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Childhood bronchiolitis obliterans (CBO) is an uncommon disease characterized by persistent signs and symptoms of obstructive respiratory disease after an acute bronchiolar injury. It is considered to be a complication of viral infection, most often of adenovirus, and is usually classified as a constrictive-type bronchiolitis obliterans (BO). Few reports have described its histology. We present the histopathological features of 34 pediatric patients with a diagnosis of BO, comprising 30 open lung biopsies (OLB), 2 lobectomies, and 2 autopsies. Quantitative analysis was performed on the OLB to better characterize the morphological changes observed in these lungs. Of 37 patients, 25 were male and 9 were female, ranging from 7 months to 15 years of age. Airway diameter in terminal bronchioles varied from 50-600 microm. Ninety-seven percent of the CBO were of constrictive type, with variable degrees of airway obstruction. Chronic inflammation in the bronchioles was mild in 63% of the patients. Aggregates of foamy macrophages, mucostasis, and bronchiectasis appeared in, respectively, 93%, 40%, and 30% of the biopsies. There was more hyperinflation than atelectasis (40.1% and 24.3%, respectively). Lobectomies and autopsies showed more severe bronchiolar obliteration, associated with bronchiectasis. The results show that CBO is characterized histologically mainly by a constrictive pattern, with variable degrees of inflammation and airway obliteration. Secondary signs of airway obstruction are invariably present. Mild histological changes may predominate and should be carefully evaluated by the pathologist.

To compare the effects of two different recruitment maneuvers repeated multiple times on gas exchange lung injury, hemodynamic, and lung mechanics.Randomized prospective comparison.Animal research laboratory.Nineteen fasted Hampshire sheep.In 15 27-kg sheep with saline lavage lung injury, we compared the effects of two recruitment maneuvers: 40 cm H2O continuous positive airway pressure for 60 secs and 40 cm H2O positive end-expiratory pressure with 20 cm H2O pressure control, rate 10 breaths/min, inspiratory to expiratory ratio 1:1 for 2 mins. Each recruitment maneuver was repeated four times, every 30 mins after a 30-sec ventilator disconnection. An additional group received no recruitment maneuvers. Animals were assigned randomly to the three groups and ventilated with 20 cm H2O positive end-expiratory pressure, pressure control 15 cm H2O, rate 20 breaths/min, inspiratory to expiratory ratio 1:1, and Fio2 1.0 between recruitment maneuver periods.Significant and marked increases in Pao2 were observed in the pressure control recruitment maneuver group but only after the second recruitment maneuver. In both the control group and continuous positive airway pressure groups, Pao2 did not significantly increase after any recruitment maneuver compared with baseline injury. There was a significant decrease in cardiac output immediately after some continuous positive airway pressure recruitment maneuvers and a significant increase in mean pulmonary artery pressure in both continuous positive airway pressure and pressure control groups immediately after recruitment maneuvers, but these changes resolved within 10 mins. There were no marked histologic differences between groups and no volutrauma.In this model, maximal lung recruitment was obtained with 40 cm H2O positive end-expiratory pressure and 20 cm H2O pressure control applied repetitively every 30 mins for 2 mins without physiologic or histologic harm. Multiple recruitment maneuvers in some animals were required for maximum effect.

É sabido que certos pacientes asmáticos apresentam perda parcial e irreversível da função respiratória ao longo do tempo. Postula-se que o processo inflamatório crônico em vias aéreas, característico da doença, poderia, através da liberação de diversos mediadores inflamatórios, ocasionar alterações estruturais irreversíveis nas vias aéreas e conseqüente piora da broncoconstrição, contribuindo assim para o fenômeno de perda de função pulmonar. A este processo creditou-se o nome de remodelamento brônquico. Nesta revisão descrevem-se os mecanismos propostos para o remodelamento brônquico, o papel dos diversos mediadores inflamatórios envolvidos e as diversas alterações patológicas observadas em vias aéreas asmáticas. Para cada alteração estrutural descrita, discute-se a possível conseqüência funcional. O entendimento do remodelamento brônquico é importante para o melhor manejo dos pacientes com asma e para a prevenção da deterioração funcional definitiva. The relationship between structure and function in asthma has been extensively studied. All the compartments of the airway have been shown to have some structural alterations contributing to functional defects. The structural alterations are thought to be a consequence of the chronic inflammation present in asthmatic airways, leading ultimately to remodeling. The decline of the ventilatory function over time in some asthmatic patients may be a consequence of airway remodeling. In this review, the authors describe the phenomena leading to airway remodeling and discuss the role of inflammatory mediators involved in this process. The structural alterations of the asthmatic airways are presented and the possible correlated functional defects are discussed. Universidade de São Paulo Faculdade de Medicina Departamento de Patologia Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina UNIFESP, EPM SciELO

We investigated in vivo and in vitro oscillatory mechanics in bleomycin-induced fibrotic lungs and correlated these with morphometric changes in the collagen-elastin matrix and contractile cells. Fischer rats received bleomycin sulfate (BLEO,1.5 U) or saline intratracheally. Four weeks later tracheal flow and tracheal and alveolar pressure (using alveolar capsules) were measured in open-chested rats during mechanical ventilation (V T = 8 ml/kg, f = 1 Hz, PEEP = 4 cm H(2)O). Total lung, tissue, and airway resistance (R) and lung elastance (E) were calculated. In addition, excised parenchymal strips (10 x 2 x 2 mm) were studied in the organ bath. Strips were attached to a force transducer at one end and to a servo-controlled lever arm that effected length (L) changes at the other. Sinusoidal oscillations were applied (f = 1 Hz, amplitude = 2. 5% resting L and tension = 0.7 g) and R, E, and hysteresivity (eta) were calculated. Strips were then exposed to acetylcholine (ACh, 10(-)(3) M). The amount of collagen and elastic fibers in the parenchymal strip was assessed semiquantitatively by point-counting in 5-micrometer-thick sections stained with either Sirius Red or Weigert's Resorcin-fuchsin. alpha-Smooth-muscle-specific actin was detected immunohistochemically. Both in vivo and in vitro, R, E, and eta were significantly increased in BLEO rats (p < 0.05). The % increase in R, E and eta after Ach was greater in BLEO rats (p < 0. 01). There was also a significant increase in the volume proportion of collagen, elastic fibers, and actin in the parenchyma (p < 0.01). In BLEO rats, baseline R and E were correlated with the volume proportion of collagen in the parenchyma. We conclude that changes in the collagen-elastin matrix contribute to changes in the viscoelastic properties of bleomycin-treated rat lungs. Dolhnikoff M, Mauad T, Ludwig MS. Extracellular matrix and oscillatory mechanics of rat lung parenchyma in bleomycin-induced fibrosis.

The collagen-elastin-proteoglycan (PG) matrix is the key constituent of lung parenchyma and plays a major role in the mechanical behavior of lung tissues. However, the exact composition of the PG matrix in lungs has not yet been fully determined. In the present study we report the expression of leucine-rich repeat PGs in adult human lungs. PG extraction was performed on peripheral lung tissue from patients undergoing therapeutic lung resections. The samples were analyzed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis and immunoblotting using antipeptide antisera specific to human lumican, decorin, biglycan, and fibromodulin. Control experiments to verify antiserum reactivity were performed with an extract of adult human articular cartilage, which is known to contain all four PGs. In all lung extracts analyzed, a single component of molecular weight 65 to 90 kD was detected for lumican. Decorin, biglycan, and fibromodulin were either not detected or were barely detectable in the lung extracts, but were readily visualized in the cartilage samples. Immunohistochemistry showed that lumican was diffusely present in peripheral lung tissue, mainly in vessel walls. These results suggest that lumican is a major component of the PG matrix in adult human lungs.

Objective : To develop and study an experimental model for severe pancreatitis-associated lung injury. Design : Prospective, randomized, controlled trial. Setting : University pulmonary laboratory. Subjects : Seventy-eight male Wistar rats. Interventions : Pancreatitis was induced by taurocholate injection into the pancreatic duct. Data were compared with data from sham-operated animals. Measurements and Main Results : Pulmonary mechanical measurements were performed in anesthetized and mechanically ventilated rats. Alveolar pressure was obtained by the alveolar capsule technique. Lungs were fixed at functional residual capacity by immersion in liquid nitrogen and were submitted to morphometric studies. Dynamic pulmonary elastance was found to be increased in the acute pancreatitis group (2.25 ± 0.21 vs. 1.62 ± 0.10 cm H 2 O/mL [p

We have previously shown that, after induced constriction, there is substantial distortion of the parenchymal tissues. In this study we investigated whether differences in parenchymal morphology occurred when the lung was constricted at different lung volumes. We measured tracheal pressure and calculated lung resistance in mechanically ventilated rats under control conditions and after aerosol administration of methacholine (256 mg/ml) at different positive end-expiratory pressures (PEEP = 7, 5, and 3 cmH2O). The lungs were frozen with liquid nitrogen at different PEEP levels and processed via freeze substitution. We measured airway constriction as the ratio of the airway lumen to the ideally relaxed area, alveolar size by measuring the mean linear intercept between alveolar walls, and tissue distortion as the standard deviation of the number of intercepts in the 40 fields sampled per lung. The increase in lung resistance was largest at PEEP = 3 cmH2O. Whereas airway constriction decreased and alveolar size increased at higher lung volume (PEEP = 7 cmH2O), tissue distortion did not change. These data suggest that parenchymal distortion after induced constriction was not attributable to airway narrowing and/or closure.

We studied airway and pulmonary tissue responses to platelet-activating factor (PAF) in rats by measuring alveolar pressure with the alveolar capsule technique. We calculated airway resistance (Raw), dynamic elastance (Edyn), and pulmonary tissue resistance (Rtis). PAF was administered intravenously in doses of 0.1, 1, 10, and 30 micrograms (1 dose per animal, 5 rats for each dose). Infusion of PAF resulted in a significant increase in Rtis and Edyn (p.05). Maximal values of Edyn were observed with the infusion of 10 micrograms of PAF (p.02). Rtis presented a significant increase after infusion of 1 microgram of PAF (p.05). The observed increase in Raw was transient and did not reach statistical significance. After infusion of PAF lungs were fixed by a quick-freezing method. Morphometric analysis showed that PAF infusion resulted in significant increases in intraluminal secretion (p = .001) and peribronchiolar edema (p.001) but did not result in significant airway contraction. We conclude that intravenous infusion of PAF results in significant effects on lung tissue mechanics. The effects of PAF on the mechanical properties of lung parenchyma reflect the inflammatory alterations induced by this agonist in distal airspaces.

We studied the effects of selective depletion of neurokinins in sensory nerve fibers by capsaicin treatment on the airway and pulmonary tissue responses to methacholine. Dose-response curves to aerosolized methacholine were performed on anesthetized and mechanically ventilated Wistar rats. Capsaicin (50 mg/kg sc) was administered to 2-day-old rats, and the animals were studied after 12 wk. The response to each dose of methacholine was determined by measuring changes in airway resistance (R(aw)), dynamic pulmonary elastance (Edyn), and pulmonary tissue resistance (Rtis). We calculated sensitivity (Kx) as the concentration of methacholine required for a one-half maximal response and reactivity as the relationship between the maximum response and Kx. Capsaicin treatment resulted in significantly greater values of Kx and lower values of reactivity for R(aw), Edyn, and Rtis compared with control rats. Morphometric analysis of airways showed similar values of the area occupied by smooth muscle but a significantly lower (P < 0.02) area of airway epithelium in capsaicin-treated rats. Our results suggest that methacholine requires capsaicin-sensitive nerves for part of its airway and lung tissue effects.

Background Structural and inflammatory changes in asthma involve both the large and small airways, with involvement of the distal lung being related to disease severity. We have previously shown that changes in the extracellular matrix (ECM) composition of the distal lung are associated with loss of alveolar attachments in patients with fatal asthma. However, major ECM elements, such as collagen I and fibronectin and their regulators, have not been addressed at the distal level. Objective We sought to evaluate ECM remodeling in the distal lungs of asthmatic patients. Methods Using immunohistochemistry and image analysis, we determined the content of collagen I and III, fibronectin, and matrix metalloproteinases (MMPs) 1, 2, and 9 and tissue inhibitors of metalloproteinase (TIMPs) 1 and 2 in the large and small airways and lung parenchyma of 24 patients with fatal asthma and compared the results with those of 11 nonasthmatic control subjects. Protein content was defined as the area of positive staining divided by basement membrane or septum length. Results We observed increased collagen I and decreased collagen III content in the small airways of asthmatic patients compared with that seen in control subjects. Greater fibronectin and MMP-1, MMP-2, and MMP-9 content was observed at the outer area of the small airways in asthmatic patients. MMP content was also increased in the peribronchiolar parenchyma in asthmatic patients. In contrast, TIMP expression was only increased in the large airways of asthmatic patients compared with that seen in control subjects. Conclusions The outer area of the small airways is a major site of ECM remodeling in fatal asthma, potentially contributing to functional changes and the loss of airway-parenchyma interdependence observed in patients with fatal asthma.

In acute lung injury (ALI), elevation of procollagen type III (PC III) occurs early and has an adverse impact on outcome. We examined whether different high-inflation strategies of mechanical ventilation (MV) in oleic acid (OA) ALI alter regional expression of PC III. We designed an experimental, randomized, and controlled protocol in which rats were allocated to two control groups (no injury, recruited [alveolar recruitment maneuver after tracheotomy without MV; n = 4 rats] and control [n = 5 rats]) or four injured groups (one exposed to OA only [n = 10 rats] and three OA-injured and ventilated). The three OA-injured groups were ventilated for 1 hour according to the following strategies: LVHP-S (low volume-high positive end-expiratory pressure [PEEP], supine; n = 10 rats, tidal volume [VT] = 8 ml/kg, PEEP = 12 cm H2O), HVLP-S (high volume-low PEEP, supine; n = 10 rats, VT = 20 ml/kg, PEEP = 5 cm H2O), and HVLP-P (high volume-low PEEP, prone; n = 10 rats). Northern blot analysis for PC III and interleukin-1-beta (IL-1β) and polymorphonuclear infiltration index (PMI) counting were performed in nondependent and dependent regions. Regional differences between groups were assessed by two-way analysis of variance after logarithmic transformation and post hoc tests. A significant interaction for group and region effects was observed for PC III (p = 0.012) with higher expression in the nondependent region for HVLP-S and LVHP-S, intermediate for OA and HVLP-P, and lower for control (group effect, p < 0.00001, partial η2 = 0.767; region effect, p = 0.0007, partial η2 = 0.091). We found high expression of IL-1β (group effect, p < 0.00001, partial η2 = 0.944) in the OA, HVLP-S, and HVLP-P groups without regional differences (p = 0.16). PMI behaved similarly (group effect, p < 0.00001, partial η2 = 0.832). PC III expression is higher in nondependent regions and in ventilatory strategies that caused overdistension. This response was partially attenuated by prone positioning.

Between 1997 and 1999 three sericite plant workers in Parana, Brazil, were diagnosed with pneumoconiosis.To investigate and describe the radiological, clinical, and pathological changes in miners and millers exposed to sericite dust with mineralogical characteristics of inhaled dust.The working premises were visited to examine the sericite processing and to classify the jobs according to make qualitative evaluation. Respirable dust was collected and the amount of crystalline silica and particle size distribution were measured. Forty four workers were examined by a standard questionnaire for respiratory symptoms, spirometry, and chest x ray. Material from an open lung biopsy was reviewed for histopathological and mineralogical analysis, together with sericite samples from the work site to compare the mineral characteristics in lung lesions and work area.Respirable dust contained 4.5-10.0% crystalline silica. Particle size distribution showed a heavy burden of very fine particles (23-55%) with a mean diameter of0.5 microm. Mean age of sericite miners was 41.0 (11.9) and mean number of years of exposure was 13.5 (10.1). In 52.3% of workers (23/44), chest radiographs presented a median category of 1/0 or above, and 18.2% (8/44) had a reduced FEV1. There was a significant association between exposure indices and x ray category. Histological studies of the lung biopsy showed lesions compatible with mixed dust fibrosis with no silicotic nodules. x Ray diffraction analysis of the lung dust residue and the bulk samples collected from work area showed similar mineralogical characteristics. Muscovite and kaolinite were the major mineral particle inclusions in the lung.Exposure to fine sericite particles is associated with the development of functional and radiological changes in workers inducing mixed dust lesions, which are distinct histologically from silicosis.

Summary Background Currently, there are no studies of well-characterized severe asthmatics in Brazil. We aimed to study a population of severe treated asthmatics still uncontrolled to characterize them and define possible phenotypes. Methods Descriptive cross-sectional outpatient study of severe asthmatics, evaluating functional and inflammatory markers, health-related quality of life, anxiety and depression symptoms, clinical control status, and characteristics related to atopy, age of asthma onset, induced sputum eosinophil levels, and airflow limitation. We also grouped the subgroups characteristics to identify phenotypes. The study is registered on ClinicalTrial.gov NCT 01089322. Results From 128 eligible patients with severe/uncontrolled asthma, 74 fulfilled the inclusion criteria. The cohort was comprised of 85% women, frequently with a body mass index higher than 31 kg m −2 , atopy (60%), early-onset disease (50%), sputum eosinophilia (80%), comorbidities, and reduced quality of life. Nonatopics had significant higher asthma onset (19 y.a.) and twice level of induced sputum eosinophil. Late-onset patients had significantly less atopy (57%) and higher levels of induced sputum eosinophils. Non-eosinophilics had lower levels of inflammatory markers. Patients with airflow limitation had more intensive care unit admissions (56%) and 1.5 times more airway resistance. Subgroups characteristics identified a priori four well-characterized phenotypes, with 55% presenting sputum eosinophilia. Conclusion Our data emphasize the high burden of disease, the persistence of inflammation and the existence of clinical possible phenotypes population sharing common features with published cohorts. Despite the necessity of further investigation into pathogenic mechanisms, this study with clinically difficult patient group may help to improve future asthma care.

Background The importance of the lung parenchyma in the pathophysiology of asthma has previously been demonstrated. Considering that nitric oxide synthases (NOS) and arginases compete for the same substrate, it is worthwhile to elucidate the effects of complex NOS-arginase dysfunction in the pathophysiology of asthma, particularly, related to distal lung tissue. We evaluated the effects of arginase and iNOS inhibition on distal lung mechanics and oxidative stress pathway activation in a model of chronic pulmonary allergic inflammation in guinea pigs. Methods Guinea pigs were exposed to repeated ovalbumin inhalations (twice a week for 4 weeks). The animals received 1400 W (an iNOS-specific inhibitor) for 4 days beginning at the last inhalation. Afterwards, the animals were anesthetized and exsanguinated; then, a slice of the distal lung was evaluated by oscillatory mechanics, and an arginase inhibitor (nor-NOHA) or vehicle was infused in a Krebs solution bath. Tissue resistance (Rt) and elastance (Et) were assessed before and after ovalbumin challenge (0.1%), and lung strips were submitted to histopathological studies. Results Ovalbumin-exposed animals presented an increase in the maximal Rt and Et responses after antigen challenge (p

PurposeRecent studies suggest a role for distal airway injury in acute respiratory distress syndrome (ARDS). The epithelium lining the small airways secretes a large number of molecules such as surfactant components and inflammatory mediators. There is little information on how these small airway secretory functions are altered in ARDS.Materials and MethodsWe studied the lungs of 31 patients with ARDS (Pao2/fraction of inspired oxygen ≤200, 45 ± 14 years, 16 men) and 11 controls (52 ± 16 years, 7 men) submitted to autopsy and quantified the expression of interleukin (IL) 6, IL-8, surfactant proteins (SP) A and SP-B in the epithelium of small airways using immunohistochemistry and image analysis. In addition, an index of airway epithelial apoptosis was determined by the terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine-triphosphatase nick-end labeling assay, caspase 3, and Fas/Fas ligand expression. The density of inflammatory cells expressing IL-6 and IL-8 within the small airway walls was also quantified.ResultsAcute respiratory distress syndrome airways showed an increase in the epithelial expression of IL-8 (P = .006) and an increased density of inflammatory cells expressing IL-6 (P = .004) and IL-8 (P < .001) compared with controls. There were no differences in SP-A and SP-B epithelium expression or in epithelial apoptosis index between ARDS and controls.ConclusionDistal airways are involved in ARDS lung inflammation and show a high expression of proinflammatory interleukins in both airway epithelial and inflammatory cells. Apoptosis may not be a major mechanism of airway epithelial cell death in ARDS.

Introduction: The regular practice of physical exercise has been associated with beneficial effects on various pulmonary conditions. We investigated the mechanisms involved in the protective effect of exercise in a model of lipopolysaccharide (LPS)-induced acute lung injury (ALI). Methods: Mice were divided into four groups: Control (CTR), Exercise (Exe), LPS, and Exercise + LPS (Exe + LPS). Exercised mice were trained using low intensity daily exercise for five weeks. LPS and Exe + LPS mice received 200 µg of LPS intratracheally 48 hours after the last physical test. We measured exhaled nitric oxide (eNO); respiratory mechanics; neutrophil density in lung tissue; protein leakage; bronchoalveolar lavage fluid (BALF) cell counts; cytokine levels in BALF, plasma and lung tissue; antioxidant activity in lung tissue; and tissue expression of glucocorticoid receptors (Gre). Results: LPS instillation resulted in increased eNO, neutrophils in BALF and tissue, pulmonary resistance and elastance, protein leakage, TNF-alpha in lung tissue, plasma levels of IL-6 and IL-10, and IL-1beta, IL-6 and KC levels in BALF compared to CTR (P ≤0.02). Aerobic exercise resulted in decreases in eNO levels, neutrophil density and TNF-alpha expression in lung tissue, pulmonary resistance and elastance, and increased the levels of IL-6, IL-10, superoxide dismutase (SOD-2) and Gre in lung tissue and IL-1beta in BALF compared to the LPS group (P ≤0.04). Conclusions: Aerobic exercise plays important roles in protecting the lungs from the inflammatory effects of LPSinduced ALI. The effects of exercise are mainly mediated by the expression of anti-inflammatory cytokines and antioxidants, suggesting that exercise can modulate the inflammatory-anti-inflammatory and the oxidative-antioxidative balance in the early phase of ALI.

O início de uma nova doença, cujo epicentro se deu em Wuhan - China - com sintomas similares a de uma pneumonia com alto potencial de disseminação, fez com que a Organização Mundial de Saúde decretasse o status de pandemia a está nova doença, chamando a, então, de COVID-19. O agente causador dessa doença foi identificado como um vírus da família coronoviridae denominado SARS-CoV-2. Tal patógeno apresenta como seu órgão alvo o pulmão, instalando um dano alveolar difuso e consequentemente a falência respiratória aguda levando milhares de pessoas a óbito através do mundo. Assim como outros vírus da família coronoviridae, o SARS-CoV-2 utiliza-se de receptores ACE2 e TMPRSS para ligar-se as células do hospedeiro, apresentando assim intenso tropismo por tecidos epiteliais. Neste racional o objetivo deste trabalho foi aprofundar o conhecimento sobre as interações do SARS-CoV-2 e os nichos epiteliais da cavidade oral a partir de autópsias de pacientes que foram a óbito por complicações da COVID-19, desenvolvendo novas metodologias de coletas e reflexões sobre o papel desta técnica na odontologia com diferentes ensaios. Foram realizadas 40 autopsias minimamente invasivas, coletando múltiplos sítios da cavidade oral com o intuito de identificar e caracterizar a presença do SARS-CoV-2 em tecidos de glândulas salivares e periodonto, assim como, avaliar clinicamente potenciais lesões orais. Por fim, avaliar a interação de agentes descontaminantes do vírus nos tecidos da cavidade oral e demonstrar a importância da utilização das autopsias para a odontologia em diversas abordagens metodológicas. Foram realizadas análises biomoleculares dos tecidos glandulares e periodontais sendo as amostras positivas em 5/7 periodontos e 22/35 das glândulas salivares maiores e 80% das menores. A avaliação IHC anti-SARS-CoV-2 foi positiva 55% dos casos. As reações de imunopostividade para os receptores ACE2 e TMPRSS2 foram francamente positivas em todos os casos de tecido periodontal e glândulas salivares. As avaliações das lesões orais se mostraram majoritariamente como coinfecções decorrentes da deterioração da saúde geral dos pacientes. Visto a cinética viral nos nichos orais, os relatos de casos corresponderam com o racional viral, não tendo capacidade sustentada de erradicar o vírus das amostras avaliadas. A utilização das autópsias para avaliação dos tecidos orais se mostrou uma técnica segura e que permite uma avaliação ampla das amostras, assim como, das interações do mesmo com outros órgãos Resume: The beginning of a new disease, in Wuhan China that presents pneumonia symptoms and high transmissibility, made the World Health Organization decree a pandemic status, calling this disease COVID-19. The pathogen of this disease was a new virus, named SARS-CoV-2. The viruss main targets are the lung epithelial cells causing diffuse alveolar damage and consequently respiratory distress, leading thousands of people to death. Like other coronaviridae viruses, the SARS-CoV-2 uses ACE2 and TMPRSS2 receptors to bond into membrane host cells, showing intense epithelial tropism. The aim of this research is to understand and create knowledge about the relation between the SARS-CoV-2 and oral epithelial niches based on autopsies from COVID-19 deceased patients, developing new sample methodologies and insights about the autopsy role in dentistry in several methodological approaches. We performed 40 minimally invasive autopsies, sampling multiple oral cavity sites aiming to identify and characterize the SARS-CoV-2 presence in salivary glands and periodontal tissues, as well as, evaluate some clinically evident oral lesions. Finally, evaluate the decontaminate potential from chemical agents and show the value of autopsies in dentistry science. We did analyze tissues from salivary glands and gingiva using biomolecular assays that resulted positive for SARSCoV-2 in 5/7 periodontal tissues and 22/35 major salivary glands and 80% of minor ones. The immunohistochemistry analysis showed positivity in 55% of the cases. Immunopositivity for ACE2 and TMPRSS2 was frankly positive in all cases involving periodontal and glandular tissue. The evaluation of oral lesions showed in the vast majority as coinfections that appear in recurrence of the poor health status of the patients. The case reports using different methods of decontamination showed transient results, with recontamination during time in the analyzed sample. The use of autopsies to evaluate oral samples seems to be a secure method and allows us an overview of oral and systemic health, the use of new biomolecular techniques must be employed for further validation of new diseases using samples coming from deceased patients

Este estudo buscou avaliar o potencial da poluição na promoção de neoplasias utilizando camundongos como modelo experimental. Os camundongos foram colocados em câmaras de topo aberto, nas seguintes condições de exposição: Ar Limpo, com filtro para partículas e gases; Intermediário, com filtro para gases e Ar Sujo, sem filtragem. Em cada câmara os camundongos foram divididos em dois grupos, um recebeu n-nitroso-metil-uretana (2g por quilo de peso) e o outro serviu de controle recebendo solução salina . Os camundongos foram acompanhados por 2 meses. Os pulmões foram pesados e instilados com formol tamponado, foram observados macroscopicamente quanto à presença de tumores. A contagem macroscópica de nódulos demonstrou que existem diferenças entre os grupos. Os animais que receberam solução salina não apresentaram nódulos não importando as condições de exposição, o grupo que ficou exposto na câmara limpa apresentou uma média de 2,2 nódulos, o grupo da câmara intermediária teve como média o valor de 3,3 nódulos e o grupo da câmara suja 4,6 nódulos. A análise estatística demonstrou haver diferenças entre a câmara limpa uretana e a câmara suja uretana. Este estudo demonstrou que os poluentes do ar podem promover neoplasias pulmonares. This study aims to evaluate the potential of air pollution on neoplasms promotion using mouse as a experimental model. Mice were placed in open top chamber, on the following conditions: Clean air, with filtration of gases and particles; Intermediary, with filtration of gases only and Dirty air, without filter. In each chamber mouse were divided in two groups, one of then received urethane (2g/k of weigh) and the other was control group receiving salina solution. Mice were maintained in the chambers for two months. After this period animals were death and lungs were weigh and instilled with formol, nodules were counted. Nodules count showed differences between the groups. Control animals did not present any nodule no matter the chamber they were placed. In the urethane group, the animals placed in the clean chamber presented an average of 2,2 nodules per animal, in the intermediary chamber the average was 3,3 per animal and in the dirty chamber the average was 4,6 nodules. Statistic showed that dirty chamber urethane group was different from clean chamber urethane group. This study showed that air pollutant can promote lung neoplasms.

INTRODUÇÃO: O objetivo do estudo foi avaliar o perfil de marcadores imuno-histoquímicos relacionados às células NK em biópsias de aloenxertos renais com diagnóstico anatomopatológico de rejeição aguda (mediadas por células T ou anticorpos) e estabelecer relações desses marcadores com parâmetros morfológicos de lesão à microcirculação e sobrevida do enxerto. MÉTODOS: Estudo retrospectivo histórico que revisou 74 biópsias realizadas entre janeiro de 2009 e dezembro de 2012, de pacientes com rejeição aguda mediada por células T (n=36), rejeição aguda mediada por anticorpos com expressão positiva (n=19) ou negativa (n=19) para o marcador C4d, juntamente com levantamento de dados clínicos e laboratoriais pertinentes ao estudo. Foram realizadas reações imuno-histoquímicas, para os marcadores CD56, CD57, CD16, CD68, CD3, CD8 e CD4 com ênfase para os marcadores CD56 e CD16. Foi feita análise das células positivas em toda a cortical da biópsia nos compartimento intersticial, glomerular e vascular. Testes estatísticos foram aplicados conforme os pressupostos definidos no objetivo da pesquisa. RESULTADOS: No compartimento intersticial, células CD56+ (P = 0,004) e CD57+ (P < 0,001) foram expressas em maior quantidade em biópsias negativas para dosagem sérica de anticorpos específicos anti-doador (DSA) com diagnóstico de rejeição aguda mediada por células T. CD56 intersticial foi associado estatisticamente com presença de glomerulite (g >= 1) (P = 0,02) e ausência / leve capilarite peritubular (ptc = 1) (P = 0.02) and peritubular capillaritis (ptc >= 2) (P = 0.003). Interstitial CD56 + cells with mean superior to 0.56cells/mm2 had worse allograft survival (P = 0.028). CD56+ cells in the interstitial compartment with mean inferior or equal to 0.56cells/mm2 associated with absence or mild peritubular capillaritis (P = 0.012) and mean superior to 0.56cells/mm2 was associated with presence of glomerulitis (P = 0.002). CD16+ cells was increased in the glomerular compartment in DSA-positive biopsies (P = 0.03) and in the presence of glomerulitis (P = 0.009). Interstitial CD16+ cells associated with peritubular capillaritis (P = 0.0001).CONCLUSION: CD56+ cell infiltrates in the interstitial compartment were significantly associated with microcirculation injury scores, especially glomerulitis, acute T-cell mediated rejection and clinical outcomes. CD16+ cell infiltrates in glomerular compartment was associated with acute antibody-mediated rejection and glomerulitis. Our findings showed variations in expression of NK cells markers in renal biopsy different compartments which might suggest the involvement of NK cells in different immune system pathways in acute renal allograft rejection

Alguns estudos sugerem que as pequenas vias aéreas têm um papel importante na fisiopatologia da lesão pulmonar aguda/ síndrome do desconforto respiratório agudo (LPA/SDRA). O epitélio respiratório que reveste as vias aéreas é capaz de liberar mediadores inflamatórios e está relacionado ainda com a produção de surfactante nas vias aéreas. Até o presente momento, existem poucos estudos que avaliaram se estas funções do epitélio que reveste as pequenas vias aéreas encontram-se alteradas na SDRA. No presente estudo, nós mensuramos a expressão da proteína de surfactante (PS) A e PS-B, a expressão de citocinas inflamatórias interleucina (IL)-6 e IL-8, e um índice de apoptose do epitélio que reveste as pequenas vias aéreas de pacientes com SDRA que foram submetidos a autópsia e comparamos estes resultados com os de indivíduos controle. Foram incluídos no estudo pulmões de autópsia de 31 pacientes com SDRA (PaO2/FiO2200, 45±14 anos, 16 homens) e 11 controles (52±16 anos, 7 homens). A expressão de IL-6, IL-8, PS-A e PS-B no epitélio das pequenas vias aéreas (diâmetro2.0mm) foi verificada através de reações de imunohistoquímica e análise de imagem. O índice de apoptose epitelial das vias aéreas foi avaliado através do método de TUNEL e da expressão de FAS/FASL. Avaliou-se ainda a densidade de células inflamatórias positivas para IL-6 e IL-8 na parede das pequenas vias aéreas. As vias aéreas dos pacientes com SDRA apresentaram maior expressão epitelial de IL-8 (p=0,006) e maior densidade de células inflamatórias expressando IL-6 (p=0,004) e IL-8 (p

Introdução: O uso de biomassa como combustível para aquecimento e preparação de alimentos vem sendo considerado como um importante fator associado à prevalência aumentada de sintomas respiratórios e à perda de função pulmonar. No presente estudo apresentamos os efeitos respiratórios da exposição crônica à combustão de biomassa (BM) dentro (BMD) ou fora (BMF) do domicílio em uma população do interior do Brasil e comparamos os resultados aos de indivíduos da mesma população que utilizam gás liquefeito de petróleo (GLP). Métodos: Foram incluídos 1402 indivíduos em 260 domicílios divididos em três grupos de acordo com a exposição (GLP, BMD, BMF). Os sintomas respiratórios foram avaliados utilizando questionários validados. O índice de refletância de filtros de papel foi utilizado para avaliar a exposição à biomassa. Em 48 domicílios a concentração de material particulado PM2,5 também foi quantificada. Provas de função pulmonar (PFP) foram realizadas em 120 indivíduos. Resultados: O índice de refletância correlacionou-se diretamente com a concentração de PM2,5 (r=0,92, p

Há diversas evidências epidemiológicas de correlações positivas entre indicadores de morbidade e mortalidade pulmonar e cardiovascular e aumentos na concentração atmosférica de MP2,5 (material particulado fino). O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da exposição subcrônica de MP2,5 sobre o tônus cardíaco autonômico, a inflamação pulmonar e sistêmica; o estresse oxidativo e a homeostase sanguínea, após oito semanas de repetidas instilações nasais de suspensão aquosa de MP2,5 da cidade de São Paulo em concentração ambiental. Dividiram-se os animais em dois grupos: salina e MP2,5 e avaliaram-se os seguintes parâmetros: frequência cardíaca (FC), variabilidade da frequência cardíaca (VFC), pressão arterial sistólica (PA), hemograma, contagem de plaquetas e reticulócitos, fibrinogênio plasmático, tempo de protrombina (TP), tempo de tromboplastina parcialmente ativada (TTPA), mielograma, citologia do lavado broncoalveolar (LBA), análise histopatológica e imuno-histoquímica (15-F2tisoprostano e -actina) de pequenas arteríolas pulmonares e coronarianas. Não houve alterações na FC e na PA (p > 0,05). Houve interação estatisticamente significante entre grupos e semanas em relação à VFC. O SDNN (desvio padrão dos intervalos R-R normais), a r-MSSD (raiz quadrada da média dos quadrados das diferenças sucessivas entre intervalos R-R normais adjacentes) e a AF (alta frequência) do grupo MP2,5 aumentaram significativamente na 7ª semana em comparação à 1ª semana (p < 0,05), enquanto a BF (baixa frequência) não se alterou (p > 0,05). A porcentagem de macrófagos no LBA do MP2,5 diminuiu significativamente (p < 0,05). Não se observaram alterações no sangue, mielograma e análise histopatólogica e imuno-histoquímica dos vasos (p > 0,05). Concluiu-se que a exposição subcrônica pela instilação nasal de suspensão aquosa de MP2,5 em concentração ambiental causou inflamação pulmonar tênue e alterou o equilíbrio cardíaco autonômico There are several epidemiological evidences of positive correlation between indicators of pulmonary and cardiovascular morbidity and mortality and increases of PM2.5 (fine particulate matter) air concentration. The aim of this experiment was to evaluate the effects of subchronic exposure of PM2.5 on cardiac autonomic tone, pulmonary and systemic inflammation, oxidative strees and blood homeotasis of healthy rats after eight weeks of repeated nasal instillations of suspended PM2.5 from Sao Paulo city in environmental concentration. Rats were divided in two groups: saline and PM2.5. The following parameters were evaluated: heart rate (HR), heart rate variability (HRV), systolic blood pressure (BP), hemogram, platelets and reticulocytes count, plasmatic fibrinogen, prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (APTT), bone marrow cells, bronchoalveolar lavage cells (BAL), histopathological and immunohistochemical analysis (15-F2tisoprostane and -actin) of pulmonary and coronary small arterioles. No changes were detected in HR and BP (p > 0.05). There were a statistically significant interaction between groups and weeks in relation to HRV. SDNN (standard deviation of normal RR intervals), r-MSSD (square root of the mean of the squared differences between adjacent normal RR intervals) and HF (high frequency) of PM2.5 group significantly increased on 7th week compaired to 1st week (p < 0.05), while LF (low frequency) did not alter (p > 0.05). BAL macrophages porcentage of PM2.5 group significantly decreased (p < 0.05). No alterations were observed in blood, bone marrow cells, histopathological and immunohistochemical analysis of vessels (p > 0.05). We concluded that subchronic exposure by nasal instillation of aquous suspension of PM2.5 in environmental concentration caused tenuous pulmonary inflammation and altered cardiac autonomic balance

Mais de 60% dos pacientes com Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica (DPOC) podem apresentar hiper-responsividade brônquica. Entretanto, não se sabe se, além das vias aéreas, o tecido pulmonar periférico também apresenta uma resposta exagerada a um agonista na DPOC. No presente estudo foi investigado o comportamento mecânico in vitro e as alterações estruturais e inflamatórias do tecido pulmonar periférico de 10 pacientes com DPOC comparados com 10 controles não fumantes. Foram realizadas medidas de resistência (R) e elastância (E) de fatias pulmonares em situação basal e após desafio com Acetilcolina. Também foram analisados no tecido alveolar as densidades de neutrófilos, eosinófilos, macrófagos, mastócitos e linfócitos CD8+ e CD4+, além do conteúdo de células positivas para -actina de músculo liso, fibras elásticas e colágenas. Os valores de R após o tratamento com Acetilcolina (RACh) e a porcentagem de aumento de resistência (%R) foram significativamente maiores no grupo DPOC comparado ao grupo controle (p0,03). O grupo DPOC também apresentou densidade de macrófagos (p=0,04) e linfócitos CD8+ (p=0,017) significativamente maior e conteúdo de fibras elásticas significativamente menor (p=0,003) comparado ao grupo controle. Foi observada uma correlação positiva significativa entre a %R e a densidade de eosinófilos e linfócitos CD8+ (r=0,608, p=0,002; e r=0,581, p=0,001, respectivamente), e também uma correlação negativa significativa entre a %R e a relação VEF1/ CVF (r=-0,451, p

A poluição do ar é um importante fator ambiental de risco para muitos desfechos gestacionais e reprodutivos negativos. Neste estudo nós investigamos os efeitos da poluição particulada em dois períodos de exposição (antes da concepção e durante a gestação) sobre alguns desfechos reprodutivos e gestacionais em camundongos. Utilizando câmaras de exposição, uma recebendo ar filtrado (F) e outra ar não-filtrado (nF), observamos que as fêmeas expostas ao ar não filtrado apresentaram alterações na duração do ciclo estral, estro persistente e o número de folículos antrais reduziu cerca de 36% (75±35,2, P=0,04) comparado às expostas ao ar filtrado (118,6 ±18,4). Nossos resultados mostram ainda um aumento significativo no tempo necessário para que o acasalamento ocorra, uma diminuição nos índices de fertilidade e gestação (P=0.003) nos casais expostos ao ar não filtrado (nF). A taxa média de perdas pós implantacionais (PPI) está aumentada em 70% (P0,005) no grupo de fêmeas expostas ao ar não filtrado antes e durante a gestação quando comparada ao grupo exposto antes de durante a gestação ao ar filtrado. O peso fetal (PF) é significativamente maior no grupo exposto nos dois períodos ao ar filtrado quando comparado aos demais grupos expostos antes e/ou durante a gestação ao ar não filtrado. O PF e a taxa média de PPI são influenciados tanto pela exposição durante a gestação quanto a exposição que ocorre antes da gestação. A exposição materna prévia a gestação e durante a primeira fase gestacional são críticas para o aumento no risco de baixo peso em camundongos. Nós também verificamos que a exposição ao ar não filtrado está associada a uma redução no volume, calibre e área de superfície dos espaços sanguíneos maternos, a um aumento na área de superfície dos capilares fetais, e na condutância de difusão da placenta. Alterações morfológicas no cordão umbilical também foram encontradas. Este estudo demonstra que a exposição aos níveis ambientais de poluição particulada de origem veicular afeta diferentes funções e estágios do processo reprodutivo. Nossos resultados também indicam que a exposição materna prévia está ligada a desfechos gestacionais negativos mesmo quando a exposição ocorre somente antes da concepção Air pollution is an important environmental health risk factor for many different gestational and reproductive negative outcomes. In this study we have investigated the effects of two different timing of exposure (before conception and during pregnancy) to urban ambient particulate matter on reproductive and pregnancy outcomes in mice. Using exposure chambers receiving filtered (F) and non-filtered (NF) we observed that exposed females presented changes in the length of estrus cycle, extended estrus and antral follicles number declined by 36% (P=0.04) in mice exposed to non filtered air (75±35.2) compared to mice exposed to filtered air(118.6 ±18.4). Our results further indicate a significant increase in time necessary to mating and decreased fertility and pregnancy indices (P=0.003) in NF couples. Mean postimplantation loss (PIL) rate was increased by 70% (P0.005) in the group exposed before and during pregnancy to non-filtered air when compared to the group exposed before and during pregnancy to filtered air. Fetal weight (FW) was significantly higher in group exposed during both periods to filtered air when compared to other groups exposed before and/or during pregnancy to non filtered air. FW and PIL mean rate were influenced by both pre-gestational (p

O parênquima pulmonar periférico tem sido estudado como um componente da resposta inflamatória na asma. Durante uma constrição induzida, a resistência do tecido aumenta em diferentes modelos de asma. Aproximadamente 60% dos pacientes asmáticos possuem respostas imediata e tardia. A resposta tardia é caracterizada por obstrução mais grave de vias aéreas. No presente estudo, foi avaliada a mecânica de fatias de parênquima pulmonar em cobaias sensibilizadas com ovoalbumina (OVA), tentando reproduzir ambas as repostas imediata e tardia. A mecânica oscilatória de fatias pulmonares foi realizada em um grupo controle (C), em um grupo de resposta imediata (IM) e em dois grupos de resposta tardia: 17 (T1) e 72 (T2) horas após o último desafio com ovoalbumina. Medidas de resistência (R) e elastância (E) foram obtidas antes e depois do desafio com OVA nos grupos C e IM e antes e depois do desafio com Acetilcolina (ACh) em todos os grupos. Com o uso de morfometria, foram avaliadas as densidades de eosinófilos e de células musculares lisas, assim como o conteúdo de colágeno e elastina nas fatias pulmonares. Os valores de R e E basais e pós-agonista estão aumentados nos grupos IM, T1 e T2 quando comparados com o grupo C (p = 0.001). A análise morfométrica mostrou um aumento na densidade de eosinófilos nas fatias de tecido periférico dos grupos IM e T2 quando comparados com o grupo C (p < 0.05). Houve uma correlação positiva significante entre a densidade de eosinófilos nas fatias de parênquima dos grupos C, T1 e T2 e os valores de R e E pós-ACh (r = 0,71, p = 0.001 e r = 0,74, p < 0.001, respectivamente). Os resultados mostram que o parênquima pulmonar está envolvido na resposta tardia deste modelo de inflamação alérgica crônica e que a resposta constritora nesta fase está relacionada à inflamação eosinofílica. The peripheral lung parenchyma has been studied as a component of the asthmatic inflammatory response. During induced constriction, tissue resistance increases in different asthma models. Approximately 60% of the asthmatic patients show early and late responses. The late response is characterized by more severe airway obstruction. In the present study, we evaluated lung parenchymal strips mechanics in ovalbumin-sensitized guinea pigs, trying to reproduce both early and late inflammatory responses. Oscillatory mechanics of lung strips were performed in a control group (C), in an early response group (ER), and in two late response groups: 17 (L1) and 72 (L2) hours after the last ovalbumin challenge. Measurements of resistance and elastance were obtained before and after ovalbumin challenge in C and ER groups and before and after Acetylcholine challenge in all groups. Using morphometry, we assessed the density of eosinophils and smooth muscle cells, as well as collagen and elastin content in lung strips. The baseline and post-agonist values of resistance and elastance were increased in ER, L1 and L2 groups compared with C (p = 0.001). The morphometric analysis showed an increase in alveolar eosinophil density in ER and L2 groups compared with C group (p < 0.05). There was a significant correlation between eosinophil density in parenchymal strips of C, L1 and L2 groups and values of resistance and elastance post-Acetylcholine (r = 0.71, p = 0.001 and r=0.74, p < 0.001, respectively). The results show that the lung parenchyma is involved in the late response of this guinea pig model of chronic allergic inflammation and the constriction response in this phase is related to the eosinophilic inflammation.

INTRODUÇÃO: O papel da linfangiogênese no transplante renal em humanos é desconhecido até o momento. As poucas publicações disponíveis acerca do assunto revelam resultados controversos. O presente estudo visa a avaliar a influência dos vasos linfáticos sobre aspectos clínicos e patológicos no transplante renal. MÉTODOS: Biópsias de indicação clínica de pacientes submetidos a transplante renal com enxertos oriundos de doadores falecidos na Unidade de Transplante Renal do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo de janeiro de 2007 a dezembro de 2009 foram selecionadas e os dados clínicos destes pacientes foram coletados do banco de dados. Estas biópsias foram classificadas de acordo com a Classificação de Banff. Reação imuno-histoquímica foi empregada para identificar vasos linfáticos, linfócitos T, linfócitos B e macrófagos. Análise histomorfométrica foi empregada para quantificar estes quatros elementos e a fibrose intersticial cortical. RESULTADOS: A presença de vasos linfáticos foi significativamente mais intensa em biópsias com rejeição aguda mediada por linfócitos T e com distúrbios infecciosos (nefropatia do poliomavírus e pielonefrite), quando comparadas à expressão de linfáticos com biópsias sem rejeição e com biópsias com fibrose intersticial e atrofia tubular de etiologia indeterminada. Biópsias com expressão de vasos linfáticos apresentaram escores semiquantitativos da Classificação de Banff mais altos. Os linfócitos B túbulo-intersticiais apresentaram maior concentração em amostra com presença de vasos linfáticos. A linfangiogênese não demonstrou influência sobre desfechos clínicos relevantes, como função renal e sobrevida do enxerto. CONCLUSÃO: O presente estudo associa a linfangiogênese com distúrbios inflamatórios túbulo-intersticiais do enxerto (rejeição aguda mediada por linfócitos T e infecções) e com infiltrado de linfócitos B. No entanto, a expressão de linfáticos não foi associada à influência sobre a função e a sobrevida do enxerto INTRODUCTION: The role of lymphangiogenesis in human kidney allograft is currently unknown. Controversial results have arisen from few publications available. This study intends to evaluate the influence of lymphatics on relevant clinical and pathological aspects of renal transplantation. METHODS: Clinically indicated biopsies from patients who underwent renal transplantation with allografts from deceased donors at the Renal Transplantation Unit of the Clinics Hospital of the University of São Paulo Medical School from January of 2007 to December of 2009 were selected and clinical data of these patients were retrieved from the database. These biopsies were classified according to the Banff Classification. Immunohistochemistry was used to identify lymphatic vessels, T lymphocytes, B lymphocytes, and macrophages. Morphometric analysis was employed to quantify their expression and cortical interstitial fibrosis. RESULTS: Lymphatic vessel formation was significantly higher in biopsies with acute T-cell mediated rejection and infectious disorders (polyomavirus-associated nephropathy and pyelonephritis) compared with no rejection and interstitial fibrosis and tubular atrophy without evidence of any specific etiology. Biopsies with expression of lymphatics presented higher levels of semiquantitative scores of the Banff Classification. B lymphocytes infiltrate was more intense in biopsies with lymphatics compared with those without the vessels. Lymphangiogenesis had no effect on important clinical parameters examined (graft function and graft survival two years post transplant). CONCLUSION: The present results associate lymphangiogenesis with kidney allograft tubulointerstitial inflammation (ATCMR and infectious disorders) and with B lymphocytes infiltrate. However, the presence of lymphatic vessels was not associated with any influence on graft function and survival

Introdução: O padrão de distribuição da lesão pulmonar na síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA) tem sido alvo de interesse de estudos com tomografia computadorizada. Entretanto, pouca informação é disponível quanto a distribuição e progressão histológica da lesão pulmonar na SDRA. Objetivos: Caracterizar a distribuição e progressão histológica da lesão pulmonar em modelo experimental de SDRA em suínos pela quantificação de parâmetros estruturais, inflamatórios e de remodelamento da matriz extracelular (MEC) e correlacioná-los com variáveis funcionais e de tomografia de impedância elétrica (TIE). Métodos: Vinte e três porcas da raça Landrace foram divididos em três grupos: 1) Sham (n=5): animais submetidos ao preparo e monitorização; 2) Lesão (n=9): animais submetidos ao protocolo de lesão e eutanasiados após 3 horas; 3) Lesão+MV: animais submetidos ao protocolo de lesão e eutanasiados após 40 horas de ventilação mecânica (VM) segundo a \"estratégia ARDSnet\". Os parâmetros histológicos foram mensurados por análise de imagem e incluíam: área alveolar, índice de espessamento septal, densidade neutrofílica, membrana hialina, hemorragia, edema intraalveolar e proporção de fibras colágenas. As medidas de cada parâmetro foram normalizadas pela mediana do grupo Sham. Expressão gênica de proteínas da MEC (colágeno tipo I e tipo III, versican, biglican e decorin) foram quantificados por PCR em tempo real. A ventilação regional foi mensurada por TIE. Foram analisadas regiões anteriores e posteriores do pulmão para cada variável. Resultados: A densidade neutrofílica foi menor no grupo Lesão+VM (p=0,02). A análise da área alveolar no grupo Lesão+VM mostrou que as regiões posteriores apresentaram menor área que as regiões anteriores (p=0,012). Entretanto, o espessamento septal foi maior no grupo Lesão+VM, especialmente nas regiões anteriores, quando comparado ao grupo Lesão (p

Introdução: A prática regular de exercício tem sido grandemente associada a efeitos benéficos em doenças pulmonares crônicas como asma e doença pulmonar obstrutiva crônica. Poucos estudos têm avaliado os benefícios do exercício aeróbico na lesão pulmonar aguda (LPA). Objetivo: Neste estudo nós investigamos os mecanismos envolvidos no papel do exercício físico em diminuir os danos pulmonares causados pela LPA induzida por lipopolissacarídeo (LPS). Métodos: Camundongos Balb/c foram divididos em quatro grupos: Controle (CTR), Exercício (Exe), LPS e Exercício+LPS (Exe+LPS). Os animais dos grupos Exe e Exe+LPS foram treinados em baixa intensidade por 60 minutos/dia, 3x/semana, durante 5 semanas. A instilação intratraqueal de LPS (200 /animal) foi realizada 48 horas após o último teste físico nos grupos LPS e Exe+LPS. Vinte e quatro horas após a instilação de LPS nós analisamos os níveis de óxido nítrico exalado (NO), a mecânica respiratória e a densidade de neutrófilos no tecido pulmonar. Nós analisamos também os níveis de extravasamento de proteína, contagem de células totais e diferenciais e os níveis de IL-1, IL-6, KC, IL-10 and TNF- no lavado bronco-alveolar (LBA). Os níveis de IL-6 e IL-10 também foram avaliados no plasma e tecido pulmonar. A expressão de receptores de glicocorticóide (Gre) e da enzima superóxido dismutase (SOD) foi analisada no tecido pulmonar. As atividades enzimáticas de glutationa peroxidade (GPX), catalase (CAT), glutationa redutase (GR), e SOD foram determinadas no homogenato de pulmão por espectrofotometria. O nível de malonaldeído (MDA) foi quantificado no homogenato de pulmão. Resultados: A instilação de LPS resultou em aumento nos níveis de NO exalado (p

A doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC) é caracterizada por inflamação crônica e alterações estruturais que levam a obstrução das pequenas vias aéreas e destruição do parênquima alveolar. A composição da matriz extracelular (MEC) nos pulmões tem um importante papel em prover e sustentar a arquitetura pulmonar. No entanto, não há uma descrição abrangente da composição da matriz extracelular no trato respiratório de indivíduos portadores de DPOC. No presente estudo investigou-se a composição da MEC das vias aéreas grandes (VAG), pequenas (VAP) e do parênquima pulmonar de pacientes com DPOC. Utilizando imunohistoquímica e análise de imagem analisou-se a área fracionada de fibras elásticas, colágenos I, III e IV, versicam, decorina, biglicano, lumicam, fibronectina e tenascina nas VAG, VAP e no parênquima peribrônquico e distal de 26 indivíduos com DPOC e comparou-se à área fracionada nos pulmões de 26 fumantes sem DPOC e 16 indivíduos não fumantes. A área fracionada de fibras elásticas foi significante maior no grupo de fumantes não obstruídos em comparação com os demais grupos, em todos os compartimentos analisados. Houve menor expressão de colágeno I na camada interna das VAG e nas camadas interna, muscular e externa das VAP dos indivíduos com DPOC e na camada externa das VAP dos fumantes não obstruídos quando comparados ao grupo controle. A área fracionada de versicam mostrou-se menor apenas no parênquima distal do grupo DPOC comparado ao grupo controle. O estudo da matriz de glicoproteínas mostrou maior área fracionada de fibronectina nas camadas interna, muscular e externa das VAP dos indivíduos com DPOC comparados aos demais grupos, assim como maior área fracionada de tenascina foi observado na membrana basal das VAG e na camada interna das VAP do grupo DPOC comparados aos controles. Além disso, a composição da MEC correlacionou-se com valores funcionais, como o VEF1 (% predito). A partir desses resultados, concluímos que a DPOC é caracterizada por complexas alterações nas principais proteínas estruturais nas pequenas e grandes vias aéreas. Tais alterações podem contribuir para a lesão tecidual persistente e com a obstrução ao fluxo aéreo observado na DPOC COPD is characterized by chronic inflammation and structural alterations leading to small airway obstruction and to destruction of the lung parenchyma. The extracellular matrix (ECM) composition of the lungs has an important role in determining airway structure. However, there are no comprehensive descriptions of the ECM composition along the respiratory tract in COPD patients. We postulated that the ECM composition in large and small airways and in lung parenchyma of COPD patients differs from that observed in smoking and non-smoking controls. Using immunohistochemistry and image analysis, fractional areas of elastic fibers, type-I, -III and IV collagen, the proteoglycans versican, decorin, biglycan and lumican; fibronectin and tenascin were quantified in the large (LA) and small airways (SA), in peribronchiolar (PP) and distal parenchyma (DP) of 26 COPD patients and compared to 26 smokers without COPD and 16 non-smoking controls. The fractional area of elastic fibers was higher in non-obstructed smokers than in COPD and non-smoking controls subjects, in all lung compartments. Type-I collagen fractional area was lower in the inner layer of LA and in the inner, muscle and outer layer (OL) of SA of COPD patients and in the OL of SA of non-obstructed smokers when compared to non-smoking controls. The versican fractional area was lower in DP of COPD patients than non-smokers. Fibronectin fractional área was higher in the inner, muscle and outer layer of SA of COPD patients compared to non-smokers. Tenascin fractional area was higher in the subepithelial area of LA and inner layer of SA of COPD when compared to non-smoking controls. Furthermore, ECM composition correlated with FEV1% predicted. Architectural alterations due to an altered ECM composition in COPD are likely to contribute to the persistent tissue injury and to the airflow obstruction characteristic of this disease

A disfunção de vias aéreas em pacientes com Síndrome do Desconforto Respiratória Agudo (SDRA) é caracterizada por limitação do fluxo expiratório e hiperinsuflação dinâmica. As alterações morfológicas possivelmente associadas com tais alterações funcionais têm sido investigadas em modelos experimentais de lesão pulmonar aguda, que mostram necrose e descamação epitelial em vias aéreas distais. Entretanto, até o momento, essa avaliação não foi realizada em humanos. O objetivo deste estudo foi investigar as alterações estruturais e inflamatórias nas pequenas vias aéreas de pacientes com SDRA. Com este propósito, estudamos, retrospectivamente, o tecido pulmonar de 31 pacientes com SDRA (A: PaO2/FIO2

A ventilação mecânica (VM) pode ser causa de lesão pulmonar sendo este fato reconhecido na literatura como Lesão Pulmonar Induzida pela Ventilação Mecânica (LPIV), onde alterações tanto fisiológicas quanto morfológicas são evidenciadas no pulmão. O objetivo desse trabalho foi avaliar a repercussão das forças envolvidas na ventilação mecânica através de diferentes mecanismos de LPIV sobre o sistema mucociliar pela análise funcional e histopatológica desse aparelho. Em um estudo controlado e randomizado vinte e sete coelhos machos da raça Nova Zelândia foram separados em quatro grupos. Nos primeiros trinta minutos foram submetidos à VM com volume corrente de 8 ml/kg peso, fluxo de 3 L/minuto, e pressão positiva expiratória final (PEEP) de 5 cm H2O e FIO2 de 0,4, sendo que o grupo Sham (n=6) foi ventilado por apenas 10 minutos. Os grupos Baixo Volume/BV (n=6; Vt 8, Ppico 17, Pmédia 9, PEEP 5, Fluxo 3), Alto Volume/AV (n=7; Vt 16, Ppico 27, Pmédia 12, PEEP 5, Fluxo 5) e Alta Pressão/AP (n=8; Vt 8, Ppico 30, Pmédia 20, PEEP 12, Fluxo 9) foram ventilados por mais 3 horas. A mecânica do sistema respiratório foi registrada pelo sistema Labview®. Foram acompanhados os valores de gasometria e sinais vitais. Amostras de tecido pulmonar foram coradas com H&E para análise de infiltrado inflamatório. Analisou-se a frequência de batimento ciliar (FBC), transporte mucociliar na traqueia (TMCT), transportabilidade em palato de rã (MCT) e ângulo de contato (AC). Amostras de pulmão e traquéia foram coradas pela técnica PAS/AB para avaliação do muco. Observamos diminuição da complacência do sistema respiratório (p

Estudos anteriores (Zayas, 1990) tem sugerido a existência de uma melhor transportabilidade por cílio do muco respiratório de pacientes fumantes que não apresentam câncer de pulmão em comparação com pacientes fumantes com câncer de pulmão e semelhante carga tabágica. Nosso principal objetivo foi verificar esta hipótese. Nós estudamos 16 tabagistas com câncer de pulmão (média carga tabágica = 58,78), 16 tabagistas com câncer extra-pulmonar (média carga tabágica = 53,87) e 11 não Tabagistas com Metástase Pulmonar com indicação de broncoscopia diagnóstica. O muco respiratório foi coletado durante a broncoscopia, usando um pequeno cateter através do canal de aspiração do broncoscopio. A transportabilidade por cílio no palato de rã, ângulo de contato (wetabilidade), transportabilidade pela tosse e viscosidade (cone-plate) e análise morfológica do epitélio respiratório foi realizado. Não foi encontrada diferença estatística entre os pacientes Tabagistas (Câncer de pulmão e Câncer extra-Pulmonar) para os parâmetros de muco estudos. Da mesma forma não foi encontrada diferença estatística nas análises do muco coletado de um lado do tumor comparado com o lado contralateral. Entretanto, encontramos diferença estatística entre os grupos não tabagistas com Metástase Pulmonar e Tabagistas com câncer Pulmonar e Extra-Pulmonar para os parâmetros de Transportabilidade pela Tosse (p = 0,018), Viscosidade 10 rpm (p= 0,021), FEV 1 (L) (p= 0,028) e FEV 1 (%) (p= 0,042) e diferença estatística nos Tabagistas para Correlação entre carga tabágica e idade (p=0,038) e Viscosidade (p= 0,029). Na análise histologica observamos 10 Tabagistas (60% alteração, sendo, 30% metaplasia escamosa; 20% hyperplasia e 10% epitélio com ausência de cílios) e 15 não Tabagistas (40% com alteração histológica sendo 20% destes com metaplasia escamosa e em pacientes com Câncer pulmonar ou Câncer extra-pulmonar). Não teve diferença na composição das mucinas entre os tabagistas. Concluímos que não há diferença entre as propriedades físicas do muco respiratório de Tabagistas com Câncer de Pulmão e Câncer Extra-Pulmonar com similar carga tabágica e que essas alterações das propriedades físicas do muco respiratório e alterações morfológicas, devem-se mais à exposição dose-tempo da fumaça do cigarro ao epitélio respiratório Previous study (Zayas 1990) has suggested the existence of a better transportability by cilia in respiratory mucus of smoking patients who did not present lung cancer in comparison to lung cancer patients smoking similar packages/year. Our aim was to verify this hypothesis. We studied 16 smoking patients with lung cancer (mean packages/year = 58,78), 16 smoking patients with extra pulmonary cancer (esophagus and head and neck), (mean packages/year = 53,87), and 11 non-smoking patients (metastasis) that underwent diagnostic bronchoscopy. Respiratory mucus was collected during bronchoscopy, using a small catheter passed through the aspiration channel of the bronchoscope. Mucus transportability in frog palate, contact angle (wettability), transportability by cough and viscosity (cone-plate) as well as morphological analysis the respiratory epithelium were performed. No statistical differences were found between smoking patients (lung and extra pulmonary cancer) in the mucus parameters studied. In the same way, no difference was found in the analysis of mucus samples collected from the tumor side compared to contra lateral samples. Nevertheless, statistical difference between Smoking (Lung Cancer and Extra-Pulmonary Cancer) and non Smoking (metastasis Pulmononary) for valous Clearance by cough (p = 0,018), viscosity 10rpm (p=0,021) FEV 1 (L) (p= 0,028) and FEV1 (%) (p=0,042) and statistical difference for correlation between smoking history and age (p=0,038) and viscosity 10 rpm (p= 0,029). The analysis histological of the 10 smoking, observed 60% of cases with alteration histological (30% with squamous metaplasia; 20% with hyperplasia and 10% with epithelium with cilia absence) and 15 non smoking presented 40% of cases with alteration histological (205 with squamous metaplasia in patients with lung cancer or exra-pulmonary cancer. We conclude that there is no difference between the physical properties of the respiratory mucus of smokers with lung cancer and extra-pulmonary cancer with similar packages/year and that changes in physical properties of respiratory mucus and morphological changes, due to more exposure to the dose-time of cigarette smoke in the respiratory epithelium

Introdução: Poucos estudos têm sido direcionados às mudanças histopatológicas nas pequenas vias áreas e seu possível papel no processo de remodelamento, nas pneumonias intersticiais idiopáticas. Objetivos: Estudar aspectos morfológicos, morfométricos e de imunohistoquímica das pequenas via aéreas na Fibrose Pulmonar Idiopática/ Pneumonia Intersticial Usual (FPI/ UIP) e Pneumonia Intersticial Não-específica (NSIP). Métodos: Foram estudadas as pequenas vias aéreas em biópsias pulmonares de 29 pacientes com FPI/ UIP e 08 com NSIP. As biópsias foram comparadas com 13 pacientes com Bronquiolite Constritiva Crônica (BC) - como controle positivo - e 10 pulmões controles normais de autópsia. Foram analisados semi e quantitativamente aspectos arquiteturais, inflamatórios, estruturais das vias aéreas, além da expressão de TGF-β, MMP -2, -7, -9, e seus inibidores (TIMP-1, -2). Resultados: Comparados com os controles, pacientes com FPI/ UIP, NSIP e BC apresentaram inflamação bronquiolar, inflamação e fibrose peribronquiolar aumentadas e áreas luminais diminuídas. Pacientes com FPI/ UIP tiveram paredes das vias aéreas mais espessadas, devido ao aumento de todos os compartimentos. Pacientes com NSIP apresentaram área do epitélio aumentada, enquanto pacientes com BC tiveram maior lâmina própria. Todos os grupos estudados demonstraram expressão epitelial bronquiolar aumentada de MMP-7 e -9 comparados ao controle. Conclusão: As pequenas vias aéreas são patologicamente alteradas e podem fazer parte do processo de remodelamento nas pneumonias intersticiais idiopáticas. Background: Few studies have addressed small airway (SA) histopathological changes, and their possible role in the remodeling process, in idiopathic interstitial pneumonias. Objectives: To study morphological, morphometrical and immunohistochemical features of SA in Idiopathic Pulmonary Fibrosis (Usual Interstitial Pneumonia - UIP) and Non-Specific Interstitial Pneumonia (NSIP). Methods: We analyzed SA pathology in lung biopsies of 29 patients with UIP and of 8 with NSIP. Biopsies were compared with lung tissue of 13 patients with Constrictive Bronchiolitis (CB) - as a positive control - and 10 normal autopsied control lungs. We analyzed, semi-quantitatively, SA structure, inflammation, architectural features and the bronchiolar epithelial immunohistochemical expression of TGF-β, MMP -2, -7, -9, and their tissue inhibitors (TIMP-1, -2). Results: Compared to controls, patients with UIP, NSIP and CB presented increased bronchiolar inflammation, peribronchiolar inflammation and fibrosis and decreased luminal areas. UIP patients had thicker walls, due to an increase in most airway compartments. NSIP patients presented increased epithelial areas, whereas patients with CB had larger inner wall areas. All of the groups studied presented increased bronchiolar expression of MMP-7 and MMP-9, compared to the controls. Conclusion: We conclude that SA are pathologically altered and may take part in the lung remodeling process in idiopathic interstitial pneumonias.

A matriz extracelular e as células musculares lisas das vias aéreas estão intimamente interrelacionadas. Poucos estudos porém, avaliaram a composição dos diferentes componentes da matriz extracelular e seus reguladores na camada do músculo liso brônquico na asma. Utilizando um programa de análise de imagens, a área fracionada do colágeno total e das fibras elásticas foi quantificada no interior do músculo liso brônquico de 35 indivíduos que faleceram devido a um ataque de asma (Asma Fatal), e comparada com 10 casos de indivíduos com asma e que faleceram de outras causas (Asma Não Fatal), e com 22 indivíduos controles sem patologia pulmonar. Expressão dos colágenos I e III, fibronectina, versicam, metaloprotease (MMP)-1, 2, 9 e 12, e inibidores de metaloprotease 1 e 2 foram quantificados no interior do músculo liso brônquico de 22 casos de asma fatal e 10 controles. Nas grandes vias aéreas dos casos de asma fatal, a área fracionada das fibras elásticas foi significativamente maior na camada do músculo liso brônquico quando comparada com os grupos de Asma Não Fatal e Controle. Semelhantemente, fibronectina, MMP-9 e MMP-12 estavam aumentadas no músculo liso das grandes vias aéreas nos casos de asma fatal quando comparadas aos controles. Apenas aumento das fibras elásticas foi observado nas pequenas vias aéreas na Asma Fatal, e somente quando comparadas aos casos de Asma Não Fatal. O conjunto dos resultados mostra que há uma composição alterada dos elementos da matriz extracelular e um ambiente de degradação protéica no músculo liso brônquico de indivíduos que morreram por asma, o qual pode acarretar importantes conseqüências nas funções sintéticas e mecânicas do músculo liso das vias áreas. There is an intimate relationship between the extracellular matrix (ECM) and smooth muscle cells within the airways. Few studies have comprehensively assessed the composition of different ECM components and its regulators within the airway smooth muscle (ASM) in asthma. With the aid of image analysis, the fractional area of total collagen and elastic fibres was quantified within the ASM of 35 subjects with Fatal Asthma (FA) and compared with 10 Nonfatal Asthma (NFA) patients and 22 nonasthmatic control cases. Expression of collagen I and III, fibronectin, versican, matrix metalloprotease (MMP)-1, 2, 9 and 12 and tissue inhibitor of metalloprotease-1 and 2 was quantified within the ASM in 22 FA and 10 control cases. In the large airways of FA cases, the fractional area of elastic fibres within the ASM was increased compared with NFA and controls. Similarly, fibronectin, MMP-9 and MMP-12 were increased within the ASM in large airways of FA cases compared with controls. Elastic fibres were increased in small airways in FA only in comparison with NFA cases. The results shower that, there is altered extracellular matrix composition and a degradative environment within the airway smooth muscle in fatal asthma patients, which may have important consequences for the mechanical and synthetic functions of airway smooth muscle.

A doença de Pompe (GSDII), autossômica recessiva, é causada pela deficiência da enzima lisossomal que degrada o glicogênio, -glucosidase ácida (GAA). O quadro clínico varia de acordo com a idade de início da doença, grau de progressão e envolvimento dos tecidos: predominantemente cardíaco e muscular esquelético na forma de início-precoce (FIP) e mais restrito no músculo esquelético na forma de início-tardio (FIT). A sobrevida média na FIP é de 9-12 meses. Com avanço dos métodos histológicos, histoquímicos e imunoistoquímicos intensificou-se a análise estrutural e funcional dos tipos de fibras musculares. O estudo da vascularização também é de importância pelo aporte nutricional e funcional das fibras. O objetivo do presente trabalho é analisar a correlação da distribuição do tipo de fibras com a forma de apresentação clínica da doença de Pompe, seu genótipo correspondente e a quantidade residual da enzima GAA. Analisou-se 10 biópsias musculares de pacientes FIP e 09 de FIT comparados com o grupo controle, pareados por idade e gênero. Os pacientes foram selecionados segundo dados clínicos e laboratoriais, sendo feito o seqüenciamento de toda parte codificante do gene e Western Blotting (WB) com anticorpo monoclonal 15362-157, cedido pela Genzyme (primário 1:200 e secundário 1:10.000). A confirmação do diagnóstico foi feita através da medida da atividade residual de GAA em papel filtro, da presença de miopatia vacuolar com grânulos PAS e fosfatase ácida positivos em biópsia muscular e pela presença de mutação no gene GAA. A reação de imunoistoquímica foi realizada para fibras tipo I (lenta), tipo II (rápida) e densidade capilar (ulex), utilizando anticorpos monoclonais, respectivamente: antimiosina lenta (1:80), anti-miosina rápida (1:40) da Novocastra e ulex da Vector (1:800). A contagem das fibras foi realizada por 2 observadores em todo fragmento do corte transversal da biópsia com auxílio de um programa semi-automatizado. Observou-se predomínio de fibras tipo II em ambos os gêneros na FIP e predomínio de fibras tipo I em mulheres e tipo II em homens, na FIT. Aumento da densidade capilar, em comparação com os controles, foi notada em ambas as formas IP e IT. Verificou-se em média 90% de fibras vacuoladas nos casos FIP com completa distorção da arquitetura, enquanto na FIT, a porcentagem de fibras vacuoladas foi variável (0-88%). Como alguns genes constitutivos influenciam na distribuição das fibras musculares, como o gene ACE, o polimorfismo deste gene foi analisado quanto aos genótipos I/I, D/D e I/D. Observou-se ausência de concordância entre o genótipo do ACE e a distribuição de fibras em 60% dos casos da FIP e FIT, atribuindo-se o resultado da distribuição do tipo de fibras como parte da patologia da doença de Pompe. A gravidade da doença variou inversamente com a quantidade de enzima residual, sendo compatível com o quadro clínico do paciente. A presença de mutação deletéria em ambos os alelos foi observada em 3/10 casos de IP, sendo que todos os 3 casos apresentaram ausência total de enzima no WB. Há maior envolvimento de fibras tipo II em GSDII, sem depleção da microcirculação muscular. Estudos demonstram que a remoção do depósito de glicogênio ocorre diferencialmente nos tipos de fibra, sendo menos eficiente nas fibras tipo II. O achado do presente estudo poderá ter implicações na resposta à recente terapêutica proposta por reposição enzimática. The glycogen storage disease type II (GSDII), autosomal recessive disorder, is caused by the deficiency of GAA (acid -glucosidase) a lysossomal enzyme that degrades the glycogen. The clinical findings are in accordance to great variability of age onset, degree of disease progression and extent of tissue involvement: predominantly cardiac and skeletal muscle in the infantile form (I) and more restricted to the skeletal muscle in the late-onset form (LO). The average survival time of the infantile form is 9-12 months. With advances of the histological, histochemical and imunohistochemical methods structural and functional analysis of muscle fiber types were intensified. The study of the capillary density is also important for nutritional and functional aspects. The objective of the present work is to analyze the correlations of the fiber type distribution to clinical presentation, genotype and residual GAA enzymatic activity. We analyzed 10 muscle biopsies of infantile and 09 of late-onset patients and compared to age and gender matched controls. The patients were selected according to clinical and laboratorial data, molecular diagnosis by full gene sequencing, and Western Blotting (WB) with monoclonal antibody 15362-157, courtesy Genzyme Science Group (primary 1:200 and secondary 1:10.000). Diagnostic confirmation was made by GAA enzymatic measurement in DBS, presence of vacuolar myopathy in muscle biopsy, and presence of mutation in GAA gene. The imunohistochemical study was carried out by detection of type I (slow), type II (fast) fibers and capillaries, using monoclonal antibodies, respectively: anti-slow myosin (1:80), anti-fast myosin (1:40) (Novocastra) and ulex (1:800) (Vector). Morphometry was performed by 2 observers using a half-automatized program. Type II fiber predominance was observed in both gender in the infantile form, type I fiber predominance in women and type II predominance in men with LO. Increase of the capillary density, in comparison to controls was noticed in both forms. 90% of vacuolated fibers with complete distortion of fiber architecture were demonstrated in I cases, while in LO, the percentage of vacuolated fibers ranged from 0 to 88%. As some constitutive gene, like ACE, influence muscle fiber distribution, its polymorphisms I/I, D/D and I/D gene were analyzed. Absence of agreement was observed between ACE genotype and fiber type distribution in 60% of I and LO cases, which was attributed as consequence of Pompe disease pathology itself. The disease severity varied inversely to the amount of residual GAA enzymatic activity, being compatible with the patient clinical findings. The presence of deleterious mutation in both alleles was observed in 3/10 infantile cases, and all 3 presented total enzyme absence at WB. A greater fiber type II involvement was observed in GSDII, without decrease in muscle capillary density. Recent studies demonstrated that glycogen deposit removal occurs distinctively in different fiber types, being less efficient in type II fibers. The present findings might have implications in the reply to the recent proposed enzyme replacement therapy.

Pacientes vítimas de queimaduras convivem com seqüelas que podem diminuir sua auto-estima e qualidade de vida. Vítimas de queimaduras faciais são excluídos social e profissionalmente solicitando ao cirurgião plástico tratamentos complementares aos cirúrgicos para melhoria da aparência e qualidade da pele. Quinze pacientes do sexo feminino, vítimas de queimadura facial por álcool com mais de dois anos de evolução, foram submetidas a tratamento tópico com tretinoína 0,05% durante um ano, com exceção da região pré-auricular. Após este período, duas biópsias faciais, uma na região pré-auricular e outra um centímetro abaixo do lóbulo da orelha, foram realizadas para comparar áreas não tratadas e tratadas. Os fragmentos biopsiados foram submetidos à análise mecânica e histológica. Medidas de resistência e elastância foram significativamente menores nas áreas tratadas (resistência p=0,03 e elastância p

A linfangite pulmonar neoplásica (LPN) é a disseminação intrapulmonar de células neoplásicas metastáticas via vasos linfáticos, englobando 6 a 8% das metástases pulmonares. Seu desconforto sintomático tem grande impacto na qualidade de vida (QdV) e seu prognóstico é muito reservado. Nosso objetivo foi avaliar os aspectos clínicos, o tratamento, a QdV e a sobrevida em LPN, em um estudo prospectivo. O seguimento mediano foi de 32 dias; 79% dos pacientes foram seguidos por menos de 6 meses, devido a evolução desfavorável e óbito. A idade mediana dos pacientes foi de 60,5 anos; 65% eram mulheres. A maioria dos sítios primários de neoplasia foram pulmão e mama (88%). A QdV estava comprometida, mas podiam ter algum benefício terapêutico, especialmente com corticosteróides, e a quimioterapia melhorou a sobrevida. Algumas variáveis foram estatisticamente significantes para predizer o status de sobrevida em um mês: Karnofsky performance scale (KPS)>=60%, hemoglobina(Hb)>=10 g/dL, LPN unilateral, PO2>=60 mmHg, tratamento oncológico sistêmico e sem necessidade de ventilação assistida não-invasiva. Preditores significantes de maior sobrevida mediana foram: KPS>=60%, SpO2>=90%, Hb>=10 g/dL, sem hipoxemia (PO2>=60 mmHg), sem necessidade de oxigenioterapia, tratamento com opióide fraco, tratamento oncológico sistêmico e ausência de ventilação assistida. O tratamento sintomático deve ser ativo, oferecendo melhor QdV aos pacientes e familiares e o tratamento etiológico é importante. As avaliações de QdV facilitam a relação médico-paciente, além da informação prognostica ser crucial para ajudar na definição e planejamento terapêuticos, uma vez que análises de parâmetros de custo-benefício e metas realistas são essenciais para cuidados oncológicos paliativos de boa qualidade, especialmente em síndromes com prognóstico reservado, tal como a LPN. Our objective was to evaluate clinical aspects, treatment, QoL, and survival, in NPL in a prospective study. Median follow-up was of 32 days; 79% percent of patients were followed for less than 6 months, due to bad outcome. Median age was 60.5 years; 65% were female. Most primary tumor sites were lung and breast cancers (88%). QoL was compromised, but could have treatment benefit, especially with corticosteroids, and chemotherapy improved survival. Some variables were statistically significant for predicting survival status in one month, such as: Karnofsky performance scale (KPS)>=60%, hemoglobin>=10 g/dL, unilateral NPL, PO2>=60 mmHg, oncological systemic treatment, and no need for noninvasive assisted ventilation. Significant predictors of longer median survival were: KPS>=60%, SpO2>=90%, hemoglobin>=10 g/dL, without hypoxemia (PO2>=60 mmHg), no need for oxygen therapy, weak opioid treatment, systemic oncological treatment, and absence of assisted ventilation. Symptomatic treatment must be active, offering better QoL to patients and their families, and etiological treatment is important. QoL evaluation facilitates patient-physician relationship, and prognostic information is crucial to help in defining treatment plan, since cost-benefit parameter analysis and realistic goals are essential in good-quality palliative cancer care, especially for syndromes with poor prognosis, such as NPL.

INTRODUÇÃO: Uma das formas de uso (ilegal) da cocaína é a forma fumada, através da queima de uma base de cocaína na forma de \"pedras\" (cocaína \"crack\"). O uso da cocaína \"crack\" pode causar alterações de caráter crônico ou agudo no trato respiratório. Neste estudo foram investigados os efeitos da inalação crônica de cocaína \"crack\" no aparelho respiratório de camundongos. MÉTODOS: Quarenta camundongos Balb/c machos com 60 dias de idade (10 animais controles e 30 expostos) foram usados no estudo. Dez animais foram usados para determinar o nível de cocaína sérica após uma única exposição. Vinte animais foram expostos à fumaça de \"crack\" em uma câmara de inalação, 5 dias por semana, durante 2 meses. Os dez animais controles foram mantidos no biotério. Análises morfométricas quantitativas de cortes histológicos de nariz e pulmão foram realizadas através da microscopia óptica. Foram quantificados a espessura e quantidade de muco no epitélio nasal e brônquico, a hemossiderina pulmonar, a espessura da parede e o índice de vasoconstrição de artérias pulmonares de pequeno calibre e a densidade de macrófagos e neutrófilos nas regiões alveolares e peribrônquicas. O grupo exposto e controle foram comparados entre si e as diferenças foram consideradas significativas quando p

Introdução: Um dos principais objetivos na SARA é encontrar a melhor estratégia protetora de ventilação mecânica que minimize o stress pulmonar e otimize as trocas gasosas. Teoricamente, estas duas metas podem ser obtidas simultaneamente, evitando-se a hiperdistensão e colapso cíclico de unidades alveolares instáveis. Numa tentativa de radicalizar a minimização da hiperdistensão e da pressão motriz inspiratória, duas estratégias podem ser propostas: o uso da ventilação de alta freqüência oscilatória (HFOV) e o uso da insuflação intra-traqueal de gás (TGI), esta última associada à hipercapnia permissiva e baixas freqüências respiratórias. Objetivo: identificar qual (quais) entre as três estratégias de ventilação mecânica, HFOV, TGI e ventilação protetora de baixa freqüência (VP: volume corrente ~6 mL/kg), foi (foram) a (s) mais protetora (s) em um modelo de SARA em coelhos, durante seis horas de ventilação mecânica. Material e métodos: Os animais (n = 45) foram submetidos a repetidas lavagens pulmonar até uma PaO2 < 100 mmHg. Imediatamente após a injuria pulmonar, foi obtida uma curva P/V para calculo do trabalho inspiratório e energia dissipada durante insuflação pulmonar. Em seguida, os animais foram randomizados em um dos três grupos: HFOV, VP ou TGI. O PEEP ou PMEAN ideais foram obtidos através de uma curva PEEP/PaO2 (ou PMEAN/PaO2) que foi precedida por uma manobra de recrutamento. Os animais dos grupos VP e TGI foram inicialmente ventilados em PCV com um delta de pressão = 8 cmH2O e freqüência = 60 resp/min. A única diferença inicial entre os dois foi que o grupo TGI possuía um fluxo traqueal continuo = 1 L/min. Os animais do grupo HFOV foram inicialmente ventilados com uma amplitude de pressão = 45 cmH2O e freqüência = 10 Hz. Todos os animais foram ventilados com uma FiO2 = 1.0. Os deltas de pressão (ou pressão motriz) nos grupos VP e TGI foram reajustados para manter uma PaCO2 = 90-110 mmHg, enquanto no HFOV a amplitude de pressão foi reajustada para manter uma PaCO2 = 45-55 mmHg. No final do experimento, outra curva P/V foi obtida. Amostras do LBA e sangue foram coletados antes e após o período de ventilação para determinar os níveis de IL-8. Amostras do pulmão esquerdo foram processadas para análise histológica e para cálculo da relação peso-úmido/ peso-seco. Resultados: Não foi observada diferença na PaO2 entre os grupos. A PaCO2 foi significantemente menor no grupo HFOV (59 ± 3 mmHg) quando comparado aos grupos VP (99 ± 4 mmHg) e TGI (80 ± 3 mmHg). O volume corrente foi significantemente menor nos grupos TGI e HFOV quando comparado ao grupo VP. Logo após a lesão pulmonar, todos os grupos necessitaram de trabalhos similares para a insuflação pulmonar, mas o grupo VP foi o único que não apresentou melhora (diminuição) deste trabalho expiratório, a estratégia VP foi a única que apresentou aumento ao longo das 6 horas (P