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For decades, sphingolipids have been related to several biological functions such as immune system regulation, cell survival, and proliferation. Recently, it has been reported that sphingolipids could be biomarkers in cancer and in other human disorders such as metabolic diseases. This is evidenced by the biological complexity of the sphingolipids associated with cell type-specific signaling and diverse sphingolipids molecules. As mitochondria dynamics have serious implications in homeostasis, in the present review, we focused on the relationship between sphingolipids, mainly ceramides and sphingosine-1-phosphate, and mitochondrial dynamics directed by fission, fusion, and mitophagy. There is evidence that the balances of ceramides (C18 and C16) and S1P, as well as the location of specific ceramide synthases in mitochondria, have roles in mitophagy and fission with an impact on cell fate and metabolism. However, signaling pathways controlling the sphingolipids metabolism and their location in mitochondria need to be better understood in order to propose new interventions and therapeutic strategies.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES Quetiapine (QUE) is a highly complex drug that, due to its different forms of interaction with receptors, has great clinical applicability. Although widely used, QUE brings with it a range of side effects that include, in addition to disorders of the metabolic pathway, changes in levels of the immune system. Quickly metabolised by the liver, it is transformed into its main active metabolite, norquetiapine, being then the clearance of QUE only 5%. This percentage may increase in elderly people, with liver failure or through interaction with other drugs. Thus, non-metabolized quetiapine (nmQUE) may be responsible for inducing peripheral immune changes, especially low-grade chronic inflammation. Therefor, our objective was to evaluate in vitro the potential cytotoxicity and modulatory effect of nmQUE on inflammatory activation and in the formation of extracellular neutrophil traps (NETs). For this, cellular experiments were carried out, using a commercial macrophage cell line (RAW 264.7), in addition to leukocytes and neutrophils, obtained through blood collection from volunteers. The cells were cultured under ideal conditions according to standardisation until the concentration of 1x105 cells/mL was obtained. Then, macrophages, leukocytes and neutrophils were treated and activated, or not, with a mitogenic agent, phytohemagglutinin (PHA). After 24 hours, they were treated with different concentrations of QUE (25, 50, 100, 200 and 400 μg/L). Given at 24 hours of treatment, the cell viability and cytotoxicity of all cells were evaluated using the 3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium assay (MTT). With the result of these tests, the concentration of choice for QUE to be used in the following analyses was defined: 100 μg/L. Thus, after 72 hours of treatment, cell proliferation, oxidative molecules and gene and protein expression (via Quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (qRT-PCR) of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines in RAW 264.7 were evaluated. In addition, to assess the effect of nmQUE on the formation of NETs, neutrophils were previously activated, or not, by exposure to yeast cells for 2 hours, followed by exposure to QUE for an additional 2 hours, then fixed and stained, followed by images capture and evaluations consistent with the experiment.The results show the high capacity of nmQUE to interact with immune cells, not showing cytotoxicity, but modifying its inflammatory profile according to its initial state, thus corroborating it with a pro and anti-inflammatory pharmacological effect. In relation to the formation of NETs, neutrophils were surprisingly induced, with nmQUE being responsible for hyper-formation of NETs. With these results, it is concluded that nmQUE exerts an influence on the pathways of the immune system, being possibly responsible for the existence of morbidities and side effects, which represents the major problem of antipsychotic therapy. A quetiapina (QUE) é um fármaco altamente complexo que por suas diferentes formas de interação com os receptores apresenta grande aplicabilidade clínica. Embora muito utilizada, a QUE traz consigo uma gama de efeitos colaterais que incluem além de distúrbios da via metabólica, alterações em nível de sistema imune. Rapidamente metabolizada pelo fígado ela é transformada em seu principal metabólito ativo, a norquetiapina, estando então, à depuração da QUE em apenas 5%. Este percentual pode aumentar em pessoas idosas, com isuficiência hepática ou através da interação com outros fármacos. Com isso, a quetiapina não metabolizada (nmQUE) pode ser responsável pela indução das alteraçãoes imunológicas periféricas, principalmente a inflamação crônica de baixo grau. Assim, nosso objetivo concentrou-se em avaliar in vitro o potencial efeito citotóxico e modulatório da nmQUE na ativação inflamatória e, na formação de armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs). Para isso, foram realizados experimentos celulares, utilizando a linhagem celular comercial de macrófagos (RAW 264.7), além de leucócitos e neutrófilos, obtidos através de coleta sanguínea de voluntários. As células foram cultivadas em condições ideais conforme a padronização até a obtenção da concentração de 1x105 cél/mL. Em seguida, os macrófagos, leucócitos e neutrófilos foram tratados e ativados ou não com agente mitogênico, a fitohemaglutinina (PHA). Após 24 horas, foram tratados com diferentes concentrações de QUE (25, 50, 100, 200 e 400 μg/L). Dada às 24 horas do tratamento, foi avaliada a viabilidade celular e citoxicidade de todas as células, através do ensaio espectrofotométrico do Brometo de 3-[4,5-dimetiltiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazólio (MTT). Com o resultado destes testes, fora definida a concentração de escolha da QUE para ser utilizada nas análises seguintes: 100 μg/L. Com isso, após 72 horas de tratamento, avaliou-se a proliferação celular, moléculas oxidativas e a expressão proteica e gênica (via Quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (qRT-PCR) de citocinas pró- inflamatórias e anti-inflamatória em RAW 264.7. Ainda, para avaliar o efeito da nmQUE na formação de NETs, os neutrófilos foram previamente ativados ou não pela exposição a células de leveduras por 2 horas, seguidos da exposição à QUE por mais 2 horas, estando posteriormente fixados e corados, seguidos pela captura de imagens e avaliação condizente. Os resultados mostram a alta capacidade de interação da nmQUE para com as células imunológicas, não demostrando citoxicidade, porém modificando seu perfil inflamatório conforme seu estado inicial, corroborando assim, para com um efeito farmacológico pró e anti- inflamatório. Já em relação a formação de NETs, os neutrófilos foram induzidos surpreendentemente, estando a nmQUE responsável por uma hiperformação das NETs. Com esses resultados, conclui-se que nmQUE exerce influência nas vias do sistema imune, sendo possivelmente responsável pela existência de morbidades e efeitos colaterais, o que representa o grande problema da terapia antipsicótica.

Apesar da terapia antirretroviral (TARV) preservar os linfócitos TCD4+ de pessoas vivendo com HIV (PVHIV), seu uso regular e a infecção viral associam-se a alterações negativas na composição corporal, capacidade aeróbia, força muscular e potência muscular de membros inferiores (PMMI). Embora o treinamento físico periodizado ondulatório diário (TFPOD) seja eficaz em PVHIV para atenuar tais adversidades, é incerto se esse tipo de abordagem promove efeito adicional comparado ao treinamento físico não periodizado (TFNP). O primeiro estudo investigou se o TFPOD quando comparado ao TFNP promove efeitos adicionais na melhora da composição corporal, capacidade aeróbia, força muscular, PMMI e dos linfócitos TCD4+ de PVHIV. Quarenta e uma PVHIV foram randomizadas em grupo Controle (CON; n=15), TFPOD (n = 13) e TFNP (n = 13). Os grupos TFPOD e TFNP realizaram um treinamento combinado três vezes por semana durante 12 semanas. O TFPOD promoveu maior ganho na força muscular (exceto para o supino reto (SP)), VO2pico e PMMI em relação ao TFNP. Houve aumento dos linfócitos TCD4+ apenas no grupo TFPOD. O efeito geral do treinamento promoveu uma correlação positiva entre a mudança da força no leg press (LP), tríceps pulley (TP), puxada frontal (PF) e a PMM com a mudança dos linfócitos TCD4+. Conclui-se que o TFPOD é mais eficiente para aumentar o desempenho muscular, capacidade aeróbia e os linfócitos TCD4+ de PVHIV. Referente ao segundo estudo, sabe-se que a TARV contribui para o maior risco do desenvolvimento da resistência à insulina (RI) em PVHIV. A RI está associada à hipertensão arterial, mudanças negativas na composição corporal e a um menor desempenho físico. O primeiro objetivo do segundo estudo foi verificar se PVHIV e resistentes à insulina (PVHIV+RI) apresentam maiores agravos em parâmetros da saúde e do desempenho físico em comparação a PVHIV sem RI (PVHIVSRI). O segundo objetivo foi verificar se o TFPOD pode atenuar de modo mais significativo às adversidades frente a RI em PVHIV+RI quando comparado ao TFNP. Para o primeiro objetivo, PVHIV foram divididas em grupo PVHIV+RI (n = 30) e PVHIVSRI (n = 11). Para o segundo objetivo trinta PVHIV+RI foram alocadas em CON (n = 10), TFPOD (n = 10) e TFNP (n = 10). Os grupos TFPOD e TFNP realizaram um treinamento combinado três vezes por semana durante 12 semanas. PVHIV+RI apresentaram maior IMC, pressão arterial diastólica (PAD), pressão arterial sistólica (PAS), %MG e maior concentração de lactato (LAC) comparadas a PVHIVSRI. Ainda, PVHIV+RI apresentaram menor %MLG e VO2pico. O TFPOD promoveu efeitos adicionais no aumento da força de LP e VO2pico, bem como na redução da Hb1ac quando comparado ao TFNP. Apenas o TFPOD reduziu as concentrações de LAC e a PAS. O efeito geral do treinamento demonstrou correlação negativa entre a mudança da Hb1ac com as mudanças do SP, LP, PMMI, VO2pico. Conclui-se que PVHIV+RI apresentam maiores agravos nos parâmetros da saúde e menor VO2pico em comparação a PVHIVSRI. Entretanto, os resultados da intervenção sugerem que o TFPOD pode atenuar de modo mais significativo os agravos relatados em PVHIV+RI. Despite antiretroviral therapy (ART) preserving the TCD4 + lymphocytes of people living with HIV (PLWHIV), its regular use and viral infection are associated with negative changes in body composition, aerobic capacity, muscle strength and muscle power of lower limbs (MPLL). Although daily undulatory periodization (DUP) is effective in PLWHIV to alleviate such adversities, it is uncertain whether this type of approach promotes an additional effect compared to non-periodized training (NPT). The first study investigated whether DUP when compared to NPT promotes additional effects in improving body composition, aerobic capacity, muscle strength, PMMI and TCD4 + lymphocytes of PLWHIV. Forty-one PLWHIV were randomized into a Control (CON; n = 15), DUP (n = 13) and NPT (n = 13) group. The DUP and NPT groups performed a combined training three times a week for 12 weeks. DUP promoted greater gains in muscle strength (except for the bench press (BP)), VO2peak and MPLL in relation to NPT. There was an increase in TCD4 + lymphocytes only in the DUP group. The general effect of the training promoted a positive correlation between the change in strength in leg press (LP), triceps pulley (TP), lat pulldown (LPD) and MPLL with the change in TCD4 + lymphocytes. It is concluded that DUP is more efficient to increase muscle performance, aerobic capacity and TCD4 + lymphocytes of PLWHIV. Regarding the second study, it is known that ART contributes to the greatest risk of developing insulin resistance (IR) in PLWHIV. IR is associated with high blood pressure, negative changes in body composition and lower physical performance. The first objective of the second study was to verify whether PLWHIV and insulin resistant (PLWHIV + IR) have more adversities in terms of health and physical performance parameters compared to PLWHIV without IR (PLWHIVSRI). The second objective was to verify whether the DUP can more significantly mitigate the adversities facing IR in PLWHIV+IR when compared to NPT. For the first objective, PLWHIV were divided into PLWHIV+IR (n = 30) and PLWHIVSRI (n = 11) groups. For the second objective, thirty PLWHIV+IR were allocated to CON (n = 10), DUP (n = 10) and NPT (n = 10). The DUP and NPT groups performed a combined training three times a week for 12 weeks. PLWHIV+IR presented higher BMI, diastolic blood pressure (DBP), systolic blood pressure (SBP), %MG and higher lactate concentration (LAC) compared to PLWHIVSRI. Additionally, PLWHIV+IR presented lower %MLG and VO2peak. DUP promoted additional effects in increasing the strength of LP and VO2peak, as well as reducing Hb1ac when compared to NPT. Only DUP reduced LAC and PAS concentrations. The general effect of the training showed a negative correlation between the change in Hb1ac and the changes in BP, LP, MPLL, VO2peak. It is concluded that PLWHIV+IR have more adversities on health parameters and lower VO2peak compared to PLWHIVSRI. However, the results of the intervention suggest that DUP can more significantly mitigate the conditions reported in PLWHIV+IR. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Introdução: Imunoterapias têm se tornado foco no tratamento de vários tipos de câncer, principalmente para o câncer de mama. A relevância em utilizá-la como tratamento, se faz, por intermédio da estimulação de células do sistema imune em reconhecer antígenos tumorais gerando respostas imunes específicas direcionadas contra estas células, impedindo a progressão tumoral. Objetivos: Objetivando avaliar o tratamento contra o câncer de mama induzido com células 4T1, em camundongos da linhagem Balb/C, utilizamos o protocolo de imunização com as vacinas de células dendríticas (DCs), e células Natural Killer (NK). Materiais e Métodos: Compuseram o estudo, camundongos do grupo controle, tumor sem tratamento, tumor tratados com vacina de células DCs e o grupo tumor tratados com vacina de células NK, o protocolo de tratamento foi realizado durante 3 semanas, ao término foram submetidos a eutanásia para remoção do baço e infiltrado tumoral. O material biológico foi preparado para realização da citometria de fluxo utilizando os marcadores de ativação das células NK, NKG2D, NKp46 e inibição Ly49G2, NKG2A/C/E, associado a cada um os marcadores para as citocinas, IL-10, IL- 2, IL-12, IL-17, IFN-γ e TNF-α. Resultados: Os resultados demonstraram que as células NK frente a imunoterapia com células DCs, influenciaram diretamente na resposta antitumoral, uma vez que, observamos maior expressão dos receptores de ativação NKp46 e NKG2D, e menor expressão dos receptores de inibição Ly49G2 e NKG2A/C/E, com a produção das citocinas IL-2, IL-10, IFN-γ, TNF-α e IL-12, indutoras da ativação de células NK e promotoras da ativação de outras células do sistema imune. Para o tratamento com a vacina de células NK, nossos achados mostram um desbalanço na expressão dos receptores de ativação e inibição, onde uma alta expressão dos receptores de inibição como o Ly49G2 leva a uma interferência na eliminação de células alvo com baixa expressão de MHC classe I. Conclusões: Concluindo nossos achados, demonstramos que a imunoterapia com DC é capaz de alterar o perfil das células NK, influenciando-as diretamente na resposta antitumoral, devido à expressão reduzida do receptor de inibição e ao aumento da produção de citocinas como TNF-α e IFN-γ estimulando o sistema imunológico a eliminar as células tumorais, porém, na imunoterapia com células NK a expressão aumentada do receptor de inibição Ly49G2, e a migração desse perfil fenotípico para o microambiente tumoral, impede que células NK sejam ativadas em associação a presença da IL-10, gerando um estado de dormência e contribuindo para a progressão do tumor. Introduction: Immunotherapies have become a focus in the treatment of several types of cancer, mainly for breast cancer. The relevance of using it as a treatment is done through the stimulation of cells of the immune system to recognize tumor antigens, generating specific immune responses directed against these cells, preventing tumor progression. Objectives: In order to evaluate the treatment against breast cancer induced with 4T1 cells, in Balb / C mice, we used the immunization protocol with dendritic cell (DC) vaccines and Natural Killer (NK) cells. Materials and Methods: The study comprised mice from the control group, untreated tumor, tumor treated with DC cell vaccine and the tumor group treated with NK cell vaccine, the treatment protocol was carried out for 3 weeks, at the end of which they were submitted to euthanasia to remove the spleen and tumor infiltrate. The biological material was prepared for flow cytometry using the cell activation markers NK, NKG2D, NKp46 and Ly49G2, NKG2A/C/E inhibition, associated with each one of the markers for cytokines, IL-10, IL-2 , IL-12, IL-17, IFN-γ and TNF-α. Results: The results demonstrated that the NK cells in the face of immunotherapy with DC cells, directly influenced the antitumor response, since we observed greater expression of the activation receptors NKp46 and NKG2D, and less expression of the inhibitors of Ly49G2 and NKG2A/C/E, with the production of cytokines IL-2, IL-10, IFN-γ, TNF-α and IL-12, inducing the activation of NK cells and promoting the activation of other cells of the immune system. For treatment with the NK cell vaccine, our findings show an imbalance in the expression of activation and inhibition receptors, where a high expression of inhibitory receptors such as Ly49G2 leads to an interference in the elimination of target cells with low expression of MHC class I. Conclusions: Concluding our findings, we demonstrate that immunotherapy with DC is able to alter the profile of NK cells, directly influencing the antitumor response, due to the reduced expression of the inhibitor receptor and the increase in the production of cytokines such as TNF-α and IFN- γ stimulating the immune system to eliminate tumor cells, however, in immunotherapy with NK cells the increased expression of the Ly49G2 inhibitory receptor, and the migration of this phenotypic profile to the tumor microenvironment, prevents NK cells from being activated in association with the presence of IL -10, generating a state of numbness and contributing to the progression of the tumor. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais Fundação de Ensino e Pesquisa de Uberaba FINEP Inovação e Pesquisa

Todos os anos ao final do verão, no sul do Brasil, colônias manejadas da abelha sem ferrão Melipona quadrifasciata manifestam uma síndrome que eventualmente leva-as ao colapso. Abelhas de colônias afetadas podem apresentar sintomas como tremores e paralisia, mas a principal característica da síndrome é a repentina morte de operárias, cujos corpos são encontrados em frente ou mesmo dentro da colméia. Nesta tese descrevemos nossos achados sobre as possíveis causas dessa mortalidade avaliando os diferentes níveis de complexidade de uma abelha social, desde o indivíduo e seus microrganismos associados até o nível da colônia. Mostramos que a microbiota de M. quadrifasciata é altamente variável, com grandes diferenças na composição bacteriana de abelhas de diferentes colônias. Bactérias patogênicas não foram detectadas em abelhas afetadas e o padrão na composição da microbiota não indicou uma correlação entre disbiose e a ocorrência da síndrome. Mostramos também que os sintomas observados em forrageiras doentes não são causados por vírus conhecidos como patogênicos em outras abelhas. Entretanto, novos vírus que nós identificamos no viroma da M. quadrifasciata são mais frequentemente diagnosticados em determinados meliponários durante a síndrome, e podem estar relacionados à intensidade dos sintomas e ao colapso de certas colméias. Por fim, num monitoramento temporal feito ao longo de cinco meses no verão de 2018/2019, mostramos que a síndrome foi resultado da incapacidade de expressar genes envolvidos na detoxificação de xenobióticos e resposta imune cerca de dois meses antes da síndrome, seguido da perda de peso das forrageiras, troca nos recursos polínicos utilizados e perda da capacidade de controle do clima interno da colônia. Além da divulgação e discussão no meio científico, elaboramos também, com base nestas investigações, um guia com recomendações de manejo aos meliponicultores que, se aplicadas, podem contribuir para a prevenção da síndrome anual de M. quadrifasciata, bem como da perda de outras abelhas nativas. Every year at the end of summer, in southern Brazil, managed colonies of the stingless bee Melipona quadrifasciata manifest a syndrome that eventually leads to their collapse. Bees from affected colonies may show symptoms such as tremors and paralysis, but the main feature of the syndrome is the sudden death of workers, whose bodies are found in front or inside the hives. In this thesis we describe our discoveries on the possible causes of this mortality evaluating the different complexity levels of an eusocial bee, from the individual and its associated microorganisms until colony level. We show that the M. quadrifasciata microbiota is highly variable, with large differences in community composition among bees from different colonies. Pathogenic bacteria were not detected in affected bees, and the pattern of microbiota composition did not indicate a correlation between dysbiosis and syndrome occurrence. We have also shown that the symptoms observed in unhealthy foragers are not caused by viruses known to be pathogenic in other bees. However, novel viruses that we identified in the M. quadrifasciata-a ssociated virome are more often diagnosed in some meliponaries during the outbreak, and may be related to the intensity of observed symptoms and to the collapse of some colonies. Finally, on a temporal survey performed for five months during the summer of 2018/2019, we show the syndrome resulted from the inability to express genes involved in the detoxification of xenobiotics and immune response about two months before the outbreak, followed by foragers weight loss, a shift in pollen resources used, and a decrease in performance to control the nest environment. In addition to reporting our results to the scientific community, we have also prepared, based on our investigations, a guide with recommendations for the management of stingless bees that may contribute to the prevention of the M. quadrifasciata annual syndrome, as well the loss of other native bee In addition to reporting our results to the scientific community, we have also prepared, based on our investigations, a guide with recommendations for the management of stingless bees that may contribute to the prevention of the M. quadrifasciata annual syndrome, as well the loss of other native bees.

Orientadora: Profª. Drª. Carla Wanderer Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Mestrado Profissional em Ensino de Biologia em Rede Nacional – PROFBIO. Defesa : Curitiba, 27/10/2020 Inclui referências: p.124-132 Área de concentração: Ensino de Biologia Resumo: Diante da dinamicidade do processo educativo, urge a necessidade de amparo ao docente com material de apoio à sua prática pedagógica, com o fim de instigar os educandos ao conhecimento, diversificando as metodologias utilizadas. Igualmente, a promoção e a manutenção da saúde individual e coletiva são assuntos sempre atuais e determinantes da qualidade de vida das comunidades, pelo mundo todo. A presente pesquisa objetivou a produção de materiais didáticos, na forma de manuais de tópicos integrados para o estudo do Sistema Imune (SI) no ensino médio, baseado em metodologias ativas de ensino-aprendizagem, destinados ao professor e ao estudante, com linguagens próprias a cada público-alvo. Para alcançar este objetivo, foram realizadas pesquisas nas dez coleções de livros didáticos (LDs) aprovadas no Plano Nacional do Livro Didático de 2018 (PNLD/2018), ofertados a todo o ensino médio público do país, mostrando que, além da abordagem esparsa, ou seja, espalhada pelos volumes, à medida em que surgem os assuntos sobre saúde e infecções, apenas uma coleção deixou de dedicar um capítulo, ou seção de capítulo, especificamente à tratativa do SI. Foram encontrados erros conceituais em sete volumes, essencialmente quanto à função dos linfonodos, de algumas células de defesa e do timo. A análise dos trinta LDs mostrou apenas nove atividades, ditas "diferenciadas", aqui consideradas como propostas de metodologias ativas, voltadas ao estudo do SI, sugeridas ao docente. A pesquisa junto a repositórios online revelou a necessidade de mais estudos e produções acadêmicas conjugando o SI às metodologias ativas. A elaboração das SDs privilegiou tais aspectos, com a criação de uma sequência de estudo de caso e outras duas de aula invertida. A impossibilidade de aplicação das SDs aos estudantes, nos anos de 2019 e 2020, devido a fatores involuntários (greve docente e pandemia por Covid-19, respectivamente), permitiu somente a confecção do manual do professor, com dicas de aplicação aos discentes e roteiros do estudante, correlacionando às habilidades descritas na Base Nacional Comum Curricular (BNCC) e contemplando o passo-apasso necessário ao bom andamento de cada uma das SDs propostas, respeitando a liberdade docente de adaptação à realidade de sua prática. Palavras-chave: Sistema Imune, metodologias ativas, ensino-aprendizagem. Abstract: In view of the dynamics of the educational process, there is an urgent need for support to the teacher with material to support their pedagogical practice, in order to instigate students to knowledge, diversifying the methodologies used. Likewise, the promotion and maintenance of individual and collective health are always topical issues and determinants of the quality of life in communities, all over the world. This research aimed to produce teaching materials, in the form of integrated topic manuals for the study of the Immune System (SI) in high school, based on active teaching-learning methodologies, aimed at the teacher and the student, with their own languages each target audience. To achieve this goal, research was carried out on the ten textbook collections (LDs) approved in the 2018 National Textbook Plan (PNLD / 2018), offered to all public high schools in the country, showing that, in addition to the sparse approach, that is, spread over the volumes, as issues of health and infections emerge, only one collection failed to dedicate a chapter, or chapter section, specifically to the IS treatment. Conceptual errors were found in seven volumes, essentially as to the function of the lymph nodes, some defense cells and the thymus. The analysis of the thirty LDs showed only nine activities, called "differentiated", considered here as proposals for active methodologies, focused on the study of the SI, suggested to the teacher. The research with online repositories revealed the need for further studies and academic productions combining SI with active methodologies. The elaboration of the SDs privileged such aspects, with the creation of a case study sequence and two others of an inverted class. The impossibility of applying SDs to students, in the years 2019 and 2020, due to involuntary factors (teacher strike and pandemic by Covid-19, respectively), allowed only the preparation of the teacher's manual, with application tips for students and scripts of the student, correlating to the skills described in the National Common Curricular Base (BNCC) and contemplating the step-by-step necessary for the good progress of each of the proposed SDs, respecting the teaching freedom to adapt to the reality of their practice. Keywords: Immune System, active methodologies, teaching-learning

Introduction: Immune activation is characterized by an inflammatory process caused by infectious pathogens, as well endotoxins such as LPS. Although, in childhood, the innate immune system is still developing, it has greater plastic capacity, because external stimuli such as pathogens, may be able to program immune responses until adulthood. The investigation of the tolerance mechanism, as a consequence of exposure to LPS in low doses in the neonatal period, becomes relevant, as it aims to understand whether or not this first immune activation may predispose to the development of late changes after a second exposure to endotoxemic as an adult. Objective: Evaluate the consequences of systemic immune activation on the central nervous system after immunological tolerance in the neonatal period. Methods: Pre-clinical study of the experimental type. 156 male and female C57BL / 6 mice were used. The animals were mated and the offspring used for this study. The collected data were inserted into a database, developed electronically, using the IBM SPSS Statistics 24.0 software. The statistical analysis of the parametric data was performed using the ANOVA test with post-hoc Tukey, and the statistical analysis of the non-parametric data was performed using the Kruskal-Wallis tests. Results: It was observed that the animals that received LPS in the neonatal phase did not present memory deficits and low levels of IL-1b. In the group that received LPS in the neonatal and adult phase, there was an increase in the MDA equivalents and protein carbonylation in an equivalent way to the group of untreated animals. Conclusion: It was found that animals that were subjected to immunological tolerance did not show changes in aversive memory and habituation as well as in IL-1β levels and oxidative damage in brain tissue after receiving an effective dose of LPS. Introdução: A ativação imune é caracterizada por um processo inflamatório ocasionado infeccioso por agentes patogênicos e também, por endotoxinas como o lipopolisacarídeo (LPS). Embora, na infância o sistema imune inato ainda esteja em desenvolvimento, possui maior capacidade plástica, pois estímulos externos como patógenos, podem ser capazes de programar respostas imunes até a idade adulta. A investigação do mecanismo de tolerância, como uma consequência à exposição ao LPS em doses baixas no período neonatal, torna-se relevante, pois visa entender se esta primeira ativação imune pode ou não pré-dispor ao desenvolvimento de alterações tardias após uma segunda exposição a endotoxêmicos quando adulto. Objetivo: Avaliar as consequências da ativação imune sistêmica sobre o sistema nervoso central após tolerância imunológica no período neonatal. Métodos: Estudo pré-clínico do tipo experimental. Utilizou-se 156 camundongos C57BL/6 machos e fêmeas. Os animais foram acasalados sendo a prole utilizada para este estudo. Os dados coletados foram inseridos em um banco de dados, desenvolvido em meio eletrônico, no software IBM SPSS Statistics 24.0. A análise estatística dos dados paramétricos realizou-se por meio do teste de ANOVA com post-hoc Tukey, e a análise estatística dos dados não paramétricos realizou-se pelos testes de Kruskal-Wallis. Resultados: Observou-se que os animais que receberam LPS na fase neonatal não apresentaram déficits de memória e níveis baixos de interleucina (IL)1β. No grupo que recebeu LPS na fase neonatal e adulta, houve aumento dos equivalentes malondialdeído (MDA) e carbonilação de proteínas de maneira equivalente ao grupo de animais não tratados. Conclusão: Verificou-se que os animais que foram submetidos a tolerância imunológica não apresentaram alteração na memória aversiva e de habituação bem como nos níveis de IL-1β e no dano oxidativo em tecido cerebral após receberam uma dose efetiva de LPS.

Foi conduzido experimento no Setor de Avicultura da Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal do Tocantins, este trabalho tem por objetivo caracterizar diferentes densidades de alojamento sobre as características do desempenho zootécnico de codornas japonesas em postura, a qualidade da casca do ovo e o perfil hematológico desses animais por meio de indicadores fisiológicos. Ao atingir o pico de postura as codornas foram pesadas e distribuídas pelo peso e postura nas unidades experimentais de acordo com o delineamento inteiramente casualizado, sendo quatro tratamentos e cinco repetições por tratamento. Sendo os tratamentos as quatro diferentes densidades de alojamentos: T1: 112,2 cm²/ave (10 aves por gaiola); T2: 102 cm²/ave (11 aves por gaiola); T3: 93,5 cm²/ave (12 aves por gaiola) e T4: 86,31 cm²/ave (13 aves por gaiola), totalizando 230 aves. As aves foram avaliadas durante o período de postura. Foram 125 dias experimentais divididos em cinco períodos de 25 dias, analisadas em esquema fatorial (Tempo x Densidade) para as análises sanguíneas. Foram avaliadas as seguintes variáveis: porcentagem de eritrócitos (Hct, %), hemoglobina (g/dL), contagem total de células brancas (CTL, µL); relação heterófilos/linfócitos (H/L); índices hematimétricos: volume corpuscular médio (VCM, µm3), hemoglobina corpuscular média (HCM, pg/cel) e concentração da hemoglobina corpuscular média (CHCM, g/dL); qualidade da casca do ovo: espessura de casca (EC, mm), gravidade específica (GE, g/cm3), peso da casca (PC, g); e o desempenho produtivo das aves: consumo de ração (CR, g/ave/dia), taxa de postura (TP, %), peso dos ovos (PO, g), massa de ovos (MO, g), conversão por dúzia (CDz, g) e massa de ovos (CMO, g). Para as variáveis: CR, CMO, CDz, MO, TP, não houve efeito entre os diferentes tratamentos (p˃0,05), assim como para as variáveis da qualidade da casca do ovo (p˃0,05) também não ocorreram efeitos entre os diferentes tratamentos, a variável PO houve efeito (p=0,023). A relação heterófilo/linfócito houve efeito significativo (p=0,01), portanto pode ser afetada conforme o tempo e a densidade de alojamento for aumentado. O volume corpuscular médio ocorreu efeito (p=0,0001) obteve influência do tempo, assim como a contagem total leucocitária (p=0,001) também aumentou até o terceiro período de coleta conforme o período de alojamento avançou, porém no último período de alojamento houve um decaimento. As densidades não interferem no desempenho e na qualidade da casca do ovo. A relação H/L pode ser afetada conforme o tempo e a densidade de alojamento for aumentado. O volume corpuscular médio obteve influência do tempo, assim como a contagem total leucocitária também aumentou conforme o período de alojamento avançou. O melhor tratamento foi de 102 cm² /ave por não diferir do tratamento controle nos parâmetros sanguíneos. Recomenda-se alojar codornas japonesas em postura em densidades de 86,31cm²/ave quando trata-se de desempenho. An experiment was conducted in the Poultry Sector of the School of Veterinary Medicine and Zootechnics of the Federal University of Tocantins, this work aims to characterize different densities of housing on the characteristics of the zootechnical performance of Japanese quails in laying, the quality of the egg shell and the hematological profile of these animals through physiological indicators. Upon reaching the peak of laying, the quails were weighed and distributed by weight and laying in the experimental units according to the completely randomized design, with four treatments and five repetitions per treatment. The treatments are the four different densities of accommodation: T1: 112.2 cm² / bird (10 birds per cage); T2: 102 cm² / bird (11 birds per cage); T3: 93.5 cm² / bird (12 birds per cage) and T4: 86.31 cm² / bird (13 birds per cage), totaling 230 birds. The birds were evaluated during the laying period. There were 125 experimental days divided into five periods of 25 days, analyzed in a factorial scheme (Time x Density). After the batch registers 5% of production total white percentage of erythrocytes (Hct,%), hemoglobin (g / dL), total white cell count (CTL, µL); heterophil / lymphocyte ratio (H / L); hematimetric indices: mean corpuscular volume (MCV, µm3), mean corpuscular hemoglobin (HCM, pg / cell) and concentration of mean corpuscular hemoglobin (CHCM, g / dL); egg shell quality: shell thickness (ST), specific gravity (SG), shell weight (SW); and the productive performance of birds: feed consumption (FC), laying rate (RL), egg weight (WE), egg mass (ME), conversion per dozen (CDz) and egg mass (CMO). The variables (CR, g / bird / donate), (CMO, g), and (CDz, g), (MO, g), (TP,%) there was no effect between the different treatments (p˃0.05) , as well as the eggshell quality variables (p˃0.05) there was also no effect between the different treatments, the variable (PO, g) there was an effect (p = 0.023). The heterophile / lymphocyte relationship had a significant effect (p = 0.01), so it can be affected as time and density of accommodation are increased. The mean corpuscular volume effect (p = 0.0001) was influenced by time. Just as the total leukocyte count (p = 0.001) also increased until the third collection period as the accommodation period progressed, however in the last accommodation period there was a decay. The densities do not interfere with the performance and quality of the eggshell. The H / L ratio can be affected as time and housing density are increased. The mean corpuscular volume was influenced by time. Just as the total leukocyte count also increased as the accommodation period progressed. The best treatment was 102 cm² / bird because it did not differ from the control treatment. It is recommended to house Japanese quail laying at densities of 86.31cm² / bird when it comes to performance.

Introduction: Since its implementation, the vaccination process has been questioning and criticizing its effectiveness, immunological functioning and results. From this, even though it is an efficient public policy in the fight against infectious diseases, we are aware of the non-achievement, which harms the prevention of disease morbidity and mortality. Methods: Bibliographical review using as databases the Google academic, Medline, Center for Biotechnology Information (PubMed) and the electronic library Scientific Electronic Library Online (SciELO). The search was carried out of articles published between 2008 and 2018, in Portuguese and / or English. Development: The efficacy of the vaccine is based on the immune response of the host against an antigen can induce a memory T cell response over time. There are several reports of cases of autoimmune diseases following vaccination, however, due to the limited number of cases, different classifications of the symptoms and the disease latency period, all attempts at anti-vaccination studies have so far failed to achieve a connection plausible. Conclusion: Therefore, the population should seek information from reliable sources and from government agencies. In addition, health professionals, education managers and the media should suggest an important strategy for maintaining vaccine coverage and addressing vaccine refusal ethically., Introdução: O processo de vacinação enfrenta, desde a sua implementação, questionamentos e críticas acerca de sua efetividade, funcionamento imunológico e resultados. À partir disso, mesmo sendo uma política pública eficiente no combate de doenças infectocontagiosas, tem-se a consciência da não realização da mesma, o que prejudica na prevenção da morbimortalidade das doenças infectocontagiosas. Métodos: Revisão bibliográfica utilizando como bases de dados o Google acadêmico, Medline, Center for Biotechnology Information (PubMed) e na biblioteca eletrônica Scientific Eletronic Library Online (SciELO). A busca foi realizada em artigos publicados no período de 2008 a 2018, em português e/ou inglês. Desenvolvimento: A eficácia da vacina baseia-se na resposta imune do hospedeiro contra um antígeno que possa induzir uma resposta da célula T de memória ao longo do tempo. Existem vários relatos de casos de doenças autoimunes após a vacinação; no entanto, devido ao número limitado de casos, as diferentes classificações dos sintomas e ao período de latência das doenças, todas as tentativas de estudos antivacinação, até o momento, não conseguiram uma correlação plausível. Conclusão: Portanto, a população deve buscar informações em fontes confiáveis e em órgãos governamentais. Além disso, profissionais da saúde, gestores da educação e a mídia devem sugerir estratégias importantes para manter as coberturas vacinais e abordar a recusa vacinal de forma ética.

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior A doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD) é uma das doenças crônicas mais frequentes no mundo. As limitações na compreensão de sua patogênese, especialmente nos estágios iniciais, impedem o desenvolvimento de ferramentas de diagnóstico mais eficazes e de novos tratamentos. No presente trabalho, mapeamos as alterações imunológicas no fígado durante os estágios iniciais da NAFLD em camundongos e em seres humanos, e propusemos um novo modelo animal de esteatose hepática inicial, que pode servir como uma plataforma para impulsionar os avanços no diagnóstico rápido e precoce auxiliando também nos métodos terapêuticos. Para tal, biópsias hepáticas de pacientes diagnosticados com NAFLD branda, foram coletadas para desenvolvimento de um perfil de expressão gênica, e camundongos foram alimentados com dieta high fat por curtos períodos para mimetizar a esteatose inicial. A resposta imune do fígado em camundongos foi investigada detalhadamente usando uma combinação de imagem intravital confocal, expressão gênica, isolamento celular, citometria de fluxo e ensaios de transplante de medula óssea. Sendo assim, foi possível observar grandes alterações imunológicas em humanos e camundongos nas fases iniciais da esteatose hepática. Em camundongos, essas alterações aumentaram significativamente a taxa de mortalidade por lesão hepática aguda induzida por drogas e também predispuseram os animais a infecções bacterianas. Além disso, a deleção de TLR4 tanto nas células imunológicas do fígado quanto nos hepatócitos reduziu a tolerância hepática, especialmente nas células de Kupffer, nos momentos iniciais de ingestão da dieta high fat. Dessa forma, concluímos que o sistema imunológico do fígado é capaz de sentir de maneira precoce o acúmulo de gordura hepático, gerando uma resposta bifásica ao consumo de dieta rica em gordura. Observamos ainda que as células do fígado parecem estar sendo primadas por ligantes de TLR4, o que confere ao fígado uma tolerância imunológica nas fases iniciais mas que a manutenção do insulto dietético pode levar a uma hiper-responsividade a lesões hepáticas agudas e a uma inabilidade em controlar infecções bacterianas. Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD) is one of the most frequent chronic disease in the world, and limitations in our understanding of its pathogenesis, especially in initial stages, are precluding the development of diagnosis tools and new treatments. Here we mapped the immunological changes in liver during the early stages of fatty liver disease in mice and humans, and proposed a novel mouse model of initial liver steatosis, which may serve as a platform to drive advances in rapid diagnosis and therapeutic fields. For that, liver biopsies from patients in early stages of NAFLD were collected to further profiling of gene expression, and mice received high fat diet for short periods to mimic initial steatosis. Liver immune response in mice was detailed investigated using a combination of confocal intravital imaging, gene expression, cell isolation, flow cytometry and bone marrow transplantation assays. We observed major immunologic changes in both humans and mice in the early phases of liver steatosis. In mice, these changes significantly enhanced mortality rate upon drug-induced liver injury and also predisposed mice to bacterial infections. Also, deletion of TLR4 in liver cells dampened liver tolerogenesis, especially in Kupffer cells, in the initial time points of dietary insult. In conclusion, liver immune system acts as a sentinel for early and minor changes in hepatic lipid content, mounting a biphasic response upon high fat diet insult. Priming of liver immune cells by gut-derived TLR4 ligands may add to liver tolerogenesis in initial phases, but continuous insults may drive hyper-responsiveness to damage and reduced ability to control infections.

Submitted by Ana Moreira (anadsmoreira@ufp.pt) on 2020-06-30T11:14:25Z No. of bitstreams: 1 PPG_28149.pdf: 993669 bytes, checksum: 23f3a3321eba48995de2cbcbb06eee1f (MD5) Approved for entry into archive by azevedo@ufp.pt (azevedo@ufp.pt) on 2020-07-14T08:45:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 PPG_28149.pdf: 993669 bytes, checksum: 23f3a3321eba48995de2cbcbb06eee1f (MD5) Made available in DSpace on 2020-07-14T08:45:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PPG_28149.pdf: 993669 bytes, checksum: 23f3a3321eba48995de2cbcbb06eee1f (MD5) Previous issue date: 2019-11-27

Made available in DSpace on 2019-10-03T17:32:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2019-08-01. Added 1 bitstream(s) on 2019-10-04T16:21:08Z : No. of bitstreams: 1 S2179-84512019000200343.pdf: 1401392 bytes, checksum: b7e87607936720a19f5819150b0b7514 (MD5) RESUMO A incidência de doenças neoplásicas mostra que a busca por tratamentos mais eficazes contra o câncer ainda é necessária. Além dos tratamentos padrão, como quimioterapia e radioterapia, novas modalidades de tratamento têm sido focadas nos recentes avanços na imunologia. Como pouco tem sido discutido sobre as implicações biológicas da quimioterapia em relação ao seu impacto tanto no sistema imunológico como em outras células normais e “saudáveis”, dedicamos o presente trabalho de modelagem matemática a fazê-lo. Primeiro, provamos a invariância da região na qual todas as variáveis de estado permanecem positivas (ou seja, o número de células cancerosas, células normais e células imunes, e também a quantidade de quimioterapia). Em seguida, analisamos o modelo em termos de estabilidade linear do sistema e estabelecemos uma condição necessária e suficiente para a estabilidade local do ponto de equilíbrio de cura. Além disso, simulamos alguns cenários envolvendo tanto o sistema imunológico quanto a quimioterapia, mostrando que uma estratégia de tratamento razoável ocorre quando estes são combinados adequadamente. ABSTRACT The incidence of neoplastic diseases shows that the search for more effective cancer treatments is still necessary. In addition to standard treatments such as chemo- and radiotherapy, new treatment modalities have been focused in recent advances in immunology. Since little has been discussed about the biological implications of chemotherapy with respect to its impact on the immune system and on the other normal, “healthy” cells, we devote the present mathematical modeling work to do so. First, we prove the invariance of the region where all state variables remain positive (i.e., the number of cancer cells, normal cells and immune cells, and also the amount of chemotherapy). Afterward, we analyze the model in terms of the linear stability of the system and establish a necessary and sufficient condition for the local stability of the cure equilibrium point. Moreover, we simulate some scenarios involving both the immune system and chemotherapy, showing that a reasonable treatment strategy occurs when these are combined suitably. UNESP Programa de Pós-graduação em Biometria USP Departamento de Computação e Matemática Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras UNESP Departamento de Bioestatística Instituto de Biociências UNICAMP Faculdade de Tecnologia UNESP Programa de Pós-graduação em Biometria UNESP Departamento de Bioestatística Instituto de Biociências

Submitted by Boris Flegr (boris@uerj.br) on 2021-01-05T18:50:03Z No. of bitstreams: 1 Pedro Jose Falci Alves - Dissertacao.pdf: 3235033 bytes, checksum: fb8efb4eb2d3a76ae0c68c1ffa63e64e (MD5) Made available in DSpace on 2021-01-05T18:50:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pedro Jose Falci Alves - Dissertacao.pdf: 3235033 bytes, checksum: fb8efb4eb2d3a76ae0c68c1ffa63e64e (MD5) Previous issue date: 2019-09-03 Exercise can bring health benefits through responses and adaptations promoted in various biological systems, including the immune system. Moderate intensity exercise can reduce the risk of infection by intracellular microorganisms by directing the immune response to a Th1 type pattern. Strenuous physical exercise can lead to immune cell targeting, causing an immune window that can make the body susceptible to infection through the prevalence of a Th2-type response. This study investigates the effect of a single exercise session, acute, moderate or strenuous, on nitric oxide production by peritoneal macrophages of Balb / C mice. The mice were divided into 3 groups for acute exercise (sedentary control, moderate exercise and strenuous exercise). The acute exercise consisted of a single moderate session and a single strenuous session. A single session of moderate (acute) exercise promoted a significant increase in NO production in LPS-stimulated macrophages infected with Leishmania major or Leishmania braziliensis. A single session of moderate and strenuous exercise promoted a decrease in the Leishmania / Macrophage association index in in vitro Leishmania major and Leishmania braziliensis infection. These data suggest that acute exercise promotes an improvement in macrophage microbicidal capacity, which facilitates the resolution of infections by intracellular microorganisms, but further studies are needed to better understand such mechanisms O exercício físico pode trazer benefícios para saúde através de respostas e adaptações promovidas nos diversos sistemas biológicos, incluindo o sistema imunológico. Exercício físico de intensidade moderada pode reduzir o risco de infecção por microrganismos intracelulares, através do direcionamento da resposta imune para um padrão do tipo Th1. Exercício físico extenuante pode gerar um direcionamento das células imunes, causando uma janela imunológica , podendo deixar o organismo suscetível a infecções, através da prevalência de uma resposta do tipo Th2. Este estudo investiga o efeito de uma única sessão de exercício, agudo, moderado ou extenuante, na produção de óxido nítrico por macrófagos peritoneais de camundongos Balb/C. Os camundongos foram divididos em 3 grupos para o exercício agudo (controle sedentário, exercício moderado e exercício extenuante). O exercício agudo consistiu de uma única sessão moderada e uma única sessão extenuante. Uma única sessão de exercício moderado (agudo) promoveu aumento significativo na produção NO em macrófagos estimulados por LPS e infectados por Leishmania major ou por Leishmania braziliensis. Uma única sessão de exercício moderado e extenuante promoveu a diminuição do índice de associação Leishmania/Macrófago na infecção in vitro por Leishmania major e Leishmania braziliensis. Estes dados sugerem que exercício físico agudo promove uma melhora na capacidade microbicida de macrófagos, o que facilita a resolução de infecções por microrganismos intracelulares, porém, há a necessidade de mais estudos para melhor entender tais mecanismos

Citral is a monoterpenoid that occurs in essential oils of different plant species used in folk medicine, which also showed promising effects when added to fish diets. However, in spite of the numerous biological activities demonstrated for essential oils, in vivo studies demonstrating the effective benefit of citral are insufficient, especially with regard to the increase of animal production. In Brazil, the growing interest in fish farming and good prospects for growth of commercial fish production increased the search for a healthier diet for the health of these animals. Thus, the objective of this study was to evaluate if the citral added to the diet has beneficial effects on the oxidative profile and innate immunity in juveniles of Centropomus undecimalis (common snook and Mugil liza (mullet). Biochemical markers (alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase activity) and liver histology (tissue appearance and lobar center vein morphometry, sinusoidal capillaries and hepatocytes) were determined to evaluate the hepatic toxicity of the tested compound. Citral was commercially obtained and added to the diet of both species for 45 days at different concentrations (0, 0.44, 0.88, 1.76mg kg of diet) giving four experimental groups. Temperature, pH and dissolved oxygen were verified daily, while alkalinity, ammonia and nitrite were measured weekly throughout the experimental period. At the end of the experiment, ten fish from each tank were anesthetized and euthanized by section of the spinal cord to collect blood and tissues. Although in vitro studies have shown that citral has antioxidant capacity and benefical effects with the use of essential oils composed mainly of this monoterpenoid, our results indicate that for common snook the dietary addition of citral does not improve its health conditions. Although the compound under evaluation did not promote hepatic toxicity, it promoted lipoperoxidation in gills and hyperactivation of the complement system. The activity of the enzymes superoxide dismutase, catalase and glutathione-S-transferase increased in response to the oxidative damage evidenced. However, 10 for mullet the incorporation of citral in the diet was beneficial, improving oxidative parameters (reduced lipid peroxidase activity, increased the activity of superoxide dismutase, glutathione peroxidase and glutathione-S-transferase, increased levels of non-protein thiols), without altering the activity of enzymes and histological parameters of the liver. There was a decrease in myeloperoxidase activity in the two species under study. The data presented demonstrated that the physiological differences between the two species have a direct influence on citral activity, which in turn is not indicated as a dietary additive for C. undecimalis, but is recommended to supplement the M. liza diet at the concentration of 1.76 g per kg of diet. O citral é um monoterpenoide que ocorre em óleos essenciais de diferentes espécies de plantas utilizadas na medicina popular, que também apresentaram atividades benéficas quando adicionados à dieta de peixes. Contudo, apesar das inúmeras atividades biológicas já demonstradas para óleos essenciais, estudos ―in vivo‖ demonstrando o benefício efetivo do citral são insuficientes, especialmente no que diz respeito ao incremento da produção animal. No Brasil, o crescente interesse pela piscicultura e boas perspectivas de crescimento da produção comercial de peixes resulta na busca de uma dieta mais saudável para a saúde desses animais. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar se o citral adicionado à dieta possui efeitos benéficos sobre o perfil oxidativo e imunidade inata em juvenis de Centropomus undecimalis (robalo-flecha) e Mugil liza (tainha). Para avaliar a toxicidade hepática do composto testado, foram determinados marcadores bioquímicos (atividade de alanina aminotransferase e aspartato aminotransferase) e histologia hepática (aspecto do tecido e morfometria da veia centro lobular, capilares sinusoides e hepatócitos). O citral foi obtido comercialmente e adicionado à dieta de ambas espécies por 45 dias em diferentes concentrações (0; 0.44; 0.88; 1.76 g kg dieta) originando quatro grupos experimentais. Temperatura, pH e oxigênio dissolvido foram verificados diariamente, enquanto que alcalinidade, amônia e nitrito foram mensurados semanalmente durante todo o período experimental. Ao término do experimento, dez peixes de cada tanque foram anestesiados e eutanasiados por secção da medula espinhal para coleta de sangue e tecidos. Embora estudos ―in vitro” já tenham demonstrado que o citral apresenta capacidade antioxidante e benefícios com a utilização de óleos essenciais compostos majoritariamente por este monoterpenoide, nossos resultados indicam que para o robalo-flecha a adição de citral na dieta não melhora suas condições de saúde. Apesar do composto em avaliação não promover toxicidade hepática, promoveu lipoperoxidação em brânquias e hiperativação do sistema complemento. 8 A atividade das enzimas superóxido dismutase, catalase e glutationa-S-transferase aumentou em resposta ao dano oxidativo evidenciado. Contudo, para a tainha a incorporação do citral na alimentação foi benéfica, melhorando parâmetros oxidativos (reduziu lipoperoxidação; aumentou a atividade de superóxido dismutase, glutationa peroxidase e glutationa-S-tranferase; aumentou níveis de tióis não proteicos), sem alterar a atividade das enzimas e paramêtros histológicos do fígado. Houve diminuição da atividade de mieloperoxidase nas duas espécies em estudo. Os dados apresentados demonstram que as diferenças fisiológicas entre as duas espécies têm influência direta sobre a atividade do citral, que por sua vez não é indicado como aditivo na dieta para C. undecimalis, mas é recomendado para complementar a dieta M. liza na concentração de 1.76 g por kg de dieta.

Desde 1937 está disponível uma vacina eficaz contra febre amarela. Ainda assim, questões relativas a seu uso permanecem pouco entendidas, como, por exemplo, a dose ideal capaz de conferir imunidade contra a doença, a necessidade de dose reforço, o esquema ideal de vacinação para indivíduos imunocompetentes, imunossuprimidos, e crianças, dentre outras questões. O objetivo deste trabalho é demonstrar que ferramentas computacionais podem ser utilizadas para simular diferentes cenários referentes à vacinação contra a febre amarela e à resposta imune dos indivíduos a esta vacina, auxiliando assim na busca pelas respostas de algumas destas questões em aberto. Neste contexto, este trabalho apresenta um modelo computacional da resposta imune humana à vacinação contra a febre amarela. O modelo leva em conta importantes células e moléculas do sistema imune humano como células apresentadoras de antígeno, linfócitos B e T, células de memória e anticorpos. O modelo foi capaz de reproduzir os níveis de anticorpos obtidos experimentalmente em diferentes cenários relativos à vacinação, permitindo uma validação quantitativa com dados experimentais. Adicionalmente foram reproduzidos qualitativamente alguns comportamentos da resposta imune descritos na literatura. Foram simuladas as respostas imunes de indivíduos adultos primovacinados, revacinados e portadores de doenças autoimunes sob uso de terapia imunomoduladora. Além disso, reproduziu-se o comportamento observado na primovacinação de crianças e os níveis de anticorpos produzidos pela administração de doses menores de vacinas, comparados aos obtidos pela dose referência. An effective yellow fever vaccine has been available since 1937. Nevertheless, questions regarding its use remain poorly understood, such as the ideal dose to confer immunity against the disease, the need for booster dose, the optimal immunization schedule for immunocompetent, immunosuppressed, and children, among other issues. The objective of this work is to demonstrate that computational tools can be used to simulate different scenarios regarding yellow fever vaccination and the immune response of the individuals to this vaccine, thus assisting the response of some of these open questions. In this context, this work presents a computational model of the human immune response to vaccination against yellow fever. The model takes into account important cells and molecules of the human immune system such as antigen presenting cells, B and T lymphocytes, memory cells and antibodies. The model was able to replicate the levels of antibodies obtained experimentally in different vaccination scenarios, allowing a quantitative validation with experimental data. In addition, some behaviors of the immune response described in the literature were reproduced qualitatively. The immune responses of primovacinated, revaccinated adult individuals with autoimmune diseases under immunomodulatory therapy were simulated. In addition, the behavior observed in the primary vaccination of children and the levels of antibodies produced by the administration of smaller doses of vaccines were reproduced, compared to those obtained by the reference dose.

A vitamina D é um hormônio essencial para o organismo, podendo ser obtida da dieta ou, principalmente, gerada pela pele após exposição à luz solar ultravioleta B. Na sua forma ativa (1,25(OH)2D) ela controla a absorção de cálcio e fósforo do intestino para a corrente sanguínea e participa de diversos processos celulares e fisiológicos. A ligação da 1,25(OH)2D ao receptor da vitamina D (VDR) presente em diversas células, como as células do sistema imunológico, induz a transcrição de genes que podem, por exemplo, modular a resposta imune inata e adquirida. A deficiência de vitamina D ou do VDR é associada a problemas de saúde como desordens esqueléticas, hipertensão, doenças cardiovasculares, diabetes mellitus, dislipidemias, doenças autoimunes e doenças infecciosas. Neste sentido, a suplementação com vitamina D tem sido proposta como uma possível medida preventiva, podendo ser aplicada em muitas patologias, em especial na tuberculose. Principal causa de morte por um único agente infeccioso, a tuberculose é responsável por cerca de 1,3 milhões de óbitos por ano no mundo. Publicações recentes apontam efeitos diversos da vitamina D na resposta imune inata e adquirida. A 1,25(OH)2D3 na presença do interferon (IFN)-γ é capaz de aumentar a atividade bactericida do macrófago contra o M. tuberculosis, aumentando a produção de peptídios antimicrobianos e estimulando a autofagia, favorecendo assim a lise de bacilos localizados em fagossomos. Por outro lado, a vitamina D em linfócitos T mostra efeito tolerogênico que favorece o controle de respostas inflamatórias excessivas. Neste trabalho de revisão são apresentados estudos recentes envolvendo efeitos da vitamina D na resposta imune inata e adquirida. Além disso, considerações sobre deficiência de vitamina D e maior risco de contrair tuberculose, e efeitos contrastantes da suplementação com vitamina D na prevenção e tratamento da TB, são discutidos.

Submitted by Sheila MONTEIRO (sheila.monteiro@ufma.br) on 2019-06-04T18:07:04Z No. of bitstreams: 1 PAULA-Albuquerque.pdf: 2254779 bytes, checksum: eebed686bde307112573e393642c6968 (MD5) Made available in DSpace on 2019-06-04T18:07:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PAULA-Albuquerque.pdf: 2254779 bytes, checksum: eebed686bde307112573e393642c6968 (MD5) Previous issue date: 2019-04-24 Fundação de Amparo à Pesquisa e ao Desenvolvimento Científico e Tecnológico do Maranhão - FAPEMA Cyclophosphamide is a drug widely used in the treatment of cancers. Due to its non-specific antiproliferative action, it also acts as an immunosuppressant, an effect that is present in patients treated by this drug. In this context, it is opportune to develop preclinical models of immunosuppression concomitant with the experimental ones of cancer, for several purposes. Thus, the objective of this study was to characterize a model of immunosuppression with cyclophosphamide in mice with or without Ehrlich tumor. For this, male mice of the Swiss strain, aged 3 to 4 months, received in the right ear 5x105 Ehrlich tumor cells or PBS (20μL). From the second day after the inoculum, the animals received cyclophosphamide (25mg/kg) daily, intraperitoneally, for 10 days. Animals and feed were weighed at the beginning and at the end of treatment. On the twelfth day after the inoculum, the animals were euthanized and the ears were removed for macroscopic and histological analysis. In addition, the cells of the blood, peritoneum, bone marrow and spleen were quantified. Splenic immunophenotyping and evaluation of hydrogen peroxide (H2O2) were also performed. Initially the antitumor effect of cyclophosphamide was confirmed in the model used and the reduction of inflammatory infiltrate and necrosis in the ears with tumor was confirmed. As an immunosuppressive effect, this drug caused reduction of feed intake, animal weight, leucopenia, medullary aplasia and reduced the number of splenocytes. Cyclophosphamide, alone, induced a decrease in the number of B lymphocytes in the spleen. However, in animals with tumor, cyclophosphamide induced a decrease in all analyzed populations. In addition, there was a decrease in B lymphocytes, activated cytotoxic T, NKT cells and macrophages when compared to tumor-bearing and tumor-free animals, both treated by this drug. Although cyclophosphamide also reduced the cells in the peritoneum, it was verified that the functional capacity of these cells was not affected, since there was a high production of H2O2 after stimulation with PMA. These results allow us to conclude that the protocol characterized in this study can be used as an efficient pre-clinical model of immunosuppression in animals with or without tumor, considering its effects on the cellularity of lymphoid organs and peripheral tissues. A ciclofosfamida é um fármaco muito utilizado no tratamento de cânceres. Devido a sua ação antiproliferativa inespecífica, também atua como imunossupressor, efeito esse que está presente em pacientes tratados por essa droga. Nesse contexto, se faz oportuno o desenvolvimento de modelos pré-clínicos de imunossupressão concomitante aos experimentais de câncer, para diversos fins. Assim, o objetivo deste estudo foi caracterizar um modelo de imunossupressão com ciclofosfamida em camundongos portadores ou não de tumor de Ehrlich. Para isso, camundongos machos da linhagem Swiss, com idade entre 3 e 4 meses, receberam na orelha direita, 5 x 105 células do tumor de Ehrlich ou PBS (20μL). A partir do segundo dia após o inóculo, os animais receberam, ou não, ciclofosfamida (25mg/Kg), diariamente, via intraperitoneal, durante 10 dias. Os animais e a ração foram pesados no início e no término do tratamento. No décimo segundo dia após o inóculo, os animais foram eutanasiados e as orelhas foram retiradas para análise macroscópica e histológica. Além disso, foram quantificadas as células do sangue, peritônio, medula óssea e baço. Foi realizada, ainda, a imunofenotipagem esplênica e a avaliação de peróxido de hidrogênio (H2O2). Inicialmente foi confirmado o efeito antitumoral da ciclofosfamida no modelo utilizado e a diminuição do infiltrado inflamatório e da necrose nas orelhas com tumor. Como efeito imunossupressor, esse fármaco causou redução do consumo de ração, peso dos animais, leucopenia, aplasia medular e reduziu o número de esplenócitos. A ciclofosfamida, isoladamente, induziu a diminuição do número de linfócitos B no baço. Porém, nos animais com tumor, a ciclofosfamida induziu a diminuição de todas as populações analisadas. Além disso, houve a diminuição de linfócitos B, T citotóxicos ativados, células NKT e macrófagos quando comparados os animais com tumor aos sem tumor, ambos tratados por esse fármaco. Apesar da ciclofosfamida também ter reduzido as células no peritônio, verificou-se que a capacidade funcional dessas células não foi afetada, já que houve uma alta produção de H2O2 após estimulo com PMA. Esses resultados permitem concluir que, o protocolo caracterizado neste estudo pode ser utilizado como um modelo pré-clínico eficiente de imunossupressão em animais com ou sem tumor, considerando seus efeitos na celularidade dos órgãos linfóides e tecidos periféricos.

Fish immune systems have become the subject of several studies due to the growing development of aquaculture and fisheries, and the demand for healthy produce for human consumption. Among the parasites responsible for diseases in fish farming, helminths stand out because they cause infections in farmed fish and decrease food conversion, zootechnical performance and meat quality. In the present review, the components that participate in the innate and adaptive immune responses of teleost fish that have so far been described are presented in order to summarize the defenses that these hosts have recourse to, in combating different groups of helminth parasites. Resumo O sistema imune dos peixes tem se tornado alvo de muitas pesquisas devido ao crescente desenvolvimento da aquicultura e da pesca, assim como a exigência de obtenção de animais saudáveis para o consumo humano. Dentre os parasitos responsáveis pelas enfermidades na piscicultura, os helmintos destacam-se por causarem infecções nos peixes cultivados e por ocasionarem diminuição da conversão alimentar, do desempenho zootécnico e da qualidade da carne. Nesta revisão, apresentaremos os componentes que participam das respostas imunes inata e adaptativa dos peixes teleósteos já descritos, a fim de sintetizar à quais defesas o hospedeiro recorre frente aos diferentes grupos de parasitos.

Glutamine is a conditionally essential amino acid widely used in sports nutrition, especially because of its immunomodulatory role. Notwithstanding, glutamine plays several other biological functions, such as cell proliferation, energy production, glycogenesis, ammonia buffering, maintenance of the acid-base balance, among others. Thus, this amino acid began to be investigated in sports nutrition beyond its effect on the immune system, attributing to glutamine various properties, such as an anti-fatigue role. Considering that the ergogenic potential of this amino acid is still not completely known, this review aimed to address the main properties by which glutamine could delay fatigue, as well as the effects of glutamine supplementation, alone or associated with other nutrients, on fatigue markers and performance in the context of physical exercise. PubMed database was selected to examine the literature, using the keywords combination “glutamine„ and “fatigue„. Fifty-five studies met the inclusion criteria and were evaluated in this integrative literature review. Most of the studies evaluated observed that glutamine supplementation improved some fatigue markers, such as increased glycogen synthesis and reduced ammonia accumulation, but this intervention did not increase physical performance. Thus, despite improving some fatigue parameters, glutamine supplementation seems to have limited effects on performance.

Horses are extremely dependent on the correct functioning of the digestive system for energy production and the performance of their physiological functions. The intestinal microbiota plays a key role in maintaining health, being related to the modulation of the immune system, protection against pathogenic microorganisms and also for obtaining nutrients. Due to the importance of the microbiota in maintaining health from the beginning of life, this review aims to address the early composition, development and factors that influence the intestinal microbiota in foals. A qualitative review was carried out in the main research databases. Data referring to the early microbial colonization suggest that it occurs since intrauterine life, despite the fact that at birth, the foals acquire a large part of the microorganisms that will form its microbiota. The main phyla involved in this process are Proteobacteria, Firmicutes, Actinobacteria and Bacteroidetes, which are aquired from a combination of bacteria present in the feces, vagina and other maternal environments. From birth until the first weeks of life, the microbiota gradually changes due to several factors, which include the composition of food, coprophagy, exposure to different environments and medications. The foal's microbiota becomes more stable in the first and second months of life. It is suggested that changes in the composition (dysbiosis) and diversity of the different phyla are a risk factor for the development of diseases, since the microbiota directly influences the immune system. From advances in sequencing technologies it was possible to investigate the components and factors associated with early colonization of microbiota in horses as well as factors related to the development of dysbiosis and disease. Nevertheless, many facts are still unclear and should be adressed in the future. Los equinos son animales que dependen extremadamente del correcto funcionamiento del sistema digestivo para la producción de energía y el desempeño de sus funciones fisiológicas. La microbiota intestinal tiene un papel fundamental en el mantenimiento de la salud, estando vinculada tanto a la modulación del sistema inmunológico y la protección frente a microorganismos patógenos como a la obtención de nutrientes. Debido a la importancia de la microbiota en el mantenimiento de la salud desde el inicio de la vida, esta revisión tiene como objetivo abordar la composición inicial, el desarrollo y los factores que influyen en el equilibrio de la microbiota intestinal en los potrillos. Se realizó una revisión cualitativa de trabajos que abordan el tema en las principales bases de investigación. Los datos referentes a la colonización microbiana inicial sugieren que se da desde el período de la vida intrauterina, a pesar de estar al nacer, momento en el que el potro adquiere gran parte de los microorganismos que formarán su microbiota. Los principales phyla involucrados en este proceso son Proteobacteria, Firmicutes, Actinobacteria y Bacteroidetes, provenientes de una combinación de bacterias presentes en las heces, vagina y otros ambientes maternos. Desde el nacimiento hasta las primeras semanas de vida, la microbiota cambia gradualmente debido a varios factores, que incluyen la composición de los alimentos, la coprofagia, la exposición a diferentes ambientes y medicamentos. La microbiota del potro se vuelve más estable en el primer y segundo mes de vida. Se sugiere que los cambios en la composición (disbiosis) e diversidad de los diferentes phyla son un factor de riesgo para el desarrollo de enfermedades, ya que la microbiota influye directamente en el sistema inmunológico. A partir de los avances en las tecnologías de secuenciación, fue posible investigar mejor los componentes y factores asociados a la colonización inicial de la microbiota en equinos, así como los factores relacionados con el desarrollo de disbiosis y enfermedades. A pesar de esto, muchos hechos sobre el tema aún no se han aclarado y merecen ser estudiados en el futuro. Os equinos são animais extremamente dependentes do correto funcionamento do sistema digestivo para a produção de energia e o desempenho das suas funções fisiológicas. A microbiota intestina tem papel fundamental na manutenção da saúde, estando ligada tanto a modulação do sistema imune e proteção contra microrganismos patogênicos quanto com a obtenção de nutrientes. Devido a importância da microbiota na manutenção da saúde desde o início da vida, essa revisão tem por objetivo abordar a composição inicial, desenvolvimento e os fatores que influenciam no equilíbrio da microbiota intestinal em potros. Foi realizada uma revisão qualitativa de trabalhos que abordam o assunto nas principais bases de pesquisa. Dados referentes a colonização microbiana inicial sugerem que esta ocorra desde o período de vida intrauterina, apesar de ser no parto, o momento em que o potro adquire grande parte dos microoganismos que formarão sua microbiota. Os principais filos envolvidos nesse processo são Proteobacteria, Firmicutes, Actinobacteria and Bacteroidetes, provenientes de uma combinação de bactérias presentes nas fezes, vagina e outros ambientes maternos. A partir do nascimento até as primeiras semanas de vida a microbiota muda gradualmente devido a diversos fatores, os quais incluem a composição da alimentação, coprofagia, exposição a diferentes ambientes e medicações. A microbiota do potro se torna mais estável no primeiro e segundo mês de vida. É sugerido que alterações na composição (disbiose) e diversidade dos diferentes filos são um fator de risco para o desenvolvimento de doenças, uma vez que a microbiota influencia diretamente no sistema imune. A partir dos avanços nas tecnologias de sequenciamento foi possível investigar melhor os componentes e fatores associados a colonização inicial da microbiota nos equinos tanto quanto fatores correlacionados ao desenvolvimento de disbiose e doenças. Apesar disso, muitos fatos sobre o assunto ainda não foram esclarecidos e merecem ser estudados no futuro.

This study aimed to evaluate the effects of different stocking densities on the performance, eggshell quality, surface body temperature and hematological parameters of Japanese laying quails based on physiological indicators of animal welfare. Two hundred and thirty seven-week-old Japanese quails were used in this experiment. The quails were completely randomized to four stocking densities: 112.2 (T1), 102 (T2), 93.5 (T3), and 86.31 (T4) cm²/quail and five replicates each. Hematological parameters were analyzed as a 4x4 factorial design (stocking density X time) over four periods of blood sampling (25, 50, 75, and 100 days). To obtain the body surface temperature (Ts, °C) three thermograms (head, core and shin) were captured from each repetition per plot (2 repetitions per experimental plot) every 25 days (25, 50, 75, and 100 days). Feed intake, feed conversion per egg mass, feed conversion per dozen eggs, egg mass, egg production rate, and eggshell quality-related variables were not affected by treatments. However, egg weight (p = 0.023) and core temperature (p = 0.003) were influenced by different cage stocking densities. The heterophil/lymphocyte ratio increased (p = 0.01) with increasing time and stocking density. The mean corpuscular volume (p = 0.0001) as well as the total leukocyte count (p = 0.001) increased until the third blood sampling period (75 days) and then decreased in the last period. Different stocking densities do not interfere with the performance and eggshell quality of Japanese quails. However, the hematological parameters and head temperature are affected by different cage stocking densities and time. Este estudio tuvo como objetivo evaluar los efectos de diferentes densidades de vivienda en el desempeño, calidad de la cáscara de huevo, temperatura corporal superficial y parámetros hematológicos de codornices japonesas ponedoras basados en indicadores fisiológicos del bienestar animal. En este experimento se utilizaron 230 codornices japonesas de la séptima semana de edad. Las aves se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos experimentales 112.2 (T1), 102 (T2), 93.5 (T3) y 86.31 (T4) cm² / codorniz según el diseño completamente aleatorizado, con cinco repeticiones. Los análisis hematológicos se analizaron en un esquema factorial 4x4 (Densidad x Tiempo) dividido en cuatro períodos de recolección de sangre (25, 50, 75 y 100 días). Para obtener la temperatura de la superficie corporal (Ts, ° C) Se capturaron tres termogramas (cabeza, núcleo y canela) de cada repetición por parcela (2 repeticiones por parcela experimental) a los 25, 50, 75 y 100 días. Consumo de alimento, conversión por masa de huevos, conversión por docena de huevos, masa de huevos, la tasa de puesta de codornices y las variables de calidad de la cáscara del huevo no mostraron ningún efecto entre los diferentes tratamientos, los pesos de los huevos fueron influenciados por las diferentes densidades de alojamiento (p=0.023), así como la temperatura central de la codorniz (p=0,003). La relación heterófilo / linfocito tuvo un efecto significativo (p=0,01), por lo tanto, puede verse afectado a medida que aumenta el tiempo y la densidad de alojamiento. El volumen corpuscular medio (p=0,0001), así como el recuento total de leucocitos (p=0,001) aumentaron hasta el tercer período de recolección (75 días), sin embargo, en el último período de acomodación hubo una disminución. Las densidades no interfieren con el rendimiento y la calidad de la cáscara de los huevos de codorniz japonesa. Sin embargo, los parámetros hematológicos y la temperatura de la cabeza de la codorniz se ven alterados por el tiempo en función de las densidades de alojamiento. Este estudo teve como objetivo avaliar os efeitos de diferentes densidades de alojamento no desempenho, qualidade da casca do ovo, temperatura superficial corporal e parâmetros hematológicos de codornas japonesas poedeiras com base em indicadores fisiológicos de bem-estar animal. Duzentos e trinta codornas japonesas a partir da 7ª semana de idade foram utilizadas neste experimento. As aves foram divididas aleatoriamente em quatro grupos experimentais 112,2 (T1), 102 (T2), 93,5 (T3) e 86,31 (T4) cm²/codorna de acordo com o delineamento inteiramente ao acaso, com cinco repetições. As análises hematológicas foram analisadas em esquema fatorial 4x4 (Densidade x Tempo) divididos em quatro períodos de coleta do sangue (25, 50, 75 e 100 dias). Para obtenção da temperatura da superfície corporal (Ts, °C) Foram capturados três termogramas (cabeça, núcleo e canela) de cada repetição por parcela (2 repetições por parcela experimental) aos 25, 50, 75, and 100 dias. Consumo de ração, conversão por massa de ovos, conversão por dúzia de ovos, massa de ovos, taxa de postura das codornas e as variáveis da qualidade da casca dos ovos não apresentaram efeito entre os diferentes tratamentos, os pesos dos ovos foram influenciados pelas diferentes densidades de alojamento (p=0,023), assim como temperatura do núcleo da codorna (p=0.003). A relação heterófilo/linfócito apresentou efeito significativo (p=0,01), portanto pode ser afetada conforme o tempo e a densidade de alojamento for aumentado. O volume corpuscular médio (p=0,0001), assim como a contagem total leucocitária (p=0,001) aumentaram até o terceiro período de coleta (75 dias), porém, no último período de alojamento houve decréscimo. As densidades não interferem no desempenho e na qualidade da casca dos ovos de codornas japonesas. Todavia, os parâmetros hematológicos e a temperatura da cabeça da codorna são alterados pelo tempo em função das densidades de alojamento.

Aiming to determine the ration between digestible lysine and digestible threonine (Thr/Lys) for weaned piglets at 27 days, kept in the nursery under sanitary challenge conditions, 105 hybrid piglets with initial weight of 7.2 ± 0.41 kg, were distributed in randomized block design inside of five treatments (Thr/Lys ratios of 0.56; 0.63; 0.70; 0.77 and 0.84), seven replicates and three piglets per experimental unit. The Thr/Lys ratios did not affect (P>0.05) piglet performance. There was quadratic effect (P=0.02) of the Thr/Lys ratio on the protein/fat ratio and the estimated point of the bigger protein/fat ratio occurred with the Thr/Lys ratio of 0.68. The Thr/Lys ratio did not affect (P>0.05) the carcass parameters and serum urea levels, however, the liver and kidney weights raised with the increase (P=0.01) in Thr/Lys rate. The Thr/Lys ratio had a quadratic effect (P=0.01) on rate of plasma haptoglobin, Thr/Lys ratio was estimated at 0.74. It was concluded that the ratio between digestible threonine with digestible lysine for piglets from 27 to 48 days of age raised under sanitary challenge conditions is 0.74. Con el fin de determinar la relación entre treonina digestible y lisina digestible (Tre/Lis) para lechones destetados a los 27 días, mantenidos en vivero en condiciones de desafío sanitario, se utilizaron 105 lechones híbridos con un peso pro medio de 7,2 ± 0,41 kg. Los animales fueron distribuidos en un diseño experimental completamente al azar con cinco tratamientos (razones Tre/Lis de 0,56; 0,63; 0,70; 0,77 y 0,84), siete repeticiones y tres lechones por unidad experimental. Las proporciones Tre/Lis no afectaron (P> 0,05) el rendimiento de los lechones. Hubo un efecto cuadrático (P=0,02) de la relación Tre/Lis en la relación proteína/grasa y el punto estimado de la relación proteína/grasa más alta fue con la relación Tre/Lis de 0,68. La relación Tre/Lis no afectó los parámetros de la canal y los niveles de urea sérica, sin embargo, los pesos del hígado y riñón aumentaron linealmente (P=0,01) con el aumento de la tasa Tre/Lis. La relación Tre/Lis tuvo un efecto cuadrático sobre la tasa de haptoglobina plasmática, se estimó que la relación Tre/Lis era 0,74. Se concluyó que la relación entre treonina digestible y lisina digestible para lechones de 27 a 48 días de edad criados en condiciones de desafío para la salud es de 0,74. Com o objetivo de determinar a relação entre treonina digestível com lisina digestível (Tre/Lis) para leitões desmamados aos 27 dias, mantidos na creche em condições de desafio sanitário, 105 leitões híbridos com peso inicial de 7,2 ± 0,41 kg foram distribuídos em delineamento com blocos ao acaso com cinco tratamentos (relações Tre/Lis de 0,56; 0,63; 0,70; 0,77 e 0,84), sete repetições e três leitões por unidade experimental. As relações Tre/Lis não afetaram (P>0,05) o desempenho dos leitões. Houve efeito quadrático (P=0,02) da relação Tre/Lis sobre a taxa proteína/gordura e o ponto estimado de maior taxa proteína/gordura se deu com a relação Tre/Lis de 0,68. A relação Tre/Lis não afetou os parâmetros de carcaça e teores de uréia no soro, entretanto, os pesos do fígado e do rim aumentaram linearmente (P=0,01) com o aumento da taxa de Tre/Lis. A relação Tre/Lis teve efeito quadrático sobre a taxa de haptoglobina no plasma, estimou-se a relação Tre/Lis de 0,74. Concluiu-se que a relação entre treonina digestível com lisina digestível para leitões dos 27 dias aos 48 dias de idade criados sob condições de desafio sanitário é de 0,74.

Submitted by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2019-07-08T14:49:42Z No. of bitstreams: 1 ArthurCorreaResendeFerreiraDissertacao2019.pdf: 955328 bytes, checksum: aa510d848fdc0ec5abb39f3c35abba02 (MD5) Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2019-07-08T14:49:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ArthurCorreaResendeFerreiraDissertacao2019.pdf: 955328 bytes, checksum: aa510d848fdc0ec5abb39f3c35abba02 (MD5) Made available in DSpace on 2019-07-08T14:49:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ArthurCorreaResendeFerreiraDissertacao2019.pdf: 955328 bytes, checksum: aa510d848fdc0ec5abb39f3c35abba02 (MD5) Previous issue date: 2019-03-08 Klebsiella pneumoniae is a microorganism of great relevance in clinical context because it presents resistance to several antibiotics, besides possessing the ability to evade the immune system of the host. Antimicrobial therapy has encountered several barriers mainly due to the emergence of multiresistant strains, which reinforces the need to formulate new antimicrobial and adjuvant agents. Within this scenario, immunomodulatory peptides may be an alternative for the protection of the host immune system in this type of infection. Therefore, the objective of this work was to evaluate the immunomodulatory potential of the Synoeca-MP peptide against an in vitro model of K. pneumoniae, evaluating inflammatory mediators. Knowing that K. pneumoniae strains that present capsules have greater virulence and respond differently to treatments, the presence of this capsule was initially evaluated in the strains of K. pneumoniae (Kp2177569 and ATCC 13883) used in this study. Subsequently, cell viability, nitric oxide production and inflammatory mediators, such as tumor necrosis factor alpha and interleukin 10, were evaluated in RAW 264.7 cells, incubated with heat-inactivated K. pneumoniae antigens, Synoeca-MP and levofloxacin and the combination of both. In the presence of the antigens, the viability was maintained and the production of nitric oxide increased when compared to the control. It was observed that the presence of Synoeca-MP and levofloxacin did not alter the production of nitric oxide. However, when this association was incubated with the cells stimulated in the presence of K. pneumoniae antigen ATCC 13883 it was observed that TNF-?? levels were maintained, in addition to a reduction in IL-10 production. In this way, from the obtained results, the association is able to present a low modulating action of pro and anti-inflammatory mediators. Klebsiella pneumoniae ?? um microrganismo de grande relev??ncia em contexto cl??nico por apresentar resist??ncia a diversos antibi??ticos, al??m de possuir a capacidade de evadir o sistema imune do hospedeiro. A terapia antimicrobiana tem encontrado diversos entraves principalmente devido ao surgimento de cepas multirresistentes o que refor??a a necessidade de formula????o de novo agentes antimicrobianos e coadjuvantes. Dentro deste cen??rio, pept??deos imunomoduladores podem ser uma alternativa para a prote????o do sistema imune do hospedeiro nesse tipo de infec????o. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial imunomodulador do pept??deo Synoeca-MP frente a um modelo in vitro de K. pneumoniae, avaliando mediadores inflamat??rios. Sabendo que as cepas de K. pneumoniae que apresentam c??psula possuem maior virul??ncia e respondem diferentemente aos tratamentos, inicialmente avaliou-se a presen??a desta c??psula nas cepas de K. pneumoniae (Kp2177569 e ATCC 13883) utilizadas neste estudo. Posteriormente, avaliou-se a viabilidade celular, a produ????o de ??xido n??trico e mediadores inflamat??rios, como fator de necrose tumoral alfa e interleucina 10, em c??lulas RAW 264.7, incubadas com ant??genos de K. pneumoniae inativados pelo calor, Synoeca-MP e levofloxacina e a combina????o de ambos. Na presen??a dos ant??genos a viabilidade foi mantida e a produ????o de ??xido n??trico aumentou quando comparado ao controle. Observou-se que a presen??a da associa????o Synoeca-MP e levofloxacina n??o alterou a produ????o de ??xido n??trico. No entanto, quando esta associa????o foi incubada com as c??lulas estimuladas na presen??a de ant??geno de K. pneumoniae ATCC 13883 observou-se que os n??veis de TNF-?? foram mantidos, al??m de uma redu????o na produ????o de IL-10. Desta maneira, a partir dos resultados obtidos, a associa????o ?? capaz de apresentar uma baixa a????o moduladora de mediadores pr?? e anti-inflamat??rios.

Submitted by AUREA VERAS BARBOSA DE SOUZA (aurea.veras@unesp.br) on 2019-04-30T11:51:29Z No. of bitstreams: 1 AUREA VERAS - DISSERTAÇÃO (FINAL).pdf: 1863378 bytes, checksum: fb307e3b425140c4622e2aeacfe0c4d1 (MD5) Rejected by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br), reason: Solicitamos que realize correções na submissão seguindo as orientações abaixo: 1 - No agradecimento ao Cnpq, há a citação "Código de financiamento 001" , este texto faz parte ao agradecimento à Capes. Favor excluir e se quiser pode colocar no lugar o número do processo do Cnpq. Agradecemos a colaboração. on 2019-04-30T18:07:37Z (GMT) Submitted by AUREA VERAS BARBOSA DE SOUZA (aurea.veras@unesp.br) on 2019-05-06T21:34:52Z No. of bitstreams: 2 AUREA VERAS - DISSERTAÇÃO (FINAL).pdf: 1863378 bytes, checksum: fb307e3b425140c4622e2aeacfe0c4d1 (MD5) AUREA VERAS - DISSERTAÇÃO (FINAL).pdf: 1862029 bytes, checksum: 94268216178d630a53d63de7b54a3d92 (MD5) Approved for entry into archive by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br) on 2019-05-07T12:50:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 souza_avb_me_jabo_par.pdf: 801379 bytes, checksum: 07ba986e0925858cbb11d1d2d7684556 (MD5) Made available in DSpace on 2019-05-07T12:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 souza_avb_me_jabo_par.pdf: 801379 bytes, checksum: 07ba986e0925858cbb11d1d2d7684556 (MD5) Previous issue date: 2019-03-01 Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) Manejos inerentes da piscicultura intensiva afetam a condição fisiológica e o sistema imune, desencadeando respostas de estresse nos animais, podendo aumentar a susceptibilidade a infecções, causando queda da produtividade. Para contornar este problema, o uso de nutrientes moduladores do sistema imunológico na dieta vem sendo utilizado como medida profilática para assegurarem uma maior sobrevivência e consequentemente a produtividade. A vitamina E é um importante antioxidante e tem sido muito utilizado na aquicultura pelo seu efeito imunoestimulante. Porém, é pouco investigado o seu efeito direto sobre a resposta clássica de estresse. Neste contexto, o presente estudo avaliou, em juvenis de pacu (Piaractus mesopotamicus), o uso oral de vitamina E na dieta com 0,150 e 500 mg kg-1 administrados por 30 dias, onde em cada condição alimentar metade dos peixes foram manipulados (submetidos a estresse por perseguição (estresse crônico). Após o período experimental, foram amostrados para respostas de estresse, do sistema imune e sistema antioxidante de peixes submetidos a estressores crônico e agudo. Avaliamos como indicadores da resposta de estresse, a concentração de cortisol e glicose plasmáticos; como indicadores do sistema imune inato, a atividade respiratória de leucócitos, a atividade hemolítica do sistema complemento e a atividade de lisozima; como indicadores do sistema antioxidante/estresse oxidativo, as atividades das enzimas hepáticas da glutationa-S-transferase (GST), da glutationa reduzida (GSH) e da catalase (CAT). A vitamina E influenciou na glicose ao longo das amostragens, e em peixes não manipulados a elevação foi maior nos que receberam alimentação com 150mg de vitamina. A atividade respiratória de leucócitos teve elevação reduzida nos peixes que receberam a ração suplementada. A concentração sérica da lisozima não diferiu em ambas as condições, tanto nos peixes com estresse crônico quanto os que sofreram estresse agudo e a atividade hemolítica do sistema complemento aumentou 24h depois do estressor agudo em todos os grupos, nas duas condições. Nossos resultados mostram que a vitamina E estimula o sistema imunológico, e também o sistema antioxidante de ambas as condições de estresse. Inherent management of intensive fish farming affects the physiological condition and immune system, triggering stress responses in animals, which may increase susceptibility to infections, causing a drop of the productivity. To solve/reduce this problem, the use of nutritional modulators of the immune system in the diet has been considered as a prophylactic measure to ensure better survival and consequently productivity. Vitamin E is an important antioxidant that has been widely used in aquaculture also as an immunostimulant. However, its direct effect on the classic stress response is little investigated. In this context, the present study evaluated the oral use of vitamin E in the diet with 0.150 and 500 mg kg-1 administered for 30 days, in which half of the fish were handled during the whole period (Chronic Stress) and the other half was not disturbed and only handled acutely after the 30-day period (Acute stress). After the experimental period, both fish groups were sampled for the assessment of indicators of stress, innate immune system and the antioxidant system. We evaluated the concentration of cortisol and glucose, the respiratory activity of leukocytes, the hemolytic activity of the complement system and the activity of lysozyme, and the activity of hepatic enzymes glutathione-S-transferase (GST) and catalase (CAT), and the reduced glutathione (GSH). Vitamin E influenced glucose throughout the samplings, and non-fish manipulated the elevation was higher in those fed with 150mg vitamin. The leukocyte respiratory activity had a reduced elevation in the fish that received the supplemented feed. The serum concentration of lysozyme did not differ in both conditions, both in fish with chronic stress and those who suffered acute stress and the hemolytic activity of the complement system increased 24 hours after the acute stressor in all groups, under both conditions. Our results show that vitamin E stimulates the immune system, and also the antioxidant system of both stress conditions. 131568/2017-5

Submitted by Ana Laura Seneda (anaseneda@gmail.com) on 2019-02-26T19:25:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Ana_Laura_Seneda.pdf: 3287983 bytes, checksum: 3302bedc373126904f2eb69c686a1d75 (MD5) Approved for entry into archive by Luciana Pizzani null (luciana@btu.unesp.br) on 2019-02-26T20:34:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 seneda_al_me_bot_par.pdf: 1116581 bytes, checksum: 513c377e1392b453f5eb56b012068802 (MD5) Made available in DSpace on 2019-02-26T20:34:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 seneda_al_me_bot_par.pdf: 1116581 bytes, checksum: 513c377e1392b453f5eb56b012068802 (MD5) Previous issue date: 2019-01-28 Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) Introdução: O tumor carcinoide do pulmão pertence ao tipo neuroendócrino das neoplasias pulmonares. Devido à sua baixa incidência (~2%), pouco se conhece sobre suas alterações moleculares. Os microRNAs (miRNAs) têm importante papel na regulação gênica e têm sido associados ao câncer como biomarcadores diagnósticos, prognósticos e preditivos. Objetivos: Determinar o perfil global de expressão de miRNAs em tumores carcinoides do pulmão e identificar (in silico) vias moleculares envolvendo os miRNAs desregulados e genes-alvo preditos. Material e Métodos: Dois fragmentos de um tumor carcinoide típico e sua metástase correspondente foram obtidos, o RNA extraído de cada amostra e analisado na plataforma TaqMan Low Density Array (TLDA), a qual contém sondas para 384 miRNAs. Os dados foram analisados no Expression Suite software. Adicionalmente, 7 tumores (5 carcinoides típicos e 2 atípicos) foram utilizados para análise de expressão de 2,578 miRNAs na plataforma GeneChip™ miRNA 4.0 e os dados analisados utilizando o Transcriptome Analysis Console software. A análise estatística dos dados foi realizada para identificação dos miRNAs significativamente (p

Orientadora: Profª Drª Lupe Furtado Alle. Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Genética. Defesa : Curitiba, 31/05/2019. Inclui referências: p. 124-137. Resumo: O sistema imune tem um papel fundamental na defesa do organismo e na manutenção da homeostase. Há várias décadas tem se investigado a sua participação na quebra da homeostase metabólica pelo desencadeamento da resposta inflamatória mediante excesso no consumo de nutrientes e de desequilíbrio de componentes do metabolismo lipídico e de glicose. O presente estudo teve por objetivo avaliar a influência de 21 polimorfismos em 10 genes codificantes de componentes do sistema imune e da resposta inflamatória (TLR2, TLR4, NFKB1, NFKBIA, NLRC4, CARD8, NEK7, TNF, IL6 e IL1B) em variáveis antropométricas (índice de massa corporal (IMC), circunferência de cintura (CC), de quadril (CQ) e abdominal (CA), percentual de gordura corporal (GC)) e variáveis bioquímicas (glicose, insulina, LDL-C, HDL-C, triglicerídeos (TG), colesterol total (CT), HOMA-IR (Homeostatic Model Assessment for Insulin Resistance), QUICKI (Quantitative Insulin Sensitivity Check Index), adiponectina e visfatina) em duas amostras independentes: 158 crianças e adolescentes e 115 adultos. Os polimorfismos foram genotipados através da tecnologia Sequenom MassArray iPLEX. As comparações de médias das variáveis analisadas foram realizadas através do teste t ou Mann Whitney. Para verificar o efeito dos polimorfismos sobre as variáveis de interesse foram utilizadas análises de regressão logística ou regressão linear múltipla. Dos 21 polimorfismos analisados, 16 apresentaram associação com pelo menos uma variável de interesse. Para as variáveis antropométricas foram encontradas associações entre: IMC e os polimorfismos rs13105517 (TLR2); rs1927911 e rs1554973 (TLR4), rs1800629 (TNF) e rs3755867 (NFKB1); CQ e o SNP rs3755867 (NFKB1); GC e os polimorfismos rs385076, rs455060 (NLRC4), rs3755867 (NFKB1) e rs3917356 (IL1B). Para as variáveis do metabolismo de glicose foram encontradas associações entre: níveis de glicose e os polimorfismos rs3138053 (NF?BIA), rs7258674 (CARD8) e rs6671879 (NEK7); os valores de HOMA-IR e os polimorfismos rs13105517 (TLR2) e rs1927911 (TLR4); os valores de QUICKI e os polimorfismos rs13105517 (TLR2), rs212704 (NLRC4) e rs2069845 (IL6); os níveis de insulina e os polimorfismos rs212704 (NLRC4) e rs455060 (NLRC4). Para os parâmetros do metabolismo lipídico foram encontradas associações entre: níveis de LDL-C e os polimorfismos rs1554973 (TLR4), rs2069845 (IL6), rs3755867 (NFKB1) e rs6671879 (NEK7), níveis de HDL-C e os polimorfismos rs13105517 (TLR2) e rs7258674 (CARD8), níveis de CT e os polimorfismos rs3804099 (TLR2), rs6671879 (NEK7) e rs2069845 (IL6) e os níveis de TG e os polimorfismos rs1800629 (TNF), rs3138053 (NFKBIA), rs3804099 (TLR2), rs6509366 (CARD8) e rs6671879 (NEK7). Para as adipocinas mensuradas foram encontradas associações entre: adiponectina e os polimorfismos rs3138053 (NFKBIA) e rs696 (NFKBIA); visfatina e o SNP rs3138053 (NFKBIA). Associações aqui encontradas contribuem com o conhecimento a respeito da relação entre componentes da via inflamatória e os parâmetros antropométricos e bioquímicos e oferecerem evidências para futuras investigações sobre o mecanismo subjacente a essa relação. Abstract: The immune system plays a key role in organism defense against pathogens and in homeostasis maintenance. For several decades immune system participation in the disruption of the metabolic homeostasis by triggering of inflammatory response when facing high intake of nutrients and imbalance of lipid and glucose metabolism. The aim of the present study was to investigate the effects of 21 polymorphisms on 10 immune system and inflammatory response components coding genes (TLR2, TLR4, NFKB1, NFKBIA, NLRC4, CARD8, NEK7, TNF, IL-6 and IL1B) over anthropometric variables (body mass index (BMI), waist circumference (WC), hip circumference (HC), abdominal circumference (AC), body fat percentage (fat) and biochemical variables (glucose, insulin, LDL-C, HDL- C, triglycerides (TG), total cholesterol (TC), HOMA-IR (Homeostatic Model Assessment for Insulin Resistance), QUICKI (Quantitative Insulin Sensitivity Check Index), adiponectin and visfatin) in two independent samples: 158 children and adolescents and 115 adults. The polymorphisms were genotyped using Sequenom MassArray iPLEX technology. Mean comparisons of the variables analyzed were performed by t test or Mann Whitney test. To verify the effect of the polymorphisms over the variables analyzed, logistic regression or multiple linear regression analyzes were performed. Of the 21 polymorphisms analyzed, 16 were associated with at least one variable of interest. For the anthropometric variables were found associations between: BMI and polymorphisms rs13105517 (TLR2), rs1927911, rs1554973 (TLR4), rs1800629 (TNF) and rs3755867 (NFKB1); HC and SNP rs3755867 (NFKB1); fat and polymorphisms rs385076, rs455060 (NLRC4), rs3755867 (NFKB1) and rs3917356 (IL1B). For the variables of glucose metabolism, associations were found between: glucose levels and the polymorphisms rs3138053 (NF?BIA), rs7258674 (CARD8) and rs6671879 (NEK7); the HOMA-IR index and the polymorphisms rs13105517 (TLR2) and rs1927911 (TLR4); the QUICKI index and the polymorphisms rs13105517 (TLR2), rs212704 (NLRC4) and rs2069845 (IL-6); insulin levels and polymorphisms rs212704 (NLRC4) and rs455060 (NLRC4). For the parameters of lipid metabolism, associations were found between LDL-C levels and rs1554973 (TLR4), rs2069845 (IL-6), rs3755867 (NF?B1) and rs6671879 (NEK7); HDL-C levels and polymorphisms rs13105517 (TLR2) and rs7258674 (CARD8); TC levels and polymorphisms rs3804099 (TLR2), rs6671879 (NEK7) and rs2069845 (IL-6) and TG levels and polymorphisms rs1800629 (TNF), rs3138053 (NF?BIA), rs3804099 (TLR2), rs6509366 (CARD8) and rs6671879 (NEK7). For the adipokines measured, associations were found between: adiponectin and polymorphisms rs3138053 (NF?BIA) and rs696 (NF?BIA); visfatin and SNP rs3138053 (NF?BIA). Associations found here contribute to the knowledge about the relationship between components of the inflammatory pathway and the anthropometric and biochemical parameters and provide evidence for future investigations on the underlying mechanism of this relationship.

Background M2 macrophages are often detected in oral squamous cell carcinoma (OSCC), which, influenced by hypoxic conditions, appear to have high angiogenesis-inducing capacity. However, the effects of immunosenescence on tumor-associated macrophages (TAMs) and angiogenesis in OSCC are unknown. Methods Fifty-seven OSCCs were divided into 3 groups (I: 65 years [n = 20]). Immunohistochemistry for CD68 and CD163 (TAMs), and CD34 and D2-40 for microvessel density (MVD), microvessel area (MVA), and total vascular area (TVA) were performed. Results All groups showed similar clinicopathological and immunohistochemical findings. Similar CD68 and CD163 expression, confirmed a M2 phenotype. MVD, MVA, and TVA were similar, however, with significant predominance of blood vessels. No significant correlation between macrophage and angiogenic markers was observed. Conclusions A similar TAM and angiogenesis profile suggests the participation of other mechanisms, instead immunosenescence, in young and elderly OSCC patients.

Argyrosomus regius é uma espécie emergente em aquacultura com conhecimento limitado do tempo de aparecimento e desenvolvimento de seu sistema imunológico durante o desenvolvimento ontogénico, o que é importante para prevenir surtos de doenças. Assim, o primeiro passo é determinar o aparecimento dos órgãos linfáticos, de modo a que possam ser aplicadas medidas profiláticas, para que os indivíduos adquiram resistência ao invés de tolerância. Este estudo avaliou o aparecimento de órgãos linfáticos em larvas de corvina cultivadas a duas temperaturas diferentes (15 ± 0,7 e 18 ± 0,5°C). As larvas foram obtidas a partir de reprodutores F1, mantidos na estação de Piloto de Piscicultura de Olhão (EPPO) pertencente ao IPMA (Instituto Português do Mar e Atmosfera). O cultivo larvar foi realizado em tanques cilíndrocónicos, em duplicados, com densidade inicial de 26 larvas L-1. O fotoperíodo foi de 14h-10h dia-noite e a renovação da água começou em 15%.h-1, aumentando para 40%.h-1 em sistema aberto. Também foi aplicado o método da água verde adicionando uma mistura de duas microalgas Nannochloropsis oculata (No) e Isochrysis galbana (Tiso). Dos 3 dias após a eclosão (DAE) até 10 DAE, as larvas foram alimentadas com rotíferos (Brachionus spp.). A artemia sp. foi fornecida desde 8 DAE e a alimentação inerte foi introduzida a 9 DAE. Ambos, rotíferos e Artémia, foram enriquecidos com RedPepper ® (Bernaqua TM) antes de serem fornecidos às larvas. A amostragem larvar foi realizada diariamente para biometria (comprimento total (mm) e peso seco (mg)) e histologia. Aos 20 DAE as larvas apresentaram maior comprimento total e peso seco (6,67±0,56mm; 0,56±0,06mg) no tratamento a 18°C em comparação com as larvas do tratamento a 15°C (4,77±0,38 mm; 0,12±0,04mg). Em relação ao aparecimento dos órgãos linfáticos, a sequência do seu aparecimento foi a seguinte: rim anterior (0 DAE), baço (6 DAE) e timo (8 DAE) para ambas as temperaturas. Assim, conclui-se que a temperatura não influenciou o aparecimento dos órgãos linfáticos, no entanto afetou o crescimento das larvas.

Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq Sepsis is a generalized infection that causes changes in the purinergic and immune systems, the inflammatory parameters and the oxidative status of the patients. Physical exercise, through its anti-inflammatory and antioxidant properties, has emerged with a tool to prevent complications and / or worsening of sepsis. In this study, we investigated whether twelve weeks of physical exercise would be able to prevent the changes caused by the induction of sepsis in rats, components of the purinergic system, oxidative stress and inflammatory parameters. For this, male Wistar rats were divided into four groups: control, exercise (EX), lipopolysaccharide (LPS) and EX + LPS. A 1-meter-high ladder was used for the animals to perform twelve weeks of resistance exercise. After 72 hours of the last exercise, the animals received 2.5 mg / kg of LPS for induction of sepsis, and 24 hours later, cardiac puncture and lung, lymphocytes and serum were collected for the analysis. The results showed that exercise was able to prevent, in septic animals: 1) the increase in body temperature; 2) increased lipid peroxidation and reactive species levels in the lung; 3) the increase in serum ATP levels; 4) the changes in the activity of the enzymes ectonucleotidases in lymphocytes, partially; 5) the change in the density of purinergic enzymes and receptors in the lung and, 6) the increase in IL-6 and IL-1β gene expression. The results are expected to elucidate the involvement of purinergic signaling and oxidative stress in the mechanisms by which exercise can prevent changes caused by sepsis. In this way, encourage regular practice of resistance exercise to better prepare the body against sepsis and other diseases related to inflammation. A Sepse é uma infecção generalizada que causa alterações nos sistemas purinérgico e imune, nos parâmetros inflamatórios e no status oxidativo dos pacientes. O exercício físico, por meio de suas propriedades anti-inflamatórias e antioxidantes, vem emergindo com uma ferramenta para prevenir as complicações e/ou o agravamento da sepse. Neste estudo, investigou-se se doze semanas de exercício físico seriam capazes de prevenir as alterações causadas pela indução da sepse em ratos, em componentes do sistema purinérgico, no estresse oxidativo e em parâmetros inflamatórios. Para tanto, ratos machos Wistar foram divididos em quatro grupos: controle, exercício (EX), lipopolissacarídeo (LPS) e EX+LPS. Uma escada de um metro de altura foi utilizada para os animais realizarem doze semanas de exercício físico resistido. Após 72 horas da última sessão de exercício, os animais receberam 2,5 mg/kg de LPS para indução de sepse e, 24 horas após, foi realizada punção cardíaca e pulmão, linfócitos e soro foram coletados para a realização das análises. Os resultados mostraram que o exercício foi capaz de prevenir, nos animais sépticos: 1) o aumento da temperatura corporal; 2) o aumento da peroxidação lipídica e dos níveis de espécies reativas no pulmão; 3) o aumento nos níveis de ATP no soro; 4) as alterações na atividade das enzimas ectonucleotidases em linfócitos, parcialmente; 5) a alteração na densidade das enzimas e receptores purinérgicos no pulmão e, 6) o aumento na expressão gênica de IL-6 e IL-1β. Espera-se que os resultados possam elucidar o envolvimento da sinalização purinérgica e do estresse oxidativo nos mecanismos pelos quais o exercício pode previnir as alterações causadas pela sepse. Dessa maneira, incentivar a prática regular de exercício físico de resistência para melhor preparar o organismo contra a sepse e outras doenças relacionadas à inflamação.

Submitted by Simone Maisonave (simonemaisonave@hotmail.com) on 2020-09-01T17:38:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Matheus-Pintanel-Silva-de-Freitas.pdf: 3963457 bytes, checksum: 61cd3ff68c3fec60f450e8965a723f03 (MD5) Approved for entry into archive by Aline Batista (alinehb.ufpel@gmail.com) on 2020-09-03T23:58:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Matheus-Pintanel-Silva-de-Freitas.pdf: 3963457 bytes, checksum: 61cd3ff68c3fec60f450e8965a723f03 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Made available in DSpace on 2020-09-04T00:00:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Matheus-Pintanel-Silva-de-Freitas.pdf: 3963457 bytes, checksum: 61cd3ff68c3fec60f450e8965a723f03 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-09-11 Sem bolsa Objetivo: Comparar os efeitos crônicos protetores de diferentes modelos de exercício físico sobre a temperatura corporal, níveis séricos de citocinas inflamatórias e parâmetros cerebrais de estresse oxidativo em camundongos fêmeas C57BL/6 submetidos à indução de inflamação sistêmica por lipopolissacarídeo (LPS). Métodos: Os animais foram divididos em grupo controle (sedentário) (n=10), exercício intermitente de alta intensidade (HIIT) (n=10) e exercício contínuo de intensidade moderada (contínuo) (n=10). O treinamento durou 6 semanas e, setenta e duas horas após a última sessão, foi injetado nos animais uma dose de 250 μg/kg de LPS proveniente da bactéria Escherichia coli. Resultados: O grupo sedentário teve uma queda na temperatura corporal na primeira hora pós LPS, permanecendo baixo nas 12 horas seguintes [F(3,27)=11,15, p=

We report a novel homozygous JAK3 mutation in two female Brazilian SCID infants from two unrelated kindreds. Patient 1 was referred at 2 months of age due to a family history of immunodeficiency and the appearance of a facial rash. The infant was screened for TRECs (T-cell receptor excision circles) and KRECs (kappa-deleting recombination excision circles) for the assessment of newly formed naïve T and B cells respectively, which showed undetectable TRECs and normal numbers of KRECs. Lymphocyte immunophenotyping by flow cytometry confirmed the screening results, revealing a T-B+NK– SCID. The patient underwent successful HSCT. Patient 2 was admitted to an intensive care unit at 8 months of age with severe pneumonia, BCGosis, and oral moniliasis; she also had a positive family history for SCID but newborn screening was not performed at birth. At 10 months of age she was diagnosed as a T-B+NK– SCID and underwent successful HSCT. JAK3 sequencing revealed the same homozygous missense mutation (c.2350G>A) in both patients. This mutation affects the last nucleotide of exon 17 and it is predicted to disrupt the donor splice site. cDNA sequencing revealed skipping of exon 17 missing in both patients, confirming the predicted effect on mRNA splicing. Skipping of exon 17 leads to an out of frame deletion of 151 nucleotides, frameshift and creation of a new stop codon 60 amino acids downstream of the mutation resulting in a truncated protein which is likely nonfunctional.

Arterial hypertension represents a serious public health problem, being a major cause of morbidity and mortality worldwide. The availability of many antihypertensive therapeutic strategies still fails to adequately treat around 20% of hypertensive patients, who are considered resistant to conventional treatment. In the pathogenesis of hypertension, immune system mechanisms are activated and both the innate and adaptive immune responses play a crucial role. However, what, when and how the immune system is triggered during hypertension development is still largely undefined. In this context, this review highlights scientific advances in the manipulation of the immune system in order to attenuate hypertension and end-organ damage. Here, we discuss the potential use of immunosuppressants and immunomodulators as pharmacological tools to control the activation of the immune system, by non-specific and specific mechanisms, to treat hypertension and improve end-organ damage. Nevertheless, more clinical trials should be performed with these drugs to establish their therapeutic efficacy, safety and risk-benefit ratio in hypertensive conditions. LINKED ARTICLES: This article is part of a themed section on Immune Targets in Hypertension. To view the other articles in this section visit http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/bph.v176.12/issuetoc.

O Transtorno do Espectro do Autismo (TEA) é uma classe de distúrbios do neurodesenvolvimento que afeta cerca de meio milhão de pessoas no Brasil, caracterizado pelo comprometimento dos domínios da interação social, comunicação e flexibilidade comportamental. O modelo experimental de autismo por exposição pré-natal ao LPS é um modelo novo e pouco estudado, que pode ajudar a compreender a etiologia e a fisiopatologia do distúrbio. Estudos prévios suportam a evidência de que alterações no ambiente pós-natal são capazes de modular o fenótipo do TEA. O isolamento precoce tem sido associado ao desenvolvimento de comportamentos do tipo-autista, do tipo-ansioso e do tipo-depressivo. Neste trabalho foram estudadas as alterações comportamentais na prole submetida ao modelo de autismo por exposição ao LPS no período gestacional, ao isolamento precoce e à combinação de ambos. Os resultados indicaram que a prole masculina é susceptível ao modelo de indução ao TEA, enquanto a prole feminina é susceptível ao desenvolvimento do comportamento do tipo-ansioso. O isolamento individualmente não foi capaz de provocar alterações comportamentais, porém, quando associado à administração gestacional de LPS foi capaz de prevenir alguns dos prejuízos provocados pelo modelo de indução ao TEA. Autism Spectrum Disorder (ASD) is a class of neurodevelopmental disorders that affects about half a million people in Brazil, characterized by impairments in social interaction, communication and behavioral flexibility. The ASD animal model by the prenatal LPS exposure is a new model that may help to understand the etiology and pathophysiology of the disorder. Previous studies support the evidence that changes in the postnatal environment can modulate the ASD phenotype. Early isolation has been associated with the development of autistic-, anxiety-, and depressive-like behaviors. In this study, we investigated behavioral alterations in offspring exposed to prenatal LPS, neonatal isolation and the combination of both factors. The results indicated that male offspring are susceptible to the ASD model, while female offspring are susceptible to the development of anxiety-like behavior. Isolation alone was not related to any behavioral changes, however, when associated with prenatal LPS exposure, prevented some of the damage caused by the ASD model. Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Cynara scolymus is a plant used both as food as well as medicinal plant worldwide. Cynarin is one of the main active principles of the plant, and it is also present in species such as Echinacea purpurae, which is known to have immunomodulatory activity. Thus, the objective of this study is to evaluate the immune effects of C. scolymus in rats. Rats were treated with 1.0-, 2.0-, or 4.0-g/kg body weight of C. scolymus extract for 28 days. Haemogram, serum biochemistry, lymphoid organs weight, and their cell phenotypes were evaluated. Macrophages and neutrophils oxidative burst, specific humoral immune response, and the delayed-type hypersensitivity (DTH) were studied. No changes in the haemogram, biochemical profile, antibody titers, lymphoid organs, and in their cellularities were observed. An increase in the basal activity of reactive oxygen species from male's macrophage was observed. There was a suppression of the DTH response in both gender when treated with the highest dose of C. scolymus. This study is the first in the literature that revealed an immunosuppressive effect of C. scolymus. We also verified that the doses of artichoke extract here employed did not cause general toxicity.

This prospective study evaluates whether CMV-seropositive (R +) transplant patients with pretransplant CD8 + IFNG + T-cell response to cytomegalovirus (CMV) (CD8 + IFNG + response) can spontaneously clear the CMV viral load without requiring treatment. A total of 104 transplant patients (kidney/liver) with pretransplant CD8 +1FNG + response were evaluable. This response was determined using QuantiFERON-CMV assay. The incidence of CMV replication and disease was 45.2% (47/104) and 6.7% (7/104), respectively. Of the total patients, 77.9% (81/104) did not require antiviral treatment, either because they did not have CMV replication (n = 57) or because they had asymptomatic CMV replication that could be spontaneously cleared (n = 24). Both situations are likely related to the presence of COB + IFNG + response to CMV, which has a key role in controlling CMV infection. However, 22.1% of the patients (23/104) received antiviral treatment, although only 7 of them did so because they had symptomatic CMV replication. These patients developed symptoms in spite of having pretransplant CD8 + IFNG + response, thus suggesting that other immunological parameters might be involved, such as a dysfunctional CD4+ response or that they might have become QFNon-reactive due to the immunosuppression. In conclusion, around 80% of R + patients with pretransplant CD8 + IFNG + response to CMV did not require antiviral treatment, although this percentage might be underestimated. Nevertheless, other strategies such as performing an additional CD8 + IFNG + response determination at posttransplant time might provide more reliable information regarding the patients who will be able to spontaneously clear the viremia.

Objective To compare the proinflammatory and anti-inflammatory cytokine expression profile of CD4 + and CD8 + T lymphocytes between drug resistant mesial Temporal Lobe Epilepsy (mTLE) patients and healthy subjects. Methods mTLE patients were enrolled at the Neurology Center of Santa Casa de Misericordia de Belo Horizonte (SCM-BH) and healthy volunteers were selected at Universidade Federal de Minas Gerais. Individuals from both groups accepted to participate in this study and signed an informed consent. Peripheral venous blood samples were collected using sodium heparin vacuum tubes on the day before the surgery and in the interictal period, isolated from whole blood using Ficoll/Hypaque followed by flow cytometry analysis. Data analysis was performed using FlowJo. Results Compared to healthy individuals, mTLE patients showed reduced frequency of CD8 + T lymphocytes expressing IFN-γ, TNF-α, IL-17 and IL-4. Moreover, mTLE patients presented increased frequency of CD4 + T lymphocytes expressing IL-6 when compared to healthy volunteers. Discussion Epilepsy is the third most common chronic brain disorder. Mesial temporal lobe epilepsy (mTLE) is a major and severe form of epilepsy and 30% of the mTLE patients do not respond to conventional medications. Our data suggest that mTLE patients have distinct immunological profiles that are related to disease pathophysiology.

Vaccines have drastically reduced the mortality and morbidity of many diseases. However, vaccines have historically been developed empirically, and recent development of vaccines against current pandemics such as HIV and malaria has been met with difficulty. The advent of high-throughput technologies, coupled with systems biological methods of data analysis, has enabled researchers to interrogate the entire complement of a variety of molecular components within cells, and characterize the myriad interactions among them in order to model and understand the behavior of the system as a whole. In the context of vaccinology, these tools permit exploration of the molecular mechanisms by which vaccines induce protective immune responses. Here we review the recent advances, challenges, and potential of systems biological approaches in vaccinology. If the challenges facing this developing field can be overcome, systems vaccinology promises to empower the identification of early predictive signatures of vaccine response, as well as novel and robust correlates of protection from infection. Such discoveries, along with the improved understanding of immune responses to vaccination they impart, will play an instrumental role in development of the next generation of rationally designed vaccines.

The diagnosis and treatment of tuberculosis (TB) in transplanted receivers presents several challenges. TB is an opportunistic infection with high morbidity and mortality in solid organs of transplanted patients, therefore, the diagnosis difficulties. A case of a 30-year-old male, heart transplanted patient, who after being submitted to mediastinoscopy, obtained a result of lymph node TB.

Immunization of BALB/c mice with HIVBr18, a DNA vaccine containing eighteen CD4+ T cell epitopes from human immunodeficiency virus (HIV), induced specific CD4+ and CD8+ T cell responses in a broad, polyfunctional and persistent manner. With the aim of increasing the immunogenicity of this vaccine, the effect of Propionibacterium acnes as an adjuvant was evaluated. The adjuvant effects of this bacterium have been extensively demonstrated in both experimental and clinical settings. Herein, administration of two doses of HIVBr18, in the presence of P. acnes, increased the proliferation of HIV-1-specific CD4+ and CD8+ T lymphocytes, the polyfunctional profile of CD4+ T cells, the production of IFN-γ, and the number of recognized vaccine-encoded peptides. One of the bacterial components responsible for most of the adjuvant effects observed was a soluble polysaccharide (PS) extracted from the P. acnes cell wall. Furthermore, within ten weeks after immunization, the proliferation of specific T cells and production of IFN-γ were maintained when the whole bacterium was administered, demonstrating a greater effect on the longevity of the immune response by P. acnes. Even with fewer immunization doses, P. acnes was found to be a potent adjuvant capable of potentiating the effects of the HIVBr18 vaccine. Therefore, P. acnes may be a potential adjuvant to aid this vaccine in inducing immunity or for therapeutic use.

Background The Monocyte Monolayer Assay (MMA) is an in vitro simulation of red blood cell (RBC) alloantibody behavior. It has been classically applied to predict the risks of post-transfusion hemolytic reactions when transfusing incompatible RBC units. Quantifying erythrophagocytosis by MMA may be an interesting option for situations where there is doubt whether a RBC autoantibody is mediating significant hemolysis. Here, we present three situations involving RBC autoantibodies in which the MMA was decisive for clarifying the diagnosis and choosing the best clinical treatment. Case Report Case 1. Pregnant patient with severely anemic fetus exhibited warm autoantibody without signs of hemolysis. MMA revealed 30% of monocyte index (MI) highlighting that fetal hemolysis was caused by maternal autoantibody. Prednisone was prescribed with fetal clinical improvement. Cases 2 and 3. Two patients with the diagnosis of mixed auto-immune hemolytic anemia and poor response to corticosteroids were evaluated using MMA. The resulting MI was less than 10% in both cases, suggesting that the cold-agglutinin rather than the warm auto-IgG was responsible for overt hemolysis. Treatment with rituximab was begun, with good clinical response. Conclusion MMA can be used to evaluate the ability of RBC autoantibodies to mediate overt hemolysis. It can be especially useful to determine the role played by cold and warm auto-antibodies in mixed auto-immune hemolytic disease, helping to define the best treatment option.

O sistema imune é formado por uma série de conexões entre diversas células e moléculas, em uma rede de alta complexidade tendo como função primaria a manutenção do equilibro homeostático do hospedeiro. Dentre os diversos tipos de respostas, uma das principais é a chamada resposta citotóxica, presente no conjunto classificado como sistema imune adaptativo. Os principais protagonistas são o linfócito T CD8+ e o complexo MHC de classe I. Através de uma rota de apresentação de antígeno, uma proteína, seja viral, tumoral ou própria, sofre um processo de degradação, sendo clivada para um tamanho de 8 a 13 aminoácidos, e migração até ser alocada dentro da fenda do MHC-I, sendo esta exposta na membrana celular para ser reconhecida pelo receptor da célula T citotóxica. Ao reconhecer o epítopo como não próprio, gera-se uma cascata de sinalização que leva à apoptose celular. Um mesmo receptor de célula T pode reconhecer mais de um tipo de epítopo, mesmo se já houve uma resposta prévia para um alvo especifico, tendo este fenômeno o nome de reatividade cruzada. Este fenômeno tem uma grande atribuição no combate a doenças e tumores, possuindo um grau de importância no desenvolvimento de novas terapias e vacinas. Apesar da sua relevância, existem poucas ferramentas in silico disponíveis para a sua predição, gerando assim um grande nicho a ser explorado. Devido a isto, desenvolvemos o MatchTope, ferramenta que utiliza o complexo do pMHC em sua conformação tridimensional para a busca de similaridades, utilizando o campo eletrostático das estruturas como dado de entrada para o cálculo de similaridade. Com resultados promissores, temos em mãos uma ferramenta pronta que estará disponível para diversos pesquisadores que trabalham com prospecções de alvos para vacinas tanto para vírus quanto para novos alvos tumorais que podem ser utilizados em uma abordagem imunoterapêutica. The immune system is formed by a series of connections between several cells and molecules, in a network of high complexity having as primary function the maintenance of homeostatic equilibrium of the host. Among the several types of responses, one of the main is the so-called cytotoxic response, which is present in the set classified as adaptive immune system. The main protagonists are the CD8+ T lymphocyte and the MHC class I complex. Through an antigen presentation route, a viral, tumor or own protein undergoes a degradation process, cleaving it to a size of 8 to 13 amino acids, and migration until it is allocated into the MHC-I cleft, which is exposed in the cell membrane to be recognized by the cytotoxic T cell receptor. By recognizing the epitope as non-self, a signaling cascade that leads to cellular apoptosis is generated. A single T cell receptor can recognize more than one type of epitope, even if there has been a previous response to a specific target, and this phenomenon is called cross- reactivity. This phenomenon has a great attribution in the fight against diseases and tumors, having a degree of importance in the development of new therapies and vaccines. Despite their relevance, there are few in silico tools available for their prediction, thus generating a great niche to be explored. Due to this fact, we developed MatchTope, a tool that uses the pMHC complex in its three-dimensional conformation for the search of similarities, using the electrostatic field of the structures as input data for the calculation of similarity. With promising results, we have at hand a ready tool that will be available to several researchers who work with prospective vaccinations for both viruses and new tumor targets that can be used in an immunotherapeutic approach.

Os tumores renais correspondem a 3% das neoplasias que acometem os seres humanos e apesar de representarem uma parcela pequena dentro do universo do câncer, sua incidência vem aumentando a cada ano. A inter-relação entre câncer e sistema imune já vem sendo há muito descrita e diversos estudos vem demonstrando que o sistema imune, em muitas situações, pode atuar como um promotor da neoplasia ao sustentar processos inflamatórios crônicos e ao contribuir para a seleção de células tumorais com baixa imunogenicidade. O processo de apresentação antigênica realizado pelas células dendríticas constitui o passo inicial da geração da resposta imune adaptativa anti-tumoral. Nesse contexto, as moléculas codificadas pelo complexo principal de histocompatibilidade, particularmente o HLA-G, vem ganhando a atenção dos cientistas, pois apesar das funções do HLA-G no ambiente tumoral ainda não estarem completamente compreendidas, essa molécula parece favorecer uma tolerização do tumor pelas células do sistema imunes. Considerando que diversos tumores induzem a expressão das moléculas de HLA-G e de seus receptores como uma estratégia de evasão do sistema imunológico, é possível considerar que esse estado de tolerância possa ser revertido por intervenções imunoterapêuticas. A identificação e o conhecimento dos mecanismos envolvidos nos processos de tolerização tumoral, poderão ser utilizados em abordagens corretivas não só para o tratamento de tumores renais, mas também para diversas outras neoplasias. Assim, o presente trabalho teve como objetivo contribuir para a compreensão dos processos de evasão tumoral da resposta imune através da investigação das funções da molécula de HLA-G e de seus receptores na patogênese do câncer renal, bem como avaliar a presença de fatores pró-inflamatórios que também podem contribuir para a promoção e o desenvolvimento de neoplasias renais. Os resultados obtidos indicam níveis significativamente elevados da citocina pro-inflamatória IL-6 em pacientes portadores de câncer renal em comparação aos indivíduos controle. Tal resultado, pode ser um indicativo do papel promotor dessa citocina na patologia do câncer renal. Na avaliação das células imunes, foi possível observar, nos pacientes de câncer renal, um aumento significativo no número de linfócitos T, tanto CD4 quanto CD8 positivos, que expressavam o receptor de HLA-G, ILT2. Isso pode ser um indicativo de que tais células estão mais suscetíveis a regulação negativa via HLA- G, sendo essa molécula um mecanismo de evasão tumoral em câncer renal. Renal tumors correspond to 3% of the neoplasms that affect the human beings and although they represent a small portion within the universe of the cancer, their incidence is increasing every year. The interrelationship between cancer and the immune system has long been described and several studies have demonstrated that the immune system, in many situations, can act as a promoter of the neoplasm by sustaining chronic inflammatory processes and contributing to the selection of tumor cells with low immunogenicity. The antigen presentation process performed by dendritic cells is the initial step in the generation of the anti-tumor adaptive immune response. In this context, the molecules encoded by the major histocompatibility complex, particularly HLA-G, have been gaining the attention of scientists, because although the HLA-G functions in the tumor environment are still not fully understood, this molecule appears to favor tumor tolerance by the immune system. Considering that several tumors induce the expression of HLA-G molecules and their receptors as a strategy of immune system evasion, it is possible to consider that this state of tolerance can be reversed by immunotherapeutic interventions. The identification and knowledge of the mechanisms involved in tumor tolerance processes can be used in corrective approaches not only for the treatment of renal tumors but also for several other neoplasms. The aim of the present work was to contribute to the understanding of the tumor evasion processes from the immune response by investigating the functions of the HLA-G molecule and its receptors in the pathogenesis of renal cancer, as well as to evaluate the presence of pro- inflammatory factors that may also contribute to the promotion and development of renal neoplasms. The results obtained indicate significantly elevated levels of IL-6 pro- inflammatory cytokine in patients with renal cancer compared to control subjects. Such a result may be an indicative of the role of this cytokine in the pathology of renal cancer. In the evaluation of immune cells, it was possible to observe, in renal cancer patients, a significant increase in the number of CD4 and CD8 positive T lymphocytes expressing the HLA-G receptor, ILT2. This may be an indication that such cells are more susceptible to HLA-G negative regulation, which is a mechanism of tumor evasion in renal cancer.

Rapamycin, the macrolide immunosuppressant and active pharmaceutic in drug-eluting stents (DES), has a well-recognized antiproliferative action that involves inhibition of the mTOR pathway after binding to the cytosolic protein FKBP12. TGF receptor-type I (TGFRI) spontaneous activation is inhibited by the association with FKBP12. We hypothesized that rapamycin, in addition to inhibition of mTOR signaling, activates TGFRI independent of TGFβ. Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were treated with rapamycin (10 nmol/l) and/or TGFβ RI kinase inhibitor (TGFRIi, 100 nmol/l) for 24 h. Rapamycin induced SMAD phosphorylation (SMAD1, SMAD2, and SMAD5) and PAI-1 up-regulation, which was specifically abrogated by SMAD2 knockdown. TGFRIi efficiently blocked phosphorylation of SMAD2, but not SMAD1/5. Interestingly, the inhibitor did not alter cell proliferation arrest induced by rapamycin. Active TGFβ secretion was not affected by the treatment. Neutralizing TGFβ experiments did not influence SMAD2 phosphorylation or PAI-1 expression indicating that activation of this pathway is independent of the ligand. In addition, rapamycin induction of endothelial-to-mesenchymal transition (EndMT) was potentiated by IL-1β and efficiently blocked by TGFRIi. In vivo, the prothrombogenic effects of rapamycin and up-regulation of PAI-1 in murine carotid arteries were reduced by TGFRIi treatment. In conclusion, we provide evidence that rapamycin activates TGF receptor independent of its ligand TGFβ, in concert with promotion of PAI-1 expression and changes in endothelial phenotype. These undesirable effects, the prothrombogenic state, and activation of EndMT are SMAD2-dependent and independent of the therapeutic rapamycin-induced cell proliferation arrest.

Ureases são enzimas que catalisam a hidrólise de ureia para formar amônia e dióxido carbono, sendo produzidas por plantas, fungos e bactérias. A toxina de estudo, Jaburetox, é um peptídeo recombinante derivado de uma das isoformas de urease presentes em Canavalia ensiformis. Esta molécula mostrou toxicidade a insetos de diferentes ordens quando administrada oralmente ou por injeção e, além disso, apresenta atividades antifúngica e bacteriostática, não exibindo efeitos tóxicos para mamíferos, demonstrando um enorme potencial biotecnológico. Em estudos realizados com Rhodnius prolixus, um dos principais vetores da Doença de Chagas na América Latina, observamos que o Jaburetox é capaz de interagir com hemócitos, células do sistema imune. Concomitante a esta interação, também demonstramos que o peptídeo é capaz de induzir a agregação de hemócitos, característica da resposta celular, e também é capaz de aumentar a atividade da fenoloxidase (PO), enzima envolvida na resposta humoral dos insetos. Estes efeitos sugerem que o peptídeo é capaz de ativar o sistema imune dos insetos. Os insetos apresentam somente imunidade inata, sendo esta subdividida em resposta celular e humoral. A resposta celular, mediada por hemócitos, é caracterizada pela fagocitose, agregação e encapsulação de patógenos. Em contraste, a resposta humoral é representada pela produção de peptídeos antimicrobianos, melanização desencadeada pela enzima PO e produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) e nitrogênio (RNS). Recentemente, outro mecanismo de resposta imune inata tem sido estudado: as armadilhas extracelulares - Extracellular Traps (ETs), sendo bem caracterizadas em mamíferos, porém pouco estudadas em insetos. As ETs são armadilhas de ácidos nucleicos extracelulares associados a proteínas citoplasmáticas, que podem auxiliar na captura e na morte de patógenos. Essa resposta é desencadeada por receptores extracelulares de células granulares que induzem o aumento de Ca2+ intracelular, levando à produção de ROS, que parece ser parte fundamental para liberação dos ácidos nucleicos, permitindo com que estes passem para o citoplasma e associem-se com as proteínas. O presente estudo tem como objetivo avaliar o papel de ácidos nucleicos extracelulares na resposta imune e na proteção contra o peptídeo entomotóxico Jaburetox. As respostas imunológicas foram avaliadas por meio da contagem de agregados, através de hemocitômetro, e por ensaio colorimétrico para dosar alterações da resposta humoral, 6 e 18 h após injeção de Jaburetox e/ou RNA extracelular (RNAet). A liberação de RNA e DNA foi avaliada 6 h pós injeção de tratamentos para ensaios in vivo e 1 h pós incubação para ensaios in vitro, através do kit Qubit RNA HS e Qubit dsDNA HS. Para avaliar a liberação de ROS e viabilidade celular, realizamos culturas de hemócitos, que foram tratados por 24 h com Jaburetox. Por fim, avaliamos a imunocompetência dos insetos após tratamentos com Jaburetox, RNAet ou Jaburetox + RNAet e desafiamos o inseto contra uma bactéria patogênica. A hemolinfa dos insetos foi coletada e unidades formadoras de colônia foram mensuradas pelo método de drop-plate. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que o RNAet é capaz de ativar as defesas do organismo, tanto celular quanto humoral e, quando associado à toxina, apresentam um efeito protetor. Jaburetox não foi capaz de induzir alterações na liberação de ácidos nucleicos em nenhuma das abordagens, mas modificou a liberação de ROS na dose de 6 M. A viabilidade celular não foi alterada em nenhuma das condições testadas. Nos ensaios de imunocompetência, observamos que o peptídeo modula a resposta do organismo, deixando-o mais susceptível a infecções. Os tratamentos com RNAet desencadeiam uma resposta protetora. Nossos dados sugerem que o RNAet modula as defesas do organismo de forma benéfica para combater patógenos, enquanto que o Jaburetox, nas condições testadas, não induz resposta imune através de ETs, mas torna o inseto mais susceptível a infecções por patógenos. Os presentes achados enfatizam a importância dos ácidos nucleicos extracelulares para as defesas imunológicas em insetos. Também elucidamos os efeitos desencadeados pelo peptídeo, aprimorando os conhecimentos referentes a esta toxina, enfatizando o potencial uso deste composto como um bioinseticida. Ureases are enzymes that catalyze the hydrolysis of urea to form ammonia and carbon dioxide, being produced by plants, fungi and bacteria. The studied toxin, Jaburetox, is a recombinant peptide derived from one of the urease isoforms present in Canavalia ensiformis. This molecule showed toxicity to insects of different orders when administered orally or by injection and, in addition, presents antifungal and bacteriostatic activities, not exhibiting toxic effects to mammals, demonstrating an enormous biotechnological potential. Studies with Rhodnius prolixus, one of the main vectors of Chagas' disease in Latin America, have shown that Jaburetox is capable of interacting with hemocytes, the cells of the immune system. Concomitant with this interaction, we also demonstrated that the peptide induces hemocyte aggregation, a characteristic of the cellular response, and is also capable of increasing the activity of phenoloxidase (PO), an enzyme involved in the humoral response in insects. These effects suggest that the peptide is able of activating the insect immune system. Insects present only innate immunity, which is subdivided into cellular and humoral responses. The cellular response, mediated by hemocytes, is characterized by phagocytosis, aggregation and encapsulation of pathogens. In contrast, the humoral response is represented by the production of antimicrobial peptides, melanization triggered by the PO enzyme and the production of reactive oxygen species (ROS) and reactive nitrogen species (RNS). Recently, another mechanism of innate immune response has been studied: the Extracellular Traps (ETs), being well characterized in mammals, but little studied in insects. ETs consist of extracellular nucleic acids associated with cytoplasmic proteins that may aid in the capture and killing of pathogens. This response is triggered by extracellular granular cell receptors that induce the increase of intracellular Ca2+, leading to the production of ROS, which appear to play a key role in the release of nucleic acids, allowing them to pass into the cytoplasm and associate with proteins. The present study aims to evaluate the role of extracellular nucleic acids in the immune response and protection against the entomotoxic peptide Jaburetox. Immunological responses were evaluated by means of hemocytometer counting and by colorimetric assays to measure changes in the humoral response, 6 and 18 h after injection of Jaburetox and/or extracellular RNA (RNAet). The release of RNA and DNA was evaluated 6 h post injection of treatments for in vivo assays and 1 h post incubation for in vitro assays, using the Qubit RNA HS and Qubit dsDNA HS kits. In order to evaluate the release of ROS and 14 the cell viability, hemocyte cultures were treated for 24 h with Jaburetox. Finally, the immunocompetence was evaluated after treatment with Jaburetox, RNAet or Jaburetox + RNAet and challenging the insects with a pathogenic bacterium. Hemolymph of the insects was collected and colony forming units were measured by the drop-plate method. The results obtained in this work indicated that RNAet is able to activate the organism defenses, both cellular and humoral, and displays a protective effect when associated with the toxin. Jaburetox was not able to induce changes in the release of nucleic acids in any of the approaches, but modified the release of ROS at the dose of 6 μM. Cell viability was not altered in any of the conditions tested. In the immunocompetence assays, we observed that the peptide modulates response of the organism, making it more susceptible to infections. RNAet treatments elicit a protective response. Our data suggest that RNAet modulates the insect defenses in a beneficial way to fight pathogens, while Jaburetox, in the conditions tested, does not induce an immune response through ETs, but makes the insect more susceptible to pathogen infections. The present findings emphasize the importance of extracellular nucleic acids for immune defenses in insects. We also elucidate the effects triggered by the peptide, improving the knowledge regarding this toxin, reinforcing its potential use as a bioinsecticide.