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The oxygen levels in water are fundamental importance in the distribution of life, especially the animals. Oxygen is one of the most important gases in the dynamics and the characterization of aquatic ecosystems where it could cause a reduction in their levels (hypoxia) or even the absence (anoxia). The tolerance to hypoxia/anoxia is highly variable among animals. In crustaceans were identified adaptive strategies that allow the survival of the species can be highlighted: the use of anaerobic pathways for ATP production, maintenance of high concentrations of glycogen and phosphate under aerobic and metabolic depression. The use of anaerobic glycolysis pathways is the fundamental way to produce ATP. The strategy of metabolic depression is a very common mechanism used by animals to cope the environmental stress and for many species, this is the primary strategy. The maintenance of high concentrations of glycogen and phosphate is also an adaptation made by several species of crustaceans to hypoxia/anoxic. Beyond tolerance to this environment, animals must contend with periods of recovery to normal levels of oxygen. The recovery phase is important for the replenishment of energy reserves and the removal of the finished products stored. Research on the adaptations of species, mainly metabolic, are essential to a better understanding of the mechanisms used by the species to survive in environments with low oxygen levels., O teor de oxigênio na água tem importância fundamental na distribuição da vida, especialmente dos animais. O oxigênio é um dos gases mais importantes na dinâmica e na caracterização de ecossistemas aquáticos podendo ocorrer uma redução de seus níveis (hipóxia) ou até mesmo sua ausência (anoxia). A tolerância a hipóxia/anoxia é muito variável entre os animais. Em crustáceos foram identificadas estratégias adaptativas que permitem a sobrevivência de espécies podendo-se destacar: a utilização de vias anaeróbicas para a produção de ATP, manutenção de altas concentrações de glicogênio e de fosfato em condições aeróbias e a depressão metabólica. Na utilização das vias anaeróbicas a glicólise é a via fundamental para a produção de ATP. A estratégia da depressão metabólica é um mecanismo muito comum utilizado pelos animais para enfrentar o estresse ambiental e para muitas espécies, essa é a estratégia primária utilizada. A manutenção de altas concentrações de glicogênio e fosfato também é uma adaptação apresentada por várias espécies de crustáceos ao ambiente hipóxico/anóxico. Além da tolerância a esse ambiente, os animais precisam enfrentar períodos de recuperação aos níveis normais de oxigênio. A fase de recuperação é importante para a reposição das reservas energéticas e para a remoção dos produtos finais armazenados. Pesquisas sobre as adaptações das espécies, principalmente as metabólicas, são essenciais para a melhor compreensão dos mecanismos utilizados pelas espécies para sobreviverem em ambientes com níveis reduzidos de oxigênio.

This study describes the variation of tissue composition and haemolymphatic metabolites in the anomuran crab A. platensis, which was maintained for 90, 120, 150, and 180 days under laboratory conditions, and relates the data collected to reproductive aspects of this species. Individuals were collected during the winter from Mineiro Creek, in Rio Grande do Sul, Brazil. Some of the individuals were killed when collected and the remaining animals were maintained in a laboratory for different time periods using a commercial diet. Haemolymph, hepatopancreas and gonads were removed at different times of cultivation to determine their biochemical composition using spectrophotometric methods. Hepatosomatic and gonadosomatic indexes were determined. Statistical analysis revealed significant differences between the sexes in all metabolites except in the proteins levels in the haemolymph. We observed an increase of ovigerous females kept under the same culture conditions between 120 and 150 days and we found an increase in the gonadosomatic index and a decrease in the hepatosomatic index in both sexes for the same times. Results showed that the regular food supply caused an increase in the gonadosomatic index in both sexes during all the time periods when compared to the results of animals from the natural environment. We also observed that the females used part of their hepatopancreatic reserves for vitellogenesis and gametogenesis, but the nutrients obtained from the other tissues and the diet were very important for supporting reproduction. Males used the metabolic reserves for growth, gametogenesis, and reproductive behaviors. This study indicates that reproductive events depend on a regular food supply., (Composição tecidual e metabolitos hemolinfaticos durante o desenvolvimento gonadal de Aegla platensis (Crustacea, Decapoda) mantidas em cultura experimental). Este estudo descreve a variação da composição tecidual e metabólitos hemolinfáticos nos caranguejos anomuros A. platensis mantidos por 90, 120, 150 e 180 dias no laboratório, e relaciona esses dados com os aspectos reprodutivos. Os animais foram coletados no arroio do Mineiro, Rio Grande do Sul, Brasil durante o inverno. Parte dos animais foi sacrificado em campo, e os restantes animais foram mantidos em laboratório por diferentes períodos com uma dieta comercial. A hemolinfa, o hepatopâncreas e as gônadas foram retiradas em diferentes épocas de cultivo para determinar a sua composição bioquímica por métodos espectrofotométricos. Os índices hepatossomático e gonadossomático foram determinados. A análise estatística revelou diferenças significativas entre os sexos em todos os seus metabolitos, exceto nos níveis de proteínas na hemolinfa. Observamos um aumento de fêmeas ovígeras mantidas sob as condições de cultivo entre 120 e 150 dias e encontramos um aumento do índice gonadossomático e uma diminuição do índice hepatossomático em ambos os sexos no mesmo periodo. Os resultados mostraram que o fornecimento regular de alimentos provocou um aumento no índice gonadossomático em ambos os sexos durante todo o período, quando comparado com os resultados dos animais do ambiente natural. Também foi observado que as fêmeas utilizadas parte das suas reservas do hepatopâncreas para a vitelogênese e a gametogênese, mas os nutrientes obtidos a partir de outros tecidos e da dieta foram muito importantes para apoiar a reprodução. Os machos utilizaram a reserva metabólica para o crescimento, gametogênese e comportamentos reprodutivos. Este estudo indica que os eventos reprodutivos dependem de um fornecimento regular de alimentos.

Specialized literature has demonstrated, in Decapods, that anterior gills are morphologically and physiologically adapted for gas exchange and breathing, while the posterior gills are specialized for osmorregulation. The goal of this work was to analyze the seasonal variations of the intermediate metabolism of the gills of Parastacus varicosus, relating variation of these metabolites with ecological and behavioral factors of the animal and abiotics factors. Crayfishes were collected from June/2004 until May/2005 in Gravataí, Rio Grande do Sul State, Brazil. Gills were removed and separated in anterior and posterior parts for determination of the levels of glycogen, proteins and lipids. The results were analyzed with ANOVA followed by Bonferroni test. For the comparision between males and females and anterior and posterior gills was used the two-way ANOVA test. Both tests were made with a significant level of 0.05 in the Statistical Package for the Social Sciences (SPSS-11.5) software. The results showed a bigger consumption of the glycogen and lipids in the males in relation to the females for anterior gills. This pattern can be related to the agonist behaviors of the males and the increase of the activity of exploration of the environment mainly in search of reproductive partners. The gills of P. varicosus act in different way in relation to its position (anterior and posterior) and sex, showing a clear seasonal variation. The storage and the consumption of the metabolites in each season differ between the sexes and the localization of the gills. These differences can be occurring due to environmental factor, behavioral or the addition of both of these factors., A literatura especializada tem demonstrado, em Decapoda, que as brânquias anteriores estão morfologicamente e fisiologicamente adaptadas a trocas de gases e respiração; já as posteriores são especializadas para osmorregulação. Este trabalho tem como objetivo analisar as variações sazonais do metabolismo intermediário das brânquias de P. varicosus, relacionando a variação destes metabólicos com fatores ecológicos e comportamentais do animal e fatores abióticos. Os lagostins foram coletados de Junho/2004 a Maio/2005 em Gravataí, Rio Grande do Sul, Brasil. As brânquias foram removidas e separadas as anteriores das posteriores para a determinação dos níveis de glicogênio, proteínas e lipídios. Ao compararmos os sexos, observa-se que as brânquias anteriores apresentam um comportamento diferencial ao longo do ano; padrão semelhante foi encontrado para as posteriores quando considerados os níveis de glicogênio, proteínas e lipídios. Foi observada também, uma variação na composição bioquímica das brânquias anteriores e posteriores entre as estações. Os resultados mostram um maior consumo de glicogênio e lipídios nos machos em relação às fêmeas somente para brânquias anteriores. Esta resposta pode estar relacionada a comportamentos agonistas dos machos e ao aumento da atividade de exploração do meio ambiente principalmente em busca de parceiras reprodutivas. As brânquias de P. varicosus atuam de maneira diferente quanto a sua posição (anterior e posterior) e quanto ao sexo; apresentando clara variação sazonal. O armazenamento e o consumo dos metabólitos em cada estação diferem tanto entre os sexos e quanto à localização das brânquias, tais diferenças podem estar ocorrendo por fatores ambientais, comportamentais ou pela soma destes fatores.

Many plants contain the phytoalexin trans-resveratrol, red grapes and peanuts being rich in this antioxidant which is thought to be responsible for the protection which wine have been reported to provide against diseases; many authors considering this antioxidant also to have the ability to retard aging. We investigated the effects of trans-resveratrol on the energetic metabolism in D. melanogaster during the adult life. Adult male and female of the D. melanogaster were divides into 3 groups: treatment group received 1mM of trans-resveratrol dissolved in 3% of dimethyl sulfoxide (DMSO), whereas the control group received only DMSO or water. For the analyses of energy metabolism (lipids, triglycerides, cholesterol, glycogen and proteins) and lipoperoxidation the flies were treated during 21 days. All these experiments were repeated five times in five different cohorts. Results for the metabolism in control group and treated groups with trans-resveratrol or DMSO showed that both sexes flies showed selective responses to the different treatments. Both sexes of flies treated with trans-resveratrol or DMSO showed different values for cholesterol, glycogen and total protein as compared to control flies. These results indicate that both treatments can modulate energy metabolism and lipoperoxidation in this strain of D. melanogaster in both sexes.

Melanophryniscus admirabilis ? uma esp?cie de bufon?deo microend?mica do sul da Mata Atl?ntica (RS, Brasil), regi?o cujas atividades agr?colas podem impactar esta esp?cie. Os objetivos deste trabalho foram avaliar poss?veis altera??es em par?metros metab?licos (n?veis de glicog?nio, prote?nas totais e ?cido ?rico), do balan?o oxidativo (lipoperoxida??o e atividade das enzimas super?xido dismutase, catalase e glutationa S-transferase), morfol?gicos (massa, comprimento e ?ndices corporais) e da metamorfose (tempo necess?rio para atingir os est?gios 42 e 46, al?m do intervalo entre estes) de girinos de M. admirabilis expostos a concentra??es isoladas dos herbicidas Roundup? Original DI (i.a. glifosato; R1: 2,5 mg.L-1; R2: 5,0 mg.L-1) e Boral? 500 SC (i.a. sulfentrazone; B1: 1,0 mg.L-1; B2: 2,0 mg.L-1), e a misturas destes (Mistura 1: R1+B1; Mistura 2: R2+B1; Mistura 3: R1+B2; Mistura 4: R2+B2). Massas de ovos foram coletadas, transportadas e mantidas, em laborat?rio (23?1?C; 12:12h) at? a eclos?o em girinos (Ensaio 1: 82 girinos eclodidos; Ensaio 2: 123 girinos eclodidos), sendo aclimatados (cinco dias) com as mesmas condi??es e, no sexto dia, divididos em grupos experimentais (Controle e grupos de exposi??o), com tr?s r?plicas cada, sendo expostos (96h) aos herbicidas. Ao final da exposi??o, no Ensaio 1, os girinos foram pesados, medidos e crioeutanasiados (nitrog?nio l?quido); no Ensaio 2, foram colocados em aqu?rios com ?gua declorada e substrato rochoso para o acompanhamento at? a metamorfose, quando foram pesados, medidos e crioeutanasiados. O Cap?tulo 1 demonstra, para girinos, manuten??o dos par?metros morfol?gicos, aumento dos n?veis de glicog?nio e de ?cido ?rico e redu??o das prote?nas, indicando mobiliza??o de substratos energ?ticos e estruturais, e a poss?vel atua??o do ?cido ?rico como antioxidante n?o enzim?tico. Al?m disso, a redu??o dos n?veis de lipoperoxida??o e da atividade enzim?tica sugere mobiliza??o de outros mecanismos constitutivos da esp?cie, evitando lipoperoxida??o; por?m, em longo prazo, isto pode reduzir o fitness e o sucesso destes animais. O Cap?tulo 2 demonstra mortalidade em alguns grupos (R2: 71%; Misturas 1 e 4: 64%; Mistura 2: 29%; Mistura 3: 50%), e, para rec?m-metamorfoseados, supress?o enzim?tica e aus?ncia de lipoperoxida??o, principalmente nas misturas, sugerindo, novamente, mobiliza??o de mecanismos constitutivos evitando danos oxidativos. Entretanto, esta supress?o pode prejudicar a metaboliza??o dos herbicidas e impactar a sobreviv?ncia destes animais. No Cap?tulo 3, apesar da mortalidade j? descrita, observou-se manuten??o da massa, do crescimento e de ?ndices corporais de rec?m-metamorfoseados, indicando aloca??o energ?tica voltada ao crescimento som?tico em detrimento da biotransforma??o dos herbicidas. Quanto aos tempos de metamorfose, para o est?gio 42, observou-se aumento (R2, 4%) ou redu??o (Mistura 2 ? 13%, Misturas 3 e 4 ? 6%); redu??o para o est?gio 46 (Misturas 2 ? 15% e 4 ? 12%) e, para o intervalo entre estes est?gios, redu??o (R2: 59%) ou aus?ncia de diferen?as. Estas altera??es sugerem a??o do Roundup como disruptor end?crino, com a??o sin?rgica com o Boral (nas misturas), encurtando o tempo de metamorfose, prejudicando o desenvolvimento e, possivelmente, ocasionando mortalidade destes animais. A partir deste conjunto de resultados, evidencia-se o risco da exposi??o de M. admirabilis a agrot?xicos, alterando par?metros relacionados ao fitness, ? sobreviv?ncia e ao sucesso destes animais durante os est?gios larval (metam?rfico) e p?s-metam?rfico, o que pode levar a impactos em n?vel populacional. Assim, a elucida??o de efeitos letais e subletais de agrot?xicos, isolados e em misturas, al?m de controle e monitoramento da entrada destes poluentes na regi?o s?o extremamente relevantes para a conserva??o desta esp?cie microend?mica. Melanophryniscus admirabilis is a bufonid species endemic to the Southern Atlantic Forest (RS, Brazil), a region with agricultural activities which can impact this species. The objectives of this work were to evaluate alterations in metabolic parameters (glycogen, proteins and uric acid levels), oxidative balance (lipid peroxidation and activity of enzymes superoxide dismutase, catalase and glutathione S-transferase), morphological parameters (mass, length and body index) and metamorphosis (timing to stages 42, 46 and time interval between these stages) of M. admirabilis tadpoles exposed to the herbicides Roundup? Original DI (a.i. glyphosate; R1: 2,5 mg.L-1; R2: 5,0 mg.L-1) and Boral? 500 SC (a.i. sulfentrazone; B1: 1,0 mg.L-1; B2: 2,0 mg.L-1), and to herbicides mixtures (Mixture 1: R1+B1; Mixture 2: R2+B1; Mixture 3: R1+B2; Mixture 4: R2+B2). Egg masses were collected, transported and reared, in laboratory (23?1?C; 12h:12h) until eclosion in tadpoles (Experiment 1: 82; Experiment 2: 123), which were acclimated (5 days) and then, exposed (96h) to the herbicides (except Control group). After exposure, tadpoles were weighed, measured and euthanized (liquid nitrogen) (Experiment 1) or relocated in aquariums with dechlorinated tap water and rocky sediment until metamorphosis (Experiment 2), and then, weighed, measured and euthanized. In Chapter 1, for tadpoles, there was maintenance of morphological parameters, higher levels of glycogen and uric acid, and reduction in protein levels, indicating mobilization of energetic and structural metabolites, and the possible role of uric acid as antioxidant. Reduced lipid peroxidation and enzymatic activities suggests mobilization of constitutive mechanisms of this species. Nevertheless, these results can reduce fitness and success of these animals. In Chapter 2, the herbicide exposure resulted in mortality and, in metamorphosed tadpoles, reduced lipid peroxidation, mostly in mixture groups, suggesting mobilization of constitutive mechanisms of these animals. The enzymatic suppression can jeopardize herbicide metabolization, impacting animals? survival. In Chapter 3, for metamorphosed tadpoles, aside from mortality, the animals maintained mass, growth and body index, indicating energetic allocation to body maintenance, impacting biotransformation. Timing to metamorphosis, for stage 42, were longer (R2, 4%) or reduced (Mixtures 2 - 13%, 3 and 4 - 6%); reduced for stage 46 (Mixtures 2 -15% and 4 - 12%) and, for time interval, reduced (R2, 59%) or absence of effect. These results suggest Roundup as endocrine disruptor, with synergic action with Boral (mixture groups), shortening metamorphosis, which can threaten this species development and, possibly, lead to death. These results demonstrate the risks imposed to M. admirabilis by pesticide exposure, compromising fitness, survival and success of metamorphic and post-metamorphic life cycle stages. Therefore, elucidation of the effects of pesticides, especially in mixtures, control and monitoring of these pollutants in this region are extremely relevant for conservation of this endemic species. Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES

Uma das atividades mais impactantes ao meio ambiente ? a agricultura que utiliza muitos agentes t?xicos aos ecossistemas, poluindo e envenenando as esp?cies nativas e que n?o s?o alvo destas subst?ncias. Portanto, avaliar os efeitos que agrot?xicos causam em esp?cies n?o-alvo ? importante para a tomada de decis?es acerca do uso, libera??o e mitiga??o de seu impacto. O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar a toxicidade dos herbicidas Roundup? Original (glifosato) e DEZ? (2,4-D) no balan?o oxidativo e nos par?metros de condi??o corporal em Scinax squalirostris, uma esp?cie nativa brasileira submetida a concentra??es ambientalmente e legalmente relevantes no Brasil destes dois agrot?xicos. Tamb?m objetivamos avaliar os impactos no balan?o oxidativo e na condi??o corporal da formula??o comercial Roundup? Original na fase larval de uma esp?cie nativa, por?m exclusivamente aqu?tica, de anuro, Pseudis minuta. Em ambos os estudos, as coletas foram feitas na mesma propriedade particular, localizada em Tapes, Brasil, onde h? lavouras de arroz irrigado e soja em rotatividade e uma ?rea de reserva de Butiazal nativo, na qual os anf?bios foram coletados. De Scinax squalirostris coletamos 140 girinos de um ?nico corpo d??gua, entre os est?gios 25 e 34 de Gosner e os mantivemos em laborat?rio sob condi??es controladas, expondo-os a tr?s diferentes concentra??es de cada um dos dois herbicidas mais utilizados no Brasil, o glifosato e o 2,4-D em formula??o comercial. Este ensaio contou com dois controles, aclimata??o e exposi??o, a fim de eliminarmos erros provindos do manuseio e do tempo de laborat?rio. De Pseudis minuta, fizemos a coleta de massa de ovos e as levamos para o laborat?rio, mantendo-as at? os girinos eclodirem e atingirem o est?gio 25 de Gosner, para que ent?o os expus?ssemos a 65?g/L, 250?g/L e 500?g/L de Roundup? Original. Da esp?cie S. squalirostris avaliamos os par?metros de condi??o corporal como massa e comprimento, bem como os ?ndices K e Kn. Analisamos tamb?m as enzimas de defesa antioxidante (Super?xido Dismutase e Catalase), de biotransforma??o (Glutationa S-transferase) e os danos oxidativos por Lipoperoxida??o (TBARS) e Prote?nas Carboniladas (PC). J? para P. minuta, avaliamos os mesmos ?ndices de condi??o corporal e as mesmas enzimas antioxidantes e de biotransforma??o, por?m com rela??o aos danos oxidativos, avaliamos apenas TBARS. Para S. squalirostris, uma esp?cie arbor?cola, pudemos observar uma modula??o da atividade das enzimas antioxidantes, especialmente com rela??o ao glifosato. Entretanto, observamos estresse oxidativo atrav?s da carbonila??o de prote?nas, de forma dose-dependente para o 2,4-D e na concentra??o intermedi?ria de glifosato, o que sugere que o 2,4-D ? potencialmente mais t?xico que o glifosato. Por outro lado, para P.minuta, observamos crescimento acima do esperado na menor concentra??o de glifosato sugerindo um aumento da ingesta e direcionamento dos nutrientes para o crescimento. Com rela??o ao balan?o oxidativo de P.minuta, n?o observamos diferen?as significativas e, com isso, levantamos a hip?tese de toler?ncia por parte dessa esp?cie que ? mais antropizada que a primeira e que habita ambientes aqu?ticos por todo o ciclo de vida. Esperamos que estes resultados ratifiquem a import?ncia de estudos ecotoxicol?gicos em esp?cies nativas de diferentes h?bitos e que possam contribuir com informa??es para a tomada de decis?es acerca do uso e libera??o (ou n?o) de agrot?xicos no ambiente. GLYPHOSATE AND 2,4-D TOXICITY EVALUATION ON PSEUDIS MINUTA AND SCINAX SQUALIROSTRIS TADPOLES COLLECTED IN NATURAL ENVIRONMENT One of the most impactful activities on the environment is agriculture which uses several toxic agents to ecosystems, polluting and poisoning native species that are not target of these substances. Therefore, assessing pesticides effects on non-target species is important for making decisions about the use, release, and mitigation of their impacts. The aim of this study was to compare and evaluate toxicity of herbicides Roundup? Original (glyphosate) and DEZ? (2,4-D) on oxidative balance and body condition parameters in Scinax squalirostris, a Brazilian native species submitted to environmentally and legally relevant concentrations in Brazil for these pesticides. Our goal was also to analyze commercial formulation of Roundup? Original impacts in oxidative balance and body condition parameters on an exclusively aquatic native species of anuran, Pseudis minuta at the larval fase. In both studies we collected animals in the same Butiazal reserve area, inside a particular property, localized in Tapes, Brazil, that cultivates rice and soybean in rotating planting. From S. squalirostris we collected 140 tadpoles from a single water body, between 25 and 34 Gosner?s stages and we kept them under controlled conditions in lab. We exposed them to three different concentrations of each of the most widely used herbicide formulations in Brazil, glyphosate and 2,4-D. In this experiment we used two control groups - acclimatization and exposure - to eliminate handling and lab time errors. From P. minuta, we collected egg masses and we kept them in controlled conditions in laboratory until tadpoles hatched and reached Gosner stage 25. Then we exposed them to 65?g/L, 250?g/L and 500?g/L of Roundup? Original. Concerning S. squalirostris, we analyzed body condition parameters such as weight, length, as well as K and Kn indexes. We also analyzed antioxidant defense enzymes (Superoxide Dismutase and Catalase), biotransformation enzyme (Glutathione Stransferase) and oxidative damage by Lipoperoxidation (TBARS) and Protein Carbonylation (PC). Whilst to P. minuta, we evaluated the same body conditions indexes, antioxidant and biotransformation enzymes, however, with regard to oxidative damage, we only evaluated Lipoperoxidation (TBARS). About S.squalirostris, an arboreal species, we observed an antioxidant defense enzymes activity modulation, especially related to glyphosate. Nevertheless, we found dose-dependent oxidative stress through protein carbonylation for 2,4-D and also in the intermediate glyphosate concentration, suggesting that 2,4-D is more toxic than glyphosate. On the other hand, we found aboveexpected growth in the lowest glyphosate concentration for P. minuta, insinuating an increase in intake and targeting nutrient for growth. Regarding the oxidative balance of P.minuta, we were not able to observe significative differences, so we raised the hypothesis of tolerance of this species, which is more anthropized than the first one and inhabits aquatic environment throughout its whole life cycle. We expect that these results ratify the value of ecotoxicological studies in native species that have different habits and that it may contribute with scientific information for decision-making about the release and use (or not) of pesticides in environment. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq

O Brasil ? um dos maiores consumidores mundiais de agrot?xicos, cuja utiliza??o de forma massiva afeta ecossistemas e organismos n?o-alvo. Os anf?bios t?m sofrido decl?nios populacionais devido ? degrada??o de habitats, doen?as e exposi??o a poluentes como agrot?xicos. Os girinos s?o particularmente afetados por res?duos que atingem o ambiente aqu?tico e h? diversos biomarcadores relacionados ao balan?o oxidativo nesses animais que podem ser quantificados. A esp?cie Rhinella icterica (Bufonidae) ? nativa de regi?es de mata Atl?ntica no sul e sudeste do Brasil e sua fase aqu?tica ocorre em ?reas pr?ximas a lavouras de arroz, nas quais se utilizam os herbicidas atrazina, glifosato e quinclorac. O presente estudo teve como objetivo verificar o efeito das formula??es Facet?, Primoleo? e Roundup? sobre a composi??o bioqu?mica e o balan?o oxidativo de girinos de Rhinella icterica. As concentra??es foram escolhidas com base naquelas encontradas em ambientes impactados pela agricultura. Foram realizados dois cultivos experimentais em laborat?rio com girinos coletados em ?reas n?o contaminadas e expostos a diferentes concentra??es de formula??o comercial dos herbicidas Primoleo? (princ?pio ativo atrazina), Facet? (princ?pio ativo quinclorac) e Roundup? (princ?pio ativo glifosato). Em um dos ensaios, foram utilizadas tr?s concentra??es de cada agrot?xico (10, 20 e 40 ?g/L de Primoleo? e Facet?; 100, 250 e 500 ?g/L de Roundup?) e quantificados os n?veis de atividade da super?xido dismutase (SOD) e da catalase (CAT); os n?veis dos marcadores de dano oxidativo, TBARS (subst?ncias reativas ao ?cido tiobarbit?rico) e prote?nas carboniladas; al?m de marcadores de condi??o corporal ou nutricional. N?o se observaram varia??es significativas nos marcadores de estresse oxidativo avaliados. A aus?ncia de mortalidade nestas concentra??es evidencia uma condi??o subletal. No outro ensaio experimental, os animais foram expostos a herbicidas isolados (20 ?g/L de atrazina- formula??o Primoleo?; 250 ?g/L de glifosato- Roundup? e 20 ?g/L de quinclorac- Facet?) ou as suas misturas. Foram quantificados os mesmos marcadores, mais a atividade da GST. Houve varia??o nos n?veis das enzimas antioxidantes e demais marcadores, destacando-se o aumento da SOD, da GST e dos n?veis de TBARS nos animais expostos a atrazina de forma isolada e, um aumento da CAT no grupo exposto ? mistura dos tr?s herbicidas. Ambos os ensaios sugerem um potencial mais t?xico para a atrazina. Os resultados indicam que mesmo concentra??es ecologicamente relevantes destes herbicidas, assim como suas misturas, podem causar altera??es bioqu?micas nos anf?bios, as quais podem ter rela??o com altera??es fisiol?gicas e teciduais que podem a mais longo prazo comprometer a sobreviv?ncia destes animais. Brazil is one of the world's largest consumers of pesticides, whose massive use affects ecosystems and non-target organisms. Amphibians have suffered population declines due to habitat degradation, disease, and exposure to pollutants such as pesticides. Tadpoles are particularly affected by residues that reach the aquatic environment and there are several biomarkers related to the oxidative balance in these animals that can be quantified. The species Rhinella icterica (Bufonidae) is native to regions of Atlantic forest in southern and southeastern Brazil and its aquatic phase occurs in areas close to rice fields, in which the herbicides atrazine, glyphosate and quinclorac are used. The present study aimed to verify the effect of the formulations Facet?, Primoleo? and Roundup? on the biochemical composition and oxidative balance of Rhinella icterica tadpoles. The concentrations were chosen based on those found in environments impacted by agriculture.Two laboratory cultivations were performed in the laboratory with tadpoles collected in non-contaminated areas and exposed to different concentrations of commercial formulation of the herbicides Primoleo? (active ingredient atrazine), Facet? (active principle quinclorac) and Roundup? (active principle glyphosate). In one of the tests, three concentrations of each pesticide (10, 20 and 40 ?g / L of Primoleo? and Facet?; and 100, 250 and 500 ?g / L of Roundup?) were used and quantified the levels of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activity; levels of oxidative damage markers, TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) and carbonylated proteins; in addition, body condition markers were determined. There were no significant variations in the oxidative stress markers assessed. The absence of mortality in these concentrations shows a sublethal condition. In the other experimental trial, the animals were exposed to isolated herbicides (20 ?g / L atrazine: 250 ?g / L glyphosate, and 20 ?g / L quinclorac) or their mixtures. The same markers were quantified, plus GST activity. There was variation in the levels of antioxidant enzymes and other markers, especially the increase in SOD, GST and TBARS levels in animals exposed to atrazine in isolation, and an increase in CAT in the group exposed to the mixture of the three herbicides. Both tests suggest a more toxic potential for atrazine. The results indicate that even ecologically relevant concentrations of these herbicides, as well as their mixtures, can cause biochemical changes in amphibians, which may be related to physiological and tissue changes that may in the longer term compromise the survival of these animals. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq

O crescente aumento do uso de agrot?xicos nos ecossistemas agr?colas coloca em risco as popula??es de polinizadores. Entre esses produtos, res?duos do inseticida-acaricida clorpirif?s (grupo qu?mico: organofosforado) s?o detectados nos recursos alimentares coletados pelas abelhas. Dessa forma, avalia??es da resposta toxicol?gica resultante da exposi??o a esse inseticida ? fundamental para elucidar a a??o desse produto sobre os polinizadores. Por esse motivo, o presente estudo avaliou os efeitos da exposi??o cr?nica a concentra??es ambientalmente relevantes de clorpirif?s (equivalente aos res?duos encontrados no p?len e mel) no (1) desenvolvimento larval de oper?rias criadas in vitro e em (2) oper?rias adultas da abelha sem ferr?o Scaptotrigona bipunctata. Para a realiza??o dos testes, concentra??es crescentes de clorpirif?s foram adicionadas ao alimento larval (0,46 ng i.a./?L dieta, 0,92 ng i.a./?L dieta e 1,8 ng i.a./?L dieta) fornecido aos imaturos e, uma dieta sem adi??o de inseticida foi utilizada como controle negativo. Os indiv?duos foram monitorados diariamente at? a emerg?ncia dos adultos, sendo avaliados a sobreviv?ncia, o tempo de desenvolvimento e caracter?sticas morfom?tricas dos adultos rec?m emergidos. Para a realiza??o dos testes na fase adulta, as abelhas foram alimentadas cronicamente com concentra??es subletais de clorpirif?s dilu?das em solu??o de sacarose (0,011 ng i.a./?L de dieta, 0,056 ng i.a./?L de dieta e 0,112 ng i.a./?L de dieta - valores que representam 0,1, 0,5 e 1% da CL50 para S. bipunctata) e uma dieta controle sem adi??o de inseticida. A primeira exposi??o ao inseticida foi conduzida sem interrup??o at? que se atingisse 100% de mortalidade dos indiv?duos expostos a fim de avaliar a taxa de sobreviv?ncia e o consumo de alimento. Para as demais an?lises as abelhas foram alimentadas por 27 dias (tempo m?dio de sobreviv?ncia) sendo ent?o avaliados o comportamento de caminhada, a atividade das enzimas acetilcolinesterase (AChE), super?xido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationas S-transferases (GST), al?m dos n?veis de ?cido tiobarbit?rico (TBARS). Tamb?m foram avaliadas poss?veis altera??es ultraestruturais no intestino m?dio e nos t?bulos de Malpighi das abelhas. Como resultado, observamos que a exposi??o das larvas ao clorpirif?s reduziu significativamente as taxas de sobreviv?ncia, mas n?o alterou o tempo de desenvolvimento dos imaturos. Al?m disso, a exposi??o ao inseticida reduziu o tamanho e a massa corporal dos adultos rec?m emergidos, e tamb?m causou redu??o da ?rea alar. Em rela??o ?s abelhas expostas durante a fase adulta, a ingest?o de clorpirif?s n?o afetou a taxa de sobreviv?ncia e o consumo de alimento. Ap?s 27 dias de exposi??o ao inseticida n?o observamos altera??es na atividade da AChE, mas o comportamento locomotor foi significativamente prejudicado. Al?m disso, a exposi??o prolongada ao clorpirif?s resultou na diminui??o dos n?veis de atividade das enzimas antioxidantes SOD e CAT, e da enzima de biotransforma??o GST. Os n?veis de TBARS tamb?m foram significativamente reduzidos. As c?lulas do intestino m?dio das abelhas expostas ao clorpirif?s n?o apresentaram altera??es ultraestruturais relevantes. No entanto, a ingest?o do inseticida causou altera??es no epit?lio dos t?bulos de Malpighi. Tendo em vista os resultados apresentados, consideramos que a exposi??o aos res?duos de clorpirif?s representam um risco tanto para os imaturos quanto para os adultos da abelha sem ferr?o S. bipunctata. As altera??es observadas na fisiologia e no comportamento das abelhas podem comprometer a homeostase das col?nias, contribuindo assim, para o decl?nio de suas popula??es. Este estudo contribui para uma melhor compreens?o dos efeitos da exposi??o cr?nica a concentra??es ambientalmente relevantes de clorpirif?s e os resultados aqui apresentados podem ter implica??es para outras esp?cies de abelhas. RISKS OF CHRONIC EXPOSURE TO CHLORPYRIFOS RESIDUES ON IMMATURE AND ADULT WORKERS OF STINGLESS BEES The growing increase in the use of pesticides in agricultural ecosystems puts the pollinator populations at risk. Among these products, residues of the insecticide-acaricide chlorpyrifos (organophosphorus) are detected in the food resources collected by bees. Thus, assessment of the toxicological response resulting from exposure to this insecticideacaricide is essential to elucidate the action of this product on pollinators. Therefore, the present study evaluated the effects of chronic exposure to environmentally relevant concentrations of chlorpyrifos (equivalent to the residues found in pollen and honey) on the (1) larval development of worker bees rearing in vitro and on (2) adult worker stingless bees Scaptotrigona bipunctata. In order to carry out the tests, increasing concentrations of chlorpyrifos were added to the larval food (0.46 ng a.i./?L diet, 0.92 ng a.i./?L diet and 1.8 ng a.i./?L diet) provided to the immature, and a diet with no added insecticide was used as a negative control.The individuals were monitored daily until adult emergence and the survival, development time and morphometric characteristics of the newly emerged adults were evaluated. Sublethal concentrations of chlorpyrifos diluted in sucrose solution (0.011 ng a.i./?L diet, 0.056 ng a.i./?L diet and 0.112 ng a.i./?L diet - values representing 0.1, 0.5 and 1% of the LC50 for S. bipunctata) were chronically used in the feeding of the bees so that the tests could be performed in the adult phase. The first exposure to the insecticide was conducted without interruption until 100% mortality was reached for the exposed individuals in order to assess the survival rate and food consumption. For the other analyzes, the bees were fed for 27 days (survival time), then the walking behavior, enzymes activity acetylcholinesterase (AChE), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione S-transferases (GST), in addition to thiobarbituric acid (TBARS) levels were evaluated. Possible ultrastructural changes in the midgut and in the Malpighian tubules of bees were also evaluated. As a result, it was observed that the larvae exposure to chlorpyrifos reduced survival rates significantly, but did not alter the development time of the immature. In addition, exposure to the insecticide reduced the size and body mass of newly emerged adults, and also caused a reduction in the alar area. Regarding bees exposed during adulthood, the intake of chlorpyrifos did not affect the survival rate and food consumption. After 27 days of exposure to the insecticide, changes in AChE activity were not observed, but the locomotor behavior was substantially impaired. Furthermore, extended exposure to chlorpyrifos resulted in decreased activity levels of the antioxidant enzymes SOD and CAT, and biotransformation enzyme GST. TBARS levels were also significantly reduced. The cells of the midgut of bees exposed to chlorpyrifos did not show relevant ultrastructural changes. However, ingestion of the insecticide caused changes in the epithelium of Malpighian tubules. In view of the results presented, we consider that exposure to chlorpyrifos residues represents a risk for both the immature and adults of the stingless bee S. bipunctata. The changes observed in the physiology and behavior of bees can compromise the homeostasis of the colonies, thus contributing to the decline of their populations. This study contributes to a better understanding of the effects of chronic exposure to environmentally relevant concentrations of chlorpyrifos and the results presented here may have implications for other species of bees. Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES

Os peixes de ?gua doce s?o considerados um dos grupos mais amea?ados do mundo, visto que os ecossistemas aqu?ticos atualmente est?o enfrentando constantes interfer?ncias de a??es antr?picas, principalmente, com a intensifica??o da agricultura que tem impactado e descaracterizado diversos habitats de muitas esp?cies. Frente a isto, para a conserva??o da diversidade biol?gica nesses ambientes aqu?ticos ? de extrema import?ncia obter informa??es sobre as esp?cies constituintes destes habitats. Desta forma, ferramentas fisiol?gicas podem ser utilizadas para caracterizar a diversidade biol?gica e suas implica??es ecol?gicas, e abranger tamb?m, as respostas dos organismos ?s altera??es ambientais e agentes estressores. Os peixes anuais s?o organismos que vivem em ?reas ?midas tempor?rias que secam sazonalmente. Devido a isto, apresentam um ciclo de vida curto e r?pido, mostrando um grande potencial para serem utilizados como modelos biol?gicos para diversas pesquisas, principalmente, aquelas ligadas ao estudo de envelhecimento. O objetivo do presente trabalho foi analisar marcadores fisiol?gicos relacionados ao balan?o redox do peixe anual Cynopoecilus fulgens, end?mico da regi?o sul do Brasil, com vari?veis ambientais e estimativas do per?odo reprodutivo. Foram coletados 443 indiv?duos compreendendo juvenis, adultos e senis, entre o m?s de junho e novembro de 2016, nos arredores do Parque Nacional da Lagoa do Peixe (PNLP), localizado na Plan?cie Costeira Externa do Rio Grande do Sul, em tr?s diferentes unidades amostrais (P1, P2 e P3). Estes animais foram eutanasiados em campo e em laborat?rio foram medidos (comprimento padr?o) e pesados (massa corporal). Ap?s, foram homogeneizados para a realiza??o dos ensaios da Super?xido Dismutase, Catalase, Glutationa Peroxidase e Glutationa S-transferase, e para determina??o dos n?veis de Lipoperoxida??o, atrav?s do TBARS, Prote?nas Carboniladas e Prote?nas Totais. Os resultados mostraram que machos e f?meas de C. fulgens empregam estrat?gias fisiol?gicas diferentes em seu balan?o redox durante o ciclo de vida, sendo influenciados pelo per?odo reprodutivo e vari?veis ambientais (bi?ticas e abi?ticas). Dentre as estrat?gias, as f?meas mostram investir bastante na reprodu??o, principalmente no per?odo de matura??o sexual e produ??o dos ovos, evidenciado pelos n?veis mais elevados de TBARS quando comparadas aos machos que parecem investir no crescimento som?tico e massa corporal. Al?m disso, as vari?veis que apresentaram maiores influ?ncias no balan?o oxidativo destes animais foram: temperatura, abund?ncia de predador, abund?ncia do peixe anual Austrolebias minuano e abund?ncia de C. fulgens. Tamb?m, a popula??o de cada ?rea ?mida tempor?ria apresenta respostas fisiol?gicas distintas frente ? adapta??o ao seu ciclo de vida, corroborando a influ?ncia de algum componente ambiental como modulador deste ciclo. Adicionalmente, foi observado que os animais das po?as P2 e P3 se comportam de maneira semelhante entre si apresentando um ciclo mais longo; sugerindo que o sistema antioxidante destes animais apresenta alta efici?ncia mantendo os n?veis de lipoperoxida??o e prote?nas carboniladas baixos. Enquanto os da P1 t?m seu ciclo de vida p?s-eclos?o mais curto possivelmente devido ao incremento do estresse oxidativo evidenciado pelo aumento da lipoperoxida??o. Estes resultados demonstram que a utiliza??o dos peixes anuais neotropicais na pesquisa ? altamente promissora, permitindo um estudo aprofundado sobre o envelhecimento e ensaio toxicol?gico. Al?m disso, enfatizam a import?ncia do desenvolvimento de estrat?gias de conserva??o ambiental para preservar as caracter?sticas das ?reas ?midas tempor?rias, estabelecendo estes animais como esp?cies sentinelas. Freshwater fish are considered one of the most threatened groups in the world, as aquatic ecosystems are currently facing constant interference from anthropic actions, mainly with the intensification of agriculture that has impacted and de-characterized diverse habitats of many species. To conserve biological diversity in these aquatic environments, it is extremely important to obtain information about the species that constitute these habitats. In this way, physiological tools can be used to characterized biological diversity and its ecological implications, and also include organisms responses to environmental changes and stressors. Annual fish are organisms that live in temporary wetlands that dry out seasonally. Due to this, the life cycle is considered short and fast presenting great potential as biological models for several researches, mainly those related to the study of aging. The aim of the present study was to analyze physiological markers related to the redox balance of the annual fish Cynopoecilus fulgens, endemic to southern Brazil, with environmental variables and estimates of the reproductive period. A total of 443 individuals were collected, including juveniles, adults and senile, between June to November 2016, around the Parque Nacional da Lagoa do Peixe, located in the Coastal Plain of Rio Grande do Sul, in three sampling units (P1, P2 and P3). These animals were euthanized in the field and in the laboratory were measured and weighed. After, they were homogenized for the Superoxide Dismutase, Catalase, Glutathione Peroxidase and Glutathione S-transferase assays, and for the determination of the levels of Lipoperoxidation, through TBARS, Carbonylated Proteins and Total Proteins. The results showed that males and females of C. fulgens use different physiological strategies of their redox balance during the life cycle, being influenced by the reproductive period and environmental variables (biotic and abiotic). Among the strategies, females show a great deal of investment in reproduction, especially in the period of sexual maturation and egg production, evidenced by the higher levels of TBARS when compared to males that seem to invest in somatic growth and body mass. In addition, the variables that had the greatest influence on the oxidative balance of these animals were: temperature, abundance of predator, abundance of annual fish Austrolebias minuano and abundance of C. fulgens. Also, the population of each temporary wetland presented different physiological responses to the adaptation to their life cycle, corroborating the influence of an environmental component as a modulator of this cycle. Additionally, it was observed that the animals of the pools P2 and P3 behave in a similar way among each other presented a longer cycle; suggesting that the antioxidant system of these animals presents high efficiency keeping the levels of lipoperoxidation and carbonylated proteins low. Fish of P1 have their shorter post-hatch life cycle possibly due to increased oxidative stress evidenced by increased lipoperoxidation. These results demonstrate that the use of Neotropical annual fish in the research is highly promising, allowing in-depth study on aging and toxicology testing. In addition, they emphasize the importance of developing environmental conservation strategies to preserve the characteristics of temporary wetlands, establishing these animals as sentinel species. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Anthropogenic activities such as agriculture, urbanization and mining may increase the contamination of the aquatic environment by metals. Zinc (Zn) is an essential mineral that is involved in many biological processes. However, this metal may have toxic effects on aquatic organisms. Therefore, the first objective of this work was to evaluate the bioaccumulation and the possible effects on biochemical parameters in silver catfish (Rhamdia quelen) exposed to 0.0; 0.1; 0.25 and 0.5 mg L-1 Zn for 96 h. As a second objective, was evaluated the behavioural and biochemical effects of guppy (Poecilia vivipara) exposed to Zn (500 μg L-1) in water with different salinity (25 ppt) or hardness (120 mg L-1 CaCO3). In the first experiment, the parameters analyzed in silver catfish were bioaccumulation, determination of thiobarbituric acid reactive substances measured through the malondialdehyde levels (MDA), protein carbonyl (PC), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione S-transferase (GST), non-protein thiols (NPSH), ascorbic acid (AA) in the brain, gill, liver and muscle. The levels of glycogen, protein, lactate, ammonia, and amino acids were measured in liver and muscle. Zn accumulation was observed in gill (0.5 mg L-1), intestine and liver (0.25 and 0.5 mg L-1). MDA levels increased in the brain and decreased in liver and muscle at all concentrations tested. There was a decrease in PC in brain and increase in liver. CAT activity in liver was reduced in all exposed groups and GST activity decreased in brain (0.5 mg L-1) and in liver (0.1, 0.25 and 0.5 mg L-1). NPSH levels increased in muscle (0.5 mg L-1) and in gill (0.25 and 0.5 mg L-1) and AA in brain (0.5 mg L-1) and gill in all concentrations tested. Exposure to Zn also altered metabolic parameters, causing decreased levels of lactate and ammonia in the muscle, and decreased hepatic glycogen. There was increased levels of ammonia, amino acids and protein in the liver, and increased glycogen and amino acids in muscle tissue. In the second experiment, guppies were divided into 6 groups: control, Zn (500 μg L-1), salinity (25 ppt), hardness (120 mg L-1 CaCO3), salinity (25 ppt) + Zn (500 μg L-1) and hardness (120 mg L-1 CaCO3) + Zn (500 μg L-1). There was a decrease in the distance traveled by fish in hard water and the number of entries into the top region in hardness and hardness + Zn. Exposure to Zn recorded an increase in the maximum speed of the fish. Biochemical analyzes were evaluated in the whole body of the guppy, where MDA increased, except in the association between salinity and Zn. PC was not altered in the salinity group, in the other groups, there was an increased. Zinc group increased the total peroxides, the reactive oxygen species, the antioxidant capacity against peroxyl radicals, SOD and NPSH. And decreased the activities of acetylcholinesterase and Na+/K+-ATPase. The integrated biomarker response index (IBR) was calculated for each parameter to aid in the interpretation of the results and indicated that the hard water containing Zn had the greatest effect on the biochemical parameters of the guppies. With these results, we can conclude that Zn, even in relevant environmental concentrations, altered the biochemical parameters analyzed. There was metal accumulation in some tissues of silver catfish and alterations in its biochemical and metabolic parameters. Zinc also altered the parameters analyzed in the guppy, where neither the salinity nor the hardness was able to protect the fish from the damages caused by the metal. Atividades antropogênicas, como agricultura, urbanização e mineração, podem aumentar a contaminação do ambiente aquático por metais. O zinco (Zn) é um mineral essencial que está envolvido em muitos processos biológicos. No entanto, este metal pode ter efeitos tóxicos para organismos aquáticos. Sendo assim, o primeiro objetivo deste trabalho foi avaliar a bioacumulação e os possíveis efeitos sobre parâmetros bioquímicos em jundiás (Rhamdia quelen) expostos a 0,0; 0,1; 0,25 e 0,5 mg L-1 de Zn por 96 h. Como segundo objetivo, avaliou-se os efeitos comportamentais e bioquímicos do guppy (Poecilia vivipara) expostos ao Zn (500 μg L-1) em águas com diferente salinidade (25 ppt) ou dureza (120 mg L-1 CaCO3). No primeiro experimento, os parâmetros analisados em jundiás foram bioacumulação e a dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico medidas através dos níveis de malondialdeído (MDA), proteína carbonil (PC), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa S-transferase (GST), tióis não-proteicos (NPSH), ácido ascórbico (AA) em cérebro, brânquias, fígado e músculo. Os níveis de glicogênio, proteína, lactato, amônia e aminoácidos foram medidos em fígado e músculo. A acumulação do Zn foi observada nas brânquias (0,5 mg L-1), intestino e fígado (0,25 e 0,5 mg L-1). Os níveis de MDA aumentaram no cérebro e reduziram no fígado e músculo em todas as concentrações testadas. Houve diminuição da PC em cérebro e aumento dos seus níveis em fígado. A atividade da CAT no fígado foi reduzida em todos os grupos expostos e a atividade da GST diminuiu em cérebro (0,5 mg L-1) e em fígado (0,1; 0,25 e 0,5 mg L-1). Os níveis de NPSH aumentaram no músculo (0,5 mg L-1) e nas brânquias (0,25 e 0,5 mg L-1) e de AA em cérebro (0,5 mg L-1) e brânquias em todas concentrações testadas. A exposição ao Zn também alterou os parâmetros metabólicos, causando diminuição dos níveis de lactato e amônia no músculo, e a diminuição do glicogênio hepático. Houve aumento dos níveis de amônia, aminoácidos e proteína no fígado, e aumento do glicogênio e aminoácidos no tecido muscular. No segundo experimento, os guppies foram divididos em 6 grupos: controle, Zn (500 μg L-1), salinidade (25 ppt), dureza (120 mg L-1 CaCO3), salinidade (25 ppt) + Zn (500 μg L-1) e dureza (120 mg L-1 CaCO3) + Zn (500 μg L-1). Houve uma diminuição da distância percorrida pelo peixe em água dura e do número de entradas no topo, na dureza e dureza + Zn. A exposição ao Zn, registrou um aumento na velocidade máxima do peixe. As análises bioquímicas foram avaliadas no corpo inteiro do guppy, onde o MDA aumentou, exceto na associação entre a salinidade e o Zn. A PC não foi alterada no grupo salinidade, nos demais grupos, aumentou. O grupo Zn aumentou a quantidade de peróxidos totais, as espécies reativas de oxigênio, a capacidade antioxidante contra radicais peroxil, SOD e NPSH. E diminuiu as atividades da acetilcolinesterase e da Na+/K+-ATPase. O índice integrado das respostas dos biomarcadores (IBR) foi calculada para cada parâmetro para auxiliar na interpretação dos resultados e indicou que a água dura contendo Zn teve o maior efeito nos parâmetros bioquímicos dos guppies. Com estes resultados, podemos concluir que o Zn, mesmo em concentrações ambientais relevantes, alterou os parâmetros bioquímicos analisados. Houve acumulação do metal em alguns tecidos de jundiá e alterações em seus parâmetros bioquímicos e metabólicos. O Zn também alterou os parâmetros analisados no guppy, onde nem a salinidade, nem a dureza, foram capazes de proteger o peixe dos danos causados pelo metal.

Aquatic ecosystems are affected by the use of agrochemicals in agricultural areas near rivers. To evaluate possible impacts, studies with animals that inhabit these ecosystems are needed. In situ exposure is one way of assessing possible damage to ecosystems. The aim of this study was to investigate the use of Rhamdia quelen as a bioindicator through its in situ exposure. Group of 10 fishes were transported and placed in cages at three sites (S1, S2 and S3) of the Vacacaí river in the city of São Gabriel, Rio Grande do Sul. After the exposure period of 96 hours, fish were euthanized and brain, gill, liver and muscle were removed for biochemical assays. Biomarkers of oxidative damage as thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and protein carbonylation (PC), biomarker of neurotoxicity as the acetylcholinesterase enzyme (AChE) and antioxidant parameters such as glutathione s-transferase (GST), superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), antioxidant capacity against peroxyl radicals (ACAP) and non-protein thiols (NPSH) were evaluated. The calculation of the Integrated Biomark Response Index (IBR) was used to aid in the interpretation of the results. There was a decrease in AChE in brain of exposed fishes in the three studied sites (S1, S2 and S3). In addition, it decreased levels of TBARS in the brain and increased PC in the brain, liver and gills in S2 and S3. SOD activity decreased at all site in the gills and CAT increased at S3. The increase in GST was mainly observed in the liver at all three sites. ACAP increased in S3. The IBR calculation showed a higher value in S2, followed by S3 and S1. Rhamdia quelen has been shown to be an excellent bioindicator for use in in situ experiments. The use of biomarkers with the help of the IBR proved to be very useful for the results of the study. Os ecossistemas aquáticos são afetados pelo uso de agroquímicos em áreas agrícolas próximas a rios. Para avaliar possíveis impactos, são necessários estudos com animais que habitam esses ecossistemas. A exposição in situ é uma das formas de avaliar possíveis danos em ecossistemas. O objetivo deste estudo foi investigar o uso da espécie Rhamdia quelen como bioindicador, através de sua exposição in situ. Grupo de 10 peixes foram transportados e colocados em gaiolas em três locais (S1, S2 e S3) do rio Vacacaí na cidade de São Gabriel, Rio Grande do Sul. Após o período de exposição de 96 horas, os peixes foram eutanizados e cérebro, brânquia, fígado e músculo foram removidos para ensaios bioquímicos. Foram analisados biomarcadores de danos oxidativos como substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e carbonilação de proteínas (PC), biomarcador de neurotoxicidade como a enzima acetilcolinesterase (AChE) e parâmetros antioxidantes como glutationa s-transferase (GST), superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), capacidade total contra peróxidos (ACAP) e tióis não protéicos (NPSH). O cálculo do Índice Integrado de Respostas de Biomarcadores (IBR) foi utilizado para auxiliar na interpretação dos resultados. Houve uma diminuição da AChE no cérebro dos peixes expostos nos três locais estudados (S1, S2 e S3). Além disso, diminuiu os níveis de TBARS no cérebro e aumentou a PC no cérebro, fígado e brânquias em S2 e S3. A atividade da SOD diminuiu em todos os pontos nas brânquias e CAT aumentou em S3. O aumento de GST foi observado principalmente no fígado nos três pontos. ACAP aumentou em S3. O cálculo do IBR mostrou um valor maior em S2, seguido por S3 e S1. Rhamdia quelen mostrou ser um excelente bioindicador para ser usado em experimentos in situ. O uso dos biomarcadores com o auxílio do IBR, mostraram-se bastante úteis para o resultado do trabalho.

O incremento no uso de pesticidas vem ocasionando a degrada??o de diferentes ecossistemas, sobretudo aqu?ticos. Apesar de possu?rem aplica??es espec?ficas a determinados organismos, sabe-se que os agrot?xicos s?o capazes de ocasionar altera??es metab?licas e funcionais em diversos organismos n?o alvo. Os anf?bios constituem a Classe de vertebrados mais amea?ada globalmente, sendo que os decl?nios populacionais observados no mundo todo s?o decorrentes da a??o sin?rgica de diversos fatores, incluindo a fragmenta??o e degrada??o de habitat, principalmente para fins agr?colas, a exposi??o a contaminantes derivados destas atividades, dentre outros. Neste contexto, Melanophryniscus admirabilis ? uma esp?cie de sapo bufon?deo micro end?mica, descrita atualmente para apenas uma localidade no estado do Rio Grande do Sul (Brasil), e avaliada como Criticamente em Perigo de extin??o, em n?vel regional, nacional e global. O alto grau de amea?a desta esp?cie deve-se a um conjunto de fatores, como a fragmenta??o e perda de qualidade do habitat, principalmente devido ? convers?o de ?reas para agricultura e ? larga utiliza??o de agrot?xicos no entorno da ?rea de ocorr?ncia da esp?cie. Com isso, o objetivo do presente estudo foi analisar poss?veis altera??es em par?metros metab?licos e do balan?o oxidativo em homogeneizado total de girinos de M. admirabilis expostos a duas concentra??es de formula??o comercial contendo Sulfentrazone (Boral? 500 SC) e outras duas contendo Glifosato (Roundup? Original). Foram analisados os n?veis totais de glicog?nio, prote?nas e ?cido ?rico; a poss?vel ocorr?ncia de lipoperoxida??o (LPO) atrav?s dos n?veis de TBARS; e o n?vel de atividade das enzimas Super?xido Dismutase (SOD), Catalase (CAT) e Glutationa S-Transferase (GST). Os resultados obtidos evidenciaram altera??es significativas nos par?metros mensurados, nos grupos expostos ?s diferentes concentra??es dos herbicidas Sulfentrazone e Glifosato. A partir disto, sugere-se que a mobiliza??o conjunta das enzimas e metab?litos analisados possivelmente foi capaz de conter o dano oxidativo nestes animais. Entretanto, cabe ressaltar que as altera??es observadas podem vir a afetar estes animais ao longo do ciclo de vida, especialmente durante e ap?s o per?odo metam?rfico. A aparente inibi??o enzim?tica observada nos grupos expostos aos herbicidas, al?m de indicar grande suscetibilidade dos girinos frente ? exposi??o a estes agentes, pode refletir um preju?zo da capacidade destes animais em lidar com situa??es ambientais adversas e sin?rgicas, como a fragmenta??o de habitat, radia??o UV e exposi??o a outros poluentes. A aus?ncia de mortalidade nos girinos de M. admirabilis sugere resist?ncia ?s concentra??es dos herbicidas testados; contudo, caberia a compara??o da capacidade antioxidante desta esp?cie com outras esp?cies taxonomicamente pr?ximas. Assim, este estudo demonstrou que a exposi??o de girinos de M. admirabilis a concentra??es subletais dos herbicidas Sulfentrazone e Glifosato conduziu a uma ruptura da homeostase que pode afetar a sobreviv?ncia da esp?cie em etapas futuras de seu ciclo de vida. Seriam relevantes estudos futuros visando ? compreens?o dos efeitos de outras concentra??es e herbicidas, bem como a an?lise de outros metab?litos e componentes do sistema antioxidante desta esp?cie. The increased use of pesticides has caused the degradation of a variety of ecosystems, especially aquatic environments. Despite specific targets, agrochemicals are able to cause metabolic and functional alterations including in non-target organisms. Amphibians constitute the most globally threatened Class of vertebrates, and the population declines observed around the world are due to a synergy of different factors, including habitat degradation and fragmentation, mostly to agricultural purposes, and the exposure to contaminants derived of these activities, among others. Within this context, Melanophryniscus admirabilis is a micro endemic bufonid toad species, with occurrence registered to only one area in Rio Grande do Sul state (Brazil). This species has a critically endangered (CR) status, at regional, national and global levels. The great danger of extinction is due to several factors, including habitat fragmentation (especially for agricultural purposes) and the decreased habitat quality, mainly because of extensive use of agrochemicals in areas near of the natural habitat of this species. In view of the foregoing, the objective of the present study was to analyze possible alterations in metabolic and oxidative parameters in total homogenate of M. admirabilis tadpoles exposed to two different concentrations of commercial formulation containing Sulfentrazone (Boral? 500 SC) and two concentrations containing Glyphosate (Roundup? Original). The total levels of glycogen, proteins and uric acid were analyzed; as well as the possible occurrence of lipid peroxidation (LPO), expressed by TBARS levels; and the enzymatic activity of Superoxide Dismutase (SOD), Catalase (CAT) and Glutathione S-Transferase (GST). The results showed significant alterations in metabolic and oxidative parameters, in groups exposed to Sulfentrazone and Glyphosate herbicides. Analyzing these results, we hypothesize that the associated mobilization of enzymes and metabolic parameters presumably was capable of counter the oxidative lipid damage in these animals. Despite of that, the observed alterations may affect these animals during its life cycle, especially during and after metamorphic period. The apparent enzymatic inhibition observed in groups exposed to the herbicides, in addition to indicate the great susceptibility of tadpoles to these agents, reflects an impairment of the ability of these animals to cope with adverse and synergistic environmental situations, such as habitat fragmentation, UV radiation and exposure to other pollutants. The absence of mortality suggests resistance of M. admirabilis tadpoles to the tested concentrations of herbicides; nevertheless, the comparison of the antioxidant capacity of this species against taxonomically related species would be relevant. Therefore, the present study has demonstrated that the exposure of M. admirabilis tadpoles to sub lethal concentrations of Sulfentrazone and Glyphosate herbicides has affected the homeostasis, thus affecting the survival, of these animals in later life cycle stages. However, further studies would be necessary, including other concentrations and herbicides, as well as the analysis of further metabolites and components of the antioxidant system of this species. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq

Dentre os qu?micos agr?colas, destacamos triazinas, amino?cidos fosfonados, benzenaminas, organofosforados, fenilpiraz?is e aril triazolinonas por seu uso excessivo ? um dos fatores que afetam o desenvolvimento, reprodu??o e sobreviv?ncia de anf?bios. Dentre os agroqu?micos mais utilizados mundialmente (inclusive Brasil) est?o os herbicidas. Seu amplo uso ? um dos fatores que afetam o desenvolvimento, reprodu??o e sobreviv?ncia dos anf?bios. Contudo, seus efeitos t?xicos em animais n?o foram ainda suficientemente estudados. Dessa forma, neste trabalho objetivamos estudar o efeito isolado e em mistura dos herbicidas Boral ? 500 SC e Glifosato ? sobre uma s?rie de par?metros bioqu?mico-funcionais (n?veis de glicose; ?cido ?rico e corticosterona) no plasma, o balan?o oxidativo no f?gado e no m?sculo e sobre par?metros de condi??o nutricional em girinos de r?-touro ( Rana catesbeiana Shaw, 1802 ). Para tanto, utilizamos oitenta girinos em est?gio de pr?-metamorfose (aus?ncia de membros aparentes) e adquiridos em ran?rio. Estes foram pesados, medidos e distribu?dos em aqu?rios sob condi??es controladas de temperatura (23 ? 2?C), fotoper?odo (12h luz:12h escuro), aera??o constante, alimentados uma vez ao dia com ra??o comercial durante sete dias (grupo controle 7 - C7). Ap?s esse per?odo, parte dos animais continuou nessas condi??es (controle 14- C 14 ) e, o restante dividido em tr?s grupos sendo expostos a Boral ? 500 SC (sulfentrazone: 130?g/L), Glifosato ? (glifosato: 234?g/L) e uma mistura de Boral ? mais Glifosato ? (130?g/L mais 234?g/L, respectivamente) durante mais sete dias. Depois do per?odo de aclimata??o (7 dias) girinos do grupo controle (C 7 ) tiveram amostras de sangue coletadas por pun??o card?aca, com seringa heparinizada e ent?o eutanasiados. Estes animais foram pesados, medidos e foi removido o f?gado, o intestino (somente para determinar os par?metros de condi??o nutricional), e parte do m?sculo caudal. Os tecidos foram imediatamente congelados em nitrog?nio l?quido para determina??o da atividade das enzimas antioxidantes Super?xido Dismutase (SOD), Catalase (CAT), Glutationa S-transferase (GST), e n?veis de TBARS, um indicador de Lipoperoxida??o (LPO). Os mesmos procedimentos foram utilizados depois do t?rmino do per?odo de 14 dias para o grupo controle C 14 e aos grupos expostos aos herbicidas (B; G; e BG). N?s comparamos estatisticamente os grupos C 7 e C 14 por Teste T Student para amostras independentes. Cabe ressaltar que nos tr?s primeiros dias de aclimata??o observamos uma mortalidade de 25% dos animais. Ao compararmos os resultados obtidos para a maior parte dos par?metros analisados, com exce??o da glicose plasm?tica e da atividade das enzimas (SOD, CAT e GST) no f?gado dos animais do grupo controle aclimata??o (C 7 ) e do controle tempo de cultivo total (C 14 ), n?o existiu diferen?a. Tal diferen?a nestes par?metros pode indicar que durante o per?odo de aclimata??o os girinos apresentaram um grau de estresse, possivelmente em virtude da adapta??o as condi??es de cultivo o que justifica a taxa de mortalidade observada. Ressaltamos que para elabora??o do artigo cient?fico foram usados como controle os animais do grupo C 14 , pois estes animais tem o mesmo tempo de vida que os animais expostos; o que aliado ao perfil de resposta, descrito acima, refor?a tal escolha. Ao compararmos o grupo C 14 aos grupos expostos (B; G e BG) pelo teste de Kolmogorov-Smirnov detectamos uma distribui??o n?o param?trica para todos os par?metros analisados sendo ent?o, utilizado o Teste Kruskal-Wallis com complementar de Student-Newman-Keuls para detectar as diferen?as entre os grupos, para um p

This study was conducted at the laboratory of Biology and Adaptive Aquatic Toxicology, as well as at the Pisciculture Laboratory, both from the Federal University of Santa Maria (UFSM). The overall objective was to evaluate the antioxidant effects of vitamin C on biochemical and hematological parameters of jundiá Rhamdia quelen. The study was divided in two experiments (phase), and the results of the first experiment served as the basis for the second period. The first step consisted in preparing food supplemented with vitamin C in 3 different concentrations: (1) 0 (2) and 500 (3) 1000 mg / kg. During supplementation were collected 10 fish per diet on days 0, 7, 14, 21 and 28, for the purpose of performing a concentration curve to ascertain the minimum amount of supplementation it to obtain the protective effect of vitamin C. In each collection, blood, liver and gill samples were collected for subsequent biochemical and hematological analysis. Our results showed that the activity of catalase (CAT) in the liver, increased, only in group 1, with no significant changes in the other groups. The levels of lipid peroxidation in liver and gills were reduced in groups 2 and 3 compared to group 1. The activity of glutathione peroxidase (GPx) in liver increased both in group 2 and in group 3 compared to group 1. The protein carbonyl content in gills was higher in group 1 when compared to others groups. Regarding the activity of glutathione Stransferase enzymes (GST) and superoxide dismutase (SOD) and the level of non-protein thiols (NPSH), there was no significant difference between groups. The total erythrocyte count (RBC), hemoglobin (Hb) and hematocrit (HCT) increased in all groups. There were no significant differences in relation to the mean cell volume (MCV) and mean cell hemoglobin (MCH) values. From the results obtained it was observed that the amount of 500 or 1000 mg/kg vitamin C were sufficient to improve the antioxidant ability to Rhamdia quelen and it was established that 28 days of feeding would be a minimum to obtain desired results. Through these assumptions began the second phase of the study, where animals were fed for 30 days with feed containing 1000 mg/kg of vitamin C. The animals were divided into the following groups: (1) control Vitamin C 0 mg/kg (2) control vitamin C 1000 mg/kg, (3) exposure to atrazine vitamin C 0 mg/kg, (4) exposure to atrazine vitamin C 1000 mg/kg. After the feeding period the animals were subjected to exposure atrazine at a concentration of 10μg/L, for a period of 96 hours. The purpose of this step was to determine whether this amount of vitamin C would be sufficient for fish protection against stress caused by exposure to the herbicide. At this stage we choose to perform analysis only in the liver, since the gill showed few significant changes in the first phase of the experiment. The results of this phase showed that in all groups there was no significant difference in lipid peroxidation. However, there was a decrease in protein carbonyl content in group 4 when compared to the other groups. NPSH levels increased only in the groups supplemented with 1000 mg/kg vitamin C (groups 2 and 4). There was no significant difference in the GST activity among the groups. The GPx activity increased significantly in group 4 as compared to the other groups. The CAT activity decreased both in groups 3 and 4. Thus, we conclude that vitamin C improved liver protection when the animals were exposed to atrazine. Therefore, a diet supplemented with adequate amounts of vitamin C, can provide both good nutrition for the fish as well as a protection against stress factors. O presente estudo foi realizado no laboratório de Biologia Adaptativa e Toxicologia Aquática, bem como no laboratório de Piscicultura, ambos pertencentes à Universidade Federal de Santa Maria (UFSM). O objetivo geral foi avaliar os efeitos antioxidantes da vitamina C sobre parâmetros bioquímicos e hematológicos de jundiás (Rhamdia quelen). O estudo foi dividido em dois experimentos (fases), sendo os resultados do primeiro experimento base para o segundo período experimental. A primeira fase constituiu-se na preparação da ração suplementada com vitamina C, em 3 diferentes concentrações: (1) 0, (2) 500 e (3) 1000 mg/kg. Durante a suplementação foram coletados 10 peixes por dieta, nos dias 0, 7, 14, 21 e 28, com o intuito de realizar uma curva de concentração a fim de conhecer a quantidade mínima de suplementação para que se obtenha os efeitos protetores da vitamina C. Em cada coleta foram amostrados: sangue, fígado e brânquias, para posteriores análises bioquímicas e hematológicas. Nossos resultados mostraram que a atividade da catalase (CAT), em fígado, aumentou apenas no grupo 1, não havendo alterações significativas nos outros grupos. Os níveis de peroxidação lipídica em fígado e brânquias foram reduzidos nos grupos 2 e 3, quando comparado ao grupo 1. A atividade da glutationa-peroxidase (GPx) no fígado aumentou tanto no grupo 2 quanto no grupo 3, quando comparado ao grupo 1. O nível de proteína carbonil, em brânquias, foi elevado apenas no grupo 1, quando comparado com os outros grupos. Em relação as atividade das enzimas glutationa-S-transferase (GST) e superóxido dismutase (SOD), bem como ao nível dos tióis- não proteicos (NPSH), não houve diferença significativa entre os grupos. A contagem total de eritrócitos (RBC), hemoglobina (Hb) e hematócrito (HCT) aumentou em todos os grupos. Não houve diferenças significativas em relação aos valores do volume celular médio (MCV) e da hemoglobina celular média (MCH). A partir dos resultados obtidos observou-se que as quantidades de 500 ou 1000 mg/kg de vitamina C foram suficientes para a melhoria da capacidade antioxidante de Rhamdia quelen, bem como foi estabelecido que 28 dias de alimentação seria um período mínimo para se obter os resultados desejados. Por meio destes pressupostos iniciamos a segunda fase do estudo, onde os animais foram alimentados por 30 dias com ração contendo 1000 mg/kg de vitamina C. Os animais foram divididos nos seguintes grupos: (1) controle - vitamina C 0 mg/kg, (2) controle - vitamina C 1000 mg/kg, (3) exposição à atrazina - vitamina C 0 mg/kg e (4) exposição à atrazina - vitamina C 1000 mg/kg. Após o período de alimentação estes animais foram submetidos à exposição de Atrazina, na concentração de 10μg/L, por um período de 96 horas. O objetivo desta etapa foi verificar se essa quantidade de vitamina C seria suficiente para a proteção dos peixes contra o estresse causado pela exposição ao herbicida. Nesta etapa escolhemos realizar as análises apenas em fígado, uma vez que a brânquia mostrou poucas alterações significativas na primeira fase do experimento. Os resultados desta fase mostraram que em todos os grupos não houve diferenças significativas na peroxidação lipídica. Entretanto, houve uma diminuição do conteúdo da proteína carbonil no grupo 4, quando comparado com os outros grupos. Os níveis de NPSH aumentou apenas nos grupos suplementados com 1000 mg/kg de vitamina C (grupos 2 e 4). Não houve diferença significativa da atividade da enzima GST, em nenhum grupo. A atividade da GPx aumentou significativamente no grupo 4 em comparação com os outros grupos. A atividade da CAT diminuiu, tanto no grupo 3 quanto no grupo 4. Sendo assim, concluímos que a vitamina C mostrou ser capaz de melhorar a proteção do fígado quando os animais foram expostos a Atrazina. Logo, uma dieta suplementada com quantidades adequadas de vitamina C, pode proporcionar tanto uma boa nutrição para os peixes, bem como uma proteção contra fatores de estresse.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior The water pollution, derived from several human activities, results in harmful effects to the ecosystems involved. In order to verify the potential toxicity of xenobiotics, it is usual to use carps (Cyprinus carpio) as exposure model. Among the pollutants that could cause damage to aquatic biota, it is believed that selective herbicides, such as atrazine (ATZ), have low toxic effect on wildlife. However, there are reports of direct effects on development, growth, reproduction and behavior of fish exposed to ATZ. Considering that selenium is an essential trace element for the adequate cell function and is present in important antioxidant enzymes, is very important its appropriate food supply for fish. Therefore, supplementation of diets with selenium compounds increases the antioxidant profile of several model organisms, protecting them from adverse effects of environmental pollutants. Considering the harmful effects from exposure to ATZ, this study aimed to investigate the beneficial effects of diet supplemented with diphenyl diselenide [(PhSe)2], an organic compound of selenium, in carps exposed to ATZ. Thus, carp were fed for 60 days with diet control and diet supplemented with 3 mg/kg of (PhSe)2. Subsequently, they were exposed to ATZ (concentrations of 0, 2, and 10 μg/L) for 96h. At the end of the experiment, the carps were euthanized and tissues (gills, liver and muscle) were dissected and frozen for further biochemical assays. ATZ accumulated in muscle of carp directly related to the concentration of exposure. It was observed that both ATZ concentrations generated oxidative damage, represented by lipid peroxidation, measured as thiobarbituric reactive species (TBARS) levels. The protein oxidation, measured as the protein carbonyl content, showed an increase compared to the control results. Dietary supplementation with (PhSe)2 prevented oxidative damage, maintaining the levels of TBARS and protein carbonyl content similar to control . Exposure to ATZ inhibited the activity of the enzymes glutathione S-transferase (GST) and glutathione peroxidase (GPx), however this inhibition was relatively prevented in carp fed with (PhSe)2. Thus, acute exposure to ATZ caused biochemical changes in carp, and some of these alterations were prevented by dietary supplementation with (PhSe)2. A poluição aquática, oriunda de diversas atividades humanas, acarreta em efeitos nocivos aos ecossistemas envolvidos. Com o intuito de verificar o potencial tóxico de xenobióticos, é usual a utilização de carpas (Cyprinus carpio) como modelo de exposição. Dentre os poluentes passíveis de causar danos à biota aquática, acredita-se que os herbicidas seletivos, como a atrazina (ATZ), possuam baixo efeito tóxico à fauna. No entanto, existem relatos de efeitos diretos em desenvolvimento, crescimento, reprodução e comportamento de peixes expostos a ATZ. Considerando-se que o selênio é um elemento traço essencial para o adequado funcionamento celular e que está presente em importantes enzimas antioxidantes, é de suma importância seu fornecimento alimentar adequado aos peixes. Logo, a suplementação de dietas com compostos de selênio tende a melhorar o perfil antioxidante de diversos organismos modelo, protegendo-os de efeitos adversos de poluentes ambientais. Considerando-se os efeitos nocivos causados por exposição a ATZ, esta pesquisa objetivou investigar efeitos benéficos de dieta suplementada com disseleneto de difenila [(PhSe)2], um composto orgânico de selênio, em carpas expostas a ATZ. As carpas foram alimentadas durante 60 dias com dieta controle e dieta suplementada com 3mg/kg de (PhSe)2. Posteriormente, foram expostas a ATZ (concentrações de 0, 2 e 10 μg/L) durante 96h. Ao final do experimento, as carpas foram submetidas a eutanásia e os tecidos (brânquias, fígado e músculo) foram dissecados e congelados para posteriores ensaios bioquímicos. Constatou-se acúmulo de ATZ em músculo das carpas, sendo dependente da concentração de exposição. Verificou-se que ambas concentrações de ATZ geraram dano oxidativo, representado pela peroxidação lipídica, medida através dos níveis de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS). A oxidação de proteínas, aferida através do conteúdo de proteína carbonilada, demonstrou aumento em relação aos resultados controle. A suplementação da dieta com (PhSe)2 preveniu o dano oxidativo, mantendo os níveis de TBARS e de proteína carbonilada próximos aos valores do controle. Identificou-se inibição na atividade das enzimas glutationa S-transferase (GST) e glutationa peroxidase (GPx) pela exposição a ATZ, no entanto esta inibição foi relativamente prevenida em carpas alimentadas com (PhSe)2. Portanto, exposição aguda a ATZ causou alterações bioquímicas em carpas, e algumas destas alterações foram prevenidas pela suplementação da dieta com (PhSe)2.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Interspecific aggression is a common ecological phenomenon, but is still very poorly understood. It is related to the obtention of resources, geographic distribution patterns and species replacement, in the case of biological invasions. A better understanding of this issue may contribute to different areas, such as ecology, evolution, biogeography and conservation biology. Decapod crustaceans are a good model group to study interspecific aggression: they respond well to laboratory conditions, and aggression is an important aspect of the ecology of many species. The goal of this thesis is to use decapods as models to investigate interspecific aggression in three different contexts: biological invasions, competitor naïveté and experimental designs. In the first chapter, we investigate the interaction of the native crayfish Parastacus brasiliensis with the invasive Procambarus clarkii, to better understand the consequences of a possible interaction of these species in nature, considering that the invasive species has not yet encountered the native. In experiments with size-matched animals, the invader won more interactions, was more aggressive, reached the resource first and kept possession of the resource for longer than the native species. Interspecific fights escalated faster than intraspecific fights. These results mean that P. clarkii is a serious threat to native species, especially considering that this invader reaches larger sizes and is more fecund than native species of similar niches. In the second chapter, we investigated the interspecific aggression between P. clarkii and three other invasive crayfish species: Orconectes limosus, Pacifastacus leniusculus and Astacus leptodactylus. These interactions were compared with P. clarkii intraspecific fights. All fights were repeated along three consecutive days. In intraspecific fights, the duration of the first bout, mean duration of bouts, total fighting time, number of bouts and highest aggressive level differed between days: they were higher in the first day in comparison to the second and third days. In contrast, in interspecific fights only the highest aggressive level differed, between the first and second days of the interactions with O. limosus. We also found differences between the experimental groups in the first day, regarding the latency and time to the highest aggression level, indicating that interactions with P. leniusculus tend to escalate faster than the others. In the species combinations we tested, there seems to be no dominance hyerarchies between species without previous co-existence, since aggressive levels did not decrease over time, suggesting that the inability to form stable dominance might be an important factor in biological invasions. In the third chapter we investigated aggressive interactions between the crayfish P. brasiliensis and a native competitor, the anomuran Aegla longirostri, aiming to test which criteria is the most parcimonious to outline laboratorial experiments between competitors with different morphologies. We observed fights of interspecific pairs with random-sized animals, for which we determined the size difference, weight difference and weapon strength difference. We used a series of models to test if these variables were able to predict the winning species, number of aggressive bouts, duration of the first bout, mean duration of bouts, total fighting time, latency period and time until the highest aggression. The strength difference was able to predict the winning species, with the probability of A. longirostri being the winner increasing as the difference in weapon strength decreased, meaning that this aeglid has an advantage when both animals are matched for strength. This also indicates that, between competitors with different body shapes, weapon strength may be the best predictor of success in aggressive interactions. The size difference was related to the time until the maximum aggression, and fights escalated faster as the size difference between contestants decreased. This could be due to the fact that large animals perceive themselves as potential winners of fights, even though such hypothesis should to be tested in the future. Overall, our results indicate that interspecific aggression is an important phenomenon to all investigated species, but this issue clearly requires an overall framework that unifies the scarce literature around this subject, to provide clear directions for future research on this topic. A agressão interespecífica é um fenômeno biológico de ocorrência muito comum, mas que ainda é muito pouco compreendida, estando relacionada com a obtenção de recursos, padrões de distribuição geográfica e substituição de espécies, no caso de invasões biológicas. Sua melhor compreensão pode contribuir para o aumento do conhecimento em diferentes áreas, tais como ecologia, evolução, biogeografia e biologia da conservação. Um bom grupo modelo para se estudar a agressão interespecífica são os crustáceos decápodos, pois estes respondem bem à condições laboratoriais, e a agressão é um aspecto importante da ecologia de muitas espécies. O objetivo desta tese é utilizar decápodos como modelos para investigar a agressão interespecífica em três contextos diferentes: invasões biológicas, ingenuidade de competidor e desenho experimental. No primeiro capítulo, investigamos a relação do lagostim nativo Parastacus brasiliensis com o invasor Procambarus clarkii, para compreender as possíveis consequências da interação entre esses lagostins, visto que a espécie invasora ainda não entrou em contato com o nativo. Experimentos relizados com animais de tamanho semelhante demonstraram que a espécie invasora vence mais interações, é mais agressiva, alcança o recurso mais rápido e mantém a posse do recurso disputado por mais tempo do que a espécie nativa. Confrontos interespecíficos também escalonaram mais rapidamente do que confrontos intraespecíficos. Esses resultados significam que P. clarkii representa uma ameaça séria para espécies nativas, especialmente considerando que este invasor atinge maiores tamanhos e é mais fecundo do que as espécies nativas de nicho semelhante. No segundo capítulo, investigamos a agressão interespecífica entre P. clarkii e outras três espécies de lagostins invasores: Orconectes limosus, Pacifastacus leniusculus e Astacus leptodactylus. Essas interações foram comparadas com interações intraespecíficas de P. clarkii. Todas as interações foram repetidas ao longo de três dias consecutivos. Os resultados demonstraram que a duração do primeiro embate, duração média dos embates, tempo total em confronto, número de embates e maior nível agressivo diferem entre os dias apenas para as interações intraespecíficas, sendo maiores no primeiro dia, em relação ao segundo e terceiro dias. Em contraste, nos grupos interespecíficos apenas o maior nível agressivo diferiu significativamente, entre o primeiro e o segundo dia dos confrontos com O. limosus. Também encontramos diferenças para a latência e tempo até o maior nível agressivo, no primeiro dia de interação, indicando que confrontos envolvendo P. leniusculus tendem a escalonar mais rápido do que os envolvendo outras combinações de espécies. Nas combinações de espécies testadas, não parece haver formação de hierarquias de dominância entre espécies sem histórico de co-existência prévia, já que os níveis agressivos não diminuíram ao longo do tempo, indicando que a não-formação de ordens estáveis de dominância pode ser um fator impotante em invasões biológicas. No terceiro e último capítulo, investigamos interações agressivas entre o lagostim P. brasiliensis e um competidor nativo, o anomuro Aegla longirostri, com o objetivo de testar qual o critério mais parcimonioso para se delinear experimentos entre competidores com morfologias marcadamente distintas. Foram realizados confrontos entre pares interespecíficos com indivíduos de tamanho aleatório, para os quais determinamos a diferença de tamanho, diferença de peso e diferença na força do armamento. Realizamos uma série de modelos para testar se essas variáveis eram capazes de prever a espécie vencedora, o número de embates agressivos, a duração do primeiro embate, a duração média dos embates, o tempo total em confronto, o período de latência e o tempo até o maior nível agressivo. A diferença de força foi capaz de prever a espécie vencedora, sendo que a probabilidade de A. longirostri vencer um confronto é maior à medida que a diferença de força entre os animais diminui, indicando que este eglídeo está em vantagem quando os animais são equivalentes em força. Isso também indica que entre competidores de formas distintas, a força do armamento talvez seja o melhor preditor de sucesso em interações agressivas. A diferença de tamanho estava relacionada com o tempo até o escalonamento máximo, e confrontos escalonaram mais rápido a medida que a diferença de tamanho aumentava, o que pode se dever ao fato de animais maiores se perceberem como potenciais ganhadores de confrontos, embora essa hipótese necessite ser testada no futuro. No geral, os resultados indicam que a agressão interespecífica é um fenômeno marcente nos casos investigados nesta tese, e que necessita claramente de um framework que unifique a esparsa literatura acerca do tema e forneça claras direções futuras para pesquisadores interessados no tema.

Desde os princ?pios do manejo com agricultura pelo homem, a tecnologia tem aumentado de modo exponencial, permitindo a r?pida evolu??o deste setor. Por?m, muitas melhorias est?o atreladas a utiliza??o de compostos quimicamente sintetizados, sendo o meio ambiente e o pr?prio ser humano expostos a estes poluentes, muitas vezes nocivos. Mesmo assim, a quantidade desses herbicidas ? crescente. Herbicidas a base de quinclorac, como o Facet? atuam como inibidores do crescimento, sendo imediatamente absorvidos por sementes germinadas, ra?zes e folhas e ent?o translocados para a planta. Este agente ? comumente aplicado em lavouras de arroz e, no sul do Brasil, o quinclorac ? o mais frequentemente detectado em estudos com res?duos de agroqu?micos utilizados nestas lavouras, sendo considerado um grande contaminante de ?guas. Diversos estudos com animais tem demostrado o efeito biol?gico negativo de xenobiontes, como altera??es no comportamento, desenvolvimento e produ??o de corticoides, podendo acarretar malforma??es, problemas de diferencia??o celular e reprodu??o. Tendo em vista a alta sensibilidade de girinos a estressores ambientais, escolhemos como modelo a esp?cie Lithobates catesbeianus, que possui, dentre a fam?lia ran?dea, uma grande plasticidade e resist?ncia, sendo uma esp?cie introduzida no Brasil. Para a realiza??o deste estudo foram adquiridos 79 girinos com 4 meses de vida, no est?gio 25 (pr?-metam?rfico) da tabela de Gosner. Os animais foram divididos em aqu?rios com 60L de ?gua, com aera??o constante em fotoper?odo e temperatura naturais, pH de 7,4, alimentados ad libitum com ra??o. Uma vez que houve manipula??o e eutan?sia dos animais, a pesquisa foi submetida ? Comiss?o de ?tica no Uso de animais (CEUA) da PUCRS.O herbicida foi adicionado no 8? dia nas concentra??es X1(0,05?g/L), X2(0,1?g/L), X3(0,2?g/L) e X4(0,4?g/L). O objetivo da pesquisa foi analisar as poss?veis altera??es da atividade das enzimas antioxidantes e n?veis de lipoperoxida??o (LPO) hep?tica; assim como, dos n?veis de corticosterona (CORT), glicose e ?cido ?rico (AU) no plasma frente ? exposi??o do herbicida. Uma vez que n?o houve diferen?a entre os grupos controle 7 dias (C7) e controle 14 dias (C14), com exce??o da medida de AU, assim os grupos foram comparados com o C14, onde os animais apresentam o mesmo tempo de desenvolvimento dos expostos. Os resultados mostraram diferen?as significativas na LPO, principalmente nos animais expostos a concentra??o 0,1?g/L (X1) do herbicida; induzindo tamb?m, a aumento da atividade da GST, da SOD e da CAT; ap?s seguiu-se uma diminui??o desta atividade onde verificamos, no caso da SOD, CAT e GST, uma rela??o inversa entre a concentra??o do pesticida e a resposta do sistema enzim?tico. Por?m, estes resultados n?o determinaram um aumento na lipoperoxida??o e nem causam mortalidade aos animais o que sugere uma atividade constitutiva alta destas enzimas e/ou a presen?a de um sistema antioxidante n?o enzim?tico bastante eficiente. Os n?veis de corticosterona plasm?tico apresentaram diferen?a entre os grupos X1(0,05?g/L) e X4(0,4?g/L), com decr?scimo no X4, deduzindo uma diminui??o da capacidade de resposta do animal frente ? exposi??o prolongada, sete dias, a concentra??es mais elevadas do pesticida; estando esta resposta aliada a um aumento da glicemia em X3. Os n?veis de AU apresentaram uma redu??o significativa no grupo X4, por?m, para maiores conclus?es sobre o uso desta mol?cula como antioxidante e seu papel junto ao sistema n?o enzim?tico ser?o necess?rios novos estudos. Since the principles of management in agriculture by man, technology has increased exponentially, allowing rapid development of this sector. However, many improvements are linked to use of chemically synthesized compounds, with the environment and the human being exposed to these pollutants, often harmful. Nevertheless, the amount of these herbicides is increasing. The herbicide based on quinclorac, as Facet? acts as a growth inhibitor, immediately absorbed by germinated seeds, roots and leaves and then transported to the plant. This agent is commonly applied in rice fields and in southern Brazil, the quinclorac is most often detected in studies with agrochemical residues used on these crops and is considered a major water contaminant. Several animal studies have demonstrated the negative biological effect of this xenobiotic, as changes in behavior, development and production of corticosteroids, which may cause malformations, cell differentiation and reproduction problems. Given the high sensitivity of tadpoles to environmental stressors, we choose as model Lithobates catesbeianus species, which has, among ran?dae family, a great plasticity and toughness, due probably to be an introduced species in Brazil. To perform this study were acquired 79 tadpoles with 4 months old, on stage 25 (pro metamorphic) of the Gosner table. Animals were divided into tanks of 60L of water with constant aeration in natural photoperiod and temperature, pH of 7.4, fed ad libitum on chow. Since there was manipulation and euthanasia of animals, the study was submitted to the Ethics Committee on Animal Use (CEUA) of PUCRS.The herbicide was added at day 8 in X1 concentrations (0,05?g/L), X2 (0,1?g/L), X3 (0,2?g/L) and X4 (0,4?g/L). The objective of the research was to analyze the possible alterations in the activity of antioxidant enzymes and levels of lipid peroxidation (LPO) liver; as well as the levels of corticosterone (CORT), glucose and uric acid (UA) in plasma after exposure of the herbicide. Since there was no difference between groups control 7 days (C7) and control 14 days (14), except for the UA as the groups were compared with the C14, where they show the same development time of exposed. The results showed significant differences in LPO, especially in animals exposed concentration 0.1 ? g/L (X1) of the herbicide; also induces the increased activity of GST, SOD and CAT; After it followed by a decrease in this activity where noticed in the case of SOD, CAT and GST, an inverse relationship between the concentration of the pesticide and the response of the enzyme system. However, these results did not determine an increase in lipoperoxidation and even cause death to the animal suggesting a high constitutive activity of these enzymes and / or the presence of a non-enzymatic antioxidant system rather desenvolvido.The plasma corticosterone levels showed differences between the groups X1 (0,05?g/L) and X4 (0,4?g/L), a decrease in X4, deducting a decreased responsiveness of animals to prolonged exposure front seven days, at higher concentrations of the pesticide; this response being coupled to increased glucose levels in X3. The UA levels showed a significant reduction in X4 group, however, for further findings on the use of this molecule and its role as an antioxidant by the non-enzymatic system will require new studies. Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES

O crescimento da população e os aumentos de consumo e da poluição dos recursos hídricos, tem gerado grande preocupação com a qualidade das águas. A indústria metalúrgica gera efluentes com contaminantes, tais como óleo, graxa e metais pesados. Estas substâncias ou uma combinação de substâncias tóxicas são susceptíveis de causar alterações no sistema endócrino dos organismos vivos, como o câncer, puberdade precoce, infertilidade masculina, feminização de animais silvestres, entre outros.O estudo teve como objetivo apontar o que aconteceu com ratos Wistar que consumiram efluente de indústria metalúrgica antes e depois do processo de tratamento, a fim de analisar a presença de substâncias com disfunção endócrina potencial no plasma sanguíneo. Foram avaliados os níveis de glicose, triglicerídeos, colesterol, estradiol, e as enzimas aspartato aminotransferase (AST) e de alanina aminotransferase (ALT). As amostras do plasma dos ratos que consumiram o efluente tratado mostrou altos níveis de glicose e estradiol. Não houve lesões no fígado de camundongos analisados como também não houve alteração nos resultados das enzimas AST e ALT. Sugere-se que essas alterações foram provocadas pelo nonilfenol, um conhecido desregulador endócrino presente na maioria dos detergentes industriais.Os padrões de emissão de efluentes industriais estipulados no nosso país refere-se a contaminantes físicos, químicos e biológicos que podem ser emitidos para o meio ambiente após a realização de tratamento. A legislação ambiental pertinente em nosso país trata desses limites de emissões, mas não deixa claro no que se refere às substâncias consideradas como desreguladores endócrinos. Esta pesquisa tem como objetivo a obtenção de dados através de revisão da literatura, sobre normas de emissões toleráveis, que não prejudiquem as atividades vitais dos seres vivos. A legislação brasileira cita a proibição da utilização de certas substâncias com potencial de desregulação endócrina, mas sem uma abordagem satisfatória. A União Europeia (UE), os Estados Unidos e o Japão têm metas e regulamentações sobre a não utilização de substâncias com potencial de interferência endócrina. Population growth and consumption increases and pollution of water resources, has generated great concern about water quality. The metallurgical industry produces effluents with contaminants such as oil, grease, and heavy metals. These substances or a combination of toxic substances are likely to cause changes in the endocrine system of living organisms, such as cancer, early puberty, male infertility, feminization of wild animals, among others. The study aimed to point out what happened to Wistar rats who consumed metallurgical industry effluent before and after the treatment process in order to analyze the presence of substances with potential endocrine dysfunction in blood plasma. We assessed the levels of glucose, triglycerides, cholesterol, estradiol, and the enzymes aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT). Plasma samples from rats that consumed the treated effluent showed high levels of glucose and estradiol. There were no lesions in the liver of mice examined, as there was no change in the results of AST and ALT enzymes. It is suggested that these changes were caused by nonylphenol, a known endocrine disrupter present in most detergents industrials. The emission standards for industrial wastewater stipulated in our country refers to physical contaminants, chemical and biological that may be issued to the middle environment after the completion of treatment. The relevant environmental legislation in our country comes to these emission limits, but does not make clear in relation to substances considered as endocrine disruptors. This research aims to obtain data through review of the literature on standards of tolerable emissions, not impairing the vital activities of living things. Brazilian law cites the ban on the use of certain substances with endocrine disrupting potential, but without a satisfactory approach. The European Union (EU), the United States and Japan have goals and regulations on non-use of substances with endocrine interference potential.

Ao longo do ciclo de vida dos organismos, a entrada de nutrientes se faz necess?ria para a manuten??o e antecipa??o de eventos biol?gicos. Um dos eventos com maiores custos para o metabolismo ? a reprodu??o. Marcadores do status oxidativo podem tornar-se ferramentas importantes na biologia da conserva??o para avaliar expectativas de sobreviv?ncia e reprodu??o nos organismos, bem como elucidar os efeitos de impactos antr?picos em popula??es em ambiente natural. Tropidurus catalanensis ? um lagarto encontrado em afloramentos de rocha, de porte m?dio e cor escura, com h?bito diurno e comportamento territorialista. O per?odo reprodutivo inicia-se em setembro e se encerra em janeiro, onde machos defendem seus har?ns e f?meas tornam-se residentes. O objetivo do presente estudo foi analisar as flutua??es sazonais do metabolismo intermedi?rio, de ?ndices corporais e marcadores do status oxidativo de machos e f?meas de uma popula??o de Tropidurus catalanensis, que habita os campos do Pampa, bioma que abrange os pa?ses Argentina, Brasil e Uruguai. O estudo foi desenvolvido em uma ?rea localizada em Alegrete, RS. Foram coletados 73 animais ao longo de um ano, atrav?s de busca ativa e captura manual. Houve o levantamento do comprimento rostro-cloacal (CRC), da massa corporal e foram retiradas amostras de sangue atrav?s de pun??o card?aca com o aux?lio de seringas heparinizadas.No plasma foram analisados os n?veis de prote?nas totais, ?cido ?rico, glicose, lip?deos totais, triglicer?deos, colesterol total e colesterol VLDL. No f?gado foram analisados os n?veis de prote?nas totais, glicog?nio, lip?deos totais e triglicer?deos. Nos tecidos hep?tico, renal e por??o do m?sculo caudal foram analisados os n?veis de lipoperoxida??o (TBARS) e a atividade das enzimas antioxidantes super?xido dismutase (SOD), catalase (CAT) e glutationa S-transferase (GST). Tamb?m foram levantados os ?ndices hepatossom?tico, gonadossom?tico e de gordura abdominal. Os resultados obtidos revelam que este s?urio apresenta um claro padr?o de varia??o sazonal em seu metabolismo, dos marcadores de estresse oxidativo e nos ?ndices corporais. Os meses de inverno parecem levar a um estado de hipometabolismo principalmente em machos, assim como o per?odo reprodutivo parece ser o evento biol?gico que exige maior demanda energ?tica, principalmente para as f?meas. Estes custos ocasionados pela reprodu??o podem tornar a esp?cie mais vulner?vel a altera??es em seu meio ambiente. Sendo assim, o presente trabalho pode ser considerado importante na descri??o e entendimento dos efeitos da sazonalidade no metabolismo intermedi?rio e no status oxidativo de lagartos de vida livre, dando subs?dios para a conserva??o da herpetofauna. During the cycle of life of organisms, the food intake is crucial to maintenance and anticipation of biological events. One of the major events in terms of metabolic costs is reproduction. Indicators of oxidative status may become important tools in conservation biology, in order to evaluate survival and reproduction expectations on organisms, as well as to elucidate the effects of anthropic impacts among populations in their natural environment. Tropidurus catalanensis it is a dark-colored and medium size lizard that can be found in rocky outcrops, and has a day-light habit and territorial behavior. It?s reproductive period goes to September from January, with males defending its harem and females tend to be more sedentary. The objective of the present study was to analyze seasonal variations of the intermediate metabolism, body index and biomarkers of the oxidative status of males and females from a population of Tropidurus catalanensis from Pampa biome, which occurs in Argentina, Brazil and Uruguay. The study was developed in a farm located in the city of Alegrete, RS. The study lasted one year, and it was collected 73 animals by active search and manual capture. It was measured the snout-vent-length (SVL), the body weight and it was taken blood samples by cardiac puncture with heparinized syringes.It was analyzed total proteins, uric acid, glucose, total lipids, triglycerides, total cholesterol and VLDL cholesterol of the blood plasma. On the liver, it was analyzed the levels of total proteins, glycogen, total lipids and triglycerides. On the liver, kidneys and muscle tissue from the lizard?s tale it was analyzes the levels of lipid peroxidation (TBARS) and the activities of the following antioxidant enzymes: superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT) and glutathione S-transferase (GST). It was also measured the hepatosomatic and gonadosomatic index, as well as the abdominal fat. The present results indicate that this lizard has a clear pattern of seasonal variation on its metabolism, its oxidative stress biomarkers and its body indexes. The winter period seems to induce a hypometabolic state mainly in males, and the reproductive period seems to be the biological event that requires the largest energetic demands, especially in females. These costs caused by reproduction may increase the vulnerability of the species to any environmental disturbance. Thus, the present study can be considered important on the description and understanding of the effects of the seasonality on the intermediate metabolism and oxidative status of free-living lizards, providing resources for the conservation of herpetofauna. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq

Os agroqu?micos s?o contaminantes aqu?ticos decorrentes das atividades antropog?nicas, tendo como principal objetivo a elimina??o de alguma forma de vida, sendo, portanto, lesivos inclusive ? esp?cies n?o-alvo. ? de extrema import?ncia a padroniza??o e a utiliza??o de esp?cies bioindicadoras, em especial de organismos aut?ctones, al?m do desenvolvimento de testes de toxicidade ou bioensaios para avalia??o dos impactos decorrentes das atividades agroindustriais. Assim, buscou-se verificar poss?veis altera??es bioqu?micas, avaliar o balan?o oxidativo e a sobreviv?ncia de indiv?duos do jundi? Rhamdia quelen, em duas faixas et?rias, frente a testes de toxicidade aguda com diferentes concentra??es de Roundup? (glifosato: 18, 36, 72 e 144?g/L), Primoleo? (atrazina: 2,5, 5, 10 e 15?g/L) e Facet? (quinclorac: 1,75, 3,5, 7 e 14?g/L). Foram realizados os procedimentos com alevinos (indiv?duos com comprimento total entre 6 e 8 cm) e indiv?duos rec?m-maturados sexualmente, chamados alevin?es (com comprimento total superior a 18 cm). Todos os animais foram comprados de uma piscicultura e permaneceram por 7 dias em um per?odo denominado Aclimata??o. Ap?s, os agroqu?micos foram aplicados individualmente, em concentra??es semelhantes ?s relatadas para o ambiente natural e permitido pela legisla??o vigente em nosso pa?s. Ap?s 7 dias de exposi??o ao agroqu?mico, os animais foram eutanasiados por sec??o de medula cervical, e foram separados os tecidos branquial, hep?tico, renal e muscular, sendo congelados a -20?C. Nos alevinos, foram realizados agrupamentos dos tecidos de tr?s indiv?duos, devido seu baixo peso; os tecidos dos alevin?es foram analisados individualmente. Estimou-se o efeito destes agroqu?micos sobre o metabolismo intermedi?rio, atrav?s da determina??o dos n?veis de glicog?nio, prote?nas totais, lip?deos totais e triacilglicer?is, nas duas faixas de comprimento. Avaliouse tamb?m o efeito destes agroqu?micos sobre o status oxidativo determinando a atividade das enzimas super?xido dismutase (SOD) e catalase (CAT), al?m dos n?veis de lipoperoxida??o (TBARS) nos quatro tecidos dos animais, das duas faixas de comprimento. Os procedimentos experimentais e as leituras biqu?micas foram realizados em triplicata. Ainda observou-se o efeito destes sobre a sobreviv?ncia dos indiv?duos em condi??es de cultivo experimental, nas duas faixas et?rias, buscando a confirma??o da subletalidade das concentra??es determinadas para os testes. Os resultados est?o organizados em tr?s artigos, sendo o primeiro intitulado Par?metros metab?licos e balan?o oxidativo de Rhamdia quelen alterado frente ? exposi??o a herbicidas de lavoura de arroz (Roundup?, Primoleo? e Facet?), para a submiss?o ? Revista Archives of Environmental Contamination and Toxicology, onde s?o apresentados os resultados obtidos para o metabolismo e o balan?o oxidativo dos alevinos, que parecem ter conseguido modular suas enzimas a ponto de n?o sofrerem dano oxidativo frente aos herbicidas Roundup? (pelo aumento da CAT) e Primoleo? (sem altera??es nas enzimas SOD e CAT). O Facet? provocou o aumento da lipoperoxida??o, principalmente nos tecidos branquial, renal e muscular, apesar da eleva??o da SOD, agredindo significativamente a esp?cie. A composi??o bioqu?mica tecidual dos juvenis de R. quelen sofreu altera??es significativas, podendo acarretar a danos principalmente no tecido branquial, conduzindo ? perda da homeostase e podendo acarretar na morte dos animais e/ou a diminui??o do sucesso reprodutivo, quando expostos cronicamente a estas subst?ncias e nestas concentra??es. O 2? artigo, intitulado Altera??es metab?licas em jundi?s expostos aos herbicidas de lavoura de arroz Roundup?, Primoleo? e Facet?, versa sobre o metabolismo de alevin?es, para submiss?o ? Revista Environmental Pollution. Houve altera??es no perfil metab?lico de todos os tecidos amostrados, evidenciando uma responsividade tecidual diferenciada, sendo as br?nquias e os rins os ?rg?os mais afetados com a exposi??o aos agroqu?micos. O herbicida Facet? alterou significativamente o tecido branquial, sendo sugerido que os ?rg?os brasileiros competentes regulamentem o seu uso em normas protetivas ao meio ambiente. Por fim, o manuscrito do artigo Status oxidativo e lipoperoxida??o determinados pela exposi??o aos agroqu?micos Roundup?, Primoleo? e Facet? em Rhamdia quelen, aborda o estresse oxidativo sofrido pelos alevin?es, a ser submetido ? Revista Ecotoxicology and Environmental Safety. Neste trabalho os tecidos hep?tico e renal foram os mais afetados, e podemos inferir que o Facet? (quinclorac) foi o agroqu?mico mais t?xico aos indiv?duos rec?m-maturados sexualmente, seguido do Primoleo? (atrazina) e ap?s o Roundup? (glifosato). Podese, a partir deste conjunto de resultados, sugerir uma revis?o na legisla??o vigente em nosso pa?s, a fim de incluir produtos com o princ?pio ativo quinclorac na lista de t?xicos a serem controlados no ambiente natural. Agrochemicals are water contaminants, resulting from anthropogenic activities, having as main objective the elimination of some form of life and, therefore, being harmful even to non-target species. It is utmost importance the standardization and the use of bioindicators, especially of native organisms, besides the development of toxicity tests or bioassays to assess the impacts of the agroindustrial activities. Thus, it was sought to identify possible biochemical changes, to evaluate the oxidative balance and the survival of individuals of catfish Rhamdia quelen, in two aged groups, facing acute toxicity tests with different concentrations of Roundup? (glyphosate: 18, 36, 72 and 144?g/L), Primoleo? (atrazine: 2.5, 5, 10 and 15?g/L) and Facet? (quinclorac: 1.75, 3.5, 7 and 14?g/L). The procedures were performed with fingerlings (individuals with total length between 6 and 8 cm) and sexually newly matured individuals, called young-adult (with total length of more than 18 cm). All the animals were purchased from a farm and were kept for 7 days in a period called Acclimatization. After, agrochemicals were applied individually, at concentrations similar to those reported for the natural environment and allowed by law in our country. After 7 days of exposuring to the agrochemical, the animals were euthanized by cervical spinal cord section and the gill, liver, kidney and muscle tissues were separated and frozen at -20?C. In fingerlings, pools were performed, grouping the tissue from three individuals, due to their low weight; the tissues from young-adult were analyzed individually. It was estimated the effect of this agrochemicals on intermidiate metabolism, by determining the glycogen levels, total proteins, total lipids and triacylglycerols, on the two length ranges. It was also evaluated the effect of this agrochemicals on the oxidative status determining the activity of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), and levels of lipid peroxidation (TBARS) in all the tissues from the animals on the two length ranges. The experimental procedures and the biochemical readings were performed in triplicate. It was also observed the effect of this agrochemicals on the survival of the individuals in experimental culture conditions, in both aged groups, searching for confirmation of sublethallity of determined concentrations for testing. The results are organized into three articles. The first is entitled Metabolic parameters and oxidative balance Rhamdia quelen changed after exposure to herbicides of rice crops (Roundup?, Primoleo? and Facet?), for submission to the journal Archives of Environmental Contamination and Toxicology, which presents the results obtained for the metabolism and the oxidative balance of fingerlings, which seem to have been able to modulate their enzymes as not to suffer oxidative damage front to Roundup? herbicide (by increasing CAT) and Primoleo? (without changes in SOD and CAT). The Facet? led to the increase of lipid peroxidation, especially in the gill, kidney and muscle tissues, despite the higher SOD, prejudicing the species significantly. The biochemical composition tissue of juveniles of R. quelen changed significantly, which may cause damages, mainly in the gill tissue, leading to a loss of homeostasis and it may result the death of the animals and/or the decrease of the reproductive success, when chronically exposed to these substances and concentrations. The second article entitled Metabolic changes in silver catfish exposed to herbicide of rice crop Roundup?, Primoleo? and Facet?, is concerned to the young-adult metabolism, for submission to the journal Environmental Pollution. There were changes in the metabolic profile of all sampled tissues, showing a differentiated tissue responsiveness, being the gills and the kidneys the most affected organs by the exposure to agrochemicals. The herbicide Facet? changed the gill tissue significantly, and it was suggested that the relevant Brazilian agencies regulate its use in protective standards for the environment. Finally, the third manuscript Article Oxidative status and lipid peroxidation determined by the exposure to agrochemicals Roundup?, Primoleo? and Facet? in Rhamdia quelen approaches the oxidative stress suffered by young-adults to be submitted to the journal Ecotoxicology and Environmental Safety. In this work the liver and kidney tissues were the most affected, and it can be infered that the Facet? (quinclorac) was the most toxic herbicide to the sexually newly matured individuals, followed by Primoleo? (atrazine) and after by Roundup? (glyphosate). One can suggest, from this set of results, a review of the current legislation in our country, to include products with the quinclorac active principle into the toxic list to be controlled in the natural environment.

Os pesticidas s?o usados para o controle, preven??o e erradica??o de organismos n?o desej?veis na produ??o agr?cola em todo o mundo. No Brasil, o uso de pesticidas ? disseminado em muitas culturas produtivas, tais como, a soja e o arroz. Assim, o uso massivo desses produtos qu?micos resulta em variados e desconhecidos meios de contamina??o. O controle qu?mico ou biol?gico ? aplicado para a supress?o total ou parcial dessas pragas agr?colas pela ado??o de m?todos qu?micos ou de agentes naturais. Sendo assim, os moluscos representam um dos grupos de pragas que interferem no processo produtivo oriz?cola podendo causar danos significativos ? produ??o. Aqui se avaliou a pot?ncia de extratos vegetais liofilizados (decocto e fra??o butan?lica) dos frutos imaturos de Ilex paraguariensis no controle qu?mico do caramujo praga do arroz Pomacea canaliculata em condi??es laboratoriais, bem como em um organismo n?o-alvo, alevinos da esp?cie Rhamdia quelen. As cromatrografias em camada delgada comprovam a presen?a de componentes qu?micos, como saponinas e flavonoides, presentes nos frutos imaturos. Aqui delimitamos as Concentra??es Letais M?dias (CL50%) e o Tempo Letal M?dio (TL50%) atrav?s do teste PROBIT. A CL50% de decoctos foi de 26,6 mgL-1 e a TL50% foi de 16 h. A CL50% da fra??o butan?lica foi de 24,4 mgL-1 e a TL50% foi de 25 h. Para os alevinos a CL50% de decoctos foi de 17,6 mgL-1 e a TL50% foi de 11,9 h. Sendo estes mais sens?veis aos extratos. Os diagramas de regress?o mostram as correla??es positivas da toxicidade dos extratos em rela??o ao ?bito dos animais. Os par?metros abi?ticos mensurados ajudam a entender o efeito que os extratos tiveram nos organismos ocasionando os ?bitos. Esses resultados comprovam a efic?cia do controle qu?mico no caramujo praga do arroz com os extratos vegetais dos frutos imaturos de ervamate mostrando assim uma alternativa sustent?vel comparada a outras plantas j? utilizadas para o controle desse molusco praga. A vantagem no uso destes extratos vegetais ? que a fonte de mat?ria prima para obten??o est? vinculada com a produ??o ervateira, sendo eles rejeitos industriais. O aproveitamento dos frutos imaturos proporcionaria uma nova fonte de extratos eficazes para o controle qu?mico do caramujo. Pesticides are used for the control, prevention and eradication of unwanted organisms in agricultural production worldwide. In Brazil, the use of pesticides is widespread in many production crops such as soybeans and rice. Thus, the massive use of these chemicals results in varied and unknown means of contamination. The chemical or biological control is applied to the total or partial supression of these agricultural pests by adopting chemical methods or natural agents. Thus, the mollusks are one of the pests group which interfere with paddy production process may cause significant damage to production. Here we evaluated the potency of lyophilized plant extracts (decoction and butanol fraction) of Ilex paraguariensis unripe fruits on the chemical control of the rice pest snail Pomacea canaliculata under laboratory conditions and in a non-target organism, fry of the species Rhamdia quelen. The chromatography thin layer confirm the presence of chemical components such as saponins and flavonoids present in unripe fruits. Here delimit the Lethal concentrations averages (LC50%) and the Middle Lethal Time (LT50%) through the PROBIT test. The decoctions LC50% was 26.6 mgL-1 and TL50% was 16 h. The LC50% of butanol fraction was 24.4 mgL-1 and TL50% was 25 hr. To fry, The LC50% of decoctions was 17.6 mg L-1 and the TL50% was 11.9 h. Who are more sensitive to the extracts. Regression diagrams show the positive correlations of the toxicity of the extracts in relation to the death of animals. The measured abiotic parameters help to understand the effect that the extracts had the organisms causing the deaths. These results prove the effectiveness of chemical control in rice pest snail with plant extracts of unripe fruits of mate thus showing a sustainable alternative compared to other plants already used to control this pest mollusk. The advantage in the use of plant extracts is that the source of raw material to obtain is linked with mate production, namely industrial waste. The use of unripe fruits provide a new source of effective extracts for the chemical control of the Golden Apple Snail. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq

Atualmente, a realiza??o de levantamentos biol?gicos que sejam capazes de classificar e caracterizar a biodiversidade e suas rela??es ecol?gicas tem sido cada vez mais importante e necess?ria na busca da conserva??o ambiental. A fisiologia da conserva??o preocupa-se em estudar e qualificar diversas vari?veis relacionadas a um organismo, para que assim seja poss?vel ampliar os conhecimentos acerca do funcionamento de determinada esp?cie e detalhar necessidades b?sicas ambientais ou estabelecer per?odos de vulnerabilidade natural. O g?nero Hyalella, de distribui??o americana, tem uma grande import?ncia nas cadeias tr?ficas onde ocorrem, tornando-se uma liga??o fundamental em processos de transfer?ncia energ?tica. O anf?podo Hyalella kaingang, uma esp?cie recentemente descrita e pouco estudada, foi utilizada nas pesquisas referentes ?s an?lises sazonais, e o objetivo do presente trabalho foi analisar o funcionamento metab?lico, a aloca??o energ?tica, os n?veis de lipoperoxida??o e atividades de enzimas antioxidantes da esp?cie. Foram utilizados 30 animais de cada sexo em cada esta??o do ano, os quais foram coletados dentro do Centro de Pesquisa e Conserva??o da Natureza (CPCN) Pr?-Mata, no munic?pio de S?o Francisco de Paula, Rio Grande do Sul.Em campo, os animais foram eutanaziados por crioanestesia e no laborat?rio, homogeneizados para a quantifica??o dos n?veis de prote?nas, glicog?nio, lip?dios, triglicer?deos, glicerol, lipoperoxida??o e a atividade das enzimas super?xido dismutase, catalase e glutationa S-transferase. Houve diferen?a significativa nos n?veis de glicog?nio, lip?dios, triglicer?deos, lipoperoxida??o e na atividade das enzimas super?xido dismutase e glutationa S-transferase ao longo de um ciclo sazonal, tanto em machos como em f?meas.Os resultados encontrados a partir dos biomarcadores de metabolismo energ?tico e do estresse oxidativo indicam tend?ncias alimentares direcionadas ao consumo predominantemente de prote?nas, e tamb?m que o per?odo reprodutivo da esp?cie seja longo, hip?tese baseada tamb?m na observa??o de f?meas ov?geras em muitas esta??es. Sugere-se tamb?m, que exista um pico de atividade reprodutiva no outono. Contudo, mais estudos devem ser realizados com a esp?cie para que possam ser aprofundados os conhecimentos acerca da biologia reprodutiva, ecologia geral e fisiologia desta esp?cie. O presente trabalho refor?a a ideia de que deve haver uma maior integra??o entre diferentes campos cient?ficos para que se possa obter um perfil mais preciso de um determinado organismo. Currently, the execution of biological research that is able to classify and characterize the biodiversity and its ecological relations has been increasingly important and necessary in order to achieve environmental conservation. Conservation physiology is concerned about studying and qualifying many variables related to an organism, so that is possible to increase the knowledge about the functioning of a given species and to detail main environmental requirements or to establish periods of natural vulnerability. The genus Hyalella presents an American distribution and has a great importance on the food chain where it occurs, and becoming a fundamental link in processes of energy transference. The amphipod Hyalella kaingang, a very recent described species and so far not very studied, was used on this study of seasonal variation, and the objective of the present work was to analyze the metabolic behavior, the metabolic allocation, the levels of lipid peroxidation and the activity of antioxidant enzymes of the species. Thirty animals from each sex were used each season of the year, which were collected at Centro de Pesquisa e Conserva??o da Natureza (CPCN) Pr?-Mata, located at S?o Francisco de Paula, Rio Grande do Sul.In the field, animals were euthanized by cryoanesthesia and in the laboratory they were homogenized in order to quantify levels of total proteins, glycogen, lipids, triglycerides, glycerol lipid peroxidation and the activity of the antioxidant enzymes superoxide dismutase, catalase and glutathione S- transferase. There was significative difference in the levels of glycogen, lipids, triglycerides, lipoperoxidation and in the activity of the enzymes superoxide dismutase and glutathione S-transferase over a full seasonal cycle in both males and females. The results of biomarkers from energetic metabolism and from oxidative stress indicate a feeding trend directed to the ingestion of proteins, and it is also suggested that the reproductive period of the species may be long-lasting, with this hypothesis being based also on the observation of pregnant females in many of the analyzed seasons. It is also suggested that there may be a reproductive peak during autumn. However, more studies must be done with this species so that the knowledge about its reproductive biology, general ecology and physiology can be increased. The present work also reinforces the idea that must be a greater interaction between different scientific fields so that a more precise profile of any given organism can be stated. Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq