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Background: In pathological situations, such as acute myocardial infarction, disorders of motility of the proximal gut can trigger symptoms like nausea and vomiting. Acute myocardial infarction delays gastric emptying (GE) of liquid in rats. Objective: Investigate the involvement of the vagus nerve, α 1-adrenoceptors, central nervous system GABAB receptors and also participation of paraventricular nucleus (PVN) of the hypothalamus in GE and gastric compliance (GC) in infarcted rats. Methods: Wistar rats, N = 8-15 in each group, were divided as INF group and sham (SH) group and subdivided. The infarction was performed through ligation of the left anterior descending coronary artery. GC was estimated with pressure-volume curves. Vagotomy was performed by sectioning the dorsal and ventral branches. To verify the action of GABAB receptors, baclofen was injected via icv (intracerebroventricular). Intravenous prazosin was used to produce chemical sympathectomy. The lesion in the PVN of the hypothalamus was performed using a 1mA/10s electrical current and GE was determined by measuring the percentage of gastric retention (% GR) of a saline meal. Results: No significant differences were observed regarding GC between groups; vagotomy significantly reduced % GR in INF group; icv treatment with baclofen significantly reduced %GR. GABAB receptors were not conclusively involved in delaying GE; intravenous treatment with prazosin significantly reduced GR% in INF group. PVN lesion abolished the effect of myocardial infarction on GE. Conclusion: Gastric emptying of liquids induced through acute myocardial infarction in rats showed the involvement of the vagus nerve, alpha1- adrenergic receptors and PVN. Fundamento: Distúrbios da motilidade do intestino proximal no infarto agudo do miocárdio podem desencadear sintomas digestivos como náuseas e vômitos. O infarto do miocárdio ocasiona retardo do esvaziamento gástrico (EG) de líquido em ratos. Objetivo: Investigar se existe a influência do nervo vago (VGX), adrenoreceptores α-1, receptores GABAB do sistema nervoso central e participação do núcleo paraventricular (NPV) do hipotálamo no esvaziamento gástrico (EG) e complacência gástrica (CG) em ratos infartados. Métodos: Ratos Wistar (n = 8-15) foram divididos em: grupo infarto (INF), sham (SH) e subdivididos. O infarto foi realizado por ligadura da artéria coronária descendente anterior. A complacência gástrica foi estimada com curvas pressão-volume. Realizada vagotomia por secção dos ramos dorsal e ventral. Para verificar a ação dos receptores GABAB foi injetado baclofeno por via intra ventrículo-cerebral. Simpatectomia química foi realizada com prazosina intravenosa (iv), e na lesão do núcleo paraventricular do hipotálamo foi utilizada corrente elétrica de 1mA/10s, com esvaziamento gástrico determinado por medição da retenção gástrica (% RG) de uma refeição salina. Resultados: Não houve diferença significativa na CG. A vagotomia (VGX) reduziu significativamente a %RG; no grupo INF, o tratamento intra ventrículo-cerebral (ivc) com baclofeno reduziu significativamente a % RG; não houve conclusivamente envolvimento dos receptores GABAB em retardar o EG; o tratamento intravenoso com prazosina reduziu significativamente a %RG no grupo INF. A lesão do NPV aboliu o efeito do infarto do miocárdio no EG. Conclusão: O nervo vago, receptores α-adrenérgicos e núcleo paraventricular estão envolvidos no retardo do esvaziamento gástrico no infarto agudo do miocárdio em ratos.

INTRODUCTION: The co-infection Trypanosoma cruzi/HIV has been described as a clinical event of great relevance. The objective of this study wasto describe clinical and epidemiological aspects published in literature. METHODS: It is a systematic review of a descriptive nature from the databases Medline, Lilacs, SciELO, Scopus, from 1980 to 2010. RESULTS: There were 83 articles (2.8 articles/year) with a total of 291 cases. The co-infection was described in 1980 and this situation has become the defining AIDS clinical event in Brazil. This is the country with the highest number of publication (51.8%) followed by Argentina (27.7%). The majority of cases are amongst adult men (65.3%) native or from endemic regions with serological diagnosis in the chronic stage (97.9%) and indeterminate form (50.8%). Both diseases follow the normal course, but in 41% the reactivation of the Chagas disease occurs. The most severe form is the meningoencephalitis, with 100% of mortality without specific and early treatment of the T. cruzi. The medication of choice was the benznidazole on doses and duration normally used for the acute phase. The high parasitemia detected by direct or indirect quantitative methods indicated reactivation and its elevation is the most important predictive factor. The lower survival rate was related to the reactivation of the Chagas disease and the natural complications of both diseases. The role of the antiretroviral treatment on the co-infection cannot yet be defined by the knowledge currently existent. CONCLUSIONS: Despite the relevance of this clinical event there are still gaps to be filled. INTRODUÇÃO: A coinfecção Trypanosoma cruzi/HIV vem sendo sistematicamente descrita como um evento clínico de grande relevância. O objetivo deste estudo foi descrever aspectos clínicos e epidemiológicos publicados na literatura científica. MÉTODOS: Trata-se de revisão sistemática, de natureza descritiva, a partir da busca nas bases Medline, Lilacs, SciELO, Scopus, de 1980 a 2010. RESULTADOS: Identificou-se 83 artigos (2,8 artigos/ano), com um total de 291 casos registrados. A coinfecção foi descrita em 1980 e, no Brasil, tornou-se evento clínico definidor de AIDS. Este é o país com maior número de publicações (51,8%), seguido pela Argentina (27,7%). A maioria dos casos é de homens adultos (65,3%), naturais ou procedentes de regiões endêmicas, com diagnóstico sorológico, na fase crônica (97,9%) e na forma indeterminada (50,8%). As duas doenças evoluem naturalmente, mas em 41% dos casos ocorreu reativação da doença de Chagas. A forma mais grave é a meningoencefalite, com 100% de letalidade nos casos sem tratamento específico e precoce do T. cruzi. O medicamento indicado foi benznidazole, nas doses e duração utilizadas na fase aguda em imunocompetentes. O diagnóstico da reativação foi comprovado por alta parasitemia, detectada por métodos diretos ou indiretos quantitativos, sendo a sua elevação considerada fator preditivo para reativação. A menor sobrevida nacoinfecção esteve relacionada à reativação da doença de Chagas e às complicações naturais de ambas as doenças. O papel do tratamento antirretroviral sobre a evolução da coinfecção ainda não pode ser definido pelo conhecimento existente. CONCLUSÕES: Apesar da relevância deste evento clínico, ainda persistem lacunas a serem preenchidas.

A doença de Chagas é uma parasitose causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, transmitido por insetos triatomíneos. A doença ocorre desde o sul dos Estados Unidos da América do Norte até a Argentina, sendo que, aproximadamente, 14 milhões de pessoas devam estar infectados na América Latina, predominantemente na forma crônica da doença. A reagudização da doença de Chagas pode ocorrer em imunossuprimidos, como tem sido observado em pacientes com aids. Verificou-se descompensação cardíaca em um destes casos, com grave disfunção ventricular e arritmias sendo considerada a possibilidade de reagudização da doença de Chagas no miocárdio, uma vez que o xenodiagnóstico foi positivo. Face a gravidade foi tratado especificamente para o Trypanosoma cruzi com benznidazol, porém sem completar o tempo estipulado para este fim, vindo a falecer em conseqüência de complicações da cardiopatia. A necropsia apresentou os estigmas habituais da cardiopatia chagásica crônica como miocardite fibrosante e redução do número de neurônios no tubo digestório, não sendo encontradas formas amastigotas do Trypanosoma cruzi em nenhum dos tecidos examinados. Assim, não ficou demonstrada a reagudização da doença de Chagas, mas sim evolução natural da cardiopatia chagásica crônica.

A doença de Chagas é uma parasitose causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, transmitido por insetos triatomíneos. A doença ocorre desde o sul dos Estados Unidos da América do Norte até a Argentina, sendo que, aproximadamente, 14 milhões de pessoas devam estar infectados na América Latina, predominantemente na forma crônica da doença. A reagudização da doença de Chagas pode ocorrer em imunossuprimidos, como tem sido observado em pacientes com aids. Verificou-se descompensação cardíaca em um destes casos, com grave disfunção ventricular e arritmias sendo considerada a possibilidade de reagudização da doença de Chagas no miocárdio, uma vez que o xenodiagnóstico foi positivo. Face a gravidade foi tratado especificamente para o Trypanosoma cruzi com benznidazol, porém sem completar o tempo estipulado para este fim, vindo a falecer em conseqüência de complicações da cardiopatia. A necropsia apresentou os estigmas habituais da cardiopatia chagásica crônica como miocardite fibrosante e redução do número de neurônios no tubo digestório, não sendo encontradas formas amastigotas do Trypanosoma cruzi em nenhum dos tecidos examinados. Assim, não ficou demonstrada a reagudização da doença de Chagas, mas sim evolução natural da cardiopatia chagásica crônica. Chagas disease is a type of parasitosis caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, and it is transmitted by triatomine insects. This disease is found between the southern United States to Argentina and approximately 14 million people in Latin America are believed to be infected, predominantly with the chronic form of the disease. Reactivation of Chagas disease can occur among immunosuppressed patients, as has been observed among AIDS patients. In one such case, we observed cardiac decompensation with severe ventricular dysfunction and arrhythmias. This case was thought to be reactivation of Chagas disease in the myocardium, since the xenodiagnosis was positive. Specific treatment for Trypanosoma cruzi was administered, consisting of benznidazole, but the course of treatment was not completed because the patient died due to cardiopathic complications. The necropsy showed the usual stigmas of chronic Chagas cardiopathy, such as fibrosing myocarditis and a decreased number of neurons in the digestive system. There were no amastigote forms of Trypanosoma cruzi in any of the tissue samples studied. Therefore, reactivation of Chagas disease was not demonstrated but, rather, the natural evolution of chronic Chagas cardiopathy was demonstrated.

Orientador: Eros Antonio de Almeida Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: A oscilação oral de alta freqüência é considerada que tenha um efeito terapêutico dentro da fisioterapia respiratória. Essa oscilação é produzida nos pulmões, através de um aparelho chamado Flütter VRP1, que pode ser utilizado como conduta fisioterapêutica, para promover a desobstrução dos brônquios, facilitando a higiene pulmonar. Com o objetivo de estudar o comportamento do pico de fluxo expiratório, nos doentes no período pós-operatório de cirurgia cardíaca, estudaram-se 30 pacientes, utilizando a oscilação oral de alta freqüência (Flütter VRP1) e comparou-se com 30 pacientes, realizando a fisioterapia respiratória convencional. Foi medido o pico de fluxo expiratório, um dia antes da cirurgia e depois no terceiro, quarto e quinto dias do pós-operatório, tanto do grupo que utilizou o Flütter VRP1, como do grupo de fisioterapia convencional, o qual foi chamado de grupo controle, para efeito de comparação da evolução desses dados. O grupo que utilizou o Flütter VRP1 apresentou um aumento no pico de fluxo expiratório em relação ao grupo que realizou a fisioterapia convencional. Conclui-se que a oscilação oral de alta freqüência, proporcionada pelo aparelho Flütter VRP1, pode ser adicionada no tratamento da fisioterapia respiratória, no pós-operatório de cirurgia cardíaca Abstract: Oral high frequency oscillation is considered a useful treatment in respiratory physiotherapy. This oscillation is produced in the lungs by a Flütter VRP1 device which can be used for bronchial disobstrucion, there by aiding pulmonary hygiene. The effect of this therapy on peak expiratory flow was examined in 60 postoperative cardiac surgery patients. Thirty of these patients were treated with oral high frequency oscillation Flütter VRP1 and where compared to 30 patients receiving conventional respiratory physiotherapy control group. The peak expiratory flow was measured one day before surgery and on the third, forth and fifth days, postsurgery in both groups. The results showed that patients who used Flütter VRP1 had an increased, peak expiratory flow compared to patients who received conventional physiotherapy. Thus, oral high frequency oscillation provided by the Flütter VRP1 device may be a useful auxiliary treatment in respiratory physiotherapy following cardiac surgery Mestrado Ciências Biomédicas Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Eros Antonio de Almeida Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: o infarto do miocárdio é conseqüência de grave isquemia do coração, geraJmente, causada por placas ateroscleróticas que se alojam nas coronárias e podem gerar trombos. Muito já se conhece sobre este evento, não havendo segredos da sua evolução natural, desde a apresentação clínica até a terapêutica. Entretanto, a repercussão do infarto do miocárdio sobre a reatividade do aparellio circulatório, no que se refere à sua fase recente, ainda se apresenta obscura. A disfunção endotelial ocorre precocemente na aterosclerose e encontra-se presente em uma outra série de patologias, tais como: hipertensão arterial, diabetes, hipercolesterolemia, insuficiência cardíaca, etc; porém, há controvérsias se o infarto do miocárdio estaria entre elas. Com o intuito de contribuir para o entendimento deste assunto, realizamos este traballio com os seguintes objetivos: 1) Estudar a função endotelial na vigência do infarto experimental do miocárdio em ratos, em sua fase recente; 2) verificar o efeito do inibidor da enzima de conversão da angiotensina (IECA) e do receptor específico de angiotensina (ATI) sobre a função endotelial;. 3) observar a influênciado IECA e do inibidor específico do ATl na mortalidade dos animais. Usou-se 80 ratos wistar machos pesando, entre 350-400 g, os quais foram divididos em oito grupos: grupo controle (RNN), grupo sham (RSS), grupo infarto médio (RIM), grupo infarto grande (RIG), grupo infarto médio e tratado com lisinopril(IECAM), grupo infarto grande e tratado com lisinopril (IECAG), grupo infarto médio tratado com losartan (ATIM) e o grupo infarto grande tratado com losartan (ATIG). O IECA e ATl escolhidos foram lisinopril e losartan, nas doses de 20 mg/kg/dia e 30 mg/kg/dia, respectivamente, sendo estas doses suficiente para a redução de aproximadamente 25% da pressão arterial confirmada pela medida na cauda dos animais. Os medicamentos foram administrados através de intubação orogástrica, dois dias antes de se submeterem à cirurgia e continuando por sete dias após o infarto do miocárdio. O infarto foi realizado por ligadura proximal da coronária descendente anterior esquerda, após toracotomia. Os animais operados foram mantidos em gaiolas com água e alimentação "ad libitum" e sacrificados através de inalação com éter etílico. Verificou-se a presença do infarto do miocárdio através da técnica de coloração com TTC (c1oreto de trifenil tetrazólio) a 1% e o estudo histopatológico foi realizado com coloração pela hematoxilina-eosina. Os infartosforam classificadosem ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital Abstract: The myocardial marction is a consequence of serious ischemia of the heart. It is usually caused by atherosc1erotic plaques which are deposited in the coronaries and generate a thrombus. Although at clinics and therapy we ftequently know what occurred during the natural evolution, what happens in the vascular endothelium in acute myocardial infarction remains obscure. The endothelial dysfunction occurs in atherosc1erosis, hypertension, diabetes, hypercholesterolemia and cardiac failure, but there is controversy whether an infarct occurs over activation of the endothelium or a decrease in endothelium response...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations Mestrado Ciências Básicas Mestre em Clínica Médica

Orientador: Luiz Cláudio Martins Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A presença da hipertensão arterial sistêmica, doença arterial periférica e de outras comorbidades, podem potencializar as chamadas síndromes geriátricas, como a síndrome da fragilidade. Embora seja um fator de risco modificável para doenças cardiovasculares, o percentual de controle da pressão arterial é baixo, sendo uma das causas, a baixa adesão ao tratamento. Tendo em vista que estas condições estão relacionadas ao desenvolvimento de incapacidades, piora da qualidade de vida dos idosos e aumento dos custos para os serviços de saúde, o objetivo desse trabalho foi investigar as relações entre hipertensão arterial, risco cardiovascular e adesão ao tratamento medicamentoso anti-hipertensivo na fragilidade do idoso. Participaram do estudo 111 idosos hipertensos, usuários de um ambulatório de atenção secundária. Foram realizadas medidas da pressão arterial e do índice tornozelo-braço (ITB), índice de massa corporal, avaliação da adesão ao tratamento medicamentoso anti-hipertensivo através do Teste de Morisk-Green e dos critérios de fragilidade (perda de peso não intencional, fadiga, diminuição da força de preensão manual, lentidão de marcha e inatividade física). Idosos que apresentaram 3 ou mais critérios de fragilidade foram considerados frágeis, 1 ou 2 critérios foram considerados pré-frágeis e os que não apresentaram critério, não-frágeis. A média de idade foi de 73,4 ± 7,37 anos, sendo 85,6% dos idosos do sexo feminino. As médias da pressão arterial sistólica sentado e em pé foram de 129,96 ±20,46 mmHg e 139,37± 22,58 mmHg, respectivamente. A médias da pressão arterial diastólica sentada e em pé foram 68,12 ± 11,24 e 76,78 ± 10,91 mmHg. A média da pressão de pulso foi 61,84 ± 17,19 e do ITB foi de 1,10±0,10. A adesão ao tratamento medicamentoso foi de 56,7%. Foram considerados frágeis 13,5%, pré-frágeis 64% e não-frágeis 22,5% dos indivíduos. Houve diferença significativa entre os 3 grupos de fragilidade para as variáveis idade (p

Orientador: Gilberto de Nucci Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: No presente trabalho, foram avaliados os efeitos farmacológicos do Aspirinato de atenolol (AA T) uma potencial pró-droga mútua resultado da combinação química entre ácido acetilsalicílico (AAS) e atenolo!. As propriedades do AA T como droga antitrombótica foram avaliadas na inibição da agregação plaquetária estimulada in vitro e na inibição da produção de tromboxano estimulada ex-vivo em sangue de animais tratados. Por outro lado, o AA T foi avaliado como droga anti-hipertensiva no modelo de hipertensão induzida pela inibição crônica da síntese de NO em ratos, e seus efeitos como antagonista dos adrenoceptores 13 foram avaliados na resposta cronotrópica ao isoproterenol em átrios isolados. Foi determinada a estabilidade metabólica em diferentes frações subcelulares hepáticas, plasma e soluções tampão de diferente pH, assim como seu perfil farmacocinético após administração endovenosa. Também foram avaliadas as propriedades ulcerogênicas gástricas e o potencial mutag'ênico através do Teste de Ames. Os resultados mostraram na avaliação do efeito antiplaquetário, que o AA T não inibiu a agregação plaquetária induzida pelo ácido araquidônico em nenhuma das concentrações testadas e apesar d~ ini~ir significativamente a produção de tromboxano estimulada ex-vivo em rat6s e na maior dose testada em camundongos, este efeito inibitório foi menor quando comparado com o AAS. O acoplamento com AAS, na molécula de AAT, suprimiu os efeitos do atenolol como antagonista dos adrenoceptores 13. Igualmente, o AA T não reduziu a freqüência cardíaca e pressão arterial após tratamento oral crônico de ratos hipertensos, estes resultados indicaram que não houve liberação de atenolol desde a molécula de AA T. Na avaliação da estabilidade metabólica e farmacocinética, observamos que o AA T seguiu uma rápida e completa hidrólise no grupo orto-acetila, gerando salicilato de atenolol (SA T), este produto foi formado quando o AA T foi submetido à hidrólise plasmática (T% 7,6 min) e aquosa (T% 56,5; 24,9 e 6,4 nos pH 2,5; 7,4 e 9.4 respectivamente) metabolização hepática e também após administração endovenosa em cães. o salicilato de atenolol formado a partir do AA T nas frações subcelulares hepáticas foi metabolizado apenas na fração microssomal gerando dois metabólitos hidroxilados em posições diferentes na molécula, a formação destes metabólitos foi dependente do tempo e paralela à cinética de desaparecimento do SAT. Após administração endovenosa, concentrações de AA T não foram detectadas em plasma. Atenolol e ácido salicílico (AS), foram liberados a partir da molécula de SAT (após clivagem da ligação éster benzoato) em concentrações significativamente menores às concentrações obtidas nos grupos tratados com AAS ou atenoloL A ASC0-24h calculada para o AS no grupo tratado com AA T correspondeu ao 0,71% da área calculada para o grupo que recebeu AAS. Similarmente, a ASC0-24h do atenolol no grupo tratado com AA T correspondeu a 1,44% da área calculada para ~ grupo tratado com atenolol. O AA T e seu principal metabólito SA T, não apresentaram propriedades mutagênicas, obtendo-se resultados negativos no Teste de Ames. O AA T produziu lesões na mucosa gástrica significativamente menores às observadas com o AAS após administração oral aguda e crônica durante 4 semanas. Devido às relevantes diferenças obtidas entre o AA T, AAS ou atenolol na caracterização farmacológica e farmacocinética, concluímos que o AA T não atua como pró-droga mútua de AAS e atenolol, e modificações futuras na molécula devem ser consideradas com a finalidade de desenvolver aspirinatos cardioativos com potencial efeito farmacológico : In this study, we evaluated the pharmacologica/ effects of Atenolol Aspirinate (A TA) a potential mutual prodrug that resulted of the chemical combination between Acetyl Salicylic Acid (ASA) and atenolo!. The properties of ATA as anthithrombotic drug were evaluated on the inhibition of in vitro stimulated platelet aggregation and on the inhibiton of ex-vivo stimulated thromboxane production in blood from treated animais. Additionally, A TA was evaluated as an antihypertensive drug on the hypertension induced by chronic inhibition of NO in rats, its effects as antagonist of f3 adrenoceptors were evaluated in the chronotropic response to isoproterenol in isolated atria. The metabolic stability was determined in different hepatic subcellular fractions, plasma and buffer solutions as well as its pharmacokinetic profile after intravenous administration. The gastric ulcerogenic properties and mutagenic potencial, using the Ames test, were toa evaluated. In the evaluation of the antiplatelet effect, our results showed that ATA had no effect on arachidonic acid induced platelet aggregation. Although it inhibited significantly the ex-vivo stimulated thromboxane production in rats and in the highest tested dose in mice, ATA showed lower inhibitory effect than ASA. The coupling with ASA, in the ATA mOlecule, abolished the atenolol effects as antagonist of f3 adrenoceptors. In the sa~e"way, ATA had no effect reducing the heart rate and blood pressure after chropic oral treatment of hypertensive rats, these results showed that atenolol was not liberated from ATA molecule. In the evaluation of the metabolic stability and pharmacokinetics, we observed that ATA followed a rapid and complete hydrolysis at the o-acetyl group, generating atenolol salicylate (A T8), this product was formed when ATA was submitted to plasma hydro/ysis (T% 7;6 min) and aqueous hydrolysis (T% 56,5; 24,9 and 6,4 at pH 2,5; 7,4 and 9.4 respectively), hepatic metabolization and after intravenous administration to dogs. ATA was biotransformed to A TS in ali hepatic subcellular fractions, then A TS was metabolized only in the microsomal fraction generating two hydroxylated metabolites, whose formation was time dependent and parallel to the kinetics of A TS consumption. After intravenous administration, concentrations of A TS instead ATA were found in plasma dog samples, SA and atenolol were originated from cleavage of A TS molecule at the benzoate ester linkage, generating concentration levels to a lesser extent than levels found after treatment with an equimolar dose of the drugs ',nóiviõua Doutorado Doutor em Farmacologia

Orientadores: Silvio dos Santos Carvalhal, Eros Antonio de Almeida Tese (doutorado) - Universidade Estadula de Campinas, Faculdade de Ciências Medicas Resumo: A relação entre a presença da onda Q no eletrocardiograma(ECG) e a presença de necrose miocárdica não é absoluta. Casos falso-positivos e casos falso-negativos são relatados na literatura desde o início do século. Em face das controvérsias existentes na li teratura sobre o comportamento anormal da onda Q no ECG de pacientes com infarto do miocárdio (1M) , e sem nos afastarmos do interesse particular de aferir quadros da semiótica física ou complementar, através da anatomia patológica, é que decidimos verificar o resultado de um confronto anátomo-eletrocardiográfico, usando a necrópsia como um meio de decidir o valor do ECG nesses casos. Foram estudados 140 casos que foram distribuídos em 3 grupos: Grupo I no qual o diagnóstico eletrocardiográfico de 1M foi confirmado pela necrópsia; Grupo 11 no qual o diagnóstico eletrocardiográfico de 1M não foi confirmado pela necrópsia e Grupo 111 no qual havia diagnóstico anátomo-patológico de 1M sem diagnóstico eletrocardiográfico prévio. No GI obtivemos casos(34,28%) ; no GIl, 17 casos(12,14%) e no GIII 88 casos(62,58%). Somando os casos de cada grupo eles perfazem 153, porque em 13 casos apareceram aI terações eletrocardiográficas e anátomo-patológicas que permitiram sua inclusão em mais de um grupo. Os fatores que mais influíram no comportamen to da onda Q anormal do ECG foram: a presença de distúrbio de condução, a localização, a idade o tamanho do 1M e a sua localização na espessura da parede do VE. Assim, a onda Q anormal do ECG para o diagnóstico de 1M tem valor apenas relativo, quando ela é considerada sem o quadro clínico, exame físico e outros exames complementares. A necrópsia continua sendo método de grande importância para aferir o ECG tradicional, bem como toda semiotécnica física e laboratorial Abstract: The relationship between the presence of Q wave at electrocardiograrn (ECG) and the presence of myocardic necrosis is not absol u te. False-posi ti ve and false-negati ve cases have been reported in literature since the beginning of this century. Literature presents controversies about the abnormal behavior of Q wave at ECG from patients wi th myocardial infarction (MI) . Since our main aim is to corroborate the pictures of physical or complemental semiotics through pathological anatomy, we decided to verify the result of a anatomoelectrocardiographic comparison. 140 cases were studied and they were divided into 3 groups: Group I, in which electrocardiographic diagnosis of MI was confirmed by necropsy; Group I I, in which i t was not confirmed; and Group III, in which there was an anatomicopat hologic diagnosis of MI without previous electrocardiographic diagnosis. GI included 48 cases(34,28%); GII 17 cases(12,14%) and GIII 88 (62,58%) . The total cases were 153 since 13 of them were included in more than one group as they presented electrocardiographic and anatomopathological changes. The most influent factors on the behavior of the abnormal Q wave of ECG were presence of conduction disturbance, localization, age, size of MI and its position at the thickness of left ventricle wall. Thus, when considered without clinical picture, physical exarnination and other complemen.tal exarninations, the abnormal Q wave of ECG has only a relative value for diagnosis of MI. Necropsy is still a very important method for corroborating traditional ECG, as well as all physical and laboratorial semiothecnics Doutorado Clínica Médica Doutor em Clínica Médica

Orientador: Gilberto De Nucci Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: Os estudos de biodisponibilidade/bioequivalência foram iniciados no Brasil em 1989 e o processo de regulamentação do setor foi iniciado em 1999 pela promulgação da lei de genéricos. A regulamentação do setor tem propiciado grande aumento na qualidade de fabricação dos medicamentos similares e genéricos, já que a realização de estudos de biodisponibilidade visa, em última análise, comprovar a eficácia terapêutica destes medicamentos. O presente trabalho tem por objetivo o planejamento e avaliação de estudos de biodisponibilidade/bioequivalência e desenvolvimento de metodologia analítica para quantificação das amostras para os fármacos avaliados (citalopram, ramipril e gliclazida). Adicionalmente, as avaliações dos estudos visam o aprimoramento dos protocolos de estudos futuros para novas formulações destes fármacos e a menor exposição possível do voluntário, respeitando os referenciais básicos de bioética. Os parâmetros considerados para o desenvolvimento dos protocolos clínicos foram: número adequado de voluntários, sexo dos voluntários, tempos de coleta para caracterização do perfil farmacocinético, forma farmacêutica, intervalo entre as administrações, condição de administração (alimentação/jejum) e metodologia analítica a ser utilizada para o doseamento das amostras. Resultados: 1) Para citalopram, o coeficiente de variabilidade intra-sujeito para Cmax e ASClast foram14.09 e 8.38, respectivamente. 2) Para ramipril, o coeficiente de variabilidade intra-sujeito para Cmax e ASClast foram menor para o metabólito ativo, como esperado para em estudos de bioequivalência, confirmando que os fármacos na forma inalterada são mais discriminativos para estabelecer bioequivalência. 3) Para gliclazida, a média geométrica e intervalo de confiança de 90% para a razão Gliclazida/Diamicron (Irelanda) foram 588.68% (90% CI= 491.16, 705.58%) para ASClast e 1395.77% (90% CI= 1116.62, 1744.72%) para Cmax. A média geométrica e intervalo de confiança de 90% para a razão Gliclazide/Diamicron (Brasil) foram 249.16% (90% CI= 207.96, 298.54%) para ASClast, e 188.04% (90% CI= 151.72, 233.05%) para Cmax. A média geométrica e intervalo de confiança de 90% para a razão Diamicron(Brazil)/Diamicron (Irelanda) foram 236.26% (90% CI= 197.12, 283.17%) para ASClast e 225.21% (90% CI= 175.25, 289.42%) para Cmax. Conclusões: 1) As metodologias analíticas desenvolvidas para ramipril, citalopram e gliclazida foram adequadas para rotinas com grande quantidade de amostras para doseamento, como estudos farmacocinéticos ou de biodisponibilidade. 2) A formulação teste de citalopram é bioequivalente a formulação de referência para velocidade e extensão de absorção. Estudos futuros de citalopram podem ser realizados com menor número (14-16) de voluntários, baseado no baixo coeficiente de variabilidade intra-sujeito. 3) A formulação teste de ramipril também é bioequivalente à formulação de referência para velocidade e extensão de absorção. Estudos futuros de ramipril devem ser realizados pela quantificação do fármaco na sua forma inalterada e coletas de amostras até 10 horas após a administração. 4) Com relação ao estudo de gliclazida, as diferenças entre as formulações teste e referências não demonstram bioequivalência. Interessante, é o fato que as formulações de referência [Diamicron Brasil e Irlanda] não são bioequivalentes entre si, indicando diferenças significativas nas formulações de referência produzidas em países diferentes (neste caso particular, Irlanda e Brasil) Abstract: Bioavailability/bioequivalence studies began in Brazil in 1989 and the regulation of this sector began in 1999 with the promulgation of laws regulating generic medications. The regulations of this sector have been fostering a growth in the production quality of generic and similar medications, since the performance of Bioavailability studies aims, at the end, to prove the efficacy of these medicatons. This work aims at the planning and evaluation of bioavailability/bioequivalence studies, the development of analytical methods for quantifying samples of evaluated pharmaceuticals (citalopram, ramipril and gliclazide). Additionally, this evaluation aims to improve protocols for future studies for new formulations as well as to decrease volunteer exposure to a minimum, respecting basic bioethical principles. The parameters considered for developing the clinical protocols were: the adequate number of volunteers, volunteer gender, sampling times for characterizing the pharmacokinetic profile, pharmaceutical form, interval between administrations, administration conditions such as fasting and non fasting, and the analytical method used for determining sample dosage. Three bioequivalence studies (citalopram, ramipril, gliclazide) were used to demonstrate the parameters considered in developing the clinical protocols. Results: 1) For citalopram, the intra subject CV% for Cmax and AUClast were14.09 and 8.38, respectively. 2) For ramipril, the intra-subject variation (% CV) for both Cmax and AUCs ratios were lower for the active metabolite, as expected in bioequivalence studies, confirming that the parent compounds are more discriminative to establish bioequivalence. 3) For gliclazide, the geometric mean and 90% confidence intervals (CI) for the Gliclazide/Diamicron (Ireland) ratio were 588.68% (90% CI= 491.16, 705.58%) for AUClast and 1395.77% (90% CI= 1116.62, 1744.72%) for Cmax. The geometric mean and 90% confidence intervals (CI) for the Gliclazide/Diamicron (Brazil) ratio were 249.16% (90% CI= 207.96, 298.54%) for AUClast, and 188.04% (90% CI= 151.72, 233.05%) for Cmax. The geometric mean and 90% confidence intervals (CI) for the Diamicron(Brazil)/Diamicron (Ireland) ratio were 236.26% (90% CI= 197.12, 283.17%) for AUClast and 225.21% (90% CI= 175.25, 289.42%) for Cmax. Conclusion: 1) The analytical method developed for ramipril, citalopram and gliclazide were adequate for routines with large quantities of samples, such as pharmacokinetic or bioavailability studies. 2) The citalopram test formulation was bioequivalent to the reference formulation regarding the rate and extent of absorption. Future studies of citalopram can be performed with a lower number of volunteers (14-16), based on the low intra subject CV. 3) Test formulations of ramipril were also bioequivalent to the reference formulation regarding the rate and extent of absorption. Future studies of ramipril need to be performed to quantify the pharmaceutical in its unaltered form alone by collecting samples up until ten 10 hours after administration. 4) Gliclazide was not bioequivalent to its reference formulations. Interestingly, the reference formulations [Diamicron Brazil and Ireland] were not bioequivalent with each other, indicating significant differences in reference formulations produced in different countries Doutorado Clínica Médica Doutor em Clínica Médica

Orientador: Gilberto de Nucci Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: No presente trabalho foi padronizado um novo método para a dosagem da atividade de fosfodiesterase in vitro, por HPLC-MS/MS. Este novo método conseguiu apresentar exatidão, precisão, sensibilidade e rapidez nas análises; monitorando os nucleotídeos (AMP, GMP, AMPc e GMPc). O desenvolvimento de novos fármacos derivados de um protótipo aponta para a obtenção de moléculas com um melhor perfil farmacocinético ou uma melhor relação estrutura-atividade. Atualmente o sildenafil é considerado o principal fármaco para o tratamento de disfunção erétil. Neste trabalho, avaliaram-se novos compostos denominados análogos de sildenafil (carbonato de lodenafil, dímero uréia e dímero uretana). Os análogos foram analisados quanto à atividade em PDE5 e agregação plaquetária humana, in vitro. Foi determinada a estabilidade destes compostos, em meio ácido e plasma humano, in vitro, além de seus possíveis metabólitos em microssomas e hepatócitos de rato in vitro, e os seus parâmetros farmacocinéticos via intravenosa e oral, em cão, in vivo. Os resultados mostraram que os análogos de sildenafil inibem a atividade de PDE e não inibem a agregação plaquetária do mesmo modo que o sildenafil in vitro, no entanto potencializam a ação do doador de NO (SNP). Os análogos de sildenafil foram estáveis em meio ácido e em plasma humano. No ensaio de metabolização, os dímeros uréia e uretana não foram metabolizados, entretanto o carbonato de lodenafil foi metabolizado principalmente em lodenafil, in vitro. O carbonato de lodenafil é rapidamente biotransformado em lodenafil, após administração v.i. e v.o. em cão. Concluiu-se que este trabalho apresenta um novo método de dosagem de PDEs e uma nova perspectiva terapêutica para a disfunção erétil, representada pelo carbonato de lodenafil, o qual inibe concentração-dependente a atividade de PDE5 Abstract: In the present work a new method for the dosage of the activity of phosphodiesterase was standardized in vitro, for HPLC-MS/MS. This new method obtained to present exactness, precision, sensitivity, and rapidity in the analyses; monitoring the nucleotides (AMP, GMP, cAMP and cGMP). The development of new drug derived from an archetype points with respect to the molecule attainment with one better pharmacokinetic profile or one better relation structure-activity. Currently the sildenafil is considered the main drug for the treatment of erectile dysfunction. In this work, we evaluate new analogous called composites of sildenafil (carbonate of lodenafil, dimer urea and dimer uretana). The analogous ones had been analyzed how much the activity in PDE5 and platelet aggregation human being, in vitro. The stability of these composites was determined, in human acid way and plasma, in vitro, beyond its possible metabolites in microsomes and hepatocytes of rat in vitro, and its pharmacokinetic profile after intravenous and oral, in dog, in vivo. The results had shown that the analogous of sildenafil inhibit the activity of PDE and they do not inhibit the platelet aggregation in a similar way that the sildenafil in vitro, however potencializam the action of the giver of NO (SNP). The analogous ones of sildenafil are presented steady in human acid way and plasma. In the metabolization assay, metabolization of dimer urea and dimer uretana was not observed, however the lodenafil carbonate was metabolizado mainly in lodenafil, in vitro. The lodenafil carbonate quickly is biotransformation in lodenafil, after administration v.i. and v.o. in dog. We conclude that this work presents a new method for analyze activity of PDEs and a new therapeutically perspective for the erectile dysfunction, represented for lodenafil carbonate, which inhibits concentration-dependent the activity of PDE5 Doutorado Doutor em Farmacologia

Orientadores: Sandra Cecília Botelho Costa, Eros Antonio de Almeida Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Atualmente, o diagnóstico laboratorial da doença de Chagas crônica baseia-se em métodos sorológicos convencionais. Entretanto, resultados falso-negativos e falso-positivos podem ocorrer. A hemocultura também pode ser utilizada como método diagnóstico, mas sua sensibilidade é limitada na fase crônica. Métodos diagnósticos baseados em princípios de biologia molecular vêm sendo estudados e a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) tem sido a técnica mais utilizada ultimamente. Este estudo teve como objetivo principal avaliar o desempenho da PCR qualitativa e quantitativa no diagnóstico da doença de Chagas em pacientes portadores de megaesôfago. Foram estudadas amostras de DNA de sangue de 26 pacientes com sorologia não reagente ou inconclusiva e de 33 pacientes soropositivos para doença de Chagas. O alvo genético mais adequado para PCR qualitativa, que apresentou maior positividade, foi o Sat-DNA de T. cruzi. Quando comparada com os resultados de PCR quantitativa, houve concordância de 72,72% em ambos os grupos. Além disso, observou-se que todos os pacientes com hemocultura positiva apresentaram PCR qualitativa positiva. A metodologia quantitativa, embora considerada altamente sensível, não detectou DNA de T. cruzi em uma amostra de paciente com hemocultura positiva. Nossos resultados indicam um possível subdiagnóstico da doença de Chagas em pacientes com megaesôfago devido aos exames sorológicos negativos ou inconclusivos. A PCR qualitativa mostra-se uma ferramenta útil para esclarecimento da etiologia do megaesôfago e, por apresentar positividade semelhante à qPCR, não se justifica o uso de metodologia quantitativa para fins exclusivamente diagnósticos Abstract: Current laboratory diagnosis of chronic Chagas disease relies on conventional serological tests but false-positive and false-negative results may occur. Hemoculture can also be used as a diagnostic method but its sensitivity in chronic phase is limited due to the low/intermittent parasitemia. Molecular diagnosis methods have been studied and the main technique that has been extensively tested is the Polymerase Chain Reaction (PCR). This study aimed to evaluate the qualitative and quantitative PCR performance for diagnostic purposes in patients with megaesophagus. We studied DNA blood samples from 26 patients with negative or inconclusive conventional serology for Chagas disease and from 33 patients with positive serology. The most suitable target for qualitative PCR presenting high positivity was the Sat-DNA of T. cruzi. When compared to the quantitative results, the concordance between the two molecular methods in both groups was 72.72%. In addition, we observed that all patients with positive results of hemoculture had positive qualitative PCR. The qPCR methodology although highly sensitive could not detect minimal amounts of T. cruzi DNA in one patient with positive hemoculture. Our results indicate a possible misdiagnosis of patients with megaesophagus given by the negative or inconclusive serology for Chagas disease. Due to its good performance, the qualitative PCR is a useful tool to determine the megaesophagus etiology Doutorado Clínica Médica Doutora em Clínica Médica

Orientador: Sandra Helena Alves Bonon Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Pacientes com câncer possuem longos períodos de neutropenia grave e são particularmente vulneráveis às infecções. Muitos episódios de neutropenia febril são tratados com antibióticos de amplo espectro, sem identificação do foco e microrganismo causador da infecção. Os testes moleculares, como a reação em cadeia da polimerase podem contribuir para a detecção de microrganismos causadores de infecção nessa população, otimizando os resultados e possibilitando aos médicos assistentes decidir sobre o tratamento. O objetivo principal deste estudo foi detectar a presença de material genético de vírus de maior ocorrência na população infantil em pacientes portadores de doença oncológica com neutropenia febril, como os herpesvírus Epstein Barr (EBV), Citomegalovírus (CMV), Herpesvírus 6 (HHV-6) e Herpesvírus 7 (HHV¿7). Outros vírus pesquisados foram: Parvovírus B19 (PvB19), Poliomavírus (BKV) e o Adenovírus (AdV). Amostras de soro de pacientes de 3 a 14 anos foram avaliadas através de técnicas de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e de marcadores bioquímicos de infecção. Amostras de sangue total e urina também foram coletadas para a realização dos exames de cultura microbiológica, seguindo os protocolos internos dos hospitais. Foram incluídos 58 pacientes com neutropenia febril. Dentre as hemoculturas coletadas destes pacientes, 4/58 (7%) foram positivas e dentre as uroculturas, 1/58 (1,7%) foi positiva. Pela reação em cadeia da Polimerase tipo nested, os vírus HHV-6 e HHV-7 foram os mais detectados, com positividade em 12/58 (20,7%) e 14/58 (24,1%) amostras, respectivamente. Através da técnica da PCR em Tempo Real, o PvB19 foi positivo em 10/58 (17,2%), CMV em 6/58 (10,3%) e o BKV em 2/58 (3,4%). Coinfecção viral foi detectada em 7/58 (12,1%) amostras com associação a sintomas respiratórios em 5/7 (71,4%) pacientes. Os resultados de proteína C reativa tiveram maior concentração nas infecções bacterianas, com média de 113 mg/dL, enquanto que em infecções virais a média foi de 11 mg/dL, não foi fator preditivo para a detecção de infecções. As análises dos resultados obtidos através das técnicas de biologia molecular mostraram que em crianças e adolescentes com neutropenia febril a presença dos vírus detectados é comum e podem contribuir para o aumento da morbidade. Com a utilização da detecção molecular destas viroses, podem ocorrer consequências favoráveis como a diminuição dos gastos hospitalares e o aumento da eficácia da terapia Abstract: Patients with malignancies have long periods of severe neutropenia and are particularly vulnerable to infectious complications. Most episodes of febrile neutropenia are treated with empiric broad-spectrum antibacterial therapy without identifying the site or causative agent of infection. Molecular tests with a polymerase chain reaction may contribute to detection of microorganisms that cause infection, optimizing the results and helping it possible for medical assistant¿s decision about treatment. The aim of this study was to identify the genome of herpes virus Epstein Barr Virus (EBV), Cytomegalovirus (CMV), Human Herpes virus - 6 (HHV-6), Human Herpes virus - 7 (HHV-7), and others virus with Parvovirus B19 (PvB19), Polyoma virus (BKV), and Adenovirus (AdV). Serum samples of pediatric cancer patients of 3 to 14 years old were analyzed by Polymerase Chain Reaction (PCR) and for biochemistry marks of infectious disease. Whole blood and urine were collected for cultures were performed using an internal protocol. Fifty-eight cancer patients were included with fever and neutropenia. Among blood culture collected 4/58 (7%) were positive and 1/58 (1.7%) to urine culture was positive for this patients. For nested-PCR HHV-6 and HHV-7 were the most commonly detected viruses in 12/58 (20.7%) and 14/58 (24.1%) of samples, respectively. Through of real time PCR the PvB19 was positive in 10/58 (17.2%), CMV in 6/58 (10.3%) and BKV in 2/58 (3,4%). The presence of viral DNA of two or more microorganisms were observed in 7/58 (12.1%) and patients with respiratory diseases in 5/7 (71.4%). The C reaction protein (CRP) results had high concentration in bacterial infections with media oh 113 mg/dL. Although, viral infections had a media of 11 mg/dL, and were not a good predictive factor for detection of viral infections. The analyzed of these results checked through molecular methods showed that in children and young patients with febrile neutropenia the virus presence is common and may contribute for high incidence of morbidity. The utility of molecular detection of these viruses, favorable consequences to help such as the reduction of hospital expenses and the increase of the efficacy therapy Doutorado Clínica Médica Doutor em Ciências

Orientador: Gilberto De Nucci Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: Os eosinófilos participam de processos inflamatórios e alérgicos. Estando relacionados com o sistema de imunidade inata do organismo, eles representam uma linha fundamental de defesa contra invasão microbiana e, quando ativados, produzem uma série de mediadores solúveis que atuam nas respostas inflamatórias e alérgicas. A relação entre a atividade dos eosinófilos e plaquetas foi observada nas últimas décadas por muitos cientistas. Estas observações incluem o aumento do número de eosinófilos associados a desordens plaquetárias, incluindo alterações na cascata de coagulação e agregação plaquetária. Com base nessas observações, a interação entre os eosinófilos e plaquetas foram analisadas na agregação plaquetária. Plaquetas humanas foram incubadas com a fração citosólica de eosinófilos, linhagem celular promielocítica humana HL-60 clone 15 e proteína catiônica do eosinófilo (ECP). A agregação em plasma rico em plaquetas (PRP) foi induzida por difosfato de adenosina, fator de ativação plaquetária, ácido araquidônico e colágeno, e as plaquetas lavadas (PL) foram ativadas por trombina. A agregação induzida por todos os agonistas foi inibida de maneira concentração de células dependente pela fração citosólica de eosinófilos. Esta inibição foi apenas parcialmente revertida pela prévia incubação dos eosinófilos com L-Nitro-Arginina-metil-éster (L-NAME). A prévia incubação com indometacina não impediu a inibição induzida pela fração citosólica. A separação da fração citosólica de eosinófilos por gel filtração em Sephadex G-75 mostrou que a atividade inibitória foi concentrada na fração de peso molecular mais baixo. As células HL -60 clone 15 diferenciadas em eosinófilos por 5 e 7 dias foram capazes de inibir a agregação plaquetária. A proteína de ECP inibiu a agregação plaquetária em PRP e PL. Esta inibição foi mais evidente em PL, e o ensaio de citotoxicidade com MTT demonstrou a viabilidade de plaquetas testadas, indicando que a inibição observada pela proteína ECP não ocorre simplesmente pela morte celular. A proteína EDN, clonada e expressa em sistema eucarioto, também apresentou efeito de inibição sobre a agregação plaquetária em PRP, enquanto que a proteína MBP não apresentou efeito de inibição da agregação plaquetária significativo. Os nossos resultados indicam que os eosinófilos desempenham um papel fundamental na inibição da agregação plaquetária Abstract: Eosinophils participate in allergic and inflammatory processes, being related to innate immunity system of the body, they represent a fundamental line of defense against microbial invasion and when activated produce a number of soluble mediators that act in inflammatory and allergic responses. The relationship between the activity of eosinophils and platelets has been observed in recent decades by many scientists. These observations include increased numbers of eosinophils associated with platelet disorders, including changes in the coagulation cascade and platelet aggregation. Based on these observations, the interaction between eosinophils and platelets in platelet aggregation was analyze. Human platelets were incubated with eosinophil cytosolic fraction, promyelocytic human HL-60 clone 15 cell lineage, and eosinophil cationic protein (ECP). Platelet rich plasma (PRP) aggregation was induced by adenosine diphosphate, platelet activating factor, arachidonic acid, and collagen, and washed platelets (WP) were activated by thrombin. Aggregation induced by all agonists was dose dependently inhibited by eosinophil cytosolic fraction. This inhibition was only partially reversed by previous incubation of the eosinophils with L-Nitro-Arginine-Methyl-Ester (L-NAME). Previous incubation with indomethacin did not prevent the cytosolic fraction induced inhibition. The separation of eosinophil cytosolic fraction by gel filtration on Sephadex G-75 showed that the inhibitory activity was concentrated in the lower molecular weight fraction. HL-60 clone 15 cells differentiated into eosinophils for 5 and 7 day were able to inhibit platelet aggregation. The ECP protein inhibited the platelet aggregation on PRP and WP. This inhibition was more evident in WP, and the citotoxicity MTT assay proved the viability of tested platelets, showing that the observed inhibition by the ECP protein does not occur simply by cell death. The EDN protein, cloned and expressed in eukaryotic system, also showed inhibitory effect on platelet aggregation in PRP, whereas the protein MBP had no effect significative inhibiting platelet aggregation. Our results indicate that eosinophils play a fundamental role in platelet aggregation inhibition Doutorado Farmacologia Doutora em Farmacologia

Orientadores: Eros Antonio de Almeida, Rachel Lewinsohn Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: Isolados durante milhares de anos, os indígenas não desenvolveram imunidade diante de vírus e bactérias originários de outros continentes. Apesar de seu habitat não ser destituído de uma grande variedade de moléstias (dentre elas o pian, a leishmaniose cutânea e a doença de Chagas), no contato com o colonizador, a deficiência de resposta imune Th2 para micro-organismos autóctones causou verdadeiras tragédias entre os brasilíndios, que sucumbiam por gripes, sarampo, disenterias e principalmente varíola. Médicos formados constituíam um grupo insignificante no Brasil colonial e diante do vazio profissional, jesuítas (os primeiros que se lançaram nas práticas médicas), curiosos, curandeiros, barbeiros, benzedeiras compunham um contingente expressivo. Todos praticavam uma medicina híbrida, formada inicialmente pela medicina popular européia e indígena; ambas possuíam uma noção materializada da doença que, uma vez instituída, deveria abandonar o organismo. Diante disso, a terapêutica baseava-se em sangrias, purgas e vomitórios, além de rituais, rezas e uso de amuletos para satisfazer o sobrenatural. Estas práticas médicas concomitantemente valeram-se da variada flora medicinal nativa e foram difundidas pelos bandeirantes, que desbravavam os sertões de norte a sul - por este motivo esta terapêutica foi denominada "Remédios de Paulistas" - e foi usada para diversos males como opilação (anemia), escrófulas, "carneiradas" (malária) e "meia-cegueira" (tracoma?), comuns nas matas e vilas incipientes. Nenhuma das medicinas, erudita ou popular - que na realidade eram muito semelhantes entre si - foi eficaz diante das epidemias. A despeito de serem os indígenas suas principais vítimas, elas matavam de senhores de engenho a escravos, faziam ruir a economia e causavam fome e desalento. Falências, crescentes dívidas para importar escravos africanos (mais caros, porém mais resistentes às doenças) constituíram por muitos anos um quadro sombrio da vida no Brasil. Num círculo cruel de causa e efeito, os escravos negros substituíram gradativamente o trabalho indígena nas lavouras, mas trouxeram mais doenças, como o maculo, a febre amarela, a malária (por P. falciparum) e a própria varíola. As tentativas indígenas na defesa de seu território resultaram em fracasso; a morte, na grande maioria das vezes, foi causada direta ou indiretamente pelas doenças infecciosas de além-mar e não por canhões e arcabuzes. Assim, na falta de uma imunidade eficaz, as guerras contra os colonizadores já estavam vencidas, antes mesmo de iniciadas. Abstract: Isolated during thousands of years, native Brazilians did not developed immunity to microorganisms from another continent. Despite the presence of diseases in their habitat, (such as non venereal treponematosis, cutaneous leshmaniosis and Chagas' disease), with exposure to alien explorers, the deficiency of an immune response Th2 to viruses and foreign bacteria, truly decimated the native population of Brazil, which succumbed secondary to primarily small pox, but also to the flu, measles and dysentery. Trained physicians were scarce in colonial Brazil, and due to this professional void, Jesuits (the first to start medical practices), curious people, shamans, barbers and faith healers tried to replace them; all practiced a hybrid form of medicine, based initially in the popular European medicine combined with native roots. Both schools of thought had a "material" concept of the diseases; that is, once developed, it had to abandon the organism. As such, therapy was based in exsanguinations, intestinal cleansing and forced vomit, in addition to rituals, praying and use of amulets to appease the supernatural world. These medical practices made extensive use of the varied native medicinal flora, and this knowledge was spread out by the alien explorers of the north and south remote regions - as a consequence, this therapy was called " Remedios de Paulistas", i. e., Medicine of Sao Paulo - , and it was used for a variety of maladies such as anemia, scrofula, malaria, and trachoma, diseases common in the jungle and adjacent hamlets. None of the medical practices - classic or popular (very similar to each other) - was efficacious against any epidemics. Despite native Brazilians being most affected, epidemics also killed African slaves and their owners, ruining the economy and causing hunger and discouragement. Personal bankruptcy, increased debts for buying African slaves (more expensive, however more resistant to diseases) lead to, for many years, a somber lifestyle in Brazil. In a cruel circle of cause and effect, African slaves gradually replaced native Brazilians as work force in the plantations; on the other hand, they also brought in diseases such as infectious recto colitis, yellow fever and malaria - caused by P. falciparum, and even small pox. All native Brazilian resistance to colonization resulted in failure; death, in the vast majority of cases, was caused directly or indirectly by the exposure to alien diseases, and not by cannons or guns. As a consequence, due to lack of an efficient immune system, the battle against the colonizers was already lost, even before it had started. Doutorado Clínica Médica Doutor em Clínica Médica

Orientador: Kleber Gomes Franchini Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: O presente estudo tem como objetivo avaliar a influência da estimulação biventricular prolongada no pós-operatório de revascularização miocárdica em pacientes portadores de disfunção ventricular esquerda, FE = 40%, associada à duração do QRS menor ou igual a 130ms. Foram selecionados 21 pacientes dos quais 16 foram randomizados em dois grupos denominados: Grupo de estimulação biventricular (Grupo EBV) e Grupo Controle. Os dois grupos foram submetidos à monitorização contínua por um período de 12 horas com os seguintes parâmetros coletados: parâmetros hemodinâmicos sistêmicos (pressão arterial média, índice de resistência vascular sistêmica e temperatura), parâmetros hemodinâmicos cardíacos (débito cardíaco, índice cardíaco, índice do volume sistólico do ventrículo esquerdo e freqüência cardíaca) e parâmetros hemodinâmicos pulmonares (pressão em cunha de capilar pulmonar, pressão venosa central e índice de resistência vascular pulmonar). Para análise dos resultados foram empregados o teste t de Student, teste de Wilcoxon, teste exato de Fisher, teste de Wilks e MANOVA. A sincronização obtida através da estimulação biventricular sob captação atrial (sinusal) aumentou o índice cardíaco em conseqüência do aumento do volume sistólico. Observou-se também uma redução significativa da resistência vascular sistêmica em comparação com os pacientes não estimulados. Esses efeitos permaneceram nas 6 horas que se seguiram após a parada da estimulação no Grupo EBV. Não houve diferença estatisticamente significativa na pressão arterial média entre os grupos. O grupo estimulado apresentou uma menor pressão em cunha de capilar pulmonar do que o grupo controle durante o período da estimulação. Podemos concluir que a estimulação biventricular produziu nesses pacientes uma melhora do desempenho sistólico do ventrículo esquerdo por restaurar a coordenação da contratilidade cardíaca em conseqüência da sincronização independente da variável freqüência cardíaca e duração do QRS Abstract: The present study aims to evaluate the influence of lengthened biventricular stimulation on the post-surgical period of myocardical revascularization in patients that carry left ventricular dysfunction, FE = 40%, associated to QRS endurance equal to or less than 130 ms. From a selection of 21 patients, 16 of which were randomized in 2 groups named: Biventricular Stimulation Group (EBV Group) and Control Group. Both groups have been submitted to a 12-hour continuous monitoring period, with the following parameters being collected: systemic hemodynamic parameters (mean arterial pressure, systemic vascular resistance index and temperature), cardiac hemodynamic parameters (cardiac output, cardiac index, left ventricle stroke volume index and heart rate) and pulmonary hemodynamic parameters (pulmonary artery wedge pressure, central venous pressure and pulmonary vascular resistance index). For the analysis of the results we have applied the Student's t test, Wilcoxon rank-sum test, Fisher's exact test, Wilks' test and MANOVA. The synchronization obtained through biventricular stimulation under atrial sense increased the cardiac index, as a consequence of the increased systolic volume. A significant reduction of systemic vascular resistance has also been observed, in comparison to that of the non-stimulated patients. These effects have endured for the 6-hour period that succeeded the interruption of the stimulation in the EBV Group. There was no statistically significant difference in the average blood pressure between the groups. The stimulated group presented a lower pulmonary artery wedge pressure than that of the control group over the stimulation period. We can concluded the biventricular stimulation has produce an improvement on the systolic performance as the left ventricular do the restoration of the ventricular contractibility as a consequence of a synchronization that the not depend the frequency and the QRS lasting Doutorado Medicina Experimental Doutor em Fisiopatologia Médica

Orientador: Heitor Moreno Junior Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Resumo: O ato de fumar é um hábito com sérias conseqüências para a saúde pública. De acordo com a Organização Mundial de Saúde fumar cigarro é a principal causa de morte cardiovascular e doenças respiratórias. Dados epidemiológicos mostram que durante os próximos 20 anos as doenças cardiovasculares serão a principal causa de morte do mundo. Além disso, a doença pulmonar obstrutiva crônica é a quarta principal causa de morte nos Estados Unidos da América. O tabagismo é considerado o principal fator de risco no desenvolvimento destas doenças. Por outro lado, a interrupção do hábito de fumar reduz o risco de doenças cardiovasculares. A bupropiona, utilizada inicialmente como antidepressivo, vem sendo usada como terapia para cessar o hábito de fumar e o seu êxito não supera o índice de 30%. Os poucos estudos existentes sobre o uso simultâneo da bupropiona com a nicotina apontam para resultados mais satisfatórios do abandono do hábito de fumar num período de seis meses. Contudo, pouco se sabe sobre os efeitos cardiovasculares dessa associação farmacológica. O objetivo deste estudo foi avaliar os parâmetros cardiovasculares da bupropiona isolada e em associação com a nicotina em cães anestesiados. Nos primeiros dois estudos os parâmetros hemodinâmicos da bupropiona com doses simples de 3 e 6 mg/kg e em doses acumulativas foram investigados. A bupropiona administrada em injeções ¿in bolus¿ (3 ou 6 mg/kg) ou em doses acumulativas de 0,01; 0,1; 1; 3 e 10 mg/kg mostraram aumento significativo da pressão arterial pulmonar média e índice de resistência vascular pulmonar. Estes resultados mostram que a bupropiona pode elevar a pressão pulmonar. Na terceira fase do estudo, utilizando a mesma metodologia, foram avaliados os parâmetros hemodinâmicos da bupropiona (3 mg/kg), administrada em injeções ¿in bolus¿, isolada e em associação com a nicotina (75 µg/kg). A bupropiona sozinha ou associada com a nicotina não alterou significativamente o índice cardíaco (IC; 4.7±0.2 vs 4.3±0.1 e 3.5±0.3 vs 3.4±0.3 L/min/m2, respectivamente; média+S.E.M.) e a pressão arterial média (PAM; 134±5.0 vs 145±11.0 e 118±5.0 vs 133±10.5 mmHg, respectivamente). No entanto, houve aumento significativo na pressão arterial pulmonar média (PAPM; 20±0.8 vs 25±1.6 e 18±1.3 vs 25±1.6 mmHg, respectivamente; p

Orientador: Eros Antonio de Almeida Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A regressão da aterosclerose é ainda um campo muito amplo a ser pesquisado, com mecanismos a serem desvendados, sendo o coelho um animal utilizado internacionalmente para fins de pesquisa, nesta área. Este trabalho foi realizado com objetivo de verificar a evolução e involução da aterosclerose em coelhos hipercolesterolêmicos e sua relação com a função endotelial, lípides plasmáticos, colesterol e peroxidação tecidual e quantificação de aterosclerose. Foram utilizados 30 coelhos da raça Nova Zelândia, com peso inicial de 3,0 a 3,5 kg e divididos em 6 grupos (n=5): G1 - animais não hipercolesterolêmicos; G2 - animais hipercolesterolêmicos; G3 - animais hipercolesterolêmicos, seguidos por 4 meses de dieta não hipercolesterolêmica; G4 - animais hipercolesterolêmicos, seguidos por 1 mês de dieta não hipercolesterolêmica e tratamento com rosuvastatina (5,0mg/animal/dia); G5 - animais hipercolesterolêmicos, seguidos por 2 meses de dieta não hipercolesterolêmica e tratamento com rosuvastatina (5,0mg/animal/dia); G6 - animais hipercolesterolêmicos, seguidos por 4 meses de dieta não hipercolesterolêmica e tratamento com rosuvastatina. (5,0mg/animal/dia). Sendo que os animais dos grupos G2 a G6 foram alimentados com dieta hipercolesterolêmica composta de colesterol a 0,5% e 10% de gordura de coco por um período de 4 meses. Ao final do experimento foram dosados no plasma: colesterol total, triglicérides e HDL-c. A LDL-c foi estimada através da formula de Friedwald. Em segmentos de aorta, dosou-se colesterol e MDA, assim como foi medida a função endotelial utilizando-se de curvas de concentração/efeito com acetilcolina. A quantificação de aterosclerose foi verificada macroscopicamente na aorta corada pelo sudam IV, e microscopicamente em fragmentos corados com hematoxilina-eosina e estudados por microscopia óptica. A quantificação foi realizada por software especifico. Os valores do colesterol total, LDL-c, HDL-c, triglicérides, colesterol e peroxidação teciduais, nos diferentes grupos de animais, foram examinados por teste estatístico não paramétrico de Kruskall-Walls, seguido do teste de comparação múltipla de Dunn. As curvas que expressam a função endotelial foram comparadas por analise de variância (ANOVA) para medidas repetidas. Considerando-se valores significativos "p"

Orientador: Maria Elena Guariento Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas Mestrado Gerontologia Mestre em Gerontologia

Orientadores: Sandra Cecília Botelho Costa, Eros Antonio de Almeida Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A doença de Chagas afeta aproximadamente 9 milhões de pessoas em todo mundo, sendo a maioria dessa população constituída de indivíduos cronicamente infectados, o que a caracteriza como um importante problema de saúde pública. O seu agente etiológico é o protozoário Trypanosoma cruzi, transmitido, principalmente, por meio de insetos vetores triatomíneos. Outras formas de transmissão podem ocorrer via transfusão sanguínea, congênita, oral ou acidental. Durante a fase aguda da doença, o diagnóstico laboratorial é baseado na observação direta do parasito, através de exames microscópicos de amostras de sangue de indivíduos infectados. Na fase crônica, devido à parasitemia intermitente e ao aumento de anticorpos anti-T. cruzi, são utilizados métodos sorológicos convencionais (IFI e ELISA) para o diagnóstico. Como métodos confirmatórios, podem ser usados testes parasitológicos indiretos (hemocultura e xenodignóstico), porém, ambos apresentam baixa sensibilidade nessa fase. O tratamento etiológico da infecção por Trypanosoma cruzi tem como objetivo a eliminação do parasito, o que pode retardar a evolução clínica da infecção e prevenir lesões futuras características da doença, como o comprometimento do tecido cardíaco ou de órgãos do trato digestivo. Há dois medicamentos principais para a terapêutica da doença de Chagas: o nifurtimox (indisponível no Brasil) e o benzonidazol, ambos com efeitos colaterais importantes. A eficácia do tratamento é maior em pacientes tratados na fase aguda da infecção ou naqueles que se encontram recentemente na fase crônica da doença. O maior problema do tratamento, além da baixa eficácia quando aplicado à fase crônica, é a avaliação do critério de cura. As técnicas parasitológicas disponíveis são pouco sensíveis para detecção do parasito e resultados negativos não indicam, necessariamente, cura. Além disso, os testes sorológicos convencionais geralmente permanecem positivos por um longo período após o tratamento, tornando-os inadequados para a monitoração terapêutica. Atualmente, estudos relatam a eficiência da técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) como uma ferramenta para a monitoração adequada do tratamento etiológico da doença de Chagas. Assim, o presente estudo objetivou avaliar a nested-PCR (N-PCR) como uma alternativa na determinação da eficácia do tratamento etiológico com benzonidazol, comparando-a com os testes sorológicos convencionais e a hemocultura. Para isso, realizou-se um estudo retrospectivo em pacientes que realizaram o tratamento corretamente entre 1980 e 2010, todos com testes sorológicos e/ou parasitológicos positivos para doença de Chagas antes do tratamento. Dos 29 pacientes incluídos no estudo, 14 (48,3%) apresentaram resultados positivos pela N-PCR, 12 (41,4%) apresentaram resultados negativos e 3 (10,3%) inconclusivos. Em relação à hemocultura, todos os pacientes (100%) tiveram resultados negativos. Os testes sorológicos mantiveram-se positivos após o tratamento em 27/29 (93%) dos casos, sendo 7% de resultados inconclusivos. Portanto, pode-se concluir que a avaliação de cura da doença de Chagas apresenta uma grande dificuldade para o controle dessa enfermidade e que a técnica de N-PCR pode contribuir com o estabelecimento de critérios confiáveis para a determinação da eliminação do parasito após tratamento específico, além de constatação precoce de falha terapêutica Abstract: Chagas disease affects 9 million persons around the world, the major of them chronic infected individuals, characterizing it as an important public health problem. Etiologic agent, named Trypanosoma cruzi, is a protozoan transmitted by triatominae insects. Other routes of transmission are via blood transfusion, congenital, oral or accidental. During the acute phase, laboratorial diagnosis are based on direct visualization of parasites on blood by microscopic tests. In chronic stage, because of the intermittent parasitemia and increased anti-T. cruzi antibodies, conventional serology (IIF and ELISA) is used for diagnosis. Hemoculture and xenodiagnosis could be performed as confirmatory methods, however, both are low of sensitivity in this stage. Etiologic treatment of T. cruzi infection is focused on the elimination of the parasites, which should arrest the evolution of the disease and avert its irreversible long-term consequences such as cardiac and digestive damage. There are two drugs for specific treatment of Chagas disease: nifurtimox (not available in Brazil) and benzonidazole, both of them with considerable adverse effects. Therapeutic efficacy is more significant in the acute and recent chronic phase of infection. Besides the low efficacy of treatment in chronic patients, the major problem is the criteria of cure. Parasitological methods of routine are poor of sensitivity and negative results do not indicate cure, necessarily. In addition, conventional immunological tests remain positive during a long time after treatment and are not indicated to monitor chemotherapy. Recently, authors reported the usefulness of polymerase chain reaction (PCR) as an efficient tool of etiological treatment evaluation in Chagas disease. This work aimed to evaluate nested-PCR (N-PCR) as an alternative to determinate efficacy of etiological treatment with benzonidazole in comparison to serology and hemoculture. It was carried out a retrospective study in treated patients between 1980-2010, all of them with positive serological and/or parasitological tests before treatment. Out of 29 individuals studied, 14 (48,3%) had positive N-PCR, 12 (41,4%) had negative and 3 (10,3%) inconclusive results. All patients (100%) had negative hemoculture and serology was positive in 27/29 (93%) of the cases, with 7% of inconclusive results. We conclude that criteria of cure is a great difficulty of Chagas disease control and N-PCR assay may contribute to determinate parasite clearance as well earlier therapeutic failure Mestrado Ciências Básicas Mestre em Clínica Médica

Orientadores: Eros Antonio de Almeida, Sandra Cecilia Botelho Costa Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A reativação da doença de Chagas ocorre principalmente em indivíduos transplantados e portadores do vírus HIV, levando a quadros de lesões cutâneas, sintomas cardíacos e envolvimento do sistema nervoso central. Dados da literatura revelam que a instituição do tratamento com benznidazol é eficaz para controlar a reativação. É possível, também, que os medicamentos imunossupressores utilizados estejam relacionados com a reativação. O diagnóstico da reativação, na qual é possível verificar grande quantidade de parasitos intracelulares e circulantes, é baseado em métodos parasitológicos diretos como exame de sangue a fresco, gota espessa, esfregaço corado e métodos de concentração: microhematócrito, Strout e buffy coat. Técnicas moleculares, como a PCR convencional ou PCR em tempo real (qPCR) apresentam maior sensibilidade, pois detectam o DNA do parasito, mesmo que este esteja presente em pequena quantidade, o que poderia diagnosticar precocemente a reativação da doença de Chagas. Neste estudo, utilizou-se a hemocultura e a qPCR para analisar a carga parasitária de nove pacientes que foram submetidos ao transplante renal e seguidos no Hospital de Clínicas da Unicamp (grupo A). Foi avaliada também a carga parasitária de 15 pacientes chagásicos crônicos, não transplantados e não tratados para a doença de Chagas (grupo B). Não houve positivação da hemocultura no grupo de pacientes transplantados, e no grupo controle houve quatro casos positivos (26%). Na qPCR, houve dois casos negativos e sete casos de positividade abaixo do limite de quantificação no grupo dos pacientes transplantados. No grupo de pacientes não transplantados (B), de 15 amostras, três foram quantificadas em 0,1 parasito/ml, enquanto 12 apresentaram positividade abaixo do limite de quantificação da técnica. A hemocultura e a qPCR foram concordantes em quatro casos, mesmo que tenham apresentado carga parasitária abaixo do limite de quantificação pela qPCR. Não houve diferença estatisticamente significante entre as duas técnicas (p

Orientadores: Eros Antônio de Almeida, Sandra Cecília Botelho Costa Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A doença de Chagas (dC) é a terceira doença endêmica que mais causa danos à saúde humana. Com o intuito de eliminar o parasito Trypanosoma cruzi (T. cruzi) ou diminuir a carga parasitária, recomenda-se o uso do benznidazol (BNZ). O objetivo do presente estudo foi avaliar a eficácia do tratamento com BNZ em pacientes chagásicos crônicos, mensurando a carga parasitária antes e pós-tratamento pela qPCR (quantitative Polymerase Chain Reaction). Foi realizado um estudo descritivo, prospectivo de uma coorte de pacientes chagásicos crônicos submetidos ao BNZ, atendidos no ambulatório do Grupo de Estudos em Doença de Chagas (GEDoCh/Unicamp), centro de referência, acompanhados por até 18 meses pós-tratamento. Apuraram-se dados epidemiológicos, clínicos, laboratoriais e os possíveis eventos adversos (EA) decorrentes do uso do medicamento. Trinta e dois pacientes foram tratados com BNZ (5mg/kg/dia), sendo que em 25 casos (78,12%) o completaram por 60 dias. Em 26 casos ocorreram EA (81,25%), sendo a alteração cutânea a mais frequente em 18 casos (56,25%), seguido de alteração gástrica em quatro casos (12,50%), alteração hematológica (neutropenia) em três casos (9,37%), alteração hepática em um caso (3,12%) e neuropatia periférica em um caso (3,12%). A forma clínica mais frequente foi indeterminada em 16 casos (50%), seguida da cardíaca em 14 casos (43,75%) e digestiva em dois casos (6,25%). A localidade da possível transmissão vetorial foi mais prevalente em Minas Gerais com 23 casos (71,87%), seguida da Bahia com cinco casos (15,62%), Pernambuco com três casos (9,37%) e Goiás com um caso (3,12%). Para a análise da qPCR foram apreciado 19 casos (59,37%). Os resultados antes do início do tratamento foram: dois casos (10,52%) detectáveis e quantificável, cinco casos (26,31%) detectável e não-quantificável e 12 casos (63,15%) não detectável a carga parasitária. Pós-tratamento observou-se: 16 casos (84,21%) não detectáveis e três casos (15,78%) detectáveis e não-quantificável a carga parasitária. O limite de detecção foi de 100 equivalente genômico/mL. Para os resultados sorológicos, não houve significância estatística dos títulos, antes e pós-tratamento, já que em nenhum dos casos foram negativos ou não atingiram valores limites de positividade após o uso com BNZ. A qPCR apresenta acurácia como ferramenta coadjuvante para o critério de avaliação da carga parasitária pelo T. cruzi. No entanto, ainda deixa dúvidas quanto à cura parasitológica nos casos em que não detecta os parasitos, devido aos limites de detecção e quantificação da própria técnica. Pode-se concluir pelo presente estudo que a qPCR mostrou-se importante na identificação da falha terapêutica precocemente, nos casos onde detectou-se a carga parasitária pós-tratamento com BNZ. No entanto, não é possível afirmar a cura parasitológica nos casos não detectáveis, dentre o período de seguimento desta análise Abstract: Chagas disease (Cd) is the third most endemic disease that causes damage to human health. In order to eradicate the parasite Trypanosoma cruzi (T. cruzi) or reduce parasite load, the use of benznidazole (BNZ) is recommended. The purpose of the present study was to assess the efficacy of BNZ-specific treatment in chronic chagasic patients by measuring parasite load before and after treatment by the quantitative Polymerase Chain Reaction (qPCR) technique. A descriptive, prospective and diagnostic validation study was performed in chronic chagasic patients who underwent BNZ treatment, attending the outpatient clinic of Grupo de Estudos em Doença de Chagas (GEDoCh / Unicamp), a reference center in the care of individuals with Cc. Epidemiological, clinical, laboratory and adverse events (AE) data resulting from the use of the drug were taken into account. The methodology for the use of qPCR followed the protocol of Piron et al, 2007. Thirty-two patients started the treatment with BNZ (5mg / kg / day), and 25 (78.12%) completed it for 60 days. Out of the 26 cases where AD occurred (81.25%), the cutaneous reaction was the most frequent, occurring in 18 of them (56.25%), followed by epigastric pain in four cases (12.50%), hematological change (neutropenia) in three cases (9.37%), liver enzyme alterations in one case (3.12%), and peripheral neuropathy in one case (3.12%). Seven patients (21.87%) discontinued the treatment due to EA to BNZ. The most frequent clinical form was undefined, occurring in 16 cases (50%), followed by the cardiac form in 14 cases (43.75%) and the digestive one in two cases (6.25%). The area of the possible vector transmission was the state of Minas Gerais with 23 cases (71.87%), followed by Bahia with five cases (15.62%), three cases in Pernambuco (9.37%) and one case (3.12%) in Goiás. The results of qPCR before the beginning of the treatment were: two cases (10.52%) with detection and quantification of parasite load; five cases (26.31%) with detection, but without quantification; 12 cases (63.15%) without parasite load detection. After the treatment: in 16 cases (84.21%) the parasite load was not quantified and in three cases (15.78%) there was detection, but without quantification. The limit of detection was 100 genome equivalents / mL. There was no statistical significance of the titers regarding serology, before and after the treatment, and there were no negative cases or these reached the limit values of positivity. The qPCR technique presents accuracy as an additional tool for the assessment criteria of parasite load by T. cruzi. However, it still leaves doubts about the parasitological cure in cases where it does not detect the parasites, due to the limits of detection and quantification of the technique itself. Based on the results of the present study, it can be concluded that qPCR has become important in detecting the therapeutic failure early in cases where parasite load was detected after the treatment. However, it is not possible to assert the parasitological cure in cases where the qPCR did not detect post-treatment parasite load, during the period of this study Doutorado Clínica Médica Doutora em Ciências FAPESP 2016/08737-0

Orientadores: Sandra Cecília Botelho Costa, Eros Antonio de Almeida Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: A doença de Chagas (DC), descoberta por Carlos Chagas em 1909, é uma enfermidade causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi. Esta doença afeta milhões de pessoas da América do Sul e Central. Hoje em dia, estima-se que há no Brasil entre 1,9 milhões a 4,6 milhões de pessoas infectadas por esse protozoário. Em 1991, foi lançada uma campanha para eliminação da transmissão vetorial da doença nos países do Cone-Sul, o que resultou na diminuição de casos agudos da doença. Os objetivos do trabalho foram: implantar técnicas de genotipagem e classificar os isolados de T. cruzi presentes nos pacientes portadores da doença de Chagas atendidos pelo Grupo de Estudos em doença de Chagas (GEDoCh); correlacionar com a forma clínica e a procedência dos mesmos, avaliar os resultados da hemocultura e avaliar a eficiência de kits sorológicos.Foram coletados 4 tubos com EDTA de 6mL para a hemocultura e um tubo seco de 4 mL para a coleta do soro. Os exames sorológicos e a genotipagem foram realizados no Laboratório de Diagnóstico de Doenças Infecciosas por Técnicas de Biologia Molecular. Das 54 amostras coletadas, 26 (48%) foram positivas na hemocultura. Amostras de pacientes do gênero feminino obtiveram uma porcentagem maior de hemocultura positiva, assim como em pacientes com forma clínica cardíaca e em pacientes tratados e com tratamento incompleto com o benznidazol. Após a genotipagem em DTUs, a TCII foi a DTU mais prevalente, principalmente em pacientes com a forma cardíaca da DC. Nos testes sorológicos, o teste TESA-cruzi solucionou um caso de sorologia não-reagente e não foi possível correlacionar o tipo de DTU encontrado com os testes sorológicos. A partir desse trabalho, ficou concluído que: a hemocultura positiva foi mais prevalente nos pacientes do gênero feminino e na forma cardíaca, a implantação da técnica de genotipagem foi eficaz e foi possível genotipar os isolados presentes nos pacientes coletados; foram encontrados dois tipos de DTU, sendo a TC III um tipo raro em humanos Abstract: Chagas disease (DC), discovered by Carlos Chagas in 1909, is a disease caused by the protozoan Trypanosoma cruzi. This disease affects millions of people in South and Central America. Nowadays, it is estimated that there are in Brazil between 1.9 million and 4.6 million people infected by this protozoan. In 1991, a campaign was launched to eliminate the vector transmission of the disease in the Southern Cone countries, which resulted in the reduction of acute cases of the disease. The objectives of the study were: to implant genotyping techniques and to classify T. cruzi isolates present in patients with Chagas disease treated by the Chagas Disease Study Group (GEDoCh); correlate with the clinical form and their origin, evaluate the blood culture results and evaluate the efficiency of serological kits. Four tubes were collected with 6mL EDTA for blood culture and a 4 mL dry tube for serum collection. Serological tests and genotyping were performed at the Laboratory of Diagnosis of Infectious Diseases by Techniques of Molecular Biology. Of the 54 samples collected, 26 (48%) were positive in blood culture. Samples of female patients obtained a higher percentage of positive blood culture, as well as in patients with cardiac clinical form and in patients treated with incomplete treatment with benznidazole. After genotyping in DTUs, the TC II was the most prevalent DTU, especially in patients with the cardiac form of CD. In the serological tests, the TESA-cruzi test solved a case of non-reactive serology and it was not possible to correlate the type of DTU found with the serological tests. From this study, it was concluded that: positive blood culture was more prevalent in female patients and cardiac form, the implantation of the genotyping technique was effective and it was possible to genotype the isolates present in the patients collected; two types of DTU were found, with TC III being a rare type in humans Doutorado Clínica Médica Doutora em Ciências CNPQ 404179/2012-6

Orientadores: Eliana Cotta de Faria, Daniel Zanetti Scherrer Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas Resumo: As doenças cardiovasculares (DCV) são as principais causas de morte no Brasil e no mundo. Reduções no colesterol da lipoproteína de alta densidade (HDL-C) estão associadas à DCV aterosclerótica. A lipase hepática (LH) é uma serina esterase que hidrolisa triglicérides e fosfolípides das lipoproteínas plasmáticas e facilita a ligação destas aos receptores celulares, e tem efeitos pró e anti-aterogênicos. O polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) do promotor do gene da LH (LIPC) -250G/A (rs2070895) reduz a sua atividade e aumenta as concentrações de HDL-C, entretanto seu efeito sobre a DCV é controverso. Este estudo foi realizado para identificar as relações entre este SNP e a aterosclerose carotídea, atividade da LH, lípides plasmáticos, apolipoproteína A-I (apo A-I) e parâmetros do transporte reverso de colesterol (TRC). Um total de 285 voluntários normolipidêmicos e assintomáticos participaram do trabalho. O SNP foi detectado na plataforma TaqMan® OpenArray® Real Time PCR. A espessura da camada íntimo-medial das artérias carótidas (cIMT) e a presença de placas ateroscleróticas foram determinadas por ultrassonografia modo-?. As frequências genotípicas foram 44%, 41% e 15% para indivíduos GG, GA e AA, respectivamente. Os grupos de genótipos não diferiram significativamente para sexo, idade, índice de massa corpórea, circunferência de cintura e pressão arterial diastólica e sistólica. Não foram observadas variações para cIMT, mas a proporção entre indivíduos com placas e sem placas foi 3,5 vezes maior em AA do que em GG (p?0,05). A análise de regressão linear multivariada demonstrou associações positivas do genótipo AA com HDL-C, tamanho da partícula de HDL e atividade da lipoproteína lipase (LPL), além da relação inversa com a atividade da LH. A análise de regressão logística mostrou que o risco de desenvolvimento de placas aumentou em indivíduos portadores do alelo A em relação ao alelo G (OR=3,9; IC95% = 1,54-10,33; p?0.004), apesar de maiores concentrações de HDL-C, tamanho de HDL e apo A-I, após ajuste para a idade e sexo. As atividades da LH e da lecitina: colesterol aciltransferase (LCAT) endógena reduziram-se (38 e 19%, respectivamente) e a LPL aumentou em 30% (AA x GG). Em conjunto, esses resultados fornecem evidências de que o alelo A é associado com a aterosclerose carotídea em indivíduos aparentemente saudáveis e de baixo risco, o que levanta a questão deste SNP poder ser um marcador de DCV utilizado para medidas de sua prevenção e tratamento Abstract: Cardiovascular diseases (CVD) are the leading causes of death in Brazil and worldwide. Reductions in high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) levels are associated with atherosclerotic CVD. Hepatic lipase (HL) is a serine esterase which hydrolyzes triglycerides and phospholipids of plasma lipoproteins, facilitates their binding to cellular receptors and has pro and antiatherogenic effects. The single nucleotide polymorphism (SNP) of the HL gene promoter (LIPC) -250G/A (rs2070895) reduces the activity of HL and increases HDL-C levels, but its effect on CVD is controversial. This study was conducted to identify the relationships between this SNP and carotid atherosclerosis, HL, plasma lipids, apolipoprotein A-I (apo A-I) and reverse cholesterol transport (RCT) parameters. A total of 285 asymptomatic and normolipidemic volunteers participated in the study. SNP detection was performed in the TaqMan® OpenArray® Real Time PCR Plataform. Carotid intima-media thickness (cIMT) and the presence of atherosclerotic plaques were determined by ?-mode ultrasound. Genotype frequencies were equal to 44%, 41% and 15% for GG, GA and AA individuals, respectively. The genotype groups did not differ significantly for sex, age, body mass index, waist circumference and systolic and diastolic blood pressure. No variations were observed for cIMT, but the proportion of individuals with plaques to without plaques was 3.5 times higher in AA than in GG (p?0.05). Multivariate linear regression analysis showed positive associations of AA genotype with HDL-C, HDL size and activity of lipoprotein lipase (LPL) and an inverse relationship with HL activity. The logistic regression analysis showed an increased risk of development of plaques in individuals with A allele as compared with G (OR=3.9; 95%CI=1.54-10.33; p?0.004) despite the increases in HDL-C, HDL size and apo A-I, after adjustment for age and sex. HL and endogenous lecithin: cholesterol acyltransferase (LCAT) were reduced by 38 and 19% respectively, and LPL increased by 30% (AA x GG). Together, these results provide evidence that the A allele is associated with carotid atherosclerosis in apparently healthy and low-risk individuals, which raises the question of this SNP as a CVD marker for preventive and treatment efforts Mestrado Clínica Médica Mestra em Ciências CAPES

Orientadores: Luiz Augusto Corrêa Passos, Ana Maria Aparecida Guaraldo Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia Resumo: Na amazônia brasileira, microepidemias de doença de Chagas aguda (DCA) humana são notificadas por meio de caracterização clínica e epidemiológica após associação ao consumo de polpa in natura de açaí contaminada com Trypanosoma cruzi. Dada a sua relevância econômica, cultural e considerando que a refrigeração e o congelamento não são métodos eficientes à prevenção da DCA de transmissão alimentar, os objetivos desse estudo foram determinar um binômio "temperatura x tempo" mínimo necessário à inativação ou morte do T. cruzi em polpa de açaí e avaliar a possibilidade experimental da transmissão dessa parasitose, proveniente de vetores e reservatório de diferentes localizações do Estado do Pará, por contaminação acidental no alimento. Na primeira etapa, 105 tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi foram misturadas à polpa in natura de açaí e submetidas a tratamentos térmicos entre 37ºC e 49ºC em um banho ultratermostático de alta precisão, por até uma hora, sob homogeneização constante. Na segunda etapa, 105 tripomastigotas de T. cruzi (TcI) de diferentes fontes e localizações do Pará, comparando-se à cepa Y de T. cruzi (TcII), foram misturadas, à temperatura ambiente, à polpa in natura de açaí. Em ambas etapas, quando necessário, as misturas contaminadas foram submetidas à tamisação forçada. O inóculo (controle negativo, controle positivo ou grupo teste), de até 200?L, foi administrado via intraperitoneal, gavagem ou oral em hospedeiros isogênicos imunodeficientes C.B-17-Prkdcscid/Pas Unib ou B6.129S7Rag1-/-tmMom/J Unib, sob antibioticoterapia prévia (1,75mg/dia). A parasitemia foi realizada de acordo com o método de Brener e a mortalidade foi registrada. T. cruzi preservou sua virulência em polpa de açaí à 43±0,1ºC durante 20 minutos, causou DCA e morte em até 24 dias após as infecções experimentais, via intraperitoneal. T. cruzi de R. pictipes da Mata do Val-De-Cans, de Belém, apresentou DCA, com início de parasitemia e morte, respectivamente, nos dias 32,0±3,0 e 40,0±3,0. T. cruzi de R. pictipes do Rio Ajuaí, de Abaetetuba, apresentou DCA, com início de parasitemia e morte, respectivamente, nos dias 35,0±1,0 e 49,0±1,0. T. cruzi de P. opossum da Ilha do Combu, de Belém, apresentou DCA, com início de parasitemia e morte, respectivamente, nos dias 45,0±2,0 e 51,0±1,0, via oral. Não houve diferença significativa para a DCA de vetores de diferentes localizações, contudo, houve diferença significativa para a DCA entre T. cruzi de vetores e reservatório, bem como em relação à cepa Y de T. cruzi (teste de Duncan, 99% de confiança). Portanto, a cocção da polpa in natura de açaí acima de 44ºC poderá prevenir a DCA de transmissão alimentar. T. cruzi obtidos de diferentes fontes e localizações do Pará, após o contato com a polpa in natura de açaí, à temperatura ambiente, foram capazes de preservar sua virulência in vivo, causar DCA e morte em até 52 dias após as infecções experimentais. Uma educação básica de qualidade facilitará que boas práticas de higiene ocorram durante toda a cadeia produtiva do açaí e evitará a ocorrência de DCA de transmissão alimentar na região Norte do país nas próximas décadas Abstract: In the Brazilian Amazon, outbreaks of acute Chagas¿ disease (ACD) in humans are reported by clinical and epidemiological characterization after association with the ingestion of in natura fruit¿s açai of pulp contaminated with T. cruzi. Due the economic and cultural relevance and considering that the cooling and freezing are not efficient to prevent the ACD foodborne, the aims of this study were determine a minimum binomial "temperature x time" and necessary to inactivation or death of T. cruzi in fruit¿s açai of pulp and evaluate the possibility of experimental transmission of this parasitosis, from vectors and reservoir at different locations at Pará State, in an accidental contamination in food. In the first stage, 105 trypomastigotes of T. cruzi Y strain were mixed with in natura fruit¿s açai of pulp and heat-treated between 37ºC and 49ºC in a high-precision water bath, by up to an hour, under constant homogenization. In the second stage, 105 trypomastigotes of T. cruzi (TcI) from different sources and locations at Pará, comparing with T. cruzi Y strain (TcII), were mixed with in natura fruit¿s açai of pulp, at room temperature. In both stages, when necessary, contaminated mixtures were subjected to forced sieving process. The inoculum (negative control, positive control or test group), up to 200 ?L, was administered intraperitoneal, gavage or oral in inbred immunodeficient hosts CB-17-Prkdcscid/Pas Unib or B6.129S7Rag1-/-tmMom/J Unib, under previous antibiotic therapy (1,75 mg/day). Parasitemia was scored as recommended by Brener and mortality registered. T. cruzi retained its virulence in fruit¿s açai of pulp at 43±0,1ºC for 20 minutes, caused ACD and death in mice up to 24 days after experimental infections, intraperitoneally. T. cruzi from Rhodnius pictipes, Val-de-Cans¿ forest, Belém, presented ACD and death, respectively, on days 32,0±3,0 and 40,0±3,0. T. cruzi from R. pictipes, Ajuaí River, Abaetetuba, presented ACD and death, respectively, on days 35,0±1,0 and 49,0±1,0. T. cruzi from Philander opossum, Combu¿s Island, Belém, presented ACD and death, respectively, on days 45,0±2,0 and 51,0±1,0, orally. There was not significant difference for the ACD from vectors of different locations, however, there was significant difference for the ACD between T. cruzi from vectors and reservoir, as well as for the T. cruzi Y strain (Duncan test, ? 0,01). Therefore, cooking in natura fruit¿s açai of pulp above 44ºC can prevent ACD foodborne. T. cruzi from different sources and locations at Pará, after contact with in natura fruit¿s açai of pulp, at room temperature, can retain its virulence in vivo, cause ACD and death in up to 52 days after experimental infections. A quality basic education will facilitate good hygiene practices occur throughout the productive chain of açai and will prevent ACD foodborne in the northern region of Brazil in next decades Doutorado Parasitologia Doutor em Parasitologia