Search

Evidence of physical interaction with the target protein is essential in the development of chemical probes and drugs. The cellular thermal shift assay (CETSA) allows evaluation of drug binding in live cells but lacks a framework to support quantitative interpretations and comparisons with functional data. We outline an experimental platform for such analysis using human kinase p38 alpha. Systematic variations to the assay's characteristic heat challenge demonstrate an apparent loss of compound potency with an increase in duration or temperature, in line with expectations from the literature for thermal shift assays. Importantly, data for five structurally diverse inhibitors can be quantitatively explained using a simple model of linked equilibria and published binding parameters. The platform further distinguishes between ligand mechanisms and allows for quantitative comparisons of drug binding affinities and kinetics in live cells and lysates. We believe this work has broad implications in the appropriate use of the CETSA for target and compound validation., QC 20190108

Target engagement is a critical factor for therapeutic efficacy. Assessment of compound binding to native target proteins in live cells is therefore highly desirable in all stages of drug discovery. We report here the first compound library screen based on biophysical measurements of intracellular target binding, exemplified by human thymidylate synthase (TS). The screen selected accurately for all the tested known drugs acting on TS. We also identified TS inhibitors with novel chemistry and marketed drugs that were not previously known to target TS, including the DNA methyltransferase inhibitor decitabine. By following the cellular uptake and enzymatic conversion of known drugs we correlated the appearance of active metabolites over time with intracellular target engagement. These data distinguished a much slower activation of 5-fluorouracil when compared with nucleoside-based drugs. The approach establishes efficient means to associate drug uptake and activation with target binding during drug discovery., Artursson, P., Martinez-Molina, D och Nordlund, P. delar sistaförfattarskapet.

Att möta elever i svårigheter blir allt vanligare i dagens skola. För att möta denna utveckling framgångsrikt, framhåller flera forskare en vinst med ett specialpedagogiskt förhållningssätt som genomsyrar verksamheten.Det råder dock delade meningar om huruvida problem med beteende och inlärning ska tillskrivas funktionsnedsättningar hos eleverna eller brister i den pedagogiska verksamheten. Ahlefeld Nisser (2009) menar i sin avhandling att de elever som är i behov av särskilt stöd är relativt få, men att ungefär 20% av samtliga elever befinner sig i en gråzon. Dessa elever skulle ha större möjlighet att nå kunskapskraven om skolans undervisning genomsyrades av ett specialpedagogiskt förhållningssätt. Syftet med den aktuella studien är att undersöka i vilken utsträckning den undersökta koncernen systematiska kvalitetsarbete utgår från ett specialpedagogiskt perspektiv. Studien har en kvantitativ ansats och datainsamlingen har genomförts med hjälp av en enkät. Enkäten tillverkades i enkätprogrammet Survey & Report för att sedan exporteras till analysprogrammet SPSS. Resultatet visar att medelvärdet på upprättat index indikerar att flertalet respondenter instämmer mellan "låg" och "hög grad" i påståendena angående uppfattningen om ett specialpedagogiskt perspektiv på det systematiska kvalitetsarbetet. Resultatet visar också att de undersökta grupperna, rektor, biträdande rektor och specialpedagog inte skiljer sig signifikant i uppfattningen om ett specialpedagogiskt perspektiv på det systematiska kvalitetsarbetet.