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Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. Durante o tratamento radioterápico de tumores, comumente surgem reações na pele em decorrência da exposição à radiação. Essas reações, denominadas radiodermatites, afetam a qualidade de vida do paciente e podem levar a interrupção da terapia. Nesse contexto, é interessante a utilização tópica de substâncias radioprotetoras que têm a capacidade de atenuar ou impedir os danos causados pela radiação. Nesse estudo, desenvolveu-se emulsões com cristais líquidos utilizando tensoativos não-iônicos da classe dos álcoois graxos etoxilados (Brij CS 20 e Brij S2) e óleo de açaí como fase oleosa, na qual foi incorporada o ativo resveratrol. As emulsões foram desenvolvidas através de diagrama de fases ternário, onde foi possível determinar, por análise macroscópica e microscópica sob luz polarizada, qual proporção dos componentes da formulação (combinação de tensoativos, óleo e água) resultava em formulações estáveis e com maior presença de cristais líquidos. Após a escolha da formulação, foram realizados testes de estabilidade, nos quais a formulação mostrou-se estável. A atividade antioxidante do óleo de açaí foi comprovada por dois métodos. Na determinação através do sequestro do radical DPPH, apresentou IC50 de 13,06 mg/mL. No teste que utiliza o radical ABTS•1 liofilizado, o resultado encontrado foi de 1882 mg equivalente de tocoferol por kg do óleo. O comprovado efeito radioprotetor do resveratrol somado à atividade antioxidante do óleo de açaí e ao poder hidratante de emulsões indicam que a formulação desenvolvida tem potencial para ser utilizada topicamente durante o tratamento radioterápico com a finalidade de minimizar os efeitos da radiação ionizante sobre a pele. During tumor radiotherapy, usually skin reactions arise as a result of radiation exposure. These reactions, called radiodermatitis, affect the quality of life of patients and may lead to discontinuation of therapy. In this context, it is interesting to make use of topical substances that present radioprotector activity which have the ability to mitigate or prevent the damage caused by radiation. In the present study, emulsions with liquid crystals were developed using non-ionic surfactants of the class of ethoxylated fatty alcohols (Brij CS 20 and Brij S2) and acai oil as the oil phase, which was incorporated into the active resveratrol. The emulsions were developed using a ternary phase diagram. By this diagram and using macroscopic analysis and microscopic under polarized light analysis, the proportion of the components of the formulation (combination of surfactants, oil and water) that result in stable emulsions and enhanced amount of liquid crystals was determinate. After the choice of the formulation and the incorporation of resveratrol (1% w/w), the stability tests were performed, in these test the formulation showed to be stable. The antioxidant activity of the acai oil was confirmed by two methods. In determining through DPPH radical, was founded IC50 of 13.06 mg / mL. In the test using the ABTS • 1 lyophilised, the result was equivalent to 1882 mg of tocopherol per kg of oil. The proved radioprotective effect of resveratrol, the antioxidant activity of acai oil and the moisturizing capacity of emulsions indicate that the proposed formulation can be used topically during radiotherapy treatment in order to minimize the effects of ionizing radiation on the skin.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. CIPHARMA, Escola de Farmácia, Universidade Federal de Ouro Preto. A produção de nanopartículas poliméricas (nanoesféras e nanocápsulas) não é novidade no mercado farmacêutico, mas os métodos de fabricação das mesmas variam muito, encontrando-se diferentes técnicas de obtenção. Dada a importância das nanopartículas na otimização da velocidade de cedência e na vetorização de fármacos, neste trabalho foi proposto o desenvolvimento de um processo para produção de nanocápsulas poliméricas, conjugando a técnica de polimerização interfacial in situ com a produção de nanoemulsão pelo método de emulsificação por inversão de fases, utilizando monômeros derivados de ácido acrílico, ativadores e iniciadores, e óleo de origem vegetal (manteiga de murumuru). A nanoemulsão e a suspensão de nanocápsulas foram caracterizadas quanto ao tamanho médio de partícula e o potencial zeta, obtendo partículas dentro do intervalo de 100 a 200 nm. Testes de estabilidade também foram realizados para as duas formulações. A análise morfológica foi realizada através de microscopia de força atômica, pela qual se comprovou a formação das nanocápsulas de formato esférico. O polímero formado ao redor da nanocápsula foi caracterizado através de análises de espectroscopia por Infravermelho com Transformada de Fourier (FT-IR), apresentando um espectro característico ao do poli(acrilato de 2-etilhexila); e calorimetria diferencial exploratória (DSC), que apresentou a transição vítrea correspondente ao mesmo. Foram realizados testes in vitro para comparação das características da nanoemulsão e da suspensão de nanocápsulas produzidas a partir das primeiras, tendo como marcador o Metoxicinamato de Octila. Analisando os perfis de liberação das amostras, utilizando células de difusão do tipo Franz, observou-se que a nanoemulsão apresentou uma liberação maior do ativo que a suspensão das nanocápsulas. No teste de determinação in vitro do Fator de Proteção Solar (FPS), a nanoemulsão obteve valor de FPS cerca de 50% superior que o da suspensão de nanocápsulas. Nos testes in vitro, observou-se que o marcador apresentou-se menos disponível na amostra de nanocápsulas, pois se encontrava em sua maior parte, no interior das mesmas. Concluiu-se que a associação dos dois processos: obtenção de nanoemulsão com emulsificação por inversão de fases (com uso de baixa energia) seguida de polimerização in situ proporcionou a formação de nanocápsulas poliméricas, com o polímero situado ao redor das mesmas, viável para a veiculação de fármacos e princípios ativos cosméticos, principalmente com características hidrofóbicas. The development of polymeric nanoparticles (nanoespheres and nanocapsules) is not new in the pharmaceutical industry, however different methods has been described in order to produce them. Due to the importance of nanoparticles as drug delivery systems to modify the release rate, in this study we described a new protocol for producing polymeric particles combining the in situ polymerization technique with nanoemulsion produced by phase inversion emulsification, using 2-ethylhexyl acrylate monomer, solutions of initiator and activator and vegetable oil (Murumuru Oil). The nanoemulsion and nanocapsules obtained were characterized as particle size and zeta potential. The mean size of the nanoparticles was in a range of 100-200 nm. Stability tests were also performed for both formulations. Atomic force microscopy analysis proved the spherical shape of nanocapsules. The polymer formed surrounding the nanocapsules was characterized by Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) and the resulting spectrum matched with that described in the literature for the poly(2-ethylhexyl acrylate). In the Differential Scanning Calorimetry (DSC), was observed the reported glass transition. In vitro tests were performed to compare the nanoemulsion and the nanocapsules produced, using octyl methoxycinnamate as a marker. The analysis of the release profile of the samples, with Franz diffusion cells, showed that the nanoemulsion had a greater release of the active than the nanocapsules. In vitro test for determining the Sun Protection Factor (SPF), the nanoemulsion SPF value was about 50% higher than the nanocapsules. In in vitro tests were observed that the marker had become less available in the nanocapsules sample, since the most part was encapsulated inside them. It was concluded that the association of both process: nanoemulsion production by phase inversion (low energy method) followed by in situ polymerization generated the formation of polymeric nanocápsulas, feasible for administration of pharmaceutical and cosmetic active ingredients, especially with hydrophobic character.

Transcription factors control cell-specific gene expression programs through interactions with diverse coactivators and the transcription apparatus. Gene activation may involve DNA loop formation between enhancer-bound transcription factors and the transcription apparatus at the core promoter, but this process is not well understood. Here we report that mediator and cohesin physically and functionally connect the enhancers and core promoters of active genes in murine embryonic stem cells. Mediator, a transcriptional coactivator, forms a complex with cohesin, which can form rings that connect two DNA segments. The cohesin-loading factor Nipbl is associated with mediator–cohesin complexes, providing a means to load cohesin at promoters. DNA looping is observed between the enhancers and promoters occupied by mediator and cohesin. Mediator and cohesin co-occupy different promoters in different cells, thus generating cell-type-specific DNA loops linked to the gene expression program of each cell., National Institutes of Health (U.S.) (Fellowship), Canadian Institutes of Health Research (Research Fellowship), National Institutes of Health (U.S.) (Grant R01 HG002668)

Uma variedade de agentes quimioterápicos pode ser utilizada para o tratamento da giardíase. Porém, a maioria desses agentes apresenta efeitos adversos consideráveis e são muitas vezes contra-indicados. Além disto, a Giardia parece ter uma grande habilidade para desenvolver resistência a estes agentes, o que torna a investigação de novos fármacos uma área atrativa e promissora. Neste trabalho, avaliamos a atividade giardicida de algumas substâncias obtidas a partir da modificação da cadeia alifática do metronidazol (MTZ), que constitui hoje a droga mais usada no tratamento da giardíase. Escolhemos estas substâncias não só pelo valor promissário, no que tange a atividade giardicida, concedido pelo MTZ, mas também pela facilidade de modificação da cadeia lateral do MTZ para obtenção destes análogos. O efeito do MTZ e seis de seus análogos (MTZ-MS, MTZ-I, MTZ-Br, MTZ-N3, MTZ-NH2.HCl e MTZ-Tr) sobre o crescimento dos trofozoítos de G. lamblia, cepa Portland-1, foi determinado in vitro. Os análogos MTZ-MS, MTZ-I, MTZ-Br e MTZ-N3, apresentaram atividade inibitória maior, ou seja, IC50 menor que o MTZ. Entre eles o MTZ-Br e MTZ-I foram os mais ativos. Os análogos MTZ-Tr e MTZ-NH2.HCl foram os que apresentaram menor atividade anti-giardia. Visando investigar o potencial citotóxico dos análogos sintetizados, avaliamos o efeito dos mesmos sobre a proliferação de células mononucleares do sangue periférico humano (CMSP) comparado ao MTZ. Os análogos nitroimidazóis não apresentaram efeito citotóxico sobre CMSP. O efeito dos análogos MTZ-I e MTZ-Br em infecções experimentais de gerbils foi obtido determinando a DE50 (dose necessária para matar 50% dos trofozoítos de G. lamblia) comparada a do MTZ. Os animais infectados experimentalmente por trofozoítos de G. lamblia foram tratados com concentrações que variaram de 0.1 a 6.0 µmol/kg do MTZ e dos análogos. MTZ-I e MTZ-Br apresentaram atividade giardicida superior a do MTZ. Os efeitos dos análogos sobre a morfologia e ultra-estrutura dos trofozoítos foram avaliados por Microscopia Eletrônica de Transmissão. Vacuolização, dilatação de vesículas periféricas, internalização de flagelos e de disco adesivo, formação de figuras de mielina e extração citoplasmática foram as principais alterações observadas em trofozoítos incubados com os análogos do MTZ. Alterações similares foram observadas em trofozoítos tratados com MTZ, sinalizando a eficácia dos análogos. Estes resultados somados à excelente atividade giardicida do MTZ-I, MTZ-Br, MTZ-Ms e MTZ-N3, comprovam que esses análogos nitroimidazóis são importantes opções terapêuticas.

Helicobacter pylori, uma bactéria gram negativa, habita o estômago deaproximadamente metade da população mundial. A infecção causada por esta bactéria está associada com certos tipos de inflamações gastroduodenais podendo levar ao desenvolvimento de gastrite aguda ou crônica, úlcera gástrica ou duodenal e câncer gástrico. A claritromicina, um agente antibiótico macrolídeo, tem sido utilizado como terapia de primeira linha no tratamento do Helicobacter pylori associado ao metronidazol ou amoxicilina e um inibidor da bomba de prótons. Entretanto, há uma elevada taxa de falha na erradicação completa dainfecção utilizando este tratamento, a qual pode estar ligada ao curto tempo de residência e instabilidade dos antimicrobianos no estômago. O objetivo desse trabalho foi preparar microesferas de claritromicina mucoadesivas e de liberação controlada na mucosa gástrica visando aumentar sua eficácia clínica no tratamento do Helicobacter pylori. Primeiramente, foi necessário validar o método de doseamento da claritromicina por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). Em seguida, microesferas mucoadesivas contendo claritromicina forampreparadas utilizando etilcelulose como matriz e carbopol 934P como polímero mucoadesivo. Depois, estas microesferas foram caracterizadas em relação ao tamanho, morfologia e perfil de liberação da claritromicina em um meio gástrico artificial contendo leite como padrão alimentar. Por fim, um estudo de mucoadesão in vitro foi efetuado. Os resultados mostraram que foi possível validar o método dedoseamento da claritromicina por CLAE, que as microesferas apresentaram uma forma esférica e tamanho de 1 a 2 m, que aproximadamente 30% da claritromicina encapsulada nas microesferas foi liberada após 4 horas, sugerindo uma ação prolongada, e ainda, que in vitro as microesferas aderem à mucosa gástrica. Estes resultados serão posteriormente confirmados in vivo antes de propor a utilização desse novo sistema para o tratamento do Helicobacter pylori. Helicobacter pylori, a gram negative bacterium, habitats the stomach ofabout half of the world population. The infection caused by this bacterium is associated with some types of gastroduodenal inflammatory diseases that can reach the stage of an acute or chronic gastritis, gastric or duodenal ulcer and gastric cancer. Clarithromycin, a macrolide antimicrobial agent, has been adopted as a first therapy line for H. pylori infection treatment associated to the metronidazole or to the amoxicillin and a proton pump inhibitor. However there is a high rate of failure in completely infection eradication using this treatment, whichcan be related to the short permanency time and instability of the antimicrobials agents in stomach. The target of this work was to prepare clarithromycin mucoadhesive microspheres with controlled liberation in the gastric mucosa for improving its clinical efficacy for the Helicobacter pylori infection treatment. Firstly, It has been necessary to validate the method for the quantification of clarithromycin by high efficiency liquid chromatography (CLAE). In the following step, mucoadhesive microspheres with clarithromycin were been prepared using asethylcellulose as the matrix and carbopol 934P as the mucoadhesive polymer. After, these microspheres have been characterized due to their size, morphology and release profile of the clarithromycin in an artificial gastric mean with milk as an alimentary standard. At the end, an in vitro mucoadhesion study has been performed. The results have made evident that it was possible validating clarithromycin quantification method by CLAE, microspheres have presented spherical shape and size from 1 to 2 m, about 30% of the clarithromycin entrapped in the microspheres has been released after 4 hours and they suggest along time action, and besides, that microspheres adhere in vitro to the gastric mucosa. These results will be after confirmed in vivo before of proposing this new system for Helicobacter pylori treatment

O ácido retinóico todo trans (AR, tretinoína) tem se mostrado eficiente no tratamento tópico de pacientes com acne inflamatória leve a moderada. No entanto, a aplicação tópica do AR é acompanhada por uma alta incidência de reações adversas: irritação, eritema local leve asevero, ressecamento e descamação no local da aplicação. A incidência de tais reações adversas diminui a adesão do paciente e compromete a eficácia da terapia. A fim de reduzir tais reações adversas, sem comprometer a eficácia, novos sistemas carreadores do AR vêmsendo desenvolvidos e avaliados. Dentre esses carreadores, as nanopartículas lipídicas sólidas (NLS), as quais têm mostrado potencial para liberação controlada, seriam uma alternativa interessante para fármacos lipofílicos tais como o AR. No entanto, a encapsulação do AR em NLS é usualmente baixa (< 1% em relação à massa lipídica), exceto se uma relação tensoativo/lípide alta for utilizada. Isto favorece a localização interfacial do fármaco, diminuindo os benefícios obtidos pela encapsulação na matriz lipídica. Assim, o presente estudo teve por objetivo o desenvolvimento, caracterização e avaliação da atividadecomedolítica in vivo de NLS como sistema carreador do AR. As NLS foram preparadas pelo método de homogenização a quente utilizando um ultra-som com sonda de alta potência. O aumento da concentração de colesterol ou da relação tensoativo/lípide aumentou a eficiênciade encapsulação do AR nas NLS e diminuiu o diâmetro das partículas. No entanto, isto favorece a localização interfacial do fármaco. Assim, a formação do par iônico entre o AR e diversas aminas foi avaliada com o intuito de aumentar a lipofilicidade do fármaco, aumentando sua incorporação na matriz lipídica das NLS. A incorporação das aminasproporcionou aumento significativo da eficiência de encapsulação, o qual foi proporcional às propriedades lipofílicas destas substâncias. A estearilamina (STE), uma amina lipofílica, propiciou uma eficiência de encapsulação do AR nas NLS superior a 90%. A estabilidade dasNLS carregadas com o par iônico AR-STE foi maior do que aquela observada para uma NLS sem a amina. As NLS contendo AR foram caracterizadas por calorimetria exploratória diferencial (DSC), difração de raios-X (DRX) e espalhamento de raios-X de baixo ângulo (SAXS). Os termogramas de DSC e os difratogramas de DRX e SAXS revelaram a presença do AR fora da matriz lipídica nas NLS sem amina, e a ausência do AR e da STE fora da matriz lipídica das NLS com o par iônico, sugerindo uma combinação extensiva entre os constituintes do par iônico e as NLS. Posteriormente, os estudos de eficácia e irritaçãocutânea, conduzidos em camundongos rhino, mostraram que as NLS apresentaram eficácia pelo menos igual à formulação comercial convencional nos diversos parâmetros avaliados (redução do comedão, aumento da espessura da epiderme e da camada granulosa), mas commenor índice de irritação cutânea (eritema e descamação) e presença de infiltrados inflamatórios na derme. Adicionalmente, o perfil de proliferação celular aumentado na camada granulosa dos animais tratados com as NLS forneceu um indício do direcionamentoepidérmico desse sistema. Em suma, nós demonstramos que a encapsulação do AR nas NLS através da formação de um par iônico é viável do ponto de vista de produção, eficiência de encapsulação e estabilidade. Além disso, esse sistema foi capaz de reduzir as reações adversas características da aplicação tópica do AR sem comprometer a eficácia. All-trans retinoic acid (RA, tretinoin) has shown to be efficient in the topical treatment of patients presenting mild to moderate inflammatory acne. Nevertheless, topical use of RA is followed by a high incidence of side-effects such as: irritation, erythema varying from mild to severe, as well as dryness and scaling. These occurrences diminish the patient compliance, compromising the efficacy of the therapy. In order to overcome these disadvantages, without compromising efficiency, new systems to delivery RA have been developed and evaluated.Among these systems, solid lipid nanoparticles (SLN), which have shown potential for controlled release, would be an interesting alternative to lipophilic drugs such as RA. However, the encapsulation rate of RA in SLN is usually low (< 1% in comparison to the lipid mass), unless a high surfactant/lipid ratio is used. This favors interface location of RAand compromises the benefits of encapsulation in the lipid matrix. Thus, this study aims to develop, characterize and evaluate the in vivo comedolytic activity of SLN as RA delivery system. SLN were prepared by hot melt homogenization method using an emulsificationultrasound.The increase of the surfactant/lipid ratio or cholesterol concentration improved the encapsulation efficiency and reduced the mean particle size of SLN. However, this favors interfacial location of the drug. Then, the formation of an ion pairing between RA and various amines was evaluated with the aim of increasing its incorporation into the lipid matrix of the SLN. The incorporation of amines provided a significant increase in the encapsulation rate, which was proportional to the lipophilic properties of these substances. The stearilamine (STE), a lipophilic amine, provided an encapsulation rate of RA in SLN that was higher than 90%. The stability of the SLN loaded with the ion pairing RA-STE was higher than that observed for the SLN without the amine. The SLN containing RA were characterized by differential scanning calorimetry (DSC), wide angle X-ray scattering (WAXS) and small angle X-ray scattering (SAXS). The DSC thermograms and the WAXS and SAXS diffractograms showed the presence of the RA crystals outside the lipid matrix in the SLNwithout amine, and the absence of the crystalline state of the RA and STE outside the lipid matrix of SLN with the ion pairing RA-STE, suggesting an extensive combination between the constituents of the ion pairing and the SLN. Subsequently, studies of efficacy and skin irritation, conducted in rhino mice, showed that the SLN presented efficacy at least equal tothe conventional commercial formulation in the various parameters evaluated (utricle diameter reduction, thickness of the epidermis and the granular layer), but with lower irritation index (redness and flaking) and inflammatory infiltrates in the dermis. Additionally, the increased cell proliferation in the granular layer of the animals treated with the SLNprovided an evidence of epidermal targetting. In summary, we demonstrated that the encapsulation of the RA in SLN through the formation of an ion pairing is feasible in terms of production, stability and encapsulation rate. Moreover, this system was able to reduce theadverse reactions characteristic of the topical application of RA without compromising effectiveness.

Acne vulgaris é uma condição que afeta cerca de 80% dos adolescentes no mundo. De acordo com sua evolução, acne é classificada como média, moderada ou severa. Ácido retinóico(tretinoína; AR) é a primeira escolha para pacientes com acne média a moderada. Contudo, aplicação tópica de AR é seguida por uma elevada incidência de reações adversas: irritação local tais como eritema, peeling e queimação no sítio de aplicação e susceptibilidade à luz solaraumentada. Estratégia para novas formulações é modificar a biodisponibilidade local, controlando a liberação do AR através de polímeros, e promover o direcionamento folicular, resultando num tratamento mais eficiente com efeitos colaterais reduzidos. Nanocápsulas (NC) representam uma alternativa interessante para liberação controlada, tão bem como pela capacidade de se acumular na unidade pilosebácea. NC têm elevada eficiência de encapsulaçãopara fármacos lipofílicos, tais como AR (log P = 4,6), baixo conteúdo polimérico e baixa toxicidade inerente. O objetivo desse trabalho foi a preparação, a caracterização e a investigação do perfil de liberação e permeação cutânea das NC contendo AR. NC contendo AR forampreparadas pelo método da nanoprecipitação. NC foram caracterizadas por tamanho, homogeneidade (Índice de polidispersão) e potencial zeta usando um Zetasizer 3000HS. A morfologia externa foi avaliada por Microscopia de Força Atômica (MFA). Os estudo de liberaçãoin vitro foram avaliados através da membrana de teflon (0,45 ìm) e de nylon (0,22 ìm), usando células de difusão de Franz. Eficiência de encapsulação de AR em NC foi elevada (~90%). O diâmetro médio, calculado por Espectroscopia de Correlação de Fótons, variou de 218 a 318 nm (NC brancas) e de 219 a 281 nm (NC contendo AR). O potencial zeta variou de 31,5 a 44,0 mV (NC brancas) e de 26,0 a 50,0 mV (NC contendo AR). NC brancas mantiveram a estabilidade físico-química após 30 dias de armazenamento a 25oC, contudo NC não foramcapazes de prevenir a degradação do AR (redução de 40% na concentração do fármaco foi observada após 30 dias). Liberação do AR a partir da nanocápsula (NC) foi maior que aquela observada para solução do fármaco e menor do que para Nanoemulsão (NE). A baixa liberação da solução foi devido à evaporação do etanol e precipitação do AR no compartimento doador. O polímero presente na interface da NC produziu liberação controlada do AR. Os estudos de permeação conduzidos em pele dermatomada de orelha de porco foram realizados por 8 horas, conforme o tempo de aplicação clínica. Ele indicou que o AR não foi encontrado nos canais receptores para NC e NE. A solução alcoólica contendo AR permeou a pele. Isso pode ser devido ao efeito significante acelerador de penetração do etanol e do propilenoglicol. Conclui-se que a formulação de NC pode evitar a captação sistêmica de tretinoína em comparação com o controle e a NC apresenta um potencial de evitar efeitos colaterais sistêmicos. Esses resultadosindicam que a NC contendo AR, com alvo para a pele, pode ser um carreador promissor para aplicação tópica de um sistema de liberação controlada de tretinoína e evitar reações adversas. Acne vulgaris is a frequent condition affecting about 80 percent of teenagers in the world. According to the evolution, acne is classified as mild, moderate or severe. Retinoic acid (tretinoin; RA) is the first choice for patients with mild to moderate acne. Nevertheless, topicalapplication of RA is followed by a high incidence of adverse affects: local irritation such as erythema, peeling and burning at the application site and increased susceptibility to sunlight. Strategy for the new formulations is modifying local bioavailability, controlling RA release through polymers, and promoting follicular targeting resulting in more efficient treatment withreduced side effects. Nanocapsules (NC) representing an interesting alternative for controlled release, as well as for their capacity to target the pilosebaceous unit. NC has high entrapment efficiency for lipophilic drugs, as RA (log P = 4.6), low polymer content and low inherent toxicity. The aim of this work was the preparation, characterization and investigation of the release profile and cutaneous permeation of the RA-loaded NC. NC containing RA was prepared by nanoprecipitation method. NC were characterized for size, homogeneity (IP) and zeta potential using a Zetasizer 3000HS. The external morphology was evaluated by atomic force microscopy (AFM). The in vitro release studies were evaluated through Teflon (0.45 ìm) and Nylon (0.22 ìm) membranes, using Franz diffusion cells. Encapsulation efficiency of RA in NC was high (~90%). The average diameter, calculated by photon correlation spectroscopy (PCS), ranged from 218 to 318nm (blank NC) and from 219 to 281nm (RA-loaded NC). The zeta potential ranged from 31.5 to 44.0 mV (blank NC) and from 26.0 to 50.0 mV (RA-loaded NC). Blank NC maintained the physicochemical stability after 30 days of storage at 25oC, however RA-loaded NC was not able to prevent RA degradation (reduction of 40% in drug concentration was observed after 30 days). RArelease from a nanocapsule (NC) was higher than that observed for drug solution and minor that observed for Nanoemulsion (NE). The low release from solution was due to evaporation of ethanol and precipitation of RA in donor compartment. The polymer present in the interface of the NC provided controlled release of the RA. The permeation studies conducted in dermatomated pig ear skin were performed for 8h according to the clinical application time. It indicated that RA was not found in receptor chambers from NC and NE. The alcoholicsolution containing RA permeated the skin. This might be due to the significant penetration enhancement effect of ethanol and propylene glycol. It is concluded that the NC formulation can avoid the systemic uptake of tretinoin in comparison with the control and NC present apotential to avoid the systemic adverse side effect. These results indicate that RA-loaded NC with skin targeting may be a promising carrier for topical application of tretinoin controlling release system and avoiding adverse effects.

O tratamento da uveíte posterior é limitado uma vez que as formas convencionais de administração de fármacos falham ao disponibilizar doses terapêuticas no vítreo, retina e na coróide. Os implantes intra-oculares biodegradáveis são capazes de disponibilizar o fármaco diretamente na cavidade vítrea em doses terapêuticas e por um período prolongado. O copolímero ácido lático / ácido glicólico é um clássico exemplo entre os polímeros sintéticos biodegradáveis e bem aplicados em sistemas de liberação de fármacos devido à sua biocompatibilidade e ausência de toxicidade em testes in vivo. Neste estudo, dois diferentes implantes biodegradáveis a partir do copolímero ácido lático / ácido glicólico) (PLGA 75:25) e do imunossupressor Ciclosporina A (CsA) foram obtidos a partir de dois sistemas: mistura liofilizada e microesfera contendo CsA. O atual trabalho caracterizou, com sucesso, os sistemas por meio de quatro técnicas e esclereceu o perfil preliminar de liberação in vitro observado. Os resultados da validação da metodologia desenvolvida por CLAE mostrou-se adequada para quantificação de CsA e os implantes foram satisfatoriamente obtidos pelas duas técnicas propostas. A cristalinidade dos materiais foram analiadas por DRX que mostraram o estado amorfo para o copolímero e o estado semi-cristalino para a ciclosporina A. Além disso, a técnica mostrou que as amostras contendo polímero e o fármaco apresentam grande caráter amorfo. As curvas de TG provaram a estabilidade da amostra entre 100 e 120°C. O DSC e FTIR mostraram a ausência aparente de interações químicas e físicas entre o fármaco e o polímero. O estudo preliminar de liberação in vitro apresentou um perfil monofásico, onde a liberação do fármaco ocorreu principalmente pela difusão da CsA pela matriz polimérica intumescida. A diferente e maior liberação dos implantes obtidos pelas microesferas contendo CsA ocorreu provalvelmente à distinta distribuição do fármaco e ao aspecto morfológico heterogêneo quando comparado ao implante obtido pela mistura liofilizada, o qual apresentou menor porcentagem de liberação e uma matriz mais homogênea, aspectos morfológicos observados por SEM. Em resumo, os sistemas de liberação de fármacos aqui desenvolvidos e caracterizados podem ser empregados, futuramente, para o tratamento da uveíte posterior. The treatment of posterior ocular disease is limited once the conventional forms of drug administration fail to provide therapeutic levels drug to the vitreous, retina and choroids. The biodegradable polymers intraocular implants are able to release drugs directly to the vitreous and are able to maintain long-term vitreous concentration of drugs in therapeutic range. The poly (D,Llactidecoglycolide) is a classic example amongst the synthetic polymers and well applied as drugdelivery system due to its satisfactory degradability, biocompatibility and absence of significant toxicity accessed by in vivo studies. In this study, two novel different intraocular implants based on poly (D,Llactidecoglycolide) (PLGA 75:25) and the Cyclosporine A (CyA) immunosuppressive have been obtained from two different systems: lyophilized mixture and CyA-loaded microspheres. We havesuccessfully characterized the system with four different techniques and explained to some extent the preliminary long-term in vitro release profile. The HPLC validation results showed to be suitable to quantify the concentrations of CyA and the implants were successfully obtained by both proposed techniques. The TG curves proved the stability of the samples between temperatures of 100 - 120ºC. The materials crystalinities were evaluated by RXD diffraction wich showed anamorphous state of the polymer and CsA semi-crystalline state. Bisade that, the technique has shown the great amorphous state of the samples containing the drug and the polymer. DSC and FTIR have shown the absence of some detectable physical and chemical interaction between drug and polymer. The CyA preliminary release profile consisted by monophasic profile, wich the drug delivery occurs mainly due to the drug diffusion from the sweeling polymeric matrices. The diferrent and higher CyA release associated with samples of CyA-loaded microsphere implants was probably caused by the distinct drug distribution andheterogeneous morphological aspect from those lyophilized mixture implants, which have presented a slow CyA release and homogeneous surfaces. In summary, the delivery systems developed and fully characterized in the present work can be applied, in the future, for the treatment of various types of posterior uveitis manifestation.

A paromomicina (PA), um antibiótico aminoglicosídeo hidrofílico, tem sido utilizada como alternativa para o tratamento tópico de leishmaniose cutânea (LC). Apesar de este regime ter mostrado resultados promissores, ele não tem acelerado a recuperação em muitos casos. Isto pode ser atribuído, pelo menos em parte, à baixa penetração da PA na pele. Uma vez que as formulações lipossomais proporcionam aumento de penetração cutânea, o objetivo deste estudo foi preparare caracterizar lipossomas contendo PA e investigar seu potencial como sistema de liberação tópica deste antibiótico. Foram preparadas vesículas unilamelares grandes (LUVs) pelo método de evaporação por fase reversa. Os lípides usados foram fosfatidilcolina de soja (PC), PC/Colesterol (Chol) (razão molar 60/40), dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC) e DPPC/Chol (razão molar 60/40). Os experimentos de permeação cutânea foram realizados utilizando pele de orelha de porcomontadas em células de difusão de Franz. Três modelos foram usados: pele intacta, sem estrato córneo (EC) e sem epiderme. A remoção do EC (30 strippings) foi confirmada por meio da determinação da perda de água transepidérmica (PAT) e de análises histológicas, as quais demonstraram uma remoção quase completa do EC. A retirada da epiderme foi confirmada por meio de análises histológicas. Apermeação da PA através de pele intacta foi desprezível, independente da formulação testada. Entretanto, a penetração cutânea (% da dose aplicada) foi de 7.2 ± 0.2%, 4.8 ± 0.2% e 1.9 ± 0.1% para PC, PC/Chol e solução aquosa, respectivamente. A permeação do fármaco através de pele sem EC foi de 19.6 ± 0.8%, 6.1 ± 0.5% e 1.0 ± 0.6% para PC, PC/Chol e solução aquosa, respectivamente, enquanto que a permeação através de pele sem epiderme foi de 7.3 ± 0.7%, 10 ± 2% e 26 ± 3%. Assim sendo, os lipossomas proporcionaram aumento significativo da penetração e permeação da PA através da pele intacta esem EC, enquanto que uma liberação tópica controlada foi observada em permeação através de pele sem epiderme. Paromomycin (PA), an aminoglicoside antibiotic, has been used as an alternative for topical treatment of the cutaneous leishmaniasis (CL). Although this treatment has shown promising results, it has not been successful in accelerating the recovery in most cases. This could be attributed, at least in part, to the low skin penetration of PA. Considering that liposomal formulations usually provide skin penetrationenhancement, the aim of this study was to prepare and to characterize liposomal formulations containing PA and to investigate their potential as topical delivery systems of this antibiotic. Large unilamellar vesicles (LUVs) were prepared by reverse-phase evaporation method. The lipids used were soybean phosphatidylcholine (PC), PC/Cholesterol (Chol) (molar ratio 60:40), dipalmitoylphosphatidylcholine (DPPC) and DPPC/Chol (molar ratio 60:40). Permeation experiments using pig ear skin were performed in Franz diffusion cells. Three models of skin were used: intact, stripped and without epidermis. The removal of the stratum corneum (SC 30 strippings) was confirmed by the determination of transepidermal water loss (TEWL) values and by histological analysis, which demonstrated an almost complete removal of EC. The removal of the epidermis was confirmed by histological analysis. PA permeation through intact skin was negligible, independent of the formulation tested. However, the skin penetration (as % dose applied) was 7.2 ± 0.2%, 4.8 ± 0.2% and 1.9 ± 0.1% for PC, PC/Chol and aqueous solution, respectively. Drug permeation across stripped skin was 19.6 ± 0.8%, 6.1 ± 0.5% and 1.0 ± 0.6% for PC, PC/Chol and aqueous solution, respectively, whereas permeation across skin without epidermis was 7.3 ± 0.7%, 10 ± 2% and 26 ± 3%. Thus, liposomes provided significant PA penetration and permeation enhancement across intact and stripped skin while controlled topical delivery was observed in permeation across skin without epidermis.