX-2 and VEGF suggest the need to extend the studies with these markers.

A alta casuística das neoplasias mamárias nos animais de companhia, em conjunto com a maior preocupação e cuidados dispensados à saúde dos animais que vivem próximos ao homem, vistos como membro da família, gera a crescente necessidade de estudos que busquem desde métodos diagnósticos mais precisos, novas formas de abordagem terapêutica e fatores preditivos de prognóstico como aspectos que aumentem a morbidade, a presença de síndromes paraneoplásicas e a possível existência de estresse oxidativo também são objeto de estudo. O malondialdeído (MDA), um biomarcador geral de dano oxidativo, considerado um importante parâmetro para avaliação de estresse oxidativo celular, utilizado rotineiramente na medicina humana, foi escolhido para ser utilizado como forma de detecção desta condição no presente trabalho. Dois estudos foram realizados em cadelas portadoras de tumor de mama. No primeiro, com objetivo de identificar a presença de estresse oxidativo, 144 cadelas portadoras de neoplasia mamária, foram submetidas a avaliação clínica para estadiamento da doença, classificação histológica dos tumores, avaliação hematológica, bioqúimica sérica, incluindo testes de função renal, hepática, níveis séricos de cálcio total e dosagem de MDA, no momento de sua abordagem e 30 dias após realização de tratamento. De 144 cadelas incluidas no estudo, em 113 (78,47%) foram diagnosticados tumores malignos, sendo o carcinoma em tumor misto, o padrão histológico mais frequente (26,54%), e em 31 cadelas (21,53%) foram detectados apenas neoplasias benignas, sendo o adenoma mamário o padrão mais frequente (45,16%). Os valores séricos de MDA das cadelas com neoplasias malínas e benignas, no momento da abordagem e 30 dias após tratamento foram comparados com os valores obtidos de um grupo de 100 cadelas saudáveis. Houve diferença significativa entre todos os grupos estudados, identificando valores mais altos no grupo de cadelas com tumores malígnos, além disso, foi encontrada correlação significativa entre presença de anemia e níveis mais elevados de MDA. No segundo estudo, foram utilizadas 100 cadelas portadoras de neoplasia maligna de mama com o objetivo de realizar a comparação entre níveis de cálcio total e cálcio ionizado e padrão histológico das neoplasias, estadiamento clínico, alterações hematológicas e bioquímicas referentes a função renal e hepática. Em (52%) das cadelas doentes, foi constatada hipercalcemia, por meio da dosagem de cálcio ionizado, o que não foi verificado quando a análise foi feita por meio de dosagem de cálcio total. Além disso, verificou-se correlação positiva entre hipercalcemia e estadiamento clínico da doença, nos estágios mais avançados foram observados maiores concentrações séricas da fração ionizada do cálcio, demonstrando a importância da pesquisa sobre a presença de síndromes paraneoplásicas em cadelas com neoplasias mamárias. Pode ser concluido que as cadelas portadoras de neoplasia malígna de mama estão em estresse oxidativo e podem apresentar hipercalcemia, que deve ser verificada por meio da mensuração de cálcio ionizado, além disso presença de anemia em cadelas portadoras de neoplasia malígna de mama pode estar relacionada ao estresse oxidativo. The high casuistic of mammary neoplasia in companion animals, with the greater concern and care given to the health of animals that live close to the man, as a family member, generates the growing need for studies that seek from more precise diagnostic methods, new forms of therapeutic approach and predictive factors of prognosis. Other aspects that increase morbidity, such as the presence of paraneoplastic syndromes and the possible existence of oxidative stress are also the object of study. Malondialdehyde (MDA), a general biomarker of oxidative damage, considered an important parameter for evaluation of cellular oxidative stress routinely used in human medicine, was chosen to be used as a means of detecting this condition in the present study. Two studies were performed on female dogs bearing mammary cancer. In the first one, 144 bitches with breast neoplasms were submitted to clinical evaluation for disease staging, histological classification of the tumors, hematological evaluation, serum biochemistry, including renal, hepatic, liver function tests, serum calcium levels and dosage of malondialdehyde (MDA), a biomarker of oxidative damage, at the time of its approach and 30 days after treatment. From 144 bitches included in the study, malignant tumors were diagnosed in 113 (78.47%), being the carcinoma in mixed tumor the most frequent histological pattern (26.54%), and in 31 bitches (21.53%), only benign neoplasms were detected, with mammary adenoma being the most frequent pattern (51.61%). Serum MDA values of bitches with malignant and benign neoplasms at the time of approach and 30 days after treatment were compared with values obtained from a group of 100 healthy bitches. There was a significant difference between all the studied groups, identifying higher values in the group of bitches with malignant tumors, in addition, a significant correlation was found between the presence of anemia and higher levels of MDA. In the second study, 100 bitches with malignant neoplasia of the breast were used in order to compare the levels of total calcium and ionized calcium and histological pattern of neoplasms, clinical staging, hematological and biochemical alterations related to renal and hepatic function. In 52% of the diseased dogs, hypercalcemia was observed by means of ionized calcium dosing, which was not verified when the analysis was done by total calcium dosing. In addition, there was a positive correlation between hypercalcemia and clinical staging of the disease, in the more advanced stages, higher serum concentrations of the ionized calcium fraction were observed, demonstrating the importance of the research on the presence of paraneoplastic syndromes in bitches with mammary neoplasms. It can be concluded that bitches with malignant neoplasia of the breast are in oxidative stress and may present hypercalcemia, which should be verified by measuring ionized calcium. The presence of anemia in female dogs with malignant neoplasia of the mammary may be related to oxidative stress.

Foram apresentados três produtos finais, separados por capítulos, ao Programa de Pós Graduação Mestrado Profissional em Clínicas Veterinárias. O primeiro trabalho, é um capítulo de livro, sobre o vírus da imunodeficiência felina (FIV) que descreve aspectos da etiologia, epidemiologia, patogenia, sinais clínicos, prognóstico, diagnóstico, tratamento, prevenção e controle do vírus. O segundo trabalho, é um artigo, formatado nas normas da revista “Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia” (ABMVZ), intitulado “Ocorrência do subtipo B do vírus da imunodeficiência felina em Londrina, ParanᔠO vírus da imunodeficiência felina (FIV) infecta gatos, e causa insuficiência progressiva do sistema imune. O FIV é dividido em cinco subtipos (A, B, C, D e E), de acordo com a diversidade genética da região v3-v5 do gene env ou da região p17 – p-24 do gene gag. O conhecimento da diversidade genética pode auxiliar no conhecimento da patogenia e da epidemiologia da doença. Assim, o presente trabalho investigou a ocorrência do subtipo do vírus em gatos oriundos de Londrina, Paraná. Foi realizado o sequenciamento de 168pb do gene gag de amostras coletadas de 13 animais, cujos resultados foram analisados pelo método de substituição nucleotídica Tamura-Nei. A análise filogenética demonstrou que todas as amostras pertenciam ao subtipo B. Esse resultado confirma que até o presente momento, apenas o subtipo B foi encontrado no Brasil. O terceiro trabalho, é um artigo sobre o relato de 3 casos de insulinoma canino aceito para publicação na revista “Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia”. Three final products were presented, separated by chapters, to the Postgraduate Program Professional Master in Veterinary Clinics. The first work is a book chapter on the feline immunodeficiency virus (FIV) that describes aspects of the etiology, epidemiology, pathogenesis, clinical signs, prognosis, diagnosis, treatment, prevention and control of the virus. The second work, is an article, formatted in the norms of the "Brazilian Archive of Veterinary Medicine and Zootechnics" (ABMVZ), entitled "Occurrence of subtype B of the feline immunodeficiency virus in Londrina, Paraná" The feline immunodeficiency virus (FIV) Infects cats, and causes progressive failure of the immune system. FIV is divided into five subtypes (A, B, C, D and E) according to the genetic diversity of the v3-v5 region of the env gene or the p17-p-24 region of the gag gene. Knowledge of genetic diversity may help in understanding the pathogenesis and epidemiology of the disease. Thus, the present work investigated the occurrence of the virus subtype in cats from Londrina, Paraná. Sequence of 168bp of the gag gene from samples collected from 13 animals was performed, whose results were analyzed by the Tamura-Nei nucleotide substitution method. Phylogenetic analysis demonstrated that all samples belonged to subtype B. This result confirms that up to the present moment, only subtype B has been found in Brazil. The third paper is an article on the report of 3 cases of canine insulinoma accepted for publication in the journal "Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia".

Os retrovírus felinos incitam o interesse de muitos pesquisadores. Dentre os retrovírus que causam doenças em gatos domésticos destacam-se o vírus da imunodeficiência dos felinos (FIV) e o vírus da leucemia felina (FeLV), ambos de ocorrência mundial. O objetivo deste estudo foi determinar a prevalência e os fatores de risco das infecções pelo FIV e FeLV na população felina atendida no Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Londrina - Paraná (HV-UEL), durante o ano de 2014. Das 771 amostras testadas, houve prevalência de 5,19% (40) para o FIV, 1,81% (14) para o FeLV e 0,26% (2) apresentaram coinfecção. No grupo de infectados pelo FIV 23 eram machos (57,5%), metade apresentou-se doente ao atendimento, 18 (45%) tinham acesso à rua e 19 (47,5%) viviam em locais com múltiplos gatos. Entre os infectados pelo FeLV, foram observados 50% de machos e metade apresentou-se doente, seis (42,86%) felinos com acesso à rua e nove (64,29%) viviam em locais com múltiplos gatos. A idade média dos infectados para o FIV (46 meses) foi maior do que dos infectados pelo FeLV (16 meses) (p = 0,03778). O risco de infecção pelo FIV foi significativamente maior para gatos mais velhos (p = 0,03581), os que possuíam acesso à rua (p = 0,009151), aos que conviviam em mais de cinco gatos na mesma residência (p = 0,008868) e também para gatos provenientes de gatis (p = 0,00207) e os nascidos na própria residência (p = 0,01164). Para os felinos infectados pelo FeLV, apenas sobressaíram-se como fatores de risco os gatos mais jovens que os infectados pelo FIV (p = 0.03778) e os que conviviam em residências com mais de 5 gatos (p = 0,01411). Feline retroviruses incite the interest of many researchers. Among the retroviruses that cause disease in domestic cats, the most common are the feline immunodeficiency virus (FIV) and feline leukemia virus (FeLV), which have occurred worldwide. The aim of this study was to determine the prevalence of FIV and FeLV in the feline population attended at the Veterinary Hospital of the State University of Londrina - Paraná (HV-UEL), during the year of 2014, and to determine the risk factors. Of the 771 samples tested, there was a prevalence of 5.19% (40) for FIV. The prevalence of FeLV was 1.81% (14). Only 0.26% (2) had coinfection with FIV and FeLV. For the group of cats infected with FIV, 23 were males (57.5%), half was sick in consultation, 18 (45%) with access to the street and 19 (47.5%) lived in places with multiple cats. In cats infected with FeLV, it was observed 50% of males and half of the group was sick in consultation, six (42.86%) cats with access to the street and nine (64.29%) lived in places with multiple cats. The risk of infection by FIV was significantly higher for older cats (p = 0.03581), those with street access (p = 0.009151), those living in more than five cats in the same residence (p = 0.008868) and also for cats from cat breedings (p = 0.00207) and cats born at home (p = 0.01164). For cats infected with FeLV, only younger cats than those infected by FIV (p = 0.03778) and those living in households with more than 5 cats (p = 0.01411) were more prominent as risk factors.

A tartaruga-verde, Chelonia mydas, é a espécie de maior ocorrência no Brasil e habita áreas mais próximas à costa, onde estão suscetíveis a ameaças naturais, como doenças, ou decorrentes de atividades antropogênicas. A fibropapilomatose é uma doença crônica caracterizada por tumores externos e internos, principalmente em tartarugas-verde juvenis, que podem dificultar atividades como alimentação e natação ou levar a morte. O artigo A teve como objetivo revisar a epidemiologia da fibropapilomatose no Brasil e avaliar informações inéditas sobre a doença em três estados (Rio de Janeiro-RJ, Paraná-PR e Santa Catarina-SC). Foram levantadas informações na literatura sobre a prevalência, comprimento curvilineo da carapaça (CCC), metodologia utilizada (encalhe, captura incidental ou intencional em rede de pesca ou desova) e gravidade da doença em tartarugas-verde ao longo da costa (Latitudes 02°52`S a 26°02`S), de 2000 a 2014. Além desses parâmetros, foram avaliadas nos três estados, a condição corpórea do animal, a histologia e a presença de Chelonid Herpesvirus-5 (ChHV5) em tumores de animais amostrados de 2007̸2009 a 2014. Os dados disponíveis em 12 dos 17 (70,6%) estados da costa brasileira foram comparados entre dois períodos (2000 a 2006 e 2007 a 2014) e prevalências demonstraram diferenças significativas de acordo com (i) a metodologia utilizada, (ii) o período e (iii) a latitude. Houve diminuição da doença no Ceará, Rio Grande do Norte, Espírito Santo e São Paulo; manutenção na Paraíba e RJ; aumento na Bahia e SC e ausência nas ilhas oceânicas. As prevalências da doença foram 13,6% (12/88), 14,5% (17/117) e 9,6% (38/395) no RJ, SC e PR, respectivamente, em animais encalhados e 23% (10/43) em animais intencionalmente capturados no PR. A análise total dos casos em toda a costa indicou a manutenção da doença de 2000 a 2014 [14% (1090/7804) de 2000 a 2006 e 13,8% (1106/8035) de 2007 a 2014]. A patogenia e prevalência da doença podem estar associados ao CCC e poluição ambiental. Achados histopatológicos dos tumores sugerem infecção viral, porém, apenas uma lesão apresentou corpúsculos de inclusão (1/121). A análise molecular das amostras detectou cinco variantes de ChHV5, semelhantes ao grupo de variantes do Atlântico e Atlântico oeste/leste do Caribe. No artigo B, o objetivo foi avaliar parâmetros hematológicos e bioquímicos de tartarugas-verde capturadas intencionalmente em duas ilhas na zona estuarina do litoral do PR. Os animais foram capturados por sete dias em 2014 e amostras de sangue foram colhidas para análise de 36 parâmetros. No total, 43 juvenis foram capturados e 10 apresentavam fibropapilomatose (23,2%), sendo que a maioria apresentava bom estado nutricional (42/43; 97,7%). O CCC e massa corpórea (MC) de animais com tumores (CCC=43,51±4,42cm; MC=10,42±2,81kg) foram semelhantes aos animais sem tumores (CCC=41,06±4,66cm; MC=8,58±2,97kg). Níveis menores de colesterol (57,10±9,24mg/dl) e ureia (7,80±0,99mg/dl) e maiores concentrações de eosinófilos (3,10±1,09 103/μl) foram observados em animais com tumores em relação aos sem tumores (colesterol=85,66±6,74mg/dl; ureia=37,85±8,59mg/dl e eosinófilo=0,88±0,26 103/μl). A despeito da doença, o CCC foi relacionado positivamente aos níveis de proteína total, albumina/globulina e hematócrito e negativamente ao cloreto. O estado de saúde das tartarugas-verde pode refletir a saúde e impactos no ambiente marinho, que devem ser continuamente monitorados para efetiva conservação dessa espécie ameaçada de extinção. The green tutle, Chelonia mydas, is the most commom species that inhabit coastal areas off Brazil, and are susceptible to natural hazards (including diseases) and anthropogenic activities. Fibropapillomatosis is a chronic disease characterized by skin and internal tumours that can affect vital activities as feeding and swimming or can lead to death. The objective of article A was to review the epidemiology of fibropapillomatosis in Brazil and also evaluate new data from three states (Rio de Janeiro‒RJ, Santa Catarina‒SC and Paraná‒PR). Local and international peer-reviewed studies summarizing prevalence, curved carapace length (CCL) sampling method (stranded, bycaught, intentionally captured or nesting), and severity of disease were searched for green turtles throughout the Brazilian coast (Latitude 02°52`S to 26°02`S) from 2000 to 2014. The body condition, histology and detection of Chelonid Herpesvirus-5 (ChHV5) were also evaluated of afflicted animals sampled from 2007̸2009 to 2014 in RJ, PR and SC. Data from 12 of 17 (70.6%) states of Brazilian coast were compared between two periods (from 2000 to 2006 and from 2007 to 2014). Prevalences varied according to (i) sampling methods, (ii) period evaluated and (iii) latitude degrees. Prevalence decrease was observed in Ceará, Rio Grande do Norte, Espírito Santo and São Paulo, maintenance in Paraíba and RJ; increase in Bahia and SC and were absent in oceanic islands. The prevalences were 13.6% (12/88), 14.5% (17/117) and 9.6% (38/395), in stranded animals off RJ, SC and PR; and 23% (10/43) in animals intentionally captured off PR. Considering all data from Brazilian coast, prevalence of fibropapillomatosis was similar from 2000 to 2014 [14% (1090/7804) from 2000 to 2006 and 13.8% (1106/8035) from 2007 to 2014]. The pathogenisis and consequent prevalence values can be associated with CCL and environmental pollution levels. Microscopical findings suggested viral infection, but eosinophilic inclusion bodies were observed in only one tumor (1/121). Molecular methods detected five variants of ChHV5 that were clustered with Atlantic groups, excepting one that clustered with western Atlantic/ eastern Caribean group. In article B, the objetive was to evaluate hematological and biochemistry samples of green turtles intentionally captured in two islands off Paraná coast. The animals were caught in gillnets for seven days in 2014 and 36 parameters of blood samples were evaluated. A total of 43 juvenile green turtles were caught, of which 10 had fibropapillomatosis (23.2%). The majority was classified in good nutritional status (42/43, 97.7%). The CCC and body mass (BM) of fibropapillomatosis afflicted animals (CCL = 43.51 ± 4.42 cm; BM = 10.42 ± 2.81 kg) were similar to green turtles without tumours (CCL = 41.06 ± 4.66 cm; BM = 8.58 ± 2.97 kg). Significant lower levels of cholesterol (57.10 ± 9.24 mg dl–1) and urea (7.80 ± 0.99 mg dl–1), but greater absolute numbers of eosinophils (3.1 ± 1.1 103 μl–1) were observed in turtles with tumours compared to turtles without tumours (cholesterol = 85.66±6.74 mg dl–1, urea = 37.85 ± 8.59 mg dl–1, eosinophils=0.9 ± 0.3 103 μl–1). Irrespective of disease, CCL was positively associated with total protein, albumin, albumin-to-globulin and hematocrit and negatively associated with chloride. The green turtles health may reflect hazards and the health status of marine environment. Therefore, monitoring is important to green turtle conservation.

Com objetivo de avaliar os efeitos sistêmicos da contaminação alimentar por micotoxinas, enfatizando aspectos morfológicos e imunohistoquímicos, dois experimentos foram realizados. No primeiro experimento, 20 leitões de cinco semanas de idade foram divididos em quatro grupos experimentais. Os animais receberam durante 28 dias os seguintes tratamentos: dieta controle, dieta contaminada com desoxinivalenol (DON) (1,5 mg/kg), dieta contaminada com DON (2 mg/kg) + nivalenol (NIV) (1,3 mg/kg) + zearalenona (ZEA) (1,5 mg/kg) ou dieta contaminada com DON (3 mg/kg) + NIV (1,3 mg/kg) + ZEA (1,5 mg/kg). A dieta mono-contaminada não alterou o ganho de peso, entretanto os animais expostos à dieta multi-contaminada apresentaram uma diminuição significativa no ganho de peso final. A ingestão crônica das dietas contaminadas induziu alterações histológicas no intestino, como atrofia e fusão de vilosidades, diminuição na altura de vilosidades e na profundidade de criptas, redução no número de células caliciformes e linfócitos. O fígado, os linfonodos mesentéricos e o baço dos animais expostos às dietas contaminadas apresentaram um aumento significativo de lesões. Um aumento significativo na expressão de caspase-3 nos órgãos linfoides foi observado nos animais que receberam as dietas contaminadas. No segundo experimento, 12 leitões de 4 a 5 semanas de idade foram eutanasiados para obtenção de explantes jejunais, os quais foram expostos a cinco tratamentos por 4 horas, sob agitação constante a 37ºC em atmosfera umidificada a 5% de CO2. No tratamento controle foi utilizado meio de cultura William E sem ou com o diluente DMSO a 0,1%. Nos demais tratamentos os explantes foram expostos a DON, NIV (1, 3, 10 µM) e fusarenona X (FX) (0,3, 1 e 3 µM). Após incubação, as amostras de tecidos foram processadas histologicamente e analisadas utilizando-se escore histológico. Não foi observada diferença significativa no escore histológico entre amostras não incubadas e incubadas com meio de cultura na ausência ou presença de DMSO. As principais alterações observadas nos explantes expostos às micotoxinas foram atrofia de vilosidades, células epiteliais cúbicas e pavimentosas, edema na lâmina própria e desnudamento apical com perda de enterócitos. Os tratamentos individuais com DON, NIV e FX induziram uma diminuição do escore histológico a partir das doses de 3µM, 1µM e 0,3 µM, respectivamente. Em conclusão, os dados obtidos fornecem uma melhor compreensão dos efeitos das fusariotoxinas isoladas ou em combinação sobre a morfologia intestinal e de órgãos linfoides, as quais podem predispor os animais a infecções secundárias. In order to evaluate the systemic effects of food contamination by mycotoxins, emphasizing morphological and immunohistochemical aspects, two experiments were conducted. In the first experiment, 20 5-week-old piglets were randomly assigned to four groups. The animals received for 28 days the following treatments: control diet, a diet contaminated with deoxynivalenol DON (1.5 mg/kg), a diet contaminated with DON (2.0 mg/kg) + nivalenol (NIV) (1.3 mg/kg) + zearalenone (ZEA) (1.5 mg/kg) or a diet contaminated with DON (3.0 mg/kg) + NIV (1.3 mg/kg) + ZEA (1.5 mg/kg). The mono-contaminated diet showed no difference in weight gain, however the animals fed the multi–contaminated diets presented a significant decrease in final weight gain. The chronic ingestion of these contaminated diets induced histological changes in the intestine as show by atrophy and fusion of villi, decreased villi height and crypth depth, and reduced number of goblet cells and lymphocytes. The liver, mesenteric lymph nodes and spleen of animals exposed to contaminanted diets showed a significant increase of lesions. A significant increase in caspase-3 expression in lymph nodes and spleen was observed in animals receiving the contaminated diets. In the second experiment, 12 4 to 5-week-old piglets were euthanized to obtain jejunal explants, which were exposed to 5 treatments for 4 hours, under constant stiring at 37ºC and 5% CO2 humidified atmosphere. In the control treatment were used the William’s medium E without or with the diluent DMSO to 0.1%. In the other treatments the explants were exposed to DON, NIV (1, 3, 10 µM) and fusarenone X (FX) (0.3, 1 and 3 µM). After incubation, the tissue samples were histologically processed and analyzed using histological score. The analyse of samples non-incubated and incubated with culture medium in the absence or presence of DMSO showed no significant different of histopathological score. The main lesions observed in the explants exposed to mycotoxins were villi atrophy, cuboidal and squamous epithelial cells, areas of oedema in the lamina propria and apical denudation with loss of enterocytes. The individual treatment with DON, NIV and FX resulted in a significant decrease of the histopathologic score from doses of 3µM, 1µM and 0.3 µM, respectively. In conclusion, the data obtained provide a better understanding of the possible effects of Fusarium toxins, alone or in combination on the morphology of the intestine and lymphoid organs, which would may predispose animals to secondary infections.

Neoplasias mamárias são comumente encontradas em cadelas, tem alta taxa de malignidade e é uma das principais causas de morte nesta espécie. O tamanho, comprometimento do linfonodo regional e sentinela, metástase à distância e o tipo histológico são importantes fatores para se traçar o prognóstico e sobrevida dos pacientes. As micotoxinas são metabólitos secundários tóxicos produzidos por fungos que podem contaminar os cereais utilizados como matéria-prima em ração para cães. Uma das possíveis causas para o desenvolvimento de neoplasia mamária em cães pode ser a ingestão crônica de micotoxinas presentes na ração. O estudo retrospectivo de neoplasias mamárias em cadelas mastectomizadas no Hospital Veterinário (HV) da Universidade Estadual de Londrina (UEL) durante o período de 2006 a 2010 que totalizou 199 prontuários e teve como objetivo associar a classificação histológica das neoplasias mamárias à frequência das variáveis epidemiológicas pesquisadas. Neste estudo observou-se que os tumores múltiplos foram associados à neoplasia maligna (p=0,026) e a presença de neoplasia maligna foi associada à metástases em linfonodo (p=0,047). O estudo de caso-controle teve como objetivo avaliar fatores de risco para neoplasias mamárias. Além das variáveis epidemiológicas, fatores dietéticos e a contaminação da ração por micotoxinas foram investigados. No período de outubro de 2010 a outubro de 2012 foram incluídas no estudo 256 cadelas do HV/UEL, sendo 85 com neoplasia mamária (grupo caso) e 171 sem qualquer alteração em mama (grupo controle). A castração teve efeito protetor no estudo (p=0,0004; OR= 0,32; IC95%= 0,17-0,60). Animais castrados previamente à mastectomia representaram 20,2% (17/84). Os tumores múltiplos foram mais frequentes e as glândulas mamárias mais acometidas foram as abdominais seguido das inguinais. Os tumores malignos representaram 84%, sendo os carcinomas em maior proporção 93,7% (59/63) seguido de sarcomas 4,8% (3/63), carcinossarcoma 1,6% (1/63) e 16% tumores benignos. O tumor misto benigno representou 72,7% (8/11). Foi identificada a presença de metástase em linfonodo regional em 16% (12/75) dos casos e metástase pulmonar em 14,7% (11/75). A análise de sobrevida dos tipos histológicos mais frequentes dos animais com tumores malignos, demonstrou 33,3% (EP=0,157, IC95%= 0,13–0,84) de sobrevida nos carcinomas simples tubular grau I aos 15 meses após cirurgia, 29,6% (EP=0,164, IC95%=0,10-0,87) no grau II aos 25 meses após cirurgia, 33,3% (EP=0,27, IC95%=0,06-1) para grau III aos 17 meses após cirurgia, 72,9% (EP=0,13, IC95%=0,50-1) para carcinoma complexo grau I, aos 20 meses após cirurgia, 58,7% (EP=0,15, IC95%=0,34-1) para carcinoma complexo grau II aos 22 meses após mastectomiaA mastectomia unilateral total foi o tratamento de escolha para todos os pacientes. A determinação de micotoxinas na ração de ambos os grupos foi realizada por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). As aflatoxinas, fumonisinas e zearalenona foram detectadas em 98,6% (146/148) das amostras. As rações analisadas foram classificadas em econômica, premium e superpremium de acordo com a qualidade mencionada pelo fabricante no rótulo da ração. Todas as amostras do tipo econômica apresentaram alguma micotoxina (72/72), seguido das amostras do tipo premium 98,4% (62/63) e 92,3% (12/13) nas superpremium. A aflatoxina B1 (p=0,0356; OR=2,74; I C95%=1,13-6,60), G1 (p=0,00007; OR=4,60; IC95%=2,16-9,79)e G2 (p=0,0106; OR=9,91; IC95%=1,21-81,15) tiveram significância estatística em relação à presença de neoplasia mamária, mostrando que a presença de cereais e sua diversidade são importantes fontes para micotoxinas, mesmo que em pequenas quantidades. Os resultados indicam a importância do diagnóstico precoce, pois tumores malignos tem alta frequência na cadela e metástase em linfonodo e a distância tem influência no prognóstico e sobrevida do paciente. A castração tem efeito protetor para neoplasia mamária em cadela. A qualidade da ração ingerida deve ser monitorada, pois em todos os tipos de ração foi detectada a presença de micotoxinas, com significância estatística para as aflatoxinas B1, G1 e G2 em relação à presença de neoplasia mamária. Tumors of the mammary gland are the most commonly neoplasms found in female dogs, the mammary tumors have a high rate of malignancy and a major cause of death in dogs. The size, involvement in regional and sentinel lymph node, distant metastasis beyond the histological type are important factors to delineate the prognosis and survival of patients. Mycotoxins are metabolites of fungi wich may contaminate naturally cereals used as raw material in food for dogs. One possible cause of the development of tumors in dogs can be chronic ingestion of mycotoxins present in the fed. The retrospective study of mammary tumors in female dogs of hospital population, in bitches undergoing mastectomy at the Veterinary Hospital (HV), State University of Londrina (UEL), aimed to associate the histological classification of mammary neoplasms the frequency of searches for epidemiological variables. Survey conducted during the period 2006 to 2010 add up to 199 records. In this study it was observed that the multiple tumors were associated with malignancy (p = 0.026) and the presence of malignancy was associated with lymph node metastasis (p = 0.047). The Case-control study aimed to evaluate risk factors for breast cancer. In addition to the epidemiological variables, dietary factors and the contamination of feed by mycotoxins were investigated. From October 2010 to October 2012 were included in the study 256 bitches from HV/UEL, 85 with breast cancer (case group) and 171 without any change in breast (control group). Castration had a protective effect in the study (p=0.0004; OR= 0,32; IC95%= 0,17-0,60). Castrated prior to mastectomy accounted for 20.2% (17/84). Multiple tumors were more frequent and the most affected mammary glands were followed by abdominal inguinal. Malignant tumors represented 84%, in a higher proportion carcinomas 93.7% (59/63) followed sarcomas 4.8% (3/63) carcinosarcoma 1.6%(1/63) and 16% benign tumors where benign mixed tumor represented 72.7% (8/11). The presence of regional lymph node metastasis in 16% (12/75) of cases and pulmonary metastasis in 14.7% (11/75) were identified. Survival analysis curve was performed of the most frequent histological types of animals with malignant tumors. There was obtained 33.3% (SE= 0.157, 95% CI = 0.13 to 0.84) survival in grade I at 15 months simple tubular carcinomas after surgery, 29.6% (SE= 0.164 , 95% CI = 0 from 0.10 to 0 , 87) in grade II and 25 months after surgery, 33.3% (SE = 0.27, 95% CI = 0.06 to 1) for grade III to 17 months after surgery 72.9% (SE = 0.13, 95% CI = 0.50 to 1) for complex carcinoma grade I, at 20 months after surgery, 58.7% (SE= 0.15, 95% CI = 0.34 to 1) for carcinoma complex grade II at 22 months after mastectomy. The unilateral total mastectomy was the treatment of choice for all patients. The detection of mycotoxins in food for both groups was performed by the high performance liquid chromatography (HPLC) technique. Aflatoxins, zearalenone and fumonisins were detected in 98.6% (146/148). The rations were classified into economic, premium and super premium according to the quality mentioned by the manufacturer in the feed label. All samples showed some kind of economic mycotoxin 100 % (72 72), followed by samples of premium type 98.4 % (62 /63) and 92.3 % (12/13) in the super-premium. Aflatoxin B1, G1 and G2 respectively had statistical significance (p = 0.0356, OR = 2.74, R= 1.13 to 6.60 % C95), (p=0.00007, OR = 4.60; 95% CI = 2.16 to 9.79) and (p= 0.0106, OR = 9.91, 95% CI 1.21 to 81.15) showing that the presence of cereals and their diversity are important sources for mycotoxins. The statistical package Epi Info 3.5.4 was used for the calculations of relative frequency, tabulation of the variables of interest and survival analysis in R 2.15.3 program, the Kaplan-Meier test. The results indicate the importance of early diagnosis, because malignant tumors have high frequency in dogs and lymph node metastasis and distance influences the prognosis and patient survival. Castration has protective effect for mammary cancer in dogs. The quality of feed intake should be monitored, as in all types of feed was detected the presence of mycotoxins, with statistical significance for aflatoxins B1, G1 and G2 related to mammary tumor.

O ovário é um órgão pluralista e dinâmico, composto por diferentes linhagens de células. As estruturas que o compõem sofrem mudanças sequenciais na morfologia e nas propriedades bioquímicas durante o ciclo reprodutivo, em decorrência da ação de hormônios hipofisários e ovarianos. Os receptores de estrógenos e de progesterona são detectados nos ovários de diversas espécies, indicando que esses hormônios exercem funções autócrina e parácrinas no órgão. Além de regular a função ovariana, os esteróides possuem um importante papel no desenvolvimento dos tecidos uterino e mamário. Na oncologia, inúmeros estudos são realizados na busca do esclarecimento da carcinogênese mamária e ovariana, e é forte a evidência que um dos fatores que favorecem a progressão da neoplasia é a exposição frequente dos tecidos a hormônios esteróides, colaborando assim no desenvolvimento e progressão do tumor. A cadela é utilizada em estudos de carcinogênese mamária devido às similaridades morfológicas e moleculares com as neoplasias em mulheres e as características da fase lútea do ciclo ovariano da cadela, transformando-a assim, em um modelo adequado aos estudos da ação dos hormônios ovarianos na fisiologia e carcinogênese dos órgãos reprodutores e da glândula mamária. São poucos e recentes os estudos sobre o ovário canino, sendo que a maioria aborda aspectos funcionais e hormonais, principalmente sobre células da granulosa e oócitos, com ênfase na reprodução. Pouco se conhece sobre o estroma ovariano de cadelas e mulheres. Atualmente, observa-se um maior interesse a respeito das células que compõem o estroma de tecidos neoplásicos, principalmente mamário, para esclarecer a possível ação autócrina e parácrina dessas células na tumorigênese. O presente estudo teve como objetivo avaliar a morfologia, a proliferação e a densidade celular do estroma ovariano de cadelas com e sem neoplasia mamária. Utilizaram-se blocos histológicos de ovários de 40 cadelas com neoplasia mamária submetidas à ovariossalpingoisterectomia terapêutica e 18 blocos de ovários de cadelas hígidas submetidas à cirurgia eletiva. As análises morfológicas do ovário e principalmente do estroma ovariano foram realizadas utilizando as colorações histoquímicas de Hematoxilina-eosina e Tricrômico de Masson e o método imunoistoquímico com o anticorpo anti-PCNA. A densidade e proliferação celular foram analisadas no estroma próximo aos folículos terciários. Nos ovários examinados não foram observadas alterações histológicas. Assim, concluiu-se que o método imunoistoquímico PCNA permitiu uma melhor visualização das características histológicas, da composição e disposição das células, do estroma ovariano quando comparado com as colorações histoquímicas de hematoxilina-eosina e Tricrômico de Masson. O estroma ovariano das cadelas é composto predominantemente por células fusiformes e epitelióides em proporções semelhantes. Constatou-se que o índice de proliferação e a densidade celular do estroma ovariano não sofrem alterações em cadelas com e sem neoplasia mamária ou em decorrência ao porte físico do animal. Verificou-se um aumento significativo na densidade celular do estroma ovariano de cadelas com neoplasia entre a faixa etária de 4 a 12 anos em relação às cadelas com idade entre 13 a 15 anos. Neste estudo, observou-se que nos ovários histologicamente normais não há influência e alteração das células estromais ovariana na carcinogênese mamária. The ovary is a pluralistic and dynamic organ composed of different cell lines. The structures that comprise suffer sequential changes in morphology and biochemical properties during the reproductive cycle, due to the action of hipofisary and ovarian hormones. Estrogen receptors and progesterone levels are detected in the ovaries of several species, indicating that these hormones exert autocrine and paracrine functions in the organ. In addition to regular ovarian function, steroids have an important role in the development of uterine and breast tissues. In oncology, many studies are conducted in search of enlightenment of breast and ovarian carcinogenesis, and is strong evidence that one of the factors that favor the progression of cancer is the frequent exposure of tissues to steroid hormones, thus fostering the development and progression of the tumor. The canine is used in studies of mammary carcinogenesis because of morphological and molecular similarities with the cancers in women and the characteristics of the luteal phase of the ovarian cycle of the bitch, thus transforming it in an appropriate model to study the action of ovarian hormones on the physiology and carcinogenesis of the reproductive organs and mammary gland. Are few and recent studies on the canine ovary, most of which addresses functional and hormonal aspects, especially on granulosa cells and oocytes, with emphasis on reproduction. Little is known about the ovarian stroma of women and bitches. Currently, there is a greater concern as the cells that make up the stroma of neoplastic tissues, especially breast, to clarify the possible autocrine and paracrine action of these cells in tumorigenesis. The present study was to evaluate the morphology, proliferation and cell density of ovarian stroma of bitches with and without breast cancer. We used histological blocks from the ovaries of 40 bitches with breast cancer undergoing treatment ovarioisterectomy and 18 blocks from the ovaries of healthy dogs undergoing elective surgery. The morphological analysis of the ovary and the ovarian stroma were mainly carried out immunohistochemical staining using hematoxylin-eosin and Masson's trichrome and immunohistochemistry with anti-PCNA. The density and cell proliferation were analyzed in the stroma close to tertiary follicles. In the ovaries were not examined histological changes. Thus, it was concluded that PCNA immunohistochemistry allowed a better visualization of the histological characteristics, composition and arrangement of cells, the ovarian stroma when compared with the histochemical staining with hematoxylin-eosin and Masson's trichrome. The ovarian stroma bitches is composed predominantly of spindle cells and epithelioid cells in similar proportions. It was found that the rate of proliferation and cell density of ovarian stroma remain unchanged in dogs with and without breast cancer or due to the physical size of the animal. There was a significant increase in stromal cell density of bitches with ovarian cancer between the ages of 4 to 12 years in relation to dogs aged 13 to 15 years. In this study, we found that histologically normal ovary no influence and alteration of the ovarian stromal cells in mammary carcinogenesis.

Linfoma é o termo utilizado para designar um grupo heterogêneo de tumores malignos de origem linfóide. Diversos sistemas de classificação foram estabelecidos para facilitar a compreensão do comportamento biológico destas doenças na medicina humana e adaptados para medicina veterinária. A classificação anatômica desenvolvida pela Organização Mundial de Saúde é a forma mais simples de classificá-los segundo o local primário de aparecimento. A determinação do grau de malignidade, da imunofenotipagem e dos índices de proliferação celular constitui a melhor forma de compreender o seu comportamento biológico, contribuindo na determinação de fatores prognósticos e na escolha de protocolos antineoplásicos. Neste estudo foram avaliados os aspectos epidemiológicos, morfológicos e terapêuticos de 49 cães com linfoma cutâneo e a associação do grau de malignidade e imunofenotipagem com os índices de proliferação celular (PCNA e Ki-67) em 55 cães com a apresentação multicêntrica, atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Estadual de Londrina no período de janeiro de 1990 a agosto de 2008. Dentre os cães com linfoma cutâneo, 35 eram fêmeas e 14 machos, com distribuição racial heterogênea, porém com maior ocorrência em cães de raça definida e idade variando entre 2 a 14 anos. O tumor foi mais freqüente em cães de pequeno e médio porte, com lesões distribuídas principalmente no abdome, dorso e tronco. Em 21 cães foi realizada a classificação morfológica verificando-se doze com linfoma não epiteliotrópico e nove com a forma epiteliotrópica. Na maioria dos cães tratados com múltiplos fármacos, a remissão clínica foi completa ou parcial. Ao utilizar protocolos com monoterapia a doença permaneceu estável ou progrediu, com exceção dos dois pacientes tratados com lomustina. A sobrevida foi maior em pacientes tratados com múltiplos antineoplásicos. Dos 55 cães com linfoma multicêntrico 30 eram machos e 25 fêmeas, dos quais 39 de raça definida e 16 sem definição racial, com idade média de 5,4 anos. Morfologicamente 70,1% dos casos eram de alto grau de malignidade e 29,9% de baixo grau, sendo 32 de células T e 23 de células B. A média de células marcadas pelo anticorpo PCNA foi de 90,0 ± 3,96 em linfomas de alto grau e de 82,0 ± 2,60 entre os de baixo grau. Ao considerarmos todas as células marcadas não houve diferença significativa, porém ao estabelecer como positivas apenas as células fortemente marcadas, obtivemos diferença significativa entre os linfomas de alto grau (84,72 ± 3,79) e os de baixo grau de malignidade (64,19 ± 3,50). Associação significativa entre a proliferação celular mensurada com o anticorpo Ki-67 e o grau de malignidade (64,0 ± 9,03 para os de alto grau e 9,50 ± 2,49 para os de baixo grau) também foi constatada. Não houve associação entre o índice de proliferação celular de nenhum dos anticorpos com o imunofenótipo. Lymphomas are a diverse group of malignant neoplasms that originate in lymphoid tissues. Several classification systems were established to enhance the understanding of the biological behavior of this disease in both human and veterinary medicine. The anatomical classification developed by World Health Organization (WHO) is the most simple and it is based in the primary site of appearance. The pattern of growth, immunophenotypic features and mitotic rates consist the main basis to understand the tumor behavior, determining prognosis, and influencing treatment selection. In this study the epidemiologic, morphologic and therapeutic aspects of 49 dogs with cutaneous lymphoma were evaluated. The association between the malignant grade, immunophenotyping, and cellular proliferation (PCNA and Ki-67) were also evaluated in 55 dogs with the multicentric form. Within cutaneous lymphoma, 35 dogs were females and 14 were males, many different breeds were represented but more frequently in pure breeds and age from 2 to 14 years. This tumor was more frequent in small and medium breeds, with lesions in abdomen, dorsum and trunk. The morphologic classification was made in 21 dogs, with twelve non epiteliotrophic and nine epiteliotrophic form. In the majority of the cases the multiple-drug therapy was established, and the remission was complete. The single-drug therapy result in stable or progressive disease, except for patients treated with lomustine. The survival was longerin patients treated with multiple-drugs therapy. In 55 multicentric form dogs were 30 males and 25 females, 39 pure breed and 16 mixed breeds. The mean age was 5.4 years. High malignant grade were 70.1% of cases and low malignant grade represented 29.9%, 32 T cell lymphoma and 23 B cell lymphoma. The mean mitotic cell rate by PCNA antibody were 90,0 ± 3,96 in high malignant grade lymphomas and 82,0 ± 2,60 in low malignant grade concerning all marked cells was no significant difference (p